ACCIN DE LA LIPASA PANCREATICA

INTRODUCCIN
La lipasa es una enzima de la clase de las hidrolasas, que se usa en el organismo para
disgregar los lpidos (grasas) de los alimentos de manera que se puedan absorber. Su
funcin principal es catalizar la hidrlisis de triacilglicerol a glicerol. Las lipasas se
encuentran en gran variedad de seres vivos, al igual que las esterasas hidrolizan grasas y
aceites en los procesos digestivos; tambin estn involucradas en el rompimiento y
movilizacin de los lpidos dentro de las clulas de un organismo y de la transferencia de
lpidos de un organismo a otro. Las lipasas, cuya denominacin bioqumica es acil-esterhidrolasas, son enzimas relativamente especficas en su actividad cataltica y algunas de
ellas se distinguen por su alta estereo especificidad. Poseen un sustrato especfico y tienen
una ptima actividad en un amplio rango de temperatura, esto las hace unos
biocatalizadores verstiles. Las lipasas son enzimas lipoliticas que hidrolizan las uniones
esteres de los triglicridos, estas enzimas se encuentran ampliamente distribuidas en
plantas, procariontes y eucariontes especialmente en animales, en vertebrados se encuentran
tres isoenzimas tejido especificas (pncreas, hgado, intestino) se a encontrado que estas
enzimas estn altamente asociadas a quilomicrones, y protenas de bajo peso molecular. En
estas protenas se encuentra una regin altamente conservada, la cual est alrededor de una
serina, la cual participa junto con residuos de histidina y cido asprtico en la estabilizacin
de la molcula esta misma regin se encuentra en otras lipasas procariotas como lecitincolesterol aciltransferasa la cual cataliza cidos grasos transferidos entre la fosfatidil colina
y el colesterol. La funcin principal de esta lipasa gstrica es ayudar a la absorcin de
grasas.
Hay que destacar que la produccin de jugo gstrico est controlada por dos mecanismos:

nervioso (sensaciones visuales, gustativas, etc.),hormonal

a travs de la hormona Gastrina

MARCO TEORICO
Las lipasas (Triacilglicerol), catalizar diversas reacciones orgnicas y son adecuadas
para la resolucin cintica de alcoholes, cidos carboxlicos y steres en agua como en
disolventes orgnicos. La lipasa es una enzima que se usa en el organismo para disgregar
las grasas de los alimentos de manera que se puedan absorber. Las lipasas se definen como
enzimas que hidrolizan preferentemente los steres de glicerol de los cidos grasos de
cadena larga en las uniones de carbono 1 y 3, produciendo 2 moles de cidos grasos y 1
mol de beta-mono-glicrido por mol de triglicrido. Tras isomerizacin, el tercer cido
graso puede ser desdoblado a una velocidad ms lenta.
La enzima lipasa en general se encuentra en la leche materna y segn estudios es
idntica a la enzima colesterol esterasa por lo que se supone que el origen es pancretico y
llega alas glndulas mamarias a travs de la circulacinsangunea. El jugo pancretico
contiene adems diversas enzimas para la digestin de lpidos, llamadas lipasas. Entre las
principales lipasas pancreticas destacan la triacilglicerol hidrolasa, el colesterol sterhidrolasa y fosfolipasa A2.
La lipasa pancretica es una enzima que se produce en el pncreas y se secreta en el
intestino delgado, donde ayuda a descomponer las grasas, lpidos (Fraccionando las
mismas (triglicridos) que comemos para convertirlas a componentes ms simples como
son los cidos grasos y el glicerol.
La lipasa pancretica, hidroliza a los TAG en posicin 1 y 3 formando
secuencialmente 1,2-diacilglicerol y 2-acilglicerol y las sales de Na+ y K+ de los cidos
grasos. Exhibe la tpica /- hidrolasa veces en su N-terminal de dominio cataltico. La
trada cataltica, compuesto de residuos Ser152, Asp 176, y His263, se pone de relieve en
magenta. La regin es la tapa de color naranja, el C-terminal de dominio es responsable de
la unin de colipasa y muestra una hoja de topologia -sheet.
El pncreas constituye el origen principal y primario de la lipasa srica. El pncreas
tambin segrega fosfolipasas que rompen los fosfolpidos y el colesterol esterasa que
degrada el colesterol esterificado a colesterol y cidos grasos. Todos estos compuestos
lipdicos e insolubles en agua, se emulsionan por las sales biliares para que puedan
procesarse. La lipasa pancretica humana es una glucoprotena, con un peso molecular de
45.000 Daltons.
Hay que destacar que la produccin de jugo gstrico est controlada por dos
mecanismos: (a) Nervioso y (b) hormonal, a travs de la hormona Gastrina. Las multiples
enfermedades; en donde, los niveles superiores a los normales pueden indicar: Colecistitis
(con afectos en el pncreas), cncer pancretico, pancreatitis, lcera u obstruccin

