Pengukuran Hormon

Dr. ANIK WIDIJANTI, Sp.PK (K)

Laboratorium Patologi Klinik
FK.UNIBRAW - RS. Dr.Saiful anwar Malang

HORMON
- DILEPAS WAKTU DIBUTUHKAN
- MASUK ALIRAN DARAH
- JUMLAH SEDIKIT & TAK HABIS PAKAI
- BEKERJA JAUH dari TEMPAT PRODUKSINYA
- KADAR DI DALAM DARAH RENDAH
- BERFUNGSI SEBAGAI KATALISATOR
- DAPAT BERUPA PROTEIN, GLIKO PROTEIN, POLIPEPTIDA, ASAM AMINO, STEROID
- BEDA-NYA DARI ENSIM : ENSIM SELALU PROTEIN
- METODE PENGUKURAN : IMMUNOASSAY

PRINSIP DASAR
PENGUKURAN HORMON
* BIOLOGIK : BIO ASSAY, R.R.A.

* KIMIAWI : Kromatografi,
Ekstraksi, Elektroforesa, Purifikasi
* IMMUNO-ASSAY : Dengan / tanpa label
sering digabung dg kromatografi, turbidimetri,
nefelometri

BIOLOGIK : BIO ASSAY

RADIO RECEPTOR ASSAY
TIDAK PRAKTIS
SENSITIFITAS & SPESIFITAS RENDAH
RUMIT DAN MEMBUTUHKAN WAKTU
MAHAL
MEMERIKSA AKTIFITAS BIOLOGIK

IMMUNO ASSAY BERLABEL

1. RADIO IMMUNO ASSAY ( RIAs)
2. ENZYME IMMUNO ASSAY ( EIA )
HETEROGENUS EIA : ELISA, FIA, ICMA, MEIA
HOMOGENUS EIA

3. RADIO RECEPTOR ASSAY

( RRAs ) : BIOLOGIK / BIO-ASSAY

RRA

ENSIM
E.I.A

IMMUNO
ASSAY

RADIOAKTIF
R.I.A

ELISA
SANDWICH
IRMA

KOLORIMETER

L.I.A / ICMA
LUMINOMETER

KOMPETITIF /
KONVENSIONIL

F.I.A
FLUOROMETER

PRINSIP DASAR PEMERIKSAAN R.I.A :

Kompetitif antara antibodi terbatas dg antigen berlabel dan
antigen sampel
Pemisahan konyugat yang terikat dan bebas
Pehitungan dengan kurve standar

PERBEDAAN ANTARA R.I.A DAN E.I.A.

PERBEDAAN

R.I.A

E.I.A

LABEL

RADIOISOTOP

ENSIM

LIMBAH

BERBAHAYA

TIDAK

LISENSI / IJIN KHUSUS

DIBUTUHKAN

TIDAK DIBUTUHKAN

ALAT PEMBACA SIGNAL

LEBIH MAHAL

MURAH, LUAS TERSEDIA

UNTUK DAPAT SIGNAL

LEBIH MUDAH

LEBIH KOMPLEKS

DETEKSI SIGNAL

TANPA OPTIMASI

DENGAN OPTIMASI

ANTIBODI Yg DIGUNAKAN

POLIKLONAL
AFINITAS

MONOKLONAL
AFINITAS

HARGA REAGEN

LEBIH MURAH

LEBIH MAHAL

EXPIRED REAGEN

E.D PENDEK

E.D PANJANG

INTERFERENS

LEBIH SEDIKIT

ANALIT PLASMA LN

SENSITIF & SPESIFITAS

BAIK / TINGGI

BAIK / TINGGI

Faktor yang dapat mempengaruhi hasil pengukuran hormon :

METODE

SAMPEL

PILIHAN TEPAT
KONTROL KUALITAS
STANDART IDENTIK
NILAI RUJUKAN
NILAI CUT OFF
SENSITIF, SPESIFITAS
DETEKTABILITAS
KONDISI SESUAI

HETEREROGENITAS HORMON
PERLAKUAN PANTAS
VARIASI BIOLOGIK
BENTUK / ASAL BAHAN
UTUH / HASIL METABOLISME
PERSIAPAN PENDERITA

VALIDITAS PENGUKURAN
UJI IN VIVO
KLIRENS
METABOLISME

HASIL

UJI IN VITRO
INTERFERENS DIKENDALIKAN
SERING TAK SAMA IN VIVO

PTH

COOH-TER NH2-TER

MASA PAROH
DI SIRKULASI
ASAL HORMON

5 MENIT
SEDIKIT
DISEKRESI
KELENJAR

30 MENIT
80 90 %
DISEKRESI
METABOLITNYA

< PTH
SEKRESI ?
METABOLIT ?

FUNGSI BIOLOGIK

METAB KALSIUM

TAK AKTIF

FUNGSI ?
AKTIFITAS ?

IMMUNO
REAKTIFITAS

INTAK-PTH : AKTIF

FRAGMEN NON 1-84

20 % INTAK-PTH

GAGAL GINJAL

1.6 X NORMAL
[ 2 2.5 X ]

FRAGMEN NON 1-84

55 % INTAK-PTH
[ 40 60 % ]

BIO-ASSAY

RIA

JARANG
DIPAKAI RUTIN

DIPENGARUHI
METABOLIT

IRMA

ICMA

15 MENIT [ I-PTH ]
INTRA OPERASI
FRAGMEN 1- 84

7 MENIT INTRA
OPERASI
SUKSES 88 %

PEMERIKSAAN HCG
Bahan pemeriksaan : darah / urine ( kalau perlu
diencerkan)
Yang diperiksa sebaiknya sub unit
Cara pemeriksaan : Hemaglutinasi, EIA, RIA , dll
Cara pemeriksaan lama bio assay : galimanini

PEMERIKSAAN HCG
Jenis pemeriksaan HCG serum : > 40 uji, urine :
> 24 uji, home pregnancy test : > 23 uji
Untuk pilih metode : harus memperhatikan titer,
Dx klinik, standar/kalibrator, prinsip pemeriksaan,
bahan pemeriksaan, dll
Jika minta pemeriksaan cantumkan Dx klinik :
penting untuk pemilihan metode

VARIASI METODE
EIA, RIA, IHA dll

VARIASI PABRIK

VARIASI STANDAR WHO

St 1 : Prep kasar, 2 : IRP 75/735,
3 : IS 75/537 ,4 : IS 75/589

ISOFORM HCG
hCG hiperglikosilasi,
hCGb, hCGbcf
Nicked / non-nicked

SAMPEL : URINE /SERUM

Dx PENYAKIT
HAMIL / TROPOBLASTIK

PEMERIKSAAN
HCG

HATI-HATI
INTERPERTASI HASIL
MEMBANDINGKAN HASIL/
MENGIKUTI Tx

KESIMPULAN
Permintaan pengukuran hormon harus disertati
Dx klinis
Pemilihan metode pemeriksaan yang tepat
sangat mempengaruhi diagnosa
Untuk follow up Tx harus dengan metode
pemeriksaan yg sama
Terdapat berbagai variasi metode pengukuran
hormon masing-2 dg kelemahan & kelebihan

KESIMPULAN
Terdapat berbagai variasi bentuk hormon di
dalam tubuh
Terdapat berbagai variasi bahan pemeriksaan
hormon dari darah, urine, ludah, cairan tubuh
Harus berhati-hati dalam menginterpertasi hasil
pemeriksaan dari masing-2 metode pengukuran &
dari masing-2 hormon