Manual de Laboratorio Clinico. MLFQM

MANUAL DE LABORATORIO CLINICO
LICDA. MARIA LOURDES FLORES QUIMICA BIOLOGA
MANUAL DE LABORATORIO
CLINICO
DEDICADO A
DIOS
Que cada da me daba fortaleza para seguir adelante cuando mi
cuerpo estaba cansado, siempre estuvo presente en los buenos y malos
momentos. Seor te quiero pedir que sigas bendiciendo mi vida y
llenndome de frutos producto de mis esfuerzos que en el futuro tendrn su
recompenza.
Solo tu puedes bendecir el camino que he de recorrer en la vida,
siendo tu el que me fortalece da a dia.
Porque sin ti yo no podria estar aqu gracias por darme un amanecer
y un anochecer mas. Gracias.
DEDICADO A
MIS PADRES
Que con gran esfuerzo y esmero me apoyaron emosionalmente asi
como economicamente, que gracias a sus consejos me guiaron por el buen
camino de la vida y que ahora tengo la oportunidad de demostrarlo como un
Tcnico en Laboratorio Clnico.
Y que han puesto la confianza en m para que yo salga adelante y
sea un orgullo para ellos.
DEDICADO A
PERSONAL DOCENTE
Por impartir sus conocimientos todos los dias y dedicar su tiempo en la
enseanza-aprendizaje, ayudarnos en las diferentes problematicas que
cuando no entendiamos, dedicaban su tiempo libre en ensearnos para que
aprendieramos como los demas.
UNIDAD ANATOMA Y FISIOLOGA
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DEDICADO A
A NUESTROS COMPAEROS
Que nos dieron su apoyo incondicionalmente para salir adelante, que
siendo completos extraos nos pudimos familiarizar unos con otros como
una gran familia.
Y a todos los amigos de otros Cursos que nos dedicaron su apoyo y
motivacin para seguir.

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INTRODUCCION:
El presente manual refiere las Diferentes Tcnicas de Laboratorio

Clnico, indispensables que debemos conocer para el buen desempeo
laboral y de conocimiento acerca del trabajo que se realiza en cada
Laboratorio Clinico.
El contenido acadmico de este manual sigue siendo experimental
por la naturaleza misma de la ciencia siempre cambiante, se espera que al
aplicarlo se obtengan como hasta ahora los mejores resultados en el
proceso de realizacin de las diferentes Tcnicas de Laboratorio Clnico a
realizar.
Como contenido de Introductoria, en el presente manual contiene
teoria acerca de los diferentes tipos de Cristaleria, Equipo, Instrumentos y
otros accesorios que se utilizan en un Laboratorio Clinico cada uno con su
nombre y funcion respectivo.
En el Laboratorio Clnico existen 8 reas todas importantes como lo
son: rea de Flebotomia, de Hematologa, de Urologa, de Coprologa,
Serologa e Inmunologa, Qumica Clnica, Banco de Sangre, Microbiologa ,
en cada rea se realizan diferentes Tcnicas con las cuales podemos
diagnosticar diferentes patologs que puedan estar afectando la salud de
los pacientes. Por ejemplo, en el rea de Flebotomia es muy importante
que se encuentre aislada de las dems areas del Laboratorio Clnico, ya
que en sta rea se tiene contacto principalmente con el paciente y es
necesario que el paciente se encuentre alejado de todas las reas del
Laboratorio Clinico para eviatar que se contamine de algun Virus Bacteria
que pueda estar en el ambiente.
En el rea de Hematologa podemos conocer el nivel de
Hemoglobina que tiene un paciente, conocer su nivel de Hematocrito,
Velocidad de Sedimentacin entre otros anlisis que se realizan
especialmente para verificar si el paciente esta padeciendo algun tipo de
Anemia si esta incubando algun tipo de infeccin.
Entre otra de las reas encontramos el rea de Urologa, que en esta
rea es muy importante para diagnosticar algun tipo de Sepsis Urinaria. En
el rea de Coprologa es muy importante ya que en esta rea se
diagnostican los diferentes tipos de Parsitos encontrados en Heces, asi
como tambien otros hallazgos importantes que se encuentren.

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En el rea de Serologa e Inmunologa es muy importante, ya que en

esta rea se pueden diagnosticar patologias como el VDRL, Diferentes tipos
de Hepatitis, pruebas de HCG, Dengue, Widal, PCR, FR, ASO, VIH, etc, es
muy importante resaltar que si las pruebas de VIH salen positivas, el
resultado debera ser enviado a algun Hospital Central donde utilicen el
mtodo confirmatorio de Werterblot para confirmar algun posible resultado
positivo de VIH.
En el
rea de Qumica Clnica encontraremos diferentes
procedimientos que se pueden realizar tanto como en Qumica Humeda y
Qumica Seca, en los dos metodos podemos realizar diferentes tipos de
examenes como Glucosa pre y post prandial, BUN, Acido Urico, Creatinina,
pruebas de Electrolitos como Potasio, Sodio, Calcio, Magnesio, Fsforo, y
otras pruebas que se realizan para diagnosticar o llevar el control de algn
tipo de patologia del paciente.
En el rea de Banco de Sangre es como todas, un rea muy
importante en el Laboratorio Clinico, sta rea deber estar hubicada en un
lugar alejado de las otras reas del Laboratorio Clnico, ya que se trabaja
directamente con Sangre de los pacientes, en sta rea, se divide en tres:
un rea de Entrevista
(evaluacion del paciente), Extraccin y
Almacenamiento de sangre, donde el paciente ser sometido a una serie de
anlisis para saber si esta apto para donar sangre, luego se debera de
pasar al paciente al Area de Extraccin, donde deber estar el equipo
necesario para la extraccion adecuada de la sangre, y por ltimo, se debera
trasladar las bolsas de sangre al rea de Almacenamiento, donde debera
estar en refrigeracion durante 18 a 35 dias bien rotuladas con el tipo de
sangre, fecha de extraccion, fecha de vencimiento, entre otros datos. En
esta rea es indispensable que se encuentre bien abastecida por alguna
emergencia que pueda ocurrir en el Hospital y que se necesite algun tipo de
Sangre de Hemergencia para poder salvar la vida de los pacientes que lo
necesiten.
En el rea de Microbiologa es bien importante, ya que se trabaja con
diferentes tipos de Bacterias que estan produciendo algun tipo de patologa
en el paciente. En esta rea es muy importante la manipulacin de las
muestras, ya que con algun error que cometamos podemos contaminar la
muestra y podemos dar algun falso resultado.
Es indispensable que en cada una de las reas en las que
analicemos las muestras de los pacientes mantengamos un estricto Control
de Calidad para dar resultados precisos y tambien es muy importante utilizar
en todas las reas el Equipo de Bioseguridad ya que en algun mal
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procedimiento nos podemos contaminar con alguna muestra podemos

contaminar algun paciente al momento de la extraccin, tambin es
importante tomar las medidas de Bioseguridad en todo momento, ya que
con esto podemos cuidar de nuestras vidas y de la vida de las demas
personas.
Esperamos que en el presente manual pueda encontrar informacin
necesaria para consulta prctica de las mismas que le ayudaran a realizar
Tecnicas mas precisas para dar o confirmar los resultados de los anlisis
realizados en un Laboratorio Clnico.

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OBJETIVOS DEL TECNICO EN LABORATORIO CLINICO:

Servir de ayuda a las personas con escasos recursos en diagnosticar
patologias leves previniendo complicaciones graves de la salud de
las mismas.
Contribuir con la sociedad en controlar el estado de salud de las
personas a traves del personal calificado.
Promover campaas de salubridad directamente a la comunidad, con
intensiones de prevencin y propagacin de enfermedades de
transmisin sexual.
Promover campaas de salubridad directamente a la comunidad, con
intensiones de prevensin y propagacin de enfermedades de
transmisin sexual.
Motivar a la juventud actual en integrar a la familia salubrista dndole
nfasis a la carrera de Tcnicos en Laboratorio Clnico.
Inculcar los valores con responsabilidad, sensillez, normas de
cortesia para que pueda alcanzar una calidez humana a nivel de un
Tcnico en Laboratorio Clnico.
Investigar patologas basandonos en hechos veridicos para emitir un
diagnostico certero para su previo tratamiento mdico.
Alcanzar el dominio total de la vida microbiana para el diagnstico de
enfermedades que afecten al ser humano tanto interna como
extgerna.

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MANUAL DE
LABORATORIO CLINICO
UNIDAD
INTRODUCTORIA

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IMPORTANCIA DE LA CARRERA DE TCNICO EN LABORATORIO

CLNICO.
El laboratorio ocupa un lugar muy importante en las ciencias mdicas; es la
encrucijada donde confluyen todas las especialidades mdicas, lo que ha
llevado a algunos autores a decir que estamos en la edad de la medicina de
laboratorio, ya que este extiende la capacidad de la observacin mdica a
magnitudes que estn fuera del alcance de los mtodos clnicos de
exploracin que eran los predominantes antes del desarrollo de esta
especialidad.
Las principales disciplinas que en un conjunto conforman el laboratorio son:
Qumica, Fsica, Matemticas, Estadsticas, Hematologa, Qumica Clnica,
Inmunologa, Parasitologa, etc. Por ello es fcil darse cuenta de la
necesidad de la formacin integral del tcnico de laboratorio, ya que este
debe tener por lo menos un dominio mnimo de cada una de las disciplinas
mencionadas y profundizar sus conocimientos en la rama o ramas en que
vaya a prestar sus servicios.
En nuestro pas, durante las ltimas dos dcadas, el laboratorio ha tenido
un desarrollo marcado en dos direcciones, lo cual ha sido posible por el
triunfo de nuestra
Revolucin, ya que en la poca capitalista existan muy pocos y mal
equipados laboratorios y, adems, no se formaba en forma sistemtica y
oficial personal tcnico para estos.
ELEMENTOS GENERALES DEL LABORATORIO:
Todos los laboratorios, independientemente del lugar que ocupen en la
organizacin del centro asistencial al que pertenezcan, tienen una estructura
organizativa y administrativa que es, en lneas generales, igual para todos,
con las diferencias obvias dadas por el grado de complejidad y cantidad del
servicio que presten y la cantidad y nivel tcnico del personal que en ellos
trabaje.
En todos existe un jefe del servicio o seccin, cargo que es ocupado en los
hospitales por un mdico especialista y, en los policlnicos, generalmente por
un tcnico de laboratorio especializado o no. En los hospitales, adems del jefe
del servicio, existe un jefe tcnico y jefes de seccin, estos ltimos de acuerdo
con el nmero de secciones que tenga el laboratorio. En los hospitales estos
cargos son generalmente ocupados por mdicos especialistas, licenciados en
bioqumica o tcnicos especializados. Esta estructura organizativa es
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aplicable, en general, a los laboratorios clnicos y microbiolgicos, a los

servicios de transfusiones y a los bancos de sangre, con la salvedad de que
existen laboratorios microbiolgicos y bancos de sangre que son unidades
independientes y, por ello, tienen otra estructura administrativa aunque casi
siempre a nivel de sus laboratorios siguen la misma organizacin descrita.
En los policlnicos las secciones que existen generalmente son: hematologa,
qumica clnica, parasitologa, orina y bacteriologa, aunque algunas de ellas
pueden estar fundidas en una sola; adems, de acuerdo con el volumen de
trabajo un tcnico puede cubrir ms de una seccin.
En los hospitales, las secciones del laboratorio clnico varan de acuerdo con el
nivel que la unidad ocupe en la organizacin y con la mayor o menor
especializacin de dicha unidad, pero de forma general las secciones del
laboratorio son: hematologa bsica y especial, qumica clnica bsica y
especial, orina-nefrologa, parasitologa, investigaciones de urgencia y, en
algunos casos (hospitales provinciales y clnico-quirrgicos), endocrinologa y
estudio de lpidos. La seccin de gastroenterologa siempre est bajo la
atencin directa de un gastroenterlogo.
Los laboratorios de microbiologa tambin estn divididos en secciones de
acuerdo con el nivel del servicio que prestan; estas son generalmente:
miscelneas, coprocultivo, tuberculosis y urocultivo. Estos laboratorios pueden
tener secciones muy especializadas y tambin secciones de microbiologa
sanitaria.
Los servicios de transfusiones en general poseen una sola seccin que es la de
transfusiones. En algunos casos pueden tener una seccin de
inmunohematologa.
Los bancos de sangre constan de varias secciones que son, en la mayora
de los casos: recepcin e inscripcin, examen mdico, extracciones de
sangre,
laboratorio
de
inmunohematologa,
desplasmatizacin,
conservacin y despacho de sangre.
Adems, en los bancos provinciales existen secciones de preparacin de
derivados de la sangre y de control de calidad.

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PRINCIPIOS BSICOS DEL TRABAJO EN EL LABORATORIO:

Vestuario adecuado:
Debe usarse la bata sanitaria, ya que en el laboratorio con frecuencia se
derraman lquidos y saltan gotas que pueden contaminar o daar las ropas.
Ubicacin del analista:
El analista debe situarse frente a la mesa de trabajo y adoptar una posicin
que resulte cmoda al tipo de trabajo a realizar y a la altura de la mesa. Las
mesas altas son propias para el trabajo de pie y las bajas para el trabajo
sentado. La posicin sentada resta movilidad al analista y solo se justifica
cuando la operacin a realizar lo permite.
Disposicin de los elementos:
Antes de situarse a ejecutar el trabajo, el analista deber escoger todos los
utensilios que requerir para trabajar (gradillas, tubos reactivos, pipetas, etc.) y
disponerlos ordenadamente al alcance de sus manos, de modo que una vez
comenzado este no lo interrumpa.
Resulta esencial para un buen trabajo utilizar cristalera limpia. Se debe verificar
la limpieza de la cristalera e instrumentos antes de comenzar el trabajo.
Certeza de los reactivos:
Los reactivos a utilizar deben ser seleccionados antes de comenzar el trabajo y
dispuestos en orden de utilizacin. Debe leerse cuidadosamente la etiqueta de
cada frasco para no cometer errores en la seleccin de los reactivos. Tambin
se colocar cada tapa delante del correspondiente frasco para evitar el cambio
de tapas.
Ordenamiento de las muestras:
Las muestras que se empleen deben ser debidamente identificadas, ordenadas
y dispuestas de acuerdo con el trabajo a realizar. Hay que evitar, por todos los
medios, errores de identificacin o de seleccin de la muestra.
Concentracin en el trabajo:
El trabajo de laboratorio requiere meticulosidad y precisin, y ello solo se
alcanza prestando la debida atencin a lo que hacemos y no respondiendo a
llamada alguna hasta tanto no se haya finalizado la operacin en curso. Debe
tomarse en cuenta y recordarse la etapa en que se encuentre el trabajo para
centrar transitoriamente la atencin en otros asuntos.

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Fuentes potenciales de accidentes y medidas para evitarlos resulta

imprescindible, por parte de todo el personal del laboratorio, conocer las
fuentes posibles de accidentes y elementos peligrosos, as como las medidas
convenientes para evitarlos.
1. Fuego y explosivos por solventes inflamables.
a) Tratar los solventes inflamables con sumo cuidado, almacenarlos y
manipularlos lejos de fuentes de calor.
b) Realizar la evaporacin de solventes tales como alcohol, acetona,
ter, etc., en bao de agua o en un plato trmico y nunca sobre la
llama directa.
2. Reactivos venenosos, corrosivos y custicos.
a) Cuando ha ocurrido derramamiento de alguno de los reactivos
(venenos, cidos y lcalis) sobre la mesa, limpiar esta enseguida
y lavar el rea cuidadosamente con agua.
b) Como medida preventiva contra la inhalacin de gases irritantes o
txicos, jams pretender identificar reactivo alguno por el olor.
c) No pipetear con la boca cidos puros ni soluciones concentradas
en lcalis.
3. Heridas por cristales rotos.
a) Eliminar inmediatamente los restos de cristal dispersos en caso
de roturas.
b) No trabajar con cristalera rota, ya que durante su limpieza
pueden causarse heridas.
c) Evitar los procedimientos inadecuados para destapar frascos con
tapa firmemente adherida y destrabar jeringuillas trabadas.
4. Contaminacin por muestras biolgicas.
a) Aplicar estrictamente las normas de trabajo y limpieza del
material.
b) Mantener las uas de las manos cortas y limpias, y lavarse las
manos con agua y jabn frecuentemente.

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5. Quemaduras y shock elctrico.

a) Hacer el calentamiento de tubos de ensayo que contengan
lquidos, a la llama directa calentando la zona media del tubo y
agitndolo cuidadosamente.
b) Dirigir la boca del tubo en sentido contrario al operador.
c) Encender siempre el fsforo antes de abrir la llave de los
quemadores.
d) No situar los equipos elctricos prximos a las pilas de agua, para
evitar salpicaduras que originen cortocircuitos elctricos.
e) Velar por el buen estado de los conductores e interruptores
elctricos y no manipularlos con las manos mojadas.
OBJETIVOS Y FUNCIONES DEL LABORATORIO CLNICO:
El laboratorio clnico es una especialidad mdica bsica, perteneciente al grupo
de las que reciben la denominacin comn de "Medios de Diagnstico" y, como
todas ellas, resulta absolutamente indispensable en la actualidad. En l confluyen
diferentes disciplinas mdicas y no mdicas que, en su conjunto, lo conforman
como una ciencia con caractersticas propias.
Los exmenes de laboratorio tienen como objetivos, en lo que se refiere a la
asistencia mdica:
Ayudar a confirmar o descartar un diagnstico,
Establecer un pronstico.
Controlar la evolucin de la enfermedad y los resultados del tratamiento.
Detectar complicaciones.
Colaborar con estudios epidemiolgicos y de grupos de riesgo.
Constituyen parte esencial de protocolos de investigacin cientfica y de
ensayos clnicos para la introduccin de nuevos medicamentos.
El valor diagnstico de la mayora de las investigaciones de laboratorio est
limitado por el hecho de que, aunque ellos reflejan cambios en la funcin de
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los rganos y sistemas, la mayora de estos cambios son inespecficos; por lo

tanto, si bien detectan la presencia de una alteracin patolgica, a menudo no
identifican la enfermedad concreta. Es decir, dirigen la atencin del mdico
hacia un diagnstico particular (incluso en el caso de que los resultados
obtenidos sean considerados normales), o permiten excluirlo con una
razonable confiabilidad, pero no pueden emplearse como sustitutos del
interrogatorio ni del examen fsico, sino como complemento de estos. La
interpretacin de los resultados de los anlisis de laboratorio depende sobre
todo de su sensibilidad y su especificidad nosogrficas y de su valor predicativo.
Esto codujo a una demanda rpidamente creciente de pruebas para el
diagnstico, que tubo que ser enfrentada por los profesionales del laboratorio;
estos respondieron a su vez con una oferta que, con frecuencia supero a la
demanda y al mismo tiempo, la hizo aumentar, originando una espiral viciosa con
la cual se cre una situacin muy compleja, que puede reunirse en pocas
palabras de la manera siguiente:
Incremento considerable en la variedad de anlisis que se realiza en los
laboratorios, algunos de los cuales duplican la informacin brindada por
otros, sin aportar nuevos datos.
Incremento rpidamente progresivo de la cantidad de investigaciones que
se indican, motivada por la masifcacin de los servicios de salud, el
mercantilismo de la medicina, estudios de poblaciones (screening) y las
exigencias de los sistemas de seguros mdicos en muchos pases,
entre otras causas. Este aumento, en varios pases de nuestro
continente, es del orden de aproximadamente 15 % en el ltimo
quinquenio del siglo XX.
El propio progreso cientfico tcnico (el desarrollo de nuevas tcnicas de
diagnstico rpido y la difusin y perfeccionamiento de los equipos
automatizados, por ejemplo) ha estimulado el desarrollo de una
mentalidad que lleva a los profesionales de la medicina a realizar
determinadas investigaciones y procedimientos, no porque sean
necesarias, sino porque son posibles.
El trabajo del laboratorio se ha hecho en pocos aos tan complejo y la
cantidad de informacin que brinda es tan considerable, que muchos
profesionales no han tenido tiempo de adaptarse a esos cambios y de
asimilar esa informacin.
Ha tenido lugar una transformacin epistemolgica en la enseanza de la
medicina en las ltimas dcadas: de una parte, los programas no
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enfatizan el uso correcto de los medios de diagnstico ni estimulan, en los

futuros mdicos, el desarrollo de una mentalidad que permita obtener los
mximos beneficios para los enfermos con el menor costo posible para la
sociedad; de otra, el propio personal de los laboratorios suele estar mal
preparado en lo referente a la gestin de calidad que le permita lograr
resultados de excelencia. Adems, a menudo este personal carece de una
formacin que le permita entablar un dilogo efectivo con los mdicos de
asistencia.
Existe un reclamo creciente de que los laboratorios clnicos utilicen sus
recursos de manera efectiva y se desempeen con calidad
ejemplar, al tiempo que se hace evidente la necesidad de un uso
racional de este importante recurso.
Es de vital importancia promover el uso racional del laboratorio; ello
implica, entre otros factores:
Precisar, de manera adecuada, las limitaciones y la utilidad
clnica de cada una de las investigaciones que se realizan en el
laboratorio.
Promover la eliminacin de las pruebas que duplican informacin.
Fijar plazos lgicos de realizacin de exmenes evolutivos.
Elaborar, conjuntamente con los mdicos de asistencia,
protocolos apropiados, tanto para la prctica diaria como para la
investigacin y definir las circunstancias en que sern empleados.
Hacer nfasis en los estudios de cost / beneficio y costo /
efectividad y trazar una adecuada poltica orientada a la
disminucin de los costos sin perjudicar por ello la atencin al
paciente.
Reducir la solicitud de urgencias al mnimo indispensable; el
abuso de este tipo de indicacin, adems de retardar los
resultados de las verdaderas urgencias, resulta perjudicial desde
el punto de vista econmico.
Prestar especial atencin a las etapas pre analtica y pos analtica.
Identificar los problemas que entorpecen el flujo del trabajo del
laboratorio y establecer medidas para su solucin.
Evaluar crticamente las necesidades actuales y las perspectivas
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de desarrollo del laboratorio, antes de introducir nuevos

exmenes y nuevas tecnologas.
Educar al personal para los cambios que deben introducirse.
PRINCIPIOS BSICOS DEL TRABAJO DEL LABORATORIO:
Normas Generales de Trabajo en el Laboratorio:
Para realizar un efectivo trabajo de cualquier ndole en el laboratorio, se
requiere cumplir una serie de principios bsicos con el objetivo de asegurar
la calidad del trabajo, economizar tiempo y esfuerzo y proteger al analista de
posibles accidentes. Sobre este ltimo tema se trata ms extensamente en
otra seccin de este folleto, por lo que nos referiremos muy someramente a
los dos primeros:
Antes de comenzar a ejecutar el trabajo, el tcnico debe escoger todos los
elementos que requerir para el mismo: gradillas, tubos, reactivos,
pipetas, etc. Y disponerlos ordenadamente al alcance de la mano. Se debe
verificar la limpieza de la cristalera.
Los reactivos deben ser seleccionados antes de comenzar el trabajo y
dispuestos en el orden de su utilizacin; algunos reactivos que se
conservan en fro deben alcanzar la temperatura del ambiente antes de
ser utilizados. Todos deben estar debidamente identificados para evitar
confusiones. Debe evitarse introducir pipetas en los frascos donde se
conservan los reactivos; es aconsejable separar en recipientes ms
pequeos la cantidad que se va a usar en el trabajo del da y desechar el
sobrante.
La confeccin del protocolo de trabajo es una tarea vital, que requiere la
mayor atencin por parte del analista, para evitar confusiones u
omisiones, que implican repeticin de la toma de muestra, cuando son
detectadas, pero tambin pueden dar lugar a errores groseros. En los
laboratorios donde se ha introducido la computacin, el protocolo es
confeccionado por el ordenador, pero siempre debe ser comprobado
cuidadosamente.
Las muestras que van a ser procesadas deben ser debidamente
identificadas, ordenadas y dispuestas, de acuerdo con el trabajo que se
va a realizar, de modo de evitar errores de identificacin o de seleccin de
la muestra.

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EXMENES QUE SE REALIZAN EN EL LABORATORIO CLNICO:

En la actualidad, la variedad de los exmenes que realiza el laboratorio es
considerable; sin embargo, est claro que no todos los laboratorios realizan
toda esta amplia gama de investigaciones, como tampoco todas las
instituciones mdicas de un pas ofertan todos los servicios, incluidos los ms
especializados. Cada pas establece, de acuerdo con su propia poltica de
salud, las investigaciones que se realizan en los laboratorios de la red de
salud pblica, en los distintos niveles de asistencia (primario, secundario y
terciario). En principio, antes de incorporar la determinacin de algn nuevo
anlisis a la batera de investigaciones que se realizan en un laboratorio, es
importante conocer las caractersticas de los mtodos, las limitaciones de los
mismos, las posibles interferencias, la preparacin del paciente y, por ltimo,
realizar los clculos de costo / beneficio de su introduccin.
De manera muy general, los exmenes de laboratorio se pueden agrupar en:
a) Qumica sangunea: incluye pruebas para el estudio del metabolismo
de los carbohidratos, las protenas, los lpidos, el agua y los electrlitos
y el equilibrio cido-base; enzimas sricas, productos intermedios o
finales del metabolismo, oligoelementos, hormonas y niveles de
medicamentos en sangre, entre otros.
b) Hematologa: incluye un grupo de exmenes denominados "bsicos" o
"habituales" (hemoglobina, hematocrito, recuentos de clulas de la
sangre, examen de la extensin coloreada de sangre perifrica, clculo
de las constantes corpusculares, velocidad de sedimentacin globular)
y pruebas ms especializadas, como los estudios de anemias
hemolticas y nutricionales, el examen de las extensiones coloreadas
de mdula sea (medulograma), las coloraciones cito qumicas y
algunos estudios realizados con empleo de radionclidos, sondas
moleculares o microscopia electrnica.
c) Estudios de la hemostasia: agrupan a todas las pruebas que permiten
explorar los mecanismos de la coagulacin sangunea, la fibrinlisis y
la actividad de los trombocitos.
d) Inmunologa: incluye una amplia gama de pruebas para el estudio de
la auto inmunidad, las inhumo deficiencias, el tipaje para transplantes y
otras.
e) Examen qumico y citolgico de orina, lquido cefalo-raqudeo,
amnitico o sinovial; semen, saliva, exudados y trasudados.
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f) Biologa molecular: de introduccin relativamente reciente en el

laboratorio clnico, se emplean las sondas de ADN para el estudio de
enfermedades infecciosas, neoplsicas y de origen gentico, as
como para sustituir cada vez ms los mtodos clsicos de estudio del
sistema inmunolgico. El ADN disponible para una reaccin, es
ampliado por medio de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
La introduccin de esta tecnologa permite lograr diagnsticos ms
rpidos y especficos y abre posibilidades insospechadas unos pocos
aos atrs.
RECURSOS HUMANOS DEL LABORATORIO CLNICO:
El recurso ms importante de cualquier actividad humana, es el propio
hombre. El laboratorio clnico no constituye una excepcin. La composicin, el
grado de instruccin y las responsabilidades del personal de los laboratorios,
vara de un pas a otro e, incluso, dentro de un mismo pas. Hace algunos aos,
la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) intent introducir un orden en la
denominacin que reciben los miembros del "staff' de un laboratorio, de
acuerdo con su categora y atribuciones. Aunque no ha sido universalmente
aceptado, es una gua til para clasificar el personal:
Para el diseo de un laboratorio deben tenerse en cuenta los siguientes
factores:
Necesidades dependientes del flujo de trabajo (cantidad y variedad de
anlisis electivos o de urgencia, cantidad de personal, flujo de muestras,
etc.).
Necesidades dependientes del tipo y cantidad de equipos,
automatizacin, informatizacin, estaciones de trabajo (work-stations).
Necesidades de locales auxiliares, de tipo administrativo (oficinas),
docente (aulas), limpieza y esterilizacin de material, almacenamiento
(incluye refrigeracin), sala de espera, toma de muestras, facilidades
para el personal (servicios sanitarios, taquillas, duchas, cuarto de
descanso para el personal de guardia).
Necesidad de reas con caractersticas especiales (rea estril, rea
para trabajo con istopos radiactivos).
De lo anteriormente expuesto, se deduce que no existe un proyecto nico
de diseo de un laboratorio, que pueda ser aplicado de manera
universal. En todos los casos, el diseo debe ser realizado por el
arquitecto responsable, con la asesora del especialista de laboratorio
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clnico, que presentar su propuesta al inversionista principal. El proyecto

debe incluir:
Planificacin del rea total, con espacio suficiente (incluida la
perspectiva de crecimiento futuro).
Secciones de trabajo. En la actualidad, predomina el concepto de
mdulos mviles, que permiten flexibilidad para adaptarse a cambios
tecnolgicos o del flujo de trabajo.
Paredes, pisos y techos: de color claro y sin brillo, cubiertos de
material que permita fcil limpieza (en el caso de los pisos, el linleo
es una buena opcin). En muchas ocasiones es importante la
climatizacin del local, as como el aislamiento acstico. La iluminacin
juega un papel primordial.
Instalaciones auxiliares y reas especiales, mencionadas
anteriormente. Debe procurarse que estas ltimas se ubiquen al final
del laboratorio, para evitar el trnsito por las mismas de personal ajeno
a las funciones que se realizan en ellas.
Las necesidades de electricidad, agua, gases o vaco, as como de
servicios telefnicos y terminales de computadoras, deben ser previstas
tambin.
Campanas de extraccin, para el manejo de sustancias que liberan
gases txicos.
La disposicin de desechos debe estar prevista dentro de las
caractersticas constructivas. Sobre estos dos ltimos temas, se trata
ms ampliamente en el captulo sobre Bioseguridad.
FASES DEL TRABAJO DEL LABORATORIO CLNICO:
Toda la actividad que realiza el laboratorio se divide en tres fases bien
delimitadas, pero estrechamente relacionadas entre s; a saber:
Fase pre analtica: abarca el periodo comprendido desde que el
mdico de asistencia llena la solicitud de anlisis, hasta que la
muestra llega al puesto de trabajo donde va a ser analizada. Incluye la
preparacin del paciente, la toma o recoleccin de las muestras, su
procesamiento y conservacin, adems de los mecanismos de control
administrativo (registro del paciente y de las indicaciones, identificacin
de la muestra).
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Fase analtica: incluye toda la etapa del procesamiento analtico

propiamente dicho, as como las medidas de aseguramiento de la
calidad que se toman en la misma (control del procedimiento, de los
reactivos, de los equipos, calidad del agua, etc.)
Fase pos analtica: es la que se inicia cuando se informan los
resultados obtenidos en la fase anterior e incluye los mecanismos de
registro y entrega de los mismos, su interpretacin y la garanta del
secreto profesional. En esta fase se contabiliza el tiempo total invertido
desde la indicacin por el mdico hasta la recepcin, por este, del
informe de los resultados.
Control de la calidad:
Conceptos:
Materiales de control. Control interno y evaluacin externa de la
calidad.
El control de la calidad en la fase analtica se utiliza con el principal objetivo
de mantener una vigilancia constante para detectar a tiempo los errores que
pueden afectar la calidad de los resultados. Hoy da, constituye una
herramienta indispensable en el laboratorio clnico para alcanzar la excelencia
en el trabajo.
El control de la calidad en el laboratorio clnico tiene dos variantes:
Aseguramiento interno de la calidad (control interno de la calidad). Evaluacin
externa de la calidad (control externo de la calidad).
El aseguramiento interno de la calidad tiene como principal objetivo la
deteccin de errores en el trabajo diario del laboratorio, para entonces
pasar inmediatamente a resolverlos. La liberacin de los resultados
obtenidos est supeditada a la deteccin y correccin de la fuente (del, los)
error(es). De esta forma se trata de evitar la entrega de resultados no
confiables y que carecen de utilidad diagnstica.
BIOTICA:
Es el estudio sistemtico en la conducta humana en el rea de las ciencias
biolgicas en respecto de los valores y principios morales.
tica de la vida: la tica aplicada a la vida humana es donde proviene la
palabra biotica.
Bio = relativo a la vida.
tica= valores morales.
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Valores: al conjunto de pautas que la sociedad establece para las personas en

las relaciones sociales de una forma aplicada, pueden ocuparse otras ciencias
como: la psicologa, economa, poltica, realizndolo de maneras muy
diferenciadas, ejemplo: amor, respeto, ayuda, libertad, paz, sencillez, humildad,
felicidad, honestidad, responsabilidad.
Conciencia: es el conocimiento que el ser humano tiene en si mismo en su
entorno.
Moral: conjunto de costumbres, creencias, valores o normas de una persona o
grupo social determinado que se basas en actuar de buena o mala manera,
haciendo el bien o el mal, lo correcto o incorrecto.
PARTES DE UN MICROSCOPIO PTICO
SISTEMA PTICO:
OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del
objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta.
CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
SISTEMA MECNICO:
SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin.
CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular,
binocular.
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar
los objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Micromtrico que aproxima el enfoque y
micromtrico que consigue el enfoque correcto.

20

MANEJO DEL MICROSCOPIO PTICO:

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la
platina.
2. completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso
anterior.
3. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
4. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o
colocar el de 10 aumentos (l0 x) si la preparacin es de bacterias.
1. Para realizar el enfoque:
a) Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo
micromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular,
ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose
daar alguno de ellos o ambos.
b) Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo
de la preparacin con el micromtrico y, cuando se observe algo ntido la
muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino.
2. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele
ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino.
Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a
enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El
objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es
fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se
descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si
se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin.
3. Empleo del objetivo de inmersin:
a) Bajar totalmente la platina.
b) Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz
que nos iindica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el
aceite.
c) Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino
entre este y el de x40.
d) Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
21

e) Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del

objetivo de inmersin. Mirando directamente al objetivo, subir la platina
lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese
momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.
f) Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo
entre el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que
con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.
g) Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no
se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se
manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que
bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3.
h) Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se
coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este
momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se
debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin.
i) Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel
especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est
perfectamente limpio.
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES:
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento
en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina
no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto
con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar
de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para
protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el
microscopio.
5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que
queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de
filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la
lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y
22

pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona

(7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican
estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin.
No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (micromtrico, micromtrico,
platina, revlver y condensador).

23

PARTES DEL MICROSCOPIO
Partes de un microscopio ptico

24

CRISTALERA DE LABORATORIO CLNICO

MEDIDAS
NOMBRE
USOS
DIBUJO
ML O CM
2000, 1000
900, 500
sirve para medir volumen
Vaso
de lquidos y tambin
precipitado o
300, 200
para calentar y mezclar
beacker.
sustancias.
150, 140
100, 80
2000, 1000
Probeta
es
til
para
medir 500, 250
volmenes
ms
pequeos de lquidos.
100, 50
25, 10
Matraz o
Erlermeyer:
2000, 1000
Bola,
Bola fondo
plano,
Destilacin,
500, 300
sirve
para
contener,
mezclar,destilar
y 250, 200
calentar sustancias.
125, 100
Kjendhal,
50, 30
aforacopn
12x72
Tubos de
ensayo
se emplea para calentar

o
mezclar
pequeas 15x150
cantidades
de
sustancias.
13x100

25

25x200
12x150
Mechero:
Universal
se utiliza como fuente de

energa para calentar
sustancias
buncen
NOMBRE
Gotero
USOS
MEDIDAS
sirve para agregar una

pequea cantidad de una
sustancia
.1
.2
PIPETAS:
instrumento
de
laboratorio que se utiliza 1
Aforadas
para medir o transvasar
pequeas cantidades de 10
Volumtricas lquido
5
2
Se utilizan para disgregar 8
MORTEROS sustancias, mediante la
presin ejercida
11.5

26
DIBUJO

A l se sujetan los
recipientes
que
se
SOPORTE
necesitan para .realizar
UNIVERSAL
los
montajes
experimentales.
BURETA
Instrumento
de
laboratorio que se utiliza
en volumetra para medir
con gran precisin el
volumen
de
lquido
vertido.
NOMBRE
USOS
MEDIDAS
TRIPOIDE
Se utiliza como soporte

para calentar distintos
recipientes
Se usa para proteger el

fuego directo el material
MALLA BESTUR
de vidrio que va a sufrir
calentamiento.
Dispositivo
CONDENSADOR almacena
elctrica.
que
carga

27
DIBUJO

EMBUDO
BUCHNER
Es un embudo con la
base agujereada. Se
acopla por su extremo
inferior mediante un
corcho
taladrado
al
matraz kitasato. Encima
de los orificios se coloca
un papel de filtro. Se
utiliza
para
filtrar
sustancias pastosas
Se
utiliza
para
la
determinacin de puntos
de fusin.
TUBO TIEL
NOMBRE
USOS
MEDIDAS DIBUJO
CAJA PETRI
Son
utilizadas
en
bioqumica para llevar
a cabo cultivos de
microorganismos.
GRADILLA
Pueden ser de metal,

madera o platico. Se
utilizan para sostener
los tubos de ensayo.
EMBUDOS
Se emplean para filtrar

sustancias liquidas o
simplemente
para
trasvasarlas de un
recipiente a otro.

28

PINZAS
TUBOS
ENSAYO
Son instrumentos en
forma de tenacillas que
PARA
sirven para sujetar los
DE
tubos de ensayo ;
pueden ser de madera
o metlicas.
Permiten efectuar la
cristalizacin
de
sustancias, es decir, la
CRISTALIZADOR
obtencin de cristales a
partir
de
sus
disoluciones.
NOMBRE
USOS
MEDIDAS
PIZETA
Se Utiliza para guardar

diferentes
soluciones
como: cloro, alcohol, etc.
Consiste en una pieza

cncava cuya utilidad es
Vidrio de reloj pesar
pequeas
cantidades de sustancias
en estado slido.
Consiste en un recipiente
de porcelana con una
Placas de gota serie de hendiduras las
cuales e usan para hacer
ensayos de gota.
Nuez
Son unas pinzas de

acero inoxidable que se
utilizan para sujetar las
buretas.
Embolo
Es un aparato se plstico
que se coloca en el
extremo ancho de la
29
DIBUJO

pipeta y su funcin es
absorber el lquido que
se va a pipetear
NOMBRE
USOS
Desecador
Se utilizan para desecar

sustancias o bien para
preservarlas
de
la
humedad.
Termmetro
Instrumento que mide la

temperatura en grados
centgrados o Fahrenheit.
Crisol
Vaso resistente al fuego

para fundir metales.
Aro Soporte
Instrumento metlico de
laboratorio,
que
se
emplea como soporte de
otros materiales anexado
al soporte universal.
Esptula
MEDIDAS
Sirve para sacar las

sustancias slidas de los
recipientes
que
las
contienen.

30
DIBUJO

NOMBRE
USOS
Mangueras
Es un instrumento de
caucho que se utiliza
para traspasar lquidos o
gases de un instrumento
a otro.
Pinza
bureta
MEDIDAS
DIBUJO
para Se utilizan para sujetar

dos buretas a la vez.
Este instrumento sirve

para proteger los ojos y
Gafas
de
parte de la cara, de
seguridad
cualquier partcula que
pueda afectarla.
Pinza
tubo
ensayo
para Permiten sujetar tubos

de de ensayo y si stos se
necesitan calentar
Pinza
crisol
para
NOMBRE
Permiten sujetar crisoles.
USOS
MEDIDAS
DIBUJO
Se utiliza para realizar

pequeas combustiones
Cuchara para
de sustancias, para
combustin
observar el tipo de
flama, reaccin, etc.

31

Pinzas para
Permiten
sujetar
cpsula
de
cpsulas de porcelana.
porcelana.
Tringulo de Permite
porcelana.
crisoles.
calentar
Pinzas para
refrigerante
Se utiliza para adicionar

Embudo de sustancias a matraces y
seguridad
como
medio
para
recto
evacuarlas cuando la
presin aumenta.
NOMBRE
USOS
MEDIDAS
Embudo
de Se utiliza para separar
separacin.
lquidos inmiscibles.
Refrigerantes:
Recto
condensadores
Serpentin
rosario

32
DIBUJO

Permiten
sustancias
almacenarlas
Frascos
reactivos.
guardar
para
Es un aparato que
permite medir que tan
Potenciometro.
alcalina (bsica) o cida
esta una sustancia.
Agitador
rotador
magntico.
Se utiliza para agitar

sustancias.
NOMBRE
USOS
MEDIDAS
Mascarilla
Cubre la boca y nariz

para que no entre
sustancias o bacterias
peligrosas al sistema
respiratorio.
Estas pinzas se adaptan

Pinzas
para
al soporte universal y
vaso
de
permiten sujetar vasos de
precipitado.precipitados.
Tapon
esmerilizado
sirven para tapar tubos

de ensayo, matraces

33
DIBUJO

Tapones
Caucho.
de sirven para tapar tubos

de ensayo, matraces
Se utilizan junto con los

Matraz
de
refrigerantes
para
destilacin.
efectuar destilaciones.
BIOSEGURIDAD:
El laboratorista realiza exmenes de laboratorio para proporcionar
informacin a los mdicos (o sus representantes) con el fin de beneficiar a
los pacientes. Por lo tanto, desempea un importante papel ayudando a que
los enfermos mejoren. Al mismo tiempo, en su trabajo obtiene abundante
informacin acerca de los pacientes y sus enfermedades.
El laboratorista considerar, lo mismo que el medico, esta informacin
estrictamente confidencial; nicamente el medico que solicita los exmenes
debe recibir los informes correspondientes. Si los pacientes desean conocer
los resultados de las pruebas se les indicara que los pidan al medico.
En la mayora de los pases del mundo existen rigurosas normas morales y
profesionales de conducta entre los mdicos y el personal capacitado de
laboratorio. Todo laboratorista que maneje materiales clnicos deber
ceirse a esas normas.
Importante: Las muestras examinadas en laboratorio (heces fecales, pus,
esputo, orina, etc.) frecuentemente son infectadas. Despus de examinarlas
se deben destruir de manera que se evite todo riesgo de contaminacin.
Estas muestras se pueden desechar en:
Cajas de cartn o recipientes de material plstico que se puede

destruir (heces fecales, esputo).

34

Frascos (tarros) de vidrio y matraces que se puedan limpiar,

esterilizar y usar nuevamente. Todos los recipientes desechables se usan
solo una vez.
PRINCIPIOS:
En los laboratorios de salud, el propsito bsico de un programa de
bioseguridad en lograr un ambiente de trabajo ordenado y seguro, que
conduce simultneamente a mejorar la calidad, reducir los costos y alcanzar
los optamos niveles de funcionalidad confiable en estas reas.
AGENTES DE RIESGO:
El conocimiento de la procedencia y caractersticas de los potenciales
agentes causales de accidentes, es un factor de gran valoracin en las
medidas y actuaciones para la BIOSEGURIDAD en el laboratorio de salud.
Estos agentes se pueden clasificar, para su estudio, el los siguientes
grupos:
1. BIOLGICOS:
Agentes microbiolgicos que pueden penetrar en las membranas mucosas
por inhalacin, ingestin o inoculacin directa.
Pelos o
partculas contaminadas procedentes de animales de
experimentacin.
2. FSICOS Y MECNICOS:
Pelos o
partculas contaminadas procedentes de animales de
experimentacin.
Temperaturas extremas producidas por agentes qumicos.
Contactos
elctricos
originados
en
equipos
o
conexiones
defectuosas.
Radiaciones procedentes de radioistopos, rayos X y fuentes de luz
ultravioleta.
Ruidos excesivos producidos por instrumentos sin graduaciones o
defectuosos.
Vidrios desquebrajados de recipientes daado.

35

3. QUMICOS:
De este grupo, procede conocer las propiedades diversas, que constituye
riesgos con efectos relacionados con las caractersticas particulares. Para
esos fines se presentan la siguiente descripcin:
3.1
Corrosivos:
Estas situaciones qumicas pueden destruir tejidos o reaccionar con

metales, madera u otros materiales usados en los laboratorios clnicos.
Actan cono potenciales agentes de riesgos de quemaduras, laceraciones
en los ojos, boca, piel o cabellos. Por ejemplo:
1. cido Actico
2. cido Frmica
3. cido Ntrico
3.2. Txicos
La accin y efectos se manifiestan segn la va de exposicin, entre estas
Inhalacin, ingestin o contacto directo con mucosas o piel; de este modo
se presenta esta clasificacin:
Por inhalacin:
1. Acetona
2. cido Clorhdrico
3. cido Fluorhdrico
Por Ingestin:
1. Acetona
2. cidos (indicados)
3. lcalis (indicados)
REGULACIONES GENERALES:
El estricto cumplimiento de las normas que representan la buena prctica
en el laboratorio es la mayor garanta de la bioseguridad.

36

1.
ELIMINACIN DE RESIDUOS:
En los laboratorios se producen como consecuencia de los ensayos y

determinaciones analticas una considerable cantidad de desechos
biolgicos y materiales qumicos que pueden eliminarse con precaucin y
seguridad.
Entre las generales estn las siguientes:
No verter materiales corrosivos en el fregadero a menos que sea con

una fuerte corriente de agua.
Disponer de recipientes o depsitos adecuados.
Entrenar al personal para establecer la forma de eliminacin de

residuos conforme al tipo.
BIOLGICOS:
Material contaminado, medios de cultivo requieren ser esterilizados en
autoclave antes de eliminarlos.
1.
Precauciones
con
los
especimenes
(sangre,
lquido
cefalorraqudeo secreciones y excreciones).
Estas muestras constituyen riesgos potenciales, mientras no sean
conocidos los resultados.
Utilizacin de tcnicas correctas al extraer o recibir una muestra

evitando el contacto de riesgo, sin lastimar la sensibilidad del paciente o su
representante.
El desecho de la parte de muestra no utilizada requiere el

cumplimiento de la higiene del laboratorio.
Entre los instrumentos que pueden causar riesgos en trabajo rutinario

se consideran los siguientes:
Jeringas y agujas: No remover la cubierta de la aguja para sacar el

aire de la jeringuilla, no rehusar jeringuillas desechables, nunca desinfectar
agujas estriles previo a su uso, llenar cuidadosamente la jeringuilla para
evitar burbujas, jeringuillas utilizadas con material de riesgo de
contaminacin deben ser desechadas en un recipiente con desinfectante
previamente a su eliminacin.

37

MEDIDAS PARA MINIMIZAR

ADQUIRIR UNA INFECCIN:
LOS
RIESGOS
POTENCIALES
DE
Toda muestra de laboratorio debe ser manipulada como si fuera infecciosa.

El equipo con sangre debe ser limpiado con desinfectantes ya que se
presenta un riesgo de contaminacin.
Cmo manipular una muestra potencialmente infecciosa?
a) Utilizar bata de manga larga para proteccin corporal.
b) Utilizar guantes siempre que se manipulen muestras.
1.
Los procedimientos que puedan generar aerosoles como apertura de
tubos, centrifugacin de tubos abiertos, mezclar tubos, pipeteo, implican la
utilizacin de mascarillas y anteojos de seguridad adems de guantes y
bata.
a)
Los tubos deben centrifugarse debidamente cerrados.
b)
Deben lavarse las manos al quitarse los guantes y al concluir la
jornada de trabajo, la vestimenta protectora se quita despus de abandonar
el rea de trabajo.
c)
No se debe pipetear con la boca.
d)
Las muestras deben colocarse en contenedores seguros (gradillas) y
debidamente tapados para su transporte.
e)
No se come, bebe, ni fuma en el laboratorio, no se aplican
cosmticos ni se manipulan lentes de contacto.
f)
Todo alimento y bebida del rea restringida y los utensilios de
laboratorio no se utilizan nunca para comer ni beber.
g)
No debe tocarse el rostro, orejas, boca, ojos y la nariz ni otros objetos
como telfono con los guantes.
h)
Cualquier exposicin accidental a material
comunicarse de inmediato al encargado de laboratorio.
infeccioso
debe
i)
La eliminacin de materiales punzo cortantes debe hacerse en
recipientes especiales y en su vaina al tirarse.
j)
No deben transportarse muestras en bolsas de las batas o la ropa.
k)
Existen ciertos reactivos y material en el laboratorio que es fungible
por lo que no debe exponerse al fuego como etanol, fenol, acetona, etc.
38

MANUAL DE
LABORATORIO CLINICO
UNIDAD
ANATOMA Y FISIOLOGA
39

CLULA ANIMAL
Membrana Celular: Es el lmite externo de la clula formada por

fosfolpido y su funcin es delimitar la clula y controlar lo que sale e
ingresa de la clula.
Mitocondria: diminuta estructura celular de doble membrana responsable de la

conversin de nutrientes en el compuesto rico en energa trifosfato de
adenosina (ATP), que acta como combustible celular. Por esta funcin que
desempean, llamada respiracin, se dice que las mitocondrias son el motor de
la clula.
Cromatina: complejo macromolecular formado por la asociacin de cido

desoxirribonucleico o ADN y protenas bsicas, las histonas, que se encuentra
en el ncleo de las clulas eucariticas.
Lisosoma: Saco delimitado por una membrana que se encuentra en las clulas
con ncleo (eucariticas) y contiene enzimas digestivas que degradan
molculas complejas. Los lisosomas abundan en las clulas encargadas de
combatir las enfermedades, como los leucocitos, que destruyen invasores
nocivos y restos celulares.
Aparato de Golgi: Parte diferenciada del sistema de membranas en el interior
celular, que se encuentra tanto en las clulas animales como en las vegetales.
Citoplasma: El citoplasma comprende todo el volumen de la clula, salvo el

40

ncleo. Engloba numerosas estructuras especializadas y orgnulos, como se

describir ms adelante.
Nucleoplasma: El ncleo de las clulas eucariticas es una estructura discreta que
contiene los cromosomas, recipientes de la dotacin gentica de la clula. Est
separado del resto de la clula por una membrana nuclear de doble capa y
contiene un material llamado nucleoplasma. La membrana nuclear est perforada
por poros que permiten el intercambio de material celular entre nucleoplasma y
citoplasma.
Ncleo: El rgano ms conspicuo en casi todas las clulas animales y vegetales
es el ncleo; est rodeado de forma caracterstica por una membrana, es esfrico
y mide unas 5 um de dimetro. Dentro del ncleo, las molculas de ADN y
protenas estn organizadas en cromosomas que suelen aparecer dispuestos en
pares idnticos. Los cromosomas estn muy retorcidos y enmaraados y es difcil
identificarlos por separado.
Nucleolo: Estructura situada dentro del ncleo celular que interviene en la
formacin de los ribosomas (orgnulos celulares encargados de la sntesis de
protenas). El ncleo celular contiene tpicamente uno o varios nuclolos, que
aparecen como zonas densas de fibras y grnulos de forma irregular. No estn
separados del resto del ncleo por estructuras de membrana.
Centrolos: Cada una de las dos estructuras de forma cilndrica que se encuentran
en el centro de un orgnulo de las clulas eucariticas denominado centrosoma. Al
par de centrolos se conoce con el nombre de diplosoma; stos se disponen
perpendicularmente entre s.
Ribosoma: Corpsculo celular que utiliza las instrucciones genticas contenidas en
el cido ribonucleico (ARN) para enlazar secuencias especficas de aminocidos y
formar as protenas. Los ribosomas se encuentran en todas.

41

CLULA VEGETAL
Las clulas vegetales, as como las animales, presentan un alto grado de

organizacin, con numerosas estructuras internas delimitadas por membranas. La
membrana nuclear establece una barrera entre la cromatina (material gentico) y
el citoplasma. Las mitocondrias, de interior sinuoso, convierten los nutrientes en
energa que utiliza la planta.
A diferencia de la clula animal, la vegetal contiene cloroplastos, unos orgnulos
capaces de sintetizar azcares a partir de dixido de carbono, agua y luz solar.
Otro rasgo diferenciador es la pared celular, formada por celulosa rgida, y la
vacuola nica y llena de lquido, muy grande en la clula vegetal.
La membrana plasmtica de las clulas eucariticas es una estructura dinmica
formada por 2 capas de fosfolpidos en las que se embeben molculas de colesterol
y protenas.
Los fosfolpidos tienen una cabeza hidrfila y dos colas hidrfobas. Las dos capas
de fosfolpidos se sitan con las cabezas hacia fuera y las colas, enfrentadas, hacia
dentro. Es decir, los grupos hidrfilos se dirigen hacia la fase acuosa, los de la
capa exterior de la membrana hacia el lquido extracelular y los de la capa interior
hacia el citoplasma.
Las protenas embebidas en las capas de fosfolpidos cumplen diversas funciones
como la de transportar grandes molculas hidrosolubles, como azcares y ciertos
aminocidos. Tambin hay protenas unidas a carbohidratos (glicoprotenas)
embebidas en la membrana.
42

Las mitocondrias, estructuras diminutas alargadas que se encuentran en el

hialoplasma (citoplasma transparente) de la clula, se encargan de producir
energa. Contienen enzimas que ayudan a transformar material nutritivo en
trifosfato de adenosina (ATP), que la clula puede utilizar directamente como
fuente de energa. Las mitocondrias suelen concentrarse cerca de las estructuras
celulares que necesitan gran aportacin de energa, como el flagelo que dota de
movilidad a los espermatozoides de los vertebrados y a las plantas y animales
unicelulares.
EXMENES QUE SE REALIZAN EN EL LABORATORIO CLNICO:
En la actualidad, la variedad de los exmenes que realiza el laboratorio es
considerable; sin embargo, est claro que no todos los laboratorios realizan
toda esta amplia gama de investigaciones, como tampoco todas las
instituciones mdicas de un pas ofertan todos los servicios, incluidos los ms
especializados. Cada pas establece, de acuerdo con su propia poltica de
salud, las investigaciones que se realizan en los laboratorios de la red de salud
pblica, en los distintos niveles de asistencia (primario, secundario y terciario).
En principio, antes de incorporar la determinacin de algn nuevo anlisis a la
batera de investigaciones que se realizan en un laboratorio, es importante
conocer las caractersticas de interferencias, la preparacin del paciente y, por
ltimo, realizar los clculos de costo / beneficio de su introduccin.
De manera muy general, los exmenes de laboratorio se pueden agrupar en:
a) Qumica sangunea: incluye pruebas para el estudio del metabolismo de
los carbohidratos, las protenas, los lpidos, el agua y los electrlitos y el
equilibrio cido-base; enzimas sricas, productos intermedios o finales del
metabolismo, oligoelementos, hormonas y niveles de medicamentos en sangre,
entre otros.
b) Hematologa: incluye un grupo de exmenes denominados "bsicos" o
"habituales" (hemoglobina, hematocrito. recuentos de clulas de la
sangre, examen de la extensin coloreada de sangre perifrica, clculo de las
constantes corpusculares, velocidad de sedimentacin globular) y pruebas
ms especializadas, como los estudios de anemias hemolticas y
nutricionales, el examen de las extensiones coloreadas de mdula sea
(medulograma), las coloraciones citoqumicas y algunos estudios realizados
con empleo de radionclidos, sondas moleculares o microscopia electrnica.
c) Estudios de la hemostasia: agrupan a todas las pruebas que permiten explorar
los mecanismos de la coagulacin sangunea, la fibrinlisis y la actividad de
los trombocitos.
43

d) Inmunologa: incluye una amplia gama de pruebas para el estudio de la

autoinmunidad, las inmunodeficiencias, el tipaje para transplantes y otras.
e) "Examen qumico y citolgico de orina, lquido cefalo-raqudeo, amnitico o
sinovial; semen, saliva, exudados y trasudados.
f) Biologa molecular: de introduccin relativamente reciente en el laboratorio
clnico, se emplean las sondas de ADN para el estudio de enfermedades
infecciosas, neoplsicas y de origen gentico, as como para sustituir cada
vez ms los mtodos clsicos de estudio del sistema inmunolgico. El
ADN disponible para una reaccin, es ampliado por medio de la reaccin en
cadena de la polimeriza (PCR). La introduccin de esta tecnologa permite
lograr diagnsticos ms rpidos y especficos y abre posibilidades
insospechadas unos pocos aos atrs.
ESTUDIO DEL ORGANISMO POR SISTEMA:
EL APARATO DIGESTIVO Y SU FUNCIONAMIENTO:
El aparato digestivo es una serie de rganos huecos que forman un largo y
tortuoso tubo que va de la boca al ano El interior del tubo est revestido por
una membrana llamada mucosa. La mucosa de la boca, el estmago y el
intestino delgado contiene glndulas diminutas que producen jugos que
contribuyen a la digestin de los alimentos.
Hay otros dos rganos digestivos compactos, el hgado y el pncreas, que
producen jugos que llegan al intestino a travs de pequeos tubos. Adems,
algunos componentes de otros aparatos y sistemas (por ejemplo, los
nervios y la sangre) juegan un papel importante en el aparato digestivo.
Por qu es importante la digestin?
Cuando comemos alimentos como pan, carne y verduras, estos no estn en
una forma que el cuerpo pueda aprovechar para nutrirse. Los alimentos y
bebidas que consumimos deben transformarse en molculas ms pequeas
de nutrientes antes de ser absorbidos hacia la sangre y transportados a las
clulas de todo el cuerpo. La digestin es el proceso mediante el cual los
alimentos y bebidas se descomponen en sus partes ms pequeas para
que el cuerpo pueda usarlos como fuente de energa, y para formar y
alimentar las clulas.

44

Cmo se digieren los alimentos?

La digestin comprende la mezcla de los alimentos, su paso a travs del
tracto digestivo y la descomposicin qumica de las molculas grandes en
molculas ms pequeas. Comienza en la boca, cuando masticamos y
comemos, y termina en el intestino delgado. El proceso qumico vara un
poco dependiendo de la clase de alimento.
Paso de los alimentos a travs del aparato digestivo:

Los rganos grandes y huecos del aparato digestivo poseen msculos que
permiten que sus paredes se muevan. El movimiento de estas paredes
puede impulsar los alimentos y los lquidos, y mezclar el contenido de cada
rgano.
El movimiento tpico del esfago, el estmago y los intestinos se llama
peristaltismo. La accin del peristaltismo se parece a la de una ola del mar
movindose por el msculo. Comenzando desde la parte superior y
movindose lentamente hacia la parte inferior del rgano, el msculo
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comienza a contraerse y relajarse. Estas ondas alternadas de contracciones

y relajaciones empujan la comida y los lquidos a travs de cada rgano.
El primer movimiento muscular importante ocurre cuando ingerimos
alimentos o lquidos. Aunque esta parte del proceso es voluntaria, en cuanto
empieza se vuelve involuntaria y pasa a estar bajo el control de los nervios.
La comida que acabamos de ingerir pasa al siguiente rgano que es el
esfago, y que conecta la garganta con el estmago. En la unin del
esfago y el estmago hay una vlvula en forma de anillo que cierra el paso
entre los dos rganos. Sin embargo, a medida que los alimentos se acercan
al anillo cerrado, los msculos que lo rodean se relajan y permiten el paso.
Los alimentos entran entonces al estmago, que debe realizar tres tareas
mecnicas. Primero, debe almacenar la comida y los lquidos ingeridos.
Para ello, el msculo de la parte superior del estmago debe relajarse y
aceptar volmenes grandes de material ingerido. La segunda tarea es
mezclar los alimentos, los lquidos y el jugo digestivo producido por el
estmago. La accin muscular de la parte inferior del estmago se encarga
de esto. La tercera tarea del estmago es vaciar su contenido lentamente
en el intestino delgado.
Esto ltimo recibe la influencia de varios factores, como la naturaleza de los
alimentos (especialmente su contenido de grasas y protenas) y el grado de
actividad muscular del estmago y del intestino delgado. A medida que los
alimentos se digieren en el intestino delgado y se disuelven en los jugos del
pncreas, el hgado y el intestino, el contenido intestinal se va mezclando y
avanzando para facilitar la digestin adicional.
Finalmente, todos los nutrientes digeridos se absorben a travs de las
paredes intestinales. Los productos de desecho de este proceso
comprenden partes no digeridas de los alimentos, conocidas como fibra, y
clulas viejas que se han desprendido de la mucosa. Estos materiales son
impulsados hacia el colon, en el cual permanecen generalmente durante
uno o dos das, hasta cuando se expulsa la materia fecal durante la
deposicin.
La produccin de los jugos digestivos:
Las glndulas del sistema digestivo son de primordial importancia en el
proceso de la digestin, porque producen tanto los jugos que descomponen
los alimentos como las hormonas que controlan el proceso.

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Las que actan primero son las glndulas salivares de la boca. La saliva
que producen contiene una enzima que comienza a digerir el almidn de los
alimentos y lo transforma en molculas ms pequeas.
El siguiente grupo de glndulas digestivas est en la membrana que tapiza
el estmago. Estas producen cido y una enzima que digiere las protenas.
Uno de los misterios del sistema digestivo es la razn de por qu el jugo
cido del estmago no disuelve el propio tejido estomacal. En la mayora de
las personas, la mucosa estomacal puede resistir el jugo, a diferencia de los
alimentos y de otros tejidos del cuerpo.
Despus de que el estmago vierte los alimentos y su jugo en el intestino
delgado, los jugos de otros dos rganos se mezclan con ellos para continuar
el proceso. Uno de esos rganos es el pncreas, cuyo jugo contiene un
gran nmero de enzimas que descomponen los hidratos de carbono, las
grasas y las protenas de los alimentos. Otras enzimas que participan en el
proceso provienen de glndulas de la pared intestinal o forman parte de ella.
El hgado produce la bilis, otro jugo digestivo, que se almacena en la
vescula biliar. Cuando comemos, la bilis sale de la vescula por las vas
biliares al intestino y se mezcla con las grasas de los alimentos. Los cidos
biliares disuelven las grasas en el contenido acuoso del intestino, como los
detergentes disuelven la grasa de una sartn. Despus de que las grasas
se disuelven, las enzimas del pncreas y de la mucosa intestinal las
digieren.
Absorcin y transporte de los nutrientes:
Las molculas digeridas de los alimentos, y el agua y minerales
provenientes de la dieta se absorben en la parte superior del intestino
delgado. Los materiales absorbidos atraviesan la mucosa y pasan a la
sangre, que los distribuye a otras partes del cuerpo para almacenarlos o
para que pasen por otras modificaciones qumicas. Como dijimos antes,
esta parte del proceso vara dependiendo de los diferentes tipos de
nutrientes.
Hidratos de carbono. Un adulto estadounidense promedio consume cerca
de media libra de hidratos de carbono al da. Algunas de nuestras comidas
ms corrientes, como el pan, las papas, los pasteles, los dulces, el arroz, los
espaguetis, las frutas y las verduras, contienen principalmente hidratos de
carbono. Muchas de ellas contienen al mismo tiempo almidn, que es
digerible, y fibra, que no lo es.