estomacal o Gastroenteritis viral. La lipasa activada, es responsable de un mayor o menor

grado de necrosis de grasa peri pancretica relacionada directamente con la extensin de la
lesin y probablemente relacionada tambin con la cantidad de grasa all presente; la mayor
severidad de la pancreatitis en los pacientes obesos se debe en parte a esta circunstancia ya
que en ellos la cantidad de grasas peri pancretica es mucho mayor y por tanto la
posibilidad de inflamacin peri pancretica, infecciones peri pancreticas y adems morbimortalidad secundaria a estas es tambin mayor.
Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas (la gran mayora biomolecular)
compuestas principalmente por carbono e hidrgeno y en menor medida oxgeno, aunque
tambin pueden contener fsforo, azufre y nitrgeno. Tienen como una caracterstica
principal el ser hidrfobas (insolubles en agua) y solubles en disolventes orgnicos como la
bencina, el benceno y el cloroformo. Los lpidos cumplen funciones diversas en los
organismos vivientes, entre ellas la de reserva energtica (como los triglicridos), la
estructural (fosfolpidos de las bicapas) y la reguladora (tal como las hormonas-esteroides).
En resumen, la mayora de los lpidos son hidrolizados; son digeridos en cidos
grasos y glicerol por la lipasa pancretica. La bilis est producida por las clulas del hgado
y contiene agua, cidos biliares, colesterol y lecitina, que son sustancias emulsionantes de
las grasas. Es decir que realizan la misma funcin que los detergentes, que dispersan las
grasas en el agua. As facilitan su posterior digestin qumica y as estos pueden ser
absorbidos como tal.

OBJETIVOS

Determinar los acido grasos liberados por accin de la pancreatina.

Observar la actividad de la enzima lipasa indirectamente por titulacin de los cidos
grasos liberados utilizando en la titulacin usando la base de hidrxido de sodio
(NaOH).

MATERIALES

4 tubos de ensaya
Gradilla
Peseta
Pipeta

SUSTANCIAS

Fenolftalena
Na oH
Pancretica (capsula de digestaze)
Buffer fosfato
Aceite neutra
Agua destilada

PROCEDIMIENTO

1) 20 ml de aceite vegetal deben ser neutralizado agregar fenolftalena ms Na oH

0,1N hasta color rojo grosella.

2) Preparar una solucin de lipasa C. pancreatina disolviendo una capsula de digestaze

u otro formal. En 20 ml de buffer fosfato de Ph.

3) Tener 4 tubos en los cuales 2 de ellos agregar el aceite neutralizado.

4) Hidrolisis de triglicridos.

Tubo
Tubo
1
2
Aceite neutro
Buffer fosfato pH
Agua destilada
Na oH
pancretica

Tubo
3
2
4
5
0.01

2
4

0.01
5

Tubo
4
2

5
0.01
5

M 37 por hora hervir TUBO 4

5) Los 4 tubos de ensayo ya finalizado.

2
4
5
0.01
5