Abstrak

Ikan mas (termasuk hias koi ikan mas) Cyprinus carpio L. secara ekologis dan ikan air tawar
ekonomis penting di Eropa dan Asia. C. carpio baru-baru ini telah terancam oleh virus herpes
cyprinid ketiga, yang dikenal sebagai cyprinid herpesvirus-3 (CyHV-3), yang agen etiologi
penyakit koi herpes (KHVD), yang menyebabkan morbiditas yang signifikan dan mortalitas
pada koi dan ikan mas. Tanda-tanda klinis dan patologis termasuk lecet epidermal, produksi
lendir yang berlebihan, nekrosis insang dan organ internal, dan kelesuan. KHVD telah hancur
populasi ikan mas besar di Israel, Indonesia, Taiwan, Jepang, Jerman, Kanada, dan Amerika
Serikat, dan telah terdaftar sebagai penyakit harus dilaporkan di Jerman sejak tahun 2005, dan
oleh Organisasi Dunia untuk Kesehatan Hewan sejak tahun 2007. KHVD diperburuk dalam
budidaya karena relatif tinggi tuan rumah padat tebar, dan CyHV-3 dapat terkonsentrasi oleh
organisme air filter-makan. CyHV-3 taksonomi dikelompokkan dalam keluarga
Alloherpesviridae, dapat diperbanyak dalam jumlah baris sel, dan aktif di berbagai suhu 15-28
C. Tiga isolat yang berasal dari Jepang (KHV-J), USA (KHV-U), dan Israel (KHV-I) telah
diurutkan. CyHV-3 memiliki 295 kb genom dengan 156 frame pembacaan terbuka unik dan
bereplikasi dalam inti sel, dan dewasa partikel virus yang 170-200 nm diameter. CyHV-3 dapat
dideteksi oleh beberapa PCR berbasis metode dan oleh enzim-linked immunosorbent assay.
Beberapa mode imunisasi telah dikembangkan untuk KHVD; Namun, ikan diimunisasi dengan
baik vaksin atau tipe liar virus mungkin menjadi operator untuk CyHV-3. Tidak ada pengobatan
saat ini untuk KHVD.
Kata kunci
Akuakultur; KHV; Penyakit herpes koi; KHVD; Perdarahan kulit; Deteksi virus;
Enzyme-linked Immunosorbent Assay; ELISA
PENGANTAR
Protein ikan membuat naik 20% atau lebih dari total protein yang dikonsumsi di berpenghasilan
rendah, makanan- negara kekurangan, dengan akuntansi budidaya untuk 46% dari pasokan ikan
pangan global di 2008; selain menjadi bentuk kritis gizi, produksi foodfish melalui
akuakultur juga merupakan bentuk utama dari kerja (FAO 2010). Carp (Cyprinidae) membuat
71% dari bertani produksi ikan air tawar global dan merupakan sumber penting makanan di
Cina dan India di mana 70,7 dan 15,7%, masing-masing, dari ikan mas ternak yang dihasilkan.
Namun, cyprinid herpesvirus (CyHV-3), yang merupakan agen etiologi dari virus yang sangat
menular penyakit, penyakit koi herpes (KHVD), yang menyebabkan kerusakan besar ke dunia
produksi koi dan ikan mas Cyprinus carpio L. Penyakit ini telah terdaftar sejak
2005 di Jerman, dan sejak tahun 2007 di Inggris dan oleh Organisasi Dunia Hewan
Kesehatan (OIE) sebagai penyakit yang wajib lapor, dan telah menyebar ke sebagian besar
wilayah dunia karena perdagangan ikan global dan internasional menunjukkan koi hias
KHVD ditandai dengan bercak putih, perdarahan kulit, lesu, kurang nafsu makan, mata cekung,
pembesaran limpa dan ginjal, dan nekrosis insang (Gambar. 1) pada ikan yang terinfeksi
(Hedrick et al. 2005). Virus bereplikasi di insang, usus, interstitium, hati, otak, dan jaringan
ginjal (Pikarsky et al. 2004), dan sebelumnya dikenal sebagai ikan mas nefritis interstitial dan
insang virus nekrosis. Karena KHVD telah menjadi begitu merugikan produksi dunia foodfish,
ulasan ini akan mencakup penemuan KHVD, penyebaran CyHV-3, kemajuan dalam pemahaman
kita tentang penyakit dan inang-patogen hubungan, alat dikembangkan untuk mendeteksi virus,
dan metode yang dikembangkan untuk mengendalikan penyakit ini.
The cyprinid keluarga herpesvirus

Berdasarkan urutan keselarasan dari daerah lestari untuk polimerase DNA dan terminase
gen, virus herpes cyprinid berhubungan erat dengan anguillid herpesvirus 1 (-AngHV 1)
(Waltzek et al. 2009a). CyHV-3 saham 40 gen dilestarikan dengan AngHV-1 (van Beurden et
al. 2010), dan menurut Komite Internasional Taksonomi Semua 3 virus herpes cyprinid dan
AngHV-1 dikelompokkan dalam genus Cyprinivirus. Pertama cyprinid virus herpes, cyprinid
herpesvirus-1 (CyHV-1), adalah terisolasi di Jepang dari pertumbuhan kulit papillomatous pada
koi yang terinfeksi dan disebarkan di epithelioma papulosum cyprini (EPC) dan orang bodoh
minnow (FHM) sel garis pada 20 C (Sano et al. 1985a), dan digambarkan dengan dimensi 113
dan 190 nm untuk nukleokapsid dan matang menyelimuti virion masing (Sano et al. 1985b).
