UNIVERSIDAD NACIONAL DEL

ALTIPLANO PUNO
FACULTAD DE MEDICINA
VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CURSO: PATOLOGA CLNICA
ESTUDIANTE: LUZ ELIANA RAMOS
CANAZA
TEMA: ELISA

INTRODUCCION
La tcnica ELISA (del ingls EnzymeLinked ImmunoSorbent Assay: ensayo por
inmunoadsorcin ligadoa enzimas).

Es una tcnica de inmunoensayo en la

cual un antgeno inmovilizado se
detecta mediante un anticuerpo
enlazado a una enzima capaz de
generar un producto detectable:

como cambio de color La aparicin de

colorantes permite medir indirectamente
mediante espectrofotometra el antgeno
en la muestra.

La interaccin antgeno-anticuerpo en el
laboratorio puede ser utilizada para determinar
si un paciente tiene una infeccin.
INCONVENIENTES:
En primer lugar, un resultado positivo que confirma la
presencia de anticuerpos no significa necesariamente que el
paciente est enfermo. El cuerpo de una persona que ha
estado enferma y que ya se ha recuperado puede seguir
produciendo anticuerpos. Esto originara un falso positivo.
Hay personas que producen una baja cantidad de
anticuerpos, por lo que estos pueden pasar desapercibidos y
no ser medidos, dando lugar a un falso negativo

Tipos de ensayos ELISA

Se han desarrollado mltiples variantes de

ensayos ELISA que permiten la cuantificacin
de un antgeno en solucin, la deteccin de
un anticuerpo en una solucin.

ANALITO:
ES UN COMPONENTE
ELEMENTO
COMPUESTO O ION
DE INTERES
ANALITICO DE UNA
MUESTRA

REACTIVO
REACTIVO LIMITANTE:
LIMITANTE:
ES
ES EL
EL REACTIVO
REACTIVO QUE
QUE EN
EN UNA
UNA
REACCION
REACCION QUIMICA
QUIMICA
DETERMINADA,
DETERMINADA, DA
DA A
A CONOCER
CONOCER O
O
LIMITA,
LIMITA, LA
LA CANTIDAD
CANTIDAD DE
DE
PRODUCTO
PRODUCTO FORMADO
FORMADO

ISOTIPO : SON CADA UNO DE

LOS AC
IG M IG E IG G IG E IG A IG D

A PARTIR DEL MIN 1

FUNDAMENT
O

A PARTIR DEL MIN 2

A PARTIR DEL MIN 2

ELISAdirecto:
directo:
ELISA
Eneste
estese
sefija
fijael
elantgeno
antgenoal
alsoporte
soporte
En
selava
lavapara
paraeliminar
eliminarlos
losno
nofijados
fijados
se
luego
se
adicionan
los
anticuerpos
marcados
luego se adicionan los anticuerpos marcados
conla
laenzima
enzimapara
paraque
quereaccin
reaccincon
conel
el
con
antgeno
antgeno
selava
lavapara
paraeliminar
eliminaranticuerpos
anticuerposque
queno
no
se
reaccionaronyyse
seagrega
agregaun
unsustrato
sustrato
reaccionaron
especficopara
parala
laenzima,
enzima,al
alfinal
finalse
seobserva
observa
especfico
lacoloracin.
coloracin.
la

ELISA directo

Ventajas
1.Simplicidad
Reactivos empleados en pequeos volmenes.
La separacin de reactante libres y ligados es hecha por un
simple procedimiento de lavado
La adsorcin pasiva de protenas al plstico es fcil
El equipo especializado es de fcil disponibilidad
2.Lectura
El producto final coloreado puede ser leido a simple vista para
evaluar como ha sido trabajado el test (evitando esperar los
resultados como en el RIA)
Espectrofotmetros multicanal cuantifican los resultados
3.Rapidez
Los test pueden desarrollarse en pocas horas
La lectura se da por espectofotomtria.

GRACIAS.