2.

METODE
A. Alat dan Bahan
Alat dan bahan yang digunakan pada penelitian kultivasi mikroalga ini yaitu
sampel mikroalga, selang udara yang digunakan untuk aerasi pada saat kultivasi,
Haemocytometer yang digunakan untuk perhitungan densitas sel mikroalga,
mikroskop yang digunakan untuk pengamatan jumlah sel mikroalga, centrifuge tubes
yang digunakan sebagai wadah sampel mikroalga, wadah kultur digunakan untuk
tempat media kultur dan mikroalga yang akan dikulturkan, media kultur yang
digunakan sebagai medium pertumbuhan mikroalga yang berupa f/2 yang terdiri
medium f/2 yaitu: FeCl.6H2O, Na2EDTA.2H2O, CuSO4.5H2O (9,8 mg/mL),
Na2MoO4.2H2O (6,3 mg/mL), ZnSO4.7H2O (22 mg/mL), CoCl2.4H2O (10
mg/mL), MnCl2.4H2O, vitamin B12 (1 mg/mL), biotin (0,1 mg/mL), dan thiamin
HCl, NaNO3 (75 mg/mL) dan NaH2PO4-H2O (5 mg/mL),dan Laminair Air Flow
Cabinet yang digunakan sebagai tempat steril dalam pembuatan medium maupun
pada saat mikroalga akan di masukkan ke botol kultur.

B. Cara kerja
Cara kerja yang dilakukan pada penelitian kultivasi mikroalga terdiri atas :
1. Kultivasi mikroalga
1)Menyiapkan stok media f/2 sesuai dengan resep yaitu FeCl.6H2O,
Na2EDTA.2H2O, CuSO4.5H2O (9,8 mg/mL), Na2MoO4.2H2O (6,3 mg/mL),
ZnSO4.7H2O (22 mg/mL), CoCl2.4H2O (10 mg/mL), MnCl2.4H2O, vitamin
B12 (1 mg/mL), biotin (0,1 mg/mL), dan thiamin HCl, NaNO3 (75 mg/mL)
dan NaH2PO4-H2O (5 mg/mL).
2)Stok media disterilisasi dengan cara filtrasi dengan Milipore membrane 0,22
mikrometer
3)Air laut dan alat-alat disterilisasi dengan autoclave selama 15-20 menit dengan
suhu 1210 C dan tekanan 1 atm.
4)Stok kultur mikroalga diambil dan dimasukkan ke dalam wadah kultur yang
berisi media yang sudah disterilisasi. Sebaiknya volume stok kultur sebesar 1/5
atau 20% dari volume medium dengan kepadatan awal sel total dalam
keseluruhan volume akhir minimal sekitar 10-20 x 10.000 sel/ml.
5)Wadah kultur diberi aerasi dan pencahayaan yang sesuai.
6)Kultur diinkubasi dalam kondisi yang telah ditentukan dan diamati
pertumbuhannya selama 14 hari.

2. Pengambilan data jumlah sel mikroalga

1) .Sampel kultur diambil setiap 48 jam selama masa inkubasi.
2) Jumlah sel dihitung dibawah mikroskop dengan menggunakan Neubauer
Haemocytometer.
3) Kultur diambil kemudian diamati di bawah mikroskop dengan bantuan
OptiLab.
4) Perhitungan jumlah sel dibantu dengan menggunakan handcounter. Dicatat
jumlah sel yang terhitung.

C. Analisis Data
Hasil perhitungan sel dengan haemocytometer di konversi menjadi densitas sel
(sel/mL) dengan rumus sebagai berikut:
Densitas sel (sel/mL) = Jumlah sel terhitung 5 104
Perhitungan doubling time dan specific growth rate menggunakan data dari
densitas sel. Doubling time dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Ln(Nt/N0)=(ln 2)t/td
td=( ln 2)t/ Ln(Nt/N0)
Setelah doubling time diperoleh, maka dihitung specific growth rate dari kultur
mikroalga dengan rumus:
= 0,693/ td