Kemudian, sebuah cyprinid herpes diisolasi di Amerika Utara oleh Hedrick et al. (1990), dan
digambarkan dengan dimensi 109 dan 157 nm untuk nucleocapsid dan matang menyelimuti
virion. CyHV-1 adalah mematikan pada ikan muda, dan dapat menyebabkan tingkat kematian
hingga 97% (Sano et al. 1991). Meskipun CyHV-1 menyebabkan pertumbuhan akut papiloma,
biasanya non-mematikan untuk koi dewasa (Calle et al. 1999). Cyprinid herpesvirus-2 (CyHV-2)
mempengaruhi terutama ikan mas Carassius auratus auratus dan telah diisolasi di EPC dan sel
FHM garis tumbuh pada 20 C (Jung & Miyazaki 1995, Groff dkk. 1998), tetapi tidak cell line
cocok untuk serial passaging yang virus (Goodwin et al. 2006a). Jeffery et al. (2007) passaged
CyHV-2 dalam koi sirip-1 (KF-1) garis sel sekali, tapi tidak ada efek sitopatik (CPE) diamati
pada ayat-ayat berikutnya. CyHV-2 telah passaged dalam ikan mas garis sel sirip (GF-1) untuk
studi di filogenetik analisis dan deteksi tes (Waltzek et al. 2005, 2009b). Tanda-tanda klinis
CyHV-2 infeksi termasuk kelesuan, pengembangan kulit pucat dengan warna putih, berlendir,
blister-seperti proyeksi pada jaringan, dan akhirnya kematian (Jeffery et al. 2007). Pemeriksaan
postmortem dari CyHV-2 ikan mas yang terinfeksi mengungkapkan nekrosis parah insang dan
kerusakan ginjal dan hati (Jeffery et al. 2007). CyHV-2 menyebabkan nekrosis hematopoietik
herpesviral di ikan mas (Jung & Miyazaki 1995), dan dapat dideteksi dengan PCR (Goodwin et
al. 2006a, b). CyHV-2 partikel virus yang heksagonal, dan partikel intranuklear memiliki
diameter 100 nm dengan 50 inti nm (Jeffery et al. 2007). Dewasa, virion menyelimuti berkisar
170-220 nm dalam ukuran ketika diamati di ruang sitoplasma dan ekstraseluler (Jung &
Miyazaki 1995). Acak sampling dalam peternakan ikan mas telah menunjukkan bahwa CyHV-2
adalah sangat umum di Amerika Serikat (Goodwin et al. 2009). Ada 3 isolat utama dari virus
herpes cyprinid ketiga, CyHV-3, satu berasal di Jepang, lain di Israel, dan lain terisolasi di AS,
dilambangkan KHV-J, KHV-I, dan KHV-U, masing-masing.
Taksonomi
CyHV-3 saham homologi Poxviridae, Iridoviridae, dan protein yang terlibat dalam Nimaviridae
sintesis deoksinukleotida tri-fosfat (dNTP); Namun, CyHV-3 secara genetik berbeda dari
keluarga virus tersebut dan lebih mirip dengan CyHV-1 dan CyHV-2; Oleh karena itu, CyHV-3
dianggap virus herpes cyprinid ketiga (Waltzek dkk. Gotesman dkk. 2005, Ilouze dkk. 2006).
Protein perbandingan urutan helikase, protein kapsid tripleks, Polimerase DNA, dan protein
utama capsid (open reading frame 39: ORF39) dikonfirmasi homologi signifikan cukup untuk
CyHV-3 untuk dikelompokkan dengan yang lain 2 cyprinid virus herpes dalam orde baru, yang
(al Waltzek et. 2005) Herpesvirales. Berdasarkan gen encoding polimerase DNA virus dan
ATPase subunit terminase, CyHV-3 saat ini diklasifikasikan bersama dengan CyHV-1 dan
CyHV-2 dalam genus Cyprinivirus dalam keluarga Alloherpesviridae (Waltzek et al. 2009a,
Michel et al. 2010a). Isolat dapat dibedakan oleh duplex PCR untuk mendeteksi mutasi kecil di
coding daerah antara ORF29 dan ORF31 (Bigarre et al. 2009). Kloning dan sekuensing

berikutnya dari 3 glikoprotein ORF25, ORF65, dan ORF 116 variasi mendeteksi bahwa termasuk
spesifik sisipan dan penghapusan antara 3 isolat KHV utama (Han et al. 2013).
