Anda di halaman 1dari 5

Alat dan Metode

Formulasi yang diujikan

Produk uji: Rosuvastatin 40 tablet mg, dibuat dan didistribusikan oleh


Laboratorios Tecnoqumicas S.A. di Kolombia. Batch 3P3123.
Produk

referensi:

Crestor

Rosuvastatin

40

mg

tablet,

dibuat

dan

didistribusikan oleh AstraZeneca. KF476 batch.


Untuk menyatakan pharmaceutical ekuivalensi sebelum pengembangan studi in
vivo, sifat fisikokimia seperti penilaian bahan aktif dan keseragaman dosis yang
dievaluasi untuk test dan referensi produk dan hasilnya:

Subjek

Sebanyak 30 relawan yang sehat dari kedua jenis (15 wanita dan 15 laki-laki),
non-perokok, dalam berbagai usia rata-rata 32 tahun (19 - 49 tahun), berat ratarata 61 kg (48-84 kg), tinggi rata-rata 161 cm (143-176 cm) dan BMI rata-rata
23,2 kg / m2 (19,0-27,7 kg / m2)
Sebelum tahap klinis, semua relawan harus melalui uji medis dan tes
laboratorium untuk mengkonfirmasi kondisi kesehatan mereka. Wanita juga
diminta untuk melakukan tes kehamilan, sejarah alkoholisme, riwayat penyakit
yang membahayakan fungsi hati atau ginjal (diskrasia darah atau proteinuria
dianggap sebagai faktor pengecualian)

Pemeriksaan medis dan tes laboratorium klinis

Menghitung darah lengkap, bilirubin total, kreatinin, glukosa darah, protein total,
analisis urin lengkap, Elisa untuk HIV, antibodi terhadap hepatitis C dan B,
elektrokardiogram

dan

tes

kehamilan

pada

wanita

ditanya

seperti

tes

laboratorium klinis.

informasi persetujuan / kontra :

Protokol dan informasi persetujuan yang disahkan oleh Etika di Komite Penelitian
Klinis dari Universidad de la Sabana (CEIC), yang diatur oleh pedoman hukum
dan etika dari resolusi 008.430 dari tahun 1993 dan 002.378 2008 Kementerian
Perlindungan Sosial (Kolombia), dari Konferensi Dunia tentang Harmonisasi untuk
Good Clinical Practice untuk lembaga yang melakukan penelitian dengan
manusia

dan

prinsip-prinsip

Majelis

Kedokteran

Dunia

diterbitkan

dalam

Deklarasi Helsinki, lalu revisi pada tahun 2013.


perkuliahan dilakukan dengan relawan untuk menjelaskan studi secara rinci
tentang penekanan pada jenis obat yang digunakan, dosis, mungkin efek
samping obat, volume darah yang akan ditarik dalam setiap tahapan penelitian,
bahan yang digunakan sampel ini akan diperoleh, beban / resiko yang mereka
peroleh dan pemantauan pengalaman, mereka harus paham akan menghadapi
larangan atau pantangan secara umum, semua informasi yang mereka butuhkan
untuk memutuskan bahwa mereka akan mendaftar sebagai volunteer dalam
penelitian. Selanjutnya, masing-masing dari mereka menandatangani bentuk
informasi dan persetujuan.

Studi desain

Sebuah label terbuka, acak, dua periode, dua urutan, Crossover dengan periode
washout dari 7 hari desain yang digunakan. Tiga hari awalsebelum setiap

periode, relawan harus menjauhkan diri dari mengambil jenis obat, alkohol atau
makanan atau minuman yang berisi methylxanthines. Pembatasan ini tetap
dipertahankan selama semua waktu sampling dan untuk semua relawan secara
acak urutan pengobatan.

Pemberian obat
- Relawan di puasakan selama 10 jam sebelum pemberian obat, diberi 200
mL air dengan dosis 40 mg Rosuvastatin, berarti 1 tablet 40 mg untuk
-

setiap relawan.
Selanjutnya 2 jam kemudian, masing-masing relawan diberikan makanan
yang sudah menjadi standar. Relawan diberikan jadwal makan lengkap 3
kali sehari (sarapan, makan siang dan makan malam) dan 2 kali makanan
ringan (di pagi hari dan siang hari) dan diberikan selama periode

pemantauan.
Tim penguji terdiri atas dokter dan perawat yang berlisensi.
Sebelum relawan diberikan obat, segera ambil sampel darah terlebih
dahulu oleh venipuncture di lengan menggunakan alat Vacutainer, yang
disebut waktu sampel nol. Semua relawan menerima Uji produk atau
produk referensi secara random, dan 14 sampel darah vena diambil sesuai

dengan waktu berikut: 0; 2, 3, 3,5,4, 4,5, 5, 6, 7, 8, 10, 24, 36 dan 48 jam.