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Los hidratos de carbono digeribles se descomponen en molculas ms

sencillas por la accin de las enzimas de la saliva, del jugo pancretico y de
la mucosa intestinal. El almidn se digiere en dos etapas: primero, una
enzima de la saliva y del jugo pancretico lo descompone en molculas de
maltosa; luego, la maltasa, una enzima de la mucosa del intestino delgado,
divide la maltosa en molculas de glucosa que pueden absorberse en la
sangre. La glucosa va por el torrente sanguneo al hgado, en donde se
almacena o se utiliza como fuente de energa para las funciones del cuerpo.
El azcar comn es otro hidrato de carbono que se debe digerir para que
sea til. Una enzima de la mucosa del intestino delgado digiere el azcar
comn y lo convierte en glucosa y fructosa, cada una de las cuales puede
absorberse en el intestino y pasar a la sangre. La leche contiene lactosa,
otro tipo de azcar que se transforma en molculas fciles de absorber
mediante la accin de una enzima llamada lactasa, que se encuentra en la
mucosa intestinal.
Protenas. Los alimentos como carne, huevos y frijoles estn formados por
molculas enormes de protenas que deben ser digeridas por enzimas antes
de que se puedan utilizar para fabricar y reparar los tejidos del cuerpo. Una
enzima del jugo gstrico comienza la digestin de las protenas que
comemos. El proceso termina en el intestino delgado. All, varias enzimas
del jugo pancretico y de la mucosa intestinal descomponen las enormes
molculas en unas mucho ms pequeas, llamadas aminocidos. Estos
pueden absorberse en el intestino delgado y pasar a la sangre, que los lleva
a todas partes del cuerpo para fabricar las paredes celulares y otros
componentes de las clulas.
Grasas. Las molculas de grasas son una importante fuente de energa
para el cuerpo. El primer paso en la digestin de una grasa como la
mantequilla es disolverla en el contenido acuoso del intestino. Los cidos
biliares producidos por el hgado actan como detergentes naturales que
disuelven las grasas en agua y permiten que las enzimas descompongan
sus grandes molculas en molculas ms pequeas, algunas de las cuales
son los cidos grasos y el colesterol. Los cidos biliares se unen a los
cidos grasos y al colesterol y les ayudan a pasar al interior de las clulas
de la mucosa. En ellas, las molculas pequeas vuelven a formar molculas
grandes, la mayora de las cuales pasan a los vasos linfticos cercanos al
intestino. Estos vasos llevan las grasas modificadas a las venas del trax y
la sangre las transporta hacia los lugares de depsito en distintas partes del
cuerpo.

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Vitaminas. Otros integrantes fundamentales de nuestra comida que se

absorben en el intestino delgado, son las vitaminas. Estas sustancias
qumicas se agrupan en dos clases, segn el lquido en el que se disuelven:
hidrosolubles (todas las vitaminas del complejo B y la vitamina C) y
liposolubles (las vitaminas A, D y K).
Agua y sal. La mayora del material que se absorbe del intestino delgado es
agua, en la que hay sal disuelta. El agua y la sal vienen de los alimentos y
lquidos que consumimos y de los jugos que las glndulas digestivas
secretan. En el intestino de un adulto sano se absorbe ms de un galn de
agua con ms de una onza de sal cada 24 horas.
Cmo se regula la digestin?
Reguladores hormonales
Una caracterstica fascinante del aparato digestivo es que contiene sus
propios reguladores. Las principales hormonas que controlan las funciones
del aparato digestivo se producen y liberan a partir de clulas de la mucosa
del estmago y del intestino delgado. Estas hormonas pasan a la sangre
que riega el aparato digestivo, van hasta el corazn, circulan por las arterias
y regresan al aparato digestivo, en donde estimulan la produccin de los
jugos digestivos y provocan el movimiento de los rganos.
Las hormonas que controlan la digestin son la gastrina, la secretina y la
colecistocinina.
La gastrina hace que el estmago produzca un cido que disuelve y
digiere algunos alimentos. Es necesaria tambin para el crecimiento
normal de la mucosa del estmago, el intestino delgado y el colon.
La secretina hace que el pncreas secrete un jugo digestivo rico en
bicarbonato. Estimula al estmago para que produzca pepsina, una
enzima que digiere las protenas, y al hgado para que produzca bilis.
La colecistocinina hace que el pncreas crezca y produzca las
enzimas del jugo pancretico, y hace que la vescula biliar se vace.
REGULADORES NERVIOSOS:
Dos clases de nervios ayudan a controlar el trabajo del aparato digestivo.
Los nervios extrnsecos (de afuera) llegan a los rganos digestivos desde el
cerebro o desde la mdula espinal y provocan la liberacin de dos
sustancias qumicas: la acetilcolina y la adrenalina. La acetilcolina hace que
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los msculos de los rganos digestivos se contraigan con ms fuerza y

empujen mejor los alimentos y lquidos a travs del tracto digestivo.
Tambin hace que el estmago y el pncreas produzcan ms jugos. La
adrenalina relaja el msculo del estmago y de los intestinos y disminuye el
flujo de sangre que llega a estos rganos.
Los nervios intrnsecos (de adentro), que forman una red densa incrustada
en las paredes del esfago, el estmago, el intestino delgado y el colon, son
an ms importantes. La accin de estos nervios se desencadena cuando
las paredes de los rganos huecos se estiran con la presencia de los
alimentos. Liberan muchas sustancias diferentes que aceleran o retrasan el
movimiento de los alimentos y la produccin de jugos en los rganos
digestivos.
EL APARATO RESPIRATORIO:
El aparato respiratorio es el encargado de realizar el intercambio de gases
entre el aire y la sangre. Est constituido por:
Vas respiratorias
Pulmones
Vas respiratorias: Conducen el aire del exterior a los pulmones y
viceversa.
Fosas nasales: Son las dos cavidades de la nariz. En ellas el aire es
filtrado, calentado y humedecido.
Faringe: Forma parte a la vez de las vas respiratorias y del tubo digestivo:
comunica con la laringe y el esfago. Tiene la misma misin que las fosas
nasales.
Laringe: En su interior se encuentran las cuerdas vocales, cuya vibracin,
al paso del aire, produce la voz. Cuando tragamos el alimento, la laringe
queda cerrada por una especie de lengeta llamada epiglotis.
Trquea: Es un largo tubo que posee anillos cartilaginosos incompletos en
forma de C que lo mantienen siempre abierto. Se halla situada delante del
esfago.
Bronquios: Son los dos tubos en los que se divide la trquea. Penetran en
el interior de los pulmones donde se ramifican repetidamente, formando los

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bronquiolos. Su pared interior posee cilios (especie de pelillos que vibran) y

moco para filtrar el aire y atrapar las partculas que lleva en suspensin.
Pulmones: Son dos masas esponjosas recubiertas de un tejido de doble
pared llamado pleura, con una fina capa de lquido entre ambas para
suavizar los movimientos respiratorios.
El pulmn derecho est dividido en tres lbulos y el izquierdo en dos. Estn
constituidos por los bronquiolos que se dividen repetidamente en ramas
cada vez ms finas que terminan en unas bolsas llamadas alvolos,
recubiertas de capilares sanguneos.
VENTILACIN PULMONAR:
As se llama a la entrada y salida de aire de los pulmones. Consta de dos
movimientos respiratorios: inspiracin y espiracin.
Inspiracin: Se produce por
contraccin
del
diafragma
(desciende) y de los msculos
que elevan las costillas. Esto
provoca un aumento de la
cavidad torcica que permite la
entrada de aire en los pulmones.
Espiracin: Ocurre lo contrario
que en la inspiracin: diafragma
y los msculos de las costillas se
relajan,
disminuyendo
la
capacidad
torcica.
Esto
provoca la salida pasiva del aire.
INTERCAMBIO DE GASES:
El intercambio de gases entre el aire y la sangre tiene lugar a travs de
las finas paredes de los alvolos y de los capilares sanguneos. La sangre
venosa proveniente de la arteria pulmonar se libera del dixido de carbono,
procedente del metabolismo de todas las clulas del cuerpo, y toma
oxigeno. La sangre oxigenada regresa por la vena pulmonar al corazn que
la bombea a todo el cuerpo.

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APARATO CIRCULATORIO:
Tiene varias funciones: sirve para llevar los alimentos y el oxgeno a las
clulas, y para recoger los desechos metablicos que se han de eliminar
despus por los riones, en la orina, y por el aire exalado en los pulmones,
rico en dixido de carbono (CO2). De toda esta labor se encarga la sangre,
que est circulando constantemente. Adems, el aparato circulatorio tiene
otras destacadas funciones: interviene en las defensas del organismo,
regula la temperatura corporal, transporta hormonas, etc.
LA SANGRE:
Es el fluido que circula por
todo el organismo a travs del
sistema circulatorio, formado
por el corazn y un sistema de
tubos o vasos, los vasos
sanguneos.
La sangre describe dos
circuitos
complementarios
llamados circulacin mayor o
general y menor o pulmonar.
La sangre es un tejido lquido,
compuesto por agua y sustancias orgnicas e inorgnicas (sales minerales)
disueltas, que forman el plasma sanguneo y tres tipos de elementos formes
o clulas sanguneas: glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas. Una
gota de sangre contiene aproximadamente unos 5 millones de glbulos
rojos, de 5.000 a 10.000 glbulos blancos y alrededor de 250.000 plaquetas.

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PLASMA SANGUNEO:
Es la parte lquida de la sangre. Es salado, de color amarillento y en l flotan
los dems componentes de la sangre, tambin lleva los alimentos y las
sustancias de desecho recogidas de las clulas.
El plasma cuando se coagula la sangre, origina el suero sanguneo.

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Los glbulos rojos, tambin denominados eritrocitos o hemates, se

encargan de la distribucin del oxgeno molecular (O2). Tienen forma de
disco bicncavo y son tan pequeos que en cada milmetro cbico hay
cuatro a cinco millones, midiendo unas siete micras de dimetro. No tienen
ncleo, por lo que se consideran clulas muertas.
Los hemates tienen un pigmento rojizo llamado hemoglobina que les sirve
para transportar el oxgeno desde los pulmones a las clulas. Una
insuficiente fabricacin de hemoglobina o de glbulos rojos por parte del
organismo, da lugar a una anemia, de etiologa variable, pues puede
deberse a un dficit nutricional, a un defecto gentico o a diversas causas
ms.

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Los glbulos blancos o leucocitos tienen una destacada funcin en el

Sistema Inmunolgico al efectuar trabajos de limpieza (fagocitos) y defensa
(linfocitos). Son mayores que los hemates, pero menos numerosos (unos
siete mil por milmetro cbico), son clulas vivas que se trasladan, se salen
de los capilares y se dedican a destruir los microbios y las clulas muertas
que encuentran por el organismo. Tambin producen anticuerpos que
neutralizan los microbios que producen las enfermedades infecciosas.
Las plaquetas son fragmentos de clulas muy pequeos, sirven para
taponar las heridas y evitar hemorragias.
EL CORAZN:
El corazn es un rgano hueco,
del tamao del puo, encerrado
en la cavidad torcica, en el
centro del pecho, entre los
pulmones, sobre el diafragma,
dando nombre a la "entrada"
del estmago o cardias.
Histolgicamente en el corazn
se distinguen tres capas de
diferentes tejidos que, del
interior
al
exterior
se
denominan
endocardio,
miocardio y pericardio.
El endocardio est formado por
un
tejido
epitelial
de
revestimiento que se contina
con el endotelio del interior de los vasos sanguneos.
El miocardio es la capa ms voluminosa, estando constituido por tejido
muscular de un tipo especial llamado tejido muscular cardaco. El pericardio
envuelve al corazn completamente.

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El corazn est dividido en dos mitades que no se comunican entre s: una

derecha y otra izquierda, La mitad derecha
siempre contiene sangre pobre en oxgeno,
procedente de las venas cava superior e
inferior, mientras que la mitad izquierda del
corazn siempre posee sangre rica en
oxgeno y que, procedente de las venas
pulmonares, ser distribuida para oxigenar los
tejidos del organismo a partir de las
ramificaciones de la gran arteria aorta.
En algunas cardiopatas congnitas persiste
una comunicacin entre las dos mitades del
corazn, con la consiguiente mezcla de
sangre rica y pobre en oxgeno, al no cerrarse
completamente el tabique interventricular
durante el desarrollo fetal.
Cada mitad del corazn presenta una cavidad superior, la aurcula, y otra
inferior o ventrculo, de paredes musculares muy desarrolladas. Existen,
pues, dos aurculas: derecha e izquierda, y dos ventrculos: derecho e
izquierdo.
Entre la aurcula y el ventrculo de la misma mitad cardiaca existen unas
vlvulas llamadas vlvulas aurculoventriculares (tricspide y mitral, en la
mitad derecha e izquierda respectivamente) que se abren y cierran
continuamente, permitiendo o impidiendo el flujo sanguneo desde el
ventrculo a su correspondiente aurcula.
Cuando las gruesas paredes musculares de un ventrculo se contraen
(sstole ventricular), la vlvula auriculoventricular correspondiente se cierra,
impidiendo el paso de sangre hacia la aurcula, con lo que la sangre fluye
con fuerza hacia las arterias.
Cuando un ventrculo se relaja, al mismo tiempo la aurcula se contrae,
fluyendo la sangre por esta sstole auricular y por la abertura de la vlvula
auriculoventricular.
Como una bomba, el corazn impulsa la sangre por todo el organismo,
realizando su trabajo en fases sucesivas. Primero se llenan las cmaras
superiores o aurculas, luego se contraen, se abren las vlvulas y la sangre
entra en las cavidades inferiores o ventrculos. Cuando estn llenos, los
ventrculos se contraen e impulsan la sangre hacia las arterias. El corazn
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late unas setenta veces por minuto gracias a su marcapasos natural y

bombea todos los das unos 10.000 litros de sangre.
Los vasos sanguneos
Los vasos sanguneos (arterias, capilares y venas) son conductos
musculares elsticos que distribuyen y recogen la sangre de todos los
rincones del cuerpo. Se denominan arterias a aquellos vasos sanguneos
que llevan la sangre, ya sea rica o pobre en oxgeno, desde el corazn
hasta los rganos corporales. Las grandes arterias que salen desde los
ventrculos del corazn van ramificndose y hacindose ms finas hasta
que por fin se convierten en capilares, vasos tan finos que a travs de ellos
se realiza el intercambio gaseoso y de sustancias entre la sangre y los
tejidos. Una vez que este intercambio sangre-tejidos a travs de la red
capilar, los capilares van reunindose en vnulas y venas por donde la
sangre regresa a las aurculas del corazn.

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Las Arterias: Son vasos gruesos y elsticos que nacen en los Ventrculos
aportan sangre a los rganos del cuerpo por ellas circula la sangre a presin
debido a la elasticidad de las paredes. Del corazn salen dos Arterias:
1. Arteria Pulmonar que sale del Ventrculo derecho y lleva la sangre a los
pulmones.
2. Arteria Aorta sale del Ventrculo izquierdo y se ramifica, de esta ultima
arteria salen otras principales entre las que se encuentran:
Las cartidas: Aportan sangre oxigenada a la cabeza.
Subclavias: Aportan sangre oxigenada a los brazos.
Heptica: Aporta sangre oxigenada al hgado.
Esplnica: Aporta sangre oxigenada al bazo.
Mesentricas: Aportan sangre oxigenada al intestino.
Renales: Aportan sangre oxigenada a los riones.
Ilacas: Aportan sangre oxigenada a las piernas.
Los Capilares: Son vasos sumamente delgados en que se dividen las
arterias y que penetran por todos los rganos del cuerpo, al unirse de nuevo
forman las venas.

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Las Venas: Son vasos de paredes delgadas y poco elsticas que recogen
la sangre y la devuelven al corazn, desembocan en las Aurculas. En la
Aurcula derecha desembocan:
La Cava superior formada por las yugulares que vienen de la cabeza y las
subclavias (venas) que proceden de los miembros superiores. La Cava
inferior a la que van las Ilacas que vienen de las piernas, las renales de los
riones, y la supraheptica del hgado.
La Coronaria que rodea el corazn. En la Aurcula izquierda desembocan
las cuatro venas pulmonares que traen sangre desde los pulmones y que
curiosamente es sangre arterial.

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Arriba puedes ver una buena imagen que te dar una visin global del
Aparato Circulatorio, con las arterias y venas ms importantes y el sentido
de la circulacin sangunea.
Recuerda que, por definicin, las arterias "salen del corazn" y las venas
"llegan al corazn", independientemente de que lleven sangre rica en
oxgeno (color rojo) o pobre en oxgeno (color azul).
As, por ejemplo, la gran arteria aorta y sus ramificaciones llevan sangre rica
en oxgeno (color rojo), mientras que la arteria pulmonar lleva sangre pobre
en oxgeno (color azul).
ANATOMA Y FISIOLOGA DEL APARATO URINARIO:
Primero es vlido mencionar que el
sistema urinario en s no existe. Hay un
sistema reproductor, el cual se divide en
aparto genital y urinario. Es ste ltimo
en que basaremos nuestro trabajo. Otra
cosa importante por sealar es que en
el hombre la evacuacin de la orina y la
expulsin del semen son acciones
realizadas por distintos conductos, que
despus de un breve trayecto
comparten la cavidad por donde sern
evacuados
y
expulsados,
respectivamente. Por otro lado, la mujer
tiene conductos y esfnteres diferentes
para ambas acciones.
FUNCIN:
El aparto urinario es el encargado de eliminar del organismo las sustancias
nocivas que se forman en las clulas y de contribuir a mantener la reaccin
alcalina de la sangre.
ESTRUCTURA:
Est formado esencialmente por dos riones que vuelcan cada uno su
contenido en un receptculo llamado vejiga, por medio de un tubo llamado
urter. La vejiga, a su vez evacua su contenido al exterior por medio de un
conducto llamado uretra. A continuacin estudiaremos esto rganos.

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Los riones:
Los riones son dos rganos que afectan la forma de un poroto, colocados
en el abdomen a ambos lados de la columna vertebral. Se hallan
aproximadamente a la altura de la ltima vrtebra dorsal y de las dos
primeras lumbares. Las ltimas dos costillas cubren su mitad superior. Tiene
unos 10 a 12 centmetros de largo, unos 5 o 6 centmetros de ancho y unos
2,5 a 3,5 centmetros de espesor. Pesan unos 150 gramos cada uno. Su
color es rojo castao. Estn separados de la piel del dorso por varios
msculos, y de los rganos del abdomen por el peritoneo parietal. Hay una
capa de grasa que los rodea y los fija, permitiendo, sin embargo, que se
deslicen hacia abajo en cada inspiracin.
El rin derecho es un poco ms bajo que el izquierdo. Sobre su po9lo
superior se hallan las cpsulas suprarrenales. Su borde interno es cncavo
y recibe el nombre de hilio, pues llegan y salen por ese lugar la arteria renal
y la vena renal.
Se halla tambin all la llamada pelvis renal, que tiene forma de embudo y
en la cual desembocan los llamados clices, que reciben cada uno la orina
de una de las pirmides renales.
Si se corta el rin paralelamente a sus dos caras, se puede observar que
su sustancia propia se halla formada por dos zonas de color distinto, a las
que se ha llamado medular, o interna, y cortical, o externa.
La sustancia medular, de color ms rojizo, forma 9 a 10 masas triangulares,
llamadas pirmides renales o de Malpighi. Su base est en contacto con la
sustancia cortical y su vrtice, que presenta 15 a 20 pequeos orificios, se
halla en comunicacin con un cliz renal, que lleva la orina a la pelvis renal.
La cortical, de color ms amarillento, presenta en su parte ms externa
pequeos puntit0os rojos que corresponden a los corpsculos de Malpighi.
La sustancia cortical cubre a la medular y rellena tambin os espacios que
dejan entre s las pirmides de Malpighi.
Lo ms importante del rin es el llamado nefrn, cuyo funcionamiento, una
vez comprendido, nos explica el trabajo del rin. Hay aproximadamente un
milln de nefrones en cada rin. Cada nefrn se halla constituido por el
llamado corpsculo renal, o de Malpighi, y del llamado tbulo urinfero, que
tiene diversas partes, cuya explicacin no cabe mencionar en el presente
trabajo. Estos desembocan en canales colectores, que llevan la orina a los
clices y a la pelvis renal.
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El corpsculo renal o de Malpighi contiene un vaso capilar ramificado, que

forma un ovillo que recibe el nombre de glomrulo. El glomrulo recibe la
sangre de un pequeo vaso llamado afrente, que le trae sangre arterial
procedente de la arteria renal. La sangre sale del glomrulo por otro
pequeo vaso llamado eferente. La sangre proveniente del vaso eferente,
en su mayor parte irriga a los tbulos renales y va a dar despus e la vena
renal, perdido ya su oxgeno, pero eliminadas tambin las sustancias
nocivas. Rodeando el glomrulo se halla la llamada cpsula de Bowman,
que tiene dos capas que dejan entre s un espacio, espacio que comunica
con el comienzo del tbulo renal. En realidad, la cpsula de Bowman es la
extremidad ensanchada del tbulo renal que hunde o invagina el glomrulo.
La cantidad de sangre que pasa por el rin es de aproximadamente un litro
por minuto, vale decir que ms menos cada cinco minutos pasa toda la
sangre por el rin. Esa sangre proveniente de la arteria renal, tiene una
presin del glomrulo de 75 mm de mercurio, la cual tiende a filtrar la
sangre. Y aunque hay elementos que tratan de contrarrestar dicha filtracin
(presin osmtica de la sangre, presin del tejido renal y dentro del tubo
renal), filtran los glomrulos ms de 100 g de lquido por minuto. Ese lquido
contiene todos los elementos solubles del plasma sanguneo, salvo las
protenas.
Eso dara una enorme cantidad de orina que si se eliminara as hara que el
organismo perdiese junto con las sustancias que debe eliminar, otras que
necesita. Para evitar esto, los tbulos renales reabsorben aproximadamente
el 99% del agua que filtran los glomrulos y seleccionan las sustancias que
esa agua contiene disueltas, reabsorbiendo por completo algunas como la
glucosa, y dejando pasar parte de otras, como la sal. Otras no vuelven a
pasar por la sangre, como la creatina. La reabsorcin de parte de lo filtrado
a travs del glomrulo por los tbulos renales, es regulada por una
secrecin interna del lbulo posterior de la hipfisis.
Los urteres.
Los urteres son dos conductos de unos 25 a 30 cm. de largo, bastante
delgados, aunque de calibre irregular, que llevan la orina desde la pelvis
renal a la vejiga, en cuya base desembocan formando los llamados meatos
ureterales, cuya disposicin en vlvula permite a la orina pasar gota a gota
del urter a la vejiga, pero no viceversa. Su interior est revestido de un
epitelio y su pared contiene msculo liso.

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La vejiga.
La vejiga es un depsito membranoso situado en la parte inferior del
abdomen y superior de la pelvis, destinada a contener la orina que llega de
los riones a travs de los urteres. Cuando est vaca, sus paredes
superior e inferior se ponen en contacto, tomando una forma ovoidea
cuando est llena. Su capacidad es de unos 300 a 350 g, aunque puede
variar de una persona a otra y en ciertas afecciones. Su interior est
revestido de una mucosa con un epitelio poliestratificado pavimentoso,
impermeable a la orina. Su pared contiene un msculo liso, que
contrayndose y con la ayuda de la contraccin de los msculos
abdominales, produce la evacuacin de la vejiga a travs de la uretra. A
esto se llama miccin. La parte de la vejiga que comunica con la uretra est
provista de un msculo circular o esfnter, que impide normalmente la salida
involuntaria de la orina. Adems de estas fibras lisas hay otras estriadas
que ayudan a retener voluntariamente la orina.
La uretra:
La uretra es el conducto que permite la salida al exterior de la orina
contenida en la vejiga. Difiere considerablemente en ambos sexos. En la
mujer es un simple canal de 3 a 4 cm. de largo, algo ms estrecho en
ambas extremidades que en el resto de su trayecto. Es casi vertical y se
halla por delante de la vagina, abrindose en la vulva por delante del orificio
vaginal.
En el hombre la uretra mide de 18 a 20 cm. de longitud, y es de calibre
irregular, presentando partes ensanchadas y otras estrechadas. Adems no
es recta sino que presenta ciertos ngulos. Tiene muchos segmentos: uretra
prosttica (parte que pasa por la prstata), uretra membranosa y uretra
esponjosa, es decir, la rodeada por el cuerpo esponjoso, la que a su vez
puede subdividirse en varios segmentos.
Desde el punto de vista de sus enfermedades la uretra puede dividirse en
dos segmentos: la uretra anterior y la uretra posterior, separados por un
esfnter de msculo estriado, situado a unos 3,5 cm. de la vejiga.
Las hemorragias o secreciones que se producen en la primera, salen al
exterior y las que se producen en la segunda, pueden volcarse en la vejiga.
La inflamacin de cada uno de estos sectores produce tambin sntomas
distintos. En la uretra desembocan diversas glndulas en las que pueden
acantonarse una infeccin de la uretra.

63

FORMACIN DE LA ORINA:
La orina es una solucin de urea, sales y otras sustancias de desecho,
solubles en agua, producida en el rin a partir de la sangre que transporta
la arteria renal. La sangre pasa por cada uno de los glomrulos, quedando
retenidos en el mismo las sustancias de mayor volumen, mientras las
sustancias proteicas como el agua, las sales, la urea y otras pasan desde
las paredes de los capilares a la cpsula de Bowman. Por lo tanto, el
glomrulo realiza la funcin de filtrar, mientras que la cpsula y los tbulos
recogern la orina formada y la transportan a las vas urinarias para su
posterior eliminacin.
FILTRACIN DE LA ORINA.
La filtracin es un proceso que permite el paso de lquido desde el
glomrulo hacia la cpsula de Bowman por la diferencia de presin
sangunea que hay entre ambas zonas.
El lquido que ingresa al glomrulo tiene una composicin qumica similar al
plasma, solo que no tiene protenas, o stas se encuentran en porcentajes
ms bajos.
A travs del ndice de filtrado glomerular, es posible inferir que cada 24
horas se filtran, en ambos riones, 180 litros aproximadamente.Los factores
que influyen en la filtracin glomerular son: flujo sanguneo y efecto de las
arteriolas aferente y eferente.
ELIMINACIN DE LA ORINA.
Una vez formada la orina en los glomrulos, discurre por los tbulos hasta
llegar a la pelvis renal, desde donde pasa al urter y llega a la vejiga, lugar
donde es almacenada. Cuando el volumen supera los 250-500 cm3,
sentimos la necesidad de orinar, debido a las contracciones y relajaciones
del esfnter, que despierta el reflejo de la miccin.
La necesidad de orinar puede reprimirse voluntariamente durante cierto
tiempo. La frecuencia de las micciones vara de un individuo a otro debido a
que en ella intervienen factores personales como son el hbito, el estado
squico de alegra o tensin, y el consumo en mayor o menor medida de
bebidas alcohlicas.

64

La cantidad de orina emitida en 24 horas en el hombre es de

aproximadamente 1500 cm3. El aumento por encima de esta cifra se
denomina poliuria y la disminucin oliuria.
LA ORINA:
El trabajo limpiador de los riones es la orina. Se ha podido decir con razn
que la orina es una solucin salada de urea, por ser la urea y la sal las
sustancias que en mayor cantidad estn disueltas en ella.
CANTIDAD:
La orina se produce habitualmente en una cantidad que oscila entre 1250 y
1500 gramos diarios.
Este volumen puede variar, aumentando cuando se ingieren muchos
lquidos, si hace fro, por emociones, entre otras. Puede disminuir cuando se
beben pocos lquidos o cuando se pierde mucho lquido por otras vas:
transpiracin abundante, diarrea, vmitos, etc. Ciertas enfermedades
pueden aumentar la cantidad de orina: diabetes sacarina, diabetes inspida,
incapacidad del rin para producir una orina concentrada, etc. Puede
disminuir la orina en los momentos en que se retienen lquidos en el
organismo en la nefrosis, las glomerulonefritis agudas, ciertas nefritis
crnicas y tambin las enfermedades infecciosas cuando no se da al
paciente suficiente cantidad de lquidos.
COLOR:
Habitualmente la orina tiene un color amarillo mbar. Cuando su cantidad es
abundante tiende a ser de color ms claro. En cambio, se hace ms oscura
cuando es escasa, por hallarse en mayor concentracin las sustancias
eliminadas. Adems del cambio que pueden provocar en el color de la orina
numerosos medicamentos, se puede sealar el tinte castao, a veces muy
oscuro que le dan los pigmentos de la bilis cuando hay ictericia. La sangre
le da un color rojo oscuro.
OLOR:
La orina recin eliminada tiene un olor particular no ftido. Cuando pasa
cierto tiempo, toma un olor fuerte, que ms tarde se hace amoniacal. Las
personas que han ingerido esprragos tienen orina ftida. Los que tienen
mucha acetona (por acidosis) pueden tener orina con el olor propio de dicha

65

sustancia. Cuando la orina es ftida o amoniacal en el momento de su

emisin, es probable que haya una antigua infeccin urinaria.
DENSIDAD:
Normalmente la densidad de la orina vara entre 1015 y 1025.
Generalmente la funcin renal es bastante buena cuando es capaz de
segregar una orina concentrada. Por supuesto, casi siempre las orinas de
poca densidad son abundantes, y las de elevada densidad, escasas. Una
excepcin notable es la diabetes sacarina, en la que hay poliuria (orina
abundante), con densidad elevada.
REACCIN DE LA ORINA.- La reaccin habitual de la orina humana es
cida. Si por alimentacin excesivamente rica en residuos alcalinos, o por
tomar medicamentos alcalinos, la orina se hace alcalina o neutra, sta se
pone turbia por hallarse precipitados los fosfatos que contiene.
COMPOSICIN QUMICA:
Puede variar mucho segn el tipo de alimentacin y la cantidad de orina. El
trmino medio habitual es el siguiente:
En cada litro de orina hay: Urea: 24 g.
Cloruro de sodio (sal comn): 10 g.
Sulfatos: 3g,
Fosfatos: 2,3 g.
Creatinina: 0,9 g.
Sales de amonio: 0,7 g.
cido hiprico: 0,6 g.
cido rico: 0,5 g.
Otros compuestos: 4 g.
Los principales elementos anormales que puede hallar un examen qumico
de orina son protenas y glucosa.

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QUE REVELA EL EXAMEN MICROSCPICO DEL SEDIMENTO DE LA

ORINA?
La orina normal tiene un sedimento escaso compuesto por clulas
epiteliales, planas y descamadas de las vas urinarias, escasos glbulos
blancos, filamentos de mucus y, a veces, cristales de uratos y oxalatos.
Despus de un ejercicio violento, pueden aparecer tambin algunos
glbulos rojos. En las orinas anormales pueden aparecer glbulos de pus,
glbulos rojos y cilindros. Estos ltimos se forman en los tbulos renales,
recibiendo el nombre de cilindros hialinos, creos, granulosos, epiteliales,
etc., segn su composicin.
Otros elementos anormales que pueden hallarse son diversas sales
cristalizadas, grmenes microbianos y parsitos.

67

MANUAL DE
LABORATORIO CLNICO
UNIDAD PARASITOLOGA

68

PARASITOLOGIA
INTRODUCCIN:
El diagnstico de cualquier parasitismo del hombre debe mostrar
directamente la presencia del parsito causante de infeccin o infestacin,
pueden ser diagnosticadas a travs de las pruebas inmunolgicas,
microbiolgicas y Microscpicas.
La demostracin directa del parsito se realiza tomando muestras del
organismo segn sea la etiologa que se sospecha.
La demostracin indirecta se hace mediante la bsqueda de los anticuerpos
en sangre o secreciones, o anfgenos circulantes o eliminados por las
excretas o secreciones del organismo.
CLASIFICACIN DE LOS PARSITOS:
Puede ser Helmintos, Protozoarios y Hematozoarios
EXAMEN DIRECTO O PARASITOLGICO:
La bsqueda de estados evolutivos del parsito tiene relacin
caractersticas de la biologa de cada uno de ellos.
Los siguientes son los principales exmenes que se solicitan:
con las
Heces
Contenido duodenal
Sangre
Biopsia
Esputo
Piel
Pelos
Ropa
EXAMEN DE HECES:
El examen de heces incluye el examen macroscpico y microscpico de las
mismas.
Para realizar un buen examen de heces se requiere una muestra reciente,
cuando solamente se necesita hacer el examen microscpico y las heces
son proglotido de obtener frescas, se les debe fijar utilizando los fijadores
apropiados para la bsqueda del parsito.
69

IMPORTANCIA DEL EXAMEN DE HECES:

Su importancia es la observacin de parsitos patgenos que producen en el
husped lesiones mecnicas traumticas o toxicas las cuales pueden afectar la
salud general del paciente por lo que un anlisis adecuado facilitara el
diagnostico y tratamiento del paciente.
RECOLECCIN DE LA MUESTRA:
Hacerse en un recipiente limpio de plstico o de vidrio y con tapn de rosca
preferiblemente con boca ancha.
Se puede obtener en forma directa o indirecta.
Si la muestra tiene aspecto normal se puede dejar a temperatura ambiente
o en el refrigerador por un periodo no mayor de 24 horas.
Si la muestra tiene moco, sangre y son liquidas el examen debe hacerse
inmediatamente ya que puede haber en ellas amebas mviles que mueren
rpidamente.
Para el Dx. de E. Vernicularis la recoleccin de la muestra se hace por
medio de la tcnica de Scotch tape (Se rodea un baja lenguas con tape con
el pegamento hacia arriba y se recoge la muestra de la regin perianal, sin
que el paciente haya defecado ni baado, la cinta adhesiva se coloca sobre
un porta objetos y se observa en el microscopio).
PRESERVACIN DE LA MUESTRA:
Se utiliza cuando se transporta la muestra o cuando debe preservarse por
varios meses:
Formol de 5-10%: Permite preservar huevos de Helmintos, pero no es
eficiente para protozoos.
PVA (Alcohol polivinilico): Para todo tipo de parsitos se hacen frotes de las
heces y se tien con Hematoxilina frrica o coloracin tricrmica.
EXAMEN DE LA MUESTRA:
Se divide en Macroscpico y Microscpico.

70

EXAMEN MACROSCPICO:
1. Examen Fsico: en este se contemplan varios parmetros:
Color: Normalmente es pardo pero ciertos medicamentos o alimentos pueden
variar el color de las heces (rojizo, negro, blanquecino, amarillo, verde, etc.)
Consistencia: Pastosas pero pueden presentarse liquidas o semilquidas, su
aspecto normal es cilndrico.
Olor: La fetidez acentuada indica procesos de putrefaccin o infeccin.
Moco: Se encuentra como copos transparentes su presencia indica un proceso
inflamatorio del intestino.
Pus: Se encuentra mezclado con el moco e indica una grave inflamacin del
intestino grueso.
Sangre: Si es roja indica hemorragia en la parte inferior si es negra en la
parte superior.
Residuos alimenticios: Su presencia indica mala digestin de los alimentos.
2. Examen Qumico:
Determinacin del PH.
Determinacin de sangre oculta: Reaccin de Bencirina, reaccin de Guayaco
y Ocultest o Hematest.
EXAMEN MICROSCPICO:
En esta parte del examen se puede conocer el grado de digestibilidad de los tres
grupos de alimentos (prtidos, glicidos y lpidos).
Respecto a los prtidos si hay abundantes fibras musculares indica falta de
digestin; la presencia de grasas neutras cidos grasos y jabones indica mala
digestin de lpidos; los almidones, restos vegetales si son muy abundantes indica
mala digestin o exceso de ingestin de feculentos.
La preparacin no debe ser ni muy gruesa ni muy delgada, el examen debe hacerse
utilizando poca intensidad de luz y observando toda la preparacin con el objetivo
71

del 1Ox en ambas muestras luego deben examinarse mnimo 20 campos con el
objetivo 40x o bien cuando se tenga duda de la presencia de un quiste huevo o
trofozoito de algn parsito.
PREPARACIN DE LA MUESTRA:
1. FROTE DIRECTO: En casos de urgencia.
a) Se realiza el examen macroscpico.
b) Se coloca una o dos gotas de S.S. de un lado del porta y una o dos gotas de lugol
en otro lado.
c) Se esparce uno o dos miligramos del material homogenizado en cada solucin.
d) Se coloca un cubreobjetos sobre cada preparacin y se observa al microscopio.
2. MTODO DE CONCENTRACIN:
Sedimentacin y flotacin se cuela el material fecal para eliminar el material
voluminoso.
SEDIMENTACIN:
Para concentracin de quistes, trofozotos y huevos
a) Se coloca 5ml de S.S. al 0.85% en un vaso.
b) Se homogeniza aproximadamente un gramo de la muestra hasta disolver
totalmente.
c) Se cuela con un colador y la solucin se transfiere a un tubo y se centrfuga a
2,000 rpm/5mn.
d) Se decanta el sobrenadante y se homogeniza, se coloca en el portaobjetos
como en el frotis directo.

72

Causas de error.
En el rea de parasitologa es de gran importancia que a la hora de realizar
los exmenes debemos de tomar ciertas medidas para no cometer las
siguientes causas de error:
No recibir muestras en un recipiente inadecuado: bolsas plsticas,
frascos sucios, frascos con restos frmacos, etc.
A la hora de realizar el frote no utilizar el mismo extremo del
aplicador en solucin salina y en Lugo.
No descartar la muestra antes de informar.
No rotula las muestras a la hora de la recepcin y a la hora de
examinarla.
No utilizar el kit de bioseguridad.
No limpiar los objetivos antes y despus de hacer los exmenes.
PARASITOS INTESTINALES MS FRECUENTES EN GUATEMALA
PROTOZOOARIOS
Clase Rhizopoda (amebas)
ESPECIES
-
Entamoeba hystolitica
Entamoeba coli
Endolimax nana
Iodamoba butschlii
Dientamoeba fragilis
Entamoeba gigivalis
Clase Mastogophora (flagelados)

ESPECIE
-
Giardia lamblia
Chilomastix mesnili
Embadomonas intestinalis ( Retartomonas)
Enteromonas hominis
Tricomonas hominis
73

Tricomonas vaginalis
Clase Ciliata
ESPECIES
-
Balantidium coli
HELMINTOS
Nematodos (gusanos redondos)
ESPECIES
- Trichuris trichura (Tricocefalo)
-
Ascaris lumbricoides
Strongyloides stercoralis
Necator Americanus (Uncinaria)
Ancylostoma duodenale
Enterobius vermicularis (Oxiuros)
Platelmintos (gusanos planos)

Clase cstoda (tenias)
ESPECIES
- Taenia solium
-
Taeni saginata
Hymenolepis nana
Hymenolepis diminuta
PROTOZOOARIOS
CLASE RHIZOPODA (AMEBAS)

74

ENTAMOEBA HISTOLYTICA:
Trofozoito de E. histolytica mide de 10 a 20m tiene un ncleo excntrico,
con cromatina perifrica uniforme y cariosoma central.
El citoplasma es granular fino, no vacuolado y algunas veces con glbulos
rojos. Movilidad progresiva. Coloracin tricrmica 1000x El quiste, mide de
10 a 20m, redondo u El quiste joven tiene vacuola y dos o tres barras
cromatoideas y uno o dos ncleos. El quiste maduro, tiene cuatro ncleos y
no tiene vacuolas, ni barras cromatoideas.

75

ENTAMOEBA COLI:
Quiste mide de 10 a 35m (promedio 17). El quiste maduro tiene ocho
ncleos de cariosoma excntrico, cromatina perifrica mal distribuida,
vacuola de glucogeno poco precisa 1000X27.
En lo que se diferencia la Entamoeba coli de la Entamoeba histolytica es
que la Entamoeba coli tiene mas ncleos y es mas grande que la
Entamoeba histolytica.
ENDOLIMAX NANA:
Se ubican en la parte intestinal su presencia indica contaminacin fecal.
Quiste elptico de 5 a 10m, promedio 9. el quiste maduro tiene 4 cuatro
ncleos, el cariosoma es compacto, irregular y relativamente grande, no
tiene cromatina perifrica. 1000x

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IODAMOEBA BTSCHLII:
Quiste El ncleo tienen cariosoma central, es compacto, relativamente
grande. Miden de 5 a 120m (promedio 10). Dentro del citoplasma hay una
gran vacuola de glucgeno, que se tie de caf con la solucin de lugol.
ENTAMOEBA HARTAMANNI:
Los trofozotos son similares a los de E. histolytica. Con dos excepciones.
Los quistes contienen uno o dos ncleos, aunque los maduros contienen
cuatro ncleos. Y a menudo retienen las barras cromatoideas lo que no
ocurre en E. histolytica. Los trofozotos miden de 5 a 12m y los quistes de
5 a 10m Se puede diferenciar de E. histolytica solo por el tamao.

77

DIENTAMOEBA FRAGILIS:
Dientamoeba fragilis: los trofozotos miden de 6 a 12 micras, de forma
irregular presentan dos ncleos con grnulos de cromatina en su parte
central en nmero de 4 a 8.
BLASTOCYSTIS HOMINIS:
Quiste teido con tincin tricrmica se observa una forma esfrica de
tamao variable, luminoso, refrctil con 1, 2 o 4 organelos rechazados a los
lados con unas vainas compactas, queda libre al centro una estructura que
ha recibido el nombre de cuerpo central.
CLASE MASTIGOPHORA (FLAGELADOS)

GIARDIA LAMBLIA:
Es un protozoario flagelado perteneciente a la Clase Mastigophora
GIARDIOSIS:
Infeccin parasitaria causada por Giardia lamblia, protozoo flagelado que
tiene por hbitat el intestino delgado, principalmente duodeno del hombre y
de algunos animales.
Material de observacin:
78

1.
Frotis de heces coloreados con hematoxilina frrica o GomorriTrichrome. Observacin con lente de inmersin.
2.
Preparacin microscpica de heces fijadas con formol y teidas con

lugol. Observacin a mayor aumento.
Morfologa:
El parsito presenta dos formas evolutivas; el trofozoito y el quiste.
OBSERVE las preparaciones:
a)
El trofozoito es de forma piriforme y mide de 15x7 micras. En las

preparaciones teidas con hematoxilina frrica o Gomorri-Trichrome,
ocasionalmente, es posible observar claramente los 4 pares de
flagelos, un anterior, dos laterales y uno posterior, pero con claridad,
los dos ncleos en la porcin anterior o ms ancha del trofozoito con la
cromatina compacta central en cada uno de ellos. El axostilo o barra
rgida recorre por la mitad del parsito de la extremidad anterior a la
posterior. Hacia la mitad del mismo la atraviesan dos formaciones
cortas o cuerpos parabasales. Cuando se observa el trofozoito de perfil
se puede apreciar en la extremidad anterior una concavidad que
corresponde a la depresin de los discos suctorios, rganos de fijacin
del parsito a la superficie de la mucosa intestinal.
b)
El quiste es ovalado y mide de 10 micrones en su dimetro mayor.

Reconzcalo en las preparaciones coloreadas con hematoxilina frrica
o Gomorri-Trichrome y en las preparaciones teidas con lugol, tiene
una membrana qustica doble y en se distinguen de dos a cuatro
ncleos, el axostilo y en ocasiones los cuerpos parabasales.
Ciclo biolgico:
La forma infectante es el quiste.
El mecanismo de transmisin es el agua de bebida o alimento contaminado
con los quistes del parsito.
La puerta de entrada es la va oral.
Los animales infectados no son tan importantes como reservorios de la
infeccin como lo es el hombre.
Accin patgena:
79

Los trofozotos de Giardia lamblia se ubican en la superficie de las clulas

epiteliales de la mucosa duodenal, sin penetran ella, ocasionando
inflamacin de la mucosa, lo que ocasiona la diarrea y a su vez puede
bloquear la absorcin de nutrientes, principalmente grasas, por lo cual se le
considera como agente causante de mala absorcin intestinal.
La cuanta de parsitos, la edad del paciente y la reaccin del hospedero,
determinan, principalmente, la intensidad de la sintomatologa digestiva.
Diagnstico:
Se hace por el hallazgo de trofozotos y/o quistes en las heces. Se
recomienda hacer, en casos indicados, sondaje duodenal o el uso de la
cuerda encapsulada.

80

CHILOMASTIX MESNILI:
El trofozoito de forma periforme mide de 6 a 20 micras de largo por 3 a 10
de ancho. Presenta 4 flagelos anteriores que no se les suele distinguir a
todos ellos, se suele distinguir una depresin anterior a manera de
citostoma.
El ncleo est situado en la extremidad anterior. Se observa un surco en
forma de espiral a lo largo del cuerpo.
El quiste tiene forma redondeada con una prominencia que lo asemeja a un
limn y mide de 6 a 10 micrones, presenta doble membrana y en su interior
se observa los elementos descritos en el trofozoito.
TRICHOMONAS HOMINIS:
Los trofozotos tienen forma ligeramente periforme y miden de 5 a 14
micras. Se pueden distinguir los flagelos anteriores en nmero de 5 y una
membrana ondulante bordeada de un sexto flagelo que suele prolongarse
por el extremo posterior. Se suele distinguir el ncleo anterior y un axostilo
que recorre la parte media del parsito.

81

DIENTAMOEBA FRAGILIS:
Presentan slo formas de trofozoito y Chilomastix mesnili, de trofozoito y
quiste.
Dientamoeba fragilis: los trofozotos miden de 6 a 12 micras, de forma
irregular presentan dos ncleos con grnulos de cromatina en su parte
central en nmero de 4 a 8.
CLASE CILIATA.
BALANTIDIUM COLI:
Trofozoito tiene forma ovoide, cubierto de cilios cortos de longitud uniforme,
mide de 50 a 200m de largo por 40 a 70 de ancho. El extremo anterior es
puntiagudo y a uno de los lados se encuentra el citostoma, el extremo
posterior es redondeado y con orificio pequeo, el citopigio. Posee 2
ncleos,

82

HELMINTOS:
NEMATODOS (GUSANOS REDONDOS):
Gusanos redondos, son cilndricos, tienen simetra bilateral, tienen una

cutcula exterior y un pseudocele que contiene todos los sistemas (digestivo,
excretor, nervioso y reproductivo. Los nemtodos presentan dimorfismo
sexual.
Se adquieren usualmente por ingestin o penetracin de la piel de las
formas larvarias del suelo.
El estado de diagnstico de los helmintos son huevos o larvas (S.
stercolaris). Algunos criterios para reconocer los huevos de helmintos son:
Tamao.
Forma.
Grueso de la cubierta.
Estado de desarrollo al salir del cuerpo.
Otras estructuras: presencia de oprculo, espinas, etc.
Presenta simetra bacterial. El extremo anterior tiene a veces ganchos,
cerradas, papilas, que sirven para romper tejidos y fijarse a ellos.
El posterior presenta espcula y una bolsa. Tubo digestivo completo, sexos
separados, su alimentacin es variada dependiendo de la especie.
TRICHURIS TRICHIURA (TRICOCFALO):
Huevo de color caf, alargado con prominencias polares translcidas.
Miden 50 x 25m. La cubierta externa es gruesa Presenta membrana
vitelina ms fina que contienen una clula de protoplasma granuloso que da
lugar al embrin que sale por el tapn mucoso en los polos.
TRICHURIS TRICHIURA
83

ADULTOS TRICHURIS TRICHIURA:

La hembra mide de 4 a 5cm, la porcin posterior gruesa es arqueada.
El macho mide de 3 a 4cm, su porcin posterior se encuentra enroscada.
CICLO BIOLGICO:
La forma infectante es el huevo de T. Trichiura.
El mecanismo de transmisin al hombre es el agua y alimento contaminado
con huevos de T. trichiura, que son ingeridos por va oral.

84

ASCARIS LUMBRICOIDES:
Huevo frtil, con su cubierta albuminosa gruesa, mamelonada y una
membrana interna lisa, incolora y refringente. Se puede ver el desarrollo y
algunas veces la larva en el interior. El huevo es elptico, mide de 50 a
75m de largo por 40 a 60m de ancho.
LARVA DE SCARIS LUMBRICOIDES:

Larva de scaris lumbricoides saliendo del huevo. Los huevos de scaris
lumbricoides son muy resistentes. Pueden sobrevivir y seguir madurando
an en formalina al 10%.

85

ADULTOS ASCARIS LUMBRICOIDES:

De color rosado cuando estn vivos, tienen forma cilndrica con extremos
adelgazados, el macho mide de 15 a 17cm de largo por 3mm de grosor, la
hembra de 20 a 25cm por 5mm de grosor.
CICLO BIOLGICO:
La forma infectante es el huevo de scaris. El mecanismo de transmisin al
hombre es a travs del agua y alimento contaminado con huevos de
scaris, que son ingeridos por va oral.

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STRONGYLOIDES STERCOLARIS:
Material de observacin
Preparacin microscpica de heces con larvas del parsito. Observacin al
microscopio compuesto a menor y mayor aumento.
ESTROGILOIDIOSIS:
Definicin:
Infeccin ocasionada por el nematodo Strongyloides stercolaris se localiza
en el intestino delgado del hombre, especialmente en el duodeno.
MORFOLOGA:
a) Adulto: nematodos filiformes; muy pequeos, el macho mide 0.7 mm
de longitud por 40 micras de dimetro, la hembra mide 2.2 mm de
largo por 20 a 70 micras de dimetro.
b) Larva rabditoide: OBSERVE en preparados de heces larvas de 200

micras de longitud; en la parte anterior localice cpsula bucal corta y
un esfago con un bulbo posterior.

87

CICLO BIOLGICO:
La forma infectante es la larva rabditoide.
El mecanismo de transmisin se efecta cuando la larva infectante penetra
a travs de la piel; para alcanzarla circulacin general por lo vasos venosos
y linfticos.
ACCIN PATGENA:
En el estadio invasivo las larvas producen pequeas hemorragias y edema
conjurito intenso.
En el estadio pulmonar las larvas producen lesin de los alvolos,
engrosamiento de los tabiques interalveolares y de los bronquiolos.
En el estadio intestinal, producen cambios fibrticos y ulceraciones.
DIAGNOSTICO:
Observacin, al microscopio compuesto, las larvas rabditoides en muestras
de heces, procesados mediante los mtodos directo o en el lquido
intestinal obtenido por sondeo duodenal.
Periodo intestinal, si la infeccin es masiva se produce lesin intestinal, con
sangrado continuo ayudado por la sustancia anticoagulante del parsito,
inflamacin de la mucosa, enteritis e hiperplasia medular.
Examen directo de preparados de heces para observar huevos del parsito.
ANCYLOSTOMA DUODENALE Y NECATOR AMERICANUS:
Anquilostomiasis.
Ingresan al organismo por la piel de los pies descalzos.
Transmisin feco oral.
Producen anemia e incapacidad
MATERIAL DE OBSERVACIN:
1. Lamina portaobjeto con ejemplares
adultos de Ancylostoma.
Observacin al microscopio estereoscopico y compuesto.
2. Preparacin microscpica de heces con huevos del parsito.
Observacin al microscopio compuesto a menor y mayor aumento.

88

MORFOLOGA:
Adulto: OBSERVE laminas preparadas de ejemplares adultos del
parsito; distinga la forma cilndrica presentan dimorfismo sexual, la
hembra presenta el extremo posterior en punta y el macho en forma de
campana llamada bolsa copulatriz. La longitud de los parsitos oscila
entre 8 y 12mm, cuyo dimetro alcanza de 0.4 a 0.6 mm.
UNCINARIA:
Huevo ovalado con una cubierta delgada y totalmente transparente y en su
interior se encuentra material celular que normalmente, al ser observado en
la materia fecal, ya ha empezado la divisin embriognica y ha pasado a la
etapa blasto.
Muestra teida con lugol.
ANCYLOSTOMA DUODENALE.

89

NECATOR AMERICANUS
CICLO BIOLGICO:
La forma infectante es la larva filariforme.
El mecanismo de transmisin se da cuando la larva infectante se pone en
contacto con la piel del hombre, penetrando a travs de ella de manera
activa.
CICLO DE ANCYLOSTOMA DUODENALE Y NECATOR AMERICANUS.

90

ENTEROBIUS VERMICULARIS.
ENTEROBIOSIS
DEFINICIN:
Infeccin producida por el nematodo Enterobius vermicularis, se localiza en
el intestino grueso.
MATERIAL DE OBSERVACIN:
1. lamina portaobjetos con hembra adulta de Enterobius vermicularis.
Observacin al microscopio compuesto.
2. lamina portaobjeto con huevos de Enterobius vermicularis adheridos
a cinta adhesiva.
MORFOLOGA:
a) Adulto: OBSERVE lminas preparados de ejemplares hembras
adultas del parsito, cilndricas y aguzadas; el extremo anterior
presenta una expansin cuticular y el posterior recto y delgado
como un hilo; mide 1cm de largo. El macho mide 0.5cm de longitud, y
presenta el extremo posterior esta engrosado.
b) Huevos: OBSERVE preparaciones segn el mtodo de Graham,

conteniendo
huevos del parsito; distinga la forma plana convexa a cada
lado y el tamao que alcanza de 50 a 60 micras de largo por 20 a 30 micras
de ancho; en el interior reconozca la larva.

91

CICLO BIOLGICO:
La forma infectante es el huevo del parsito.
El mecanismo de transmisin al hombre es a travs de los alimentos que
contienen el huevo embrionado o por retroinfeccin cuando eclosionan los
huevos en la regin perianal y las larvas infectivas migran hacia el intestino
grueso.

92

Accin patgena:
Produce prurito vulvar e inflamacin de la vagina; cuando alcanza el
peritoneo ocasiona una peritonitis.
Diagnostico:
Se efecta mediante el hallazgo del parsito adulto o de huevos obtenidos
por el mtodo de Graham o de la cinta adhesiva. La cinta se aplica en la
regin perianal y luego se coloca sobre un porta objeto.
TCNICAS DE TEST DE GRAHAM:
Principio:
Los huevos de oxiuros Enterobius vermicularis se suelen recoger (en
especial en nios) en los pliegues de la piel que rodea el ano. Raras veces
se hallan en las materias fecales
MATERIALES:
Cinta adhesiva de celofn
Una cucharilla de 10cm de longitud o, mejor an, una batelenguas de
madera.
Un portaobjetos.
Microscopio
MTODO:
1. Coloque una cinta de celofn, con el lado adhesivo hacia abajo, sobre un porta
objetos, como indica la figura.
2. Coloque el lado plano de la cucharilla debajo del porta objetos.
3. Separe la cinta adhesiva del porta objetos con suavidad y dndole sobre el
extremo de la cucharilla.

93

MTODO UNO
MTODO DOS
MTODO TRES

94

Sostenga eL hisopo con la mano

derecha, presione firmemente el
porta objetos contra el mango de la
cucharilla.
Separe con la mano izquierda las

posaderas del paciente aplique
presionando, el extremo de la
cucharilla cubierto con la cinta
adhesiva en varios sitios de la piel
que rodea el ano
Coloque de nuevo la cinta de

celofn sobre el porta objetos con
el lado adhesivo hacia abajo.
Para estar seguro de que la

cinta
se
adhiere
uniformemente
al
porta
objetos presione con un trozo
de algodn.
Observe con el microscopio, con abertura reducida del condensador y
utilizando objetivo x 10, en busca de los huevos de E. vermiculars, que
tienen las caractersticas siguientes;
Forma:
Oval, aunque asimtrica (aplanada en un lado y redonda en el lado opuesto)
Tamao: 50-6 O micras.
Envoltura: lisa y delgada, aunque con una lnea doble visible.

95

Contenido: pu.ede ser una masa granulosa (1) o un embrin del helminto,
plegado sobre s mismo (2)
Color:
transparente, incoloro
Si no se cuenta con cinta de celofn:

1. sese un hisopo de algodn.
2. Aplquese alrededor del ano (pero no dentro).
Sumerja el hisopo en un tubo de ensayo que contenga aproximadamente

0,5 mi (10 gotas) de solucin de cloruro sdico (reactivo No. 48) y
enjuguelo bien es esta solucin. Aspire el lquido con una pipeta Pasteur.
Pselo a un portaobjetos, ponga un cubreobjetos y examnelo.
PLATELMINTOS (GUSANOS PLANOS).
CESTODOS:
Gusanos planos, la forma adulta se adquiere por ingestin de la forma
larvaria. El adulto consiste en una serie de unidades llamadas progltides
que se desarrollan a partir del escolex.
Los progltidos contienen los rganos reproductores que al madurar
producen los huevos. El hospedero intermediario tiene las formas larvarias
que adquiere por ingestin de los huevos.
96

Los humanos pueden servir como hospederos intermediarios y definitivos

para infecciones por Hymenolepis nana y Taenia solium.
Huevo esfrico con doble cubierta externa que mide de 47 x 36m.
La cubierta interna mide 23 x 28m que encierra una oncosfera (los tres
pares de ganchos son apenas visibles).
Los caractersticos filamentos polares de esta especie tambin son apenas
visibles en el espacio entre las membranas interna y externa en las
posiciones 3 y 9 del reloj.
TAENIA SP.
a) Adulto: OBSERVE al microscopio y compuesto ejemplares adultos
de Taenia sp. Y distinga el Escolex provistos de ventosas y un
rostelo tpico, retrctil o no, con o sin coronas o crculos de ganchos y
el Estrbilo compuesto de segmentos o proglotidos: inmaduros,
maduros y grvidos; en los maduros diferencie estructuras del
sistema reproductor.
b) Huevo: en un preparado microscpico reconozca huevos de Taenia
sp. De forma esfrica con un embriforo que puede ser delgado o
muy grueso, radiado y poroso que toma la apariencia estriada.
Guese para sus observaciones en el dibujo adjunto.
TAENIA SAGINATA (RES) Y TAENIA SOLIUM (CERDO)

Conocido como tenia o solitaria.

97

TENIASIS.
Transmisin feco oral o por ingesta de alimentos contaminados.
Producen nerviosismo, falta de sueo y apetito, perdida de peso y dolor
abdominal.
Tenia de cerdo es ms invasiva que la de res.
TAENIA SOLIUM:
TAENIA SAGINATA:

98

CICLO BIOLGICO:
La forma infectante de la teniasis es el estadio larvario o cisticerco presente
en los msculos esquelticos del cerdo (Cysticercus cellulosae) o de
vacuno (Cysticercus bovis).
El mecanismo de transmisin en el hombre es el cisticerco, contenido en
carnes de cerdo o vacuno crudas o insuficientemente sometidas a coccin
el que es ingerido por va oral.
Accin patgena:
El parsito adulto de T. solium y T. saginata provoca leve irritacin en la
mucosa del intestino delgado, debido a la adhesin del escolex o bien
produce ocasionalmente oclusin intestinal. Los mecanismos patognicos
fundamentales son el expoliativo, es decir, la utilizacin por el parsito del
contenido intestinal del hospedero y el toxialergico por la produccin de
catabolitos pro el helminto.

99

Diagnostico:
Para el caso de teniasis el diagnostico se basa en el hallazgo de proglotidas
del parsito expulsadas por el paciente y mediante el examen microscpico
de heces en los que se encuentran huevos de forma esfrica.
HIMENOLEPIOSIS:
Definicin:
Infeccin parasitaria causada por los cstodes: Hymenolepis nana e
Hymenolepis diminuta, que se localizan en tercio inferior del intestino
delgado del hombre, especialmente nios. H. diminuta, es un parsito
comn del intestino delgado de ratas y ratones.
El parsito:
HYMENOLEPIS NANA E HYMENOLEPIS DIMINUTA
1. Lamina portaobjeto con adulto de Hymenolepis. Observacin al
microscopio estereoscopico y compuesto.
2. Preparacin microscpica de heces con huevos de parsito.
Morfologa:
a) Adulto: OBSERVE ejemplares adultos del parsito de forma aplanada
y acintados.
Hymenolepis nana Tenia enana mide 3 a 4 cm de longitud en tanto
que Hymenolepis diminuta mide de 20 a 60 cm de longitud. Distinga
en el esclex de ambas especies 4 ventosas y en caso de H. nana
un rostelo retrctil provisto de una corona simple de ganchos. En la
estrbila maduro del helminto distinga proglotidas de forma
trapezoidal, con poros genitales dispuestos todos hacia el mismo
lado y estructuras del sistema reproductor diferenciados y el la
grvida el tero sacular con numeroso huevos

100

b) Los huevos de Hymenolepis diminuta de 70 a 80 micras de dimetro

no presentan mamelones polares ni filamentos, el embrin hexacanto
presenta ganchos extendidos en pares abiertos en abanico.
c) Huevo: OBSERVE muestras de heces preservadas y reconozca huevos

de Hymenolepis nana, de 30 a 40 micras de dimetro, que se caracteriza
por presentar corteza gruesa, transparente, membranas, provista de dos
mamelones polares de donde nacen tres pares de filamentos, contiene
un embrin hexacanto con ganchos dispuestos en paralelo.