Sejarah awal dan distribusi di seluruh dunia
CyHV-3 awalnya diidentifikasi oleh Hedrick et al. (2000) sebagai agen penyebab untuk massa
wabah kematian di AS dan Israel, tetapi mungkin telah terdeteksi sedini tahun 1996 di
Inggris (Haenen et al. 2004) dan 1997 di Jerman (Bretzinger et al. 1999). Tiga CyHV-3
isolat-benar diurutkan: nos aksesi. dalam database nukleotida NCBI NC_009127 (DQ177346
[regangan I]; DQ657948 [regangan U], dan AP008984 [regangan J,
TUMST1]). Masing-masing dapat diidentifikasi berdasarkan perbedaan urutan gen yang
berbeda. Kurita et al. (2009) dikelompokkan 3 sequencing CyHV-3 isolat baik sebagai US / I
atau J strain berdasarkan nucleotide polymorphism di timidin kinase (TK) gen; sistem
pengelompokan ini diverifikasi oleh Avarre dkk. (2011) disparitas pelacakan di tandem
mengulangi di urutan genetik dari 8 berbeda CyHV-3 lokus. Beberapa isolat Eropa mirip dengan
isolat dari AS dan Israel (KHV-U dan KHV-I, masing-masing). Isolat lain yang mungkin varian
CyHV-3, yang dikenal sebagai KHV-J, telah terdeteksi di Jepang, Malaysia, Taiwan, dan lainnya
East Negara-negara Asia (Kurita et al. 2009, Cheng et al. 2011). Baru-baru ini, berdasarkan
urutan perbandingan glikoprotein, varian baru dari KHV terdeteksi di Korea (Han et al. 2013).
Eropa
Para peneliti di Jerman termasuk di antara yang paling awal untuk menggambarkan KHVD di
koi (Bretzinger dkk. 1999). Sejak itu, CyHV-3 telah terdeteksi di beberapa peternakan di
Polandia, di mana ikan mas adalah ditanam untuk makanan (Antychowicz et al. 2005, Bergmann
et al. 2006). Ada sporadis Lokasi CyHV-3-positif dari koi komersial dan peternakan ikan mas di
Republik Republik (Pokorova et al. 2007). Inggris dan Wales memiliki KHVD luas di ikan mas
dan perikanan koi, tetapi ada ikan mas dan koi peternakan terpisah yang bebas dari CyHV-3
(Taylor et al. 2010, 2011). Dua kasus KHVD dilaporkan di Irlandia, satu pada tahun 2005 dan
satu lagi di 2007, dan setiap kasus yang terlibat koi import (McCleary et al. 2011). Pada hari ini,
sebagian besar negara-negara Eropa Barat, termasuk Austria, Belgia, Denmark, Perancis, Italia,
Luxemburg, Rumania, Slovenia, Spanyol, Swedia, Swiss, dan Belanda memiliki melaporkan tes
positif untuk CyHV-3 (Pokorova et al. 2005, OIE 2012).
Asia
Sebuah gugus tugas internasional didirikan dalam upaya untuk menentukan penyebab dari 2002
wabah penyakit di Indonesia. Selanjutnya, isolat Indonesia yang unik CyHV-3 (a
hibrida dari AS / I dan Jepang mengisolasi) diisolasi dan diidentifikasi dari daerah di Indonesia
(Bondad-Reantaso et al. 2007, Sunarto dkk. 2011). KHVD pertama kali terdeteksi di Jepang di
2003 selama acara kematian massal ternak ikan mas di Danau Kasumigaura, Ibaragi prefektur
(Sano et al. 2004). Setelah itu, CyHV-3 terdeteksi oleh PCR dan tes ELISA berbasis di
ikan mas liar di Danau Biwa, dan CyHV-3-DNA terdeteksi dalam sampel air dari 4 situs
sepanjang Sungai Tamagawa di Tokyo, Jepang, pada tahun 2006; sejak saat itu, CyHV-3 telah
Gotesman dkk. dikonfirmasi di 90% dari 109-A kelas sungai nasional alam di Jepang (Ishioka et
al. 2005, Sano et al. 2005, Haramoto dkk. 2009, Uchii dkk. 2009, Minamoto dkk. 2012).
Kematian karena CyHV-3 terdeteksi di Taiwan utara pada tahun 2002 (Tu et al. 2004), dan massa
Peristiwa kematian yang pertama kali terlihat pada tahun 2003 di perikanan Taiwan selatan
(Cheng et al. 2011). CyHV-3 telah terdeteksi di China (Dong et al. 2011) dan di koi induk di
Korea Selatan (Gomez et al. 2011, Lee et al. 2012, Han et al. 2013).

Amerika Utara
Karena deteksi awal KHVD di AS, konvensional dan real-time PCR dengan dikumpulkan
sampel dari hati, limpa, dan ginjal diambil dari ikan mas selama acara kematian massal 2004
ikan mas liar di New York menegaskan bahwa ikan terinfeksi oleh CyHV-3 (Grimmett et al.
2006). Selanjutnya, CyHV-3 terdeteksi di Ontario, Kanada, pada tahun 2007, dan setelah itu,
beberapa danau di Ontario menderita peristiwa kematian ikan mas kotor karena KHVD
(Garver et al. 2010). Menurut Michigan Departemen Sumber Daya Alam, ada
telah kematian massal ikan mas baru-baru ini disebabkan oleh CyHV-3 di wilayah Midwest utara
AS berbatasan Kanada (Whalen 2011). Tampaknya bahwa virus menyebar ke arah barat adalah
bersama AS / Kanada perbatasan.
