Aktivitas Hepatoprotektif daun

Mimosa pudica terhadap Toksisitas

Induksi Karbontetraklorida

Oleh:
Angela Irena Sumartono, S.Farm.
(148115129)
Lisa Sudaryanto, S.Farm. (148115153)

Pendahuluan
Mimosa pudica (Putri Malu)
Kingdom: Plantae (Tumbuhan)
Subkingdom: Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Super Divisi: Spermatophyta (Menghasilkan biji)
Divisi: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas: Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)
Sub Kelas: Rosidae
Ordo: Fabales
Famili: Fabaceae (suku polong-polongan)
Genus: Mimosa
Spesies: Mimosa pudica Duchass. & Walp

Ciri-ciri Mimosa pudica

Berduri
Tanaman berbiji tertutup (angiospermae) dan terdapat
pada kelompok tumbuhan berkeping dua atau dikotil.
Berdaun majemuk menyirip dan bertepi rata ini memiliki
letak daun yang berhadapan
Daun kecil-kecil tersusun majemuk, bentuk lonjong
dengan ujung lancip, warna hijau (ada yang kemerahmerahan).
Bila daun disentuh akan menutup (sensitive plant).
Bunga bulat seperti bola,warna merah muda,
bertangkai.

Manfaat

Antihiperglikemia
Antidiarrhoeal
Anticonvulsant
sifat sitotoksik

Material dan Metode

Bahan
Mimosa pudica
diperoleh dari
Thailavaram (dekat
SRM University) pada
bulan Februari - 2009
.

Persiapan Ekstrak

Studi Toksisitas

Karbontetraklorida
diinduksi
hepatotoksisitas

Pendahuluan
Analisis Fitokimia

Penilaian Fungsi
Hati

Hewan Uji
Tikus Wistar albino
seberat 175-225 g
(kedua jenis kelamin).

Studi Histopatologi

Analisis
Statistik

Langkah Kerja

(Penyiapan Ekstrak Mimosa pudica)

Bubuk kasar dari daun Mimosa pudica

(300g) diekstrak secara exhausted dengan
alat Soxhlet pada suhu 50C dengan 500
ml metanol. Ekstrak disaring dengan plug
kapas dan kertas saring Whatman ( no.1 )
dan
kemudian
dipekatkan
dengan
menggunakan rotary evaporator pada
suhu rendah ( 40-60C) dan mengurangi
tekanan untuk mendapatkan ekstraktif
metanol sebanyak 8,20 g .

Langkah Kerja

(Analisis Fitokimia Pendahuluan )

Ekstrak
metanol
kemudian
mengalami analisis untuk menilai
adanya berbagai phytoconstituents
fitokimia pendahuluan (Harbone ,
1984), terbukti adanya flavonoid,
alkaloid
dan
glikosida.
Studi
kromatografi lapis tipis awal juga
menegaskan
adanya
konstituen
tersebut .

Langkah Kerja

(Karbontetraklorida diinduksi Hepatotoksisitas)

Tikus dibagi menjadi
empat kelompok,
masing-masing
enam tikus.

Setelah 36 jam
pemberian
Karbontetraklorida,
darah dari tikus
dikumpulkan dan
serum dipisahkan.

Tikus-tikus dari
kelompok kontrol ( I )
menerima tiga dosis
lendir gumacacia 5 %
( 1 ml / kg , per oral)
pada interval 1 jam ( 0
jam , 12 jam dan 24
jam).

Tikus dari kelompok

Karbontetraklorida (II)
menerima 3 dosis
pembawa pada
interval 12 jam dan
dosis tunggal
Karbontetraklorida
(1,25 ml/kg i.p.) dalam
parafin cair 30 menit
setelah pemberian
dosis pertama
pembawa.

Tikus dari kelompok uji

( IV ) menerima tiga
dosis ekstrak uji
dengan dosis 200 mg /
kg BB per oral pada 0
jam , 12 jam dan 24
jam.
Karbontetraklorida
(1.25ml / kg
i.p.)diberikan 30 menit
setelah pemberian
dosis pertama ekstrak
Silymarin.

Tikus-tikus dari
kelompok standar (III)
menerima tiga dosis
Silymarin (100mg / kg)
pada 0 jam , 12 jam
dan 24 jam .
Carbontetrachloride
diberikan ( 1.25ml / kg
ip ) 30 menit setelah
dosis
pertamasilymarin .

Langkah Kerja
Darah dikumpulkan
dari semua
kelompok yang
diambil pada
daerah pleksus
retroorbital dan
dibiarkan untuk
menggumpal pada
suhu kamar. Serum
dipisahkan dengan
sentrifugasi
dengan kecepatan
2500rpm selama
10 menit .
Total protein
(TPTN)
ditentukan
dengan
metode
Biuret,
Albumin
ditentukan
dengan BCG.

(Penilaian Fungsi Hati)

Serum ini
digunakan
untuk
estimasi
parameter
biokimia
untuk
menentukan
keadaan
fungsional
hati.

Total kolesterol
ditentukan
dengan
metode CHODPAP.

