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PRACTICA N 7

IDENTIFICACIN DE CUERPOS CETNICOS EN ORINA

OSCAR ALMENTERO KERGUELEN


YESSICA MERCADO
CAROLINA ORTIZ SALGADO
ALEJANDRA SUAREZ BENEDETTI

JAVIER MARTINEZ GUZMAN


QUIMICO

UNIVERSIDAD DE CORDOBA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
TEC. EN REGENCIA DE FARMACIA
FUNDAMENTO DE BIOQUIMICA
MONTERIA-CORDOBA
2015

INTRODUCCIN

Cuando la glucosa no est fcilmente disponible en el organismo a consecuencia


de no existir un aporte simultneo de glucosa por la alimentacin, es estos casos
el hgado se empobrece en glucgeno y la glucogenlisis es incapaz de
compensar el desgaste perifrico de glucosa. Sucede lo mismo en el ayuno
prolongado; un mecanismo de adaptacin al ayuno es la formacin de cuerpos
cetnicos sintetizados a partir de los cidos grasos y producidos nicamente en el
hgado; estos se utilizan como fuente de energa
En caso de ayuno hay cambios que requieren de la adaptacin del organismo y
esto trae como consecuencia modificaciones en los patrones metablicos y por lo
tanto en las molculas utilizadas como combustibles.
Durante las primeras etapas del ayuno se realizan cambios hormonales, se deja
de liberar insulina y se aumenta la liberacin de glucagn, lo que ocasiona un
aumento en la Glucogenlisis, estimulacin de la Liplisis, inhibicin de la sntesis
de triacilglicridos, aumento de la Beta - oxidacin y produccin de cuerpos
cetnicos (Cetognesis), si el ayuno es prolongado se presenta un desequilibrio
entre el metabolismo de carbohidratos y el de lpidos lo que ocasiona que los
niveles de cuerpos cetnicos se eleven en sangre y sean eliminados por orina
donde son detectados fcilmente.

OBJETIVOS

Objetivo General

Identificar cuerpos cetnicos en la orina mediante diferentes pruebas.

Objetivos Especfico

Determinar la presencia de cuerpos cetnicos en orina, mediante pruebas


cualitativas para cada uno de ellos.
Familiarizarse con algunos protocolos empleados en laboratorios clnicos
para el reconocimiento de cuerpos cetnicos

TEORA RELACIONADA

Los cuerpos cetnicos son los cidos acetoactico, la acetona y el cido hidrxibutirico.
En la cetsis, hallamos un aumento de estas sustancias en la sangre y en la orina.
Bajo buenas condiciones de salud, los cuerpos cetnicos se forman en el hgado y
son completamente metabolizados, de tal manera que solo cantidades
insignificantes aparecen en la orina. Por el contrario, en casos de diabetes,
inanicin, vmitos con deshidratacin y despus de la exposicin al fro y/o
ejercicio vigoroso, los cuerpos cetnicos pueden encontrarse en cantidades
apreciables en la orina, lo cual permite su determinacin cualitativa.
La determinacin de acetona (Mtodo de Imbert), se fundamenta en la formacin
de un ferropentacianuro con el derivado isonitrado de la acetona, la determinacin
de acido acetoactico (Mtodo de Gerhrdt), se basa en la aparicin de una
coloracin rojo-vinosa con el cloruro frrico y en el Mtodo de Hart, el acido hidrxibutirico es transformado en acetona, la cual se identifica mediante el
reactivo de Imbert.
Los cuerpos cetnicos desempean un papel importante en la homeostasis del
organismo. En estados en los que la glucemia es baja (como en el ayuno o en
dietas pobres en glcidos) o en casos donde la glucosa no puede ser utilizada
(como en la diabetes), la concentracin de cidos grasos y cuerpos cetnicos en
el plasma aumenta. Ambas sustancias sustituyen a la glucosa como combustible
favorito para obtener energa por parte de la clula. Conviene recordar que la
gluconeognesis, en animales, utiliza distintos precursores como aminocidos,
lactato, glicerol o cido pirvico para conseguir fabricar glucosa, pero que los
cidos grasos no pueden convertirse en azcares.
As, por ejemplo, clulas como los eritrocitos o las constituyentes del cerebro
obtienen su energa mayoritariamente de la glucosa, ya que sus mitocondrias
tienen poca capacidad para oxidar los cidos grasos y en situaciones de ayuno o
casos de diabetes los cuerpos cetnicos constituyen unos magnficos sustratos
energticos sustitutivos de la glucosa. Para determinar estos cuerpos en el
organismo se realiza en la orina.
Esta prueba se usa para medir el nivel de cetonas en su orina. Normalmente, su
cuerpo quema azcar para obtener energa. Sin embargo, si usted tiene diabetes,
es posible que no tenga suficiente insulina para que el azcar de su torrente