DETEKSI
CyHV-3 awalnya dibedakan dari virus ikan lele dan virus herpes cyprinid
dengan analisis polipeptida yang mengungkapkan peptida novel dalam dimurnikan ekstrak virus
dan oleh analisis pembatasan ekstrak DNA dimurnikan. Teknik yang terakhir menyebabkan awal
Metode PCR berbasis deteksi (Gilad et al. 2002). Selanjutnya, metode PCR berbasis adalah
dikembangkan berdasarkan amplifikasi gen TK (Bercovier et al. 2005). Loop-dimediasi
amplifikasi isotermal (LAMP) dari gen TK memungkinkan untuk mendeteksi CyHV-3 dalam
langkah 1 proses tanpa memerlukan pengendara sepeda termal (Gunimaladevi et al. 2004,
Yoshino et al. 2006, 2009). Deteksi CyHV-3 dapat dilakukan dengan nested PCR atau dengan
menangkap virus partikel dengan antibodi diikuti oleh LAMP untuk mendeteksi partikel virus
(El-Matbouli dkk. 2007a, Soliman & El-Matbouli 2009). Real-time PCR, nested PCR, dan seminested PCR adalah salah satu alat yang paling sensitif untuk mendeteksi CyHV-3 (Bergmann et
al. 2010b). Dalam satu metode deteksi yang lebih elegan untuk CyHV-3 oleh Soliman & ElMatbouli (2005), produk LAMP-PCR divisualisasikan dengan mencampur dengan SYBR-Green
saya untuk mengkonfirmasi positif hasil untuk CyHV-3 (Gambar. 2). Diferensiasi CyHV-3 isolat
dari Israel, Jepang, dan AS dapat dicapai dengan analisis dari sejumlah variabel pengulangan
tandem di coding dan daerah non-coding (al. Avarre et 2011). Selain berbagai metode molekuler
untuk mendeteksi CyHV-3, antibodi monoklonal yang dihasilkan terhadap ORF68 juga telah
dikembangkan untuk digunakan untuk mengkonfirmasikan CyHV-3 oleh imunohistokimia (Akoi
et al. 2011). Sebuah sensitif enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) yang probe untuk
menangkap ikan mas anti-KHV antibodi dikembangkan untuk deteksi tidak langsung CyHV-3
oleh Adkison dkk. (2005); satu sama lain dengan St-Hilaire et al. (2009). Sebuah ELISA lanjut
yang menggunakan antibodi anti-KHV untuk Probe untuk menangkap partikel KHV
dikembangkan oleh Disyon et al. (2005) dan dijual sebagai kit komersial. Penderitaan ikan dari
KHVD diketahui memiliki bakteri sekunder Infeksi (Haenen et al. 2004), sehingga metode PCR
berbasis masih ditambah dengan susunan DNA teknologi untuk cepat mendeteksi CyHV-3 ikan
positif yang terinfeksi Flavobacterium (Lievens et al. 2011) atau bakteri lainnya. Penyelidikan
primer dirancang terhadap mRNA exonic coding urutan memungkinkan untuk mendeteksi
CyHV-3 selama tahap replikasi (Yuasa et al. 2012).

MODE OF Entry

Tes bioluminescent menggunakan rekombinan CyHV-3 genom luciferase-mengekspresikan

kloning menjadi kromosom buatan bakteri (BAC) mengungkapkan bahwa CyHV-3 dapat masuk
melalui kulit dalam hubungannya dengan rute diduga sebelumnya masuk, insang (Costes dkk.
2009). Lecet epidermal menyediakan situs rentan terhadap masuknya virus, dan luka
penyembuhan daerah yang juga rentan terhadap masuknya virus (Raj et al. 2011). Makan pada
CyHV-3-positif materi menyediakan mode tambahan masuk untuk CyHV-3 melalui periodontal
faring mukosa selama pengunyahan, dan diketahui bahwa CyHV-3 ulangan deras di usus
(Fournier et al. 2012) daripada yang masuk melalui usus (Ilouze et al. 2010). Respon inflamasi
dan TK mRNA yang terdeteksi dalam ikan mas usus 3 pasca perendaman dengan CyHV-3, dan
gen claudin (claudin-2, -3, -11, -23 dan) yang berpartisipasi dalam pemeliharaan persimpangan
ketat di sel epitel yang termodulasi dalam usus selama CyHV-3 Infeksi (Syakuri et al. 2013).
TRANSMISI
Faktor lingkungan
CyHV-3 menginduksi kematian yang tinggi untuk koi pada suhu antara 18 dan 28 C, tapi tidak
ada mortalitas diamati untuk ikan CyHV-3-terkena pada 13 C (Gilad et al. 2003). CyHV-3
adalah ditularkan secara horizontal melalui kotoran ikan yang sakit; Oleh karena itu, memiliki
kepadatan tinggi ikan seperti di perusahaan budidaya akan memperburuk suatu CyHV-3 wabah
dengan memfasilitasi pelepasan tingkat tinggi CyHV-3 melalui kotoran ikan yang sakit (Disyon
et al. 2005). CyHV-3 titer dalam air sungai dan danau yang terkontaminasi dapat diukur dengan
berkonsentrasi partikel virus menggunakan ultrasentrifugasi atau filter berlapis kationik diikuti
oleh kuantitatif real-time PCR (qPCR) (al. Honjo et 2010). Penggunaan qPCR telah
menunjukkan bahwa CyHV-3 konsentrasi bervariasi di dekat situs penyimpanan plankton dan
kemungkinan terkonsentrasi oleh Filter- makan Rotifera (Minamoto et al. 2011). CyHV-3 dapat
ditularkan ke ikan mas ketika makan plankton langsung, atau bivalvia yang telah diberi plankton
dan telah terkonsentrasi CyHV-3 di tabung pencernaan mereka (Minamoto et al. 2011).