101

Ciclo biolgico:
La forma infectante de la Himenolepiosis en el hombre es el huevo y la larva
o cisticercoide.
El mecanismo de transmisin es a travs del agua y los alimentos
contaminados con huevos del parsito.
Para el caso de Hymenolepis nana existe una auto infeccin externa por
falta de higiene de las manos despus de defecar y una autoinfeccin
interna, a partir de huevos que eclosionan dentro del tubo digestivo de la
persona infectada desarrollando el cisticercoide que invade las vellosidades
intestinales. Las dos especies parasitas, H. nana y H. diminuta, presenta
un ciclo indirecto, con la intervencin de un hospedero intermediario
constituido por artrpodos de los gneros Tribolium y Tenebrio, en los que
desarrollan el cisticercoide. El hombre, la rata y los ratones adquieren la
infeccin por ingestin de los insectos en estado larvario.
Accin patgena:
El parsito Hymenolepis nana ocasiona reacciones inflamatorias de la
mucosa intestinal y destruccin de las vellosidades intestinales debido al
desarrollo de cisticercoides en su interior. El mecanismo patognico es
toxialergico, determinado por la absorcin de desechos metablicos del
parsito. Hymenolepis diminuta no produce efecto patgeno.
Diagnostico:
Se realiza por el hallazgo de huevos en el examen seriado de heces. Para
el caso de Hymenolepis nana, huevos con mamelones polares y filamentos.
102

MANUAL DE
LABORATORIO CLNICO
UNIDAD UROLOGA

103

ANATOMA Y FISIOLOGA DEL APARATO URINARIO.

Primero es vlido mencionar que el sistema urinario en s no existe.
Hay un sistema reproductor, el cual se divide en aparto genital y urinario. Es
ste ltimo en que basaremos nuestro trabajo. Otra cosa importante por
sealar es que en el hombre la evacuacin de la orina y la expulsin del
semen son acciones realizadas por distintos conductos, que despus de un
breve trayecto comparten la cavidad por donde sern evacuados y
expulsados, respectivamente. Por otro lado, la mujer tiene conductos y
esfnteres diferentes para ambas acciones.
FUNCIN:
El aparto urinario es el encargado de eliminar del organismo las sustancias
nocivas que se forman en las clulas y de contribuir a mantener la reaccin
alcalina de la sangre.
ESTRUCTURA:
Est formado esencialmente por dos riones que vuelcan cada uno su
contenido en un receptculo llamado vejiga, por medio de un tubo llamado
urter. La vejiga, a su vez evacua su contenido al exterior por medio de un
conducto llamado uretra. A continuacin estudiaremos esto rganos.
LOS RIONES:
Los riones son dos rganos que afectan la forma de un poroto, colocados
en el abdomen a ambos lados de la columna vertebral. Se hallan
aproximadamente a la altura de la ltima vrtebra dorsal y de las dos
primeras lumbares. Las ltimas dos costillas cubren su mitad superior.
Tiene unos 10 a 12 centmetros de largo, unos 5 o 6 centmetros de ancho y
unos 2,5 a 3,5 centmetros de espesor. Pesan unos 150 gramos cada uno.
Su color es rojo castao. Estn separados de la piel del dorso por varios
msculos, y de los rganos del abdomen por el peritoneo parietal.
Hay una capa de grasa que los rodea y los fija, permitiendo, sin embargo,
que se deslicen hacia abajo en cada inspiracin. El rin derecho es un
poco ms bajo que el izquierdo. Sobre su po9lo superior se hallan las
cpsulas suprarrenales. Su borde interno es cncavo y recibe el nombre de
hilio, pues llegan y salen por ese lugar la arteria renal y la vena renal. Se
halla tambin all la llamada pelvis renal, que tiene forma de embudo y en la

104

cual desembocan los llamados clices, que reciben cada uno la orina de
una de las pirmides renales.
Si se corta el rin paralelamente a sus dos caras, se puede observar que
su sustancia propia se halla formada por dos zonas de color distinto, a las
que se ha llamado medular, o interna, y cortical, o externa. La sustancia
medular, de color ms rojizo, forma 9 a 10 masas triangulares, llamadas
pirmides renales o de Malpighi. Su base est en contacto con la sustancia
cortical y su vrtice, que presenta 15 a 20 pequeos orificios, se halla en
comunicacin con un cliz renal, que lleva
la orina a la pelvis renal.
La cortical, de color ms amarillento, presenta en su parte ms externa
pequeos puntit0os rojos que corresponden a los corpsculos de Malpighi.
La sustancia cortical cubre a la medular y rellena tambin os espacios que
dejan entre s las pirmides de Malpighi.
Lo ms importante del rin es el llamado nefrn, cuyo funcionamiento, una
vez comprendido, nos explica el trabajo del rin. Hay aproximadamente un
milln de nefrones en cada rin. Cada nefrn se halla constituido por el
llamado corpsculo renal, o de Malpighi, y del llamado tbulo urinfero, que
tiene diversas partes, cuya explicacin no cabe mencionar en el presente
trabajo. Estos desembocan en canales colectores, que llevan la orina a los
clices y a la pelvis renal.
El corpsculo renal o de Malpighi contiene un vaso capilar ramificado, que
forma un ovillo que recibe el nombre de glomrulo. El glomrulo recibe la
sangre de un pequeo vaso llamado afrente, que le trae sangre arterial
procedente de la arteria renal.
La sangre sale del glomrulo por otro pequeo vaso llamado eferente. La
sangre proveniente del vaso eferente, en su mayor parte irriga a los tbulos
renales y va a dar despus e la vena renal, perdido ya su oxgeno, pero
eliminadas tambin las sustancias nocivas. Rodeando el glomrulo se halla
la llamada cpsula de Bowman, que tiene dos capas que dejan entre s un
espacio, espacio que comunica con el comienzo del tbulo renal.
En realidad, la cpsula de Bowman es la extremidad ensanchada del tbulo
renal que hunde o invagina el glomrulo.
La cantidad de sangre que pasa por el rin es de aproximadamente un litro
por minuto, vale decir que ms menos cada cinco minutos pasa toda la
sangre por el rin. Esa sangre proveniente de la arteria renal, tiene una
presin del glomrulo de 75 mm de mercurio, la cual tiende a filtrar la
sangre. Y aunque hay elementos que tratan de contrarrestar dicha filtracin
105

(presin osmtica de la sangre, presin del tejido renal y dentro del tubo
renal), filtran los glomrulos ms de 100 g de lquido por minuto.
Ese lquido contiene todos los elementos solubles del plasma sanguneo,
salvo las protenas. Eso dara una enorme cantidad de orina que si se
eliminara as hara que el organismo perdiese junto con las sustancias que
debe eliminar, otras que necesita.
Para evitar esto, los tbulos renales reabsorben aproximadamente el 99%
del agua que filtran los glomrulos y seleccionan las sustancias que esa
agua contiene disueltas, reabsorbiendo por completo algunas como la
glucosa, y dejando pasar parte de otras, como la sal. Otras no vuelven a
pasar por la sangre, como la creatina. La reabsorcin de parte de lo filtrado
a travs del glomrulo por los tbulos renales, es regulada por una
secrecin interna del lbulo posterior de la hipfisis.
Los urteres.
Los urteres son dos conductos de unos 25 a 30 cm. de largo, bastante
delgados, aunque de calibre irregular, que llevan la orina desde la pelvis
renal a la vejiga, en cuya base desembocan formando los llamados meatos
ureterales, cuya disposicin en vlvula permite a la orina pasar gota a gota
del urter a la vejiga, pero no viceversa.
Su interior est revestido de un epitelio y su pared contiene msculo liso.

106

La vejiga.
La vejiga es un depsito membranoso situado en la parte inferior del
abdomen y superior de la pelvis, destinada a contener la orina que llega de
los riones a travs de los urteres.
Cuando est vaca, sus paredes superior e inferior se ponen en contacto,
tomando una forma ovoidea cuando est llena. Su capacidad es de unos
300 a 350 g, aunque puede variar de una persona a otra y en ciertas
afecciones.
Su interior est revestido de una mucosa con un epitelio poliestratificado
pavimentoso, impermeable a la orina.
Su pared contiene un msculo liso, que contrayndose y con la ayuda de la
contraccin de los msculos abdominales, produce la evacuacin de la
vejiga a travs de la uretra.
A esto se llama miccin. La
parte de la vejiga que
comunica con la uretra est
provista de un msculo
circular o esfnter, que
impide
normalmente
la
salida involuntaria de la
orina.
Adems de estas fibras lisas
107

hay otras estriadas que ayudan a retener voluntariamente la orina.

La uretra:
La uretra es el conducto que permite la salida al exterior de la orina
contenida en la vejiga. Difiere considerablemente en ambos sexos. En la
mujer es un simple canal de 3 a 4 cm. de largo, algo ms estrecho en
ambas extremidades que en el resto de su trayecto.
Es casi vertical y se halla por delante de la vagina, abrindose en la vulva
por delante del orificio vaginal.
En el hombre la uretra mide de 18 a 20 cm. de longitud, y es de calibre
irregular, presentando partes ensanchadas y otras estrechadas. Adems no
es recta sino que presenta ciertos ngulos.
Tiene muchos segmentos: uretra prosttica (parte que pasa por la
prstata), uretra membranosa y uretra esponjosa, es decir, la rodeada por el
cuerpo esponjoso, la que a su vez puede subdividirse en varios segmentos.
Desde el punto de vista de sus enfermedades la uretra puede dividirse en
dos segmentos: la uretra anterior y la uretra posterior, separados por un
esfnter de msculo estriado, situado a unos 3,5 cm. de la vejiga.
Las hemorragias o
secreciones que se
producen en la
primera, salen al
exterior y las que
se producen en la
segunda, pueden
volcarse
en
la
vejiga.
La
inflamacin
de
cada uno de estos
sectores produce
tambin sntomas
distintos.
En
la
uretra
desembocan
diversas glndulas en las que pueden acantonarse una infeccin de la
uretra.
108

El APARTO URINARIO
UROLOGIA
LA ORINA:
La orina es un lquido acuoso transparente y amarillento, de olor
caracterstico, secretado por los riones y eliminado al exterior por el
aparato urinario. En los laboratorios clnicos se abrevia u o uri (del latn
urinam).
Despus de la produccin de orina por los riones, sta recorre los urteres
hasta la vejiga urinaria donde se almacena y despus es expulsada al
exterior del cuerpo a travs de la uretra, mediante la miccin.
FUNCIONES DE LA ORINA:
Las funciones de la orina influyen en la homeostasis como son:
Eliminacin de sustancias txicas producidas por el metabolismo celular
como la urea.
Eliminacin de sustancias txicas como la ingesta de drogas.
El control electroltico, regulando la excrecin de sodio y potasio
principalmente.
Regulacin hdrica o de la volemia, para el control de la tensin arterial.
Control del equilibrio cido-base.
COMPOSICION DE LA ORINA:
En los seres humanos la orina normal suele ser un lquido transparente o
amarillento. Se eliminan aproximadamente 1,4 litros de orina al da. La orina
normal contiene un 96% de agua,un 4% de slidos en solucin y
aproximadamente 20g de urea por litro. Cerca de la mitad de los slidos son
urea, el principal producto de degradacin del metabolismo de las protenas.
El resto incluye nitrgeno, cloruros, cetosteroides, fsforo, amonio,
creatinina y cido rico.
Composicin de la orina en gm/100 ml de fluido - Urea: 2.0 - cido rico:
0.05 - Sales inorgnicas: 1.50
La orina puede ayudar al diagnstico de varias enfermedades mediante el
anlisis de orina o el urocultivo.

109

CONTENIDOS ANORMALES DE LA ORINA:

Glucosuria:
Es la presencia de glucosa en la orina y aparece sobre todo en la diabetes
mellitus.
Hematuria:
Es la presencia de sangre en la orina, debiendo descartarse: infeccin
urinaria, litiasis urinaria, glomerulonefritis, neoplasias (cncer de vejiga,
urter, rin, prstata, etc.)
Bacteriuria:
Es la presencia de bacterias en la orina, cuando normalmente es estril.
Piuria:
Es la presencia de pus en la orina.
Proteinuria:
Es la presencia de protenas en la orina como suele observarse en:
glomerulonefritis, infeccin urinaria, intoxicaciones, diabetes, etc.
PRODUCCIOIN DE LA ORINA:
Los riones se encargan de la elaboracin y la excrecin de orina. La
sangre arterial que ingresa en los riones por la arteria renal, termina
formando la unidad elemental de la maquinaria renal que es el glomrulo
renal. Cada da, los riones filtran 180 litros de sangre y producen una
media de 1,5 litros de orina. En cada glomrulo renal la sangre se filtra por
un fenmeno de smosis: El glomrulo se descarga de agua, de sustancias
minerales y biolgicas.
Esta orina primaria circula por un sistema de tbulos que componen la
nefrona como el tbulo contorneado proximal, asa de Henle, tbulo
contorneado distal, donde la orina por un lado se enriquece sucesivamente
de diversas sustancias como urea, amonaco, urocromo, bicarbonato
(excrecin) y por otro lado se descarga de ciertos compuestos recuperados
por el organismo como el agua, glucosa y sales minerales (reabsorcin).

110

Los fenmenos de excrecin y de absorcin son regulados por varias

hormonas, como la hormona antidiurtica. La orina que circula por todos los
tbulos contorneados distales es reunida en los tbulos de Bellini, despus
stos se unen en los clices renales y en los urteres que desembocan en
la vejiga urinaria. Una vez que el contenido vesical alcanza un nivel, el
deseo de orinar se transmite al cerebro para vaciar la vejiga durante la
miccin.
ANALISIS DE ORINA:
El anlisis rutinario de orina es una medicin por mtodos fsicos y qumicos
para medir diferentes parmetros qumicos y microscpicos para
diagnosticar la presencia de infecciones urinarias, enfermedades renales, y
otras enfermedades generales que producen metabolitos en la orina.
PARA QU SE REALIZA EL ANLISIS?
Se utiliza para evaluar la funcin de los riones, de las diferentes hormonas
que lo regulan, y situaciones de la regulacin de lquidos en el cuerpo
humano.
El anlisis de orina se realiza como estudio rutinario para discriminacin del
estado de salud, para el diagnstico precoz de diferentes enfermedades,
para el control de la diabetes o enfermedades renales. Tambin para
diagnosticar infecciones urinarias o la presencia de enfermedades renales.
PROCEDIMIENTO DE OBTENCIN:
Se debe de tener un envase limpio, mejor si es estril.
La mejor hora para tomar una muestra es la primera hora de la maana, ya
que est ms concentrada y puede mostrar mejor las posibles
irregularidades.
Para recoger la orina se limpiar la cabeza del pene o la vagina con agua y
jabn secando con una toalla seca y limpia.
Comenzar a orinar y dejar caer la primera parte de la orina al inodoro, luego
poner el envase limpio para recoger unos 50 a 80 cc y separar el envase de
la salida de la orina.
Luego se cierra el envase adecuadamente para su transporte y entrega al
personal sanitario encargado de la realizacin del anlisis.

111

El mejor anlisis de orina se realiza con una recogida de menos de 15

minutos antes de realizar el mismo.
El exceso de vitamina C tomada por diferentes razones puede interferir en
los resultados de un anlisis rutinario de orina.
Hay medicamentos que modifican el color de la orina y no debe de ser
tomado como una anormalidad, entre ellos estn: La cloroquina, el hierro, la
levodopa, la nitrofurantona, la fenotiacina, la fenitona, la riboflavina y el
triamterene.
ANALISIS FISICO:
Color anormal de la orina
La orina de un color anormal aparece diferente del color amarillo paja usual
y puede ser turbia, oscura o teida de sangre.
Nombres alternativos
Decoloracin de la orina
CONSIDERACIONES GENERALES:
Se debe informar al mdico de cualquier cambio en el color de la orina o de
la presencia de un color anormal en la orina que no pueda ser asociado con
el consumo de alimentos o drogas. Esto es especialmente importante si
sucede durante ms de uno o dos das, o cuando hay episodios repetitivos.
Algunos colorantes utilizados en ciertos caramelos pueden excretarse por la
orina y tambin existe una gran variedad de drogas que pueden colorear la
orina.
La orina opaca, turbia u oscura es caracterstica de una infeccin de las vas
urinarias y tambin puede tener un olor desagradable. La orina oscura
tambin puede ser producto de la presencia de bacterias, moco, glbulos
blancos o rojos, clulas epiteliales, grasa o fosfatos.
La orina clara y de color marrn oscuro es caracterstica de un trastorno
heptico, como la hepatitis viral aguda o la cirrosis.
Una orina opaca de color rosado, rojo o marrn puede ser un efecto
secundario de un medicamento o puede ser producto del consumo reciente
de remolachas, moras o ciertos colorantes de los alimentos. Tambin es
caracterstica de un trastorno en las vas urinarias en el que se presenta
sangrado, tales como cistitis, inflamacin de la prstata, cncer de rin,
112

tumor en la vejiga, tuberculosis, clculos en la vejiga, infeccin renal, tumor

de Wilms (en los nios) o hipernefroma. La anemia hemoltica y la porfiria
tambin pueden hacer que la orina tome esos colores. La coloracin puede
tambin presentarse despus de un traumatismo renal o de las vas
urinarias.
Una orina amarilla oscura o anaranjada puede ser producida por el uso
reciente de laxantes o por el consumo de complejos de vitamina D o
caroteno. La orina naranja suele ser causada por el Pyridium (utilizado en el
tratamiento de las infecciones urinarias), la rifampina y la warfarina.
El color verde o azul en la orina se debe al efecto de un color artificial en los
alimentos o drogas y tambin puede ser el resultado del consumo de
medicamentos como la amitriptilina, la indometacina y la doxorubicina.
CAUSAS COMUNES:
Alimentos (remolachas, moras u otros alimentos rojos naturales)
Colorantes de los alimentos
Algunas drogas
Infeccin de las vas urinarias
Hepatopatas como la hepatitis viral aguda o la cirrosis
Otras enfermedades (no se presentan en orden de probabilidad y algunas
son extremadamente improbables):
Necrosis tubular aguda
Uropata obstructiva unilateral aguda
Sndrome de Alport
Carcinoma de la vejiga urinaria
Infeccin crnica o recurrente de las vas urinarias
Prostatitis crnica
Endocarditis
Cistitis aguda
Glomerulonefritis aguda
Glomerulonefritis crnica
Hepatitis
113

Nefrolitiasis (clculos renales)

Cncer de prstata
Carcinoma de clulas renales
Rabdomilisis
SE DEBE LLAMAR AL MEDICO SI:
Se debe consultar con el mdico si se presenta:
Orina clara de color marrn oscuro, especialmente si est acompaada de
heces plidas y ojos y piel amarillenta
Orina de color rosado, rojo o marrn humo y no se esperaba el cambio de
color (debido a un medicamento)
Color anormal de la orina que persiste sin explicacin.
OLOR DE LA ORINA:
Es una prueba que se realiza para evaluar el olor de la orina.
Forma en que se realiza el examen
Nios o adultos:
Para tomar la muestra de orina, la persona recoge una cantidad limpia ("de
la mitad de la miccin"). Para esto, los nios y los hombres deben tener la
cabeza del pene limpia, mientras que a las nias y las mujeres se les debe
lavar el rea que hay entre los labios de la vagina con agua y jabn y
enjuagar bien. Cuando se inicie el proceso de eliminacin de la orina, se
debe dejar que una pequea cantidad de sta caiga en el inodoro (as se
limpia la uretra de sustancias contaminantes). Posteriormente, en un
recipiente limpio se recomienda recoger aproximadamente 30 a 60 ml (dos
onzas) de orina y retirarlo. Finalmente, se debe entregar este recipiente al
mdico, a su asistente o al laboratorio.
PREPARACION DEL EXAMEN:
No se necesita preparacin especial para este examen, pero si la muestra
va ser tomada a un beb, puede ser necesario un par de bolsas
recolectoras de orina adicionales.

114

Lo que se siente durante el examen

El examen involucra slo una miccin normal, por lo tanto no produce
ninguna molestia.
Valores normales
El olor normal de la orina es aromtico.
Significado de los resultados anormales
El olor anormal de la orina puede indicar:
Insuficiencia heptica (hgado)
Cetonuria
Enfermedad de la orina del azcar del arce (muy poco frecuente)
Fenilcetonuria (poco frecuente)
Fstula rectal
Infeccin de las vas urinarias
Cules Son Los Riesgos
Esta prueba no representa ningn tipo de riesgo.
Consideraciones especiales
El olor de la orina aumenta al levantarse; la descomposicin produce un olor
semejante al amonaco.
El esprrago produce un olor caracterstico en la orina.
EL EXAMEN QUE SE LE REALIZA A LA ORINA SE DIVIDE EN 3
EXAMEN MACROSCOPICO (FISICO)
Color (amarillo,amarillo claro, ambar,icterico, rojizo etc)
Olor (suigeneris,amoniaco y aromatico)
Aspecto (claro, ligeramente turbio y turbio)
EXAMEN QUIMICO (TIRAS REACTIVAS)
Densidad
Glucosa
Bilirrubina
115

Nitritos
Cetonas
Ph
Urrubirinogeno
Eritrocitos
Leucositos
Sangre
EXAMEN MICROSCOPICO (sedimento urinario)
ELEMENTOS ORGANIZADOS
Leucocitos
Eritrocitos
Celulas epiteliales
Celulas de la vejiga urinaria
Cilindros
Hialinos
Granulosos
Hematicos
Lelucocitarios
ELEMENTOS NO ORGANIZADOS
Cristales de acido rico
Cristales magnesiano
Cristales de oxalato de calcio
Cristales fosfatoaminomagnesianos
Cristales de fosfatos triples
Cristales de calcio
Sales
Uratos amorfos
Fosfatos amorfos
116

OTROS ELEMENTOS
Bacterias
Espermatozoides
Pelos
Glbulos de grasa
Fibras
Levaduras
EXAMEN MICROSCOPICO DE SEDIMENTO URINARIO
Para conseguir los mejores resultados deber emplearse una
muestra de orina reciente, concentrada y vaciada con limpieza. La primera
muestra de orina de la maana suele estar suficientemente concentrada. La
limpieza de los genitales externos con agua y jabn, antes de la miccin,
prevendr la contaminacin de la orina con secreciones vaginales y clulas
del meato uretral. Si se retrasa el examen del sedimento, la muestra urinaria
puede guardarse en un refrigerador durante un corto plazo, que no exceda
de una hora, puesto que las clulas y los cilindros empiezan a lisarse de 1 a
3 horas.
Procedimiento:
Debe mezclase bien la muestra y posteriormente dejar caer 10ml de orina
en un tubo de centrfuga graduado. Centrifugar a 2000rpm durante 5
minutos. Quitar el sobrenadante decantndolo en otro tubo y volver a
suspender el sedimento. Seguidamente , se pone una gota de sedimento
redispersado sobre un rea de un portaobjetos y un cubreojetos deslizante.
Realcese el examen con pequeo aumento (10x) y con luz atenuada.
Deber moverse constantemente el micromtrico mientras se est
observando. Puede usarse tincin, segn el tipo de muestra y la experiencia
del examinador. Posteriormente, observa en seco fuerte (40 X) para
observar eritrocitos, leucocitos y realizar sus respectivos recuentos.
El sedimento normal no se encuentra libre de clulas o cilindros, pero
contiene un nmero limitado de elementos formes.
Es difcil proporcionar una definicin precisa de la normalidad, pero la
presencia de un o dos glbulos rojos por campo con objetivo seco fuerte o
uno o dos leucocitos y una cuantas clulas epiteliales no se considera
anormal. La orina de las mujeres adultas puede contener tambin un gran
nmero de clulas epiteliales escamosas de la pares vaginal. Puede
encontrarse tambin en forma anormal algn cilindro hialino.
117

EXAMEN QUIMICO DE TIRAS REACTIVAS

EXAMEN BIOQUMICO DE ORINA
Examen bioqumico se realiza a travs de tiras reactivas, este es un medio
rpido de realizar 10 exmenes, que tienen como principio reacciones
colorimtricas.
Presenta beneficios, ya que estandariza la lectura de los resultados, no
varia con la rotacin del personal, aumenta la precisin de la lectura,
impresin automtica e inmediata de los resultados, adems permite
identificar la muestra con un nmero de la secuencia programada.
Las pruebas son:
PH:
El Ph es el que mide la concentracin de iones de hidrogeno
Ligeramente cido, una variacin puede ser reflejo de trastornos cido
bsico de origen metablico o respiratorio, clculos renales, infeccin de las
vas urinarias.
Acido es de 5 a 6.5
Neutro 7
Alcalino 7.5 a 9
Proteinas:
Que evala una proteinuria, microalbuminuria

118

Glucosa:
til en la deteccin de diabetes sacarina lo que permite un mejor pronostico
para el paciente (principalmente en el embarazo), tambin es til en la
deteccin de trastornos del SNC, de la resorcin tubular renal (umbral renal
160-180mg/100ml).
Cetonas:
Cetonuria como resultado de inanicin, anorexia, vmitos, fiebre,
acetoacidosis, alteraciones del metabolismo (antes que aparezcan en
suero)
Pigmentos biliares como:
Bilirrubina:
Primeros indicadores inflamacin y dao Heptico (antes de ictericia),
hepatitis, cirrosis, obstruccin biliar , cncer.
Urobilingeno:
Indicador de enfermedad heptica, trastornos hemolticos
Nitritos:
Indicador de presencia de bacterias Gram negativo, puede reflejar presencia
de trastornos como cistitis, riesgo de infeccin urinaria.
Sangre y Hb:
Hematuria hemoglobinuria (desintegracin de los GR dentro de VU,
generalmente la vejiga). Interviene el examen macroscpico.
Densidad:
Indicador del grado de hidratacin corporal.
Leucocitos:
Posible infeccin de las vas urinarias, inflamacin de las VU,
glomerulonefritis aguda, adems esta prueba presenta la ventaja de que
detecta leucocitos que pudieron ser lisados, y son cuantificables.

119

En conjunto estas pruebas son tiles para detectar casos en que quiz no
se manifiesta la necesidad de un cultivo, que es el estndar de oro para el
diagnostico definitivo de un proceso.
Sin embargo es importante que los mdicos tengan buena comunicacin
con personal capacitado, entre estos Qumicos Bilogos y tcnicos de
laboratorio competentes que sepan evaluar los resultados de las pruebas de
laboratorio obtenidos ya que factores como la actividad fsica, dieta,
metabolismo corporal, funcin endocrina, posicin corporal, pueden influir
en los resultados obtenidos.
EXAMEN MICROSCOPICO DEL SEDIMENTO URINARIO
1. Elementos orgnicos:
A. ClulasLas clulas epiteliales del tracto urinario suelen ser
clasificadas como: de tracto superior, medio o inferior de
acuerdo a su morfologa. La mayora del tracto urinario est
formada por un epitelio que posee varias capas (epitelio
transicional).
Las caractersticas de las clulas dependen de la posicin que
ocupen las mismas en esas capas y no del lugar del tracto
urinario de donde provenga.
Las clulas de la superficie son grandes, planas, ovales o romboides. Estas
clulas de las capas superficiales pueden encontrarse en la orina de
personas sanas. Un aumento de estas clulas implica que aument la
exfoliacin y esta puede ser producto de una irritacin. Por eso pueden
aumentar en un cuadro de inflamacin.

120

epitelio superficial, renal y pavimentoso
Dos clulas transicionales provenientes de las capas profundas del tracto

urinario. Aumento: 400 veces.
Clulas del epitelio tubular renal:
Las clulas del epitelio tubular renal tiene aproximadamente el mismo
tamao que un leucocito, y contienen un gran ncleo redondo, midiendo
aproximadamente menos de 15u. Los cuerpos grasos ovales son clulas del
epitelio tubular que contienen glbulos de grasa; en general, el ncleo es
invisible.
La observacin de un gran nmero de clulas epiteliales renales
pueden
indicar una degeneracin tubular activa. Estas clulas se
encuentran en la orina de pacientes con necrosis tubular y papilitis
necrosante.

121

Epitelio tubular renal . Aumento 100X

Clulas epiteliales de la vejiga:
Las clulas epiteliales de la vejiga son mayores que las tubulares renales,
poseen un ncleo redondo y varan de tamao segn la profundidad de
origen del epitelio de transicin. Las clulas superficiales son grandes y
planas, con ncleo pequeo. En ocasiones se ven cmulos o capas.
Algunas tienen cola y se parecen a las clulas epiteliales de la pelvis renal.
Un sedimento con muchas clulas epiteliales superficiales de vagina, con

leucocitos y hemates, producto de una mala recoleccin de la muestra.
Aumento: 250 veces
Cilindros:
Los cilindros se encuentran a menudo a los largo del borde del
cubreobjetos. Debe contarse el nmero de cilindros por campo a pequeo
aumento, por 10 campos. Se pone el gran aumento y se determina la clase
de cilindros presentes. El dimetro de los cilindros vara en funcin del
tamao del tbulo renal o del conducto colector donde originan. Su forma
cilndrica se evidencia al apretar ligeramente el borde del cubreobjetos y
122

observar cmo se enrollan los cilindros. Sus extremos son en general

redondeados, pero pueden ser aplanados, irregulares o fusiformes.
Prcticamente todos los cilindros tienen una matriz hialina, que puede tener
inclusiones como clulas descamadas procedentes del revestimiento de los
tbulos, piocitos o glbulos rojos. Los cilindros se clasifican de acuerdo con
el material que contiene.
Cilindros hialinos:
Los cilindros hialinos son plidos, incoloros y ocasionalmente refringentes.
Se les ve mejor cuando se reduce considerablemente la intensidad de la
luz. Estos cilindros se forman del gel de las protenas que han cruzado
probablemente la membrana capilar glomerular.
Cilindros Hialinos de delicada apariencia y tamao pequeo. Aumento: 160

veces
Cilindros hialinos:
Est compuesto por una protena de alto peso molecular (mucoprotena de
Tamm-Horsfall) que se produce y elimina en cantidades muy pequeas en
condiciones normales.

123

Cilindros granulares gruesos:

Contienen material granular homogneo, de grasa o de clulas
degeneradas que aparecen como grnulos. Son claros, incoloros y de
apariencia densa. Si hay grasa, pueden aparecer como grnulos
refringentes.
Los cilindros granulares gruesos pueden representar las etapas iniciales de
la degeneracin de los cilindros de clulas epiteliales.
Estos cilindros degeneran despus para formar cilindros granulares finos y
terminan como cilindros serosos o grasos , si ocurre inicialmente el
reemplazo con la grasa.
Cilindros granulosos: Ocasionalmente pueden aparecer en personas sanas,

aunque su presencia se relaciona con enfermedades agudas y crnicas del
rin. Suelen ser ms grandes que los hialinos y presentar inclusiones
granulares. No es raro observar una mezcla de cilindros hialinos y
granulosos.
Cilindros granulares finos:
Contienen grnulos menudos en todo el cilindro o en una parte

124

Cilindro granular fino.
Cilindros creos:
Son amarillos y homogneos, tienen contornos ms netos que los cilindros
hialinos. Suelen tener extremos irregulares y quebrados. Estos cilindros
tienen un contorno altamente refringente y son relativamente anchos con
hendiduras caractersticas.
Cilindros creos: Suelen ser ms anchos que los hialinos, muestran una
refringencia mucho mayor y no son fciles de omitir. Presenta muescas o
hendiduras finas en sus bordes, que se dirigen perpendicularmente al eje
longitudinal del cilindro.
Su presencia indica siempre una enfermedad renal crnica grave en un
paciente con insuficiencia renal crnica avanzada, pero en ocasiones puede
observarse en la fase de recuperacin de la diuresis luego de una perodo
de anuria.
Cilindros celulares tubulares:
Estn formados de clulas epiteliales tubulares fusionadas. La
degeneracin de los cilindros en un material granular grueso y fino es una
funcin de la edad y permite la inferencia de que ha habido estasis en el
nefrn.

125

Cilindros de Clulas tubulares.

Cilindros leucocitarios:
Se componen usualmente de muchos leucocitos en una forma cilndrica que
indican su origen renal. Estos cilindros pueden observarse en enfermedades
intersticiales, como una pielonefritis, una infeccin intrarrenal causada por
un microorganismo Gram negativo (usualmente), que puede entrar del
torrente sanguneo (septicemia) o de infecciones de la vejiga y/o uretra.
Las protenas acompaan usualmente a la infeccin, las cuales se
condensan y precipitan formando cilindros de leucocitos.
Cilindros leucocitarios: Se producen cuando ocurre una exudacin intensa

de eritrocitarios leucocitos y al mismo tiempo se eliminan protenas por el
tbulo.

126

Cilindros:
Aparecen de color amarillo con el objetivo seco dbil. Si hay muchas clulas
en cada cilindro. La matriz no ser visible. La enfermedad o dao a el
glomrulo da como resultado la fuga de glbulos rojos y protenas,
formndose cilindros eritrocitarios sobre una matriz proteica.
Cilindro eritrocitario.
Cilindros eritrocitarios: Se componen de eritrocitos hinchados que se

adhieren a una sustancia fundamental hialina. Indican siempre el origen
renal de la hematuria y por consiguiente se trata de un hallazgo muy
valioso.
Cilindros anchos:
:Los cilindros anchos (de falla renal) son de dos a seis veces ms anchos
que los cilindros ordinarios. Usualmente son serosos, granulares o
celulares. Se piensa que surgen en los tbulos de recoleccin como

127

resultado de una produccin de orina marcadamente

probablemente debida a una enfermedad renal severa.
disminuida,
Cilindro ancho seroso y celular.

C.Leucocitos:
Con gran aumento, los leucocitos neutrfilos aparecen como esferas
redondas granulosas de unas 12u de dimetro, mayores que los hemates.
A fin de distinguir entre un leucocito y una clula epitelial renal pequea, el
ncleo puede ser visualizado con ms claridad haciendo pasar por debajo
del cubre una gotita de cido actico glacial. Las clulas epiteliales tienen
un gran ncleo nico y redondeado, y los leucocitos tienen un ncleo
segmentado que algunas veces puede aparecer como varios ncleos
redondos pequeos.
El tipo predominante de leucocitos que aparece en la orina es el
leucocito polimorfonuclear. Ciertos neutrfilos son mayores que los
leucocitos normales y su citoplasma granular tiene movimiento brownianos.
Estas clulas son llamadas clulas de movilidad granular o brillantes.
Originalmente se les defini como patognomnicas de la pielonefritis, pero
ahora se les reconoce como resultado de una orina hipotnica.
La presencia de grandes cantidades de leucocitos indica una
infeccin bacteriana del tracto urinario. La piuria puede tambin encontrarse
en la glomerulonefritis aguda. Grandes cantidades linfocitos mononucleares
en un paciente que tenga un rin trasplantado, puede indica un fenmeno
temprano de rechazo.
Leucocito bien conservado y mal conservado

128

Clulas Blancas o Leucocitos. El centro es ms granuloso por la presencia

del ncleo. Aumento: 400 veces.
Si adems de la leucocituria se evidenciaran cilindros leucocitarios
procedentes de los tbulos, el origen sera renal y el diagnstico
pielonefritis.
En los casos de leucocituria estril (sin desarrollo bacteriano en los
urocultivos) deber descartarse tuberculosis, micosis, clamidias, herpes
simple as como tambin Nefritis intersticial medicamentosa.
Leucocituria que da indicio de pielonefritis y leucocituria estril. Aumento

160X
B. Eritrocitos:
A gran aumento, los eritrocitos aparecen como discos verdes plidos.
Pueden variar algo de tamao, pero habitualmente son de unas 7u de
dimetro. Si la muestra que se examina no es reciente, las clulas
aparecern como crculos tenues, incoloros o como clulas fantasmas
porque la hemoglobina se ha liberado , en orinas de densidad elevada, los
129

eritrocitos adoptan un aspecto dentado y aparecen como clulas pequeos

con bordes arrugados.
En la misma muestra cabe observar clulas lisas con repliegues y
dentelladas. Los eritrocitos pueden confundirse con gotas de aceite, sin
embargo, tienen una gran variedad de tamaos, con altamente refringentes
y no se enredan.
Las levaduras muestran de modo habitual la gemacin.
Si hay dudas en la identificacin pueden efectuarse dos preparaciones y
aadirse unas gotitas de cido actico. Los eritrocitos se lisarn en la
preparacin acidificada.
El hallazgo de ms de uno de dos eritrocitos por campo con objetivo seco
fuerte, es una condicin anormal. Puede indicar una variedad de
enfermedades renales o sistmicas, incluyendo traumas renales. Tambin
se puede encontrar despus del ejercicio exagerado.
Puede seguir su aparicin a una cateterizacin traumtica, al paso de
clculos o a contaminacin por la sangre menstrual.
La hematuria tiene lugar en la pielonefritis, tuberculosis del tracto
genitourinario, cistitis, prostatitis, tuberculosis del tracto genitourinario,
cistitis, prostatitis, clculos renales, tumores renales y otros padecimientos
malignos del tracto urinario y enfermedades hemorrgicas, como la
hemofilia, etc. Los eritrocitos tendern a lisarse o disolverse si se les deja
reposar en una orina alcalina

130

Clulas Rojas o Eritrocitos. Note la forma bicncava de los mismos.

Aumento: 400 veces.
En las orinas hipotnicas se hinchan y en las hipertnicas se arrugan, la
morfologa de los hemates puede revelar el origen glomerular o
postglomerular de la hematuria.
Los eritrocitos que atraviesan el canal glomerular aparecen "dismrficos", es
decir, se desforman, fragmentan y tienen muescas. Estas clulas se
diferencian de los hemates uniformes de origen postglomerular. La
hematuria glomerular se sospecha cuando ms del 80% de los hemates
tienen aspecto dismrfico. De todas formas, la observacin de hemates
eumrficos no descarta la enfermedad glomerular.
Los acantocitos, es decir los hemates en forma de anillo y evaginaciones,
son caractersticos de la enfermedad del glomrulo. Un 5% de ellos con
relacin a la totalidad de los eritrocitos sugiere fehacientemente una
hematuria glomerular, probabilidad que aumenta aun ms si el porcentaje
aumenta a un 10%. Elementos que apoyan la sospecha de una hematuria
de origen glomerular son la presencia simultnea de cilindros eritrocitarios,
granulosos, hialinos.

131

Acantocitos y hemates dismrficos. Aumento 400 veces.
Eritrocitos dismrficos. Aumento 160X

C. Bacterias:
La orina normal no contiene bacterias, si se utiliz la tcnica adecuada para
obtener la muestra, y si la muestra se protegi de una contaminacin antes
del examen, la presencia de bacterias en nmero importante, puede indicar
una infeccin del tracto urinario. La presencia de leucocitos ayuda a
diferenciar entre contaminacin e infeccin. Los bacilos pueden ser
reconocidos muy fcilmente, sin embargo, los cocos, se pueden confundir
con cristales amorfos.
Puede formarse una pelcula seca extendiendo una o dos gotas del
sedimento urinario en un portaobjetos. Luego puede teirse con los
132

mtodos de Gram. La orina no centrifugada, se examina de la misma

forma. Si se identifican bacterias en la muestra no centrifugada con una
lente de inmersin, significa que existen ms de 100,000 microorganismos
por ml lo cual representa una bacteriuria importante. Lo ms frecuente es
de ver bacilos, puesto que los microorganismos entricos son los que ms
comnmente se encuentran en las infecciones del aparato urinario.
B.Elementos inorgnicos:
D. Cristales de orina cida:
E.
Acido rico:
Pueden aparecer en la orina en gran variedad de formas y colores. Pueden
ser el resultado de una patologa o de metabolismo normal.
El cido rico aparece como agujas, en forma hexagonal, de roseta, de
piedra de afilar o como placas rmbicas. Los cristales pueden ser
incoloros, amarillos o cafs.
El aumento del cido rico indica un aumento del metabolismo de las
purinas y se pueden encontrar cristales de cido rico en casos de fiebre,
leucemia, algunas enfermedades tubulares renales y gota.
cido rico: Grupos de cristales. Aumento: 100 veces

133

cido rico en forma de rombo y de roseta.

Oxalato de Calcio:
Se observan como sobres refringentes en formas de octaedro.

134

Cristales de Monohidrato de Oxalato de Calcio. Aumento: 400 veces.
Oxalato de calcio: Es incoloro y muy birrefringente. Es caracterstica su

forma en sobre de carta. Se producen con gran frecuencia luego de la
ingesta de alimento ricos en oxalato como el brcoli.
Uratos amorfos:
Son grnulos amarillos rojos se ven con tirosina. Se encuentran
ocasionalmente en la orina de pacientes con problemas hepticos. Cuando
existen padecimientos hepticos severos, estos aminocidos no son
metabolizados.

135

Uratos: Se encuentran en forma amorfa en orinas cidas o conformando un

cilindro, lo que puede llevar a confusin. Cuando se eliminan en grandes
cantidades, se reconocen macroscpicamente como un precipitado rojopardo (polvo de ladrillo).
Urato diamnico: Aparece en orinas ligeramente alcalinas como pequeas
esferas de color amarillo pardo. No tiene ningn significado diagnstico
especial.
Tirosina:
Los cristales de tirosina, aparecen como agujas finas incoloras y
usualmente en aglomeraciones. Se encuentran usualmente junto a cristales
de leucina debido a la misma patologa que stos.
Cistina:
Son incoloros, hexagonales, aplanados, pueden confundirse con cristales
de cido rico. Indican cistinuria, una condicin en la cual se forman
clculos de cistina en el rin y la cistinosis, un error congnito del
metabolismo en el cual los cristales de cistina se encuentran en la orina, el
sistema reticuloendotelial, el bazo y los ojos.
Cistina: Se detectan en orinas cidas como cuadros hexagonales incoloros

Colesterol:

136

Se encuentran en raras ocasiones, como placas aplanadas e incoloras con

muescas en las esquinas.
Sulfamidas:
Se observan glbulos densos , verdosos (sulfadiacina) o como haces de
trigo con unin excntrica (acetilsulfamida). Se observan ocasionalmente en
pacientes con orina cida que no toman suficiente agua, al utilizar estos
medicamente.
F. Cristales de orina alcalina:
Fosfatos:
Se presentan normalmente en orina alcalina fosfatos amorfos, como un
precipitado fino, y fosfatos triples incoloros, en forma de prismas de 3 a 6
lados, en forma de atad.
Han sido causa de debate sobre la significacin clnica de estos en la orina.
En la prctica solo el fosfato de amonio y magnesio ha sido estimado como
significativo. Esto hace suponer una infeccin con una bacteria productora
de ureasa como Proteus.
Fosfatos de Amonio y Magnesio: Observe la tpica forma de "ataud" que

presentan. Aumento: 100 veces.
Otros fosfatos que aparecen a todos los pH son los fosfatos de Calcio.

137

Fosfatos de Calcio: Placas y prismas. Aumento: 100 veces.

Carbonato de Calcio:
Se observan como esferas o halterios incoloros finos.
Los Cristales de Carbonato de Calcio son hallados solos o unidos. Aumento:

160 veces
Uratos amnicos:
Se observan como estrellas deforme cafs.

138

Urato Amnico: note la forma de mrula con espculas. Aumento: 400

veces.
Acido hiprico:
Estos se encuentran en raras ocasiones, pueden encontrarse tanto en orina
cida como alcalina o neutra. Se observan como placas romboidales y
prismas de 4 lados. Deben distinguirse de los fosfatos triples.
2.Cuerpos Extraos, levaduras y parsitos:
G. contaminantes y artefactos:
Se pueden identificar hilos de algodn, cabellos, grnulos de almidn, fibras
de madera y de lana que permite determinar el carcter contaminado de la
muestra, por lo que no tiene importancia.
Leucocitos con bacterias

H. levaduras:
Se pueden encontrar clulas de levaduras en el sedimento urinarios.
Algunas veces se confunden con hemates.

139

Difieren en que son ovoides en lugar de ser redondos, son incoloros , de

tamao variable y frecuentemente muestran gemaciones. Si existe duda. La
adicin de cido actico lisar los glbulos rojos, pero dejar las clulas de
levadura intactas. Las grandes cantidades de levaduras con hifas sugieren
vaginitis.
micelio, levaduras
I. Parsitos:
El parsito visto con mayor frecuencia en orina es la Trichomona vaginalis.
Es un organismo unicelular con flagelos anteriores y membrana ondulante.
En apariencia, el parsito puede semejar una clula epitelial ovoide
aplanada, pero usualmente Trichomonas vaginalisle reconoce por sus
movimiento natatorios a travs del sedimento y los movimiento de sus
flagelos, as como la caracterstica membrana Ondulante.
Tambin pueden encontrarse parsitos y huevos de parsitos fecales, como
consecuencia de contaminacin.

140

BIOSEGURIDAD
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD
Kit de bioseguridad (lentes, guantes, bata, mascarilla)

Lavar correctamente cristaleria
Esterilizar correctamente las cristaleria
Limpiar el microscopio antes y despus de usar
Rotular los tubos
Limpiar el area de trabajo
.

141

MANUAL DE
LABORATORIO CLINICO
UNIDAD HEMATOLOGA

142

Es la ciencia mdica que se encarga de estudiar todas las caractersticas de

la sangre.
SANGRE:
Es un lquido corporal rojo nico claro (arterial), oscuro venoso de
composicin variable que circula a travs de los vasos sanguneos del
organismo y participa en las actividades fisiolgicas de todos los rganos.
Est compuesta por un lquido amarillo llamado SUERO PLASMA y
compuestos citolgicos o elementos formes suspendidos en el plasma
llamado CELULAS SANGUINEAS O HEMATOCITOS: estos son glbulos
rojos o eritrocitos, glbulos blancos o leucocitos y plaquetas o trombocitos.
El plasma sanguneo es la parte lquida de la sangre. Es salado, de color
amarillento y en l flotan los dems componentes de la sangre, tambin
lleva los alimentos y las sustancias de desecho recogidas de las clulas. El
plasma cuando se coagula la sangre, origina el suero sanguneo.
Concepto y esquema de glbulos rojos, blancos y plaquetas.
Los glbulos rojos, tambin denominados eritrocitos o hemates, se

encargan de la distribucin del oxgeno molecular (O2). Tienen forma de
disco bicncavo y son tan pequeos que en cada milmetro cbico hay
cuatro a cinco millones, midiendo unas siete micras de dimetro. No tienen
ncleo, por lo que se consideran clulas muertas. Los hemates tienen un
pigmento rojizo llamado hemoglobina que les sirve para transportar el
oxgeno desde los pulmones a las clulas. Una insuficiente fabricacin de
143

hemoglobina o de glbulos rojos por parte del organismo, da lugar a una

anemia, de etiologa variable, pues puede deberse a un dficit nutricional, a
un defecto gentico o a diversas causas ms.
DIFERENCIA ENTRE PLASMAS Y SUERO:
El primero contiene fibringeno (es factor uno de la coagulacin). El
suero no contiene dicha sustancia ya que ha intervenido en la
formacin del coagulo. El sobrenadante normalmente oscila entre 48%
a 64% de promedio. El porcentaje restante corresponde a los
elementos su posicin gases disueltos como oxigeno anhdrido
carbnico,
nitrgeno
protenas
como
albmina,
globulinas
y
fibringenos carbohidratos como glucosa, lpidos como lecitina
colesterol, sustancias nitrogenadas, protenas. Y sales orgnicas , los
elementos formes por otro lado estn compuestos bsicamente por
glbulos rojos o eritrocitos glbulos blancos o leucocitos, plaquetas o
trombocitos.
FUNCIONES DE LA SANGRE:
Las funciones de la sangre estn ligadas a los procesos de la vida,
por consiguiente es un tema amplio sin embargo podemos resumirlos
en dos funciones principales: metablicas y de proteccin:
METABLICAS:
Porque suministra elementos nutritivos como sales orgnicas, glucosa,
protenas
Oxigeno tambin transporta desechos como anhdrido y cido lctico
de las clulas o los rganos excretores.
1. LUGAR:
Las venas del antebrazo, en especial las del pliegue del codo, la mediana
baslica, la mediana ceflica, o la radial son en la mayora de los casos las
mas fciles para la obtencin de las muestras. Ocasionalmente, pueden
utilizarse las venas de la mueca, del dorso de la mano, la yugular externa y
femoral.
2. EQUIPO:
a. Jeringas hipodrmicas de vidrio material desechable (preferiblemente).
El calibre de la aguja ideal son los nmero 20 y 21, ya que los calibres
mas pequeos se tapan con facilidad y obligan a repetir la puntuacin.
De preferencia deben usarse agujas cortas.

144

b.
El empleo de tubos vacutanier es conveniente en casos de tener que

hacer extracciones en gran nmero. En dichos tubos se hace el vacio
con una jeringa de 50 cc. y se les pone un adaptador (camisa), se hace
la puncin y se empuja el cabo de la aguja para que atraviese el tapn
del tubo y la sangre fluye espontneamente.
c.
Alcohol
d.
e.
Ligadura, esta debe de tener como mnimo 2.5 cms. de ancho.

Algodn
f.
Tubos o frascos adecuados para la coleccin de la sangre.

3. PREPARACIN:
a. Lavarse las manos con agua y jabn.

b. Colocar etiqueta en el frasco.
c. Colocar la aguja estril en la jeringa pero mantenerla tapada hasta
utilizarla.
d. Inspeccionar agujas y punta, esta debe ser lisa y brillante.
e. Inspeccionar la jeringa que el mbolo corra libremente.
f. Tanto como la aguja como jeringa deben estar estriles y secas para
evitar la hemlisis de las clulas y dilucin de la muestra.
4. PROCEDIMIENTOS:
a. Colocar la ligadura alrededor del brazo del paciente 2 pulgadas arriba
del codo, apretando lo suficiente para impedir la circulacin venosa pero
si impedir la circulacin arterial. Se puede chequear en el punto de la
mueca para asegurarse que la circulacin arterial no se ha cortado. Se
debe tener la precaucin de mantener el torniquete por ms de dos
minutos.
b. Instruir al paciente para abrir y cerrar la mano varias veces a fin de
aumentar la circulacin.
c. Por inspeccin o palpacin localizar la vena deseada, determinar la
diferencia de su pulso y estimar su tamao y profundidad.
d. Limpiar el rea seleccionada con un algodn y un alcohol. No
contaminar el rea despus de desinfectarla.

145

e. Hacer que el paciente cierre el puo y estire el brazo.

f. Con los dedos ndice y pulgar fijarla vena elegida, luego introducir la
aguja, forma un ngulo agudo con la superficie paralela y al lado de la
vena, insertarla rpidamente debajo de la piel y luego en la vena. No
debe moverse la aguja horizontalmente ya que causan molestias y
pueden daarse los nervios.
g. Aspirar la sangre por un suave tirn del mbolo. Extraer la cantidad
deseada i.d.h. retirar el torniquete. Colocar un algodn con alcohol en el
lugar de la puncin y sacar la aguja simultneamente al hacer presin en
el rea.
5. CAUSAS DE ERROR:
a. Uso del torniquete por mas de tiempo del debido.
b. Hemlisis de los eritrocitos por uso de jeringas hmedas, agujas de
calibres inadecuados, etc.
c. Lipemia.
d. Contaminacin bacteriana.
e. Usos equivocados de anticoagulante
PUNCIN CAPILAR:
Esta tcnica se utiliza para obtener pequeas muestras de sangre, o
cuando los pacientes son nios de corta edad.
1. Lugar: Varios lugares son adecuados para la puncin capilar, siendo
mas accesibles las superficie palmar o lateral de la punta del dedo
(preferentemente el dedo del anillo). Sin embargo pueden encontrarse
algunos problemas, como reas callosas o exceso de fluido (edema) que
tienden a resultar muestras no capilares sin embargo, existe una
diferencia en la concentracin de linfocitos.
En los infantes se prefiere realizar esta puncin en el taln o dedo gordo
del pie. Una modificacin es realizar en esta rea, dos incisiones ya sea
en X o en T a fin de obtener un mejor flujo sanguneo. Para valores
vlidos la puncin capilar debe de ser flujo libre.

146

2. Equipo:
a. Algodn.
b. Alcohol.
c. Cubre o porta objetos.
d. Tubos capilares eparinizados, pipetas especiales, etc.
e. Lancetas.
3. Procedimiento:
a. El lugar de puncin debe de estar caliente, para asegurar buena
circulacin de la sangre. Si este esta fri al aplicar al rea agua caliente
(38-40 c.) por unos minutos. Si es de la oreja, debe ser tomada de la
orilla del lbulo y no de la parte plana.
b. Limpiar el lugar de la puncin con alcohol para remover todo tipo de
suciedades, aumentar la circulacin y desinfectar.
c. Mientras se realiza la puncin aplicar puncin al rea para mantener la
piel estirada. Hacer la puncin perpendicularmente a las lneas de las
huellas digitales.
d. Limpiar la primera gota que aparezca.
e. No deber apretarse o escurrir, ya que esto hace que se diluya la sangre
con los fluidos circulares, alterando la recoleccin de los elementos.
f. Colocar un algodn con alcohol para cortar la salida de sangre.
4. Recomendaciones:
a. Para realizar la puncin una lanceta desechable es lo ms satisfactorio,
en su lugar la punta afilada de in cuchillo quirrgico de buenos
resultados.
b. No deber puncionarse un dedo de una mano que haya estado hacia
abajo ya que esta estar congestionada.
c. Realizar la puncin en el lado lateral del dedo, ya que en las huellas
digitales hay mas nervios y por lo tanto mas dolor.

147

PUNCIN ARTERIAL:
La sangre arterial ha de ser extrada por un mdico hbil y experimentado,
pues no slo es difcil la puntuacin de una arteria, sino que en realidad
podra ser peligrosa. La sangre debe recogerse en una jeringa Luer-Lok,
revestida previamente con una solucin de heparina.
La heparina servir como anticoagulante; y tambin llenar los espacios de
aire en la jeringa y la guja, despus de extraerse la sangre, se cierra
hermticamente la punta de la jeringa con una tapa de metal o de o de otro
material adecuado, o bien con una gota de mercurio. Se puede introducir en
la jeringa un ligero exceso de mercurio para facilitar la mezcla de la muestra
despus de extrada y antes del anlisis. Esto se consigue haciendo girar la
jeringa rpidamente con lo cual la gota de mercurio se mover dentrote la
jeringa.
Eleccin de venas para obtener sangre. Los sitios de eleccin estn
indicados con una (X); casi siempre es aconsejable evitar las punciones
cerca del pliegue del codo, con el objeto de no provocar molestias
subsiguientes:
HEMATOLOGIA COMPLETA:
Para trabajar una hematologa completa necesitamos hacer: una
hemoglobina hematocrito, recuento de glbulos blancos, una formula
leucocitaria y velocidad de sedimentacin.

148

HEMOGLOBINA:
Es el pigmento respiratorio de la sangre es una hemoproteina formada por
dos partes: Hemo: es un pigmento respiratorio unido al hierro que se une
con la parte proteica llamada GLOBINMA la funcin de la hemoglobina son
tres las cuales son:
a. Toma oxigeno del pulmn y lo transporta a la sangre y lo sede a los

tejos.
b. Construye a transportar el CO (dixido de carbono) a los pulmones.
c. Interviene en el equilibro cido base de la sangre eliminado CO2. La
sangre debe su color a la hemoglobina se usa frecuentemente para
descartar enfermedades asociadas con la anemia (hemoglobina).
TCNICAS:
Para ser una hemoglobina necesitamos; un hemoglobimetro, la pipeta sahli
calibrada 20 microlitros (landas) o se puede usar cianometa con
espectrofotometro o colorimetro. Los valores de referencia son:
Mujeres: de 12 a 16 g/dl.
Hombres: de 14 a 18 g/dl.
149

HEMATOCRITO:
Es el volumen eritrocitrico expresado como un porcentaje del volumen de
sangre total que existente en una muestra.
MICRO TCNICA:
I.
II.
III.
Se llena un tubo capilar con muestra de sangre por lo menos hasta la

mitad. (capilar heparinizado).
Se cierra uno de los extremos del capilar, con el mechero o con
plasticina o plstico moldeable.
Ya llenados se introduce en una micro centrfuga por 5, minutos 5,000
rpm. Se comparan los datos en una tabla especial.
VALORES DE REFERENCIA:
Hombres:
Mujeres:
RN.
de 42 a 54%
de 36 a 42%
de 48 a 60%
SERIE BLANCA GLBULOS BANCOS O LEUCOCITO:

Son clulas sanguinas que participan en un papel muy importante en la
defensa del organismo ante la presienta de sustancias extraas
microorganismo que causan enfermedades. Para su diferencia se recure
aun frote de sangre que se colorea para observar los diferentes tipos de
clulas. Los leucocitos o glbulos blancos estn constituidos por tres clases
diferencia de clulas:
a. serie mieloide o granulocitica.
b. Serie linfocitico
c. Serie monocitica:
RECUENTO DE CELULAS:
El recuento de las clulas sanguneas es un arma fundamental en el
laboratorio clnico, ya que adems de ser til en el diagnostico de una
enfermedad permite el seguimiento del proceso que pueda alcanzar este.

150

METODO MANUAL:
Para este mtodo se utiliza la cmara de Neubawer, es una cmara
especial y una pipeta para dilucin. (Thoma).
Recuento de clulas sanguneas; se usa la pipeta de vidrio de thoma que
consta de una graduacin o dilucin 1/10marcado de 0.5 en la quinta
divisin y arriba se encuentra una ampolla que es la cmara de mezcla con
una bolita de vidrio y encima de esta ampolla es seguido por otro tubo
capilar. Corto con una marca 11 que es a la pipeta de leucocitos y a la de
eritrocitos la marca es 101.
PIPETAS DE DILUCIN:
Las pipetas de vidrio de Thoma constan de un tubo capilar graduado en 10
partes, marcado con 0.5 en la quinta divisin y con uno en la dcima
graduacin; en cima de este, se encuentra colocada la ampolla que es la
cmara de mezcla con una bolita de vidrio y encima de esta ampolla otro
tubo capilar corto con una marca 11 en la pipeta de leucocitos y una marca
de 101 en la de eritrocitos.
TCNICA:
Se llena la pipeta adecuada con sangre hasta la marca que indica de 0.5 en
la parte capilar y luego se diluye el lquido correspondiente (para rojos hasta
la marca 101 con su lquido, y para blancos hasta la marca 11 con su
lquido).
Inmediatamente se llenar la cmara correspondiente en la forma siguiente:
LLENADO DE CMARA:
a. Extraer la sangre y luego mezclarla con cualquiera de los siguientes
anticoagulantes: EDTA, Heparina, Oxalatos de Amonio y Potasio. Puede
usarse tambin la sangre capilar.
b. Mezclar bien la sangre durante un minuto, ya sea manual o
mecnicamente, pero en forma suave.
c. Llenar la pipeta de blancos de la siguiente forma: aspirar sangre hasta la
marca que indica 0.5 y luego lquido de dilucin (diluyente: ver anexo de
reactivo), hasta la marca de 11, esto produce la entrada a la cmara de
10 unidades de 0.5 de sangre y 9.5 de lquido diluyente por la que
151

obtiene una dilucin 1:20. Si la sangre se aspira hasta la marca de 1, la

dilucin resultante ser de 2:10 debe procurarse que las cantidades
sean exactas y que no entre aire.
d. Una vez llena la pipeta, se agita transversalmente.
e. durante 3 minutos tomndola entre el pulgar y los dedos ndices y medio
de la mano imprimindole un movimiento de arriba abajo; si se hace un
agitador el tiempo mnimo es de 1 minuto.
f. Llenar la cmara en la siguiente forma:
Primero colocar el porta objetos sobre la cmara.
Colocar la punta de la pipeta en el borde entre el cubre objetos y la
cmara, teniendo tapada con el dedo ndice la extremidad opuesta y
dejar penetrar capilaridad entre el retculo de la cmara la cantidad
suficiente para que se llene, pero que no se revalse. Llenar el otro
retculo de la misma forma y dejar sedimentar los glbulos por unos tres
minutos.
1. COMO LEER EL RECUENTO DE GLBULOS ROJOS.
RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS:
Este es el nmero de eritrocitos presentes por milmetro cbico de sangre.
La tcnica a seguir es la siguiente:
1. Utilizando una pipeta de Thoma para rojos aspirar sangre hasta la marca
de 0.5 y el lquido de dilucin (ver anexo de reactivos) hasta la marca de
101 resultando una dilucin de 1:200.
2. Agitar la pipeta durante tres minutos y luego descartar las primeras 3-4
gotas.
3. Llenar la cmara en la misma forma que para glbulos blancos.
4. Dejar sedimentar las clulas, localizar el cuadrado central de la divisin
de Neubauer que se encuentra dividido en 25 cuadros pequeos.
5. Contar los eritrocitos presentes en los cuadrados de los extremos y en el
central.
6. Multiplicar el nmero de eritrocitos contados en el central por el factor de
10,000 para obtener el nmero de eritrocitos en mm. cbico.
152

FORMULA DE GLOBULOS ROJOS:

E.C. x 5 x 10 x 200
VALORES NORMALES:
Hombres: 4.5 6.2 millones G.R./mm3.
Mujeres: 4 5.5 millones G.R./mm3.
EL LQUIDO DE DILUCIN PARA GLBULOS ROJOS SE PREPARA
AS:
Lquido de Harem
Cloruro de sodio
Sulfato de sodio cristalizado
Bicloro de mercurio
Agua destilada
4.
20.
2.
800.
g.
g.
g.
g.
2. CMO SE HACE EL RECUENTO DE GLBULOS BLANCOS:

CONTEO DE LOS GLBULOS:
a. Si la cmara ha sido bien llenada, debern aparecer los cuadros los
mas uniformemente posible con los glbulos. Si en un cuadrado se
encuentran por ejemplo 25 glbulos y entros 50, hay error y se habr
de repetir el trabajo. Se considera aceptable entre 5 y 6 glbulos.
b. Se localizan el milmetro cuadrado mas arriba y al lado izquierdo de
la divisin de Neubauer y se cuenta el nmero de clulas que en el
se encuentran tomando en cuenta los glbulo que esta en la lnea
vertical izquierda y en la lnea horizontal superior como si estuvieran
dentro del cuadrado; pero no se contarn los que en lnea vertical
derecha y horizontal inferior, para no contar dos veces el mismo el
mismo glbulo. No se cuentan los que estan sobre la doble lnea.
Este procedimiento se repite todo los cuadros a leer.
c. El nmero de glbulos contados en los cuatro cuadrados se
multiplica por la dilucin (20) y por el inverso de la profundidad de la
cmara 10 y se divide entre 4 siendo. Este resultado el nmero de
glbulos blancos por mm.c.
G.B./mm= No. Glbulos Blancos contados en 4 cuadrados X20 X10
153

4
Para simplificar los clculos, para una dilucin de 20 se multiplica el nmero
de glbulos blancos contados en los cuatro cuadrados por 50, ya que este
es el resultado de:
20 X 10
4
Y este ser el nmero de glbulos por un mmc.
FORMULA DE GLBULOS BLANCOS:
E.C. X 10 X 20
4
VALORES NORMALES:
Hombres y Mujeres: De 5,000 a 10,000 X mm
Estos suelen aumentar con alguna infeccin ya sea urinaria o por
apendicitis aguda y leucemias y disminuyen cuando hay infecciones virales
ya sea como el dengue, paludismo no es viral y en F.T.
3. CMO SE HACE EL RECUENTO DE PLAQUETAS:

RECUENTO DE PLAQUETAS:
El recuento de plaquetas es una gran ayuda en el diagnstico de los
desrdenes de la coagulacin. La funcin principal de las plaquetas es la
hemostasis y el mantenimiento de la integridad capilar.
El recuento de plaquetas es difcil, ya que son muy pequeas, se
desintegran fcilmente y son difciles de distinguir del polvo. Generalmente
se adhieren unas a otras y adems se pegan a partculas o cuerpos
extraos. El uso de EDTA como anticoagulante disminuye el empacamiento
de las plaquetas, aunque se pueden usar muestras de sangre capilar, los
resultados son menos satisfactorios que los obtenidos de sangre venosa.
Hay dos mtodos para realizar el recuento de plaquetas: le mtodo directo y
el mtodo indirecto.