Serum
transaminase
oksaloasetat
glutamat ( SGOT )
dan serum glutamic
piruvat
transaminase( SGPT
) dianalisis dengan
metode kinetik UV
berdasarkan
metode referensi
Federasi
internasional Kimia
Klinik berdasarkan
sistem enzim
coupled.

Koenzim
yang
teroksidasi
menjadi NAD
dan
mengalami
penurunan
absorbansi
pada 340 nm
diukur.

Total bilirubin (TBL) oleh

(Jendrassik dan Grof ,
1938) yang involves
reaksi bilirubin dengan
diazotasi asam
Sulphanilic untuk
membentuk azo
majemuk, warna yang
terbentuk diukur pada
546 nm .

Alkaline fosfatase
( ALP ) diperkirakan
dengan metode yang
dijelaskan oleh (Comb
dan Bowers , 1972)
yang melibatkan
hidrolisis p - nitrofenol
yang memberikan
warna kuning yang
kuat dalam larutan
alkali .

Langkah Kerja
(Hasil Histopatologi)

Hewan-hewan
dikorbankan dan
perut dipotong
terbuka untuk
mengambil hati
.

Bagian itu kemudian

diamati di bawah
mikroskop untuk
perubahan
histopatologi pada
bagian hati dan
photomicrographs
diambil .

Hati itu dibiarkan

tetap dalam larutan
Boucin (campuran 75
ml Asam pikrat jenuh
, 25 ml 40 % formalin
dan 5 ml asam asetat
glasial) untuk 12 jam,
maka diembed dalam
parafin
menggunakan
metode
konvensional.

Hati dipotong
dengan ketebalan
5m dan diwarnai
menggunakan
hematoksilin eosin
- dye dan akhirnya
dipasang di di fenil xylene.

Langkah Kerja
(Analisis Statistik)

Nilai Rata-rata SEM dihitung untuk

setiap parameter. Untuk menentukan
perbedaan antar kelompok yang
signifikan setiap parameter dianalisis
secara
terpisah
dan
dilakukan
analisis satu arah varians (Gennaro,
1995) dan perbandingan individu
dari kelompok nilai mean dilakukan
uji Dunnet.

Hasil dan Pembahasan

Kesimpulan
Ekstrak metanol dari Mimosa pudica
memberi efek hepatoprotektif dan
aman dengan dosis 200mg / kg BB
tikus( AMAN)

REFERENSI

Dunnet, C.W., (1964): New tables for multiple comparisions with a control.
Biometrics,
20:482 -91.
Ecobichon, D.J., (1999): The basis of toxicology testing 2nd edn, Newyork,
CRC press, pp
43-46.
Farooq, S., Ahmed, I., Pathak, G.K., (1997): In protective role of koflet (an
Ayurvedic
preparation) against cellular toxicity caused by Carbontetrachloride and
flyash. J
Ethnopharmacol., 53:109-116.
Galighor, A.E., Kozloff, E.N., (1976): Essentials of practical microtechnique
2nd edn, Lea and
Febiger, NewYork.
Gennaro, A.R., (1995): The science and Practice of Pharmacy, 9th edn, Vol 1,
Mac publishing
Company, Easton PA.
Harbone, J.B., (1984): phytochemical methods - A guide to modern technique
of plant
analysis, 2nd edn, chapman and hall, Newyork, pp 85.
Jendrassik, L., Grof, P., (1938): Quantitative determination of total and direct
bilirubin in

 Mitra, S.K., Venkataranganna, M.V., Sundaram, R., Gopumadhavan, S., (1998): Protective
effects of HD-03, A herbal formulation, against various hepatotoxic agents in rats.
Ethnopharmacol J., 63:181-86.
Peters, T., (1968): Proposals for standardisation of total protein assays. Clin Chem.,
14:1147-59.
Rao, K.S., Mishra, S.H., (1997): Screening of anti-inflammatory and hepatoprotective
activities of alantolactone isolated from the roots of Inula racemosa. Indian Drugs
34(10):571-5.
Recknagel, R.O., Glender, E.A., Walter, R.L., (1989): Mechanism of Carbontetrachloride
toxicity. Pharmal ther., 43:139-54.
Richmond, W., (1973): Preparation and properties of a cholesterol oxidase from Nocardia
species and its application to the enzymatic assay of total cholesterol in serum. Clin
Chem., 19(12):1350-6.
Schwartz, M.K, De Cediel, N., Curnow, D.H., Fraser, C.G., Porter, C.J., Worth, H.G., Zinder,
O., (1985): International federation of clinical chemistry, education committee and
international union of pure and applied chemistry, division of clinical chemistry:
definition of the terms certification, licensure and accreditation in clinical chemistry.
J Clin Chem Clin Biochme., 23(12):899-901.
Venukumar, M.R., Latha, M.S, (2002): Hepato protective effect of the methanolic extract
of
orchids in Carbontetrachloride treated male rats. J. Pharmacol., 34:2.
Wagner, G., Blatt, S., (1996): Plant drug analysis, a thin layer chromatography, atlas, 2nd
Ed,
CS Pringer Verlag, pp. 352-355.
Webster, D., (1974): A study of intraction of bromocresol green with isolated serum
globulin
fractions. Clin Chim Acta., 53:109-15.