Organisme filter-makan lainnya, seperti moluska air tawar dan krustasea, juga dapat menguji
positif untuk CyHV-3 (Kielpinski et al. 2010). Kawin juga dapat meningkatkan prevalensi
CyHV-3 dengan menggabungkan terinfeksi ikan dan / atau menyebabkan pengurangan respon
imun (Uchii et al. 2011). Penting tingkat CyHV-3 DNA terdeteksi di laguna 1 bln sebelum acara
kematian massal, dan konsentrasi yang sama juga terdeteksi di sebuah danau yang telah bebas
dari CyHV-3 terkait Peristiwa kematian massal selama 3 tahun (Honjo et al. 2010). Beberapa
strain bakteri alami yang jelas air CyHV-3 dan dengan demikian mengurangi infektivitas CyHV3 di lingkungan alam dalam beberapa hari (Shimizu et al. 2006).
Operator
Selamat dari KHVD memiliki CyHV-3 DNA di hati, jantung, insang, dan mata, dan CyHV-3
mungkin bertahan dalam sel-sel epitel gastrointestinal atau leukosit (Bergmann et al. 2009,
Eide dkk. 2011a). Bertahan ikan mas yang pembawa CyHV-3 dan dapat mengeluarkan virus
terutama berikut kegiatan yang terkait dengan stres seperti bersarang (Bergmann & Kempter
2011). Ikan mas telah ditunjukkan untuk menjadi tuan rumah CyHV-3 virus ketika co-habitated
dengan koi yang terinfeksi (El-Matbouli et al. 2007b, Bergmann et al. 2010a). Goldfish juga
telah dilaporkan untuk bertindak sebagai operator untuk CyHV-3 di AS (Sadler et al. 2008).
Leukosit dari kedua koi dan ikan mas telah diuji positif untuk CyHV-3. Selain itu, dalam studi
kohabitasi, ikan mas yang terinfeksi menular virus untuk koi naif seperti yang ditunjukkan oleh

immunostaining dengan anti-CyHV-3 serum, in situ hibridisasi, dan PCR (Bergmann et al.
2010a). Dalam sebuah penelitian serupa, ikan mas menunjukkan ke
bertindak sebagai pembawa untuk CyHV-3 dalam percobaan hidup bersama dengan ikan mas
naif (El- Matbouli & Soliman 2011). Bersarang PCR telah mengungkapkan CyHV-3 DNA dalam
sampel yang sehat ikan termasuk ikan mas rumput Ctenopharyngodon idella, biru ide kembali
Leuciscus idus, dan Ancistrus sp., Menunjukkan bahwa spesies ikan ini mungkin operator
potensi CyHV-3 (Bergmann et al. 2009). Demikian pula, Ikan sturgeon Rusia Acipenser guel
denstaedtii dan Ikan sturgeon Atlantik A. oxyrinchus juga telah diuji positif untuk CyHV-3 DNA
dengan PCR berbasis metode (Kempter et al. 2009).
Faktor yang mempengaruhi infeksi
Meskipun muda dan dewasa ikan mas yang rentan terhadap CyHV-3, larva ikan mas yang
tahan terhadap infeksi oleh CyHV-3 (Ito et al. 2007). Polimorfisme nukleotida tunggal dalam
gen respon imun bawaan dari ikan mas, seperti di Toll-like atau pada gen IL-10a, mungkin
membedakan ketahanan terhadap CyHV-3 (Kongchum et al. 2010, 2011). Peningkatan regulasi
dari 8 gen yang berhubungan dengan kekebalan tubuh, termasuk interferon diinduksi proteinpertunjukan seperti 1 dan penekan dari sitokin sinyal 1 diamati pada korban KHVD, selain lebih
cepat sitokin reaksi KHV (Rakus et al. 2012). CyHV-3 juga mungkin dapat memodulasi
respon interferon dalam jenis sel yang berbeda (Adamek et al. 2012). Infeksi CyHV-3
downregulates gen pertahanan kulit seperti muc5B, komponen dari selimut lendir, claudin (23,
30), yang penting untuk pemeliharaan persimpangan ketat, dan anti mikroba peptida seperti defensin-1 dan -2, yang terlibat dalam infeksi bakteri sekunder (Adamek et al. 2013). Namun,
lendir memberikan perlindungan bawaan terhadap masuknya virus dengan menyediakan
ikan dengan penghalang kental terhadap masuk dan sebagai media penyimpanan untuk
menetralkan virus faktor (Raj et al. 2011). Oleh karena itu, meskipun kulit dapat mengalami
CyHV-3 entri (Costes dkk. 2009), karena perlindungan yang lendir menyediakan, saluran
pencernaan dan atau insang jaringan yang semakin besar kemungkinan jalur untuk CyHV-3 entri
(SM Bergmann pers. obs.).