154

1. METODO DIRECTO:
a. Mezclar la sangre con anticoagulante suavemente por
aproximadamente dos minutos.
b. Usar dos pipetas de conteo de rojos, llenar la pipeta con sangre
hasta la marca de 0.5y diluir hasta 101 con el lquido diluyente. (Ver
anexo reactivos) (1:200) a partir de este punto el conteo de plaquetas
ha de ser completado dentro de los siguientes 30 minutos para
evitarse la desintegracin de las plaquetas.
c. Mezclar cuidadosamente las pipetas de 3 a 5 minutos.
d. Limpiar bien el hemocitmetro. Se recomienda para este proceso el
uso de alcohol etlico al 95% y una gasa.
e. Preparar una cmara hmeda de la siguiente forma: cortar papel filtro
del dimetro aproximado de una de las partes de la caja de petri.
Humedecer el papel filtro y descartar el exceso de humedad. Colocar
el papel filtro en una caja de petri de tal forma que se le adhiera.
f. Descartar las primeras cuatro gotas de la pipeta de rojos y llenar el
lado opuesto de la cmara.
g. Colocar la cmara humedecida, el hemocitmetro y permitir que la
preparacin permanezca as por 15 minutos. Esto favorece que las
plaquetas se sedimenten y la cmara hmeda evite la evaporacin
del fluido de la cmara de conteo.
h. Colocar el hemocitmetro en el microscopio y enfocar en seco
cuidadosamente para cambiar a seco fuerte (45 X) para el conteo de
plaquetas. Contar todas las plaquetas en los 5 cuadros, similar el
recuento de rojos. El lquido diluyente no lisa los glbulos rojos y
aparecen como partculas redondas ovales o alargadas que son
bastante refrctiles y se colorean de un azulado claro. Ha de tenerse
cuidado de no confundir las plaquetas con partculas de polvo.
i.
Calcular el nmero de plaquetas por mm. cbico de la forma

siguiente.
Plaquetas/mm. Cbico=rea (1mm) X profundidad (10mm.) X
dilucin (200) X 5 (cuadrados) = 10,000 Factor.
j.
Confirmar el recuento contra frotis sanguneo.

155

2. METODO INDIRECTO:
a. Preparar un frote de sangre venosa recin obtenida.
b. Teir con el colorante de Wright.
c. Contar el nmero de plaquetas por cada 1000 eritrocitos (usando el
objetivo de inmersin). Luego contar los eritrocitos.
Clculos: Plaquetas/mm.= PX eritrocitos/mm.
1000
P= nmero de plaquetas/1000 eritrocitos

156

CAMARA DE NEUBAWER

157

VELOCIDAD DE ERITRO SEDIMENTACIN:

El principal bsico de la VSE, es que la sangre es esencialmente una
suspensin de corpsculos en el plasma y al aadirle anticoagulante, los
glbulos rojos sedimentados hasta formar una columna compacta en la
parte inferior del tubo, debido a que la densidad de los glbulos rojos es
mayor que la del medio.
La velocidad del proceso se debe a:
Formacin de Rouleaux, los eritrocitos sedimentadotes debido a la mayor
densidad que el plasma que se opone a la sedimentacin con fuerza
proporcional al rea de superficie de los eritrocitos,
Fibringeno: esta relacionada a esta concentracin, exepto a enfermedades
hepticas o crnicas.
METODO:
WESTERGREEN
Mtodo de Westergreen: La pipera esta graduada de 0 a 180 mm. se coloca
en forma vertical en una gradilla especial ( soporte de Westergreen ) y se
lee a la hora siendo este un mtodo mas sencillo, solo que se usa mayor
cantidad de sangre.
ALTERACIONES DE LA VSE:
La VSE estar aumentada fisiolgicamente en el embarazo, tambin
durante el segundo y tercer mes de lactantes y en la vejez.
La VSE en condiciones patolgicas se puede encontrar aumentada:
Infecciones Agudas con distintas aceleraciones:
a. Aceleracin Ligera (30-50mm,) Fiebre tifoidea, paratifus, disentera
bacilar, fiebre de malta, gripe, sarampin, poliomielitis.
b. Aceleracin moderada (50-100 mm.) Escarlatina, difteria, bronquitis,
endocarditis bacteriana sub aguda, paludismo reciente, tifus
exantemtico.
c. Aceleracin Intensa (mas de 100 mm.) Fiebre reumtica, sepsia,
anginas supuradas, erisipela, sfilis, artritis reumatoidea.

158

d. VSE Normal:
En todos los casos funcionales, (espasmos, distonas neurovegetativas,
neurosis y psicosis).
En ciertas enfermedades orgnicas de ndole degenerativas e
inflamatoria con catarros respiratorios altos, tos ferina, ttanos,
enfermedades digestivas como gastritis, parsitos intestinales.
FUENTE DE ERROR:
Los tubos deben estar limpios, secos y libres de alcohol, ter y otros
agentes que causen hemlisis.
Deben usarse adecuadas concentraciones de anticoagulantes.
Adecuada mezcla de la muestra con el anticoagulante.
Llenar el tubo adecuadamente, sin burbujas.
La prueba no debe durar mas de una horas.
El tubo debe estar verticalmente, pues una inclinacin acelera VSE.
SIGNIFICACIN DE LOS VALORES ANORMALES DE LA VSE:
La aceleracin de la velocidad de sedimentacin, es una respuesta
inespecfica frente a la lesin tisular y representa solamente a una
indicacin de enfermedad, pero no se dota especficamente su gravedad.
El mayor inters de la velocidad de sedimentacin reside en las
determinaciones repetidas para seguir una mejora o empeoramiento de un
proceso inflamatorio como por ejemplo; la tuberculosis, la endocarditis
bacteriana sub-aguda el lupus eritematosodiseminado y a veces las
neoplasias.
En el embarazo ectpico, la VSE es normal hasta que tiene lugar la ruptura
o desprendimiento de la trompa, o sea, el desprendimiento del embrin.
La VSE puede ayudar a diferenciar el infarto del miocardio, de la angina de
pecho; la artritis reumatoide de la osteocartritis. La VSE es rpida en los
estados disproteinmicos, ejemplo: el miolema mltiple.

159

FORMULA DIFERENCIAL:
Slo deben utilizarse buenos frotis. Si son demasiados espesos, ser difcil
o imposible reconocer las clulas, en especial los monocitos de los
linfocitos, si son demasiado delgados, casi todos los polimorfo nucleares y
monocitos se encontraran en los bordes y al final de la extensin; en las
extensiones preparadas con porta objetos de bordes irregulares adolecen
de la misma distribucin defectuosa.
En primer lugar el frotis debe observarse con un objetivo de pocos
dimetros (objetivo X 12 con ocular X 8 u objetivo de inmersin en aceite
1/7x54) para establecer la calidad de la extensin y si la distribucin de los
leucocitos es uniforme. Con este aumento, se puede reconocer elementos
anormales como clulas plasmticas, megaloblastos, normoblastos, clulas
blasticas, etc. Luego se pone una pequea gota de aceite de inmersin
sobre el frotis y se inicia el examen detallado y el recuento diferencial con el
objetivo de hinmersin en aceite (2mm x 90 o 100).
En cualquier caso, es aconsejable contar 100 clulas pero de ninguna
manera menos de 100. Puede ser til un contador mecnico. Es muy util
recordar los nmeros de poli morfonucleares, neutro filos y linfocitos y
anotar tambin monocitos, eosinofilos, etc. Conforme se encuentran.
El porcentaje de cada variedad de leucocitos presentes en el frote
constituye la formula diferencial.

160

LAS CLULAS POLIMORFONUCLEARES SE DIVIDEN EN TRES QUE

SON:
1. NEUTROFILO O SEGMENTADOS:
Su ncleo es poliforme, esta definido en glbulos unidos por un filamento
muy fino. Su tamao es doble que del eritrocito. El citoplasma es de tinte
rosado claro en sangre normal. Los segmentos tienen de dos a tres entre
mas viejos es tiene mas glbulos en su ncleo, los leucocitos neutrofilos no
pasan mas de 8 hrs. En sangre circulante para emigrar a los tejidos donde
sobre viven de dos a cuatro das mas. Estos aumentan en infecciones
bacterianas y disminuyen en infecciones virales causados por
microorganismos.
VN: 45 a 65%
2. EOSINOFILOS:
Tienen un dimetro de cerca de 9 micras siendo por lo tanto un poco menor
que el neutro filo su ncleo es generalmente bilobulado. La principal
caracterstica para identificarla es la presencia de granulaciones ovoides
que se tien por eosina (granulaciones acidofilia) paralelamente le eje
mayor granulo se encuentra un cristaloide alargado y electrodenso.
Hay pruebas que el eosinofilo es capaz de neutralizar la histamina que es
liberada de los tejidos en los proceso alrgicos. Esta es posible observarlas
formas con ncleo en cayado o bastn y formas con tres o mas grumos
cromticos. Normalmente es uno a cinco por ciento. Cuando hay menos de
1% se dice que hay EOSINOPENIA y cuando hay ms de 5% se dice que
hay EOSINOFILIA. Dando una reaccin intensa a la oxidasa y peroxidas.
Estos aumentan en caso de parasitismo, medicamentos y alergias.
VN 1 5 %
3. BASFILOS:
Afinidad por los colorantes bsicos. De generacin de glbulos rojos en los
que se desarrollan grnulos vascfilos. Observadas en las anemias graves,
leucemia. Estos normalmente no se tienen que observar o si no de (0 a 1%).
VN 0 1 %

161

Clulas de 8 a 10 micras de dimetro, protoplasma uniforme y ligeramente

acid filo, grandes redondeadas o ligeramente ovaladas, estos se tien de
un color pardo (verdusco) por el fenmeno de metracomasia. Con
frecuencia se encuentran granulaciones dispuestas sobre su ncleo, esta
tiene figura irregular, su cromatina es difusa y menos intensamente color
hable que la de las otras leucocitos pueden observarse formas
segmentadas y no segmentadas cuando hay 100 por mmc. Hay basofilia,
mientras que hay menos 12mmc
LAS CLULAS MONONUCLEARES SE DIVIDEN EN DOS QUE SON:
1. MONOCITOS:
Serie monocitica:
Monocitico maduro: esta es la clula ms grande de la serie normal, mide
15-20 micras, su ncleo es grande ligeramente cntrico con grandes
muestras (protuberncias) o forma de herradura o rion el citoplasma es azul
plido, la cromatina del ncleo es plido y de color violeta.
El origen de este se cree que viene del SRR y estan relacionadas con los
macrfogos, su funcin mas importante es su gran movilidad de tipo
amiboideo y su actividad fagocitaria. Estos se aumentan por algunas
infecciones, como tuberculosis crnica, tifus y exposiciones prolongadas o
rayos X. Normalmente hay de 0 a 5% o sea de 200 a 800 X mmc. Cuando
hay menos de 200 X mmc. Hay monopenia y cuando hay de 800 a mmc.
Hay monocitosis. Se ha demostrado que cada uno tiene su origen en
clulas distintas; por lo tanto el trmino forma de transaccin debe
suprimirse de la nomenclatura hematolgica.
VN 0 5 %
2. LINFOCITOS:
Estas son clulas de 5 a 12 micras de dimetro y por lo tanto, mas
pequeas que los otros leucocitos; hay pequeos, medianos y grandes. El
protoplasma es por lo general escaso en los pequeos, que parece que no
lo tuvieran; linfocitos leucocitoide de dimensiones medias de 15 micras,
estos son considerados como formas envejecidas, normalmente por cada
100 leucocitos hay 25 a 45% linfocitos.
Estos son pequeos se cree que viven de 100 a 200 das los grandes de 2
a 3 das.
VN 25 45 %
162

OTRAS CLULAS QUE PUEDEN ENCONTRASE EN LA FRMULA

DIFERENCIAL:
CLULAS PLASMTICAS:
Se parecen a los linfocitos, pero su citoplasma se tie de azul oscuro y su
ncleo presenta la cromatina radiada.
Ocasionalmente aparecen 1 o 2% de clulas. Cuando su nmero es mayor
indica algo anormal.
MIELOCITOS:
Son clulas grandes, con un solo ncleo y contienen granulaciones en su
citoplasma, las cuales son por lo regular neutrfilas. Se ven en las anemias
graves y en las leucemias.
GLOBULOS ROJOS EN LOS FROTES DE SANGRE
Su recuento no forma parte de la forma diferencial.
ERITROBLASTO:
Son los glbulos rojos nucleados, se presenta de tamao ligeramente mayor
al de un glbulo rojo y muestran un ncleo de color prpura. Se ven tambin
en las anemias. Se les diagnostica lo mas a menudo con el nombre de
Normoblastos.
Ocasionalmente, pueden encontrarse en los frotes de sangre glbulos
deformados o restos de glbulos por lo cual es muy difcil su identificacin, a
ellos se les da el nombre de Clulas Fantasmas
RETICULOCITOS:
Se trata de clulas jvenes no nucleadas de la serie eritroctica, que
pueden conocerse solamente en coloraciones supravitales. Cuando se usa
azul de cresil brillante, se observa que el reticulocito contiene grnulos o
una red fibrilar que se tie de color azul plido.
ERITROCITOS:
Los eritrocitos son clulas adultas de la serie roja. Se trata de discos
bicncavos no nucleados que se tien de color rojo o gris rosceo con el
colorante de Wright. Los dimetros de los eritrocitos en preparaciones secas
tienen n valor medio de 7.2 de 6.7 a 7.7.
PRECURSORES:

163

Linfoblastos mide de 15 a 20 micras, tiene ncleo grande cromatina gruesa

densa y pesada, tiene hasta 12 nucleolos, el ncleo es de aspecto denso y
homogneo.
PROLIFONCITOS:
Se parece al linfocito pero su ncleo no se distingue muy bien.
LINFOCITO MADURO:
Adopta dos formas en la sangre perifrica: grande y pequeo. El pequeo
mide 10 y su ncleo es denso y de color prpura intenso, esfrico, su
citoplasma escaso y de color azul cielo y forma un anillo alrededor. El
grande mide de 15 a 20 micras se presentan linfocitos en procesos virales
su funcin: participan en los procesos inmunolgicos y en la respuesta
inmune al organismo.
PLAQUETAS, TROMBOCITOS PLAQUETAS SANGUINEAS:
Son partculas muy pequeas ms que los glbulos rojos de forma de
bastoncillo sin ncleo. Permite la coagulacin de la sangre gracias a la
seccin de fibrongeno, sustancia que contiene el plasma, los 5lt. De
sangre que tiene el hombre que est en continua transparencia. Hay
tcnicas en frote y con lquido de oxalato al 2% VN: 150,000 500,000 x
mmc.
TINCIONES HEMATOLGICAS:
Con el fin de estudiar satisfactoriamente los frotis sanguneos es necesario
colorearlos. Para ello se utilizan diferentes colorantes y tcnicas, segn los
tipos particulares de glbulos que interesen.
Dos tipos de colorantes que usan generalmente los que son adecuados
para colorear los glbulos fijados y los que teirn en forma satisfactoria los
glbulos vivos.
Los colorantes panpticos de uso general en los laboratorios de
hematologa son los GIEMSA Y WRIGTH.
TINCION DE GIEMSA:
1. Hacer el frotis con una gota de sangre.
2. Fijar la lamina extendida con alcohol metlico al 90 % por 1 minuto.

164

3. Dejar secar en tipo ambiente.

4. Cubrir con colorante Giemsa por 20 minutos.
5. Lavarla al chorro y secar espontneamente a tipo ambiente.
6. Observar la lmina con el objetivo de 100X con aceite de inmersin.
TINCIN DE WRIGTH:
1. hacer el frotis de sangre
2. fijar la lamina en colorante de Wrigth por dos minutos.
3. lavar la lamina con agua destilada durante cinco minutos.
4. lavarla con agua del chorro y secarla al aire espontneamente.
5. observar con el objetivo de 100X con aceite de inmersin.
CONCEPTOS HEMATOLOGICOS:
HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA (MCH):
La cantidad media de hemoglobina es el glbulo rojo.
HEMOGLOBINURIA:
Presencia de hemoglobina libre en el orina.
HEMOGRAMA:
Cuadros sanguneos.
HEMLISIS:
La dilucin o desintegracin de los eritrocitos.
HEMOSTASIS:
La dilucin de flujo de la sangre, especialmente de un baso sanguneo.
HIPERTNICO:
Mayor que la concentracin isotnica.
HIPOCROMIA:

165

Una disminucin en el calor de los eritrocitos, por lo tanto una disminucin

en contenido de hemoglobina.
HIPOPLASE:
Una disminucin en la formacin de los glbulos.
ICTERICIA:
Coloracin amarillenta de la piel y los ojos debida a la presencia de
pigmentos biliares en la sangre, sigue a la destruccin excesiva de la
sangre, obstruccin del conducto biliar, enfermedad difusa del hgado,
algunas infecciones y agentes qumicos txicos y drogas txicos.
PLASMA:
Es la porcin lquida de la sangre compuesta de suero y fibringeno
obtenida cuando se usa un anticoagulante.
PLAQUETA:
Trombocitos.
NEUTROFILIA:
Un aumento en neutrfilos.
BASOFILIA:
Se tie fcilmente con colorantes bsicos, por ejemplo, azul con el tipo
Romanowski o un aumento en basfilios.
ORMOCITO (eritrocitos):
Un glbulo rojo en tamao normal.
POIQUILOCITOSIS:
Nmero aumentado de eritrocitos anormalmente formados.
RECUENTO DIFERENCIAL:

166

Una enumeracin de los tipos de glbulos blancos vistos en frotis

sanguneos teidos.
RETICULOCITO:
Un glbulo rojo que muestra un retculo o red cuando se tien con tintes
vitales el estado entre el glbulo rojo nucleado y el eritrocito maduro.
TROMBOCITO PENIA:
Una disminucin de plaquetas sanguneas, tambin trombopenia.
TROMBOCITOSIS:
Un fragmento de las plaquetas sanguneas.
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN DE LOS ERITROCITOS:
La velocidad a la cual se estabiliza los glbulos rojos en su propio plasma
es un tiempo determinado.
VENIPUNTARA:
El acto de hacer una puncin en una vena a fin de sacar una muestra de
sangre.
HEMOSTASIS Y COAGULACION:
Los mtodos empleados por los investigadores para estudiar los diversos
elementos implicados en el proceso de la coagulacin, han sido recopilados
por Tocantihs y Kazal (1964) en un libro excelente y en una reciente obra de
Bang y cols. (1971). Cada uno de estos mtodos han contribuido mucho a la
comprensin de la hemostasis. Sin embargo, muchos de estos
procedimientos son tcnicamente difciles y muy especializados.
Se obtienen resultados fidedignos slo cuando se realizan con frecuencia
estas pruebas especializadas y se dispone de una fuente de reactivoscontrol.
La coagulacin de la sangre forma parte de la hemostasis, definida como el
proceso que detiene espontneamente la salida de sangre circulante de los
vasos; y es obvio que pocos procesos biolgicos sean de tanta importancia

167

como ste. En todos los animales, hemostasis se logra por la combinacin

de tres procesos.
La concentracin de los vasos, la agregacin de las plaquetas y la
coagulacin de la sangre propiamente dicha.
En el hombre estos procesos, vascular, celular y bioqumico, han llegado a
un alto grado de complejidad, los tres se requieren para un hemostasis
eficiente y completa. Sin embargo, los tres son homoestticamente
independientes, de tal manera que hemostasis compatible con la vida es
conseguida an si un competente, como las plaquetas o uno de los factores
de la coagulacin.
La formacin de un coagulo visible, manifestacin fsica de la formacin de
fibrina, representa slo el resultado final de una serie intrincada de
reacciones en las cuales participan un nmero determinado de factores.
Actualmente estos factores son 13, aunque de ellos, el VI ha sido eliminado.
DESCRIPCIN DE LA COAGULACIN:
1. El fibringeno se convierte en fibrina por la trombina.
2. La trombina existe en la sangre en forma de precursor inerte, la
protombina, que requiere iones-calcio para su conversin en
trombina.
3. El fibringeno, la trombina y los iones calcio, existen en la sangre
circulante que no coagula porque para activar la trombina se necesita
un cuarto factor, que se encuentra en extractos de clulas de tejido.
Esta sustancia se denomina tromboplastina hstica.
La tromboplastina hstica no activa directamente la protombina.
Inicia una serie de reacciones de coagulacin extrnseca que comprende los
factores VII, X y V. Estas reacciones dan lugar a un activador extrnseco de
la protombina. El factor VII es el nico que interviene en las reacciones de
coagulacin extrnseca.
Las plaquetas proporcionan un factor de coagulacin, el factor plaquetario 3,
que equivale a la porcin lipdica aislada de una tromboplastina completa de
tejido.
Los factores de la coagulacin, excepto la protrombina y fibringeno se
encuentran en el plasma en cantidades mnimas.

168

FACTORES DE LA COAGULACIN
FACTOR 1
Fibringeno
FACTOR 2
Protombina
FACTOR 3
Tromboplastina g
FACTOR 4
Calcio
FACTOR 5
Proacelarina, AC.
FACTOR 6
Proconvertina
FACTOR 7
Antihemoflico A o (AHG)
FACTOR 8
Componente tromboplastnico El Plasma (PIC)

FAC o Antihemoflico. B
FACTOR 9
Suart Power
FACTOR 10
Antecedentes tromboplastnico
De plasma (PTA)
Antihemoflico C
FACTOR 11
Hageman o vidrio de contacto.
FACTOR 12
Fibrinaza o laki lorand.
Fibrinogno.
II
Protombina
III
Tromboplastina hstica
IV
Clcio
V
VI
Proacelerina
Proconvertina
VII
Globulina antihemoflica
VIII
Componente tromboplastnico
IX
X
Factor Stuart-Prover
169

XI
Factor Hageman
XII
Factor estabilizante de la fibrina Plaquetario 3
Actividad coagulante de los fosfolpidos plaquetarios.

Los mtodos empleados por los investigadores para estudiar los diversos
elementos implicados en el proceso de la coagulacin, han sido recopilados
por Tocantihs y Kazal (1964) en un libro excelente y en una reciente obra de
Bang y cols. (1971). Cada uno de estos mtodos HEMOSTASIS Y
COAGULACION:
han contribuido mucho a la comprensin de la hemostasis. Sin embargo,
muchos de estos procedimientos son tcnicamente difciles y muy
especializados.
Se obtienen resultados fidedignos slo cuando se realizan con frecuencia
estas pruebas especializadas y se dispone de una fuente de reactivoscontrol.
La coagulacin de la sangre forma parte de la hemostasis, definida como el
proceso que detiene espontneamente la salida de sangre circulante de los
vasos; y es obvio que pocos procesos biolgicos sean de tanta importancia
como ste. En todos los animales, hemostasis se logra por la combinacin
de tres procesos.
La concentracin de los vasos, la agregacin de las plaquetas y la
coagulacin de la sangre propiamente dicha.
En el hombre estos procesos, vascular, celular y bioqumico, han llegado a
un alto grado de complejidad, los tres se requieren para un hemostasis
eficiente y completa. Sin embargo, los tres son homoestticamente
independientes, de tal manera que hemostasis compatible con la vida es
conseguida an si un competente, como las plaquetas o uno de los factores
de la coagulacin.
La formacin de un coagulo visible, manifestacin fsica de la formacin de
fibrina, representa slo el resultado final de una serie intrincada de
reacciones en las cuales participan un nmero determinado de factores.
Actualmente estos factores son 13, aunque de ellos, el VI ha sido eliminado.
I
Fibrinogno.
II
III
Protombina
Tromboplastina hstica
170

IV
Clcio
Proacelerina
VI
Proconvertina
VII
Globulina antihemoflica
VIII
Componente tromboplastnico
IX
Factor Stuart-Prover
X
XI
Factor Hageman
XII
Factor estabilizante de la fibrina
Plaquetario 3
Actividad coagulante de los fosfolpidos plaquetarios.
ANTICOAGULANTE:
Si la sangre venosa obtenida va a utilizarse para recuentos hematolgicos,
es necesario usar un anticoagulante. La eleccin del anticoagulante y la
porcin de sangre son factores de importancia.
Se emplean anticoagulantes secos para evitar dilucin de la muestra que
disminuir los elementos de la sangre.
Una sustancia que impide la coagulacin de la sangre. Los ms
comnmente usados son el oxalato de sodio, el citrato de sodio y heparina.
OXALATO DE CALCIO:
Actan como anticoagulantes removiendo el calcio de la sangre en forma
insoluble de oxalato de calcio.
Si se utiliza oxalato de sodio u oxalato de potasio produce un encogimiento
significativo de los eritrocitos por lo que se prefiere usar la mezcla (Sller y
Pal) de oxalatos de amonio y potasio ya que no afecta el valor globular
medio y puede usarse para hemoglobina, hematocrito y recuentos
globulares y no interfiere en la velocidad de sedimentacin.
El uso de las extensiones de sangre esta limitada a los primeros minutos ya
que pueden desarrollarse con rapidez formas dentadas en los hemates,
171

vacuolizacin en el citoplasma de los granulositos fagotitos de los

granulositos, fagocitosis de cristales de oxalato artefactos en los ncleos de
monocitos y otras deformidades.
CITRATOS:
Actan como anticoagulantes por la combinacin de calcio formando sal
insoluble del calcio el citrato de sodio se emplea en soluciones 2-3% para
conservar la sangre para transfusiones, al 2-3% para exmenes
hematolgicos para transfusiones al 5% 15.
Estos introducen n factor de dilucin, no interfieren en la velocidad de
sedimentacin el citrato trisodico no se usa como anticoagulante de rutina si
no para investigacin de coagulacin.
EDTA (ACIDO ETILENDIAMINO TETRACETICO O SEQUESTRENE):
Es el anticoagulante con mayor uso en el rea de hematologa.
HEPARINA: es solucin que sirve para conservar la sangre bsi que se
coagule
TIEMPO DE HEMORRAGIA O TIEMPO DE SANGRIA (TS.)
El tiempo de hemorragia es el tiempo que demora dejar de sangrar una
herida pequea normalizada, introducida en la regin capilar del dedo o en
el lbulo de la oreja. Depende principalmente de los factores vasculares y
extra vasculares entre los que estn la elasticidad de la piel y de los vasos
capilares, de la eficiencia de los lquidos del tejido y de la accin mecnica y
qumica de los trombocitos. (Plaquetas sanguneas).
1. MTODO DE DUKE:
a. Se utiliza la zona que est 15 a 20mm. por encima de la porcin
grasa redonda del lbulo de la oreja, que est tan ricamente
vascularizada que una hemorragia prolonga puede tener en personas
normales.
b. Despus de hacer calentado la oreja se coloca un porta objeto detrs
del lbulo y se mantiene firmemente en su sitio, lo que proporciona
un sitio para hacer la puncin.
c. Usando una lanceta adecuada, se perfora el lbulo mediante un
golpe firme que penetra hasta el portaobjetos, la herida deber ser

172

suficientemente profunda para que fluya libremente la sangre sin

apretar el dedo.
d. Tan pronto como se haga la herida se retira el portaobjetos y se pone
el reloj en marcha, a intervalos de medio minuto.
Para que esta prueba tenga significado diagnstico es necesario que se

haga una herida normalizada, una herida demasiado profunda prolonga
el tiempo de hemorragia, mientras que una herida poco profunda
acortara el tiempo necesario para la hemostasis.
Un solo tiempo prolongado de hemorragia no es suficiente debido a la
dificultad de producir una herida normalizada. Si se encuentra un tiempo
prolongado de hemorragia debern hacerse determinaciones
adicionales.
TIEMPO DE COAGULACIN:
El tiempo de coagulacin es el intervalo requerido para que la sangre
venosa se coagule en condicin controlada-, mide el tiempo requerido para
la formacin de las primeras trazas de trombina que bastan para formar un
coagulo visible.
1. MATERIAL:
a. Tubos de pirex (10X75mm)
b. Cronmetro de segundos
c. Bao de mara
d. Termmetro
e. Material de extraccin
2. TCNICA:
a. Usando una traccin del mbolo de la jeringuilla, extraiga 4ml. de
sangre
de una venipuntura no traumtica. Tan pronto como
aparezca por primera vez la sangre en el cuello de la jeringuilla, eche
andar el cronmetro de segundos y afloje el torniquete. Si no se
penetra en la vena rpidamente y sin trauma, repita la venipuntura.
b. Saque la aguja, introduzca exactamente 1 ml de sangre en cada uno
de los tres tubos de ensayo y descarte el ltimo mililitro que contiene

173

el lquido del tejido. Deje que la sangre corra por los lados de los
tubos, para evitar la agitacin que acelera la coagulacin.
c. Inmediatamente coloque los tubos en un bao de Mara a 37 C.
d. Espere 3 minutos, luego incline el primer tubo a intervalos del medio
minuto, hasta que quede completamente invertido sin prdida de
sangre.
e. Ahora invierta el segundo tubo a intervalos de medio minuto hasta
que pueda invertirse totalmente sin prdida de sangre.
f. Repita el procedimiento con el tercer tubo. Cuando el tercer tubo se
pueda invertir sin perdida de sangre, detenga el cronmetro.
g. El intervalo entre la aparicin de la sangre en la jeringuilla y la
coagulacin en el tercer tubo, es el tiempo de coagulacin.
3. FUENTES DE ERROR:
a. A un tiempo de coagulacin de 15 a 20 minutos sugiere una
tendencia hemorrgica. Si se prolonga ms de 20 minutos, indica una
enfermedad hemorrgica.
b. Tubos de ensayo incorrectamente limpios
c. Aplicacin prolongada del torniquete
d. La presencia de burbujas en la jeringuilla o en los tubos de ensayo
e. Agitacin innecesaria de la muestra.

174

TIEMPO DE PROTOMBINA (TP):

Suele utilizarse para revelar deficiencias de los factores esenciales hasta
convertir la protombina en presencia de actividad de tromboplastina de
tejido. Los factores que influyen en los resultados de esta prueba son:
factor V, X, VII y protombina.
Como el punto final de la prueba, es la formacin del coagulo de fibrina,
tambin revelar una deficiencia de fibringeno.
TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA. (TPT)
En una prueba excelente para descubrir eficiencias del sistema intrnseco.
Es sencilla de efectuar y requiere menos tiempo que la prueba de
generacin de tromboplastina.
Algunas tromboplastinas son incapaces de compensar totalmente el efecto
de los estados hemofiloides. Estas substancias se denominan
tromboplastinas parciales; una tromboplastina parcial es mas sensible a la
disminucin de los factores del plasma hemoflico y origina un tiempo de
coagulacin plasmtico prolongado mientras que una tromboplastina
completa (tisular), produce un tiempo de coagulacin plasmtico normal 12
a 15 segundos.
Los factores que influyen en esta prueba son: XII; XI antecedente
plasmtico de tromboplastina, IX, X, V. II y I.
1. MTODO:
Reactivos:
Cloruro de Calcio 0.025 M
Plasma problema citratado.
Plasma normal citratado.
Sustituto de plaquetas, es preferible el que contiene el activador, el cual
acta como una tromboplastina parcial.
2. PROCEDIMIENTO:
a. Verter la suspensin homognea de caoln en el frasco PTT y disolver el
liofilizado. El reactivo est listo para su uso despus de 5 minutos. De
reposo a temperatura ambiente y de agitaciones peridicas. Como el
175

caoln puede sedimentarse durante una pausa prolongada en el trabajo,

conviene agitar brevemente la suspensin antes de utilizarla. El reactivo
dispuesto para su empleo es estable por lo menos durante 8 horas a
temperatura ambiente. Si se conserva en refrigeracin (de +2 a +8 C),
el reactivo es estable durante 14 das. Una posible decoloracin no
influye en el resultado de la prueba.
b. Mezclar 0.1ml. de plasma del paciente con 0.1ml. de la suspensin
anterior en un tubo de ensayo limpio y exento de trombina. Incubar a
+37 C. exactamente durante 2 minutos.
c. Despus de la incubacin, aadir 0.1ml. de solucin de cloruro de calcio
(0.025mol/1 precalentada a +37 C. y agitar brevemente. Determinar el
tiempo de coagulacin en la manera acostumbrada.
3. FUENTES DE ERROR:
Jeringa y tubos sucios
Tiempo de incubacin inadecuado
Reactivos no estandarizados.
Valor normal: de 60 a 100 segundos.
ANORMALIDADES DE LOS ERITROCITOS EN SANGRE PERIFRICA:
ANORMALIDAD
DESCRIPCIN
Anisocitosis
Variacin en tamao
(dimetro normal; 6-8
).
Microcitosis
Clulas
pequeas,
menores de 6 MCV
80.
Macrocitosis
Clulas
largas,
mayores de 8 MCV
100.
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
Cualquier
anemia
severa
Ej.
Megaloblstica
ferropriva.
Deficiencia de hierro y
de
capacitacin
de
hierro,
talasemia
envenenamiento
con
plomo.
Anemia megaloblstica
enfermedad
heptica
hipotiroidismo anemia
hemoltica,
mieloma
mltiple
macrocitosis
fisiolgica del recin
nacido.

176

Macroovalicitosis
Clulas ovales largas 8
Clulas plidas con

baja concentracin de
hemoglobina 30gm/dl
de MCHC.
Hipocromia
Mieloptisis.
Anemia megaloblstica
Deficiencia de hierro,
talasemia,
envenenamiento
con
plomo, deficiencia de
transferina, anemia de
enfermedades crnicas
y
enfermedades
inflamatorias.
Variacin anormal en Cualquier
anemia
forma.
severa
Ef.
Megaloblstica,
ferropriva, hemoltica,
etc.
Poiquilocitosis
Procesos hematolgicos en los cuales se debe realizar aspiracin de

Mdula sea.
1. Leucemias agudas
2. Agranulocitosis
3. Anemia aplstica
4. Hiperesplenismo
5. Prpura idiomtica trombocitopnica
6. Deficiencia de hierro
7. Enfermedad de depsito de lpidosg
8. Linfoma
9. Anemia Megaloblstica
10. Tumores metastsicos
11. Mieloma mltiple
12. Macroglobulinemia de waldestronis
CLASIFICACIN DE ANEMIAS:
La anemia es una alteracin caracterizada por una reduccin de la
sustancia portadora de 02 en un volumen determinado de sangre, debido a
177

la disminucin por debajo de lo normal del nmero de glbulos rojos por

milmetro cbico, en la concentracin de hemoglobina y en el hematocrito.
La prdida de hemoglobina y el consiguiente dficit de la capacidad de la
sangre para transportar oxgeno son las caractersticas principales de la
anemia y constituyen la base patolgica de la mayora de los signos y
sntomas asociados, como la disnea, taquicardia, debilidad, etc.
El trmino anemia, sin la adicin de otro descriptivo o calificativo, no es un
diagnstico satisfactorio ni ofrece nunca una base para un tratamiento. En la
mayora de los casos, la anemia se presenta como un signo o una
complicacin de una enfermedad, a menudo muy ajena al sistema
circulatorio en s. En presencia de una anemia se impone una revaloracin
cuidadosa del estado general del enfermo en busca de la causa.
1. INDICES:
La finalidad de determinar los ndices hemticos es comprobar y relacionar
los resultados fundamentales obtenidos de los exmenes hemticos
rutinarios completos: hematocrito, recuento eritroctico y concentracin de
hemoglobina. En esta forma pueden clasificarse objetivamente los diversos
tipos de anemia y pueden estudiarse las variaciones especficas de los
hemates. Las definiciones, mtodos, clculos y valores normales de los
siguientes ndices constituyen importantes guas en el laboratorio de
hematologa.
Para hacer una clasificacin de anemia se necesitan los siguientes datos:
a. Nmero de glbulos rojos.
b. Hemoglobina en gramos.
c. Hematocrito o volumen de clulas empacadas, VCE.
Los valores que van a averiguar son:

b. VCM: Volumen corpuscular medio o volumen globular.
c. HCM: Hemoglobina corpuscular media.
d. CHCM: Concentracin de hemoglobina corpuscular media.
De estos valores resultan los ndices siguientes:
b. VCM: ndice de volumen, IV.
178

c. HCM. ndice de color, IC.

d. CHCM: ndice de saturacin, IS.
e. Relacin del nmero de glbulos rojos: ndice de nmero, IN.
2. El volumen corpuscular medio (VCM):
Es un ndice que expresa el volumen en cbicas que ocupa un
hemate de tamao medio.
VCM=
Hematocrito (%) X 10
6
Recuento eritrocitario (10 / mm.
3. La hemoglobina corpuscular media:
Indica el peso de hemoglobina de un solo hemate expresado en micro
microgramos
-12
(uug. 0 10
g.)
HCM=
Concentracin de hemoglobina X 10
Recuento eritrocitario (10
6
/ mm.
4. Valores normales: 27-32 uug.

La concentracin media corpuscular de hemoglobina (CMCH): es un
trmino que indica la concentracin media de hemoglobina por unidad de
volumen (X 100 ml.) de hemates agrupados. Se expresa como porcentaje
de clulas agrupadas y no como sangre total.
CMCH=
Concentracin de hemoglobina (g/100ml) X 100

Hematocrito (%)
5. Valores normales 32-36%

ndice de volumen: en el cociente entre el volumen promedio de los
eritrocitos de la sangre del paciente y volumen promedio d los eritrocitos
normales. Ha sustituido al ndice de color por que no utiliza un valor normal
en el clculo de los resultados.

179

IV=
VCM Encontrado
VCM Normal
6. Valores normales 09-1.0
El ndice de color: esta basado en la comparacin de la concentracin
media de hemoglobina de un hemate con la del hemate normal, que se
toma como la unidad.
IC: HCM. Encontrando
HCM. Normal
7. Valores normales 0.9-1.0
El ndice de saturacin: es una cifra que denota la cantidad media
normal de hemoglobina por unidad de volumen de hemates con relacin
a los valores normales.
IS.=
ndice de color
ndice de volumen
IS=
CHCM. Encontrando
CHCM Normal
8. Relacin del nmero de glbulos rojos: (IN.)
IN.=
No. de eritrocitos encontrados

No. de eritrocitos normal (5,000)
INTERPRETACIN:
a. Las anemias pueden clasificarse segn los criterios siguientes:
Por volumen: VCM mayor que la normal e IV. Mayor de 1.10
Normocticas: VCM normal e IV entre 0.90 y 1.10
Microctica:
VCM menor que la normal e IV menor de 0.90
b. Por su hemoglobina:
Hipercrmica:
HCM mayor que la normal e IC mayor de 1.10

180

Normocrmica: HCM normal e IC entre 0190 y 1.10

Hiprocromia:
HCM menor que normal e IC menor de 0.90
c. Por saturacin:
Hipersaturada: CHCM mayor que normal es IS mayor de 1.10
Normosaturada: CHMC normal e IS entre0.90 y 1.10
Hiposaturada: CHMC menor que normal e IS menor de 0.90
d. Por el nmero de glbulos rojos:
Hipercitmicas:
Normocitemtica:
No. de glbulos rojos mayor qe normal e IN mayor 1.10

No. de GR normal e IN entre 0.90 y 1.10
Hipocitemtica:
No. de GR. Menor que normal e IN menor de 0.90
HEMATOZOARIOS
Plasmodium
SU CLASIFICACIN SON: Tripanosomas
Leshmaniasis
Toxoplasma
Plasmodium
Sus tipos son
P. Vivax
P. Falciparum
P. Malarie
P. Ovale
Definicin:
Malaria o Paludismo es una antropozoonosis parasitaria causada por
protozoarios, esporozoarios del Gnero Plasmodium y transmitida por
mosquitos del Gnero Anopheles.
Los parsitos:
Plasmodium vivax
Plasmodium malariae
Plasmodium falciparum
181

Plasmodium ovale
1. Lminas portaobjetos con gotas gruesas y Frotices de sangre perifrica
con formas sanguneas de Plasmodium vivax, Plasmodium malariae y
Plasmodium falciparum. Observacin con lente de inmersin.
2. Preparacin histolgica de tejido heptico con esquizontes tisulares de
Plasmodium. Observacin a mayor aumento.
3. Preparaciones macroscpicas de adultos de Anopheles. Observacin
estereoscpica o con lente panormico.
4. Preparaciones microscpicas de formas evolutivas de Anopheles: larvas
y pupas. Observacin con estereoscopio o lente panormico
Morfologa:
Plasmodium tiene un ciclo de vida asexual que se desarrolla en el hombre
(hospedero intermediario) y un ciclo de vida sexual, que se desarrolla en el
mosquito Anopheles (hospedero definitivo).
El ciclo de vida asexual comprende las siguientes formas evolutivas:
a) Esporozoito: clula alargada de 10 micrones que es inoculada por el
mosquito, en el momento de la picadura.
b) Reproduccin exoeritrocitaria: esquizonte tisular: ubicado en el
citoplasma de los hepatocitos, de tamao variable de aproximadamente
100 micrones que contiene merozoitos que pueden invadir otros
hepatocitos. OBSERVE las preparaciones histolgicas de tejido
heptico, identifique a los esquizontes.
Reproduccin eritrocitaria: las formas eritrocitarias en las lminas de gota
gruesa y frotis de sangre con las formas eritrocitarias de los Plasmodium e
identifquelas de acuerdo al cuadro anterior.
HEMATOZOARIOS
Plasmodium
SU CLASIFICACIN SON: Tripanosomas
Leshmaniasis
Toxoplasma
Plasmodium
P. Vivax
182

Sus tipos son
P. Falciparum
P. Malarie
P. Ovale
Definicin:
Malaria o Paludismo es una antropozoonosis parasitaria causada por
protozoarios, esporozoarios del Gnero Plasmodium y transmitida por
mosquitos del Gnero Anopheles.
Los parsitos:
Plasmodium vivax
Plasmodium malariae
Plasmodium falciparum
Plasmodium ovale
5. Lminas portaobjetos con gotas gruesas y Frotices de sangre perifrica
con formas sanguneas de Plasmodium vivax, Plasmodium malariae y
Plasmodium falciparum. Observacin con lente de inmersin.
6. Preparacin histolgica de tejido heptico con esquizontes tisulares de
Plasmodium. Observacin a mayor aumento.
7. Preparaciones macroscpicas de adultos de Anopheles. Observacin
estereoscpica o con lente panormico.
8. Preparaciones microscpicas de formas evolutivas de Anopheles: larvas
y pupas. Observacin con estereoscopio o lente panormico
Morfologa:
Plasmodium tiene un ciclo de vida asexual que se desarrolla en el hombre
(hospedero intermediario) y un ciclo de vida sexual, que se desarrolla en el
mosquito Anopheles (hospedero definitivo).
El ciclo de vida asexual comprende las siguientes formas evolutivas:
c) Esporozoito: clula alargada de 10 micrones que es inoculada por el
mosquito, en el momento de la picadura.
d) Reproduccin exoeritrocitaria: esquizonte tisular: ubicado en el
citoplasma de los hepatocitos, de tamao variable de aproximadamente
100 micrones que contiene merozoitos que pueden invadir otros
hepatocitos. OBSERVE las preparaciones histolgicas de tejido
heptico, identifique a los esquizontes.
183

Reproduccin eritrocitaria: las formas eritrocitarias en las lminas de gota

gruesa y frotis de sangre con las formas eritrocitarias de los Plasmodium e
identifquelas de acuerdo al cuadro anterior.
Diferencias morfolgicas de los Plasmodium ms importantes en Per
Eritrocitos
y Plasmodium vivax
estado evolutivo
Glbulo rojo
Hipertrofiado.
Granulaciones de
Schffner.
Plasmodium
falciparum
Tamao normal.
Frecuente infeccin
mltiple.
Raras
granulaciones
de
Maurer.
Pequeo,
anular,
perifrico o con
doble cromatina.
Trofozoito joven
Grande, anular.
Trofozoito adulto
Grande, ameboide, No se le observa

ocupa casi todo el
glbulo rojo.
Esquizonte joven
La
cromatina No se observa
extendida
con
signos de divisin,
pigmento malrico
Esquizonte
maduro
Gametocitos
Plasmodium
malariae
Tamao normal.
Raras
granulaciones
de
Ziemann.
Tendencia a forma
en banda
Forma en banda,
ocupa 2/3 partes
del glbulo rojo.
Forma
ovalada,
cromatina
extendida
con
signos de divisin y
pigmento malrico
Hasta
16 No se observa
Hasta
12
merozoitos.
merozoitos
y
Pigmento malrico.
pigmento malrico,
dispuestos
como
roseta.
Grande,
Forma de semiluna. Redondeado.
Macrogametocito: Macrogametocito:
redondeado.
Macrogametocito: Cromatina densa, cromatina densa.
Microgametocito:
cromatina densa.
central.
Microgametocito: Microgametocito: cromatina laxa.
cromatina laxa
Cromatina laxa.

184


185

PLASMODIUM MALARIAE
PLASMODIUM FALCIPARUM

186

PLASMODIUM OVALE
PLASMODIUM VIVAX

187

Accin patgena:
El acceso paldico: escalofro, fiebre y sudoracin es la expresin del shock
anafilctico ocasionado por la ruptura del eritrocito y la liberacin de los
merozoitos al final del ciclo esquizognico de los parsitos.
La anemia que se observa en las formas de duracin prolongada es debida
a la destruccin de los glbulos rojos parasitados.
La hepatoesplenomegalia es producida por la hipertrofia del sistema retculo
endotelial que har la destruccin de os glbulos rojos parasitados y en
esos rganos se depositar, principalmente, el pigmento malrico.
En el paludismo por
Plasmodium falciparum las lesiones viscerales:
cerebro, hgado, rin etc. se deben a la adhesin de los glbulos rojos
parasitados al endotelio de los vasos capilares de esos rganos, alterando
su funcionalidad, dando sintomatologa grave y ocasionando, por insufiencia
de los rganos comprometidos, la muerte, por ello al paludismo producido
por P. falciparum se le conoce como paludismo maligno, siendo el benigno,
el producido por P. vivax, que rara vez ocasiona complicaciones graves.
Ciclo biolgico:
El hombre es el nico hospedero intermediario de los Plasmodium que lo
parasitan.
OBSERVE el esquema adjunto e identifique: el ciclo sexual, el asexual y las
formas evolutivas en cada uno de ellos. Precise a los hospederos definitivo
e intermediario, el ciclo esquizognico, el esporognico, en quienes se
realiza, las fases eritroctica y preeritroctica. Establezca las diferencias
entre las tres especies ms importantes de Plasmodium, en el ciclo
evolutivo y las formas sanguneas.
La forma infectante para el hombre es el esporozoito
El mecanismo de transmisin es por la picadura del mosquito Anopheles.
La puerta de entrada es la piel.
Hay transmisin no vectorial de la Malaria a travs de la transfusin
sangunea, a travs de la placenta y por compartir agujas hipodrmicas
(drogadictos).
Diagnstico:
Se realiza por la bsqueda de las formas sanguneas en frotis o gota gruesa
de sangre, obtenida, de preferencia, durante el acceso paldico. La

188

determinacin de la especie involucrada, principalmente P. falciparum, es

importante para el establecimiento de la terapia apropiada.
La sensibilidad del mtodo de diagnstico mejora cuando se " tien" los
parsitos con naranja de acridina que hace fluorecer a la cromatina de los
parsitos, permitiendo su visualizacin al microscopio de fluorescencia, o
utilizando el mtodo del QBC que recoge la sangre en un tubo capilar, tipo
hematocrito y que centrifugado permite visualizar a los parsitos
fluorescentes, en la zona lmite del paquete de glbulos rojos y blancos y el
suero o plasma. La introduccin de tiras reactivas de papel de nitrocelulosa
con anticuerpos monoclonales a antgenos del parsito ha permitido
detectar las infecciones por P. falciparum (Parasight) y adems por P.
vivax (Optimal) en forma sencilla y rpida, mejorando la oportunidad del
tratamiento.
Las reacciones serolgicas como ELISA. HAI detectan anticuerpos
especficos de cada especie y son tiles para estudios epidemiolgicos. La
aplicacin del PCR, es tambin de utilidad en casos especiales de precisin
del diagnstico.
Siendo el frotis y gota gruesa importante en el diagnstico de la Malaria,
durante el desarrollo de la prctica se proceder a realizar, entre los
estudiantes la preparacin y coloracin de muestras de sangre obtenidas
entre los mismos estudiantes, para lo cual, siguiendo el esquema adjunto,
proceda de la siguiente manera:
Limpie con algodn embebido con alcohol, el pulpejo del dedo medio, luego
que se haya evaporado el alcohol, puncione con la lanceta el pulpejo del
dedo y presione el dedo hasta que fluya una gota de sangre, depostela en
un extremo de una lmina portaobjeto y otra en el centro; con la primera
haga una gota gruesa con la ayuda de la punta de otra lmina portaobjeto y
con la segunda gota de sangre haga un frotis usando el borde de la lmina
portaobjeto auxiliar.
Coloree su preparacin con colorante Giemsa.
La gota gruesa debe tratarse con agua destilada para lisar los glbulos rojos
y luego fijar toda la lmina con alcohol metlico; finalmente, agregar el
colorante diluido por 20 minutos, al cabo de los cuales, lavar a chorro con
agua de cao. Secar y observar la lmina con inmersin.
Mtodo del frotis y la gota gruesa
Limpiar el dedo con algodn impregnado con alcohol
Pinchar el pulpejo del dedo con una lanceta estril y descartable

189

Tomar dos gotas de sangre en una lmina portaobjeto. Una en medio de

la lmina y la otra hacia un extremo
Con la gota del centro de la lmina hacer un extendido con otra lmina
portaobjeto inclinndola 45.
Con la gota en el extremo haga una gota gruesa usando la punta de otra
lmina portaobjeto con movimientos circulares.
Identifique con lpiz la muestra.
Tia la muestra con colorante Giemsa
ENFERMEDAD DE CHAGAS O TRYPANOSOMIASIS AMERICANA
Definicin:
Zoonosis parasitaria causada por Trypanosoma cruzi, flagelado transmitido
por insectos hempteros, heterpteros, hematfagos pertenecientes a tres
Gneros, principalmente: Triatoma, Rhodnius y Panstrongylus.
El parsito:
TRYPANOSOMA CRUZI
Trypanosoma cruzi es un flagelado de la Clase Zoomastigophora, que hay
que distinguirlo de Trypanosoma rangeli, flagelado no patgeno que tiene
una distribucin geogrfica que suele superponerse a la de Trypanosoma
cruzi.
Frotis de sangre con trypomastigotes. Observacin con lente de
inmersin
Preparacin en fresco de cultivo con epimastigotes. Observacin a
mayor aumento
Preparacin microscpica de cultivo con epimastigotes teidos con
Giemsa. Observacin con lente de inmersin.
Preparacin histolgica de corazn con formas amastigotes, teidos
con Hematoxilina-eosina. Observacin con lente de mayor aumento y
luego con inmersin.
Preparacin, en fresco, de heces de triatominos infectados con
epimastigotes. Observacin a mayor aumento.

190

Reduvideos vivos en sus estados evolutivos: huevo, ninfa y adulto.

Observacin con estereoscopio.
Caja de Xenodiagnstico. Observacin macroscpica.
Morfologa:
EL Trypanosoma cruzi presenta tres formas evolutivas:
Guese por los dibujos adjuntos.
a) Trypomastigote. EXAMINE la lmina con el frotis de sangre y observe
una clula de forma semilunar de aproximadamente 10 a 15 micrones de
longitud por 4 de dimetro trasversal, ncleo central, quinetoplasto en la
extremidad posterior, muy prominente, del que emerge un flagelo que
bordea una membrana ondulante y se prolonga hasta la extremidad
anterior, de la que emerge sola.
b) Epimastigote. EXAMINE la preparacin en fresco de cultivo del parsito

y de heces de triatominos infectados; observe formas alargadas de 20 a
30 micrones de longitud de movimiento ondulado y rpido por la
presencia de flagelo. OBSERVE la preparacin microscpica de cultivo
del parsito teida con Giemsa. Preste atencin a la forma el cuerpo
alargado, presencia de ncleo y quinetoplasto prominente cercano al
ncleo del que emerge un flagelo que bordea una membrana ondulante
y se prolonga por la extremidad anterior del parsito, emergiendo de l.

191

c) Amastigote: EXAMINE la preparacin histolgica de corazn y ubique

en el interior de las fibras musculares "nidos" de amastigotes, clulas
redondeadas de 2 a 4 micrones de tamao en los que se puede
distinguir el ncleo y el quinetoplasto. Preste atencin a la necrosis de
las fibras musculares y a la infiltracin de clulas polimorfonucleares y
linfocitos intra e interfibrilares.

192

Ciclo biolgico:
La forma infectante para el hombre es el trypomastigote metacclico. El

mecanismo de transmisin es la contaminacin de la piel erosionada,
mucosa o conjuntiva ocular con heces de triatomino conteniendo los
trypomastigotes, las mismas que son depositadas por el insecto en el
momento de la picadura.
La puerta de entrada es la piel.
El hombre puede adquirir la infeccin por transmisin no vectorial:
transfusin sangunea, transmisin placentaria, transplante de rganos.
El parsito se reproduce por divisin binaria en los estados de amastigote y
epimastigote. El trypomastigote no se reproduce.
Los principales reservorios de los parsitos son mamferos, principalmente
pequeos. En nuestro pas se han demostrado al cobayo y mamferos
sinantrpicos como las ratas y ratones que son los principales reservorios.
Accin patgena:
El parsito se ubica intracelularmente bajo la forma de amastigote. El
parsito puede parasitar cualquier clula; sin embargo, son las clulas de
los tejidos muscular, nervioso y linftico, los ms frecuentemente
parasitados. Al inicio de la infeccin, la reproduccin abundante del
amastigote en el interior de la clula determina la necrosis de la misma y el
reemplazo por tejido conjuntivo fibroso que alterar la estructura y funcin del
193

rgano parasitado (agrandamiento del corazn e insuficiencia cardiaca;

destruccin de los ganglios de los plexos nerviosos intramurales de esfago
e intestino determinando dilatacin de dichos rganos: megaesfago,
megacolon, etc.).
En la enfermedad de Chagas o Trypanosomiasis americana se reconocen
dos periodos: el agudo correspondiente a la necrosis celular y reaccin
inflamatoria de los tejidos parasitados y el crnico en que la fibrosis se hace
ms evidente, a lo que se agrega un estado de autoinmunidad pues en la
lesin tisular es muy difcil mostrar la presencia del parsito y al parecer la
destruccin tisular estimulada por el parsito determina la liberacin de
fracciones tisulares o complejos proteicos que actan como autoantgenos
favoreciendo la continuidad del dao celular.
Diagnstico:
El diagnstico parasitolgico directo, o sea la demostracin del parsito
puede hacerse por examen de sangre, en fresco, en frotis o gota gruesa,
slo en la etapa aguda o en el nio que nace con infeccin congnita, en
esas situaciones son tiles el hemocultivo y el xenodiagnstico que utiliza
triatomas criados en el laboratorio y libres de infeccin para hacer picar al
sospechoso de la infeccin y luego examinar las heces del insecto, lo cual
demanda tiempo, hasta 4 meses de observacin.
Las pruebas serolgicas como HAI (hemoaglutinacin indirecta), IFI
(inmunofluorescencia indirecta) y ELISA son tiles en la etapa crnica o
subaguda. El PCR se emplea en casos especiales de precisin diagnstica.
Hay personas que son portadoras del parsito sin manifestaciones clnicas
de la infeccin, las cuales deben ser reconocidas, principalmente mediante
pruebas serolgicas para evitar que donen sangre o preveer la transmisin
congnita o donacin de rganos; adems, dichas personas deben ser
peridicamente controladas clnicamente, pues, pueden tratarse de casos
crnicos que puede aparecer la sintomatologa con el correr del tiempo.
El insecto vector:
Los vectores biolgicos de Trypanosoma cruzi son reduvideos, hempteros,
pertenecientes a la Clase Insecta, siendo los principales pertenecientes a
tres gneros: Triatoma, Rhodnius y Panstrongylus.
En nuestro pas se han identificado ms de 15 especies de reduvideos
relacionados a la transmisin del parsito.

194

Importancia mdica:
Hay especies domiciliares, peri domiciliares y silvestres; la capacidad
vectorial de las diversas especies est en relacin al mayor o menor
contacto con los animales reservorios domsticos o silvestres.
Triatoma infestans, conocido con el nombre de "chirimacha" es el ms
importante vector en el pas, por ser domiciliario, siendo su distribucin en
los departamentos del suroeste del sur. Triatoma carrioni y Rhodnius
ecuadoriensis, peri domiciliarios se les suele encontrar en el interior del
domicilio en los departamentos del norte; y en la selva Panstrogylus herreri
ha sido con frecuencia encontrado.
La crianza de los reduvideos en laboratorio se hace alimentndolos sobre
aves, ya que en ellas no se desarrolla el parsito, con lo cual se puede tener
insectos libres de infeccin que se pueden usar en la preparacin de los
xenodiagnsticos.
Mtodos de diagnstico de laboratorio de la Enfermedad de Chagas
Mtodo
Sangre fresca
Frotis y gota gruesa
Hemocultivo
Pruebas
serolgicas
Xenodiagnstico
Etapa aguda
++
+
+++
--
Etapa crnica
----------++++
Congnita
++++
++
++++
++ ?
Portador
------------++++
++++
++
++++
++

195

-) no til; +) poco til, ++) til, +++) muy til, ++++) preferencia ++?) Slo
tiene valor el hallazgo de IgM especfica, pues la IgG de la madre pasa la
placenta.

196

MANUAL DE
LABORATORIO CLNICO
UNIDAD
QUMICA CLNICA
197

QUMICA SANGUNEA:
La determinacin del contenido de diversos componentes de la
sangre tiene una importancia que va en aumento para el diagnstico y
tratamiento de la enfermedad, muchos de los mtodos de la qumica
sangunea requieren de la preparacin de un filtrado libre de protena para
analizar los componentes que en el quedan entre los que se cuentan la
urea, el nitrgeno no proteico, glucosa, cido rico y creatinina0; muchas
otras substancias que determinan usando sangre completa oxalatada y
plasma o suero sanguneo sin la remocin previa de las protenas.
BIOQUMICA:
La Bioqumica es la rama de la Qumica que estudia los seres vivos,
especialmente de la estructura y funcin de sus componentes qumicos
especficos, como son las protenas, carbohidratos, lpidos y cidos nucleicos,
adems de otras pequeas molculas presentes en las clulas.
La bioqumica se basa en el concepto de que todo ser vivo contiene carbono y en
general estn compuestos de carbono, hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, fsforo y
azufre.
La bioqumica est conformada por la qumica de sustancias que pueden ser
catalogadas fundamentalmente en estos epgrafes:
Carbohidratos
Lpidos
Protenas y Aminocidos
cidos nucleicos
Se divide en varias ramas tales como:
Bioqumica celular o Biologa celular: Es un rea de la Biologa que se dedica al
estudio de la clula, su comportamiento, la comunicacin entre orgnulos al
interior de la clula y la comunicacin entre clulas.
Representacin esquemtica de la molcula de ADN, la molcula portadora de
la informacin gentica.
Gentica: Es un rea de la Biotecnologa dnde se estudia principalmente el
DNA (en espaol AON) y el RNA (ARN), para entender la funcin de cada una de

198

sus partes, su codificacin, para luego intentar identificar ciertas patologas,

rasgos e, incluso, modificarlas.
Glucosa
Glucosa, o dextrosa, es una forma de azcar encontrada en las frutas y en la
miel. Es un monosacrido con la misma frmula emprica que la fructosa pero con
diferente estructura. Es una hexosa (6 tomos de carbono).
Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con
fructosa), que puede ser extrada y concentrada para hacer un azcar
alternativo. Pero a nivel industrial tanto la glucosa lquida (jarabe de glucosa)
como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir de la hidrlisis
enzimtica de almidn de cereales (generalmente trigo o maz).
Molcula, (CHizOe) es una Aldohexosa (Aldehido pentahidroxilado) y un
monosacrido. La glucosa es el compuesto orgnico ms abundante de la
naturaleza. Es la fuente principal de energa de las clulas, mediante la
degradacin catablica, y es el componente principal de polmeros de importancia
estructural como la celulosa y de polmeros de almacenamiento energtico como
el almidn.
En su forma (b-Glucosa) sufre una delacin hacia su forma hemiacetlica para
lograr sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y D-glucopiranosa) que a su
vez presentan anmeros Alpha y Beta. Estos anmeros no presentan diferencias
de composicin estructural, pero s difieren de caractersticas fsicas y qumicas.
La D-(+)-glucosa es uno de los compuestos ms importantes para los seres vivos,
incluyendo a seres humanos.
En su forma 6 -D-glucopiranosa, una molcula de glucosa se une a otra gracias a
los -OH de sus carbonos 1-4 para formar Celobiosa [l-4] a travs de un enlace 6,
y al unirse varias de estas molculas, formar Celulosa.
QUIMICA CLNICA:
Es la ciencia que estudia las alteraciones qumicas, cualitativas y cuantitativas de los
lquidos biolgicos.
A. Clasificacin de acuerdo a los resultados
1. Cualitativos:
Ausencia o presencia, calidad (positivo),
2. Cuantitativos: Representacin en nmeros ejemplo 25grs.