sanguneo se use como combustible. Cuando sucede esto, su cuerpo quema


grasas en lugar de quemar azcar y produce sustancias denominadas
cetonas. Las cetonas terminan en su sangre y su orina.
Tener cantidades pequeas de cetonas en su cuerpo es normal. Sin embargo,
tener niveles altos de cetonas podra ocasionar enfermedades graves o la muerte.
Las pruebas de deteccin de cetonas evitan que esto suceda.

PROCEDIMIENTO

DETERMINACIN DE ACETONA:
A 5 ml de orina, agregamos 0.5ml de Nitroprusiano de sodio disuelto al 5% en
acido actico al 50%, adicionamos 0.5ml de amoniaco por las paredes del tubo, la
aparicin de un anillo rojo violceo en l contacto de los lquidos, es indicativo de la
presencia de acetona.

DETERMINACIN DE ACIDO ACETOACTICO.


A 5 ml de orina le adicionamos unas gotas de cloruro frrico, en presencia de
acido acetoactico se produce una coloracin rojo-vinosa.

DETERMINACIN DE ACIDO -HIDROXIBUTRICO


En una capsula de porcelana se mezclaron 10ml de agua y 10 ml de orina, se
acidifica con unas 5 gotas de acido actico y se caliento en una estufa hasta
reducir el volumen a la mitad. Con este calentamiento se eliminan la acetona y el
acido acetoactico, al contenido de la capsula se le agregaron 10ml de agua y se
transfiere en partes iguales a dos tubos de ensayo, uno de estos tubos servir
como control, al otro se le adiciona 1ml de perxido de hidrogeno al 10% y se
calienta en bao de Mara por 5 min, se dejo enfriar y finalmente se practica la
prueba de Imbert a ambos tubos.

MATERIALES Y REACTIVOS

2 tubos de ensayo
1 gradilla
2 pipetas
1 beaker de 250ml
1 capsula de porcelana
1 pinza para crisol
1 pinza para tubos de ensayo
Agua destilada
Orina de diabtico (traer)
Acido actico glacial
Amoniaco
Cloruro frrico al 10%
Perxido de hidrogeno al 10% Nitroprusiano de sodio al 5% en CH3COOH
al 50%

ANALISIS DE RESULTADO

DETERMINACION DE ACETONA:
En primera instancia se procedi a depositar en un
tubo de ensayo una muestra de 5 ml de orina la cual
fue mezclada con 0,5 ml de nitroprusiato de sodio al
5% en cido actico al 50%; mezcla que una vez
finalizada, mostro un cambio en su coloracin, esta se
torn en un tono un poco ms amarilla que en su
estado inicial, tampoco se present ningn tipo de
precipitado ni turbidez en el medio, de igual forma la
muestra se mantuvo todo el tiempo en su estado
lquido aun despus de un tiempo considerable.

Se observaron los cambios y se procedi a realizar la siguiente parte de esta


prueba.

Para esta parte; por sobre las paredes del tubo se le


agregaron 0,5 ml de amoniaco y se pudo observar
que la muestra se torn un poco ms transparente
perdiendo un poco su tono amarillo presentado en el
paso anterior, esta vez se pudo observar que la
muestra se mostr con un tono un poco ms
transparente en su parte superior, no se observ
ningn tipo de precipitado ni turbidez en el medio y de
igual forma conservo todo el tiempo su estado lquido.

Segn los resultados observados en esta prueba, se puede determinar que,


debido a la ausencia del tono rojo violceo en el medio despus de cada mezcla,
no hay presencia de acetonas en esta mezcla.
DETERMINACION DE ACIDO ACETOACETICO:

Para esta prueba hemos disuelto 5 ml de orina, muestra a la cual se le han


agregado gotas de cloruro frrico en presencia de
cido acetoacetico, se agito levemente y se pudo
observar un cambio de coloracin en la muestra, sta
se torn en un tono blanco, algo espeso, mientras que
no se observ ningn tipo de precipitado ni turbidez en
el medio, se conserv todo el tiempo en estado lquido.
Segn los resultados obtenidos, se puede concluir que
esta prueba es negativa para la presencia de cido
acetoacetico en el medio, debido a que este no se
mostr en ningn momento en un tono rojo-vinoso.

