Angka lempeng total merupakan salah satu cara untuk menghitung cemaran mikroba, dimana cara ini merupakan bagian dari metode hitung cawan. Prinsip pada metode hitungan cawan adalah jika sel jasad renik yang masih hidup ditumbuhkan pada medium agar, maka sel jasad renik tersebut akan berkembang biak membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dan dapat dihitung dengan menggunakan mata tanpa mikroskop. Metode hitungan cawan merupakan cara yang paling sensitive untuk menentukan jumlah jaasad renik karena beberapa hal yaitu : 1. Hanya sel yang masih hidup yang dapat dihitung 2. Beberapa jenis jasad renik dapat dihitung satu kali 3. Dapat di gunakan untuk isolasi dan identitas jasad renik karena koloni yang terbentuk Mungkin berasal dari jasad renik yang menetap menampakkan pertumbuhan yang spesifik. Selanjutnya fardiaz, (1992) menambahkan, di dalam metode hitungancawan bahan pangan yang diperlukan mengandung lebih dari 300 sel jasad renik per ml atau pergram sampel atau memerlukan perlakuan pengenceran sebelum di tumbuhkan pada medium agar didalam cawan petri tersebut dalam jumlah yang dapat dihitung dimana jumlah yang terbaik adalah antara 30-300 koloni. Cara penumbuhan dalam perhitungan cawan dapat dibedakan atas 2 yaitu :
Metode tuang (pour plate)
Metode permukaan (surface plate)
Dalam metode tuang sejumlah contoh pengenceran yang dikehendaki
dimasukkan ke dalam cawan petri, kemudian ditambahkan agar cair steril yang telah didinginkan sebanyak 15-20 ml dan digoyangkan supaya sel-sel mikroba dalam contoh menyebar rada pada permukaan, terlebih dahulu dibuat agar dan tuang kedalam cawan kemudian sebanyyak 0,1 ml contoh yang dienccerkan dipipet pada permukaan agar tersebut dan diiratakan dengan batas gelas melengkung yang steril. Jika semua pengencerkan dihasilkan kurang dari 30 koloni pada cawan petri, oleh Karena itu jumlah koloni pada pengenceran terendah yang dihitung hasilnya sebagai kurang dari 30 dikalikan dengan besarnya pengenceran tetapi jumlah yang sebenarnya harus dicantumkan dalam tanda kurung. Jika semua pengenceran yang tertinggi yang dihitung hasilnya dilaporkan sehingga lebih dari 30 dikalikan dengan faktor pengenceran, tetapi jumlah yang sebenarnya dicantumkan dalam tanda kurung.
Angka kapang kamir
Kapang adalah sekelompok mikroba yang tergolong dalam fungi dengan ciri khas memiliki filamen (miselium). Kapang termasuk mikroba yang penting dalam mikrobiologi pangan karena selain berperan penting dalam industri makanan, kapang juga banyak menjadi penyebab kerusakan pangan. Kapang adalah fungi multiseluler yang mempunyai filamen dan pertumbuhannya pada makanan mudah dilihat karena penampakannya yang berserabut seperti kapas. Pertumbuhannya mula-mula akan berwarna putih, tetapi jika spora telah timbul akan terbentuk berbagai warna tergantung dari jenis kapang.
