PRACTICA DE LABORATORIO- N09

EDUARDO SAUL GARCIA DONAYRE

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA | Medicina Humana

ICO: COLESTEROL TOTAL Y FRA

INTRODUCCION
Un perfil lipdico, tambin denominado lipidograma y perfil de riesgo coronario, es un
grupo de pruebas o exmenes diagnsticos de laboratorio clnico, solicitadas
generalmente de manera conjunta, para determinar el estado del metabolismo de los
lpidos corporales, comnmente en suero sanguneo.
Pruebas que se incluyen en un perfil lipdico

Colesterol total
HDL: lipoprotenas de alta densidad (a menudo denominadas colesterol bueno)
LDL: lipoprotenas de baja densidad (a menudo denominadas colesterol malo)
VLDL: lipoprotenas de muy baja densidad
Triglicridos

Algunas veces el informe del laboratorio incluye valores adicionales, segn la relacin
HDL/colesterol, o clculos basados en los resultados del perfil lipdico: edad, sexo y
otros factores de riesgo.

Igualmente algunos lipidogramas incluyen medicin de: a) total de lpidos; b)

lipoprotenas de densidad intermedia (IDL); c) apoprotenas; d) quilomicrones.

MARCO TEORICO
Por medio de un anlisis denominado "perfil lipdico", el mdico de su hijo podr ver
los diferentes tipos de grasas presentes en la sangre.
Si bien muchos padres no piensan en el nivel de colesterol de sus hijos, los niveles
elevados contribuyen a las afecciones cardacas y los accidentes cerebrovasculares.
Los mdicos miran atentamente los perfiles lipdicos en los nios porque ha quedado
demostrado que las afecciones cardacas se desarrollan en la niez.

El perfil lipdico mide lo siguiente:

El colesterol total, que es la suma de los diferentes tipos de colesterol.
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) colesterol, que suelen recibir el nombre de
colesterol "bueno". Las lipoprotenas pueden considerarse el sistema de transporte de
la sangre de su hijo. Las lipoprotenas de alta densidad transportan colesterol al
hgado para su eliminacin.
Las lipoprotenas de baja densidad (LDL) colesterol, generalmente conocidas como
colesterol "malo". Las lipoprotenas LDL que se acumulan en el torrente sanguneo
pueden tapar los vasos sanguneos e incrementar el riesgo de afecciones cardacas.
Los triglicridos, que almacenan energa hasta que el organismo la necesita. Si el
cuerpo acumula demasiados triglicridos, los vasos sanguneos se pueden tapar y
provocar problemas de salud.

Por qu se realiza?
El perfil lipdico perite verificar los niveles de lpidos en la sangre, que pueden indicar
el riesgo de una persona de padecer enfermedades cardacas o arterosclerosis (el
endurecimiento, estrechamiento o bloqueo de las arterias).
Algunos expertos consideran que el colesterol elevado en nios es un gran problema
de salud pblica que en muchos casos pasa desapercibido. Por lo tanto, es importante
estar atento a los niveles de colesterol de su hijo, en especial si alguno de los padres
sufre de colesterol elevado.

La preparacin
El nivel de lpidos puede verse afectado por
la grasa presente en la dieta. Su hijo debe
evitar las comidas con grasas la tarde
anterior a realizarse el anlisis. A menos que
el mdico indique lo contrario, su hijo no
debe comer ni beber ninguna bebida que no
sea agua despus de la medianoche anterior
al anlisis. Si no se cumple este requisito, los
resultados

del

anlisis

pueden

verse

afectados.

Su hijo tambin debe evitar hacer ejercicio

fsico entre las 12 y 14 horas anteriores al
anlisis. Si su hijo est tomando algn
medicamento, consulte a su mdico para
saber si debe interrumpirlo hasta despus de
realizada la prueba.

La recoleccin de una muestra de sangre slo provoca molestias temporales y se

siente un pinchazo leve. Despus, es posible que se forme un leve moretn, que
debera desaparecer en unos pocos das.

Obtencin de los resultados

Los resultados del anlisis deben estar listos en unos das o una semana. El mdico
querr conversar con usted acerca de los resultados y cualquier preocupacin que
tenga.