PENGARUH histopatologi CYHV-3
Karakteristik ikan CyHV-3 yang terinfeksi meliputi kehilangan nafsu makan, tidak menentu dan
tidak terkoordinasi gerakan, dan terengah-engah (Hutoran et al. 2005). CyHV-3 terdeteksi dalam
lendir sebagai awal 1 d posting infeksi, dan titer signifikan juga terdeteksi di otak, limpa,
ginjal, hati, dan usus koi yang terinfeksi (Gilad et al. 2004). Tanda-tanda klinis utama CyHV-3
Penyakit meliputi: hilangnya epidermis, perubahan warna, erosi sirip ekstremitas, dan
peningkatan di produksi lendir di insang (Bretzinger et al. 1999). Perubahan histopatologi yang
disebabkan oleh CyHV-3 mencakup: lesi dan nekrosis pada insang dan jaringan ginjal
interstisial, dan fokus nekrosis dalam tubuh hati dan inklusi nuklir di jaringan insang (Gambar. 3)
dan di ginjal glomerulae (Perelberg et al. 2003). CyHV-3 yang terinfeksi ikan mas ditampilkan
inklusi mayat di splenocytes, degenerasi nuklir di sel miokard, dan kemacetan kapiler di vena
kecil dari otak (Miyazaki et al. 2008). Selain itu, CyHV-3 penyebab hiperplasia dari lapisan
epitel yang kelenjar lambung dalam perut dan usus yang vili di usus membentuk proyeksi papiler
kistik, dan hiperplasia sel pernapasan mengakibatkan fusi lamella dan pendarahan di ujung
lamella dalam insang (El-Din 2011).
SEL BUDAYA DAN REPLIKASI VIRUS

Sel CyHV-3 yang terinfeksi menampilkan sitoplasma padat dengan organel morfologi yang
mendegradasi sebagai replikasi virus berlangsung (Miyazaki et al. 2008). CyHV-3 telah
dibudidayakan di koi sirip ekor (KF-1) dan otak ikan mas (CCB) (Gambar. 4) kultur sel, dan
telah terbukti untuk mereplikasi dalam kultur sel berasal dari ikan mas perak
Hypophthalmichthys molitrix dan ikan mas (Neukirch & Kunz 2001, Davidovich et al. 2007,
Bergmann et al. 2010a, Dong et al. 2011). CPE disebabkan oleh infeksi CyHV-3 juga telah
diamati 15 d posting inokulasi FHM (Grimmett et al. 2006). Replikasi optimal untuk CyHV-3 diKF 1 sel-line terjadi antara 15 dan 25 C (Gilad et al. 2003). Real-time PCR ditentukan bahwa
minimal 6 10 3 setara genomik CyHV-3 yang diperlukan untuk mengamati CPE di 10
6 KF-1 (fin koi) sel, dan CyHV-3 titer berkisar antara 107 dan 109 setara genom per 10 6 KF-1
sel selama infeksi puncak lendir, hati, ginjal, limpa, usus, dan otak (Gilad et al. 2004).
Morfogenesis
Elektron mikroskop gambar dari jatuh tempo virus menunjukkan bahwa CyHV-3 ulangan dalam
inti dan membentuk kapsid dengan karakteristik mirip dengan virus herpes mamalia dalam hal
tonjolan ke dalam dan melalui membran nuklir (Miwa et al. 2007). Awalnya di inti, dewasa
CyHV-3 nukleokapsid yang memiliki kerapatan elektron rendah dan 100 nm diameter terbentuk.
Selanjutnya, nukleokapsid dewasa dengan kerapatan elektron tinggi dan 117 nm diameter
terbentuk (Miyazaki et al. 2008). Kapsid dewasa dengan diameter antara 150 dan 180 nm yang
terletak di wilayah perinuklear mana mereka mulai kuncup off dan membawa mereka bagian dari
amplop nuklir (Miyazaki et al. 2008). Transmisi elektron studi mikroskopis (TEM) dari CyHV-3
menunjukkan bahwa virus membentuk simetris ikosahedron; Namun, wilayah virus inti elektronpadat wilayah asimetris di mana kompleks DNA dan nukleoprotein genom ada (Hutoran et al.
2005). Elektron yang inti padat dari CyHV-3 dewasa, seperti yang diamati dengan TEM,
menunjukkan diameter antara 170 dan 230 nm dan inti protein menjadi 110 nm (Cheng et al.
2011).
GEN FUNGSIONAL
Genom masing-masing CyHV-3 isolat (Israel, Jepang, dan Amerika Serikat) terdiri dari 295 kB
dengan 22 kB terminal repeat; Oleh karena itu, 164 ORFs potensial terdiri dari 8 ORFs diulang
sayap yang kedua ujung genom (Aoki et al. 2007). Dari 156 ORFs potensi unik di yang CyHV-3
genom, studi spektrometri massa diidentifikasi 40 protein dalam virion dewasa yang termasuk 3
protein kapsid, 13 protein amplop, 2 protein tegument, dan 22 struktural protein yang belum
diklasifikasikan (Michel et al. 2010b). Sebuah laporan terbaru oleh Ilouze dkk. (2012a)
ditunjukkan oleh terbalik transcriptase-real-time PCR yang ke-156 ORFs dari CyHV-3
ditranskripsi, dan ORFs telah dijelaskan dalam hal relatif transkripsi waktu. Tiga gen yang
terlibat dalam sintesis dNTP diperlukan untuk sintesis DNA, yaitu. timidilat monofosfat kinase,
reduktase ribonucleotide (RNR), dan TK, berbagi homologi dengan cacar gen virus (Ilouze et al.