Sampel diberi label untuk identifikasi dan,
Selanjutnya disentrifugasi pada 3000 rpm selama 30 menit.
Plasma yang terbentuk dipindahkan ke dalam tabung yang sudah diberi

label dan dibekukan pada -20 C untuk di analisis.


Pemberian obat diulang setelah 7 hari dari waktu terakhir,setelah

menyelesaikan periode uji kedua.


Analisis validasi metode
Validasi ini dilakukan sesuai dengan

prosedur

validasi

metodologi

bioanalisa yang ditetapkan oleh QUASFAR M & F SA (PL-021) dan


memenuhi saran FDA untuk menunjukkan spesifisitas, linearitas, presisi,
dan akurasi yang cocok. metode bioanalisa digunakan untuk Rosuvastatin
dalam plasma adalah Ultra High Performance Liquid Chromatographytandem Mass Spectrometry (UHPLC-MS / MS) dengan ionisasi electrospray
-

(ESI) mode. Dengan cara sebagai berikut:


Plasma sampel uji dibuat asam dengan cara tambahkan metanol dan
asam

asetat

agar

membentuk

kompleks

ionik

butylammoniumhydroxide (0,5%).
Lakukan ekstraksi cair-cair menggunakan etil asetat.
Pemisahan analit diperoleh dengan menggunakan
Ditambah C18 RHHD 2,1 x 50 mm, 1,8 mm Kolom.

dengan

Zorbax

tetra-n-

Eclipse

Lakukan elusi isokratik dengan fase gerak yang terdiri oleh Buffer: MeOH

20:80 (Buffer: Asam format 2%). Total waktu berjalan adalah 1,5 menit.
Injeksikan sampel pada UHPLC sebanyak 10,0 mikroL.
Rosuvastatin terdeteksi dengan ESI + mode ionisasi, dengan pemantauan

482,2 --- 258,2 m / z transisi.


Analisis farmakokinetik
Analisis farmakokinetik dilakukan dengan menggunakan WinNonlin 5.3
software

(Pharsight

Corporation,

Cary

USA),

dengan

analisis

non-

kompartemen. Konsentrasi maksimum (Cmax) dan waktu untuk mencapai


(tmax) yang langsung diperoleh dari hasil konsentrasi plasma, FDA dan
European Medicines Agency (EMA)sebagai rekomendasi.AUCtotal dihitung
dengan jumlah AUC parsial: a) AUC0-t, antara waktu nol dan waktu terakhir
dengan konsentrasi yang terdeteksi, dihitung menggunakan cara trapesium,
dan menjamin perhitungan setidaknya terdapat AUC 80% dengan sampel
terakhir, b) auct- dihitung sebagai rasio C / K, menjadi C konsentrasi
terdeteksi terakhir dan K lereng kurva diperoleh dari titik-titik regresi linier
yang sesuai dengan fase eliminasi obat dari regresi linear logaritma
konsentrasi sebenarnya. laju eliminasi konstan (Ke), waktu paruh (t),
clearance (Cl) dan mean residence time (MRT), disesuaikan dengan
Bioavailabilitas, dihitung setelah melakukan analisis non-kompartemen. Hasil
variabel farmakokinetik dirangkum dalam Tabel 3, dengan Cmax, AUC0-t,
AUC0-, Tmax dan laju eliminasi konstan (Ke) nilai-nilai dari masing-masing
formulasi yang diujikan.

Analisis statistik
Analisis varians (ANOVA) digunakan untuk menentukan efek yang mungkin
bagi masing-masing variasi faktor untuk sequance, periode atau subjek.
Untuk ini, F-test digunakan dengan signifikansi statistik 5% ( = 0,05%).
Perbandingan statistik dari parameter farmakokinetik yang berubah dari
kedua formulasi dibuat menggunakan program statistik versi 5.3 WinNonlin.
Kriteria bioekivalensi berikut sudah ditetapkan dengan protokol: confidence
interval 90% dari Uji Cmax / Cmax obat Referensi dan Uji AUC terakhir obat

Referensi, rasio yang dapat diterima harus berada dalam kisaran 80-125%.
Selain itu, parameter AUC terakhir tidak harus kurang dari 80% dari total

parameter AUC.
Efek samping yang dilaporkan
Tidak ada efek samping yang

dicatat

berdasarkan

INVIMA

(otoritas

Kolombia). Panduan, pengadaan N (1067-1008), dengan adanya keadaan


berat atau ringan, atau tidak terkait dengan pengujian obat. Kasus ini hanya
dilaporkan dari hasil pengujian tanpa estimasi statistik, karena ukuran
sampel tidak memiliki kekuatan statistik yang cukup.