Anda di halaman 1dari 39

AKADEMI KEBIDANAN

MUHAMMADIYAH KOTIM

PEMERIKSAAN
BAKTERI
Oleh :
dr. Chinda Liaska Indah

INDIKATOR
Mahasiswa dapat menjelaskan
pemeriksaan jenis bakteri
Mahasiswa dapat menjelaskan alat yang
diperlukan dan cara pewarnaan.

Pengertian Bakteri
Bakteri merupakan organisme yang
sangat kecil. Itu berarti bahwa jasad renik
ini tipis sekali sehingga tembus cahaya.
Akibatnya, bakteri ini akan sangat sulit
untuk dilihat dengan teliti dibawah
mikroskop. Oleh karena itu, agar dapat
dilihat dengn jelas maka bakteri tersebut
haruslah diwarnai/dilakukan pewarnaan
terlebih dahulu.

Dasar Mengapa Bakteri Harus


diwarnai?
Mikroorganisme sulit dilihat
dengan Mikroskop Cahaya,
karena tidak mengadsorbsi
ataupun membiaskan
cahaya.

PEWARNAAN GRAM

Sejarah Pewarnaan Gram

Metode
Pewarnaan
Bakteri secara Gram
pertama kali ditemukan
oleh salah satu ilmuwan
dari Denmark bernama
Hans Christian Gram
(1853-1938)
yang
mengembangkan teknik
ini pada tahun 1884
untuk
membedakan
antara
pneumokokus
dan bakteri Klebsiella
pneumoniae.

Pengertian Pewarnaan Gram


Pewarnaan Gram atau metode
Gram
adalah
suatu
metode
empiris
untuk
membedakan
spesies bakteri menjadi dua
kelompok besar, gram-positif dan
gram-negatif, berdasarkan sifat
kimia dan fisik dinding sel mereka.

Tujuan Pewarnaan
Gram
1. Untuk memahami cara
identifikasi bakteri secara
Gram.
2. Membagi Bakteri menjadi
bakteri Gram Negatif (-) dan
Bakteri Gram Positif (+)

Bagan Kerja

Alat dan Bahan


Alat
Kaca alas datar/ kaca
obyek
Lampu bunsen
Ose
Pipet
Kaca penutup
Mikroskop

Bahan
Spesimen bakteri
dalam suspensi
Larutan kristal violet
Larutan lugol
Larutan alkohol
Larutan karbol fuchsin
Air

Kaca alas datar dibersihkan


dengan kapas + alkohol 70%

Disiapkan untuk di letakkan


spesimen pemeriksaan

Dikeringkan

Suspensi
Bakteri

Ose

Membuat ulasan

Diteteskan kristal violet 2-3


tetes selama 30 detik

Proses fiksasi di lampu


bunsen

Diberi lugol 3 tetes selama


30 detik

Dibilas dengan air suling

Dibilas dengan air suling

Dicuci dengan aseton alkohol


selama 10 detik

Diteteskan zat warna karbol


fuchsin 2 tetes selama 30
detik

Dibilas dengan air suling


sampai tetes terakhir jernih

Ditetesi 1 tetes minyak


imersi kemudian ditutup dgn
kaca penutup

Dikeringkan dengan kertas


saring

Diamati pada mikroskop


perbesaran 1000x

INTERPRETASI
Hasil pewarnaan :
Bakteri Gram positif : ungu
Bakteri Gram negatif : merah

Kelebihan dan kekurangan


pewarnaan Gram
Kelebihan :
Pewarnaan Gram penting sebagai pedoman awal untuk
memutuskan terapi antibiotik, sebelum tersedia bukti
definitif bakteri penyebab infeksi (kultur dan tes kepekaan
bakteri terhadap antibiotik). Hal ini karena bakteri Gram
positif dan negatif mempunyai kepekaan yang berbeda
terhadap berbagai jenis antibiotika.
Kadang-kadang morfologi bakteri yang telah diwarnai Gram
mempunyai makna diagnostik. Misalnya pada pemeriksaan
Gram ditemukan Gram negatif diplococci intraseluler dari
spesimen pus (nana) uretral, maka memberikan
presumptive diagnosis untuk penyakit infeksi gonore.