Khamir adalah mikroorganisme eukariot yang
diklasifikasikan dalam kingdom Fungi, dengan 1.500 species yang telah dapat dideskripsikan[1](diperkirakan 1% dari seluruh spesies fungi).[2] Khamir merupakan mikroorganisme uniseluler, meskipun beberapa spesies dapat menjadimultiseluler melalui pembentukan benang dari sel-sel budding tersambung yang dikenal sebagai hifa semu(pseudohyphae), seperti yang terlihat pada sebagian besar kapang.[3] Ukuran kapang bervariasi tergantung spesies, umumnya memiliki diameter 34 m,namun beberapa jenis khamir dapat mencapai ukuran lebih 40 m.[4] Sebagian besar khamir bereproduksi secara aseksual dengan mitosis, dan dengan pembelahan sel asimetris yang disebut budding. Khamir yang paling umum digunakan adalah Saccharomyces cerevisiae, yang dimanfaatkan untuk produksi anggur, roti, tape, dan bir sejak ribuan tahun yang silam dalam bentuk ragi. Saccharomyces cerevisiae dapat mengkonversi karbohidrat menjadi karbon dioksida dan alkohol melalui proses fermentasi, karbon dioksida digunakan dalam proses pembuatan roti (baking) dan alkohol dalam minuman beralkohol. [5]
Saccharomyces cerevisiae juga merupakan organisme model penting dalam penelitian biologi sel modern,
dan juga salah satu mikroorganisme eukariot yang paling sering diteliti secara menyeluruh. Peneliti menggunakannya untuk mendapatkan informasi mengenai biologi sel eukariot dan terutama biologi manusia. [6]
Spesies khamir lainnya seperti Candida albicans adalah patogen oportunistik dan dapat
menyebabkan infeksi pada manusia (kandidiasis) . Khamir juga dapat digunakan untuk menghasilkan listrik dalam microbial fuel cell,[7] dan memproduksi etanol untuk industri biofuel.
Prosedur pengujian angka kapang kamir pada mmakanan
dan minuman sesuai metode analisis mikrobiologi (MA PPOM 62/MIK/06) yaitu dengan cara aseptic : 1. Ditimbang 25 gram atau dipipet 25 ml sampel kedalam kantong plastic stomacher steril 2. Ditambahkan 225 ml PDF , dihomogenkan dengan stomacher selama 30 detik sehingga diperoleh suspense dengan pengenceran 10 1 sesuai 3. Disiapkan 3 buah tabung yang masing-masing telah diisi ASA 4. Dari hasil homogenisasi pada penyiapan samel yang merupakan pengenceran 10 dipipet 1 ml kb dalam tabung ASA pertama, dikocok homogen hinggga diperoleh pengenceran 10 5. Dibuat pengenceran selanjutnya hingga 10 6. Dari masing-masing pengenceran dipipet 0,5 ml, dituangkan pada permukaan PDA yang sudah ditambahkan kloramfenikol , segera digoyang sambil diputar hingga suspensi tersebar merata dan dibuat duplo. 7. Untuk mengetahui sterilisasi media dan pengencer, dilakukan uji blanko 8. Pada satu lempeng PDA yang sudah ditambahkan kloramfenikol diteteskan 0,5 ml pengencer dan disebarratakan dan untuk uji media digunakan 1 lempeng PDA + kloramfenikol 9. Seluruh cawan petri di inkubasi pada suhu 20 25 C 10. Lakukan pengamatan dan hitung jumlah koloni yang tumbuh, yaitu koloni yang berwarna hitam dan koloni yang berwarna putih
Prosedur pengujian Angka Lempeng Total pada mmakanan
dan minuman sesuai metode analisis mikrobiologi (MA PPOM 62/MIK/06) yaitu dengan cara aseptic : 1. Ditimbang 25 gram atau dipipet 25 ml sampel kedalam kantong plastic stomacher steril 2. Ditambahkan 225 ml PDF , dihomogenkan dengan stomacher selama 30 detik sehingga diperoleh suspense dengan pengenceran 10 sesuai 3. Disiapkan 5 tabung atau lebih yang masing masing telah diisi dengan 9 ml PDF 4. Hasil dari homogenisasi pada penyiapan sampel yang merupakan pengenceran 10 dipipet sebanyak 1 ml kedalam tabung PDF pertama, dikocok homogeny hingga diperoleh pengenceran 10 5. Dibuat pengenceran selanjutnya hingga 10 atau sesuai dengan pengenceran yang diperlukan 6. Dari setiap pengenceran dipipet 1 ml kedalam cawan petri dan dibuat duplo, kedalam setiap cawan dituangkan 15 20 ml media PDA yang sudah ditambahkan TTC suhu 45 C 7. Cawan petri segera digoyang dan diputar sedemikian rupa hingga suspensi tersebar merata 8. Lakukan uji blangko untuk mengetahui sterilitas media 9. Inkubasi pada suhu 35 37 C , setelah media memadat, selama 24 48 jam dalam posisi cawan terbalik 10. Amati dan hitung jumlah koloni yang tumbuh