2006). Namun, TK, RNR, dan gen lain terlibat dalam sintesis DNA, deoxyuridine trifosfat
pyrophosphatase, non-esensial untuk replikasi virus di baris sel CCB, tetapi gen ini merupakan
faktor virulensi penting dalam mempengaruhi tanda-tanda dan kematian klinis (Fuchs et al.
2011). Protein yang dikode oleh ORF81 ditunjukkan untuk dimasukkan ke amplop virus utuh
CyHV-3 partikel oleh mikroskop immunogold (Rosenkranz et al. 2008). Mayoritas CyHV-3 gen
yang terlibat dalam sintesis DNA dieliminasi dalam waktu 24 jam dalam sel yang terinfeksi CCB
yang ditransfer ke 30 C (suhu yaitu non-permisif); Namun, TK, B22Rh, ITP (tripleks
intercapsomeric protein), dan klon gen Y bertahan sampai 15 d setelah transfer (Disyon et al.
2007). Di sebuah percobaan paralel dalam laporan tersebut, B22R homolog, Orf4, ORF5, dan

Gray Sph1hpi adalah yang pertama 4 gen akan kembali ditranskripsi setelah sel yang terinfeksi
diinkubasi selama 22 jam pada 30 C untuk membersihkan CyHV-3 transkrip dan kembali
dipindahkan ke 22 C (yaitu permisif suhu). Sebuah BAC membawa seluruh CyHV-3 genom
dengan gangguan gen TK ditampilkan mengurangi virulensi dan menyebabkan penurunan 50%
angka kematian di koi dibandingkan dengan BAC reversi yang memiliki gen yang memproduksi
TK tambahan (Costes dkk. 2008). Protein skrining dengan antibodi terhadap glikoprotein ORF56
mengungkapkan bahwa CyHV-3 berinteraksi dengan sejumlah protein pertahanan tuan rumah
yang mencakup lysozymes dan granulins, dan dengan mesin terlibat dalam modifikasi protein
seperti PI, glutathione S-transferase rho, dan anggota dari jalur degradasi ubiquitin (Gotesman et
al. 2013). ORF134 mengkodekan homolog interleukin-10, ekspresi yang lebih tinggi selama akut
dan fase aktivasi CyHV-3 penyakit (Sunarto et al. 2012).
Profilaksis DAN PENGENDALIAN
Imunisasi
Imunisasi terhadap CyHV-3 ini dicapai dengan mengekspos ikan mas selama 2 sampai 3 d
dengan infeksi CyHV-3 dan kemudian mentransfer ikan mas terkena suhu non-permisif
(30 C), atau dengan menggunakan virus hidup yang dilemahkan diproduksi oleh in vitro bagian
serial dan perawatan dengan ultraviolet (UV) iradiasi (Ronen et al. 2003, Perelberg et al. 2005).
Tantang dengan virus dilemahkan atau tipe liar menunjukkan bahwa antibodi yang diproduksi di
ikan yang terinfeksi dapat menetralisir CyHV-3 in vivo (Perelberg et al. 2008). Adkison dkk.
(2005) juga menunjukkan bahwa pengobatan dengan antibodi CyHV-3-diinduksi dapat
menipiskan CyHV-3 infeksi. Bertahan koi yang diinokulasi dengan strain BAC diturunkan
membawa baik penuh kekuatan atau dilemahkan CyHV-3 resisten terhadap CyHV-3 penyakit
(Costes dkk. 2008). Sebuah US paten telah diajukan berdasarkan metode tersebut imunisasi
(Costes dkk. 2011). Pemodelan matematika memprediksi bahwa inokulasi ikan budidaya dengan
CyHV-3 selama musim gugur akan menghasilkan ikan mas KHVD tahan dalam kesiapan untuk
musim permisif berikut (Omori & Adams 2011).
Diimunisasi ikan mas menjadi operator?
Sebuah cacat potensial di imunisasi ikan mas terhadap CyHV-3 oleh pergeseran suhu adalah
bahwa diimunisasi ikan dapat menjadi operator untuk virus. Ancaman ini ditunjukkan oleh
munculnya kembali CyHV-3 dalam budaya dari garis sel CCB yang akut terkena CyHV-3 dan
kemudian pindah ke suhu non-permisif (30 C) selama 30 d (Disyon et al. 2007). Selanjutnya,
Bretzinger dkk. (1999) awalnya melaporkan bahwa koi dipertahankan pada 12 C CyHV-3 yang
terkena dampak (yaitu suhu non-permisif) adalah sub-klinis; Namun, mereka segera
menunjukkan tanda-tanda klinis dan meninggal saat suhu dinaikkan menjadi 21 C (suhu yaitu
permisif). Sub-klinis ikan yang diimunisasi untuk CyHV-3 oleh inkubasi pada 12 C (yaitu nonpermisif suhu) mengalami tingkat kematian 57%, dan naif (non-terinfeksi) ikan mengalami
100% Angka kematian ketika mereka cohabitated pada 20 C (St-Hilaire et al. 2005).