Riesgos
La realizacin de un anlisis de sangre, como el anlisis del perfil lipdico, es
considerado un procedimiento seguro. Sin embargo, al igual que con muchos otros

anlisis, es posible que surjan algunos problemas, como los siguientes, al extraer
sangre:

desmayos o mareos

hematomas (acumulacin de sangre debajo de la piel que provoca un moretn

o un bulto)

dolor por los pinchazos para encontrar la vena

DESARROLLO
Experimento A: DETERMINACIN DE COLESTEROL EN SUERO
FUNDAMENTOS DEL METODO:
El colesterol es oxidado enzimticamente por la colesterol oxidasa (CHOD), previa
hidrlisis enzimtica de los esteres mediante una lipasa de origen fungal.
El agua oxigenada generada en la oxidacin, produce la copulacin oxidativa del fenol
con la 4aminofenazona (4-AF) mediante una reaccin catalizada por la peroxidasa.
El producto es una quinonaimina roja con absorbancia mxima a 505 nm.

REACTIVOS:
Standard: solucin de colesterol 200 mg%
Enzimas: suspensin conteniendo lipasa fungal (300 U/ml), colesterol oxidasa (3
U/ml) y peroxidasa (20 U/l).
Reactivo 4-AF: solucin de 4-aminofenazona (25 mmol/l).
Reactivo Fenol: solucin de fenol (55 mmol/l).
Reactivo de trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo colocar en una probeta 50
partes de agua destilada, 5 partes de reactivo 4-AF, 5 partes de reactivo fenol y
llevar a 100 partes con agua destilada. Agregar 2 partes de enzimas previamente
homogenizadas. Mezclar por inversin, sin agitar.
PROCEDIMIENTO:
En tres tubos colocar:

Incubar 15 minutos en Bao Mara a 37C. Leer en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULO DE RESULTADOS:
Calcular la concentracin de colesterol total en suero,
aplicando el mtodo del factor de calibracin. Recordar que
la concentracin del standard de colesterol es de 200 mg%
VALORES DE REFERENCIA:
Los valores de colesterol en sangre fluctan segn edad,
sexo y hbitos de dieta y de ejercicio. Sin embargo, es
preferible no hacer referencia a valores normales, pues la norma promedio de una
poblacin no necesariamente refleja ausencia de riesgo patolgico en el caso de
colesterol.
Menos de 200 mg%
200
a 239 mg%
Mayor de 240 mg%

valor deseable
valor frontera
valor alto

Resultado
Abs. Estndar (S) = 0, 553
Abs. Muestra (D) = 0, 477

F = 200
S

F = 200 = 361. 663

0.553

D*F=?
D*F = 0.477 * 0. 477 = 172. 51

Experimento B: DETERMINACIN DE COLESTEROL HDL EN

SUERO
FUNDAMENTOS DEL METODO:
Las lipoprotenas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las
lipoprotenas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de
Sulfato de Dextrn de PM 500,000 en presencia de iones Mg++. En el sobrenadante
separado por centrifugacin, quedan las HDL y se realiza la determinacin del
colesterol ligado a las mismas, empleando el sistema ms conveniente.
REACTIVOS: REACTIVO PRECIPITANTE.- Contiene una solucin de Sulfato de
Dextrn y de Cl2Mg.H2O

PROCEDIMIENTO:
En un tubo medir 0.5 ml de muestra y agregar 0.05 ml (50 ul) de Reactivo Precipitante.
Homogenizar agitando (sin invertir) durante 20 segundos. Dejar 30-40 minutos en
refrigeracin (4-10C). No colocar en el congelador. Centrifugar a 3000 rpm. X 03
minutos Usar el sobrenadante como muestra.
En tres tubos colocar:

Incubar 15 minutos en Bao Mara a 37C. Leer en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULOS:
De acuerdo al mtodo del factor de calibracin, considerando que la concentracin del
standard es de 45.7 mg%.
VALORES NORMALES: 40 65 mg%

Resultado: LDL = Colesterol total = (D*F) , D= 2,414 y S= 0,748

F = 0.624
S

0.624 = 0.834
0.748

LDL= 2.414 * 0.834 = 1.478

Experimento C: DETERMINACIN DE COLESTEROL LDL EN
SUERO
FUNDAMENTOS DEL METODO:

Las lipoprotenas de baja densidad (LDL) se separan del suero precipitndolas

selectivamente mediante el agregado de polmeros de alto peso molecular. Luego de
centrifugar, en el sobrenadante quedan las dems lipoprotenas (HDL y VLDL), el
colesterol ligado a las mismas se determina empleando el sistema ms conveniente.
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene
el colesterol unido a las LDL.
REACTIVOS: REACTIVO PRECIPITANTE.- Solucin de sulfato de polivinilo disuelto
en polietilenglicol (PM 600).
PROCEDIMIENTO:
En un tubo, colocar 0.2 ml (200 ul) de suero problema y aadir 0.1 ml (100 ul) de
Reactivo Precipitante.
Homogenizar agitando (sin invertir) durante 20 segundos.
Dejar 15 minutos en un bao de agua a 20-25C.
Centrifugar a 3000 rpm. X 03 minutos
Usar el sobrenadante como muestra.
En tres tubos colocar:

Incubar 15 minutos en bao de agua a 37C. Leer en el espectrofotmetro a 505 nm.

CALCULOS:
LDL Colesterol = Colesterol total - (Abs muestra neta x factor de calibracin)
La concentracin del standard es de 62.4 mg%.

VALORES NORMALES:
Riesgo bajo o nulo: Menor de 140 mg%
Riesgo moderado: 140 a 190 mg%
Riesgo elevado : Mayor de 190 mg%
Abs. Estandar (S) = 0. 780
Abs. Muestra (D) = 0. 576
Factor de calibracin (F) = 0. 624
S

F = 0.624 = 0.8
0.780
D*F = 0. 780 * 0.8 = 0.624 mg% / L

CONCLUSIONES
Existen factores lipdicos y no lipdicos de riesgo cardiovascular.

El incremento de LDL no es el nico factor de riesgo cardiovascular.

La disminucin de HDL es un factor de riesgo muy importante.

La hipertrigliceridemia es un factor de riesgo independiente, se acompaa de

disminucin del HDL.

Los derivados de los cidos fbricos tienen un efecto marcado para disminuir los
triglicridos.

El rgimen alimenticio, actividad fsica y cambio del estilo de vida son los pilares
fundamentales en la prevencin de la patologa cardiovascular.

CUESTIONARIO
1.- Qu es RIESGO CORONARIO y como se calcula?
Es un grupo de exmenes de sangre utilizados para medir los niveles de colesterol y
triglicridos. El perfil puede ayudar a determinar su riesgo de cardiopata.
El colesterol es una sustancia suave similar a la cera que se encuentra en todas las
partes del cuerpo. Su cuerpo necesita un poco de colesterol para funcionar
adecuadamente, pero demasiado colesterol puede taponar las arterias y llevar a que
se presente cardiopata, accidente cerebrovascular y otros problemas.
Algunos tipos de colesterol se consideran "buenos" y algunos son considerados
"malos". Se necesitan exmenes de sangre diferentes para medir cada tipo de
colesterol.
Forma en que se realiza el examen
Se necesita una muestra de sangre
El mdico puede ordenar slo un nivel de colesterol como primer examen, el cual
medir los niveles de colesterol y, algunas veces, los niveles de colesterol HDL . Usted
posiblemente no necesite ms exmenes de colesterol si ste est en el rango normal.
A usted tambin le pueden realizar un perfil lipdico (o de riesgo coronario), el cual
incluye:

Lipoprotena de baja densidad (LDL o colesterol "malo")

Lipoprotena de alta densidad (HDL o colesterol "bueno")

Colesterol total

Triglicridos

Lipoprotena de muy baja densidad (colesterol VLDL [por sus siglas en ingls],
aunque a menudo esto se calcula a partir del nivel de triglicridos)

Las personas que tambin tengan niveles altos de triglicridos pueden hacerse un
examen llamado colesterol vLDL directo. (vLDL-C directo).
Se pueden agregar otros exmenes de sangre, como protena C reactiva (PCR), al
perfil en algunos laboratorios.

2.-

Explique qu diferencias hay entre la arterioesclerosis y la

ateroesclerosis?
La aterosclerosis es una enfermedad que se subdivide de la
arteriosclerosis y que se caracteriza por afectar a las arterias
gruesas; es decir, mientras que la arteriosclerosis afecta a las
arterias pequeas, la aterosclerosis afecta a las arterias gruesas.