3. Semicuantitativos: Son valores aproximados ejemplo: el qumico de la orina que se
199

realiza con tiras qumicas o reactivas.

B. Clasificacin de acuerdo a los procedimientos
1. Colorimetrito: Mide el color.
2. Gravimtrico: Se basa en la gravedad y el peso.
3. Titri mtrico: Se basa en reacciones de valoracin
4. Gasometrito: Mide los gases.
C. Clasificacin de acuerdo a la cantidad de la muestra
1. Macromtado: Se dice que es de ms de 0,5ml de muestra.
2. Mocromtado: Se dice que es entre de 0.05 y 05ml de muestra.
3. Ultramicrometodo: son volmenes inferiores a O.OSml de muestra.
La exactitud de los resultados en el laboratorio clnico de la tcnica del individuo que lleva a
cabo los anlisis, la buena tcnica es algo ms que la habilidad para usar la pipeta o seguir las
intrusiones escritas. Incluye la preparacin compresin de cada uno de los pasos que se van a
seguir, la razn que justifica cada uno de ellos y las dificultades que pueden surgir.
RECOLECCIN DE LA MUESTRA:
Para la toma de muestras es necesario tomar en cuenta factores que no son debidos a la
enfermedad pero que influyen directamente en que determinados constituyentes disminuyen su
concentracin.
Estos factores son: Drogas dietas, estado emocional, condiciones de reposo o ejercicio.
Para la obtencin de la muestra es necesario controlar varios aspectos.
Sitio de toma de muestra y tcnica a seguir
Material que se va a utilizar en la toma de la muestra (tubos de ensayo.).
Identificacin clara del paciente o nmero de identificacin.
CAUSA DE HEMOLISIS.
Brusquedad en el manejo de la muestra.
Sacar sangre de la jeringa sin retirar la aguja.
Formacin de espuma al no escurrir la sangre lentamente. sobre la pared del tubo.
Mezclar la sangre con soluciones que no estn correctamente preparadas.
200

Mezclar con el anticoagulante sacudindolo

Los recipientes para colectar la muestra de bioqumica no solo deben estar limpios,
sino libres de sustancias contaminantes.
TIPOS DE MUESTRA A RECOLECTAR
SANGRE TOTAL:
Es la muestra obtenida en un recipiente, que contiene anticoagulante y que contiene todos los
elementos celulares.
SUERO:
Se obtiene despus de que la sangre a estado en reposo durante de 5-15 minutos despus de
haber sido extrado en un recipiente si anticoagulante.
TIPOS DE ANTICO ACULANTES
1. OXALATOS:
Usados en la hematologa
2. CITRATOS:
Usados en las pruebas de coagulacin.
3. HEPARINA:
Usada para determinacin de sodio y potasio.
D. Muestras ms usadas en Q.C.
1. Suero: Se centrifuga la sangre y el sobrenadante es el suero.
2. Plasma: Se obtiene de la sangre con anticoagulante.
3. Sangre Total: la que se extrae del paciente con todos sus elementos.
E. Los Reactivos: son sustancias qumicas que al ponerse en contacto con otro producen un
fenmeno aparente o no. En ellos tenemos lquidos slidos y puros lquidos. El reactivo ms
importante es el agua en Qumica Clnica.
F. Conservacin de Reactivos: Este depende de las caractersticas a seguir las indicaciones
del fabricante. Leer instructivo o manual.
G. Causas de Error:
1. Cristalera mala lavada.
201

2. Error en las medidas.

3. El Agua de mala calidad.
Muestra despus de desayuno,
Sueros: Entre estos tenemos:
1. Suero Normal: Es amarillo claro se usa para todo estudio en Qumica Clnica.
2. Suero Bemolizado: Es rojizo debido al rompimiento de leucocitos.
3. Suero icterico: Es amarillo intenso y tiene presencia de bilirrubinas.
Es lechhoso o grasoso debido a la presencia de grasaS.
LAS VITAMINAS
Ayuda a nuestro cuerpo a prevenir enfermedades segn su soluvilidad las
vitaminas se clasifican (solubles en agua) y liposolubles (solubles en lipidos)
Vitaminas y minerales
Vitaminas
VITAMINA ALIMENTOS EN LOS QUE SE
ENCUENTRA
FUNCIONES
PRINCIPALES
EFECTOS DE LA
DEFICIENCIA
Liposoluble
A retinol
Vegetales, productos
lcteos, hgado
D calciferol
Productos lcteos, huevos, Absorcin de calcio, formacin de

aceite de hgado de
los huesos
pescado, luz ultravioleta
Raquitismo
E tocoferol
Margarina, semillas,
verduras de hoja verde
Protege contra la oxidacin de

cidos grasos y membranas
celulares
Anemia
Coagulador sanguneo
Inhibicin de la coagulacin
de la sangre
K antihemorraaca y Verduras de hoja verde

filoquinona
Componente de pigmentos
Ceguera nocturna, ceguera
sensibles a la luz. Afecta a la vista permanente, sequedad en la
y al mantenimiento de la piel
piel
Hidrosoluble
B1 (Tiamina)
Vsceras, cerdo, cereales, Metabolismo de los hidratos de

legumbres
carbono. Regulacin de las
funciones nerviosas y cardiacas
Beriberi (debilidad muscular,

mala coordinacin e
insuficiencia cardiaca)
B2 (Riboflavina)
Productos lcteos, hgado, Metabolismo

huevos, cereales,
legumbres
Irritacin ocular, inflamacin y

ruptura de clulas
epidrmicas
B3 (Nicotinamida)
Hgado, carne magra,

cereales, legumbres
Reacciones de oxidacin-reduccin Pelagra (dermatitis, diarrea y

en la respiracin celular
trastornos mentales)
B5 (cido
pantotnico)
Productos lcteos, hgado, Metabolismo

huevos, cereales,
legumbres
Fatiga, prdida de
coordinacin
Cereales, verduras, carnes Metabolismo de los aminocidos
Convulsiones, alteraciones en
la piel y clculos renales
B6 (Piridoxina)

202

B12 (Cobalamina)
Carnes rojas, huevos,

productos lcteos
Metabolismo de los cidos

nucleicos
Anemia perniciosa, trastornos

neurolgicos
Carnes, verduras,
legumbres
Sntesis de cidos grasos y

metabolismo de aminocidos
Depresin, fatiga, nuseas
Biotina
Ctricos, verduras de hoja

C (cido ascrbico) verde, tomates
Formacin de colgeno en dientes, Escorbuto (hemorragias y

huesos y tejido conectivo de vasos cada de dientes)
sanguneos
cido flico
Metabolismo de los cidos

nucleicos
Anemia, diarrea
FUNCIONES
PRINCIPALES
EFECTOS DE LA
DEFICIENCIA
Alimentos integrales,
verduras de hoja verde,
legumbres
Minerales
MINERAL ALIMENTOS EN LOS QUE SE
ENCUENTRA
Principal
Calcio
Leche, queso, legumbres,

verduras
Formacin de huesos y dientes,

coagulacin sangunea y
transmisin nerviosa
Raquitismo, osteoporosis
Cloro
Alimentos que contienen sal, Regulacin de fluidos entre clulas Desequilibrio cido-base en los
algunas verduras y frutas
o capas de clulas
fluidos corporales (muy raro)
Cereales, verduras de hoja

Magnesio verde
Activacin de enzimas, sntesis de

protenas
Fallos en el crecimiento, problemas

de comportamiento, convulsiones
Fsforo
Leche, queso, yogur,

pescado, aves de corral,
carnes, cereales
Formacin de huesos y dientes,

mantenimiento del equilibrio cidobase
Debilidad, prdida de calcio
Potasio
Bananas, verduras, patatas, Mantenimiento del equilibrio cidoleche, carnes

base y de fluidos, transmisin
nerviosa
Calambres musculares, prdida del

apetito, ritmo cardiaco irregular
Azufre
Pescado, aves de corral,

carnes
Mantenimiento del equilibrio cidobase y funcionamiento del hgado
Trastornos poco probables aunque el

cuerpo reciba menos cantidades de
las necesarias
Sodio
Sal de mesa
Mantenimiento del equilibrio cidobase y del nivel de agua en el

cuerpo, funcin nerviosa
Calambres musculares, prdida del

apetito
Legumbres, cereales,
vsceras, grasas, aceites
vegetales, carnes, cereales
Metabolismo de la glucosa
Aparicin de diabetes en adultos
Carnes, agua potable
Formacin de glbulos rojos
Anemia, afecta al desarrollo de

huesos y tejido nervioso
Agua potable, t, marisco
Mantenimiento de la estructura
sea, resistencia a la caries dental
Osteoporosis, caries dental
Traza
Cromo
Cobre
Flor
Pescado de mar, marisco,

Sntesis de las hormonas tiroideas
productos lcteos, verduras,
sal yodada
Inflamacin del tiroides (bocio)
Yodo
Carnes magras, huevos,

cereales, verduras de hoja
verde, legumbres
Formacin de hemoglobina
Anemia
Hierro
Marisco, carnes, cereales
Previene la descomposicin de
Anemia
grasas y otras sustancias qumicas
del cuerpo
Carnes magras, pan y
Componente de muchas enzimas
Selenio
Fallos en el crecimiento, atrofia de

203

cereales, legumbres, marisco
las glndulas sexuales, retraso en la

curacin de heridas
Cinc
CREATININA:
Es el producto de la desintegracin de la creatina, la creatinina libre
existe tanto en la sangre como en la orina, aparentemente la excrecin de la
creatinina es un paso preliminar necesario para la excrecin de la mayor
parte de la creatina.
CIDO RICO:
Es el producto final del metabolismos de las purinas es muy poco
soluble de manera QUE en las orinas cidas tiende a precipitarlo con el
reposo este factor tambin puede aumentar la tendencia a formar clculos
renales en los pacientes gotosos en cambio los uratos es decir sales
alcalinas de cido rico son mucho ms solubles.
GLUCOSA:
Los carbohidratos y azcares, se hayan distribuidos ampliamente, la
glucosa tanto en los tejidos animales como en los vegetales en las clulas
animales constituye una importante fuente de energa para las actividades
del organismo. La glucosa es el azcar del organismo cuando se ingieren
en forma de otros azcares (fructuosa del jugo de frutas, o miel y galactosa
de la leche.
El hgado se encarga de convertirla en glucosa y as la utiliza el
organismo cuando existe glucosuria, la glucosa es el azcar que se
encuentra en la orina.
PROTENAS Y LA RELACIN A.G.
Las protenas del suero solo estn formadas por las fracciones de
albminas y globulinas del plasma ya que la mayor parte del fibringeno se
separa de la coagulacin; estas dos fracciones pueden compararse con el
uso de una solucin de sulfato de sodio la que precipita las globulinas y deja
en solucin las albminas la concentracin de globulinas se obtiene
restando la concentracin de albminas de las protenas totales la relacin
entre estas dos fracciones en de dos de dos de albmina por una de
globulina. En muchos padecimientos (cirrosis, desnutricin, mieloma) esta
relacin est invertida.

204

CALCIO:
El calcio existe en el organismo en mayor cantidad que cualquier otro
catin; se encuentra localizado mayormente en los huesos y en los dientes
las clulas de la sangre contiene muy poco calcio la mayor parte se
encuentra en el plasma donde existe en tres formas (calcio difusible) (unido
a las protenas no difusible) y una pequea cantidad que forma un complejo
probablemente bajo la forma de citrato. En las determinaciones habituales
de calcio se miden juntas las tres fracciones la disminucin de la fraccin
ionizada de calcio srico produce la tetania. Un aumento en la
concentracin de fsforo tambin predispone a una disminucin de los
niveles del calcio en el suero.
FSFORO:
El fsforo existe en toda la clulas del organismo pero la mayor parte
de el (aproximadamente el 80%) se encuentra combinado con el calcio en
los huesos y dientes.
SODIO:
Este elemento es el principal elemento de los cationes en el lquido
extracelular una de sus funciones importantes es el mantenimiento de la
presin osmtica de los lquidos del cuerpo protegiendo el organismo contra
las perdidas excesivas de lquido de lquido, otra de sus funciones es
preservar la excitabilidad normal de los msculos y la permeabilidad de las
clulas.
POTASIO:
Constituye el principal catin del lquido intracelular y funciona dentro
de las clulas, como el sodio del lquido extracelular, regulando el equilibrio
cido bsico y la presin osmtica incluyendo la retencin del agua.
BILIRRUBINA:
Es la fraccin porfirina de la hemoglobina y constituye el elemento
principal pigmento de la sangre y la bilis, su forma por el desdoblamiento de
la hemoglobina procedente de los eritrocitos desintegracin por lo que
cualquier trastorno, que provoque una mayor destruccin de los glbulos
rojos producirn un aumento de ella despus de pasar por el hgado, la
bilirrubina llega a la bilis en forma concentrada o modificada ya en el
intestino se convierte en estercobilina el pigmento que da su color normal al
205

excremento. El urobilingeno es la bilirrubina que llega de la circulacin

general a los riones y es excretada por la orina en su forma sangunea (no
conjugada) antes de pasar por el hgado la bilirrubina no puede ser
excretada por los riones en las tcnicas de: Van den Vergh y de Malloy y
Evelyn, para determinaciones de la bilirrubina, da una reaccin indirecta.
La bilirrubina que el hgado a retirado de la sangre conjugada con
cido glucornico puede ser excretada por los vasos capilares y da una
reaccin directa en las mismas tcnicas el aumento de cualquiera de las
dos formas provocar una elevacin en la bilirrubina total.
VALORES NORMALES:
La sangre normal contiene menos de 1 ml. de bilirrubina
(generalmente de 0.2 0.8 ml). Esta cantidad est constituida caso
exclusivamente de bilirrubina conjugada o de reaccin indirecta las
concentraciones elevadas (2 mlgs. caractersticas coloracin amarillenta de
la piel y las esclerticas llamadas ictericia).
ICTERICIA:
Aunque existe muchas clasificaciones de ictericia sus dos categoras
ms simplificadas son ictericia de retencin y de regurgitacin.
La primera es debido a un aumento en la concentracin de bilirrubina
indirecta en el suero como concentracin en la capacidad del hgado para
retirarla de la sangre conjugarla y excretarla al intestino la causa de esta
enfermedad puede ser un padecimiento hemoltico (destruccin excesiva y
rpida de los glbulos rojos) o un trastorno de la funcin heptica. En
ambos casos parcialmente incapaz de extraer la bilirrubina de la sangre en
cambio de ictericia por regurgitacin aumenta la bilirrubina directa lo cual
indica que el hgado si ha conjugado la bilirrubina pero esta ha sido
regurgitada hacia la sangre debido a una obstruccin de los conductos
biliares por lo tanto el saber si una aumento de bilirrubina srica se debe a
una elevacin de la forma directa o indirecta ayuda mucho al diagnstico.
HIPERBILIRRUBINA EN EL RECIEN NACIDO.
En los casos incompatibles sangunea maternofetal como los que
ocurren en los sistemas ABO-RH, el RN puede presentar ictericia,
hiperbilirrubinemia, debido a que la rpida destruccin de sus glbulos rojos
la concentracin de bilirrubina en el suero es el dato ms importante para
llevar a cabo un exsanguneo-transfusin con el efecto de evitar
206

Kecnicterus que puede producir lesiones cerebrales, se acepta

generalmente las cifras de 20ml% como el punto decisivo para realizarla.
ENZIMAS:
Las enzimas son protenas catalticas producidas por todos los
rganos vivos por medio de la catlisis se aceleran casi todas la reacciones
qumicas intracelulares que de otra manera se desarrollaran tan lentamente
que la vida tan como la conocemos no sera posible para casi cada uno de
los compuestos orgnicos y tambin para los inorgnicos existe una enzima
capaz de reaccionar con l produciendo algn cambio qumico los primeros
nombres aplicados a las enzimas por ejemplo: Tripsina, ptialina, pepsina,
no daban informacin a cerca del tipo de reacciones catalizada por
consiguiente, se les llam de acuerdo con el sustracto sobre el cual acta
agregndole el subfijo aza. As las enzimas que actan sobre el almidn se
le llam amilasa la que demuelen los lpidos, lipasas, las que actan con el
fsforo fasfatasas hay muchas enzimas presentes en el cuerpo pero aqu
se vern las importancia clnica comn.
AMILASA:
Es la enzima que interviene en la conversin de almidn glucosa esta
baja en las enfermedades hepticas y elevadas en la pancreatitis aguda
obstruccin intestinal y diabetes.
TRANSAMINASAS:
Hay dos enzimas transaminacicas como componentes importantes
de los tejidos humanos, su funcin consiste en facilitar la sntesis y el
desdoblamiento de los aminocidos en el organismo y controlar as el
metabolismo de las protena, como transaminasa recibe su nombre de los
productos finales de la reaccin en que intervienen as la transminasaglutmico pirvico (T.G.P.) en la transaminasa crica que provoca la
formacin de cido glutmico y cido pirvico como productos finales de la
reaccin mientras que la transaminasa glutmico oxalactica (T.G.O.)
provoca cido glutmico y cido oxalactico la destruccin de cualquier
tejido que tenga un elevado contenido de tranzaminasas dar como
resultado la liberacin de estas enzimas hacia la sangre circulante esto es
particularmente notable en las enfermedades hepticas por ejemplo:
hepatitis infeccioso en las cuales se encuentran elevadas concentraciones
de (T.G.P.) en la circulacin.

207

La intoxicacin por tetracloruro de carbono puede producir hasta

concentraciones de 2,000 de T.G.P. El hgado contiene ms T.G.P. que
T.G.O. mientras que en el miocardio predomina considerablemente esta
ltima. El infarto del miocardio puede producir una concentracin de 10
veces mayor que lo normal esta concentracin elevada dura 3 cuatro das
y vuelve a la normalidad a menos que ocurra otro infarto.
FOSFATASA ALCALINA:
Esta enzima se encuentra elevada
heperparatiroidismo e ictericia constructiva.
en
el
raquitismo
FOSFATASA ACIDA:
Se encuentra elevada en el carcinoma de la prstata y en el ceno.
LIPASA:
Reducida en el cncer enfermedades hepticas y diabetes mellitus
elevada en la pancreatitis aguda y cncer del pncreas.
DESHIDROGENASA LACTICA:
Elevada en las primeras 24 horas del infarto del miocardio tambin en
la leucemia aguda y en las reacciones en las recadas de leucemia crnica
LIPOPROTEINAS DE BAJA DENSIDAD (L.D.L.)
Son los llamados lpidos malos transportan en el plasma desde el
hgado hasta otras partes del cuerpo para depositarlo en los tejidos del
perifrico. Las L.D.L., se relacionan con un aumento del riesgo de la
enfermedad arteriosclertica del corazn se aumenta en:
1.-
Anorexia nerviosa
2.-
Diabetes mellitus
3.-
Dieta alta en colesterol y grasa saturada
4.-
Enfermedad heptica
5.-
Sndrome nefrtico
6.-
Hipotiroidismo
Se disminuyen en:
208

1.-
Desnutricin
2.-
Estrs
3.-
Enfermedad articular inflamatoria
4.-
Enfermedad pulmonar
5.-
Hipertiroidismo
Factores que afectan los resultados:
1.-
Consumo de alcohol en 24 horas antes de la prueba
2.-
Dieta alta en grasas saturadas (mantequillas, crema, tocino, dulces)
H.D.L. LIPOPROTEINAS DE ALTA DENSIDAD:

En un tipo colesterol que transporta la alfalipoprotena se piensa que
protege contra el riesgo de la enfermedad de arteria cotinica se aumenta
con:
-
Alcoholismo
Hepatitis crnica
Cirrosis
Se disminuye con:
-
Enfermedad heptica
Enfermedades Dieta alta CHON (los valores)
Tabaquismo
( valores)
QUIMICA CLINICA (Fundamentos)

QUMICA CLNICA
Se sugiere leer siempre todos los prospectos de cada reactivo antes de usar
reactivos nuevos.

209

PRUEBAS DE BIOQUMICA:
DHL
TOTAL
Pruebas Cardiacas
MB
TGO-ASAT-Amino Trasteraza
Transa
F/A= Fasfatasa Alcalina

BBSS= Bilirrubina
Pruebas Hepticas
TTSS= Transaminasas
Gama GT= glutamil transferasa= GGT
F/A= Alcalina
Pruebas Pancreticas
Lipasa
Amilasa

210

QQSS=
Qumica
Sangunea
Pruebas Renales
Nitrgeno de Urea
Creatinina
VLDL= Liproteina de muy baja densidad

HDL= Liproteina densidad
Perfil Lpido
LDL= Liproteina densidad

Triglicridos
Colesterol
PRECAUCIONES:
El tcnico conciente est al tanto de los peligros que existen en el
laboratorio el personal nuevo debe ser instruido en cuanto a las posibles
fuentes de peligro y los medios apropiados para evitar accidentes
innecesarios.
SOLUCIONES:
Todo reactivo derramado debe ser limpiado lavando con agua el espacio
afectado por una solucin cida debe neutralizarse con bicarbonato de
sodio; si es solucin alcalina se neutraliza con soluciones al 2% de cido
brico o cido actico.

211

VENENOS:
Toda solucin venenosa debe llevar un rtulo advirtindolo no debe usarse
la boca para pipetearlas si no una perilla de succin
INFLAMABLE:
Los fluidos inflamables deben manejarse con mucho cuidado. Cuando se
evaporen soluciones que contengan alcohol, ter use bao de vapor o
Mara o una plancha de elemento encerrado nunca una flama o plancha de
elemento del cubierto.
La evaporacin debe llevarse a cabo lentamente para evitar el sobre
calentamiento que pueda producir una explosin.
ESPECIMENES:
El lquido cefalorraqudeo preparado (L.C.R.) la sangre las heces y dems
fluidos que se analizan pueden ser patgenos por lo tanto debe tenerse
mucho cuidado al manipularlos y as evitar cualquier contaminacin. El
personal de laboratorio deber mantener sus uas cortas y limpias y lavarse
frecuentemente con agua y jabn.
ESTABILIDAD DE REACTIVOS:
Muchos reactivos son inestables por lo que se debern ser sometidos a
refrigeracin debe ponerse especial cuidado al refrigerar los que as lo
necesitan sacndolos slo un momento para tomar la cantidad necesaria si
es que se tienen que mantener, en la oscuridad tambin se usar el tiempo
preciso nunca debe usarse una misma pipeta para varios reactivos a la vez.
FILTROS:
La finalidad de la filtracin es separar un componente slido de uno de uno
lquido. La filtracin se lleva a cabo usualmente pasando el lquido a travs
de una barrera porosa que tienen aberturas ms pequeas que las
partculas slidas que uno desea filtrar.
Se puede filtrar por medio de papel por succin o por vidrio poroso en el
laboratorio de qumica se usa el papel filtro o se separa por centrifugacin.

212

ESPECTROFOTOMETRIA:
Es la medida de la absorcin o emisin de energa radiante.
La medida de la energa se realiza por aparatos como:
1) Fotocolormetro: Klett summerson (trabaja en base a filtros)
FILTRO
Amarillo
Azul
Verde
LONGITUD DE ONDA
500-700 nm.
350-500 nm.
380-700 nm.
LEY DE BEER:
A mayor concentracin mayor color de sustancias a determinar.
COLORMETRO:
La mayora de las pruebas qumicas que se hacen en el laboratorio clnico
se basan en la produccin de un color especfico en los anlisis cualitativos
la presencia o ausencia de este color es importante en el anlisis
cuantitativo la intensidad del color de una solucin desconocida se compara
con un color estndar.
PRINCIPIOS FISICOS BSICOS DE LA LUZ:
La luz esta formada de energa radiante que se transmite en ondas, a la
cresta de las ondas se les llama mxima mientras que a los valles se les
llama mnima. La distancia entre dos mximas vecinas o dos mnimas
vecinas se presenta la longitud de onda.
La unidad de longitud de onda es el milimicrn, el cual se observa y se
abrevia; M.U. El espectro de la luz se puede dividir en tres regiones
distintas.
LA REGION ULTRAVIOLETA:
Est compuesta de onda de longitud menores de 400 m.u. y es
invisible a ojo humano.
LA REGION INFRARROJA:
Incluye longitudes de onda por encima de 700 m.u y es tambin invisible.

213

La regin visible se encuentra entre 400 y 700 m.u. al variar la longitud de

onda el ojo distingue los diferentes colores aproximadamente en la forma
siguiente:
Violeta........................................................................................ 400
425 m.u.
Azul............................................................................................ 425
490 m.u.
Verde...........................................................................................490
575 m.u.
Amarillo.......................................................................................575
585 m.u.
Naranja.........................................................................................585
650 m.u.
Rojo..............................................................................................650
700 m.u.
a
a
a
a
a
a
La luz blanca es una mezcla de todas las longitudes y por consiguiente de

todos los colores visibles si la luz blanca es refractada por un prisma de
vidrio o rejilla de difraccin, se obtiene un patrn espectral de todos los
colores visibles. En la naturaleza un arcoiris es el resultado de la separacin
de la luz blanca en distintos componentes de longitud de onda (colores por
gotitas de humedad que estn en la atmsfera).
ABSORCIN DEL COLOR Y DE LA LUZ:
Los lquidos coloreados aparecen as porque absorben selectivamente
ciertas longitudes de honda de luz blanca y permiten que sean transmitidas
otras longitudes de onda pasen a travs de ella si al agua de le agrega
cromato de potasio la solucin se volver amarilla. El bicromato de potasio
tiene la propiedad de absorber todas las longitudes de onda del espectro en
grado mayor o menor menos las longitudes de onda de la luz amarilla que
pasan sin estorbos a travs de la solucin.
Las longitudes de onda transmitidas en mayor por esta solucin son las que
producen color amarillo la propiedad de una sustancia de absorber
selectivamente ciertas longitudes de onda de luz mientras transmite otras
esta determinada por la estructura molecular y atmica de la sustancia tiene
una capacidad propia de absorcin de luz.

214

COLORIMETRA FOTOELCTRICA:
Est basada en la medicin del grado de absorcin de la luz de una
solucin desconocida en comparacin con la solucin estndar. Para medir
esta absorcin se usa una clula fotoelctrica. La luz blanca compuesta de
todas las longitudes de onda de luz visible pasa a travs de una cubeta y
choca contra una clula fotoelctrica. La corriente generada en la clula es
medida por un galvanmetro y se hace visible en la escala del mismo.
Para todo examen la transmisin debe ser 100% o sea que la intensidad de
la luz despus de atravesar el tuvo o cubeta sea la misma que antes de
chocar con el. La longitud de onda escogida por un anlisis en particular es
usualmente aquella en que el espcimen tiene el mximo de absorcin
cuando se compara con el reactivo de la colorimetra visual se lleva a cabo
una comparacin visual de la sustancia desconocida y los colores
estndar.
CUBETAS:
Las cubetas son los recipientes de vidrio para las soluciones que se van a
medir en el colormetro. Estn fabricadas de manera que todas las cubetas
del mismo tamao sean iguales opticamente; por tanto son dispositivos
pticos que deben de cuidarse tanto como otras partes del instrumento.
No debe usarse cubetas rayadas o estropeadas de ninguna manera.
No maltrate las cubetas exponindolas a temperaturas extremadas, brochas
de alambre o soluciones fuertes de limpieza antes de usar las cubetas debe
cerciorarse que estn limpias y secas de lo por fuera antes de introducirlas
al colormetro la cubeta debe limpiarse con gasa antes de colocarla.
No debe tener huellas digitales ni beta hmedas.
No debe de haber burbujas en la solucin si las hay se debe golpear
ligeramente la parte exterior de la cubeta para que ascienda. La cubeta se
coloca de modo que la marca de la fbrica que frente a la luz es decir
opuesta al operador.
CONCETRACIN DE LOS IONES DE HIDROGENO (P.H.):
En el agua pura se encuentra presente cierta cantidad de iones diminutos
libres y activos de hidrogeno y oxidrilo. Siempre que en una solucin los
iones de hidrogeno y oxidrilo sean equivalentes (como el agua pura).
215

Se dice que la solucin es neutral. Si hay presentes un exceso de hidrogeno

la solucin es cida y se predomina los oxidrilo la solucin alcalina.
La expresin P.H. se refiere a la concentracin de iones de hidrogeno
presentes en cualquier solucin al aumentar la concentracin de iones de
hidrogeno disminuye el valor del p.h. por lo tanto en las escalas del p.h. del
0 al 6 significa cido, 7 neutro, 8 al 14 alcalino.
El p.h. de las soluciones se determina de varias maneras, uno de los
mtodos ms sencillos utiliza tiras de papel impregnadas en distintos
indicadores cuando se sumerge en la solucin el papel toma determinado
color, que debe compararse con la escala del p.h.
INDICADORES:
Se llaman indicadores a ciertas substancias que aadidas a una solucin
toman un color definido a determinado p.h. con indicadores es til entre
indicadores de p.h. comprendido desde que empieza a cambiar, hasta que
el cambio del p.h. es completo por ejemplo. El rojo de fenol es amarillo en
soluciones con p.h. bajo (punto cido) a p.h. 6.8 es amarillo pero comienza
a virar a rosa plido a p.h. 7 el color se va obscureciendo hasta que p.h. 8.4
se hace rojo oscuro (punto alcalino). Despus no cambia el color auque se
aumente la alcalinidad.
AMORTIGUADORES O BUFFERS:
Si a una solucin se agrega un reactivo alcalino o cido el p.h de la solucin
tendera a cambiar de igual manera los p.h cidos o bsicos pueden cambiar
al contacto del aire o del vidrio (efectos de los silicatos disolventes).
A menudo es necesario mantener el p.h. de una solucin que las muchas
pruebas qumicas son de p.h. En este caso se usan las soluciones
amortiguadoras, que estn compuestas de un cido dbil y una sal de dicho
cido o una base dbil una sal de dicha base.
En resumen amortiguadores o buffers son sustancias que inhiben el cambio
del p.h. en una solucin cuando se agregan sustancias alcalinas o cidas.
La accin estabilizadora de los amortiguadores se usa en muchas pruebas,
tales como la turbidez del timol y todas las pruebas de enzimticas.

216

LIMITES DE P.H. DE LOS INDICADORES

INDICADOR
DE P.H.
Rojo de metilo
- 6.0
Prpura bromocresol
P.h. 5.2 - 6.8
Azul de bromotimol
- 7.6
Rojo de fenol
- 8.4
COLORACIN
LIMITES
Rojo amarillo
P.h.
4.4
Amarillo a azul
P.h.
6.0
Amarillo a rojo
P.h.
6.8
Amarillo a prpura
MTODOS PARA TRABAJAR.

MTODO SINETICO O ENZIMATICOS.
Siguen las cinticas de la reaccin por lo tanto son ms: rpidos para determinaciones
individuales, tiles en caso de emergencia tiene las desventajas que requieren instrumentos de
alta presin. Como espectrofotmetro de paso de banda ms pequea o aparatos de lectura
digital.
MTODO A PUNTO FINAL. 6 CALORIMTRICOS:

Esta es una prueba colorimtrica no toma en cuenta las fases finales.
PANALES PARA TRABAJE EN QUMICA PRUEBAS HEPTICAS.
(HGADO)
BILIRRUBINA TOTAL (BT)

BILIRRUBINA DIRECTA (BD)
FOSTATASA ALCALINA (F.ALC) (ALKL) (Estas son pruebas de exclesion
TRANSIMINASA OXALACETICA 1TGO) (ASAT)
TRANSIMINASA PIRUVICA (TGP) (ALAT) TIEMPO DE PROTOMBINA (TP)
PROTENAS TOTALES (PT) (Estas son pruebas de funcionamiento)
GAMA GLUTIMIL TRANSFERASA (GGT) (Prueba de dao epatico+)
PRUEBAS DE RENALES (RION)
CREATININA (CREAT)
NITRGENO DE UREA (N. DE. U) (BUN) Estas pruebas sirven para medir el
funcionamiento del rin y el encargado de filtrar la sangre.
PRUEBAS PANCRETICAS
(INSULINA)
GLUCOSA AYUNAS
217

GLUCOSA 2hnr POST prandial

AMILASA
LIPASA:
Procedimientos Generales para mtodo colorimetrito. Se utiliza muestras de sangre,
plasma, suero y otros lquidos biolgicos como: el lquido cfalo raqudeo, (LCR), orina, sudor,
lquido seminal, lquido actico, jugo gstrico, bilis etc.
1. En este mtodo se realizan reacciones qumicas en serie.
2. Todos llevan lectura fotomtrica o colorimtrica.
3. Leer longitud de onda segn instructivo, ejemplo: 530 nanmetros,
4. Blanco: Ajustar o enrazar el equipo.
5. Patrn: Se utiliza para saber la concentracin conocida, sirve para calcular el resultado
de la muestra Standard.
6. Muestra: Es la sustancia que se investiga.
7. Realizar clculos: utilizando la formula fundamental de la colorimetra para informar los
resultados en unidades de concentracin.
j). Escala del Equipo:
50, 60, 70, 80, 90 y 100% Transitancia
O, 03 0,04
O, 05
Absorbencia:
DENSIDAD PTICA:
Ejemplo:
CM= DOM* CP
DOP
CM = DOM=OO5*CP=12g% = 10g%
DOP=0, 04
Reaccin entre la carga de un cuerpo y su volumen, superficie, y su

longitud.

218

Rama de la fsica que estudia los fenmenos relativos a la visin y la

propagacin
de
la
luz
en
general,
los
origina
por
radiaciones
electromagnticas an no sean visibles

LEY DE LA COLOMETRIA
DENSIDAD PTICA:
EJEMPLO:
CM= DOM* CP
DOP
CM = DOM=OO5*CP=12g% = 10g%
DOP=0, 04
CARBOHIDRATOS:
Los carbohidratos consiguen proveer energa al cerebro y al sistema
nervioso el organismos transforma los almidones y azucares en glucosa la
familia de los carbohidratos incluye: azucares y almidones.
Que ambos son transformados en glucosa alimentos ricos en almidones,
granos y vegetales suplentes de vitaminas, minerales, y fibras. El azucar
que contienen los pasteles, pudines y cereales, que proveen calorias que
proporcionan energia pero no nutrientes. La necesidad del organismo son
cubiertas por la alimentacin.
Los carbohidratos pueden ser absorbidos directamente en el intestino, sin
necesidad de ser degradados. Una vez absorbidos pasan al higado que es
capaz de almacenarlos en forma de glucogeno es transformado
continuamente en glucosa que pasa a la sangre y es consumido por las
celulas del organismo.
El exceso de los carbohidratos provoca obesidad y la falta provocada por la
mal nutricion.
CLASIFICACION:
Monosacaridos: que estan compuestos por un solo azucar llamados
azucares simples o sencillos como por ejemplo la glucosa que son jugos de
frutas el azucar de caa la maltosa y la lactosa.
Disacaridos: Compuesto por dos moleculas como por ejemplo fructosa:
que son los jugos de frutas, miel, hidrlisis de azucar de caa.
219

Polisacaridos: B Compuestos que tienen cinco o mas moleculas entre

ellas el almidon: cereales que produce la glucosa, cereales, planta,
legumbres y vegetales.
GLUCOGENO:
Compuesto mas importante para el almacenamiento de los carbohidratos
en la celula animal. Se forma a partir de la glucosa y se almacena
fundamentalmente en el higado y en menor grado en las celulas
musculares.
Las celulas del cuerpo descomponen la glucosa en dioxido de carbono y
agua liberando energia
La glicemia es el principal componente en el manejo y administracin de la
diabetes. Un metabolismo anormal de la glucosa puede causar inhabilidad
al pncreas en las clulas betas al producir insulina, reduccin en el nmero
de receptores de insulina mala absorcin intestinal, inhabilitada del hgado
al metabolismo del glicgeno o alteracin de las hormonas que juegan papel
en el metabolismo de la glucosa.
En el laboratorio la glucosa debe investigarse con tcnicos que dosifiquen
nicamente la glucosa verdadera y evitar los sistemas que dosifiquen
tambin otros sacaroideos. Hoy en da los mejores procedimientos son los
enzimticos.
GLUCOSA POST PRANDIAL (2 horas)
Se denomina aquella glicemia que se obtiene dos horas despus de la
ingesta de alimentos est raramente elevada a las dos horas en personas
no diabticas pero si significativamente en pacientes diabticos.
VALORES:
140 200 mg/dl. Indica intolerancia a la glucosa y esta indicada la curva de
tolerancia a la glucosa 200mg/dl. mayor que indica el diagnostico de
diabtico, arriba de 250 mg/dl. en una mujer embarazada indica diabetes
gestacional y debe confirmarse con una curva de glicemia a 3 horas.
En personas normales la glicemia vuelve a sus niveles normales 2 -3
horas despus de comer aquellos que toman insulina tienen valores
menores.

220

TCNICA DE LA GLUCOSA:
Reactivo
BR
St
2 ml.
2 ml.
2 ml.
Standard
20 ul
Muestra
Valores de Referencia:
20 ul
Pre: 75-110 mg/dl
Post: 110-150 mg/dl}

CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA:
TOLERANCIAS A LA GLUCOSA
Se utiliza una glucosa la ms conocida es la Dexpac.
El paciente de de estar en ayunas, se toma una muestra de sangre.
Se le da ala glucosa 1/2hr. para despus tomar otra muestra, a otra muestra se toma 2
hrs. despus y la ultima muestra se toma 3 hrs. despus y se controla con las muestras
que no haya aumentad mucho su glucosa.
A partir de la ingestin de carbohidratos convertida a glucgeno y glucosa

por el hgado. Dos hormonas regulan sus niveles sanguneos de glucagn
este acelera la glucognesis elevando los niveles sanguneos de glucosa.
La insulina aumenta la permeabilidad celular a la glucosa transportndola
hacia el interior de las clulas para ser convertida en energa estimulada la
formacin de glucgeno y disminuye los niveles sanguneos de glucosa.
Para que la insulina pueda actuar se requiere los receptores de insulina en
las clulas.
La
hormona
adernocorticotropica
(AC.TH.)
adrenocorticosteroide,
epinefrina, y la piroxina tambin juegan un papel importante en el
metabolismo de la glucosa.
La prueba de tolerancia a la glucosa constituye un valioso auxiliar
diagnstico la tolerancia a la glucosa o capacidad de usar los carbohidratos
se encuentra aumentada en la diabetes y disminuida en el hiperinsulinismo
y en enfermedad de Addison, antes de administrar el azcar se toman
muestra de sangre y de orina despus de la administracin se toman
nuevas muestras a intervalos de media hora durante tres o cuatro horas.

221

Se determina que nicamente qumicamente la concentracin de azcar en

la sangre y se hace unagrfica relacionando estos valores con el tiempo en
que fueron tomados. Con la orina se hacen pruebas cualitativa, para el
azcar para descartar una glucosuria renal.
La administracin de glucosa hace que el azcar en los individuos normales
se eleve en el plazo de una hora desde 100 a 150 ml. aproximadamente
despus de dos o dos hora y media ocurre el retorno al nivel normal. En el
diabtico el aumento de el azcar es mucho ms de lo normal y el retorno al
nivel de la muestra en ayunas es mucho ms lento. En otras palabras la
C.T.G. es ms elevada y prolongada que lo normal en diabticos.
VALORES DE REFERENCIA:
ADULTOS:
NIOS
JVENES
NEONATOS
65-10 mg/dl
70-106mg/dl
74-127ing/dl
30-100 mg/dl
NOTA:
Valores por debajo de 40 mg/dl Puede causar dao cerebral Valores por arriba de 470 mg/dl
Puede causar estado de coma Valores por arriba de 300 mg/dl Puede causar deshidratacin.
Glucosa-oxidasa-peroxidasa:
REGULACION DE LA GLUCOSA
Insulina: hormona secretada por las celulas betas de los hislotes de
Langermans del pncreas como respuesta al aumento del nivel de la
glucosa en la sangre se encarga de la regulacin del metabolismo
intermediario de las grasas, disminuye el nivel sanguineo de la glucosa y
favorece la intrada de la glucosa en los musculos y en los otros tegidos.
PRUEBAS QUE SE REALIZAN:
Glucosa Pre
Glucosa Post
Curva de Tolerancia a la glucosa
Hemoglobina glicocilada.
ELECTROLITOS:
Estn representados por los cationes Na, K, Ca y Mg (Magnesio9 que
suman en su totalidad los mismos equivalentes que los aniones que son Cl.
bicarbonatos, sulfatos cidos orgnicos.
En la prctica los que arrojan mayor utilidad clnica en el sodio Na.
que se considera como el acuatocrito (mide todo el cloruro del organismo)
222

pues su concentracin indica el grado de hidratacin del organismo en la

misma forma que el hematocrito indica el estado anmico o normal del
individuo.
El potasio (k) que sufre notables cambios en todo proceso que lo
obligue a abandonar su lecho celular no presenta siempre el nivel
sanguneo de potasio la cantidad til del organismo y accesoramiento del
cloruro. Los tres inciden en el cloruro notablemente sobre los tipos de
acidosis y alcalosis y aunque por s mismo no son capaces de producir
ninguno de estos cambios si tienen alteracin en su composicin en el
desequilibrio cido base, valor clnico: su dosificacin en indispensable en
pacientes hospitalizados.
CA CALCIO:
Elemento qumico de smbolo Ca, es un metal alcalinoterreo, blanco, muy
blanco, su sulfato presenta las formas de yeso alabrasto (cuanti), cilndrica y
su carbonato las dimorfos de piedra caliza coral.
P- FOSFATO:
Elemento qumica de smbolo P, es un metal de la familia del nitrgeno que
se encuentra en abundancia.
Na- SODIO:
Es un metal alcalino muy difundido en la naturaleza especialmente en forma
de cloruro de sodio o sal comn, desempea un papel de gran importancia
en el mantenimiento del equilibrio cido-base de los qumicos orgnicos.
K- POTASIO:
Metal alcalino de gran poder de reaccin muy ligere y de brillo comparable
al de la plata aunque en el aire se oxida rpidamente.
CI- Cloro:
Pertenece al grupo de los hidrgenos, es un gas amarillo verdoso irritable y
mas pesado que el aire, se utiliza en grandes cantidades como agente de
blancos.

223

COLESTEROL:
Es un elemento indispensable en la produccin de esteroides,
sntesis de hormonas femeninas (estrgenos), principal componente de la
bilis catalizador activo de intercambios celulares interviene activamente en
la sntesis de los andrgenos e indispensables en la formacin de
membranas celulares, esta integrado por 3 lipoprotenas denominadas
segn la densidad V.L.D.L. (13%) constituidas en un 52% por triglicridos.
Son materia prima para fabricar la fisiolgica L.D.L. (70%), por su baja
densidad se deposita muy fcilmente en las capas intimas arteriales y son
las que forman la arteriosclerosis (se tapan las arterias).
La H.D.L. (17%) es nuestra aliada, conviene tenerla lo ms elevada
posible porque es la que interviene para remover la L.D.L. de las arterias.
Se estimula su formacin con el ejercicio, uso de cigarrillo, alcohol
nicamente social y poco o nada de grasas animales. La V.L.D.L.
constituyen una gran parte de los que conocemos como triglicridos, grasa
que modela el organismo y es reserva orgnica. La L.D.L. se forma en
hgado y la podemos aumentar ingiriendo grasas animales en abundancia.
Reactivo
Standard
Muestra
BR
ST
2ml.
2ml
20ul
2ml.
20ul
Formula: Abs M / Abs st * [200]

Valores de Referencia 150-200 mgldl.
USOS:
La dosificacin
del colesterol debe hacerse frecuentemente
completando con el perfil lipdico. Se reconoce cono el primer factor
desencadenante del infarto cardiaco.

224

Triglicridos:
Son lpidos absorbidos en la dieta y tambin producidos en forma endgena a
partir de los carbohidratos. Su medicin es importante en el diagnostico y manejo
de las hiperlipidemias.
PROTENAS TOTALES Y RELACION A/G.
Las protenas se encuentran involucradas en casi todos los procesos
vitales:
ALBUMINA:
Mantiene el equilibrio del suero: Sirviendo como medio de transporte
para muchas substancias a las cuales se rena.
GLUBULINA:
La mayora son anticuerpos que mantienen el equilibrio del cuerpo.
Mtodos para determinar: Kjendal
Reaccin de Biuret
TCNICA DE PROTENAS TOTALES:
Reactivo
Suero
Standard
BR
2 ml.
M
2 ml.
20 ul
St
2 ml.
20 ul
Frmula Abs M / Abs St. * [10]

Valores de referencia 6-3 -8 3 mgl.
Mtodo de fenol
Los resultados deben estar entre valores de:
Protenas totales 6.7 8.7 g/dl
Albmina/globulina relacin 2/1
NITREGONO DE UREA:
Constituye 45% del nitrgeno no proteico en suero o plasma.
225

Principal producto de excrecin del metabolismo de las protenas en

orina es alrededor de 50 veces ms concentrado que en suero por lo que
se debe dividir 1.2.50. en la orina.
TCNICA DE NITRGENO DE UREA:
Reactivo
BR
St
2 ml.
2 ml.
2 ml.
Suero
20 ul
Standard
20 ul
reactivos nuevos.
CIDO URICO:
Aumenta en gota la excrecin urinaria esta se debe a la precipitacin
de cristales de urato monosdico en tejidos vasculares.
Puede formar clculos.
Hiper-uricemico: puede ser hereditario.
TRIGLICERIDOS:
Forma en que se almacenan los lpidos. Sus niveles son altos
despus de las comidas.
Los valores normales despus de un ayuno de 12 horas son: De 25
150 ml/dl.
COLESTEROL:
Tiene varias funciones: elemento esencial en las membranas
celulares. Precursor de las sales biliares:
BILIRRUBINA:
El 80% que se excreta proviene de la hemoglobina de los glbulos
rojos que han llegado al final de su ciclo.
226

El catabolismo tiene lugar en el hgado y en el bazo (catabolismo en

destruccin) 1916: Vandenbergh distingui dos clases:
TCNICA DE BILIRRUBINA TOTAL:
BR
Rtotal
3 ml.
3 ml.
3 ml.
Oxidante
1 gota
1 gota
1 gota
Agua destilada
20 ul
Calibrador
20 ul
Muestra
20 ul
a)
Directa:
No est unida a las protenas, reacciona rpidamente con
diazo reactivo.
TCNICA DE BILIRRUBINA DIRECTA:
BR
Rtotal
3 ml.
Oxidante
1 gota
Agua destilada
Calibrador
Muestra
20 ul
K
3 ml.
1 gota
20 ul
U
3 ml.
20 ul
reactivos nuevos.
b)
Indirecta:
Est unida a las protenas en insoluble en agua exige el
tratamiento con alcohol para que el filtrado pueda reaccionar con el diazo
reactivo.
Tcnica de bilirrubina indirecta
Bilirrubina total - Bilirrubina directa = Indirecta
Formula:
Abs U / Abs K *[10],

227

Valores de referencia:
Adulto 1.2
RN 12.
HEPATITIS:
b) Total: Normal o ligeramente alta.
c) Total o normal
Esta tambin alta en obstruccin de vas biliares.
Cncer heptico.
ENZIMAS:
T.G.O. azat Aminotransferasa aspartato.
Se encuentra en msculo cardiaco y estriado
Aumenta en infarto agudo.
La hemlisis interfiere
T.G.P. Alat (Aminotransferasa de alanina)
La encontramos en hgado msculo estriado y pncreas.
FOSFATASA ALCALINA:
Proviene de hgado, rin, y huesos P-Nitro Sustrato-P-Nitrofenilo.
Evala: Funcin del hgado y succin de vas biliares.
C.K. Total Creatin Cinasa vida media 15.5 horas.
C.K. M.b.: Se haya principalmente en msculo cardiaco, vida media12.5 horas se evala en infarto agudo.
C.k.. compuesto de dos sub-unidades: M (msculo) b (cerebro)
Se presenta como MM,BB. y Mb.
D.H.L. Dehidrogenasa lctica.
CREATININA COMPUESTA:
Nitrogenado de gran importancia producido en el metabolismo del
organismo, se combina con fsforo para formar fosfato de gran energa.
228

CREATININA KINAZA CKNAC:

Es una enzima intravascular localizada en mayor proporcin en el msculo
cardiaco, esqueltico y tambin en el cerebro.
CK-MB:
La creatina kinaza CK es una enzima intravascular y otra constituida por
una M (muscular) y otra subunidad B (brain)= Orebro que se envan dando
lugar a las isoencimas.
CK-mm= Muscular
CK-BB= Cerebro
CK-MB= Miocardio
AMILASA:
Evala funcin pancretica.
LIPASA:
Para evaluar pncreas.
SOLUCIONES
a)
POR CIENTO PESO EN VOLUMEN (% p/v)

Que se emplea cuando se disuelve determinadas sal en un lquido.
Ejemplo: 1 solucin de NACL al 10% por volumen significa que se
disuelven 10 Gramos de la sal en agua destilada y se lleva a volumen
de 100 ml.
b)
POR CIENTO VOLUMEN EN VOLUMEN (v/v)

Que se usa cuando se mezcla los lquidos ejemplo: una solucin al
10% volumen por volumen de alcohol etlico en agua significa que 10
ml. de alcohol etlico se diluyen como agua hasta un volumen final de
100 ml.
PORCIENTO PESO EN PESO (% p/p)
c)
Que puede usarse para cualquiera de los casos anteriores ejemplo:

229

1- Dos lquidos: una solucin al 20% p/p de glicerina en agua

significa 20 Gramos de glicerina se diluyan con agua hasta un
peso final de 100 grms.
2- Un slido es un lquido: Una solucin al 10% peso en peso de
glucosa en agua significa que se pesan 10 Gramos de glucosa
se disuelven en agua y esta solucin se diluye hasta un peso
final de 100 Gramos.
SOLUCIONES MOLARES:
Se llama solucin molar a las que contienen una molcula Gramo de
sustancia por litro de solucin.
SOLUCIONES NORMALES:
Son las que contienen el peso equivalente de una sustancia en
Gramos por litro de solucin.
PESO EQUIVALENTE:
Se define como una sustancia el nmero de unidades de esta
sustancia que pueden combinarse con una unidad de hidrogeno y ocho
unidades de oxigeno.
EQUIVALENTE GRAMO:
El equivalente Gramo de una sustancia es su peso equivalente
expresado en Gramos.
PREPARACION DE DILUCIONES:
Algunas veces es necesario preparar diluciones de un suero o de una
solucin concentrada.
El procedimiento que se emplea es el siguiente:
DILUCION
SOLUCION CONCENTRADA
SOLVENTE
1:2 1 . 1
1:4 1 . 3
1:5 ... 1 . 4
230

1:10 . 1 . 9
1:25 . 1 . 24
1:100 ... 1 . 99
FACTOR DE DILUCION (F.D).
F.D.= Soluto + solvente
Soluto
F.D. = Muestra + diluyente
Muestra
NOMBRE DE LA MAGNITUD
SIMBOLO
NOMBRE DE LA UNIDAD S.I. DE BASE
1) Longitud ------------------------------------------- Metro ---------------------------------- M.

2) Masa ----------------------------------------------- KiloGramo ----------------------------- K.g.
3) Tiempo -------------------------------------------- Segundo ------------------------------- S.
4) Cantidad de sustancia---------------------------- Mol ------------------------------------ Mol.
NOMBRE DEL PREFIJO SIMBOLO
MULTIPLICACION/DIVISION
FACTOR DE
Mega
Multiplicacin X 1 milln (X106)
Kilo
Centi
K
C
Multiplicacin X 1 millar (X103)

Divisin entre 1 ciento (X10.01 o
Divisin entre 1 millar (X0.001 o X
Micro
Dividido entre 1 milln (X10 )
Nano
Dividido entre mil millones (X10-
10-2)
Mili
-3
10 )
-6
90473
ESPECTROFOTOMETRIA
Es la medida de la absorcin o emisin de energa radiante.
La medida de la energa se realiza por aparatos como:
1) Fotocolormetro: Klett summerson (trabaja en base a filtros)
231

FILTRO
LONGITUD DE ONDA
Amarillo
500-700 nm.
Azul
350-500 nm.
Verde
380-700 nm.
LEY DE BEER:
A mayor concentracin mayor color de sustancias a determinar.
GLICERIL FOSFORIL COLINA:
Es producida en el epitelio epididimario, lugar donde se verifican la
espermognesis y la maduracin espermtica. Su dosificacin es de gran
valor diagnstico en los espermioGramas que muestran alteraciones en su
maduracin, al informar sobre la alteracin y grado de funcin fisiolgica
epididimaria.
La cifra normal fluctan entre 15 y 45 dL, y valores bajos se
encuentran en epididimitis, hipoandrogenismo y en todas alteraciones
infecciosa o traumtica que intervenga en la maduracin espermtica.
Valores de referencias: mg/dL
Normal: 15-45 mg/dL
QUIMICA CLINICA
TIPO DE DETERMINACIONES FOTOMETRICAS
La qumica clnica es la forma en que se determinan los metabolitos
para investigar alguna enfermedad en el paciente debido a mal metabolismo
de los mismos, como por ejemplo: glucosa, cido rico, colesterol, etc.
Dentro de las determinaciones fotomtricas existen varios tipos de anlisis a
realizar de acuerdo a la naturaleza de la reaccin y de los componentes que
participan en ella. Estos son: de punto final, de dos puntos y cinticos.
Antes de entrar en el tema debemos de saber que no es necesario hacer
correcciones a las determinaciones realizadas y esto se hace en base a
blancos ya sea de reactivo o de muestra.
Un blanco de muestra sirve para minimizar las interferencias en color de la
muestra que influyen en el color final de la reaccin.
Y un blanco reactivo sirve para corregir las absorbancias altas dadas por el
reactivo.

232

Ambos se utilizan de acuerdo al reactivo para prueba que se este

analizando. Tambin se restan cada uno de ellos del valor final obtenido con
el tubo de muestra para hacer las correcciones pertinentes.
Al hacer las determinaciones debemos de tomar en cuenta lo siguiente
longitud de onda a trabajar, tipo de lmpara del equipo (algeno o
tungsteno), estabilidad y preparacin de reactivos tiempo de incubacin y
temperatura de trabajo (25, 30, 37C).
Hablando del tipo de determinaciones empecemos por la de Punto final. En
esta se mide la absorbancia de la reaccin luego de que esta ha sido
esencialmente completada. Generalmente en lineal ascendente y se
requiere la medicin de un blanco de reactivo. En este tipo de
determinaciones se realiza la: glucosa, colesterol, cido rico, triglicridos,
calcio, magnesio, sodio, potasio albmina, protenas totales, hemoglobinas.

233

Una grfica tpica es como la siguiente:
Densidad
ptica
0.30
0.15
0
2.0
4.0
Concentracin
CREATINA:
En la determinacin de dos puntos, se miden las absorbancias a dos
diferentes tiempos, debido a 75que el color final que desarrolla la reaccin
no se da en poco tiempo, por ello la primera lectura se de cuanto antes que
empiece a desarrollarse el color final de la reaccin.
La absorbancia va creciendo con el tiempo y se utiliza un blanco de muestra
generalmente. Este tipo de determinacin esta la creatinina.
Una grfica de este tipo de a reaccin sera como la siguiente.

234

ABS
Abs2+Abs1=AbsM
Rg+2
Abs2
A ABS2 K ABS
ABS
Tiempo
Y en la determinacin cintica se miden los cambios de absorbancia

en un tiempo durante el perodo de reaccin. En esta se calculan las
diferencias de las lecturas y se sacan un promedio el cual es multiplicado
por un factor ya definido en la metdica. En este tipo de determinacin
tenemos a (fosfatasa alcalina, amilasa, creatin Kinasa Ck, creatin Kinasa
Isoenzima MB (CK MB), transaminasa oxalactica (TGO), transaminasa
Pirvica (TGP), lactato deshidrogenasa (IDH)
ABS
Rg+2
delta ABS/MIN
Tiempo
Toda esta amplia gama de reactivos las tiene HUMAN GmbH, con varias
presentaciones de reactivo y as tambin en modo Mono Test y en lquido lo
que son enzimas, y todos los substratos en Lquido. Adems los mismos
cuentan con un aval a nivel internacional de las normas ISO 9001, lo cual

235

garantiza la calidad de los mismo, as como su estabilidad. De necesitar

alguno de los mismos no dude en contratarnos.
INTRUCCIONES PARA EL MANEJO DE EQUIPO DE LABORATORIO
Material de vidrio para medir volmenes.
En las diversas especialidades de la qumica, incluyen la bioqumica, se
emplea material y equipo de laboratorio con diversos fines. En esta parte se
har hincapi nicamente en los diversos tipos de material de que se
emplean para medir.
Este puede estar calibrado para contener (TC del ingls To contain) o vaciar
(TD del ingls Todeliver) determinados volmenes. La calibracin hecha por
el fabricante del equipo volumtrico que se usarn en este curso est dentro
del error aceptable para nuestros fines. Por lo tanto no es necesario que el
estudiante haga ninguna calibracin especial. Simplemente conviene llamar
la atencin al hecho de que los aparatos y las soluciones usadas en
Volumetra deben emplearse a la temperatura ambiente cuando se haga la
medida, puesto que la mayor parte de las soluciones acuosas aumentan
0.02% en volumen por cada grado C de elevacin de temperatura por
encima de la ambiental (20C).
1.-
Probetas:
Las probetas estn calibrada para contener (TC) volmenes variables

indicados en su graduacin y son menos precisas que los matraces
volumtrico o aforados, los cuales estn calibrados para contener un
volumen determinado. En ambos casos, al emplearlos, el menisco del
lquido con que llenen debe quedar tangente a la graduacin de la probeta o
al aforo grabado en el cuelo del matraz volumtrico.
2.-
Balones aforados:
Estos balones estn calibrados para contener un volumen dado a la

temperatura impresa en las paredes, cuando el borde inferior del menisco
formado por el lquido coincide con el anillo del baln.
Este tipo de baln NO PUEDE CALENTARSE porque se rompe. Si se
desea aforar una solucin que est por arriba de la temperatura de
calibrado del baln, deber esperarse a que se enfre y en seguida aforar.

236

3.-
Buretas:
Las busetas se emplean para medir volmenes variables. En las que tengan
llaves esmeriladas stas deben estar ligeramente engrasadas. Una bureta
de 50 ml. no debe vaciarse ms aprisa de 0.7 ml. por segundo, pues de otra
manera se adhiere mucho lquido a las pareces y el volumen del lquido que
baja crnica antes de ser usadas. La llave debe engrasarse
cuidadosamente y las lecturas deben hacerse evitando errores de paralaje.
El engrase debe hacerse de tal manera que su manejo sea fcil y suave, sin
permitir ningn escape de lquido. Debe tambin evitarse que el lubricante
contamine la parte graduada de la bureta.
El lquido sin usar no debe descartarse invirtiendo la bureta, sino a travs de
la punta. Para facilitar la lectura de la bureta pntese con lpiz un rea negra
en un trozo de papel y trcese la lectura manteniendo el borde del rea a
nivel del menisco.
4.-
Pipetas calibradas al contenido (marcadas T.C. To contain).
En la calibracin de estas pipetas el fabricante toma en cuenta el

volumen de lquido que se queda en el interior de la pipeta al drenarla y,
por lo tanto es necesario soplarlas al final.
5.-
Pipetas calibradas al vaciado (marcadas T.D. To deliver)
Al calibrar estas pipetas nicamente se toma en cuenta el volumen

de lquido que se obtiene al drenarlas y por consiguiente no se deben
soplar. Cuando stas pipetas tiene uno a dos aillos esmerilados, en el
extremo superior, si se deben soplar.
6.-
Pipetas graduadas y pipetas volumtricas:
Existen dos tipos generales de pipetas, las pipetas graduadas y las

pipetas volumtricas. Las primeras estn calibradas para descargar un
volumen determinado y por siguiente con ellas no se puede medir
volmenes intermedios. Por ejemplo, con una pipeta volumtrica de 5 ml.
solo se puede medir este volumen o un mltiple de l.
Las pipetas graduadas, como su nombre lo indica, poseen una escala que
permite descargar, adems del volumen total, diferentes volmenes
intermedios.