Selanjutnya, Ikan CyHV-3 yang terinfeksi dilakukan antibodi terdeteksi spesifik untuk CyHV-3
sampai 65 minggu pasca eksposur, dan dikembangkan CyHV-3 tanda-tanda penyakit dan
kematian bahkan ketika diinkubasi pada non suhu permisif (12 C) selama 25 minggu setelah
kembali ke suhu permisif (St- Hilaire et al. 2009). CyHV-3 tetap laten dalam sel darah putih dan
dapat dideteksi dengan real- time PCR dalam jaringan insang dan kotoran deposito berikut stres
panas (Bergmann et al. 2010b, Eide et al. 2011b). Secara kumulatif, laporan tersebut

menunjukkan potensi tinggi untuk CyHV-3 untuk bertahan di operator sub-klinis dan
menginfeksi ikan naif, dan imunisasi akan lebih menyebarkan virus.
Pembastaran
Strain negeri Israel ikan mas, yang dikenal sebagai Dor-70 dan Naice (dari bekas Yugoslavia),
yang blasteran dengan strain Republik asli dikenal sebagai Sasson menunjukkan lebih tinggi
signifikan tingkat kelangsungan hidup untuk KHVD (64 dan 69%) dibandingkan dengan orangorang dari strain orangtua Dor-70 dan Nasice (28 dan 9%, masing-masing;. Shapira et al 2005).
Percobaan serupa di Inggris menunjukkan bahwa persilangan ikan mas dengan 'liar' yang berasal
dari galur Amor atau Duna Sungai di Hungaria menghasilkan ikan mas yang lebih tahan terhadap
KHVD dari dijinakkan ikan mas (Dixon et al. 2009). Crossbreeds koi crucian ikan mas
Carassius Carassius dan koi ikan mas dianalisis untuk ketahanan terhadap KHVD. Kedua
crossbreeds menunjukkan patologis tanda-tanda KHVD; Namun, meskipun koi umum crucian
ikan mas hybrid menunjukkan sejenis tingkat kematian untuk ikan mas berkembang biak murni
setelah infeksi CyHV-3-I (91 dan 100%, masing-masing), hibrida antara koi dan ikan mas
menunjukkan penurunan mortalitas (35%; Bergmann et al. 2010c).
KESIMPULAN
CyHV-3 awalnya digambarkan oleh Hedrick et al. (2000) sebagai koi virus yang mempengaruhi
serius dan ikan mas di AS dan Israel. Saat ini, CyHV-3 merupakan ancaman epidemi serius
untuk koi dan ikan mas di seluruh dunia dalam hal pembibitan koi, dan untuk produksi ikan mas
di lingkungan alam dan dalam budidaya. CyHV-3 adalah anggota keluarga Alloherpesviridae,
dan merupakan virus DNA beruntai ganda yang terdiri dari genom 295 kb yang kode untuk 156
gen, yang semuanya telah dijelaskan dan dibuktikan ditranskripsikan (Ilouze et al. 2012a). Virus
dapat mereplikasi dalam jumlah baris sel termasuk CCB, KF-1, dan EPC. KHVD terbatas koi
dan ikan mas; Namun, ikan mas, biru kembali ide, Ikan sturgeon dan Rusia dan Atlantik dapat
bertindak sebagai operator untuk virus. Spesifik dan metode diagnostik divalidasi untuk deteksi
dan identifikasi, terutama untuk subklinis infeksi, yang diprediksi akan menjadi yang paling
penting alat untuk mencegah penyebaran CyHV-3 (Pearson 2004); Namun, virus telah menyebar
di Eropa, Asia, dan Amerika Utara. Sebuah penggunaan praktis untuk CyHV-3 telah dijelaskan di
Australia, di mana ikan mas telah diperkenalkan dan dianggap sebagai spesies hama yang barubaru ini telah dikaitkan dengan penurunan spesies ikan asli Australia. CyHV-3 dianggap sebagai
agen kontrol potensial untuk memberantas ikan mas di Australia (McColl et al. 2007).
Untungnya, CyHV-3 belum terdeteksi di India dengan menggunakan baik primer PCR yang
dikembangkan oleh Ronen et al. (2003) atau yang baru primer maju yang secara khusus
menargetkan protein kapsid utama CyHV-3 (Rathore et al. 2009). Namun, negara-negara
penghasil utama ikan mas-lain, seperti Cina, Indonesia, dan Jepang, telah melihat insiden
meningkat dari KHVD (Dong et al. 2011, Avarre et al. 2012, Minamoto dkk. 2012).
Beberapa langkah telah diambil dalam beberapa tahun terakhir untuk mengendalikan penyebaran
CyHV-3, seperti pengakuan ancaman dan pengembangan alat-alat yang cepat dan sensitif untuk
deteksi virus. Metode lain termasuk imunisasi ikan mas oleh infeksi 'wild type' menular
virus dan kemudian mentransfer ikan untuk suhu yang non-permisif untuk CyHV-3 replikasi atau
oleh infeksi dari ikan mas dengan virus dilemahkan. Pembiakan selektif program untuk
berkembang biak ikan mas KHVD tahan juga telah dimulai. Setiap upaya untuk mengandung
CyHV-3 harus mengakui bahwa korban CyHV-3 wabah dapat menjadi operator untuk virus (StHilaire et al. 2005, Uchii et al. 2009, Bergmann et al. 2010b, Eide et al. 2011b,

Ilouze dkk. 2012b).