Anda di halaman 1dari 1

1.

Jelaskan perbedaan teknik Western, Northern dan Southern Blotting
Southern : Teknik ini mentransfer DNA ke kertas NC dengan menggunakan
prosedur aliran pelarut. Caranya yaitu dengan menempatkan gel elektroforesis ke
kertas matriks yang direndam buffer dan berada di atas sesuatu seperti spons
yang telah dibasahi dengan buffer. Membran tersebut diletakkan di atas gel dan
ditumpuk pula beberapa kertas peresap di atasnya. Buffer kemudian akan
mengalir pelan-pelan ke membran, demikian pula dengan gel yang membawa
molekul ke kertas membran, sementara gelnya diserap oleh kertas peresap.
Fragmen DNA yang spesifik dideteksi dengan menggunakan pelacak. Pelacak
biasanya merupakan DNA yang dimurnikan dan bisa ditandai dengan aktifitas
spesifik radionukletida. Lokasi sinyal yang terlihat setelah autradiografi membuat
kita dapat menentukan ukuran dari fragmen DNA tersebut.
Western : Teknik untuk mendeteksi protein spesifik pada sampel jaringan yang
homogenat ataupun dari suatu ekstraksi berdasarkan kemampuan protein tersebut
berikatan dengan antibodi. Teknik ini menggunakan gel elektroforesis untuk
memisahkan protein berdasarkan panjang polipeptida atau berdasarkan struktur
3D-nya. Protein tersebut kemudian ditransfer ke sebuah membran, biasanya
nitroselulosa atau PVDF, dimana mereka kemudian akan dilacak dengan
menggunakan antibodi yang spesifik kepada protein target.
Northern : Tekniknya sama dengan Southern Blot, namun menggunakan kertas
DBM dan biasanya mendeteksi RNA.