237

7.-
Pipetas serolgicas y pipetas de Mohr:
La pipetas graduadas pueden ser terminales (pipetas serolgicas) o no

terminales (pipetas de Mohr). Es importante fijarse bien en el tipo de pipeta
graduada que se est empleando, pues la confusin de una pipeta terminal
con una no terminal introduce errores serios en el volumen de lquido
servido por la pipeta.
8.-
Manera de usar la pipeta:
Tomase la pipeta por el tercio superior entre los dedos pulgar, medio y
anular introdzcase la punta en el lquido. Succinese por el extremo libre y
viglese constantemente el menisco que asciende por el tallo para evitar
que el lquido puede pasarse. Cudese de mantener completamente
sumergida la punta de la pipeta durante todo el periodo de succin; cuando
el menisco haya subido una pulgada arriba de la marca superior
rpidamente saque la pipeta y ocluya el orificio superior con la yema del
dedo ndice, sosteniendo la pipeta entre el pulgar, el medio y el anular.
Controlando la presin del ndice sobre el orificio, se puede permitir al
lquido contenido en la pipeta, drenar hasta que la parte inferior del menisco
coincida con la marca superior de la pipeta. Para descargar la solucin en
el recipiente deseado, apoye la punta de la pipetas contra la pared y quite
el ndice del orificio, permitiendo as el drenaje del lquido hasta que
alcance la marca deseada a la punta de la pipeta.
Recuerdese que las pipetas con una o dos bandas en la parte superior
deben soplarse despus que el menisco alcanza la punta.
Las pipetas graduadas terminales se usan de una manera similar a las
volumtricas, solamente que el lquido puede hacerse ascender por succin
hasta la graduacin final (cero) o hasta alguna de las graduaciones
intermedias; y tambin al vaciarlas pueden hacerse hasta el final o hasta
alguna de las graduaciones intermedias.
Las pipetas no terminales se usan de manera anloga, pero no deben
vaciarse ms all de la graduacin terminal. En general tienen una presin
intermedia entre las pipetas volumtricas y las graduadas terminales.

238

FOTOCOLORIMETRO KLETT-SUMMERSON
I
A.
Botn del dial.
B.
Dial
C.
Aguja del galvanmetro
D.
Botn del ajuste elctrico
E.
Tubo del colormetro y compartimiento de la muestra.
F.
Interruptor de corriente
G.
Botn para el ajuste del cero
H.
Interruptor de lectura
I.
Soporte para el filtro
COLORIMETRO/ESPECTROFOTOMETRO BAUSCH & LOMB, MODELO

SPECTRONIC 20
1.-
Escala lectura
2.-
Luz piloto
239

3.-
Escala de longitud de onda
4.-
Control para seleccionar la longitud de onda.
5.-
Control de intensidad de la luz
6.-
Interruptor de corriente y control del cero
7.-
Compartimiento de la mu
QUMICA SANGUINEA
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0
Globulinas
gr.
- 4
Nitrgeno no proteico
mg.
15
- 35
Nitrgeno de urea
mg.
- 22
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0
Globulinas
gr.
- 4
mg.
15
- 35

240

Nitrgeno de urea
mg.
- 22
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0
Globulinas
gr.
- 4
mg.
15
- 35
Nitrgeno de urea
mg.
- 22
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0
Globulinas
gr.
- 4
mg.
15
- 35
Nitrgeno de urea
mg.
- 22
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0
Globulinas
gr.
- 4
mg.
15
- 35
Nitrgeno de urea
mg.
- 22
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0
Globulinas
gr.
- 4
mg.
15
- 35
Nitrgeno de urea
mg.
- 22
Protenas totales
gr.
5.5. - 8
Albminas
gr.
3.5
- 4.0

241

Globulinas
gr.
- 4
mg.
15
- 35
Nitrgeno de urea
mg.
- 22
cido rico
mg.
- 8
Creatinina
mg.
0.9
- 1.7
Glucosa (ayunas)
mg.
70
- 115
Calcio
mg.
8.7
- 10.7
Fsforo
mg.
2.5
- 5.1
Sodio
mEq/L
Glucosa (2hr.p.p.)
Potasio
137 - 145
mEq/L
3.8
Cloruros
mEq/L
100 - 106
Magnesio
mEq/L
1.5
- 2.5
Hierro srico
mg.
57
- 194
mg.
Capacidad de hierro
228 - 418
Contenido de CO2
mM/L
26
- 28
ndice Ictrico
UI
-6
Bilirrubina Directa
Negativa
Bilirrubina Total
mg.
Cefalina Colesterol
0.2 - 1.0
Negativa
Turbidez de Timol
UI
- 6
Retencin de Bromosulfalena
-5

242
- 5.1

Amilasa
UI
15
Lipasa
UI
0.2 - 1.5
Fosfatasa Alcalina
UI
- 35
Fosfatasa cida
UI
- 4
Transaminasa Oxalactica
UI
10
- 40
Transaminasa Pirvica
UI
- 35
Deshidrogenasa Lctica
UI
120 - 240
Gama Glutamil Transferasa
UI
- 28
Creatina fosfoquinasa
UI
10
- 80
CPK - MB
UI
10
- 80
Catecolaminas
mcg 24h.
32
- 103
17-Quetosteroides
mg
24h.
17-Esteroides Quetognicos
mg
24h
- 12
Coproporfirinas
mcg 24h
Uroporfirinas
mcg 24h
T-3 (Captacin)
25
T-4 (Tiroxina)
mcg%
4.5. -
12
1.1. -
4.2
ndice de Tiroxina Libre
- 45
20
100 - 300
28
- 63
- 35
GASES ARTERIALES
PH
7.35 7.45
PCO.
35
- 45 mm Hg
PO.
75
- 100 mm Hg
BUFFER
12 +
45 mm Hg

243

HCO.
21 -
28 meg
Saturacin
96 100%
LIPIDOS SANGUINEOS:
Valores Normales
Lpidos
mg.
400 - 1000
Colesterol
mg.
129 - 295
Quilomicrones
mg.
Triglicridos
mg.
10
Fosfoldos
mg.
150 - 380
- 150
ORINA:
Ph
Nitrgeno Amoniacal:
6.3
0.14 147 g/24 hrs.
Densidad:
Nitrgeno Ureico
1.010 1.030
6 -17 g/24 hrs.
cido rico
Creatinina; muestra 24 hrs.
250 750 mg/24 hrs.
Hombres: 1000 - 1900 mg/24
hrs
Bilirrubina: Negativo.
Cuerpos Cetnicos: Negativo.
Urobilingeno
Amilasa:
0.05 2.5 mg/24 hrs.
35-260 unidades omogyi/h

1-17 u/h.

244

MANUAL DE
LABORATORIO CLNICO
UNIDAD SEROINMUNOLOGIA

245

SEROINMUNOLOGIA:
SEROLOGIA:
Rama de la biologa que trata de los antgenos los anticuerpos y sus
relaciones.
INMUNOLOGIA:
Es el estado de resistencia o falta de susceptibilidad a molculas
toxicas, microorganismos y clulas extraas.
ANTIGENO:
Sustancia que cuando se introduce al organismo estimula la
produccin de anticuerpos.
ANTICUERPO:
Son sustancias que produce el cuerpo en respuesta a la presencia de
antgenos.
RESISTENCIA (INMUNIDAD NATURAL):
La resistencia natural a las enfermedades comprende factores que
son pasivos y agresivos.
Son defensas pasivas entre otras: El sexo, la edad, la piel y la
temperatura, corprea del hombre.
Se encuentra entre agresivas, los famositos que se encargan de
englobar organismos patgenos. La fiebre es una defensa agresiva ya que
algunos microorganismos les es difcil sobre vivir si la temperatura del
cuerpo se aumenta en unos pocos grados.
RESISTENCIA ADQUIRIDA:
Cuando un agente patgeno entra en el organismo ciertos tejidos
reaccionan en forma especial, produciendo sustancias proteicas;
especficas llamadas anticuerpo. Representan una defensa adquirida
contra las enfermedades ya que aparecen nicamente despus de que se
ha introducido un antgeno.

246

INMUNIDAD ACTIVA:
Es natural:
La que desarrolla el cuerpo al producir los anticuerpos.
Es artificial:
Cuando se induce al cuerpo a producir anticuerpos, mediante la
administracin del agente infectante, en forma inactiva, (vacuna).
INMUNIDAD PASIVA:
La recibe la persona por medio de un tercero.
INMUNIDAD PASIVA NATURAL:
Es la absorcin de anticuerpos maternos por el feto y la recepcin de estos
anticuerpos por el recin nacido.
ADQUISICIN ARTIFICIAL:
Ocurre cuando se inyecta en un individuo suero inmune, producido en otros
animales para proveer anticuerpos especficos preformados.
Un anticuerpo se encuentra en el suero o plasma de la sangre.
antgeno en las clulas sanguneas o eritrocitos.
Y un
REACCIONES DE ANTIGENOS Y ANTICUERPOS:

La identificacin de un anticuerpo nicamente se puede efectuar
mediante la reaccin con su antgeno especfico.
Las reacciones tpicas empleadas en serologa son:
LA PRECIPITACIN:
Es un tipo de reaccin que ocurre cuando un antgeno soluble reacciona,
con su anticuerpo y se asienta o precipita.
247

LA AGLUTINACIN:
Ocurre cuando un antgeno celular o de partcula se aglutina despus de
reaccionar con su anticuerpo especifico.
LA LISIS (HERMOLISIS)
Se observa cuando los glbulos sanguneos o clulas bacteriales se
disuelven o desintegran despus de reaccionar con sus anticuerpos
especficos.
ANTICUERPOS HETEROFILOS:
La palabra heterofilos se refiere a anticuerpos que reaccionan con
antgenos encontrados en diversas substancias no afines. (Entre ellos
glbulos de oveja de conejillo de indias, etc.).
Estos anticuerpos se encuentran
mononucleosis infecciosa.
en
el
90%
de
pacientes
con
DILUCIONES Y SUSPENSIONES:
Las diluciones en serie se utilizan para dosificar anticuerpos en el suero.
Generalmente se utiliza solucin salina normal (solucin salina 0.85%) para
diluir el suero del paciente.
PRUEBAS DE AGLUTINACIN PARA ENFERMEDAS FEBRILES:
Las pruebas de aglutinacin febril se emplean en enfermedades tales
como: Fiebre Tifoidea y Paratifoidea, Brucelosis, Tularemia, Tifus y otras.
Las pruebas se basan en el hecho de que los pacientes infectados
por agentes patgenos, desarrollan anticuerpos especficos contra esos
agentes. Por tanto el exponer el suero del paciente a un antgeno conocido,
se puede identificar el anticuerpo.
En las infecciones por salmonella debe tomarse en cuenta que una
reaccin negativa no excluye el diagnostico. Aproximadamente el 50% de
las personas con fiebre tifoidea tienen una reaccin positiva despus de una
semana, un 80% en la segunda semana y se nota en aumento gradual de
248

90% a 95% en la cuarta semana. Por lo general la prueba se torna negativa

varios meses despus del recobro.
La salmonella typhosa y algunos organismos afines poseen los
antgenos separados llamados O y H. El antgeno H se encuentra en los
flagelos de las formas mviles y el antgeno O en la porcin somtica
(cuerpo).
La aglutinacin del antgeno O tiene mas importancia que la del H ya
que indica que hay fiebre tifoidea en tanto que el H puede indicar:
a) El paciente tiene tifoidea
b) Que el paciente a tenido fiebre tifoidea
c) Que el paciente a sido vacunado
ANTIESTREPTOLISINA O
Cierto grupo de estreptococos hemolticos beta (grupo A) de
Lancefield producen una hemolisina que se conoce con el nombre de
Streptolisina O. En las infecciones streptococcicas la respuesta del
organismo a esta hemolisina es la produccin de un Anticuerpo llamado
Antiestreptolisina O.
La determinacin del titulo de antiestreptolisina O es un auxiliar del
laboratorio valioso en caso de fiebre reumtica, glomrulo nefritis,
(inflamacin del rin), eritema nudoso, asma infecciosa, condiciones en las
cuales se encuentran ttulos elevados. Tambin es importante en el
diagnostico diferencial de enfermedades que pueden parecerse a la fiebre
reumtica, como la artritis reumatoide pero raras veces producen un
aumento del titulo.
La tcnica de titulacin se funda en la neutralizacin de la
Streptolisina O por la antiestreptolisina O presente en el suero del
enfermo.
PROTEINA C REACTIVA
La protena C reactiva es una protena anormal que se encuentra
comnmente en el suero de personas con una enfermedad inflamatoria
249

activa o destructora de tejidos. No est normalmente presente en el suero

humano. Pero aparece en pacientes con fiebre reumtica, tuberculosis,
neumona, infarto del miocardio y otras enfermedades inflamatorias. Al
disminuir la inflamacin disminuye tambin la protena C reactiva y al
eliminarse el proceso inflamatorio desaparece por completo de la sangre por
lo tanto, esta protena es siempre indicadora de alguna condicin
patolgica.
PRUEBAS SEROLOGICAS PARA LA SFILIS
La sfilis es una enfermedad venrea contagiosa causada por una
espiroqueta llamada Treponema Pallidum.
A la entrada del germen en el organismo este reacciona formando
una sustancia similar al anticuerpo llamado Reagina Sifiltica.
CARDIOLIPINA (VDRL)
Emplea un antgeno lpido y de lecitina derivado del corazn del
buey, la reagina sifiltica es capaza de producir cambios en la dispersin de
las partculas cardiolpidas que resultan visibles en la floculacin.
Esta prueba se ha regulado cuidadosamente y las instrucciones
deben seguirse al pie de la letra a fin de obtener resultados validos. Sus
resultados se informan como negativos y positivos o positivo dbil.
En este ltimo caso se procede a efectuar la prueba cuantitativa.
Para confirmar el diagnostico de Sfilis se utilizan dos pruebas:
M.H.A.T.P. Prueba por hemoaglutinacin y
F.T.A.B.S. Prueba por inmunofluorecencia.
LIQUIDO AMNITICO:
El anlisis del liquido amnitico a demostrado ser ms til que la
Titulacin del cuerpo del suero materno en el tratamiento de izo
inmunizacin, y en pocas ms recientes, el liquido se a utilizado para
250

investigar otros desordenes del feto.

En la bolsa amnitica aparece hacia la octava semana de gestacin
un liquido que inicialmente es similar en su composicin al liquido
extracelular, o sea el liquido amnitico. Es un liquido ultrafiltrado del plasma
materno por las secreciones del propio amnitico, la orina fecal y
secreciones traqueales del feto.
Entre las funciones del liquido amnitico estn: Las de brindar
proteccin al feto amortiguando las presiones ejercidas sobre l, le ayuda a
mantener la temperatura y le permite movilidades sabe tambin que si el
lquido se pierde en edades tempranas de la gestacin el feto muere.
A partir del liquido amnitico puede determinarse tanto el sexo del
feto como el grupo sanguneo, pudindose tambin obtener clulas de
origen fetal.
Las cuales se estudian por medio de anlisis de Cromosomas o
estudios bioqumicos.
En el lquido amnitico se estudia:
SU COMPOSICIN:
El solvente, agua, osmolaridad, los solutos pigmentos, y compuestos
diversos.
CLULAS:
Clulas, grasas, corpsculos de bocar, antgenos de grupo
sanguneo y carrotipo.
ENZIMAS:
Entre los solutos integrantes ya sea normales o anormales del lquido
se cuentan: Pigmentos (bilirrubina, urobilinogeno, coproporfirina en
situaciones normales, meta hemalbumina, oxihemoglobina, coproporfirina
251

tres, en estados patotficos).

Durante la primera mitad del embarazo el volumen del liquido
amnitico es proporcional al peso del feto. Sin embardo despus de la 20
semana el liquido se vuelve mas diluido, solamente unos cuantos
metabolitos aumentan en su concentracin a lo largo del embarazo.
El incremento de la creatinina en el liquido amnitico se atribuyo al
incremento de la actividad urinaria del feto, con el progreso del embarazo.
Las determinaciones del cido rico tambin puede ser de valor para
establecer la maduracin del feto.
El examen citolgico del lquido amnitico puede resultar til para
valorar la edad gestional.
Adelantos recientes permiten una estimacin bastante precisa de la
madurez funcional pulmonar del feto.
Los fosfolipidos ms importantes son:
-
Esfingomielina
Fosfatidilcolina (Lecitina)
Fosfatidinositosis
Fosfatidilglicerol
Son componentes del complejo surfactante.
LIQUIDO CEFALO RAQUDEO:

El LCR es producido por los plexos coroideos que son pelotones de
vasos capilares en los ventrculos cerebrales.
A la incapacidad de algunas sustancias de poder atravesar las
paredes capilares de los plexos por la accin vital de las clulas de
revestimiento se le conoce como: Barrera hemato cerebral.

252

El LCR sirve como amortiguador, regulador del volumen del encfalo

y es el responsable de la nutricin del sistema nervioso central (SNC).
Su composicin qumica es variable considerndose 3 sustancias
nicamente que son de inters para realizar el diagnostico: Glucosa,
Protenas y Cloruros.
Las primeras 2 sustancias son de gran valor diagnostico, la primera
por disminucin como consecuencia de consumo por bacterias o clulas.
La segunda por aumento por consecuencia de perdida de la
integridad de la barrera hemato cerebral.
La determinacin de cloruros ha perdido importancia ya que se ha
comprobado que la mayora de veces permanece sin alteracin.
Los constituyentes celulares de LCR normal son escasos (de 0 a 5
leucocitos Xmm) y estn constituidos principalmente por Linfocitos y
Monocitos pero en procesos patolgicos pueden ser abundantes y
complejos demostrndose eritrocitos en las hemorragias subdurales,
polimorfonuclares en las infecciones y clulas malignas en los procesos
Metastasicos (invasin de bacterias o microorganismos no localizado).
ANLISIS DE LQUIDO CEFALO RAQUDEO (L.C.R.)
-
Examen Fsico
Examen Citolgico
Examen Qumico
Examen Bacteriolgico
Examen Serolgico = Prueba para sfilis.
Guarde el LCR en refrigeracin de (2 a 8 C) hasta que realice el VDRL y

MHATP, FTABS.
LIQUIDO SEMINAL:
El estudio del semen suele formar parte de la investigacin completa
que se realiza a ambos conyugues para conocer las causas de una
253

infertilidad (incapacidad para engendrar).

EL SEMEN:
Es una solucin compuesta que consta bsicamente de
Espermatozoos suspendidos en el plasma seminal. La funcin del plasma
consiste en facilitar un medio nutritivo de Osmolaridad y Volumen adecuado
para vehiculizar (de vehculo) los espermatozoos hacia el moco
endocervical donde termina su funcin al proceso de fertilizacin.
En la formacin del semen estn involucrados varios rganos
reproductores masculinos.
A.-
TESTICULO:
En ellos se encuentran los espermatozoides, que comprenden menos

del 5% del volumen del semen, y son el nico tipo de clulas presentes en
nmero apreciado en un semen normal. Estos se depositan en las
porciones ampollares de los conductos deferentes hasta el momento de la
eyaculacin.
B.-
VESCULAS SEMINALES:
Produce aproximadamente el 60% del volumen del semen, este es un

liquido viscoso o neutro o ligeramente alcalino y ligeramente amarillo.
Estas vesculas son la fuente principal del alto contenido de fructuosa en
el semen, que es el principal elemento nutritivo. Tambin proporciona el
sustrato que permite la coagulacin del semen despus de la eyaculacin.
C.-
PRSTATA:
Produce un lquido lechoso que forma aproximadamente el 20% del

volumen total del semen. Es ligeramente cido (PH6.5) por el alto
contenido de cido Ctrico.
Tambin es rico en enzimas proteoliticas y fosfatasa cida, las que influyen
ms en la coagulacin y licuefaccin del semen.
254

D.-
OTRAS GLANDULAS:
Accesorias contribuyen en menos del 10 al 15% del volumen total del

semen.
El semen est formado por 3 fracciones:
1- Consiste en un liquido viscoso, claro cuya funcin podra ser la de
lubricar la uretra.
2- Consiste sobre todo en la secrecin prosttica junto con la mayora
de los espermatozoides.
3- Consiste casi por entero en una secrecin mucoide que procede de
las vesculas seminales.
RECOLECCION Y PROCESAMIENTO:
Se recomienda una abstinencia sexual de 3 a 7 das.
La muestra ms satisfactoria es la que se recoge en el laboratorio
mediante la masturbacin ya que permite un examen completo
principalmente en el proceso de coagulacin y licuefaccin.
La muestra puede recolectarse en casa del paciente por
masturbacin o por coito interrumpido, (relacin sexual). Se debe recoger
en un frasco de vidrio de boca ancha y limpia o en recipientes de plstico o
polietileno.
La muestra debe recolectarse en su totalidad. No utilizar ningn tipo
de preservativo y transportarse inmediatamente al laboratorio, no debe
demorarse en su traslado ms de 2 horas.

255

PROCESAMIENTO.
(EXAMEN MACROSCOPICO)
Ingreso:
Se debe anotar en la solicitud de laboratorio la hora de toma de
muestra y el inicio del procesamiento.
VISCOSIDAD:
Si es normal la muestra se puede ir virtiendo gota a gota. Tiene
importancia solo si se compromete la movilidad de los espermatozoides al
aumentar la misma.
COAGULACIN Y LICUEFACCION:
El semen recin eyaculado se coagula. Siendo muy viscoso opaco,
blanco o grisceo y con olor a moho o acre (cido fuerte)
PH:
Se encuentra alrededor de 7.7 con rango normal de 7.5 a 8.5.
APARIENCIA:
Un aumento de la turbidez puede ser el resultado de la presencia de
leucocito por un proceso inflamatorio del aparato reproductor.
VOLUMEN:
El rango normal oscila entre 1.5 a 5 ml. con un promedio de 3.5 ml.
un aumento en el volumen del liquido seminal se puede asociar con
Esterilidad.
PROCESAMIENTO:
(EXAMEN MICROSCOPICO)
En una pipeta de Thoma para recuento de leucocitos se hace una
dilucin de 1 en 20 de la muestra, utilizando cono diluyente una solucin de
formal en citrato trisodico al 1% y una solucin de citrato de sodio al 3%.
256

Se agitan las pipetas y se descartan de 3 a 4 gotas y se coloca en la

cmara de Neubawer y se deja durante 2 minutos para que sedimenten los
espermas.
Espermatozoides por milmetro es igual de nmero contado
multiplicado por 100,000 recuento celular total: Espermas por milmetro por
volumen.
VALORES NORMALES:
60 X 10 X milmetro a 150 X 10 X mm.
MOVILIDAD:
Se coloca una gota de semen en un porta objetos precalentado a 37
y se le pone un cubre objetos se observa con objetivo de gran aumento (40
por 043 X) y se cuentan 200 espermatozoides: Se apuntan los Mviles poco
Mviles e inmviles. Y se reporta en porcentaje.
Despus de las 2 horas de eyaculacin la movilidad se ha reducido
en un 40% y de 6 a 8 horas en un 60 a 75%.
Los valores normales oscilan entre 70 a 80%
MORTOLOGIA:
Se deben hacer recuentos diferenciales de los tipos de espermas en
extensiones teidas de preferencia, con Hematoxilina eosina.
Se prepara un frotis o frote el cual se debe fijar antes de que se
seque con etanol al 95% V/v (volumen x volumen) o eter etanol al 50% V/v.
El semen normal contiene por lo menos 30% de formas anormales
tambin se debe observar la presencia, de eritrocitos, leucocitos, clulas
epiteliales.
Si existen reportarlas en el informe final.

257

TERMINOLOGA UTILIZADA:
AZOOSPERMIA:
Ausencia completa de espermas.
OLIGOZOOSPERMIA:
Solamente algunos espermas presentes son mviles.
NECROSPERMIA:
Inmovilidad de todo esperma presente.
NEGACEFALO:
Cabeza grande.
MICROCEFALO:
Cabeza pequea.
LIQUIDO SINOVIAL:
Como la cavidad sinovial se desarrollo a modo de espacio en el tejido
conectivo ha de estar baado por lquidos tisulares.
Este concepto de la cavidad y de su contenido fue ratificado por las
investigaciones de Baguer y Col.
Quienes demostraron que el liquido sinovial es un Dializado o
ultrafiltrado sanguneo que contiene mucina. Esta mucina en el lquido
sinovial se ha identificado como cido Hialurnico, lo cual explica la
viscosidad del lquido sinovial. Y sin duda alguna hace que su poder
258

lubricante aumente.
El contenido celular del lquido sinovial, parece variar
considerablemente, segn las articulaciones y la especie animal, tendiente a
aumentar despus de la muerte.
El examen del lquido sinovial se realiza a partir de unos pocos
milmetros de liquido extrados por puncin articular, realizada en
condiciones de rigurosa Asepsia (procedimiento Artrocentesis).
Por simple inspeccin puede observarse el color y la transparencia
que en un lquido normal, ser ligeramente amarilla claro o clara como el
agua en color y muy transparente.
Un lquido turbio seala por lo general la presencia de leucocitos en
proporcin aumentada y puede ser de aspecto purulento en las artritis
spticas o saturadas de otro origen.
Una turbidez lechosa puede
corresponder a la existencia, abundante de cristales de cido rico, o a
uratos en la artritis gotosa.
El color rojo sanguinolento, aparece en los lquidos traumticos y en
las hemartrosis de los casos hemorrgicos, especialmente hemofilia.
ANLISIS DEL LQUIDO SINOVIAL EN EL LABORATORIO
1. EXAMEN FISICO:
COLOR: Amarillo, claro, Caf, etc.
ASPECTO: Turbio, ligeramente turbio, sanguinolento, limpio, etc.
VISCOSIDAD: Muy viscoso, viscoso, poco viscoso.

259

VOLUMEN
DENSIDAD
PRESENCIA O AUSENCIA DE COAGULO: Lo que conlleva al rechazo del
procedimiento citolgico.
2. EXAMEN QUMICO:
Para realizar el examen qumico es necesario usar el sobrenadante del
liquido, y luego de haberlo centrifugado por 10 minutos a 2,000 RPM, hay
que tener cuidado de no poner todo el liquido a centrifugar, pues para el
examen citolgico no sirve si ha sido centrifugado.
Se debe usar un tubo estril pues el sedimento sirve para
bacteriologa.
A- DETERMINACIN DE PROTEINA:
Mtodo de Maulemans 1963
Mtodo Turbidimetrico con cido tricloractico al 3%
PRINCIPIO:
Se precipitan las protenas con una solucin diluida de cido
tricloracetico y se determina la turbidez de la suspensin uniformemente
obtenida por espectrofotometra, haciendo la lectura a 450 Nanmetros.
REACTIVOS:
Solucin al 3% de cido tricloracetico
Formula de Acido Trocloracetico: CHCI 3 C00H
Solucin de Cloruro de Sodio al 0.85 o 0.90% = NACI
260

Solucin patrn de protenas 30 miligramos por decilitro o 60

miligramos x decilitro.
B- DETERMINACIN DE GLUCOSA:
Mtodo de Dubowski o Toluidina.
Mtodo Colorimetrico
PRINCIPIO:
Cuando se calienta una amnina aromtica primaria, en este caso o
toluidina en cido actico glacial con una cantidad conocida de liquido o
suero, se obtiene un color Verde Azulado, debido a la formacin de
glucosilamina presentado las absorbancias una relacin lineal con la
concentracin de glucosa.
REACTIVOS:
Solucin de Orto-toluidina en cido actico estabilizada en Tiourea.
C- DETERMINACIN DEL COAGULO DE MUCINA
Mtodo de Ropes
PRINCIPIO:
El hialuronato presente en el fluido en contacto con cido actico
diluido forma un coagulo, cuando las condiciones son normales.
Examen Citolgico
Examen Bacteriolgico
Examen Serolgico
261

NOTA:
Se le debe realizar al lquido articular factor reumatoide (FR) el cual
por encima de una dilucin de 1 a 80 se considera Positivo.
Factor antinuclear, clulas LE y titulacin del complemento se realiza
eventualmente, en un liquido articular utilizndose las tcnicas rutinarias de
estas pruebas y las especificaciones de los fabricantes.
LIQUIDO PERICARDIAL,
PLEURAL
LIQUIDO
PERITONELA,
LIQUIDO
Existen 3 cavidades, pericardial, peritoneal y pleural designados

como cavidades corporales su origen es comn en la capa embrionaria
Mesenquimatosa.
Son similares estructuralmente, las 3 estn formadas por una
membrana delgada que forma una doble capa de proteccin, la capa que
recubre se llama Viceral, la que se encuentra en la parte exterior parietal,
ambas capas poseen continuidad y forman una cavidad sin contacto con el
exterior. Las capas parietal y visceral de mesotelio estn apenas separadas
por una fina capa de fluido que facilita los movimientos de una sobre otra,
cuando estn en condiciones normales sin embargo la penetracin de
fluidos ya sean gaseosos o lquidos convertirn estas cavidades virtuales
en cavidades verdaderas.
La presencia de gas constituye respectivamente Neumotrax,
Pneumoperitoneo y Pneumopericardio.
La presencia de lquidos constituye una efusin la que podra ser un
transudado o un exudado.
En general las efusiones contienen protenas, sales, glucosa, urea y
enzimas y casi en la misma concentracin en que se hallan en la sangre.
Las paredes capilares, permiten el paso del agua, cristaloides y
enzimas que circulan en una u otra direccin.
La presin hidrosttica de la sangre se opone a la presin osmtica
262

afuera de la membrana, aumento en la presin sangunea o una

disminucin en la presin osmtica causa el paso del lquido a travs del
capilar intacto originando as un transudado.
Si existe dao en la pared celular se forma un exudado con la
presencia de gran cantidad de protenas y clulas. Un transudado tpico es
amarillo, claro, los electrolitos difieren de la concentracin en el plasma.
El transudado no contiene fibrinogeno por lo cual no se coagula.
Las causas de formacin de un transudado son:
1- Presin hidrosttica de los capilares aumentada.
2- Presin osmtica disminuida por disminucin de la albmina.
3- Retencin de sales por los riones.
Un exudado es caracterstico, entre un edama inflamatorio, es turbio
y coloreado de acuerdo a la calidad y cantidad de sus constituyentes. Ser
lechoso si hay Kilo, tendr trazas dorada si hay gran cantidad de colesterol,
ser caf rojizo si hay sangre suficiente, presenta una turbidez, y ser
evidente por el nmero aumentado de leucocitos, puede ser modificado por
infeccin o necrosis de los tejidos en donde habr un gran nmero de
leucocitos y un nmero variado de eritrocitos, en ocasiones puede haber
masas de grandes clulas mesoteliales fcilmente confundible con
macrfagos o clulas tumorales.
La glucosa y los cloruros pueden estar en ms o menos la misma
concentracin en sangre el fibringeno est presente en los exudados en
cantidad suficiente para coagular.
Las causas de formacin de un exudado son:
1- Trauma
2- Tumores
3- Neoplasias e Inflamaciones spticas.

263

Cuando se acumula liquido en el pericardio en cantidad suficiente para

causar obstruccin grave a la llegada de sangre a los ventrculos, se dice
que existe taponamiento cardiaco, la cantidad del liquido necesario para
producir este estado critico es de 240- 300 ml.
Inmunidad activa:
Es la resistencia inducida despus de contacto efectivo con antgenos
extraos. En estos casos el husped produce anticuerpos en forma activa y
las clulas linfoides adquieren la capacidad para responder a los antgenos.
Las ventajas de la inmunidad activa incluyen resistencia a largo plazo
(basada en la produc.cin de anticuerpos) y respuestas inmunitarias
mediadas por clulas; las desventajas, el lento inicio de la resistencia y la
necesidad de contacto prolongado o repetido con el antgeno.
Introduccin:
El sistema de complemento esta constituido por molculas implicadas
principalmente en la defensa frente a infecciones y clulas tumorales. Parte
de los factores del complemento potencian la inflamacin y la fagocitosis y
actan produciendo la lisis de clulas y microorganismos. El complemento
es especialmente importante frente a grmenes gram negativos que pueden
ser directamente lisados por anticuerpos y complemento.
La mayor parte de los factores del complemento son protenas plasmticas
y una pequea proporcin de ellos son protenas de membrana (Tabla
13.1). Muchos de los componentes del complemento (C2, C3, C4, C6, C7,
C8, Factor B y Factor I) son polimrficos, es decir que existen diferentes
formas allicas que se expresan con distintas frecuencias en poblaciones o
razas.
El hepatocito es el principal productor de factores del complemento. No
obstante, por ejemplo los componentes de C1 son sintetizados por las
clulas epiteliales del intestino y del sistema genito-urinario y los adipocitos
sintetizan factor D. Se ha observado que los macrfagos activados
producen algunos factores del complemento; sin embargo, esto solo tiene
importancia, en el foco inflamatorio. Las citocinas inflamatorias (IL1, IL6 y
TNF) e IFN-gamma incrementan la sntesis de algunos factores del
complemento en el hgado.
ACTIVACION DEL COMPLEMENTO:
En la activacin del complemento se pone en marcha una serie de
reacciones consecutivas en cascada, de tal forma que a partir de cada una
264

de ellas se genera un producto activo que adems de determinar que la

reaccin consecutiva prosiga, puede tener diferentes acciones biolgicas
importantes en la defensa del organismo. Se puede ver este conjunto de
reacciones en cascada en la figura 13.1.
Algunos de los factores del complemento son enzimas con carcter
proteoltico, de tal forma que durante el proceso de activacin, algunas
molculas son rotas en fragmentos a los que para identificarlos se les aade
letras minsculas (Ej. C3a, C3b). Estos fragmentos poseen importantes
funciones biolgicas y son mediadores de la inflamacin.
La activacin del complemento puede iniciarse por dos vas: la va clsica y
la va alternativa. La va clsica se activa por la unin antgeno-anticuerpo,
mientras que la va alternativa se activa por productos bacterianos. En
ambas vas el factor C5 se transforma en C5b lo que permite, en uno y otro
caso, poder entrar en la va terminal o ltica que conduce a la lisis celular o
bacteriana (Figura 13.1)
Una vez producida la activacin del complemento, toda la serie de
reacciones subsiguientes se llevan a cabo por un proceso multiplicador, de
tal forma que, aunque la activacin comienza por un nmero limitado de
molculas, son muchos los factores con actividad biolgica que aparecen en
el curso de las reacciones. La accin de las molculas puede ser local, en el
sitio de su produccin, pero tambin puede ejercerse a distancia por
dispersin a otras zonas. Un esquema general de las reacciones del
complemento en su conjunto es complejo
VIA ALTERNATIVA:
Esta va es ms antigua desde el punto de vista evolutivo- que la clsica,
diferencindose adems de sta en que la va alternativa no necesita
anticuerpos para activarse, por lo que es un mecanismo de defensa
importante en los estadios iniciales de la infeccin cuando todava no se han
sintetizado cantidades importantes de anticuerpos. Funciona de forma
continua a un bajo nivel y solo en presencia de determinados factores se
amplifica. Por ello, podemos distinguir dos situaciones para la va
alternativa: en estado de reposo y en estado de activacin.

265

La va alternativa en estado de reposo:

En condiciones normales, en el plasma, el factor C3 se escinde
continuamente y de forma lenta, en un proceso que se denomina
marcapasos de C3, dando lugar a C3b y quedando as su enlace tioester
interno expuesto. Si no se une a la superficie de algn microorganismo C3b
permanece en fase fluida y se combina con una molcula de agua,
quedando as su enlace tioester hidrolizado y el C3b inactivo (Figura
13.3) El factor B es equivalente al factor C2 de la va clsica.
El factor D circula en la sangre de forma activada aunque no es perjudicial
para el organismo, debido a su baja concentracin. Este factor tiene
actividad esterasa de tipo serina y unindose al complejo C3bB rompe a B
en una pequea fraccin, Ba, que se libera y en una de mayor peso
molecular, Bb, que se mantiene unida al complejo (C3bBb). Este complejo,
que permanece en la fase fluida, tiene actividad convertasa de C3 de la va
alternativa, es decir que puede degradar a C3 en dos fracciones: C3a y
C3b, radicando la actividad proteoltica del complejo en la molcula Bb.
El factor C3b puede unirse covalentemente mediante enlace ster o amida a
las membranas celulares (Figura 13.4), incluso a las propias, captando ms
factor B y amplificando el proceso, lo que permitira la entrada en la va
ltica. No obstante, en condiciones normales o de reposo, esto no ocurre ya
que C3b tiene una vida media muy corta. Por otra parte, los sistemas de
regulacin que se comentarn ms abajo mantienen en un bajo nivel el
funcionamiento de este circuito.
Amplificacin de la va alternativa:
Cuando C3b se une a las membranas de bacterias, hongos y parsitos, los
mecanismos de regulacin que bloquean la amplificacin en el estado de
reposo no funcionan. El factor C3b sobre estas membranas capta factor B
formando el complejo C3bB sobre el que acta el factor D liberando Ba y
quedando el complejo C3bBb que tiene actividad convertasa de C3, siendo
Bb la molcula responsable de la actividad proteoltica. Esa convertasa
libera ms factor C3b que al formar C3bBb3b retroalimenta el circuito y
consigue su amplificacin (Figura 13.2).
El complejo C3bBb3b adems puede actuar sobre C5 (C3bBb3b es la
convertasa de C5 de la va alternativa) e iniciar la va ltica que lleva a la lisis
de los grmenes. C3b puede unirse a receptores en la membrana de los
fagocitos lo que favorece la fagocitosis. Por otra parte el fragmento C3a, por
su actividad de anafilotoxina, activa mastocitos y basfilos, induciendo la
266

liberacin de mediadores qumicos por parte de estas clulas, lo que

potencia la inflamacin.
La properdina (P) es una protena constituida por 4 subunidades
aparentemente idnticas asociadas entre s de manera no covalente. Este
factor se une al complejo C3bBb, que es lbil, dando lugar a C3bBbP que
es ms estable lo que contribuye a la amplificacin.
Tambin puede amplificar la va alternativa el factor C3b generado en la va
clsica, suponiendo este fenmeno un mecanismo de conexin entre ambas
vas
El veneno de cobra contiene un factor (CVF, cobra venenom factor) que
acta de forma semejante a C3b formando un complejo muy estable CVFBb
que puede liberar grandes cantidades de C3b y producir, por agotamiento,
una depleccin de C3 del plasma.
VIA CLASICA:
Se inicia tras la unin Ag-Ac y siempre que el anticuerpo que participe en
ello sea del tipo IgM o IgG de las clases IgG1, IgG2 o IgG3. Los anticuerpos
solubles o libres no activan el complemento, solo se activa este sistema
cuando se forman complejos antgeno-anticuerpo (Ag-Ac). En el caso de la
IgG, que es una Ig monomrica, se necesitan al menos dos complejos AgAc cercanos para que las fracciones Fc de la IgG unan y activen el factor
C1. En el caso de la IgM, al ser una molcula pentamrica, solo es
necesario un complejo Ag-Ac. La unin de la Ig al antgeno, induce un
cambio conformacional en los dominios de la regin Fc que permite la unin
del factor C1.
Factor C1:
El factor C1 est compuesto por tres subunidades proteicas (q, r y s), que
en el momento de la activacin del complemento se unen entre s por
enlaces dependientes del Ca++ formando un complejo constituido con una
unidad de C1q, 2 de C1r y 2 de C1s (C1qr2s2).
La molcula C1q es una protena con dos partes bien diferenciadas,
globular y fibrilar (Figura 13.5). Parece ser que en las porciones globulares
se encuentran los sitios de combinacin con el anticuerpo con los que se
une solo cuando ste est unido al Ag. Las porciones fibrilares poseen una
estructura qumica que guarda similitud con el colgeno, con gran cantidad
de aminocidos hidroxilados que unen disacridos de glucosa y galactosa.
267

El complejo molecular C1q est integrado por 18 cadenas polipeptdicas

organizadas en seis subunidades idnticas.
Activacin de C1:
La subunidad C1q se fija al anticuerpo en los sitios de unin que son el
dominio CH2 de la IgG y el CH3 y/o CH4 de la IgM). Este fenmeno es el
primero que ocurre en la activacin mediada por anticuerpos de la va
clsica del complemento y es el que pone en marcha la cascada de
reacciones subsiguientes. El fragmento C1q va a activar a las dos
subunidades C1r, que actuar sobre las dos C1s que, entonces, adquieren
actividad de esterasa de tipo serina, responsable de iniciar las fases
siguientes.
Para que se produzca la activacin de C1q, ste debe estar unido por su
regin globular al menos a dos dominios de distinta fraccin Fc (Figura
13.6). Esto implica que los anticuerpos, para activar al complemento, han de
encontrarse con la disposicin espacial apropiada que permita a C1q
acoplarse a varios de ellos al mismo tiempo (complejos Ag-Ac dispersos
sobre una superficie celular pueden no llegar a activar el complemento).
C1q, por otra parte, solo se une a inmunoglobulinas cuando stas, a su vez,
se encuentran unidas a sus antgenos y stos estn integrados en una
misma superficie (membrana celular). Este concepto es importante para
comprender por qu complejos antgeno-anticuerpo solubles no conectados
con membranas, pueden convivir en el suero con los factores del
complemento sin llegar a activarlos y que, por el contrario, si se activan
cuando tales complejos quedan atrapados sobre algn tejido, originando,
en este caso, un proceso inflamatorio localizado.
La activacin de C1q provoca que una molcula de C1r del complejo
C1qr2s2 pierda por auto catlisis un trozo de bajo peso molecular,
quedando activada. Esta molcula, a su vez, activa a la otra molcula de
C1r. Las dos molculas de C1r atacan a las dos molculas de C1s liberando
sendos trozos de bajo peso molecular y dejando expuestos sus dominios
catalticos.
La MBP (mannose-binding protein) es una molcula del grupo de las
colectinas (protenas con colas de colgeno y dominios globulares de tipo
lectina). Esta protena reconoce carbohidratos en distintos grmenes, lo que
le permite unirse a ellos y tiene la capacidad de sustituir a C1q en la
activacin de C1r y C1s, pudiendo iniciar de esta forma la va clsica. A su
vez, la MASP (MBP associated binding protease) es una proteasa de tipo
serina que puede sustituir a C1r y C1s en la activacin de la va clsica.
268

Estos resultados han determinado que algunos autores hablen de una

tercera va de activacin del complemento: La Va de la Lectina.
Activacin de C4 y C2:
C1s del complejo C1q2r2s va a actuar sobre la cadena a de C4 produciendo
su escisin en dos molculas, una pequea, C4a, que difunde a la fase
fluida y otra mayor, C4b, que se une por enlace covalente de tipo ster o
amida (equivalente al del C3b) a la superficie celular. Esta fraccin C4b
unida a la membrana, en presencia de iones Mg++, forma un complejo con la
fraccin C2. C1s tambin acta sobre C2, provocando la escisin de esta
molcula en dos fragmentos, uno menor C2b y otro mayor C2a. Este ltimo
se une al C4b para formar el complejo C4b2a (convertasa C3 de la va
clsica), que tiene actividad estersica.
Convertasa de C5 de la va clsica:
El complejo C4b2a, cuyo centro activo se encuentra en el componente C2a,
acta sobre la cadena a del factor C3 que se transforma por proteolisis en
dos fragmentos activos: la anafilotoxina C3a, que pasa al medio lquido, y el
fragmento C3b que se une a la membrana celular mediante un enlace de
tipo ster o amida. Al complejo formado por C4b2a3b se le denomina
convertasa de C5 de la va clsica ya que tiene capacidad de actuar sobre
este factor, siendo ste el primer paso de la denominada va ltica
El factor C3b unido a la membrana celular tambin puede ser captado por
los fagocitos, que al presentar receptores de membrana para C3b, se facilita
de esta forma el proceso de la fagocitosis (opsonizacin) (Tabla 13.2).
La anafilotoxina C3a, por otra parte, potencia la inflamacin al inducir la
desgranulacin de los basfilos y mastocitos y liberar, por tanto, mediadores
de la inflamacin. El incremento de la permeabilidad capilar facilita el
acceso al foco de nuevos factores del complemento y de inmunoglobulinas
desde la sangre, as como la llegada de fagocitos que son movilizados por
la actividad quimiotxica del propio C3a y otros factores quimiotxicos del
foco inflamatorio (Tabla 13.2).
VIA LITICA. FORMACION DEL COMPLEJO DE ATAQUE A LA
MEMBRANA:
Las reacciones finales del complemento se encuentran esquematizadas en
la Figura 13.8. Las enzimas convertasas de C5 (C4b2a3b y C3bBb3b),
formadas ya sea en la va clsica o en la alternativa, actan fijando el factor
269

C5 a C3b, que es escindido por los factores con actividad esterasa (C2a o
Bb) en 2 fragmentos, la anafilotoxina C5a, que pasa al medio fluido y el
fragmento C5b de mayor peso molecular que se une no covalentemente a
C3b. La fraccin C5b capta C6 y C7 de la fase fluida, formando un complejo
estable C5b67 con actividad quimiotxica y capacidad de fijacin a las
membranas.
Si al complejo C5b67 se une la fraccin C8, C5b678 es ya citoltico, pues el
factor C8 modifica su configuracin espacial ofreciendo zonas hidrofbicas
que determinan su insercin en la membrana. Este grupo de molculas,
adquiere la capacidad de interaccionar con molculas de C9 formando el
complejo C5b6789 (Figura 13.9). Las molculas de C9 (en nmero de 1 a
18) sufren cambios en su configuracin, desplegndose y presentando ms
zonas hidrofbicas que potencian y aceleran la penetracin de este
complejo de ataque a la membrana (MAC, Membrane Attack Complex),
dando origen a la formacin de canales hidroflicos (Figura 13.10), que
permiten el libre intercambio de sodio y agua con el exterior de la clula,
provocando la consiguiente lisis osmtica de la clula atacada.
C9 es estructuralmente homologo a la perforina, protena liberada por los
linfocitos T citotxicos y las clulas NK, y que es tambin responsable de la
formacin de poros en la membrana de las clulas diana.
Codificacin gentica de las fracciones del complemento:
Las molculas C2, C4 y el factor B (Bf) estn codificadas por genes
ubicados en el cromosoma 6, entre los loci HLA-B y HLA-DR del Complejo
Principal de Histocompatibilidad humano (MHC, Major Histocom-patibility
Complex). El resto de los componentes del sistema del complemento no
estn vinculados a HLA. Mientras que el factor B y C2 estn codificados por
un solo locus, existen dos loci que codifican C4, C4a y C4b.
Otros genes que codifican componentes del sistema complemento tambin
se encuentran agrupados. As en el brazo corto del cromosoma 1 del
hombre se localizan los genes que codifican las cadenas alfa y beta de C8
y las cadenas alfa y beta de C1q. Los genes C6 y C7, que se han originado
por duplicacin, se detectan en el cromosoma 5.
En el brazo largo del cromosoma 1 se encuentra la regin RCA (regulators
of complement activation) que contiene genes ligados que codifican distintas
protenas reguladoras: CR1, CR2, DAF, H, C4BP y MCP.

270

RECEPTORES PARA FACTORES DEL COMPLEMENTO:

Muchas de las funciones del complemento se llevan a cabo tras la unin de
fragmentos de algunos factores del complemento a receptores especficos
presentes en la superficie de varios tipos de clulas (Tabla 13.2). Los mejor
conocidos son los que tienen como ligando a fragmentos de C3.
CR1 (Receptor de complemento tipo 1, CD35).
Sus ligandos son los fragmentos C3beta, iC3beta y C4beta. Se encuentra
sobre todo en las clulas del sistema fagoctico mononuclear, en los
neutrfilos, en los linfocitos T y B y en los eritrocitos. En las clulas
fagocitarias facilita la fagocitosis de partculas opsonizadas por sus
ligandos. En los eritrocitos facilita su unin a inmunocomplejos opsonizados
por C3beta y C4beta. Estos inmunocomplejos son retirados de la superficie
de los hemates en el hgado y bazo por los fagocitos. De esta forma los
hemates quedan con sus receptores libre para continuar el aclaramiento de
inmunocomplejos de la circulacin (ver mas adelante).
CR2 (Receptor de complemento tipo 2, CD21).
Sus ligandos son C3b, la forma inactiva de ste, iC3b y sus fragmentos de
degradacin C3delta y C3deltagamma. Este receptor se encuentra en los
linfocitos B, en las clulas dendrticas foliculares y en algunas clulas
epiteliales.
El CR2 se encuentra en las clulas B formando un complejo trimolecular
junto con otras dos protenas, CD19 y CD81. Este complejo es el llamado
correceptor del linfocito B y enva seales al interior de la clula B que
facilitan su respuesta una vez unida al antgeno por su receptor
(inmunoglobulina + molculas Ig-alfa e Ig-beta).
En las clulas dendrticas foliculares CR2 sirve para atrapar en los centros
germinales complejos Ag-Ac opsonizados por iC3beta o C3deltagamma.
El CR2 es el receptor usado por el virus de Epstein-Barr para invadir a las
clulas B. Este virus es el causante de la enfermedad mononucleosis
infecciosa y est relacionado con tumores como el linfoma de Burkitt y el
carcinoma nasofarngeo.

271

CR3 (Receptor de complemento tipo 3, Mac-1, CD11bCD18).

Se encuentra en fagocitos mononucleares, neutrfilos, clulas cebadas y
NK. La cadena beta de CR3 (CD18) se encuentra en otras dos molculas
(LFA-1 y p150,95). CR3, LFA-1 y p150,95 pertenecen a la familia de las
integrinas.
El ligando de CR3 es iC3b por lo que participa en la fagocitosis de partculas
opsonizadas por este factor. Pero en los fagocitos y neutrfilos se une
tambin a ICAM-1. Esta molcula se encuentra en los endotelios por lo que
facilita el anclaje de fagocitos a las clulas endoteliales para posteriormente
abandonar los vasos por diapdesis.
CR4 (CD11cCD18, p150,95).
Su ligando es tambin iC3b y probablemente la funcin de CR4 es similar a
la de CR3. CR4 es abundantemente expresado por las clulas dendrticas
por lo que se usa como marcador para identificarlas.
FUNCIONES DEL COMPLEMENTO:
Las funciones del complemento son muy diversas, de ah la gran
potencialidad defensiva del mismo.
Estas funciones se llevan a cabo por diferentes fracciones del complemento
activas. La tabla 13.2 muestra la accin fisiolgica de stas. Los factores
activos frecuentemente desarrollan su funcin conectando con distintos
receptores de membrana. La Tabla 13.2 expone los receptores de
membrana para las distintas fracciones del complemento. Comentamos, a
continuacin, las funciones biolgicas fundamentales. Las acciones
anafilotxicas, quimiotxicas y opsonizantes del complemento lo convierten
en un factor fundamental en la potenciacin de la inflamacin, fenmeno
bsico en la defensa frente a la infeccin
Accin citoltica:
Una vez puesta en marcha la cascada del complemento, si se forma el
complejo final C5b67, y sobre l se acopla la fraccin C8 y molculas de C9,
se produce la lisis de las clulas sobre cuyas membranas se ha adosado
dicho complejo. La lisis se produce por la formacin de mltiples poros
formados por el complejo C5b6789 (Figura 13.10). Como se ha explicado
anteriormente, a este efecto se puede alcanzar por la unin del Ag-Ac (va
clsica) o por la activacin grmenes (va alternativa). Por uno u otro
272

mecanismo se produce la lisis de gran nmero de bacterias, tales como

bacteridium, salmonella, shigella, escherichia, vibrio, treponema y otras
clulas. Todas estas acciones se agrupan bajo la denominacin conocida
de citotoxicidad dependiente del complemento.
Accin anafilotxica:
Las fracciones C3a y C5a, conectando con receptores de membrana (C3aR,
C5aR, Tabla 13.2), ejercen una accin anafilotxica, esto es, poseen una
potente accin activadora sobre los mastocitos y basfilos que en
consecuencia, liberan mediadores de la inflamacin. Las sustancias vaso
activas liberadas incrementan la permeabilidad capilar, lo que facilita la
afluencia de leucocitos y molculas al foco inflamatorio.
Accin quimiotxica:
La fraccin C5a posee una potente actividad quimiotxica, que determina la
atraccin de leucocitos al foco inflamatorio.
Accin facilitadora de la fagocitosis (opsonizacin)
Los macrfagos y polimorfonucleares neutrfilos presentan en sus
membranas receptores (CR1, CR3 y probablemente CR4, Tabla 13.2)
capaces de unir la molcula C3b y sus derivados resultantes de la
activacin del complemento. De esta forma, si el C3b est fijado sobre la
superficie de un germen, los fagocitos pueden conectar con ste mediante
los receptores para C3b, facilitndose as, el fenmeno de la fagocitosis.
Esta actividad facilitadora de la fagocitosis se denomina opsonizacin. La
fagocitosis de microorganismos dependiente de C3b e iC3b es
probablemente el mayor mecanismo de defensa frente a las infecciones
bacterianas (Figura 13.11).
Otra funcin de especial importancia ligada a la capacidad inductora de la
fagocitosis de ciertos factores del complemento es la de aclaramiento de
inmunocomplejos.
Aclaramiento de inmunocomplejos:
En condiciones normales, se pueden detectar inmunocomplejos solubles
circulando en sangre. Estos inmunocomplejos son potencialmente
peligrosos, pues de precipitar en algn tejido activaran el complemento e
iniciaran un foco inflamatorio. No obstante, existe un mecanismo fisiolgico
de aclaramiento de inmunocomplejos. Los eritrocitos, las clulas ms
273

abundantes de la sangre, presentan CR1 en su membrana y mediante este

receptor captan inmunocomplejos circulantes a travs del factor C3b.
Cuando los hemates atraviesan el hgado o el bazo, los macrfagos de
estos rganos, mediante sus receptores CR1, CR3 o CR4, unen los
inmunocomplejos a travs de C3b (o mediante receptores para Fc a travs
de IgG) y los fagocitan. Los eritrocitos quedan libres para captar nuevos
inmunocomplejos (Figura 13.12)..
Accin reguladora de la respuesta inmune:
El factor C3b tiene importantes funciones reguladoras de la respuesta
inmune. As, el C3b o sus derivados (C3d), unido a membranas facilita la
cooperacin entre las clulas inmunes y acta en la estimulacin de las
clulas T y B probablemente debido a su capacidad de promover la
adhesin clula-clula.
Las clulas presentadoras del antgeno tienen receptores para el
complemento, lo que permite su conexin con el antgeno para su posterior
presentacin.
MECANISMOS DE REGULACION DEL COMPLEMENTO:
Dado el potencial lesivo del sistema del complemento, ste se encuentra
estrechamente regulado por diversos mecanismos y molculas (Tabla
13.3), cuyo objeto es evitar la lisis de las clulas autlogas. El mecanismo
ms simple de regulacin es la baja concentracin y labilidad de muchos de
sus factores. No obstante los factores que actan en la regulacin del
complemento ejercen su accin en distintos puntos tanto en la va clsica
como en la alternativa o ltica, centrndose fundamentalmente en la
activacin de C3.
Inhibicin de C1
El inhibidor de la C1 esterasa (C1inh) inhibe la formacin de C3b
convertasa de la va clsica por su capacidad de unin a los fragmentos C1r
y C1s. En los casos de deficiencia en C1inh (edema angioneurtico
hereditario), el C1 activado degrada elevadas cantidades de C2
produciendo un acumulo de C2b. Este factor es degradado anormalmente
por plasmina lo que da lugar a C2-Kinina que es un potente vasodilatador y
aumenta la permeabilidad vascular produciendo los edemas caractersticos
del cuadro.

274

Inhibicin de C4
El factor C4BP (C4-binding protein) tiene la capacidad de captar C4b
facilitando su disociacin del complejo C4b2a e inhibiendo, por tanto,
la actividad de convertasa de C3.
El factor I (FI) es una esterasa de tipo serina que circula en forma
activada. El C4b disociado es susceptible de ser atacado por el factor
I y ser degradado en C4c y C4d.
Los receptores de membrana DAF (factor acelerador de la
degradacin) y la MPC (cofactor protenico de membrana) se
encuentran ampliamente distribuidos en clulas inmunes y no
inmunes. Tienen la capacidad de inhibir la unin, facilitar la
disociacin de C4b y C2a (DAF) o favorecer que el factor C4b pueda
ser degradado por el FI (MCP). Estos receptores son de gran
importancia en los mecanismos de prevencin de lisis de las clulas
autlogas.
Inhibicin de C3
La regulacin de C3, al ser ste el factor central en la activacin del
complemento, es probablemente el mecanismo de regulacin ms
importante.
El factor H (FH) es una protena plasmtica homloga a la C4BP que tiene
la capacidad de unir C3b en la fase fluida. El Factor I ataca entonces C3b
liberando una pequea fraccin C3f y convirtindolo en iC3b. Por otra parte
FH tambin promueve la disociacin del complejo C3bBb. Un defecto en
este tipo de regulacin acontece en un tipo de glomerulonefritis
(membranosa tipo II), en la que aparecen autoanticuerpos (factores
nefrticos) que se une al complejo C3bBb, estabilizndolo y hacindolo
resistente a la accin de FH.
Los receptores de membrana CR1, DAF y MCP actan sobre el C3b de
forma semejante a su actuacin sobre C4b: inhiben la unin o facilitan la
disociacin C3bBb (CR1, DAF) o actan como cofactores del factor I en la
degradacin de C3b unido a la membrana (CR1, MCP). En este caso C3b
tambin se degrada a iC3b, sobre el que el factor I puede seguir ejerciendo
su actividad cataltica originando las fracciones C3c y C3dg.
Todos estos mecanismos inhiben la capacidad de C3b de formar convertasa
de C5, as como de que C3b medie la adherencia celular. Sin embargo iC3b
s mantiene la capacidad de adherencia a clulas fagocticas por los
receptores de estas clulas para iC3b (CR1, CR3 y CR4) (Tabla 13.2).
275

Inhibicin del MAC

La protena S (vitronectina) es una glucoprotena plasmtica con
capacidad para unirse al complejo C5b67 impidiendo que ste se una
a la membrana celular.
CD59 es una protena ampliamente distribuida en las membranas
celulares que inhibe la insercin de C9 en el complejo C5b-8.
El factor de restriccin homloga (Homologous Restriction Factor,
HRF) tambin est ampliamente distribuido en la membrana de las
distintas clulas y presenta una funcin equivalente al CD59.
La capacidad de MAC de lisar las clulas puede ser modulada
tambin por una protena circulante llamada SP-40,40, esta es un
heterodmero que ha sido aislado de complejos solubles C5-9. Podra
ser un componente normal de MAC cuyo efecto principal sera
controlar la capacidad de MAC de lisar las clulas. El mecanismo de
accin de SP-40,40 es desconocido.
Proteccin de lo propio, lisis de lo extrao
De los factores reguladores estudiados DAF, HRF y CD59, se piensa que
actan exclusivamente en la inhibicin de la lisis de las clulas del propio
organismo donde asienta. Estas protenas de membrana se detectan
fundamentalmente en eritrocitos y clulas endoteliales que son las clulas
que se encuentran en mayor peligro de autolisis por el complemento.
En la enfermedad hemoglobinuria paroxistica nocturna hay un defecto
congnito de DAF, HRF y CD59 producindose una anemia debido a la lisis
de los hemates, lo cual ocurre frecuentemente durante la noche.
Lgicamente los grmenes no presentan en sus membranas molculas
reguladoras de la autolisis por lo que no pueden protegerse de los efectos
lticos del complemento. Esto determina, por tanto, un mecanismo
rudimentario de discriminacin entre lo propio y lo no propio.
No obstante, algunos grmenes han desarrollado mecanismos que le
permiten evadirse de la actuacin del complemento. En algunos grmenes
la simple presencia de una cpsula puede ser un mecanismo de resistencia.
Otros grmenes presentan protenas de membrana que impiden el
desarrollo del MAC o enzimas que degradan los factores del complemento o
liberan factores proteicos que inactivan las convertasas de C3, etc.
rganos Importantes del Sistema Inmunolgico

276

1. Defensas inespecficas
o Barreras externas
Piel
Mucosas
Secreciones
Clulas fagocitarias
Macrfagos
Macrfagos
2. Defensas especficas
o La respuesta humoral
Antgeno y anticuerpo
La reaccin antgeno-anticuerpo
o La respuesta celular
Tipos de clulas del sistema
Mecanismo de accin
Comunicacin entre las clulas del sistema
Defensas inespecficas
Dentro de este apartado, se incluyen aquellas defensas del
Organismo, cuya respuesta es la misma, con independencia del tipo de
microorganismo que intenta colonizarnos.
Barreras externas: Para invadir el cuerpo de los animales, los
microorganismos deben atravesar su piel o bien penetrar por alguno de sus
orificios naturales. La piel de los mamferos es una barrera mecnica
gracias a su grosor, al proceso de queratinizacin y a la descamacin de
las capas externas.

277

Adems la secrecin de las glndulas sebceas y el sudor determinan la

existencia de un pH cido. Por aadido, la flora bacteriana de la piel impide
el asentamiento y desarrollo de otros microbios que se depositan sobre ella.
En las aberturas naturales, como boca, ano, vas respiratorias,

urogenitales y digestivas, las barreras defensivas son las secreciones
mucosas
que
recubren
los
epitelios.
En la saliva, en la secrecin lacrimal y en la secrecin nasal, existe una
enzima, la lisozima; en el esperma la espermina, ambas con funcin
bactericida. La secrecin cida del epitelio vaginal y de los conductos
digestivos, forman un ambiente desfavorable para el desarrollo de
microorganismos. En las mucosas respiratorias, los microbios y las
partculas extraas quedan atrapados en el mucus y son eliminados
mediante el movimiento ciliar de las clulas epiteliales, por la tos y el
estornudo.
La piel y todas estas secreciones reciben el nombre de barreras

defensivas primarias. Clulas fagocitarias Los fagocitos son clulas con
capacidad fagocitara, que pueden destruir sustancias extraas y clulas
envejecidas, a las que engloban con sus seudpodos para luego digerirlas
en el citoplasma.