Bsicamente se le llama arteriosclerosis al

endurecimiento de las arterias pequeas, las
cuales son las encargadas de llevar la
sangre oxigenada a todo nuestro cuerpo.
En casos graves de arteriosclerosis, las
arterias se puedan estrechar y evitar el paso
de la sangre en nuestro organismo, mientras
que en casos menos graves, las arterias
comienzan a perder su elasticidad.
Piensa que tus arterias son como una pajilla por donde pasa jugo; al tener
arteriosclerosis, la pajilla se ira haciendo cada vez ms rgida y cada vez ms
estrecha, provocando que llegue menos jugo a su destino o que en el peor de los
casos deje de llegar
La mala alimentacin, llena de comidas rpidas y con grasa saturada, propician esta
enfermedad, al igual que llevar una vida sedentaria y sin actividad fsica que nos
ayude a quemar grasa y a bombear de forma constante sangre a nuestro cuerpo.
Adems, tener una vida estresante, sufrir de hipertensin o diabetes, el hbito de
fumar o beber en exceso, tambin favorecen la arteriosclerosis.

3.-

Describa cmo se produce la biosntesis de colesterol dentro del

organismo?
El proceso tiene 5 pasos importantes:
1. Las acetil-CoAs se convierte en 3 hidroxi-3- metilglutaril-CoA (HMG-CoA)
2. La HMG-CoA se convierte en mevalonato
3. El mevalonato se convierte en la molcula basada en isopreno, el isopentenil
pirofosfato (IPP), con la perdida concomitante de CO2

4. El IPP se convierte en escualeno

5. Y el escualeno se convierte en colesterol.

4.- Explique que es el colesterol VLDL y como se calcula?

VLDL son las siglas en ingls que corresponden a lipoprotena de muy baja densidad
(LMBD en espaol). Las lipoprotenas son sustancias hechas de colesterol,
triglicridos y protenas. Ellas llevan el colesterol, los triglicridos y otros lpidos
(grasas) a diferentes partes del cuerpo.
La VLDL es uno de los tres principales tipos de lipoprotenas. La VLDL contiene la
cantidad ms alta de triglicridos. Este se considera un tipo de "colesterol malo",
debido a que ayuda a que el colesterol se acumule en las paredes de las arterias.

Para medir la cantidad de VLDL en su sangre se utiliza un examen de laboratorio.

Forma en que se realiza el examen
Se necesita una muestra de sangre. Para obtener informacin sobre la forma en que
se hace esto, ver el artculo: venopuncin.
Lo que se siente durante el examen
Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor
moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura.
Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.
Razones por las que se realiza el examen
El mdico puede ordenar este examen para determinar el riesgo de cardiopata. El
aumento en los niveles de VLDL est ligado a ateroesclerosis, lo cual puede llevar a
que se presente cardiopata coronaria.
Este examen puede estar incluido en un perfil de riesgo coronario.
Resultados normales
El nivel de colesterol VLDL normal est entre 2 y 30 mg/dL.
Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre laboratorios.
Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su
examen.
Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los resultados de
estas pruebas. Algunos laboratorios usan diferentes medidas o pueden evaluar
distintas muestras.
La primera frmula bsica para crear una estimacin VLDL es la siguiente: colesterol
total - HDL - LDL = VLDL

5.- Qu rol cumplen los triglicridos y como se realiza su metabolismo?

Definicin
Los triglicridos son una clase de lpidos que se forman por una molcula de glicerina.
Tambin conocidos como triacilgliceroles o triacilglicridos, los triglicridos forman
parte de las grasas.

Anlisis de los triglicridos

Un nivel alto de triglicridos en el torrente sanguneo se considera una seal de
advertencia para la salud cardiovascular. La hiperlipidemia es una condicin que
puede estar asociada con un recuento alto de una o la totalidad de los diversos lpidos
discutidos aqu. Tambin puede ser un precursor de la indicacin o de una variedad de
enfermedades

crnicas.

Estas

incluyen

arteriosclerosis,

diabetes,

hipotiroidismo,

enfermedades
ciertos

cardiovasculares,

trastornos

pancreticos.

Tpicamente, un alto nivel de VLDL corresponde a un alto nivel de triglicridos en la

sangre. Hay aproximadamente una quinta parte del nmero de molculas de VLDL, ya
que hay triglicridos en la sangre en cualquier momento dado.
Esto significa que la segunda forma de calcular el nmero de VLDL es: Triglicridos / 5
= VLDL