Kekurangan :
Pewarnaan Gram memerlukan
mikroorganisme dalam jumlah banyak yakni
lebih dari 104 per ml. Sampel yang cair
dengan jumlah kecil mikroorganisme misalnya
cairan serebrospinal, memerlukan prosedur
sentrifuge dulu untuk mengkonsentrasikan
mikroorganisme tersebut. Pellet (endapan
hasil sentrifuge) kemudian dilakukan
pengecatan untuk diperiksa secara
mikroskopis.

Macam- macam bakteri pewarnaan


gram

Bakteri gram
positif

Bakteri gram
negatif

Pengertia
n
Morfolo
gi
Dinding
sel

Pengertian Bakteri Gram Positif


Bakteri gram positif adalah sekelompok
bakteri yang mempertahankan senyawa
iodin kompleks saat proses pencucian
dengan dekolorizer karena mempunyai
dinding peptidoglikan yang tebal.

Pengertian Bakteri Gram Negatif


Bakteri gram-negatif adalah sekelompok
bakteri yang melepaskan senyawa iodin
kompleks saat proses pencucian dengan
decolorizer karena mempunyai dinding
peptidoglikan yang tipis, tetapi mengikat zat
warna lain yaitu karbolfuchsin.

Morfologi Sel
Bakteri memiliki bentuk yang sangat
bervariasi.
Bentuk sel bakteri meliputi:
kokus (bulat)
basil (batang)
spirilum (spiral)
filamen
Bentuk sel menunjukkan karakteristik
spesies bakteri tersebut, tetapi dapat
bervariasi tergantung kondisi
pertumbuhannya. Beberapa bakteri

Dinding sel
Fungsi dinding sel pada prokaryot,
adalah melindungi sel dari tekanan
dari lingkungan di luarnya. Dinding sel
bakteri mengandung peptidoglikan
yang terletak di luar membran
sitoplasmik. Peptidoglikan berperan
dalam kekerasan dan memberikan
bentuk sel. Ada dua tipe utama bakteri
berdasarkan kandungan peptidoglikan
dinding selnya yaitu Gram positif dan
Gram negatif.

Dinding sel Gram Positif


Karakteristik
utamanya
adalah
tebalnya
lapisan
peptidoglikan
pada
dinding sel. Akibatnya,
pada saat prosedur
pewarnaan
Gram,
meninggalkan warna
ungu.
Dinding
sel
Gram
positif
biasa
ditemukan
pada
Actinobacteria
dan
Firmicutes.

Dinding sel Gram Negatif


Tidak
seperti
dinding sel Gram
positif,
dinding
sel Gram negatif
memiliki lapisan
peptidoglikan
yang tipis. Hal ini
menyebabkan
lunturnya warna
ungu
saat
disiram etanol.

PEWARNAAN
BAKTERI TAHAN
ASAM
(ZIEHL-NEELSEN)

Pengertian Pewarnaan Bakteri


Tahan Asam
Pewarnaan
ZN
atau
pewarnaan
bakteri tahan asam adalah suatu
metode empiris untuk membedakan
spesies bakteri menjadi dua kelompok
besar, bakteri tahan asam dan tidak
tahan asam, berdasarkan sifat kimia
dan fisik dinding sel mereka.

Tujuan Pewarnaan Bakteri


Tahan Asam (BTA)
1. Untuk memahami cara
identifikasi bakteri secara
pewarnaan tahan asam.
2. Membagi Bakteri menjadi
bakteri tahan asam dan Bakteri
tidak tahan asam

Alat dan Bahan


Alat

Bahan

Kaca alas datar/ kaca


obyek
Lampu bunsen
Ose
Pipet
Kaca penutup
Mikroskop

Spesimen bakteri
dalam suspensi
Larutan karbol fuchsin
Larutan alkohol
Larutan methylen blue
Air

Kaca alas datar dibersihkan


dengan kapas + alkohol 70%

Disiapkan untuk di letakkan


spesimen pemeriksaan

Dikeringkan

Suspensi
Bakteri

Ose

Dibilas dengan air suling


sampai tetes terakhir jernih

Ditetesi 1 tetes minyak


imersi kemudian ditutup dgn
kaca penutup

Dikeringkan dengan kertas


saring

Diamati pada mikroskop


perbesaran 1000x

INTERPRETASI

INTERPRETASI

TERIMA KASIH