278

Los neutrfilos, denominados micrfagos, son los ms abundantes y los

que presentan mayor actividad fagocitaria. Acuden al lugar de la infeccin
atravesando la pared de los capilares sanguneos (diapdesis), para llegar a
los tejidos y fagocitar a los grmenes patgenos.
Los neutrfilos realizan un proceso de heterofagia que les causa
la muerte, como expresa De Duve (La clula viva, Ed. Labor )" Los
leucocitos estn creados de tal manera que slo una vez en la vida les
est permitido comer opparamente. Se fabrican en la mdula sea, y
de ella salen, cargados de enzimas lisosmicas y de otras armas
mortferas, en busca de enemigos. Cuando los encuentran, devoran
tantos como pueden. Poco despus mueren a consecuencia de esta
jugarreta de la seleccin natural, que les lleva a cometer semejante
acto de gula, fatal para ellos; pero destinado aun bien superior, el de
todo el organismo."
El resultado de esta batalla origina el pus, que no es ms que el
montn de cadveres de bacterias y fagocitos.
3. Los macrfagos, procedentes de los monocitos de la sangre,
emigran a los distintos tejidos recibiendo diversos nombres. La
reserva de macrfagos constituye el sistema retculo
endotelial (S.R.E.), interviene en la defensa, destruccin de
clulas
viejas
y
regeneracin
de
los
tejidos.
Se trata de un conjunto de clulas, que en cierto modo, dirigen
la complicada red de procesos encaminados a eliminar la
infeccin y regenerar los tejidos daados, para ello liberan
interleucinas 1 , que se comporta como un mensajero
inmunitario y ejerce su accin sobre la totalidad del organismo.
Defensas especficas:
Las defensas especficas se basan en el reconocimiento de los
Determinantes antignicos localizados en la superficie del germen
patgeno oo en las toxinas producidas por stos. Una vez que el sistema
inmunitario reconoce la naturaleza del antgeno, lanza contra l dos tipos
de respuestas, que actan de modo secuencial:
La respuesta humoral, basada en la sntesis de anticuerpos por los
linfocitos B

279

La respuesta celular , mediada por linfocitos T, que destruyen los

microorganismos portadores de dicho antgeno, y las clulas propias si
estn infectadas pro ellos.
La respuesta humoral. En el plasma sanguneo, se encuentran un tipo
particular de globulinas que tienen la capacidad de de reaccionar
especficamente con las partculas extraas (antgenos), anulando su
posible
efecto
patgeno.
Se
las
denomina
genricamente
inmunoglobulinas o anticuerpos.
Antgeno y anticuerpo:
As se denomina antgeno a cualquier sustancia extraa que, introducida en
el interior de un organismo, provoque una respuesta inmunitaria,
estimulando la produccin de anticuerpos.
Los anticuerpos son protenas pertenecientes al grupo de la gammaglobulina o inmunoglobulinas, constituidas por la asociacin de cuatro
cadenas polipeptdicas unidas entre s mediante puentes disulfuro, dos
cadenas se denominan pesadas y las otras dos ligeras. A su vez, cada una
de las cadenas ligeras y pesadas, incluye una regin variable, cuya
secuencia de aminocidos es peculiar de cada anticuerpo, y una regin
constante, con la misma secuencia en todos los anticuerpos.
La reaccin antgeno-anticuerpo:
La unin antgeno-anticuerpo es especfica, cada anticuerpo reconoce y se
une a un determinado antgeno. Esta unin se realiza por medio de uniones
intermoleculares entre el antgeno y la zona del anticuerpo, y da lugar al
complejo antgeno-anticuerpo segn el modelo llave-cerradura.
Las reacciones antgeno-anticuerpo tienen diversas consecuencias y
existen varios tipos de reacciones:
Las reacciones antgeno-anticuerpo tienen diversas consecuencias y
existen varios tipos de reacciones:
En las reacciones de aglutinacin, un anticuerpo puede unirse a la vez a dos
antgenos, asmismo cada antgeno puede unirse a varios anticuerpos y formar
un entramado de complejos antgeno-anticuerpo. Si el antgeno es una
sustancia txica, la unin con el anticuerpo provoca su neutralizacin, de
modo que no puede ejercer su efecto txico.
280

Respuesta celular
Tipos de clulas del sistema:
Las clulas plasmticas se forman en la mdula roja de los huesos y trs un
proceso de diferenciacin, pasan a la sangre. Uno de estos tipos de clulas
son los linfocitos. Algunos adquieren sus propiedades en la misma mdula
sea: son los linfocitos B. Otros van a especializarse al timo, una glndula
situada entre la trquea y el esternn: son los linfocitos T.
rganos primarios
rganos secundarios
Medula sea
rganos linfticos,Circulatorio
bazo, amgdalas,
apndice, p. Peyer
Timo
M. sea:
linfocitos B
Timo:
linfocitos T
Linftico
Finalizado el proceso de especializacin, los linfocitos B y T pasan a los

ganglios, al bazo y a los dems rganos linfoides y algunos de ellos se
incorporan a la corriente sangunea, donde permanecen a la espera de
entrar en contacto con los antgenos.
Mecanismo de accin.
Cuando se detecta la presencia de un antgeno, un macrfago lo fagocita y
lo transporta a los ganglios linfticos. All presenta fragmentos del antgeno
a los linfocitos T, que produce la formacin de linfocitos T citotxicos, que
pueden destruir directamente las clulas infectadas, y de linfocitos T
auxiliares, que facilitan el desarrollo de los linfocitos B.
Los linfocitos T citotxicos presentan en su superficie unas molculas
receptoras semejantes a los anticuerpos, mediante las cuales se unen
especficamente a los antgenos de la membrana de las clulas. El linfocito
inyecta sus enzimas en el interior de la clula y provoca su degradacin.
Este tipo de linfocitos es el responsable del rechazo en los transplantes de
tejidos.
Los linfocitos B se activan ante la presencia del antgeno y se encargan de
elaborar un anticuerpo especfico. Sin embargo, no empiezan a producir
281

este anticuerpo hasta que no reciben la "seal" de los linfocitos T auxiliares.

Finalmente, superada la infeccin, otro tipo de linfocitos T supresores se
encargan de detener las reacciones inmunitarias.
Comunicacin entre las clulas del sistema:
Ante la presencia del antgeno, los linfocitos T auxiliares responden
segregando una serie de mediadores, las interleucinas o interleuquinas
que activan otros glbulos blancos (macrfagos y linfocitos).
Las mejor conocidas son las interleucinas 1 y 2 (IL-1, IL-2 en el esquema).
La interleucina 1 acta como mediador soluble en el proceso de inflamacin
y como factor de crecimiento y diferenciacin de las clulas B. La
interleucina 2 es el factor de crecimiento y diferenciacin de las clulas T.

282

MANUAL DE
LABORATORIO CLINICO
UNIDAD BACTERIOLOGA

283

BACTERIOLOGIA
BREVE INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA
La microbiologa es la ciencia que estudia los seres vivos
microscpicos, es decir que solo pueden observarse con ayuda del
microscopio. Los pequeos organismos microscpicos son llamados
vulgarmente microbios, pero la palabra correcta para designarlos es
microorganismos. La microbiologa se aplica no solo a la ciencia mdica,
sino tambin a la veterinaria a la agronoma y a la industria, por lo que
forma parte del plan de estudios de varias carreras universitarias.
Existen muchas clases de microorganismos, los cuales se clasifican
segn su estructura, manera de reproducirse y muchas otras
caractersticas. Los grupos mas importantes de microorganismos son: los
virus, las bacterias, los protozoos y los hongos. Los virus son los
microorganismos mas pequeos, se reproducen nicamente dentro de las
clulas y tienen forma similar a cristales. La palabra microorganismo abarca
grupos de seres vivos muy diferentes entre si.
La Microbiologa se sub-divide en varias disciplinas que estudian cada grupo taxonmico de microorganismos. Algunos no son propiamente
microorganismos, pero su estudio se basa en estructuras microscpicas.
Microbiologa
Bacteriologa (bacterias)
Micologa
(hongos)
Virologa
(virus)
Parasitologa
Protozoologa (protozoos)
Helmintologa (helmintos)
Entomologa
(insectos,
caros, otros)
La mayora de los microorganismos no son capaces de causar

enfermedades en el hombre y se le llama por esta razn saprofitos o
saprobios. Sin embargo algunos causan enfermedades en el hombre,
llamadas infecciones Cuando un microorganismo es capaz de producir
infeccin, se dice que es patgeno la virulencia es la cuantificacin de la
patogenecidad.
La inmunologa naci ligada a la microbiologa como el estudio de los
mecanismos de defensa contra los microorganismos. Ahora su campo de
accin se ha extendido mucho y es una ciencia biolgica independiente.
284

En todos los ambientes que rodean al hombre existen

microorganismos. Las bacterias y los hongos son los mas abundantes;
prcticamente todos los objetos que vemos y tocamos estn cubiertos de
ellos. El cuerpo humano, especialmente donde hay membranas mucosas
(intestino, vagina, boca, etc.), est cubierto de bacterias. De los
microorganismos que viven constantemente en el hombre, se dicen que
forman parte de alguna microbiota. Por microbiota se entiende aquel
conjunto de microorganismos que normalmente conviven con el hombre sin
causarle ningn dao. La palabra flora no es correcta, y por lo tanto no debe
utilizarse. Se dice que los microorganismos de las microbiotas colonizan,
no infectan, aunque eventualmente pueden hacerlo y en este caso se les
llama oportunistas.
EL NOMBRE CORRECTO DE LOS MICROORGANISMOS
Todos los nombres cientficos de todos los seres vivos, de acuerdo
con el sistema binario de Linneo, se componen de dos palabras: la primera
que indica un gran grupo, es el gnero y siempre se escribe la primera letra
con maysculas. Casi todos los nombres cientficos de los microorganismos
se derivan del griego o del latn, por esta razn:
a)
Siempre se subrayan discontinuamente o se escriben con letra
cursiva.
b)
Nunca se tildan.
Ejemplos:
Staphylococcus aureus (bacteria)
Escherichia coli (bacteria)
Streptococcus pyogenes (bacteria)
Pseudomonas aeruginosa (bacteria)
Entamoeba histolytica (parsito, protozoo)
Giardia lamblia (parsito, protozoo)
Ascaris lumbricoides (parsito, helminto)
Trichophyton rubrum (hongo)
Microsporum canis (hongo)
Adems del nombre cientfico, en algunos casos existe un nombre de
uso comn o vulgar. El uso de este tipo de nombres debe evitarse.
285

Los nombres vulgares ms conocidos son los siguientes:

Nombre Correcto:
Escherichia coli
Streptococcus pneumoniae
Neisseria gonorrhoeae
Enterobius vermicularis
Trichuris trichiura
helminto)
Entamoeba histolytica
protozoo)
Entamoeba coli
protozoo)
Hymenolepis nana
helminto)
Candida albicans
Nombre vulgar:
Colibacilo (bacteria)
neumococo (bacteria)
gonococo (bacteria)
oxiuro (parsito, helminto)
tricocefalo
(parsito,
ameba
histolitica
(parsito,
ameba
coli
(parsito
nana
(parsito,
tenia
monilia (hongo)
Si se desea hacer referencia a todas las especies de un gnero se

usa la abreviatura para especies. spp y no se subraya. Si solo se refiere a
una especie no determinada de un gnero dado, se usa: sp. Abreviatura
de especie.
Ejemplos:
Streptecoccus spp. = todos los estreptococos que existen.
Shigella sp. = una especie no determinada del genero Shigella.
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD
1.
Lavarse las manos frecuentemente.
2.
Usar gabacha.
3.
Usar guantes de caucho cuando es necesario, en buen estado,
4.
Usar mascarilla cuando es necesario.
5.
Rotular adecuadamente todo el material y los reactivos.
6.
No comer en el rea de trabajo.
7.
No almacenar comida en el rea de trabajo.
8.
No fumar.
9.
Usar adecuadamente los desinfectantes.
10.
Usar adecuadamente para cada tipo de material los detergentes y
desinfectantes.
286

11.
Clasificar los desechos.
12.
Descontaminar el material biolgico antes de descartarlo.
13.
Esterilizar o incinerar el material contaminado.
14.
Destruir el material descartable o no reusable.
15.
No utilizar materiales inflamables cerca del mechero.
16.
Conocer el uso y manejo de los extinguidores.
17.
Neutralizar los desechos qumicos.
18.
Descontaminar el material radioactivo antes de su descarte.

EQUIPO NECESARIO:
1.
Campana bacteriolgica.
2.
Campana de flujo laminar cuando es necesario.
3.
Lmpara de pie.
4.
Mechero o incinerador.
5.
Incubadora bacteriolgica.
6.
Autoclave.
7.
Horno esterilizador
8.
Agitador de tubos.
9.
Centrfuga.
INTRODUCCIN A LA BACTERIOLOGA
Las bacterias son microorganismos formados por una sola clula muy
simple, que en condiciones ideales realiza funciones de alimentacin y reproduccin. Son uno de los grupos microbianos ms frecuentes y
abundantes en casi todos los ambientes.
La reproduccin de las bacterias ocurre por simple particin de una
clula en dos clulas hijas, y ocurre en un tiempo muy corto en comparacin
con la reproduccin de otros seres vivientes. Algunas tiene la capacidad de
producir esporas que son estructuras de resistencia. Las bacterias pueden
ser mviles o inmviles. Cuando tiene movimiento, lo hacen por medio de
flagelos o filamentos largos que agitan en forma de ltigo.

287

Para que las bacterias puedan reproducirse in vitro, es decir en las

condiciones de laboratorio, debe proporcionrseles todas las substancias nutritivas que requieren (protenas, azcares, vitaminas, etc.) Estos
nutrientes se encuentran en los medios de cultivo. El Ph es muy importante
y debe mantenerse estable y regulado segn cada medio de cultivo.
Las bacterias se clasifican en base a diversas caractersticas. Segn
sus requerimientos de oxigeno, las bacterias pueden ser:
a.
Aerobias: Crecen bien en la atmsfera que respiramos, es decir en

presencia de oxgeno, el cual requieren para su sobrevivencia.
b.
Microaeroflicas: Crecen mejor en presencia de pocas cantidades de

oxgeno. Para disminuir la concentracin de oxgeno en el
microambiente en el cual se incuban cultivos de bacterias, se
recomienda introducirlos en jarros de vidrio con una candela encendida, lo que enriquece con un 5 al 10% de anhdrido carbnico (C0 2).
c.
Anaerobias: Son incapaces de crecer en presencia de oxgeno, el cual

les es sumamente txico e impide su crecimiento.
d.
Facultativas: Son capaces de crecer en ausencia de oxigeno y tienen

la facultad de tambin crecer en aerobiosis.
Segn la temperatura ptima de crecimiento, las bacterias pueden
ser:
a.
Mesfilas: Crecen a temperaturas intermedias, semejantes a la

temperatura del cuerpo humano o a la temperatura del ambiente. En
este grupo se incluyen todas las bacterias patgenas, por esta razn la
temperatura a la cual deben mantenerse constantemente las
incubadoras bacteriolgicas es de 36 C.
b.
c.
Termfilas: Crecen a altas temperaturas (calor).

Criofilas: Crecen a bajas temperaturas (fri)
d.
Psicrotrficas: Crecen a temperaturas de refrigeracin.
a.
Segn su forma, las bacterias se clasifican en tres grupos:

Cocos: Son bacterias de forma esfrica o redondeada.
b.
Espiroquetas: Son bacterias alargadas y retorcidas en forma de resorte

o espiral.
288

c.
Bacilos: Son bacterias alargadas, de forma similar a una salchicha o

bastoncillo.
Dependiendo de su forma de agrupacin los cocos pueden clasificarse
as:
a.
Diplococos: Agrupacin de bacterias esfricas en grupos de dos, o

parejas (Ejemplos: Streptococcus pnuemoniae y Neisseria gonorrho
eae).
b.
En cadenas. Ejemplo: estreptococos (streptococcus spp)
c.
En racimos. Ejemplo estafilococos (staphylococcus spp).
Este tipo de clasificacin no se aplica a los bacilos ni a las

espiroquetas.
COMO ORGANIZAR EL REA DE TRABAJO DE BACTERIOLOGA
Para poder trabajar bacteriologa medica, se requiere del siguiente
material y equipo bsico, segn se ilustra en la figura 1.
1. Una superficie lisa del alto de un escritorio de oficina (76 a 78 cm.
de alto) material liso blanco o negro mate, lavable, tipo frmica. El lugar de
trabajo debe estar lejos de ventanas que permitan corrientes de aire,
lavatrastos o basureros. Contar con una silla cmoda, giratoria, con
respaldo, y ajustable al alto adecuado.
2. Un mechero quemador de gas propano tipo Meker, Bunsen o
Touch -0-matic. Ajustar la entrada de aire a manera de obtener una llama
azul y traslucida (no amarilla). Debe tenerse presente que solamente es
estril el aire que esta un pie (30 cm.) alrededor del mechero encendido, por
lo que, lo mas cerca se debe trabajar. Situarlo al frente ligeramente hacia la
derecha. Tambin puede usarse incinerador.
3. Una campana bacteriolgica de madera o fibra de vidrio para aislar
al rea de trabajo, la cual debe desinfectarse diariamente antes de iniciar el
trabajo. Frotarla por dentro con formol al 10 %, fenol al 1 %, o por lo menos
alcohol al 70 %. La campana no es indispensable puede trabajarse sin ella,
si se hace con cuidado, es decir sobre una superficie desinfectada y cerca
del mechero.

289

4. Un autoclave para esterilizar con calor hmedo a presin, material

y medios del cultivos, matar material contaminado y cultivos (esterilizar
previo descarte o limpieza). Puede ser pequeo, tipo olla de presin.
Calibrarlo a manera de autoclavear siempre por 15 -20 minutos a 121C y
15 libras de presin por pulgada cuadrada.
5. Un soporte de asas, que puede ser de madera forrada con frmica,
con las siguientes asas de nichrome (aleacin de niquel y cromo), segn
se ilustra.
6. Una lmpara de mesa de pie corto (tipo escritorio) o de cuello de
ganso, que la luz no de directamente a los ojos.
7. Microscopio ptico binocular de buena calidad, con condensador
de campo oscuro.
8. Lupa o de preferencia microscopio estereoscpico para observar
bien las colonias.
9. Incubadora bacteriolgica que debe mantenerse constantemente a
36 Centgrados exactos.
10. Balanza para pesar medios de cultivo.
11. Grulla elctrica de dos discos y temperatura graduable.
12. Refrigerador con congelador.
13. Frascos grandes de boca ancha de los que usan en las tiendas
para dulces, con tapadera metlica de rosca que cierre bien. Tener
suficientes veladoras de parafina.
14. Jarro Gas-Pak (BBL) o similar.
15. Agitador de tubos tipo vortex.
16. Colorantes, soluciones y medios de cultivo segn se describe en
cada capitulo.
17. Gradillas para colocar tubos con medios de cultivo o muestras.

290

MESA DE TRABAJO PABA BACTERIOLOGA

291

COLORACIN DE GRAM
Las bacterias son microorganismos incoloros, por este motivo deben
teirse para poder observar los con ayuda del microscopio. Por esta razn a
continuacin se describe la tcnica mas importante que debe usarse para
diferenciar bacterias:
a)
Preparacin de frotes:
La coloracin de Gram puede aplicarse a frotes extendidos sobre

porta objetos de vidrio (tambin llamados frotis) de todo tipo de muestras
clnicas, o a frotes de suspensiones de cultivos. Frotar la muestra
suavemente y sin revolver mucho sobre la superficie de un portaobjetos
limpio y seco Esperar que seque sobre una superficie lisa o flamear muy
levemente. Rotular adecuadamente con crayn graso por detrs de la
lmina. Una vez que el frote ya esta seco, fijar pasando levemente por la
llama del mechero dos veces, sin que se caliente excesivamente (que no
queme al ponerlo sobre la piel del dorso de la mano). Dejar que el frote se
enfre antes de colorearlo, pues si se colorea caliente precipitan los
colorantes.
b)
Tcnica de la coloracin de Gran:
1. Cubrir el frote ya fijado con cristal violeta, dejar el colorante por 1

minuto. EnjuAgar en un chorro suave de agua corriente. Escurrir muy bien.
2. Cubrir con lugol de Gram y dejar por un minuto. EnjuAgar de nuevo
suavemente con agua corriente, escurrir bien.
3. Aplicar gota a gota del decolorante alcohol-acetona por 4 a 5 segundos, hasta que ya no salga ms cristal violeta. Este paso es crucial y
debe ser muy breve en frotes delgados y ms prolongados en frotes
gruesos.
4. Cubrir el frote con safranina solo por 30 segundos. EnjuAgar suave
mente con agua, escurrir y dejar secar. El frote puede secarse dentro de la
incubadora a 36 C, o flamear muy levemente, si es urgente. Otra
alternativa es secarlos con aire obtenido de una pera de hule o un secador
para manos.
5. Examinar en el microscopio con el lente de inmersin, con aceite
especial de viscosidad adecuada.

292

c)
Resultados:
Bacterias Gram positivo: azul obscuro.
Bacterias Gram negativo: rojo.
La diferencia de coloraciones se debe al grosor de la pared celular,

que es mas delgada en las bacterias Gram negativo. Esta coloracin solo es
valida para cocos y casi todos los bacilos (excepto micobacterias), no es
valida para espiroquetas, si el frote es de material clnico, es decir de
muestras de pacientes, debe quedar rojo a simple vista despus de
colorearlo. Si hay leucocitos presentes en la muestra estos deben ser rojos
(Gram negativo) y si hay levaduras deben verse azul-morado (Gram
negativo), lo que sirve para evaluar si el frote se decoloro adecuadamente.
d)
Informe:
El reporte correcto de una bacterioscopa (observacin de bacterias)

con Gram debe contener los siguientes elementos y en este orden:
1. Identificacin del paciente (apellidos, nombres, nmero de registro
o afiliacin, servicio y fecha)
2. Titulo que indique el tipo de muestra examinada y el sitio
anatmico de donde proviene. Por ejemplo: Secrecin de ulcera en
miembro inferior derecho. Coloracin de Gram.
3. Mencionar primero las bacterias observadas. Empezar por la clase
mas frecuente en la muestra, indicar agrupacin y cantidad (muy escaso,
escaso, regular cantidad, abundante o muy abundante +, ++, +++, ++++).
Por ejemplo: cocos Gram positivo en cadenas cortas: abundantes; bacilos
Gram-negativo: regular cantidad, diplococos Gram negativo: muy escasos.
Usar siempre positivo y negativo en singular con respecto al Gram, nunca Gram-positivos, o Gram-negativos en plural.
4. Luego es muy importante para el medico saber si hay glbulos
blancos en la muestra, su clase y cantidad. Por ejemplo: Leucocitos
polimorfo-nucleares: abundantes. Este dato indica que hay verdadera
infeccin y que la muestra era purulenta. Si se observan bacterias dentro
del citoplasma de los leucocitos, mencionar intracelular en el reporte, lo
que es de especial inters clnico en los frotes, de secreciones uretrales
masculinas. La presencia de linfocitos indica la infeccin crnica o viral no
purulenta).
293

5. Indicar siempre la presencia y cantidad de levaduras o micelio de

hongos (Gram-positivo); de clulas epiteliales, de especial inters en frotis
de esputo (se miran Gram-negativo) aplanadas con citoplasma grande
transparente y ncleo pequeo redondo u ovalado). Aunque no es crucial,
indicar la presencia de fibrina, que se mira en forma de hebras Gram negativo alargadas e irregulares.
6. Cuando es necesario, con experiencia y cautela podrn incluirse al
final comentarios sobre la calidad de la muestra, indicar que la morfologa
observada es compatible con una especie de bacterias o recomendaciones
de tratamiento (con mucha prudencia).
CLASES DE ASAS MICROBIOLOGICAS Y SU USO.
ASAS PARA BACTEIORLOGA
1. Asa en argolla o anillo, no calibrada. Generalmente de
alambre de nichrome. Sirve para siembras en estras o
inoculaciones en general.
2. Asa recta o en hilo, sirve para trasladar una sola colonia a

medios de identificacin, o subcultivo.
3. Asa de platino en anillo, calibrada para tomar 0.001 ml. para

urocultivo.
ASAS PARA MICOLOGIA Y MICOBACTERIAS.
4. Asa espatulada, para manipular colonias duras y tomar

muestras.

294

Asa de alambre grueso en L, para purificar colonias de hongos

y procedimiento especiales.
5. Aguja diseccin con punta aguda, para purificar colonias

pequeas y distribuir las preparaciones de los hongos en
fresco.

295

LICDA.MARIA LOURDES FLORES
INOCULACION DE MEDIOS SLIDOS POR ESTRIAS

1.-
Con asa o hisopo estril estriar

inculo original aproximadamente 0.5 cm. En el borde de
la caja de petri.
2.-
3.-
Flamear primera vez al

terminar
el
inculo
original
Segunda estra cruzada

debe tocar ligeramente el
inculo original.
4.-
5.-
Flamear segunda vez al

terminar la segunda estra.
Tercera estra, debe tocar

ligeramente la segunda estra y
cubrir toda la superficie libre del
medio sin tocar al final el
inculo original.
EQUIPO DE LABORATORIO
296

COPROCULTIVO
PROPSITO:
Demostrar por medio de cultivo, la presencia de bacterias
enteropatgenas, es decir que infectan el intestino penetrando o no su
mocosa. Esto causa diarrea, dolor abdominal, fiebre y a veces la muerte.
Las principales especies enteropatgenas que se buscan en
coprocultivo en orden de importancia en Guatemala son:
-
Shigella flexneri
(Shigella grupo B)
Salmonella typhy
(agente de fiebre tifoidea)
Shigella sonnei
(Shigella grupo D)
Salmonella enteritidis
Shigella dysenteriae tipo 1
(Shigella A-1 o Bacilo de Shiga

causa severa disentera epidmica)
Shigella boydii
Salmonella choleraesuis
Arizona hishawii
(rara)
Edwardsiella tarda
(muy rara)
Yersinia enterocolitica
(muy rara)
(Shigella grupo C. rar en Guate.)
Las bacterias de la familia Enterobacteriaceae, normalmente habitan en

el intestino humano, por lo que se conocen comnmente como
enterobacterias. Forman aproximadamente el 1% de la microbiota normal
fecal, el resto son bacterias anaerobias. Por esta razn es muy importante
que el laboratorio este en capacidad de aislar, diferenciar, identificar
correctamente los enteropatgenos de la lista anterior.
MUESTRAS:
Para efectuar un coprocultivo pueden inocularse las siguientes
muestras:
- heces frescas
- hisopo rectal
(la mejor muestra)

(cuando no se obtienen heces)
297

- material obtenido por proctoscopia

- biopsia de mucosa intestinal
Las muestras deben tomarse antes de iniciar tratamiento con
antibiticos. Las muestras debern procesarse lo mas pronto posible, de
preferencia antes de 2-3 horas de ser emitidas; no es necesario que el
paciente este en ayunas.
Efectu el coprocultivo as:
1.- Inocular una porcin anormal de heces (con moco, sangre o pus)
o de muestra similar, directamente en una caja de MacConkey y una caja de
SS. El inculo se coloca con asa en anillo (flameada y fra) o con hisopo en
las cajas de ambos medios. Inocular 1/2 cm. en un extremo en el
MacConkey y 1 cm en el SS, El Hektoen se inocula igual que el
MacConkey.
2.- Diseminar el inculo utilizando dos asas en anillo. Flamear una de
las asas mientras 1a otra se enfra.
3.- Ya diseminadas incubar a 36C por 18 a 24 horas, con esa
temperatura controlada diariamente.
298

MARCHA BACTERIOLOGICA PARA COPROCULTIVO:

Muestras:
Heces frescas
Material de
Hisopo rectal
Sedimento de
enema salino
prostoscopa,
biopsia
intestinal
INOCULAR
Rutina
Opcional
MacConkey
Hektoen
XLD SS
Diseminar por estras, incubar a 36 C
Seleccionar colonias segn el caso, trasladar a

TSI/LIA/urea
299

COPROCULTIVO PARA COLERA

PROPOSITO:
Demostrar por medio de cultivo la presencia de Vibrio cholerae 01, la
bacteria causante del clera. Esta bacteria se adquiere por ingestin de
bebidas o alimentos contaminados. Llega al intestino delgado, donde se
hiere a la mucosa y, debido a la produccin de una potente toxina, causa
masiva de agua y electrolitos salientes. En un bajo porcentaje de los
pacientes infectados, se produce el clera gravis, la forma clnica del clera
agudo, con muy abundante diarrea acuosa (semejante a agua de arroz) y
vmitos. Esto provoca en el paciente deshidratacin severa que puede
causar la muerte, si no se instituye tratamiento de rehidratacin antibiticos.
Vibrio cholerae 01 (01 indica que pertenece al serogrupo 1 segn su
antgeno somtico), se subdivide en tres serotipos: Inaba, Ogawa, y el
serotipo Hikojima que an no se ha detectado en Latinoamrica,
Generalmente si la epidemia se inicia con el serotipo Inaba, despus de
algn tiempo se trasforma en Ogawa, debido a cambio de antgenos. Esta
clasificacin solo tiene inters epidemiolgico. Existen dos biotipos de V.
cholerae 01: eltor y clsico.
En Latinoamrica, durante la presente pandemia biotipo presente es
eltor, el cual se caracteriza por causar epidemias pocos casos graves
(aproximadamente 2 % ) y muchos casos leves o asintomticos tambin
sobrevive mas tiempo en el medio ambiente, y es mas resistente a los
agentes qumicos.
MUESTRA:
Las muestras adecuadas para efectuar el diagnostico bacteriolgico
de el clera son: heces diarreicas (principalmente con apariencia de agua
de arroz), hisopo rectal o vmitos. Deben recolectarse de preferencia
dentro de las primeras 24 horas de la enfermedad y previo a la
administracin de antibiticos. Si las muestras de heces frescas van a ser
usadas en un tiempo adecuado (antes de dos horas), deben recolectarse en
un recipiente de vidrio o plstico bien limpio, de preferencia estril y
enviarse inmediatamente al laboratorio.
En caso contrario deben inocularse dos hisopos con material fecal en
el medio de transporte Cary-Blair y se enva al laboratorio sin necesidad de
refrigeracin.
300

PROCEDIMIENTO:
Debe conocerse la edad del paciente, anotar si es nio menor de 6
meses.
Para efectuar coprocultivo deben usarse medios que sean selectivos
(contienen inhibidores, por lo que slo permiten el crecimiento de bacilos
Gram negativo) y diferenciales (contienen lactosa e indicadores de Ph que
viran cuando se produce cido, lo que hacen cambiar el color de las colonias y as las diferencia).
Algunos de estos medios contienen sales de hierro que precipitan en
forma de sulfuro ferroso de color negro intenso si las bacterias producen
cido sulfhdrico. El coprocultivo debe efectuarse en dos medios selectivos/diferenciales/diferentes, de preferencia uno ms inhibidor que otros. Se
recomienda usar rutinariamente Agar MacConkey y Agar XLD o Agar SS
Salmonella shigella).
En caso de heces con moco y sangre (disentera) debe incluirse
adicionalmente el medio de Hektoen lo mismo que para material obtenido
por biopsia intestinal y proctoscopia.
El color original y los virajes producidos por el crecimiento bacteriano,
en estos tres medios que contienen el azcar lactosa (como agentediferencial) es el siguiente:
301

MARCHA BACTERIOLOGICA ACORTADA PARA

AISLAMIENTO DE VIDRIO CHOLERAE 01
Muestra:
Heces lquidas
Hisopo rectal
Vmito
1.- Inocular con hisopo estril bien cargado un tubo

con APA. Descartar el hisopo y agitar.
2.- Incubar 5-6 horas a 36 C.
Vidrio cholerae
en la superficie
del APA
3.-
Tomar
4.-
Sembrar
TCBS y
Agar
sangre de
carnero
(ASC).
Incubar
18-24
horas a
36 C.
inculo de la superficie
superficie del APA.
APA
No agitar
5.-
302

6.-Interpretar simultneamente
ASC
Colonias:
hemolticas
-Amarillas
Hacer
TCBS
Gram:
-Grandes
negativo,
Colonias:
-Grandes
-No
frote
Bacilos Gram-
-Planas
algunos
curvos aglutinar,
informe.
INFORME:
si positivo dar
Sembrar
antibioGrama
STAT: Vidrio cholerae 01.
NOTA: El diagnstico definitivo en 24 horas
En el caso de clera el reporte debe ser inmediato, ya que en los casos

graves la vida del paciente puede depender de este resultado. Por este
motivo se justifica plenamente usar una tcnica simplificada y evitar pruebas
innecesarias, para ahorrar tiempo. Nunca debe esperarse el resultado del
antibioGrama para hacer el reporte de un cultivo positivo. Se recomienda
informar as, lo ms pronto posible, y al lugar ms indicado:
1.
Imediatamente despus de una prueba de aglutinacin franca a partir

del Agar sangre de carnero:
Se aisl Vibrio cholerae 01.
2.
Despus de aglutinacin positiva con antisuero polivalente antiV.cholerae 01 y luego aglutinacin positiva con antisuero de serotipo
Ogawa o Inaba:
Se aisl Vibrio cholerae 01, serotipo Inaba (u Ogawa).
3.
Despus de interpretar la prueba de susceptibilidad,

posteriormente a haber enviado un reporte preliminar:
pero
Se aislo Vibrio cholerae 01, serotipo Ogawa (o Inaba), biotipo eltor.

303

Susceptible a: ...; Resistente a: ....

FRMULAS:
1.
AGUA PEPTONADA ALCALINA (APA):

Peptona .........................10 Gramos
Cloruro de sodio .............10 Gramos
Agua destilada ................1,000 ml.
Ajustar Ph final a 9.0-9.2 con hidrxido de sodio 1n.
Distribuir 5 ml en tubos 13x100 o de mayor volumen con tapn de

rosca. Autoclavear 15 minutos a 121C (15 libras de presin por pulgada
cuadrada).
2.
MEDIO DE TRANSPORTE CARY-BLAIR:

Tioglicolato de sodio ...................1.5 Gramos
Fosfato dibsico de sodio .. .........1.1 Gramos
(Na2HPO4)
Cloruro de sodio...............5.0 Gramos

Agar .............................................5.0 Gramos
Agua destilada ............ 991.0 ml.
Disolver los ingrediente en el agua por calentamiento, y con agitacin
constante. Enfriar a 50 grados centgrados, y adicionar 9 ml de cloruro de
calcio al 1%, recientemente preparado (0.1 Gramos de cloruro de calcio +
10 ml de agua), Ajustar Ph a 8.4 con hidrxido de sodio 1N, y distribuir 6 ml
en tubos de 13x100 con tapn de rosca, a manera de dejar un pequeo
espacio de aire entre el tapn y el medio. Autoclavear a 100 grados
centgrados en Bao de Mara hirviendo por 15 minutos. Enroscar bien el
tapn y almacenar en refrigeracin y oscuridad.
COPROCULTIVO PARA Campylobacter jejuni
PROPOSITO:
Demostrar por medio de cultivo, la presencia de Campylobacter
jejuni. A partir de 1,997 se considera a esta bacteria como un importante
agente causal de diarrea humana. C. jejuni es mas frecuente que Shigella y
Salmonella en coprocultivos. Estudios efectuados por el autor en
Guatemala, revelan que en heces de nios menores de cinco aos de edad
con diarrea, esta bacteria, se asla aproximadamente en el 10 por ciento.
Estos resultados son comparables con otros estudios similares en
304

Latinoamrica; la frecuencia mundial de aislamiento a partir de coprocultivos

vara del 4 al 30 por ciento. Sin embargo, debido a que su aislamiento
requiere de un medio de cultivo y condiciones de incubacin especiales, su
bsqueda no se efecta rutinariamente, lo cual debera hacerse debido a su
importancia epidemiolgica.
Campylobacter jejuni es un bacilo Gram-negativo, curvo, en espiral o
en forma de S. Presenta dos flagelos, uno en cada extremo de la clula lo
que 1e proporciona un movimiento rpido y helicoidal, que lanza a la
bacteria a manera de dardo. Es una bacteria estrictamente microaeroflica
oxidasa negativo, que no fermenta ni oxida los carbohidratos. Crece a 36 C
pero se utiliza su capacidad diferencial (termfila) de crecer mejor a 42
grados centgrados, para su capacidad diferencial, para su aislamientito.
La infeccin intestinal por este bacilo causa diarrea con dolor
abdominal, fiebre y ocasionalmente vmitos. Puede haber sangre
microscpica en las heces, especialmente en las muestras peditricas. La
infeccin se adquiere por va oral, al consumir agua o alimentos
contaminados especialmente carne mal cocinada y leche no pasteurizada.
La infeccin puede adquirirse de otro ser humano, o ser una zoonosis, pues
tambin puede adquirirse de los animales. C. jejuni es muy frecuente en
animales domsticos y mascotas. Especialmente coloniza pollos y otras
aves; causa enteritis en ganado bovino, y aborto en ovejas. En el humano,
adems de enteritis, ocasionalmente causa septicemia, artritis, sptica,
meningitis y otras infecciones.
El
diagnostico
de
Campylobacteriosis
puede
efectuarse
presuntamente por la observacin directa de bacterias con movimiento de
dardo en las heces con campo oscuro o contraste de fases. Un frote
coloreado con Gram, muestra abundantes bacilos Gram-negativo curvos. El
diagnostico definitivo se establece por medio del aislamiento e identificacin
de C. jejuni.
MUESTRA:
En vista que para el aislamiento de C. jejuni se deben aplicar procedimiento especializados, las muestras deben ser heces frescas, que
deben procesarse antes de dos horas de haber sido emitidas. Las heces no
deben estar contaminadas con orina. Tambin puede utilizarse hisopo
rectal, si la inoculacin se efecta inmediatamente.
305

CONDICIONES NECESARIAS:
El procedimiento para el aislamiento eficaz de esta bacteria, debe
incluir los siguientes aspectos:
1.
Un Agar sangre de carnero selectivo, recientemente preparado. Se

recomienda el Agar Skirrow modificado que contiene como
inhibidores: vancomicina (10 mg/lt), polimixina-B (2,500 UI/lt) y
trimetropin (5 mg/lt). Idealmente debe prepararse con la siguiente
base Blood Agar Base No. 2 (Oxoid), adicionada de 10% de sangre
de carnero desfibrinada/estril. La sangre de carnero remueve
formas txicas de oxgeno en el medio de cultivo. La mezcla de
antibiticos que hacen al medio selectivo para C. jejuni puede
obtenerse comercialmente.
2.
Incubacin en microaerofilia estricta. Idealmente: 5% de oxgeno 10%

de anhidrido carbnico y 85% de nitrgeno, La forma mas fcil y
efectiva de lograr esta atmsfera, es usar el jarro GasPak (BBL), sin
cataltico ni indicador. La incubacin en jarro con candela no es
adecuada, pues proporciona una atmsfera con demasiado oxgeno
(12-17%) para permitir el crecimiento de C. jejuni.
3.
Incubar a 42C por 48 horas. Inhibe la microbiota intestinal, y permite

el crecimiento termfilo de Campylobacter jejuni, C. coli y C. laridis.
PROCEDIMIENTO:
1.
Analizar microscpicamente la muestra fecal, para buscar la presencia de leucocitos polimorfonucleares. Si no los hay, no vale la
pena efectuar el cultivo para C. jejuni, pues las posibilidades de
aislarlo son muy bajas.
2.
Analizar microscpicamente la muestra fecal, y tomar con asa o

hisopo estril, las porciones con moco, sangre o pus. Inocular por
estras dos cajas de Agar Skirrow, y una de Agar chocolate.
3.
Inmediatamente colocar las tres cajas en atmsfera microaeroflica,

por medio del jarro Gas-Pak sin cataltico ni indicador, con sobre
generador de anaerobiosis (BBL). Es necesario quitar la canastilla
con paladio iridiado (cataltico) del jarro.
4.
Incubar 42 grados centgrados exactos, por no menos de 48 horas.
306

INTERPRETACION DE RESULTADOS:
1.
Retirar ate la incubadora y del jarro Gas-pak. Con microscopio
estereoscpico, o al menos con lupa, examinar detenidamente las
colonias aisladas. Buscar colonias con la siguiente morfologa tpica:
hmedas y ligeramente mucosas, muy aplanadas, blanco grisceas o
incoloras, no hemolticas, rodeadas de un velo de crecimiento que
se esparce sobre el Agar circundante a la colonia bordes irregulares
y poco perceptibles menos frecuente las colonias con ms secas,
convexas y amarillentas; con incubacin prolongada se transforman
en rugosas. Si no se encuentran colonias tpicas, incubar por otras 24
a 48 horas antes de descartar el cultivo como negativo.
2.
De una colonia aislada con morfologa tpica, hacer inmediata y

cuidadosamente un frote (de preferencia del velo circundante) En
una pequea gota de agua. Colorear con Gram (dejar la safranina
por 3 minutos, pues la bacteria se tie plidamente), o con fuchsina
bsica al 1% en 10 a 20 segundos, despus de fijar al calor.
3.
Si el frote presenta bacilos Gram-negativo curvos, algunos en forma

de gaviota, en forma de S o en espiral (ondulante), presuntamente
se ha aislado Campylobacter jejuni. Reportar este hallazgo de
inmediato. En los cultivos expuestos al aire predominan las formas
cocoides.
INFORME:
Al efectuar las pruebas confirmatorias, reportar:
Se aisl Campylobacter jejuni, se recomienda considerar el
tratamiento con eritromicina.
UROCULTIVO
PROPSITO:
El cultivo de orina que ha sido colectada adecuadamente o urocultivo
se efecta para demostrar la presencia de un nmero significativo de bacterias. En condiciones normales, la orina dentro del cuerpo es estril, pero
siempre se contamina con bacterias al obtener la muestra. Por esta razn,
el criterio para interpretar el crecimiento es cuantitativo. De acuerdo con el
llamado criterio de Kass, un nmero de bacterias mayor o igual a 100,000
UFC/ml (unidades formadoras de colonia por milmetro de orina) se
considera infeccin urinaria verdadera, es decir es un recuento significativo.
307

A diferencia de otros cultivos bacteriolgicos, las bacterias que

causan la infeccin urinaria, se limitan a uno pocos microorganismos de
crecimiento rpido. Las principales bacterias que infectan el sistema urinario
son las enterobacterias (bacilos Gram negativo), Escherichia coli es sin
duda la bacteria que con ms frecuencia se asla de urocultivos positivos,
luego:
- Klebsiella spp.
- Enterobacter spp
- Proteus spp
- Pseudomonas aeruginosa (no es enterobacteria)
De menor importancia son los cocos Gram-positivo;
- Enterococcus spp.
- Staphylococcus aureus
- Streptococcus pyogenes y Streptococcus sp. (raros).
- Staphylococcus epidermidis (puede ser contaminacin.)
- Staphylococcus saprophyticus (puede ser contaminacin).
TOMA DE LA MUESTRA:
Si en algn examen bacteriolgico la toma de la muestra es crucial,
para obtener un resultado de cultivo con correlacin clnica, es en el
urocultivo. El meato urinario, o sea el agujero de salida de la uretra (tubo
que desagua la vejiga), esta siempre colonizado por bacterias saprofitas,
tanto en el hombre como en la mujer. Por esta razn los genitales deben
desinfectarse antes de tomar la muestra, segn se explica a continuacin.
Tomar la muestra de orina para urocultivo despus de dos horas sin que el
paciente haya orinado. Si la muestra se toma antes, la orina no ha pasado
suficiente tiempo en la vejiga, para alcanzar cantidades significativas.
308

TOMA DE UROCULTIVO EN EL HOMBRE:

1.
Desinfectar bien la punta del pene del paciente con una gasa estril
empapada en jabn antisptico no irritante. Remover el jabn con
otra gasa estril, empapada en agua estril.
2.
Pedir al paciente que orine directamente en la taza del sanitario.
3.
Despus de transcurridos unos 3 o 5 segundos, destapar

rpidamente pero con cuidado un frasco estril de boca ancha y
tomar al VUELO una muestra de orina de la parte central de la
miccin. Se deja correr la primera porcin de orina para que remueva
las bacterias de la parte anterior del meato urinario, que contaminara
el urocultivo. Tapar rpidamente el frasco.
MARCHA BACTERIOLOGICA PARA UROCULTIVO
Muestra de orina colectada

al vuelo
1. Agitar
2. Tomar 0.001 ml con
asa calibrada
de
platino
verticalmente y justamente por debajo

de la superficie.
INOCULAR DE RUTINA
309
BIPLACA

1. Medios: Agar sangre

de carnero (ASC)
2. MacConkey
3.- En ambos medios, primero

una estra longitudinal con asa
de platino calibrada (0.001)
4.- Con asa corriente flameada y

fra, estriar perpendicularmente toda la caja.
Idealmente, incubar el Agar sangre

en jarro con candela a 36C.
4.
Incubar aerbicamente a 36C
Si no es posible el urocultivo antes de una, hora de obtenida la

muestra, refrigerarla (no congelar). La muestra conservada en refrigeracin se mantiene en buenas condiciones para ser inoculada, por
un mximo de 48 horas.
TOMA DE UROCULTIVO EN LA MUJER:

En el caso de la mujer, debe observarse especial cuidado en la toma
de la muestra, ya que sus genitales no estn expuestos y estn
abundantemente colonizados por bacterias. Proceder as:
1.
Solicitar la paciente que se coloque sobre la taza del inodoro con

las piernas abiertas. Con los dedos ndices y medio de la mano
izquierda debe separarse los labios genitales mayores.
2.
Con una gasa empapada en jabn antisptico no irritante limpiar bien

toda el rea y luego remover el jabn con otra gasa empapada en
agua estril.
3.
Obtener la muestra de orina al vuelo dejando al igual que en el caso

del hombre, que corra el chorro de orina unos segundos y luego
tomar de la porcin central de la miccin. Tapar rpidamente.
4.
Sembrar antes de una hora o refrigerar la muestra.
TOMA DE UROCULTIVO EN NIOS PEQUEOS:

Con los nios que an no saben hablar para comprender
instrucciones y orinar a voluntad, debe proceder as:
310

1.
En los nios varones desinfectar bien, con jabn antisptico no

irritante, todo el pene y el rea genital. En las nias desinfectar bien
los labios mayores y el rea genital que los rodea: Quitar bien el
jabn con gasa y agua estril, luego secar finalmente con una gasa
estril seca.
2.
Pegar una bolsita de plstico estril y descartable, especial para

tomar urocultivos infantiles. En los nios tener la precaucin de
introducir todo el pene en el orificio del llenado y en las nias que el
agujero de la bolsita quede pegado al centro por donde saldr la
orina. Colocar los paales en su lugar y fijar la bolsita en su lugar con
tiras de masking-tape.
3.
Generalmente se le pide a ala madre o a quien lleve al nio al

laboratorio, que espere hasta que orine. Algunos procedimientos que
aceleran la miccin son: dar bebidas (agua, leche, etc.), aplicar
presin en la vejiga. Tambin se puede estimular al nio segn el
reflejo de castaeda: cargar el nio boca abajo con la mano derecha
y con el ngulo que forma el dedo pulgar doblando de la mano
izquierda hacer presin en forma de rayas en la parte baja de la
espalda del nio
PUNCIN SUPR-PBICA (PSP):

PROCEDIMIENTO:
1.
Ya que la muestra ha sido colectada siguiendo las instrucciones

anteriores, estrictamente, sembrar la orina en dos medios de cultivos
segn la tcnica del asa calibrada usada en la clnica Mayo
(Rochester, Minnesota, EUA). Los dos medios de cultivo a utilizar
son:
-
2.
Agar sangre de carnero al 5% crecen la mayora de bacterias.

MacConkey. Crecen solo bacilos Gram negativo aerobios (entero
bacterias pues es selectivo y diferencial.
Alternativamente usar solamente el medio CLED si el microbilogo a
cargo conoce su interpretacin, la cual puede ser confusa por lo que
no se recomienda.
Para sembrar, usar una sas calibrada de platino (95% platino, 5%
sodio) que tome 0.001 ml. Agitar el frasco de orina (de preferencia
con agitador vortex, abrir delante del mechero y flamear la boca del
311

mismo. Introducir verticalmente el asa flameada y fra, en la orina,

justamente por debajo de la superficie.
3.
Inocular primero el Agar sangre deslizando el asa una sola vez a lo

largo de la caja y pasando por el centro. Flamear e inocular en igual
forma el MacConkey. Alternativamente, sembrar una biplaca de Agar
sangre de carnero y MacConkey, con 0.001 ml en cada mitad. Esto
permita el ahorro de cajas de petri.
4.
Inmediatamente estriar con asa corriente en anillo el inoculo de orina,

por ambas cajas, haciendo estras tupidas y perpendiculares a la
estra dejada por el asa calibrada.
5.
Con el objeto de ahorrar cajas de Petri, alternativamente puede

usarse una caja dividida por la mitad o biplaca, con Agar sangre de
carnero en un lado y MacConkey en el otro; estriar de la misma
manera.
6.
Idealmente, incubar el Agar sangre a 35C en jarro de boca ancha

con un trozo de papel absorbente hmedo y una veladora o candela
encendida cerrar bien.
7.
Incubar el MacConkey sin jarro en la incubadora a 36 C.
CULTIVO DE GARGANTA
PROPSITO:
El cultivo de garganta, se efecta para demostrar la presencia de
Streptococcus pyogenes (Streptococcus que pertenece al grupo A de
Lancefiel y es betahemoltico). No debe llamarse orocultivo, pues este
termino significa literalmente cultivo de boca. Algunas bacterias mucho
menos importantes en infecciones de la faringe, son:
- Streptococcus pneumoniae
- Haemophylus influenzae
- Klebsiella pnuemoniae
- Otras enterobacterias
- Pseudomonas aeruginosa
312

Estos microorganismos solo deben reportarse si predominan sobre la

microbiota normal de la garganta, que es abundante y muy variada.
Streptococcus agalactiae del grupo B y los estreptococos de los grupos C, F y G de Lancefield tambin son beta hemolticos (generalmente
presenta poca hemolsis beta). Pueden ser agentes etiolgicos de faringitis
por lo que debe identificarse adecuadamente.
Los sntomas mas frecuentemente asociados a infecciones de la
faringe por Streptococcus pyogenes son: dolor de garganta, ganglios linfticos del cuello agrandados, dolor de cabeza, nausea, vmitos y dolor abdominal. La infeccin de la faringe causada por virus provoca, secrecin nasal
y nariz tapada. Sin embargo, con mucha frecuencia no es posible establecer
diagnstico slo en base a observaciones clnicas.
MUESTRA:
No es necesario que el paciente est en ayunas; sin embargo,
conviene dejar pasar 1 a 2 horas para que se vuelva a formar la secrecin
que fue aglutinada. Debe tomarse siempre antes de iniciar el tratamiento
con antibiticos. El cultivo de garganta debe tomarse con sumo cuidado. Es
indispensable examinar bien las lesiones en la garganta del paciente en el
laboratorio para tomar la nuestra del lugar preciso. Siga al pie de la letra las
siguientes instrucciones:
1.
Colocar a paciente sentado y pedirle que trague saliva fuertemente

dos veces.
2.
Pedir al paciente, viendo hacia arriba que abra la boca, saque la

lengua y diga aahh.
3.
Con un baja lenguas, presionar fuertemente la lengua hacia abajo y

simultneamente iluminar bien el fondo de la garganta (detrs de la
vula o campanilla), con una lmpara porttil de bateras o flash
light.
4.
Localizar en el fondo de la garganta y en las amgdalas (que se

encuentran a los lados) las siguientes lesiones:
- Inflamacin (enrojecimiento)
- Pus (secrecin blanquecina o amarillenta)
- lceras blanquecinas.
313

5.
Con un hisopo estril frotar firmemente las lesiones con sumo cuidado
de no tocar la lengua, la campanilla, la pared interna de los carrillos
(cachetes) o los labios, al retirar el hisopo.
PROCEDIMIENTO:
1.
Inocular inmediatamente una caja (o placa) de Agar sangre de carnero al 5% hacer dos cortadas en el Agar durante la siembra, las dos
cortadas deben ser aproximadamente de 1 cm. de largo y el asa
debe llegar al fondo de la caja.
2.
Con objeto de obtener cultivos evidentes de Streptococcus

pyogenes, sin necesidad de hacer subcultivos, proceder as: Con
pinza flameada y fra, colocar discos de sensibilidad.
3.
Introducir la caja en un frasco de vidrio de boca ancha, poner en el

fondo una toalla de papel hmeda, colocar la caja con el medio arriba
y luego introducir sobre una tapa de caja de Petri una veladora o
candela corta encendida.
4.
Incubar por 18 a 24 horas a 36C. Es indispensable el uso de jarro

con candela y humedad, para obtener reacciones hemolticas
correctas. Si no se usa, la recuperacin de Streptococcus pyogenes
ser mucho menor.
El propsito de usar sangre de carnero en el medio, es aumentar la

beta hemlisis caracterstica e inhibir a Haemophylus haemolyticus que
puede confundirse con Streptococcus pyogenes. Con sangre de carnero se
obtiene una excelente diferenciacin entre alfa y beta hemlisis, entre otras
ventajas.
Evitar el uso de sangre humana vencida de banco de sangre en
todos los cultivos bacteriolgicos ya que puede ser inhibidora al crecimiento
bacteriano por contener anticoagulantes, anticuerpos o antibiticos, adems
del peligro potencial de la transmisin del virus del SIDA, hepatitis B, etc.
No hacer frotes Gram directos de faringe, pues su interpretacin es
muy difcil debido a lo abudante de la microbiota y no tiene significado
clnico.
INTERPRETACIN:
Para interpretar correctamente los crecimientos de cultivos de
exudados farngeos memorizar esta tabla
314

MARCHA BACTERIOLOGICA PARA CULTIVO

DE GARGANTA/EXUDADO FARINGEO
1.- Muestra: Tomar un hisopo

farngeo con buena luz y
baja lenguas.
2.
3.
4.
Inocular una caja de Agar sangre de carnero por estras, con dos cortadas
de 1cm. sin flamear entre cada estra.
Colocar sobre la primera estra, un disco de bacitracina de 0.04 unidades y
un disco de 30 mcg de neomicina. Separados 8-10 mm entre s.
Incubar en jarro con candela y humedad a 36C.
22
5.
Despus de 18-24 horas de incubacin, interpretar con buena luz. Buscar e

identificar colonias beta hemolticas.
315

HEMOCULTIVO / MIELOCULTIVO
PROPSITO:
El mielocultivo o cultivo de sangre, sirve para detectar las bacterias
que se estn produciendo en la sangre, lo que provoca septicemia. El
mielocultivo es el cultivo de mdula sea y sirve para detectar bacterias en
esta muestra, especialmente Salmonella typi. La septicemia es una de las
enfermedades infecciosas ms graves, por esta razn la deteccin efectiva
y rpida de la bacteria causante, constituye una de las funciones ms
importantes del diagnstico bacteriolgico. La deteccin de bacterias en
sangre o mdula sea tiene importancia diagnstica y pronostica. En el
caso de fiebre tifoidea, causada por S. typhy, su hallazgo en la sangre o
ms efectivamente en mdula sea, constituye el diagnstico de esta severa infeccin, y permite instituir tratamiento con el delicado antibitico de
eleccin (cloranfenicol).
En condiciones normales no se detectan bacterias en la sangre. Las
bacterias penetran hacia el torrente circulatorio desde sitios extravasculares,
por los vasos linfticos. Cuando las bacterias se multiplican una velocidad
que excede la capacidad del sistema retculo-endotenial para removerlas
de la sangre, ocurre la septicemia. Se diferencia de la bacteriemia, que es la
presencia transitoria de bacterias en el torrente circulatorio, la cual ocurre
cotidianamente durante dental, contacto sexual, etc. Actualmente existe la
tendencia por usar estos dos trminos (septicemia y bacteriemia)
indistintamente.
Usualmente causa septicemia una sola especia bacteriana. Sin
embargo la septicemia polimicrobiana se presenta con una frecuencia no
despreciable.
MUESTRA:
Los sntomas del paciente que indica la necesidad de obtener un
hemocultivo son: aumento sbito del pulso y la temperatura, cambios sensoriales, calofros, postracin y presin baja. La recuperacin de las bacterias
de la sangre depende de estos factores:
1.
La cantidad de sangre que se cultiva, En nios debe ser al menos 2.5

ml, y en adultos usualmente 5 ml, aunque sera preferible cultivar 10
ml.
316

2.
La relacin entre sangre y caldo de cultivo es decir sangre al 10 por

ciento en caldo, con el objeto de evitar la coagulacin de la sangre.
3.
La presencia de inhibidores bacterianos en el suero, tales como

anticuerpos, complemento o antibiticos.
4.
Los mtodos de cultivo en el laboratorio de microbiologa.
5.
Las caractersticas de la bacteria de ser fastidiosa, es decir que

requiere un medio de cultivo enriquecido y complejo.
El hemocultivo siempre antes de iniciar el tratamiento con antibiticos.

No es crucial obtener muestra de sangre cuando sube la temperatura del
paciente; si es posible, deber tomarse antes del alza de temperatura o
inmediatamente despus del calofro. En algunos casos se justifica obtener
varias muestras del paciente, en tiempo y de sitios diferentes, es decir
seriados. Los hemocultivos sereados, obtenidos antes de la
antibioticoterapia, son especiales tiles en el caso de sepsis aguda,
meningitis, osteomielitis, neumona bacteriana,. Pielonefritis y endocarditis.
Debido a que la piel humana est constantemente cubierta de
abundante bacteria (microbiota), es muy importante tomar la muestra con
precauciones especiales. Para obtener la muestra no es necesario utilizar
campo estril pero si observar todas las indicaciones necesarias para la
toma asptica de la muestra. Al obtener la sangre para hemocultivo, deben
seguirse cuidadosamente las siguientes instrucciones:
1.
Destapar el frasco con caldo de hemocultivo, para descubrir el tapn

de hule perforable. Dejar la tapadera a un lado, y con algodn
empapado en solucin de yodo al 3 % en alcohol (tintura), limpiar
bien el tapn perforable. Dejar secar mientras se atiende al paciente.
2.
Colocar la ligadura en el brazo del paciente, luego palpar la vena y

localizar por precisin el sitio donde se a puncionar.
3.
Es una buena prctica lavar con agua y jabn el brazo del paciente
antes de aplicar desinfectantes. Limpiar el sitio exacto con un algodn empapado en tintura de yodo al 3 por ciento. Dejar secar y
luego limpiar el sitio de puncin con un algodn empapado de alcohol
con movimientos circulares en forma de espiral que inicia en el sitio
de puncin. Despus de esta preparacin no se debe volver a tocar
la vena.
317

4.
Con aguja y jeringa estriles, puncionar la vena y obtener

aspticamente 5 ml o ms de sangre.
5.
Agitar suavemente las botellas ya inoculadas, e incubar a 36C.
6.
Las muestras de mdula sea para efectuar el mielocultivo siempre

deben ser obtenidas por el mdico, quien puncionar el esternn o la
cresta.
PROCEDIMIENTO:
1.
2.
Incubar los hemocultivos y mielocultivos a 36 C por siete das,

excepto en casos especiales en los cuales debe prolongarse la
incubacin por ejemplo para el aislamiento de Brucella spp.
Con mucho cuidado para que el caldo no se agite, examinar
diariamente los frascos contra la luz, para buscar alguno de los
siguientes signos visibles que indican crecimiento bacteriano, los
cuales orientan hacia el tipo de bacteria que esta creciendo.
Algunas bacterias frecuentes en hemocultivos positivos, son las

siguientes:
- Salmonella typhy
- Escherichia coli
- Streptococcus Pneumoniae
- Streptococcus pyogenes
- Pseudomonas aeruginosa
- Haemophylus influenzae
Algunas bacterias que frecuentemente crecen en hemocultivos, como
contaminantes provenientes de la microbiota de la piel, son los siguientes
bacilos Gram-positivo:
- Bacillus sp. (esporulado)
- Corynebacterium sp. (no esporulado, difteroide)
318

ETIOLOGA Y SINTOMATOLOGA DE SEPTICEMIA

SECRECIONES DIVERSAS
PROPSITO:
Detectar por medio de frote Gram y cultivo aerobio, la presencia de
bacterias que causan infecciones con presencia de pus en la piel, ojos,
odos, tegido subcutaneo, heridas y otros sitios anatmicos diversos. A las
bacterias que provocan la formacin de pus se les llama pigenas. En este
tipo de infecciones, son de especial inters los llamados cocos pigenos
Gram-positivo, que son los siguientes:
- Streptococcus puogenes
- Streptococcus pneumoniae
Menos frecuentemente pueden aislarse de este tipo de lesiones,
otras bacterias tales como:
- Pseudomonas aeruginosa (de importancia en quemaduras infectadas)
- Escherichia coli
- Haemophilus influenzae
- Neisseria gonorrhoeae
- Salmonella typhy (raro)
- Mycobacterium tuberculosis (raro)
MUESTRA:
La muestra deber obtenerse segn el sitio anatmico, siempre con
material estril y antes de tratamiento con antibiticos. En la mayora de los
casos puede usarse hisopo estril (envuelto en papel individual, no dentro
de frasco). Cuando la cantidad de pus es muy escasa, tomar la muestra con
el extremo puntiagudo y delgado de un aplicador de madera esteril que ha
sido quebrado por los extremos. Tambin puede usarse la punta de una asa
espatulada flameada y fra, bistur pequeo (nmero 15), o una lanceta
estril.
Debe considerarse como regla general indispensable, hacer siempre
un frote para Gram, sobre un porta-objetos limpio. Es de vital importancia
observar las bacterias en el frote, especialmente cuando deben
319

interpretarse cultivos con alguna microbiota normal adems de algn

patogeno.
1.
PIEL:
Si no hay apertura por donde salga el pus, escoger una lesin intacta
y madura, de preferencia con punta blanquesina. Limpiar el rea de donde
se tomar la muestra para frote Gram y cultivo, con algodn empapado en
alcohol y exprimido. Limpiar bien pero con cuidado de no sacar el pus, luego
con lanceta estril o bistur pequeo, puncionar a manera de evitar que
salga sangre. Si es necesario (usar guantes de hule estriles) presionar a
los lados de la lesin, hacia el centro, para exprimir el pus hacia afuera.
Tomar una pequea gota de pus con el asa espatulada estril, punta de
aplicador de madera estril (quebrado) o hisopo estril, e inocular siempre
los siguientes medios de cultivo, en este orden:
Primero:
Agar sangre de carnero al 5 %
Segundo:
Agar chocolate
Tercero:
Agar Manitol-sal (en caja de petri)
Cuarto:
Agar MacConkey
Luego hacer un frote Gram delgado, sin frotar mucho sobre el portaobjetos. Los medios de cultivo deben inocularse con una asada de pus, en
un extremo de la caja. El objeto de hacerlo en el orden indicado, es evi tar el
acarreo de inhibidores del MacConkey y manitol-sal, hacia el Agar sangre
de carnero y el Agar chocolate, que no son inhibidores.
ETIOLOGA Y SINTOMATOLOGA DE HERIDAS INFECTADAS
OJOS:
Tomar la muestra con el hisopo estril, as: bajar el prparo interior,
haciendo presin hacia abajo, a manera de exponer la conjuntiva enrojecida
y purulenta (usar guantes de hule estriles) Frotar la conjuntiva al mismo
tiempo que se rota el hisopo hacia fuera, con mucho cuidado de no raspar
el globo del ojo. Inocular Agar sangrede carnero, Agar chocolate, Agar
manitol-sal, y Agar MacConkey, en ese orden. Descartar el hisopo estril,
tomar mas muestra. Hacer un frote pequeo sobre un porta objeto limpio,
con uidado de no frotar escesivamente.
320

ETIOLOGA Y SINTOMATOLOGA DE HERIDAS INFECTADAS

OJOS:
Tomar la muestra con el hisopo estril, as: bajar el prparo interior,
haciendo presin hacia abajo, a manera de exponer la conjuntiva enrojecida
y purulenta (usar guantes de hule estriles) Frotar la conjuntiva al mismo
tiempo que se rota el hisopo hacia fuera, con mucho cuidado de no raspar
el globo del ojo. Inocular Agar sangrede carnero, Agar chocolate, Agar
manitol-sal, y Agar MacConkey, en ese orden. Descartar el hisopo estril,
tomar mas muestra. Hacer un frote pequeo sobre un porta objeto limpio,
con uidado de no frotar escesivamente.
En los casos de otitis media, generalmente no es necesario que el

mdico otorrinolaringlogo puncione el timpano (timpanocentesis). Este
procedimiento jams debe practicarse por el personal del laboratorio.
Proceder as: con hisipo empapado en alcohol, y luego exprimiendolo con
papel absorvente, limpiar bien el odo externo. Introducir en el canal auditivo
otro hisopo estril, despacio y sin tocar el pabelln, de la oreja, con cuidado
de no llegar al timpano. No debe hacer sangradi. Con el hisopo empapado
de pus, inocular los siguientes medios: Agar sangre de carnero, Agar
chocolate, Agar manitol-aal y Agar MacConkey, en ese orden con un
segundo hisopo estril, tomar ms muestra y sin frotar mucho hacer un
pequeo frote sobre porta-objetos limpio.
MISCELNEOS:
Antes de obtener la muestra, debe ponerse especial cuidado en
desinfectar bien las reas que se espera esten coloniadas por abundante
microbiota. El objeto de esta operacin, es evitar contaminaciones
innecesrias que dificultan la interpretacin del frote Gram y el cultivo.
El material para tomar las muestras debe ser estril. La toma de
muestra debe ser agresiva
pero cuidadosa, un hisopo frotado
descuidadamente sobre una lesin seca y no de un sitio representativo, es
completamente iltil. El sangrado debe evitarse en la medida de lo posible.
Para la toma de muestras difciles o invesivas, que representen peligro para
el paciente, debe solicitarse la intervencin microbilogo o del mdico.
Los lquidos acuosos y de volumen grande, deben centrifugarse y
luego hacer Gram y cultivo del sedimento. Inocular el medio de ThayerMartin si se sospecha la presencia de Neisseria gonorroeae, el medio de
321

Lowenstein-Jensen si se sispecha la presencia de Mycobanterium

tuberculosis.
INTERPRETACIN DE RESULTADOS E INFORME:
Es importante observar el frote lo ms pronto posible, ya que en base
a este resultado se puede iniciar tratamiento preliminar. Observar los frotes
Gram con aceite y el lente objetivo de inmersin. Es de gran importancia
observar cual es la bacteria que predomina en el frote. Informar la cantidad
de bacterias observadas, la cantidad de leucocitos u de que tipo son. En el
frote, los leucocitos deben observarse Gram-negativo (rojos), si aparecen
Gram-positovo (morados), falta de coloracin y debe oplicarse mas alcoholacetona.
Examinar los cultivos despus de 18 a 24 horas de incubacin, con
microscopio esereoscpico o lupa y buena luz. En el Agar sangre buscar
colonias pequeas beta hemolticas, si ha luz, identificar un subcultivo en
Agar sangre de carnero con discos de bacitracina y trimetoprin
sulfametoxazol prueba de CAMP. Si hay colonias planas alfa hemolticas
(hemlisis verdoda), identificar un sub-cultivo en Agar sangre de carnero
con disco de optoquina para Streptococcus pneumoniae.
De diversa secreciones, puede aislarse Enterococcus spp alfa
hemolticos o no hemolticos, que pertenecen al grupo D de Lancefiel. Son
llamados enterococos, por su pobable origen fecal, y los ms importantes
son: E, faecalis, E. faecium, E. durans y E. avium. Sub-cultivar a a Agar
bilis-esculina, un color negro a la 24 horas de incubacin a 36C indica
hidrlisis de la esculina positiva. Debe tomarse en cuenta que esta reaccin
tambin la dan positiva E. bovis y E. eqinus, que no son enterococos. Para
identificar correctamente a los enterococos, debe sembrarse en un caldo
con 6.5% de cloruro de sodio y observar el crecimiento halfilo (soporta la
sal), antes de 48 horas de incubacin, con vira je del purpura al amarillo y
turbidez. El caldo con cloruro de sodio al 6.5%, se prepara fcilmente as:
Caldo tripticasa soya ...............15 Gramos
cloruro de sodio ...................... 32.5 Gramos
Agua destilada .........................50 ml.
Servir 6 ml en tubos con tapn de rosca, esterilizar en autoclave a
121C por 15 minutos.
322

Enterococcus spp. son cocos Gram positivo, catalasa-negativo, se

agrupan en pares y cadenas (no en racimos o ttradas), y son halfilos
(turbidez en el caldo con 6.5% de cloruro de sodio).
Si se observa crecimiento de colonias grandes (ms de 1 mm de
dimetro), blancas o amarillentas (tanto en el Agar sangre de carnero como
en manitol-sal), idenficar a Staphylococcus aureus por medio de la prueba
de coagulasa. Colocar en porta-objetos o caja de Petri una gota de plasma
humano citratado (del que se usa para protrombina). Suspender una asada
all, pequea del cultivo en Agar sangre de carnero. Si se observa franca
aglutinacin, la prueba de coagulasa es positiva; reportar: Se aislo
Staphylococcus aureus y efectuar la prueba de susceptibilidad. Si la prueba
de cosgulasa en lmina es dudosa, pero hay coloracin amarilla alrededor
de las colonias en el Agar manitol-sal (acidificado por la fermentacin del
manitol), debe efectuarse la prueba en tubo. Proceder as: en un pequeo
tubo de hemolisis, medir 0.5 ml de plasma citratado suspender all una
asada del cultivo en Agar sangre, incubar de 4 a 24 horas a 36C. s no lo
hay, reincubar a temperatura ambiente, para evitar la lisis del cogulo por la
enzima extreptokinasa. La prueba de coagulasa en tubo es ms sensilla y
confiable, pero si la reaccin de positiva en la lamina es suficiente para
identificar Staphylococcus aureus porque aproximadamente 96% de
correlacin.
PRINCIPALES PRUEBAS PARA LA DIFERENCIACION BE TRES

ESPECIES DEL GNERO Staphylococcus DE ORIGEN HUMANO.
Si hay duda entre los gneros Staphylococcus y Streptoccus, hacer la
prueba de ctalas, que es positiva en el caso de los estafilococos y negativa
en los estreptococos.
El gnero Haemophilus est formado por cocobacilos Gram-negativo
pleomrficos, que requieren el enriquecimiento de los medios de cultivo con
sangre, para poder desarrollarse. Esto se debe a que como su nombre lo
indica, requieren de varios factores sanguneos para su nutricin y
reproduccin.
Con fines prcticos, aceptable el reporte de los aislamientos con
satelitismo positivo as:
-
Cultivo de ojos, reportar: Se aisl Hamophilus aegyptius.

Cultivo de cualquier otra secrecin: Se asilo Haemophilus influenzae.
323

Hacer susceptibilidad en Agar chocolate. Ciseminar sobre toda la

superficie de la caja varias asadas del crecimiento en el Agar chocolate
original, o de colonias satlites, con mucho cuidado de no tocar la estra de
S. aureus.
Las enterobacterias aisladas de cualquier secrecin en cantidad
considerable, deben identificarse con medios diferenciales (TSI, LIZ, MIO,
urea y citrato), o de preferencia con el mtodo API (Bio Merieux). Bacilos
Gram-negativo no fermentadores pueden eventualmente aislarse de
secreciones, efectuarles antibiograma y si es posible identificarlos.
SECRECIONES GENITALES
PROPSITO:
Demostrar la presencia de microorganismos de varios tipos que
infectan los rganos genitales femeninos y masculinos, en especial los
siguientes:
- Neisseria gonorrhoeae
Bacteria, causante de la gonorrea.
- Treponema pallidum
Bacteria, causante de la sfilis
- Gardnerella vaginalis
Bacteria, bacilo Gram-negativo causante
de vaginosis
- Candida albicans
vaginitis.
- Trichomonas vaginalis
vaginal.
Hongo levaduriforme, causante de vulvo

Protozoo,
causante
de
tricomoniasis
DIAGNSTICO DE GONORREA
Muestra:
La gonorrea es una enfermedad de transmisin sexual que en el
hombre generalmente causa el aparecimiento de pus cremoco, amarillento
o verdoso que sale de la punta del pene. En la mujer, este sntoma puede
no ser evidente, lo que hace ms difcil el diagnostico.
El agente causal de la gonorrea es la bacteria Neisseria gonorrhoeae
un diplococo Gram-negativo (rojo). Las neisserias presentan forma
arrionada y se agrupan en pares que semejan granos de cafe. El
diagnstico de laboratorio de la gonorrea consiste en la observacin de la
morfologa tpica de la bacteria en frotes Gram de pus uretral (solo en el
324

hombre, no as en la mujer), y en el cultivo de la bacteria Neisseria gonorrhoeae. Puede aislarse de descargas uretrales, vaginales o hisopos rectales; rara vez se aslan de heces, sangre, lquido cefalorraqudeo, lquido
sinovial, etc. Los nios que nacen de madres con gonorrea, se infectan con
la bacteria al pasar por el canal vaginal durante el parto y generalmente
presentan conjuntivitis purulenta. En el pus de los ojos de estos nios puede
observarse y cultivarse la bacteria.
La toma de la muestra es diferente en el hombre y en la mujer.
Obtener la muestra antes de tratamiento, as:
HOMBRES:
1.
Tener listo el siguiente material: hisopos estriles, porta-objetos

limpios, una caja de Agar sangre y una caja o botellita de medio de
Thayer Martin.
2.
Pedir al paciente que se ponga de pie y con ambas manos exprimir

el pene hacia adelante, a manera de forzar a salir el pus de la uretra.
3.
Con hisopo estril de madera (quebrado) o palillo de diente, tomar

uan gota del pus, tratando de no tocar la piel.
4.
Preparar cuidadosamente un frote delgado sobre porta-objetos de

vidrio limpio, haciendo rodar el palillo o hisopo sobre la lmina, no
frotar. El propsito de preparar el frote con estas precauciones es no
romper los eucocitos presentes ni alterar la posicin de las bacterias.
5.
Tomar una gota de pus con la punta de algodn de un hisopo estril

inmediatamente inocular la caja o botellita de Thayer Martin; en
botellitas frotar el hisopo en la superficie del medio desde el fondo.
Simultneamente sembrar una caja de Agar sangre de carnero para
aislar otros patgenos. Transportar las muestras rapidamente a
laboratorio.
MUJERES:
1.
Idealmente la muestra debe obtenerse por el gineclogo, con la

paciente acostada en posicin y en cama ginecolgica, usando espculo para separa las paredes vaginales y observar el cuello uterino.
Tener listo el mismo material que para la toma de muestra masculina.
325

2.
Con la punta de algodn de un hisopo estril tomar pus de donde se

localice (usar buena luz), es decir del cuello uterino, vagina o uretra,
preparar un frote para Gram haciendo rodar el hisopo sobre un porta
objetos de vidrio.
3.
Tomar ms pus con otro hisopo estril, e inocular una caja o botellita
de Thayer Martin, y una caja de Agar sangre de carnero.
Procedimiento:
1.
Colorear los frotes con Gram segn la tcnica ya explicada.
2.
Con asas flameadas y fras, diseminar por estrias el inculo sobre

toda la superficie de cajas o botellitas.
3.
Incubar tanto el Agar sangre como el Thayer Martin de 24 a 48 horas

a 36C en jarro hmedo con candela ecendida. Si el Thayer Martin
estn en botellitas, tomar la precaucin de dejarlas semi-abiertas
nunca bien cerradas.
Interpretacin de resultados:
Gram: buscar diplococos adosados en forma de granos de caf y
Gram-negativos (rojos). Anotar si se encuentran adentro de los leucocitos
polimorfonucleares
(intracelulares),
o
libres
de
estas
clulas
(extracelulares). En el pus uretral masculino, la presencia de estas bacterias
tpicas indica gonorrea. Reportar la cantidad y clase de leucocitos observados. En los frotes masculinos, los diplococos Gram-negativo
intracelulares se asocian a gonorrea aguda; extracelulares se asocian a
gonorrea crnica. El frote Gram endocervical es de diagnstico limitado y
correlaciona con el cultivo en Thayer Martin en 65 por ciento de los casos.
En el caso de las mujeres por lo general la imagen microscpica no
es tpica y se observan muchas clases de bacterias, tanto Gram-positivo
como Gram-negativo, de la abundante microbiota normal de la vagina.
Algunas bacterias de esta microbiota pueden ser idnticas a Neisseria
gonorroeae. Por estas razones el diagnstico de gonorrea femenina se basa
en el cultivo y no en el frote Gram.
Cultivo:
Despus de 24 a 48 horas de incubacin a 36C en jarro con candela
examinar el Thayer Martin con buena luz. Debido a que el Thayer Martin
contiene sustancias enriquecedoras que favorece el crecimiento de
326

Neisseria gonorroeae, y sustancias inhibidoras de otras bacterias, por lo

general solo crece ente microorganismo en cultivo puro. N. gonorroeae
presenta colonias pequeas (menos de 1 mm de dimetro), translcidas,
brillantes y de bordes lisos.
Despus de incubar, hacer frotes Gram al crecimiento Agar, Agar chocolate, que debe presentar diplococos arrionados Gram negativo.
Identificar la especie de N. gonorrhoeae por medio de 1 prueba de
oxidacin de los tres azcares: maltosa, glucosa, y sacarosa (sucrosa) en el
medio de CTA (cistina-tripticasa Agar).
Informe:
Tomando en cuenta los procedimientos y comentarios anteriores, si
se esta seguro aunque sea presuntivamente, reportar la presencia de N.
gonorrhoeae. Debe tomarse en cuenta que un reporte de este tipo implica
que el o la paciente contrajeron una infeccin por contacto sexual. Un error
de laboratorio puede por lo tanto causar serios problemas conyugales o
dejar a un paciente infectado sin tratamiento.
DIAGNOSTICO DE CHANCRO BLANDO (CHANCROIDE)
Muestra y procedimiento:
El chancro blando o chancroide es una infeccin de transmisin
sexual causada por una bacteria fastidiosa (difcil de cultivar) llamada
Haemophilus ducreyi. Es un bacilo pequeo Gram-negativo, que en frotes
de lesiones genitales o cultivos se presenta formando cadenas de 5 a 20
bacilos, paralelas entre si o entrelazadas, por lo que se ha descrito esta
agrupacin caracterstica como cardmenes de peces o huella digital.
Las lesiones en los genitales son generalmente lceras bien
circuscritas dolorosas con base necrotica y bordes socavados y blandos. De
esta caracterstica se deriva el nombre de chancro blando o chancroide
(similar al chancro sifiltico tpico). Las lesiones rara vez son mas grandes
de 2 cm de dimetro, pueden haber lesiones mltiples por autoinoculacin y
en ms de la mitad de los casos, los ganglios de la ingle estn endurecidos.
El diagnstico del chancro blando se basa en las caractersticas
clnicas y en el frote Gram directo de la lesin.
327

Para efectuar el diagnostico de laboratorio del chancro blando,

proceder as:
Frotar un hisopo estril en los bosrdes y en el fondo de la lesion y
luego rodarlos cuidadosamente sobre un porta-objetos limpio, solo en una
direccin para no destruir la agrupacin caracterstica de la bacteria. Dejar
secar, fijar con calor y colorear con Gram.
Interpretacin:
Observar cuidadosamente el frote Gram del material de la lesin con
el lente de inmersin y aceite. Buscar bacilos Gram-negativo agrupados en
cadenas largas, paralelas o entrelazadas (cardumen de peces), los cuales
deben predominar sobre otras formar de bacterias. Si se o observa esta
morfologa tpica reportar inmediatamente asi: Se observan (escasos,
regular cantidad o abundantes) bacilos Gram-negativo, agrupados en
cadenas largas (o cortas segn el caso) de morfologa compatible con
Haemophilus ducreyi. Esta morfologa se considera presuntivamente
diagnostica de chancro blando.
DIAGNOSTICO DIRECTO DE LA SFILIS:
La sfilis es una enfermedad que se transmite por contacto sexual. Es
causada por Treponema pallidum, una bacteria del grupo de las
espiroquetas, con forma alargada, enrollada a manera de tirabuzon y muy
mvil. T. pallidum no se puede colorear con Grarn ni cultivar in vitro, por
estas razones es indispensable utilizar tcnicas especiales para demostrar
su presencia. Generalmente la deteccin de anticuerpos inespecficos o
reaginas, por la prueba de V.D.R.L. (Venereal Diseases Research
Laboratory) y la deteccin de anticuerpos especificos contra esta bacteria
por FTA-ABS (Fluorescent Treponemal Antibodies-Absorbed), establecen el
diagnstico de sfilis. Sin embargo, debe transcurrir algn tiempo despus
del contagio para que las pruebas serologicas se positivicen.
En la mayoria de los casos de sfilis primaria aparece una lesin
tpica en los rganos genitales, llamada chancro. El chancro se caracteriza
por ser una lcera no purulenta, generalmente de forma redondeada y de
bordes duros. Es una lesin muy infectiva que contiene muchas
espiroquetas, por lo que debe manipularse con guantes.
Debido a que T. pallidum es una bacteria muy delgada y que no toma
los colorantes de Gram, su presencia debe demostrarse por observacin
microscpica en fresco con condesador de campo oscuro. Es muy
importante que el paciente no haya recibido tratamiento con antibiticos
328

especialmente penicilina, que hace desaparecer rpidamente

treponemas de las lesiones. Para el examen se procede as:
los
1.
Tener listo el siguiente material: guantes de hule estriles, gotero con

solucin salina, tubos capilares no heparinizados, bulvo de hule
pequeo para tubos (de los que vienen en kits de serologa), portaobjetos, subre-objetos, solucin salina estril en frasco, gasa estril y
algodn con alcohol.
2.
Es imprescindible examinar bien al paciente en un cubculo privado

con buena luz para localizar bien el chancro ms tipico. Usar los
guantes puestos para este procedimiento, limpiar suavemente la
superficie del chancro con gasa estril seca para causar ligera
abrasin. Si hay costra levantada con cuidado.
3.
Llenar un tuvo capilar, aproximadamente un centmetro con solucin

salina estril, dejarle puesto el bulbito de hua y tomarlos con la mano
derecha.
329

MANUAL DE
LABORATORIO CLINICO
UNIDAD
BANCO DE SANGRE
330

La Sangre
La sangre, tu mejor regalo
Qu es la sangre?
Los grupos sanguneos
Los grupos son:
Grupo A
Grupo B
Grupo AB
Grupo O
RH:
Positivo +
Negativo Qu es un banco de sangre?
Es un Centro Sanitario cuyas tareas
fundamentales son:
Extraccin de sangre o de
alguno de sus componentes.
Anlisis, fraccionamiento y
conservacin de la sangre y
derivados.
Distribucin a todos los
centros hospitalarios y clnicas.
Por qu hay que donar sangre?
Porque la ms avanzada tecnologa no ha sido capaz de producir este
elemento esencial para la vida. La nica posibilidad de obtenerla es gracias
a la generosidad personal del ser humano, nico capaz de fabricarla en su
propio organismo.
Qu se necesita para ser donante de sangre?
Los nicos requisitos precisos para donar sangre son:
Tener entre 18 y 65 aos.
Peso mnimo de 50 Kg.
331

Gozar de buena salud.

Dar sangre no perjudica y la vida de muchas personas depende de que los
bancos de sangre tengan la suficiente cantidad de ella. Para que podamos
dar el apoyo vital que los hospitales y clnicas de Burgos necesitan cada
da... esperamos tu ayuda.
Dar sangre es fcil.
Como equilibrar la centrifuga
El Sistema Rh En el ao
1940,
se
detecta
La
existencia de un nuevo
antgeno en la membrana de
los hemates de la mayora
de la poblacin. Este
antgeno es llamado Rh, ya
que
las
primeras
investigaciones se llevaron a
cabo experimentando con
un simio del tipo Macaccus
Rhesus.
Se observ que al inyectar
hemates humanos a estos
simios, producan un anticuerpo que era capaz de reaccionar aglutinando
los
hemates
en
el
85%
de
la
poblacin.
Se denominan Rh positivos los hemates que son aglutinados por este
anticuerpo y tienen, por tanto, el antgeno Rh en la superficie. Se
denominan Rh negativos los que no son aglutinados y que, por tanto, no
poseen
el
antgeno
Rh
en
su
superficie.
De la misma manera que en el sistema ABO, en el sistema Rh no se puede
transfundir el antgeno Rh a las personas que no lo tienen, ya que podra
originar la produccin de anticuerpos Rh en el receptor. Los sujetos Rh
negativos slo podrn recibir sangre de donantes Rh negativos.
Este sistema explica la enfermedad hemoltica del recin nacido. Esta
enfermedad, de aparicin habitual en el segundo hijo, poda incluso llegar a
provocar la muerte de ste.
Cuando la madre es Rh negativa, el padre Rh positivo y el beb Rh positivo,
ste ltimo puede estimular la produccin de anticuerpos de la madre, ya
que los glbulos rojos del hijo pasarn por la placenta a la madre. Son los
anticuerpos anti-Rh, que podran reaccionar contra los hemates del hijo.
332

Esta enfermedad, hoy en da, se puede prevenir mediante la vigilancia

sistemtica de las embarazadas Rh negativas y administrndolas
adecuadamente la inmunoglobulina anti-Rh
En las transfusiones, tanto el donante como el receptor deben pertenecer al
mismo grupo sanguneo ABO y Rh Slo excepcionalmente, se puede
transfundir sangre de otros grupos compatibles.
Otros grupos sanguneos
Existen otros grupos sanguneos, tambin clasificados por letras como, por
ejemplo M, N, S y P y otros conocidos por el nombre de las personas en las
que se identificaron los anticuerpos por primera vez (Kell, Duffy, etc.).
Frecuencias de los diferentes grupos ABO y Rh
Grupo AB Rh + 3% Grupo AB Rh -
0,5%
La donacin de sangre
Por qu es necesario donar sangre hoy?
La promocin de la donacin de sangre constituye el lado humano y social
de la transfusin. En esta
labor,
los
diferentes
estamentos de la sociedad
tienen
un
papel
fundamental,
actuando
como
agentes
multiplicadores y difusores
del mensaje de donar
sangre.
La transfusin de sangre o
de sus derivados se ha
convertido en una parte
imprescindible en la actual
asistencia sanitaria. El
incremento
de
los
accidentes, la creacin de unidades de medicina intensiva, y las importantes
necesidades de algunos enfermos que antes eran considerados
irrecuperables son algunos de los elementos que han provocado esta
demanda creciente de sangre. Estos y otros problemas tambin han hecho
333

aumentar extraordinariamente las necesidades de derivados de la sangre

(plasma, concentrados celulares, factores antihemoflicos, etc.).
Para atender las necesidades transfusionales de los enfermos, tan
slo en Burgos, se necesitan 35 unidades de sangre cada da.
LA SANGRE NO SE PUEDE FABRICAR. La nica solucin es que una
persona quiera ceder una pequea cantidad de su sangre, de manera
voluntaria y altruista. El hecho de donar sangre comporta una actitud
responsable y solidaria que hay que imitar.
Hoy en da, la donacin de sangre ya no es aquel gesto espectacular de los
pioneros de la donacin, aunque no es todava el acto frecuente que
debera ser.
No slo es necesario dar sangre hoy, sino que es absolutamente
imprescindible donar peridicamente. Se trata de convertir la donacin en
un hecho habitual en la vida de los ciudadanos. Acudir cada 4 o 6 meses al
banco de sangre tiene que llegar a ser una cosa familiar para todos,
haciendo entonces posible que las necesidades de sangre y derivados sean
cubiertas totalmente.
Es importantsimo dar a conocer a la poblacin este gran recurso
teraputico que poseemos en nosotros mismos y que cada uno puede
ofrecer de manera muy sencilla.
Para facilitar al donante el acto de la donacin, el "Banco de Sangre de
Burgos" tiene un horario amplio y desplaza, 2 veces por semana, un equipo
de extraccin a localidades de la provincia. De manera peridica los
donantes se convocan a las diferentes sesiones de donacin que se
realizan en los pueblos. Las donaciones hechas en la Provincia representan
el 30% de la sangre extrada en Burgos cada ao.
Razones para dar tu sangre
La solidaridad y la iniciativa parte de ti, ante todo se tratan de donar
libre y altruistamente, pero, por si tienes alguna duda, aqu te
presentamos razones que pueden ayudarte a dar el pequeo paso.
Con una donacin, se salvan tres vidas.
334

La cantidad donada slo representa el 10% de la sangre que

normalmente se posee, porcentaje que no interfiere con el
funcionamiento normal del organismo.
La donacin de sangre se puede hacer a cualquier hora del da, sin
necesidad de condiciones especiales.
Cada da 75 personas salvan su vida en Espaa gracias a las
transfusiones.
Los tratamientos de cncer, la ciruga compleja, los accidentes de
trfico,
los
trasplantes
de
rganos,...
seran
imposibles
sin
donaciones de sangre.
La sangre no puede fabricarse.
Si piensas donar cuando haya una emergencia, ya llegas tarde. Tu
sangre debe ser sometida a pruebas y procesos. Por lo tanto, es
mejor acudir antes de que aparezca la necesidad.
En verano, hace ms falta, al contrario de lo que se cree, por el
aumento de los accidentes y la escasez de donantes en sus
residencias habituales.
Porque maana, a lo mejor, le hace falta a uno de los tuyos.
Es el mejor donativo.
Hacen un buen anlisis de tu sangre.
Garantas de seguridad para el donante y el receptor.
Disponibilidad gratuita de los productos sanguneos
Utilizacin ptima de la donacin.
La donacin de sangre, no puede ser motivo de comercio. Ni se
compra ni se vende.
Requisitos para donar sangre
En principio, puedes ser donante de sangre si tienes entre 18 y 65
aos, pesas ms de 50 kilos y gozas, en general, de buena salud.
335

Requisitos:
Edad: entre 18 y 65 aos
Peso: superior a 50 kilos
Tensin diastlica (baja): no superior a 10
Tensin sistlica (alta): no superior a 18
Pulso: regular, entre 50 y 110 pulsaciones
Valores hemoglobina hombre: superior a 13,5 gr./dL.
Valores hemoglobina mujer: superior a 12,5 gr./dL.
No se debe donar en ayunas.
No haber viajado, en el ltimo ao, a zonas endmicas de paludismo
(algunos pases de Hispanoamrica, frica y Asia)
No realizar prcticas de riesgo que faciliten el contagio de hepatitis o
Sida.
No haber tenido infecciones vricas (catarro o faringitis) en los ltimos
7 das.
El
antecedente
de
enfermedades,
operaciones
tomar
medicamentos deben ser valorados por el mdico responsable de la

unidad de donacin.
Consideraciones:
Frecuencia de la donacin en hombres: mximo cuatro veces al ao.
Frecuencia de la donacin en mujeres: mximo tres veces al ao.
Periodo mnimo entre donaciones: dos meses.
Autoexclusin:
No dones si...
T o tu pareja trabajis en el mbito de la prostitucin.
T o tu pareja os habis inyectado droga alguna vez.
336

T o tu pareja sis enfermos de Sida o VIH (+) o pensis que

necesitis analizaros. Alguno de vosotros es portador del virus de la
hepatitis B o C.
T o tu pareja habis tenido alguna relacin sexual con una persona
dedicada a la prostitucin.
Has tenido relaciones sexuales con una persona que no sea tu pareja
y no has usado preservativo.
T o tu pareja habis tenido relaciones sexuales con una persona
portadora de VIH o Sida.
T o tu pareja habis tenido relaciones sexuales con una persona
que se ha drogado alguna vez.
(en las 4 ltimas situaciones, no se debe donar durante al menos un ao)
Pasos para donar:
Acudir a un centro de transfusin, banco de sangre hospitalario o
unidad mvil.
Inscripcin administrativa (llevar siempre el DNI).
Lectura del cuestionario con las condiciones para donar.
Entrevista con el mdico y chequeo (tensin arterial, pulso, anlisis)
para verificar la condicin de salud del donante.
Donacin de sangre.
Reposo mientras se toma un refrigerio.
Y despus de donar:
Presionar en la zona de puncin al menos cinco minutos.
Reposar durante diez minutos.
Comer o beber algo.
Aumentar el consumo de lquidos durante las siguientes 24 horas.
No fumar hasta despus de media hora.
337

No consumir alcohol hasta despus de comer.

Los trabajadores que deban realizar grandes esfuerzos o trabajen a
gran altura deben esperar un mnimo de 12 horas antes de reanudar
su actividad.
En la sala de espera, rellenando el cuestionario
Realizando el anlisis antes de la donacin
Tomando un pequeo refrigerio tras la donacin
Qu ocurre con mi sangre despus de donar?
El proceso contina. Una vez que donas sangre, empieza el trabajo de
fondo. No slo el donante debe ser responsable de su accin y
controlar si se encuentra en uno de los grupos de autoexclusin o
riesgo, sino que, para garantizar la seguridad de la calidad de la
sangre, se efectan diversos anlisis. Cualquier alteracin importante,
es comunicada de inmediato y de forma confidencial.
La sangre se somete a una serie de exmenes:
Determinacin del grupo sanguneo.
Determinacin de anticuerpos irregulares.
Determinacin de sfilis.
Determinacin del VIH (SIDA).
Determinacin de hepatitis B y C.
Determinacin
de
BBSS,(BILIRRUBINAS)
TGP,
TGO
(transaminasas).
Despus se separa por componentes, as el paciente recibe slo lo que
necesita y con una sola donacin se ayuda a varios enfermos.
En el Banco de Sangre, la sangre se separa en:
Concentrado de hemates (glbulos rojos).
Concentrado de plaquetas.
338

Plasma fresco (ste se utiliza para tranfusin un 25%- y para

fabricar hemoderivados farmacuticos que se administra tambin a
los pacientes, pero en forma de medicamentos).
Las bolsas de sangre se centrifugan para obtener tres componentes:
Hemates, Plaquetas y Plasma
Productos derivados de una Donacin de Sangre
Hoy en da la transfusin sangunea es ms que extraer sangre a un
donante para ponerla a un paciente.
La transfusin moderna procura administrar a cada paciente SLO los
componentes de la sangre que le hacen falta.
La "terapia por componentes" disminuye el riesgo de efectos adversos de
la transfusin y asegura que se consiga el mximo rendimiento de cada
donacin de sangre. Es frecuente que los componentes de una donacin
nica se utilicen para tratar a varios pacientes con enfermedades diferentes.
Eso es posible gracias a la ayuda de sencillas tcnicas de centrifugacin,
congelacin y descongelacin, que permiten separar las diferentes clulas
(glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas) y el plasma, dando lugar a
diversos productos sanguneos con una composicin, una forma de
conservacin y un uso transfusional propios.
Sangre Total:
Est constituida por la sangre obtenida del donante y la solucin utilizada
para mantenerla incoagulada y conservada en condiciones ptimas.
La sangre total contiene todos los elementos sanguneos y se conserva en
cmaras frigorficas a 4C durante 28 das.
339

Concentrado de Hemates:
Se obtiene de la separacin, por centrifugacin, de la mayor parte del
plasma de una unidad de sangre total. Est formado por glbulos rojos y
una pequea cantidad de plasma.
Su conservacin se realiza en las
mismas condiciones que la sangre
total y dura 42 das. Es el producto
ms indicado en el tratamiento de
la mayor parte de las anemias.
Concentrado
de
Plaquetas
Son las plaquetas procedentes de
la sangre total suspendidas en un
pequeo volumen de plasma, unos
60 ml, obtenidos a partir de la
centrifugacin
de
plasma
proveniente
de
la
primera
separacin. Las plaquetas slo se
pueden conservar 5 das a 22C.
Se utilizan fundamentalmente en
enfermedades
graves
acompaadas de una disminucin
importante de plaquetas, tales
como
leucemias,
algunos
cnceres, etc. Habitualmente, una
transfusin de plaquetas precisa,
como mnimo, los concentrados
procedentes de seis donaciones.
Plasma Fresco Congelado:
Una vez se han separado los hemates y las plaquetas, el plasma que nos
queda se congela por debajo de -30C. Esta congelacin se debe hacer
durante las primeras 6-8 horas de la extraccin para preservar los factores
de la coagulacin que posee.
El plasma fresco congelado se somete posteriormente a una serie de
procesos para aislar las diferentes fracciones plasmticas.
Crioprecipitado:
Es un producto de muy poco volumen, 10-20 ml, obtenido a partir de la
congelacin rpida y la posterior descongelacin lenta del plasma.
340

Contiene todas las protenas plasmticas que precipitan por la accin del
fro (fibringeno, factor VIII). Se conserva congelado durante un ao.
Su empleo est indicado en las carencias de fibringeno, factor VIII y factor
Willebrand, que son tres factores importantes para la coagulacin de la
sangre.
Albmina:
Es la protena que ms abunda en el plasma. Su participacin es
fundamental en el mantenimiento del volumen sanguneo. Se administra en
el tratamiento del "shock" cuando ste se debe a una prdida masiva de
lquido, y en las enfermedades que comportan dficits graves de protenas
(insuficiencia heptica, alguna enfermedad renal o del tubo digestivo o
quemaduras muy extensas).
Anticuerpos y globulinas:
Son protenas encargadas de reaccionar frente a sustancias extraas al
organismo, tanto si son perjudiciales (bacterias, virus, etc.), como si son
potencialmente beneficiosas (tejidos y rganos transplantados). Las
gammaglobulinas son de suma importancia en la prevencin y tratamiento
de numerosas enfermedades infecciosas (ttanos, hepatitis B, varicela,
difteria, etc.). La administracin de gammaglobulinas inespecficas se
emplea en las inmunodeficiencias congnitas o adquiridas y en el
tratamiento de algunas enfermedades autoinmunes.
Algunos Productos que Provienen del Plasma:
Albmina
Concentrado de antitrombina III
Concentrado de factor VIII
Concentrado de factor IX
Gammaglobulina inespecfica
Inmunoglobulinas especficas:
- Ttanos
- Difteria
- Sarampin
- etc, etc...
341

Preguntas ms frecuentes sobre la donacin de sangre

1.
Se le paga a la gente que dona sangre?
NO. La donacin retribuida est prohibida, tan solo se dan insignias como
reconocimiento a los donantes que alcanzan un nmero elevado de
donaciones. En algunas ocasiones los donantes pueden recibir pequeos
artculos de promocin como llaveros, pins, calendarios...
2. La donacin de sangre es dolorosa?
El nico momento en el que se puede sentir algo es en el momento del
pinchazo, adems gracias que se utilizan unas agujas especialmente
diseadas para hacer poco dao suele ser menos molesto que realizarse un
anlisis de sangre.
3. Se puede dejar de ser donante cuando uno quiera?
SI. La donacin de sangre es altruista y voluntaria, nadie puede ser
coaccionado
de
ninguna
manera
para
que
done
sangre.
4. Una persona que ha donado durante unos aos, le pasa algo si
deja de donar?
NO. El organismo est en constante formacin y renovacin de su sangre.
Cada 120 das toda la sangre que tenemos es renovada por el organismo
seamos donantes o no. El donar sangre no altera este proceso ni para bien
ni para mal, luego al dejar de ser donante nuestro cuerpo sigue produciendo
y renovando la sangre exactamente igual que antes de ser donante.
5. Debilita dar sangre?
NO. La legislacin obliga que entre dos donaciones al menos transcurran
dos meses, adems no permite que los hombres donen ms de 4 veces al
ao o que las mujeres donen ms de 3 veces al ao. Con estos lmites el
cuerpo no tiene ninguna dificultad para reponer casi de inmediato estas
donaciones.
6. Produce algn beneficio donar sangre?
NO. El nico beneficio que se produce es la satisfaccin que se obtiene es
el saber que con un gesto tan sencillo como una donacin de sangre se
salvan varias vidas.
342

7. Si la donacin no produce ningn beneficio. por qu hay personas

a las que su mdico les indica que donen sangre?
En algunos casos, hay personas que producen demasiados glbulos rojos o
su organismo acumula demasiado hierro. En estos casos se deben de
realizar extracciones de sangre hasta normalizar los valores de glbulos
rojos o de hierro, pero estas extracciones no se realizan siguiendo los
lmites que marca la ley para las donaciones ya que no tendran ningn
efecto, se realizan en perodos cortos y con una frecuencia generalmente
semanal. Y esta sangre no es utilizada para la transfusin ya que no se
considera
donacin
voluntaria
sino
extraccin
teraputica.
8. Me puedo contagiar de alguna enfermedad por donar sangre?
NO: todo el material que se utiliza para las donaciones de sangre es de un
solo uso y adems es imposible que sea reutilizado ya que tras la donacin
queda
inutilizado
para
realizar
otra
extraccin.
9. Si analizan toda la sangre Por qu se realizan tantas preguntas
antes de donar?
Los anlisis son muy fiables pero si una persona se ha contagiado de
alguna enfermedad poco tiempo antes de la donacin cabe la posibilidad
que aun no sea detectable, por eso en la entrevista mdica se hace especial
hincapi en aquellas prcticas de riesgo que puedan producir esta
circunstancia.
10. Si analizan toda la sangre Por qu se le da tanta importancia a
que la donacin sea voluntaria y se intenta evitar la donacin dirigida o
de familiares ?
Todas las donaciones son analizadas y los anlisis son muy fiables pero
hay enfermedades que no son detectables por los anlisis, y si una persona
se ha contagiado de alguna enfermedad poco tiempo antes de la donacin
(para algunas enfermedades hasta varios meses) cabe la posibilidad que
aun no sea detectable, por eso en la entrevista mdica se hace especial
hincapi en aquellas prcticas de riesgo que puedan producir esta
circunstancia y si no estamos seguros de que el donante va de forma
voluntaria sino que va coaccionado de alguna manera bien moral o
familiarmente cabe la posibilidad de que las respuestas a la entrevista
mdica no sean del todo sinceras con lo que la seguridad disminuye en una
manera considerable.
343

11. Es segura la transfusin de sangre?

Si la donacin es totalmente voluntaria, y con los anlisis que se realizan en
la actualidad se puede asegurar que la transfusin es muy segura, aunque
siempre existe un riesgo residual, si bien este riesgo es mucho menor del
que puede suponer una anestesia general o la mayora de las
intervenciones quirrgicas.
12. Cul es el mejor grupo sanguneo?
El mejor grupo sanguneo es el de cada uno de nosotros, ya que ser el que
nos transfundirn en caso de que lo necesitemos. Para los bancos de
sangre el 0 es el ms interesante ya que se puede utilizar en casos de
emergencia en cualquier enfermo.
13. Cunto tiempo dura una donacin?
Entre 5 y 10 minutos, dependiendo de las caractersticas de las venas de
cada donante.
14. Qu enfermedades se pueden transmitir por la sangre?
Casi todas las enfermedades infecciosas, pero con la historia mdica y el
reconocimiento a los donantes en el momento de la extraccin las
enfermedades que en nuestro entorno ms nos preocupan son: la hepatitis,
la sfilis, el SIDA y enfermedades tropicales que podamos adquirir en algn
viaje al extranjero. Por eso es tan importante que la donacin sea voluntaria,
para que la entrevista mdica sea completamente fiable.
15. Cada cuanto tiempo se puede donar?
El organismo est capacitado para donar y reponerse en pocos das, pero la
legislacin establece que los hombres pueden donar 4 veces al ao y las
mujeres 3 veces al ao, dejando en ambos casos siempre dos meses entre
cada donacin, si bien en nuestro Banco para las mujeres recomendamos
esperar 3 meses.
16. Por qu las mujeres pueden donar menos veces que el hombre?
Los depsitos de hierro en la mujer se ven mermados mensualmente con la
menstruacin, por tanto un hombre que done 4 veces y una mujer que done
3 veces habrn perdido parecida cantidad de hierro en un ao.
344

17. Si se detecta alguna alteracin en los anlisis que se realizan

despus de cada donacin, se le comunica al donante esta
alteracin?
SI. Tras cualquier hallazgo se avisa al donante y se realiza otro anlisis de
repeticin para asegurar el resultado y se le indica en caso afirmativo qu
se le ha detectado y cules son los pasos que tiene que realizar
dependiendo de cada caso.
18. Por qu si hay tanta necesidad de sangre y el organismo se
repone tan pronto, despus de cada donacin, la legislacin pone
lmites tan estrictos?
Para que haya sangre suficiente, bastara con obtener 50 donaciones por
cada 1.000 habitantes y ao, con lo que si cada donante diera dos veces al
ao, sera suficiente con que 2,5% de la poblacin fuera donante. Es labor
de Asociaciones como la nuestra conseguir esta cifra de donantes, en vez
de intentar que a unos pocos se les extraiga muchas veces.
La Donacin de Plasma y Plaquetas
s en alguna ocasin haya odo hablar de la donacin de plasma y se ha
preguntado qu es eso? por qu donar plasma? es mejor donar plasma
o sangre? se pueden alternar las dos formas de donacin? tiene algn
problema?
En estas pginas nuestro propsito es informarle, acercarle a este tipo de
donacin y animarle a que acuda y se inscriba en este grupo de donantes.
Esta forma de donacin slo se puede realizar, al menos de momento, en el
propio Banco (en un espacio acondicionado para ello). Como se utiliza un
equipo especial, el personal que las atiende ha sido especficamente
preparado para su manejo; por otra parte, como la donacin se prolonga
ms de lo habitual se dispone de peridico, TV y la atencin continua del
personal de enfermera, que adems de controlar la donacin intenta hacer
un poco ms cortos los 50 - 70 minutos que el donante nos acompaa
El plasma y las plaquetas
Qu es el Plasma?
El plasma es la parte lquida de la sangre, y representa aproximadamente
un 55% del volumen sanguneo total. Consta principalmente de protenas
345

(inmunoglobulinas, factores de la coagulacin, etc), minerales es decir,

ingredientes esenciales para el correcto funcionamiento del organismo.
Las necesidades de plasma son muy elevadas (es el producto sanguneo
ms deficitario en Espaa) ya que adems del gran consumo hospitalario en
transfusiones, la industria farmacutica elabora muchos productos a partir
del plasma como materia prima (gamma-globulinas, albmina, factor VIII
antihemoflico,).
El plasma que se obtiene del fraccionamiento de las donaciones de sangre
convencionales no es suficiente para cubrir las necesidades. Para corregir
este problema hemos puesto en prctica una tcnica para obtener
exclusivamente plasma: la PLASMAFRESIS.
Mediante este tcnica, junto con el plasma se pueden obtener plaquetas,
que se usan diariamente en pacientes con enfermedades de la sangre,
cncer, transplantes, etc.
Qu son las Plaquetas?
Son clulas que intervienen bsicamente en la coagulacin de la sangre. Si
faltan o estn muy reducidas en nmero, se producirn hemorragias. Por
otra parte tienen la particularidad (y la desventaja) de que viven pocos das,
por lo que quien tiene una carencia de las mismas necesitar transfusiones
cada 2-3 das; por eso algunos enfermos, como algunos casos de enfermos
hematolgicos o trasplantados puede llegar a necesitar varios cientos de
unidades de plaquetas durante su tratamiento.
Quin puede necesitar transfusiones de estos componentes?
El plasma se utiliza en enfermos con graves quemaduras, alteraciones de la
coagulacin, enfermedades del hgado, grandes hemorragias, etc.
Las plaquetas se utilizan en enfermos con leucemia, aplasia medular,
cncer, trasplantados, etc.
As es una donacin de plasma.
Qu es la Plasmafresis?
Es un tipo de donacin de sangre en que mediante una mquina especial,
con un equipo estril de un solo uso y con un solo pinchazo, se van
separando automticamente el plasma y las plaquetas y se devuelve al
346

donante, por el mismo tubo, el resto de componentes de la sangre

(hemates y leucocitos).
Este proceso es muy seguro y totalmente indoloro.
La ventaja es que permite obtener ms cantidad de plasma y plaquetas de
un solo donante y que por el hecho de no donar glbulos rojos, la
recuperacin es casi inmediata y, por tanto se pueden hacer donaciones
con la frecuencia que el donante desee (nicamente hay que esperar un
mnimo de 15 das antes de volver a donar).
El nico "inconveniente" es el tiempo: tiene una duracin de 45-75 minutos
porque el proceso se realiza en 4-6 ciclos seguidos, de 12 minutos
aproximadamente cada uno. Para conseguir optimizar los tiempos, se
procura concertar telefnicamente da y hora con el donante y nos
adaptamos al mximo a su horario, dentro de las limitaciones del Banco.
Tambin nos permite tener el equipo preparado (material, personal de
enfermera y mdico) y evitar cualquier espera o retraso, dando al mismo
tiempo una atencin ms personalizada.
Quin puede ser donante de plasma?
En principio todo
puntualizaciones:
donante
de
sangre,
si
bien
con
algunas
Es indispensable tener buenas venas, ya que en el caso de las venas finas,

el proceso es ms lento y es fcil que se produzcan hematomas.
Es mejor no tener el hematocrito (% de glbulos rojos) excesivamente alto,
ya que entonces la proporcin de plasma es menor y hace que el
rendimiento de la donacin de plasma por ciclo sea bajo.
Los donantes con hematocrito en el lmite inferior (tendencia a la anemia) y
que slo ocasionalmente pueden donar sangre, pueden hacer tantas
donaciones de plasma como deseen, ya que al retornarse los glbulos
rojos, no les afecta.
Todos los grupos sanguneos son vlidos y necesarios, si bien el "donante
universal" de plasma es el grupo AB (al revs de lo que sucede con la
donacin de sangre que es el grupo O).
Debe disponer de una hora, ya que es importante estar tranquilo y sin prisas
(es lo ms difcil).
347

Por qu hacerse donante de plasma?

Porque en la donacin por afresis se puede obtener hasta 3 veces la
cantidad de plasma que en una donacin de sangre y si se obtienen
plaquetas hasta 8 veces la cantidad de plaquetas (pero no se pierden
prcticamente hemates). Y esto sin ninguna repercusin para el organismo,
que lo recupera rpidamente.
Las plaquetas obtenidas a partir de una donacin por afresis son
particularmente beneficiosas para aquellos enfermos que van a requerir
mltiples transfusiones de plaquetas durante su tratamiento, como los
enfermos con leucemias o anemia aplsica.
Algunas preguntas frecuentes
Es mejor donar sangre o plasma?
Diariamente se necesitan donantes de sangre y de plasma. Pero si se
dispone de un poco mas de tiempo, la donacin de plasma permitir obtener
mas cantidad de plasma y plaquetas de cada donacin, lo que tiene claras
ventajas para los enfermos. Y si tiene falta de hierro (muy frecuente entre
las mujeres), no podr donar sangre pero s plasma (no se pierde hierro).
Se pueden alternar donaciones de sangre y plasma?
Se puede compaginar la donacin de sangre con la de plasma, teniendo en
cuenta que siempre que se done sangre debe de esperar un mnimo de dos
meses para efectuar otra donacin, ya sea esta de plasma o de sangre.
Es segura la plasmafresis?
Las plaquetas y el plasma donado se recuperan rpidamente. La mayora
de los donantes no sienten habitualmente molestias, o estas son tan poco
frecuentes como las que ocasionalmente se producen en una donacin de
sangre total.
Cunto tiempo dura una plasmafresis?
Si se obtienen tambin plaquetas, poco ms de 1 hora; cuando se obtiene
slo plasma entre 45 y 60 minutos.
348

Duele?
Lo mismo que la donacin de sangre necesita un pinchazo en la vena. Igual
que en esta, una vez realizado el pinchazo, no se nota ninguna molestia,
pudiendo durante el tiempo de donacin ver la TV o leer el peridico.
Qu quiere decir Afresis?
La afresis es el proceso que permite que el donante done slo un
componente de la sangre. Cuando se obtiene plasma se llama
plasmafresis y si se separan plaquetas, plaquetofresis. Tambin puede
haber afresis combinada de plasma + plaquetas y de otros componentes.
Para realizar afresis se utiliza un sistema mecnico-electrnico llamado
separador celular.
349

MANUAL DE
LABORATORIO CLNICO
CLNICO
350

Clulas
El trmino clula hace referencia tanto a organismos completos
dinoflagelados, diatomeas, espiroquetas causantes de enfermedades
como a elementos especializados de organismos superiores pluricelulares,
como linfocitos, eritrocitos, clulas musculares o nerviosas. Con
independencia del tamao o de que sea una entidad autnoma o una parte
de un organismo, todas las clulas tienen ciertos elementos estructurales
comunes. Todas estn encerradas por algn tipo de envuelta externa
semipermeable que protege un interior fluido rico en agua, llamado
citoplasma, y todas contienen material gentico en forma de ADN (cido
desoxirribonucleico).
Composicin qumica:
En los organismos vivos no hay nada que contradiga las leyes de la qumica
y la fsica. La qumica de los seres vivos, objeto de estudio de la bioqumica,
est dominada por compuestos de carbono y se caracteriza por reacciones
acaecidas en solucin acuosa y en un intervalo de temperaturas pequeo.
La qumica de los organismos vivientes es muy compleja, ms que la de
cualquier otro sistema qumico conocido. Est dominada y coordinada por
polmeros de gran tamao, molculas formadas por encadenamiento de
subunidades qumicas; las propiedades nicas de estos compuestos
permiten a clulas y organismos crecer y reproducirse. Los tipos principales
de macromolculas son las protenas, formadas por cadenas lineales de
aminocidos; los cidos nucleicos, ADN y ARN, formados por bases
nucleotdicas, y los polisacridos, formados por subunidades de azcares.
tomo:
La energa del tomo tiene distintas e interesantes aplicaciones en la salud.
Conzcalas!
El uso de la energa nuclear contina causando polmica en nuestros das
debido a que la mayora de la gente suele vincular este trmino con
armamento de alto poder destructivo o con catstrofes ocasionadas por
plantas generadoras de energa elctrica. Lo cierto es que esta visin
resulta parcial y niega importantes avances en la materia cuya aplicacin ha
contribuido a mejorar notablemente el nivel de vida del ser humano.
Uno de los usos ms nobles e ingeniosos que se ha hecho mediante esta
energa es, sin duda, la Medicina Nuclear, misma que el Dr. Erick
351

Alexanderson Rosas, especialista y jefe de la Unidad PET Ciclotrn de la

Universidad Nacional Autnoma de Mxico (UNAM) se encarga de definir
como "mtodo principalmente de diagnstico que consiste en la aplicacin
de material radioactivo que se aloja en el interior de un rgano y que
permite saber si el funcionamiento de ste es saludable o no".
El mdico e investigador explica en entrevista con saludymedicinas.com.mx
que esta rama de la Medicina es muy segura y slo se vincula con "plantas
o bombas nucleares en el sentido de que aprovecha la energa que genera
el ncleo del tomo; en cambio, nosotros utilizamos las radiaciones con
fines muy distintos y en cantidades tan pequeas e inofensivas que, sin
duda, resulta ms riesgoso exponerse al Sol sin proteccin durante algunas
horas".
Adems, destaca que gracias al desarrollo de la tecnologa empleada en
Medicina Nuclear y su continua evolucin es posible mejorar la investigacin
y atencin al cncer y problemas circulatorios en prcticamente cualquier
rgano o regin del cuerpo, as como vigilar la salud de glndulas, huesos o
articulaciones, de modo que el espectro de pacientes beneficiados es casi
ilimitado.
Cualidades y ventajas. Otra de las virtudes sustanciales de la Medicina
Nuclear, incluso ante sistemas tan avanzados como la resonancia
magntica (uso de campos magnticos para crear imgenes
tridimensionales del interior del organismo), consiste en que permite
analizar, ms que la apariencia, la eficiencia de un rgano.
Esto es importante porque, ahonda el Dr. Alexanderson Rosas, "forma y
funcionamiento son elementos muy distintos; por ejemplo, se puede obtener
una imagen clara que muestre la forma y el tamao de los riones de un
paciente, y con ella se podra determinar que no hay lesiones o tumor
alguno. Sin embargo, no permite distinguir si la sangre se filtra
adecuadamente y se eliminan las toxinas o por qu una persona orina con
menos frecuencia. Las tcnicas de Medicina Nuclear no generan grficos
tan claros, pero permiten saber qu tan bien se realiza una funcin en el
cuerpo humano".
En efecto, el hecho de que los trazadores sean absorbidos por los tejidos e
incluso sea posible obtener registros en movimiento para apreciar la manera
en que son procesados por cada rgano, ayuda a obtener diagnsticos
certeros "desde adentro" de cada estructura corporal. As, la gammagrafa
se convierte en invaluable aliado para estudiar:
352

Enfermedades neurolgicas. Es posible captar la obstruccin o ruptura de

vasos sanguneos (accidente cerebrovascular), malformaciones en el tejido
cerebral responsables de problemas como epilepsia, as como algn tumor.
Problemas cardiacos. Ofrece imgenes en movimiento de gran valor para
conocer el ritmo del corazn, desempeo de cada ventrculo (hemisferio
izquierdo o derecho) y la probabilidad de sufrir infarto.
Salud sea. Se puede determinar la posibilidad de que clulas cancergenas
provenientes de algn rgano se establezcan en alguna parte del esqueleto
(proceso conocido como metstasis, que de hecho puede ocurrir en
cualquier rgano), as como la cantidad de minerales (densitometra) que
hay en los huesos, a fin de tomar medidas que prevengan su debilitamiento.
Articulaciones. Permite conocer la presencia y severidad de enfermedades
reumatolgicas.
Aparato digestivo. El estudio ms comn de este tipo sirve para conocer
fallas en el trnsito de alimentos y la velocidad de vaciamiento estomacal,
por lo que los radiofrmacos son ingeridos, no aplicados va intravenosa.
Sistema respiratorio. Para estos casos es comn que el trazador se inhale a
fin de poder apreciar el trabajo de la estructura interna de los pulmones.
Enfermedades en tiroides. En este caso la Medicina Nuclear no se restringe
a localizar problemas, sino que el yodo radioactivo, un radiofrmaco, se
utiliza con fines teraputicos para frenar la segregacin excesiva de
hormonas por esta glndula, debido a bocio o hipertiroidismo, problemas
que ocasionan nerviosismo, temblores, sudoracin, prdida de peso,
palpitaciones y diarrea.
353

Laboratorio de Hematologa y Hemostasia
El rea de Hematologa, cuenta con contadores hematolgicos

automatizados para la cuantificacin de clulas sanguneas (glbulos
blancos, glbulos rojos, plaquetas), que brinda 18 parmetros referidos a
caractersticas celulares: concentracin de hemoglobina, hematrocito,
dispersin en tamao y forma de hemates, etc.
En el rea de Hemostasia y Trombosis disponemos de un agregmetro de
ltima generacin para un monitoreo preciso de los diferentes pasos
intervinientes en la agregacin plaquetaria y la obtencin de grficos de
curvas dosis respuestas frente al agregado de diferentes inhibidores y/o
activadores del proceso.
El coagulmetro utilizado posibilita una exacta determinacin de los
parmetros que rigen los eventos relacionados a la coagulacin sangunea,
como as tambin permite determinar ndices indispensables para el
manejo teraputico del paciente anticoagulado en forma oral o parenteral.
Finalmente la determinacin cuali y/o cuantitativa de los distintos factores
involucrados en la va intrnseca y extrnseca del proceso de coagulacin
brindan al medico tratante un diagnstico preciso de la deficiencia existente
para la eleccin de la conducta teraputica adecuada.
354

Tubo de microcentrfuga
Tubo de microcentrfuga con una solucin de azul de Coomassie

Un tubo de microcentrfuga (comnmente apodados "eppendorf", en
referencia al mayor manufacturador de estos tubos, la casa Eppendorf) es
un pequeo contenedor cilndrico de plstico, con un fondo cnico y
tpicamente una tapa unida al cuerpo del tubo para evitar su
desprendimiento. Son empleados profusamente en biologa molecular y
bioqumica no slo para la centrifugacin, sino que, dado su bajo coste, se
emplean a menudo como simples viales contenedores de sustancias
qumicas.
Los tubos estn fabricados de polipropileno,[1] y pueden emplearse a
temperaturas muy bajas (-20 C) o con disolventes orgnicos como el
cloroformo. Su tamao oscila entre los 200 L y los 2 mL. La capacidad ms
comnmente usada es de 1,5 mL, siendo por otra parte los de 200 l los
ms empleados para PCR. La desinfeccin de los tubos es posible (1 atm,
120 C, 20 minutos), pero dado su bajo coste y la dificultad de limpieza de la
superficie de plstico, los tubos de microcentrfuga son usualmente
desechados despus de su uso.
355

Tres tubos de microcentrfuga: 2 ml, 1,5 ml y 200 l (para PCR).
EQUIPOS
Adems de todos los equipos e implementos bsicos que todo Laboratorio
Clnico debe tener, como son: centrfugas, microscopios, autoclave, horno,
espectrofotmetro, pipetas, tubos de ensayo, etc. Lab-Centro Illingworth
cuenta con los siguientes instrumentos:
Informtica:
Equipo IBM AS-400 y dos servidores Compaq para el almacenamiento de

las rdenes de los pacientes. La aplicacin es cliente-servidor y el usuario
accede a los datos va terminales PC compatibles. Utilizando el Software de
356

Gestin para Laboratorios Clnicos (SGLC) los analizadores automticos

tienen interfases bi-direccionales con el computador central para el envo
electrnico de los datos evitndose as la digitacin manual.
Hematologa:
Contador de Glbulos (Hemogramas) y Reticulocitos automtico marca

Abbott modelo cell-dym 3700.
Contador de Glbulos (Hemogramas) automtico marca ABX modelo Argos.

357

Contador de Glbulos (Hemogramas) automtico marca ABX modelo Pentra

80.
Coagulmetro (pruebas de coagulacin) marca Stago de 4 canales.
358

Coagulmetro (pruebas de coagulacin) marca Sysmex modelo CA540.
359

Qumica Sangunea:
Analizador Automtico marca Roche modelo Hitachi 717.
Analizador Automtico marca Ciba-Corning modeloExpress 550.
360

Inmunologa:
Analizador Automtico marca Diagnostics Products Corporation (DPC)

modelo Immulite 1.
361

Analizador Automtico marca Diagnostics Products Corporation (DPC)

modelo Immulite 2000.
Analizador Automtico marca Abbott Modelo Axsym.

Electrolitos:
Equipo de ion selectivo marca Nova modelo Nova 4 (Na. K. Cl. CO2. Li.)
362

REFERENCIA BIBLIGRAFICA
1. Angel G. y Angel M. Interpretacin clnica de laboratorios, quinta edicin,

Colombia, 1996.
2. Botero, D. y Restrepo, M. Parasitosis humanas, Tercera Edicin, Medelln
Colombia, 1998.
3. Instituto Nacional de Salud. Manual de Procedimientos de Laboratorio para
el Diagnstico de los parsitos intestinales del hombre. Tcnica No.
37,2003.
4. Kahleen Morrison Treseler. Laboratorio Clnico y pruebas de diagnstico,
manual modernos, primera edicin, Mxico, 1998.
5. Lynch, M. J. Mtodos de Laboratorio, Segunda Edicin, Ao 1988.
6. Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social. Coproparasitologa, primera
edicin, ao 1995.
7. Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social. Gua Tcnica para el
Diagnstico de la Tuberculosis por Microscopa Directa, Segunda Edicin,
2005.
8. Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social. Manual de Bioseguridad de
los Laboratorios Clnicos, segunda edicin, 2005.
9. Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social. Manual de Serologa e
Inmunologa, 2000.
10. Ministerio de Salud Pblica y Asistencia Social. Manual para control de
calidad en los laboratorios VIH, Primera Edicin, 2005.
11. Organizacin Panamericana de la Salud. Manual de Tcnicas bsicas para
un laboratorio de salud, segunda edicin, ao 1983.
12. Ruiz Torres. Diccionario de Trminos Mdicos, Sptima Edicin, Ao 1992.
13. Tood Sanford & Savid Sohn. El Laboratorio en el diagnostico clnico,
primera edicin, 2006.
363

Manual de Laboratorio Clinico. MLFQM

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