DETERMINACION DE ACIDO -HIDROXIBUTIRICO:


Paso 1: para la determinacin de cido hidroxibutirico hemos disuelto 10 ml de agua y 10 ml de
orina y se le han adicionado 5 gotas de cido actico,
hasta este punto hemos observado una coloracin
amarilla en el medio aun despus de haberla puesto a
calentar en una estufa, no se present ningn tipo de
precipitado ni turbidez en el medio y se mantuvo todo el
tiempo en estado lquido.

Paso 2:con estos resultados obtenidos hemos


procedido a agregarle 10 ml de agua y se ha
transferido esta muestra en dos tubos de ensayos en
partes iguales, los cuales se han marcado TUBO A y
TUBO CONTROL; en donde al tubo A se le ha
agregado 1 ml de perxido de hidrogeno al 10%
mientras que el tubo CONTROL no se le ha agregado
nada; ambos se han calentado en bao de mara por
5 min, se dejaron enfriar para as proceder a
realizrsele la prueba de Imbert.
Una vez finalizada esta prueba se pudo observar que ambos presentaron una
coloracin amarilla en el fondo del tubo, llegando hasta la parte media de la
muestra, ya en la parte superior se mostr un tono un poco ms transparente, el

medio se mantuvo todo el tiempo en estado lquido y no se present ningn tipo


de precipitado ni turbidez en la muestra.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Qu otro tipo de sustancias pueden determinarse en la orina por un


metabolismo anormal de lpidos.
Cristales, albumina, acetona, pigmentos y sales

Acido 5-hidroxindoloacetico
Glucosa
Electrolitos urinarios
Urea
Fenilacetona
17- corticosteroides
Oxalato
Acido acetoactico
Acido B- hidrxibutirico
Nitroprusiano de sodio.

2. Qu es la cetsis y la Cetonuria.
Cetosis: es un estado del organismo que se produce cuando este no tiene
suficientes hidratos de carbono para obtener energa y comienza a utilizar las
grasas para obtener energa. El proceso fue descubierto por el doctor Stephen
Moody en 1969.
En estado de cetosis, el cuerpo quema la grasa y, al convertirla en energa para
funcionar, el hgado y los riones generan unas sustancias llamadascuerpos
cetnicos. Estos cuerpos cetnicos son expulsados en la orina y el aliento. El
resultado suele ser una prdida de peso al consumir el cuerpo las reservas de
grasa ms rpidamente.
Algunos sntomas de la cetosis pueden ser:
Presencia de cetonas en la orina, aumentando el olor de esta.
Halitosis, al eliminar los cuerpos cetnicos por el aliento.
Dolor de cabeza y/o mareo, debido a la escasez de glucosa para que
el cerebro la utilice.
Deshidratacin
La cetosis se puede producir al padecer enfermedades como la diabetes mellitus
tipo 1, consumo excesivo de alcohol o dietas bajas en hidratos de carbono.
Aunque pueda tener el beneficio de la prdida de grasa en personas con
sobrepeso este proceso puede ser peligroso y causar problemas de salud si se
prolonga en el tiempo. En cualquier caso es altamente recomendable consultar
con un mdico si cree que puede entrar en este estado.

Cetonuria: est generalmente asociada a la cetoacidosis diabtica o al ayuno


prolongado. NO es igual a la cetoacidosis (que es una cantidad de cetonas tan
grande que vuelve la sangre acdica).
Refleja una alteracin en el metabolismo de los hidratos de carbono (CHO) como
fuentes de energa y una movilizacin de los depsitos lipdicos (cidos grasos
libres) que el hgado transforma en cuerpos cetnicos para su posterior utilizacin
como fuente alternativa de energa. Cuando las clulas corporales no pueden
disponer de glucosa como fuente de energa, emplean las grasas. Como
consecuencia de la combustin de estas, se obtienen los cuerpos cetnicos. En el
mercado existen tiras reactivas que son tiles para monitorear los niveles de
cuerpos cetnicos en la orina a travs la lectura visual de colores. Ayudan al
paciente diabtico a controlar mejor su condicin y a obtener informacin sobre el
metabolismo de los hidratos de carbono y de los lpidos, educndose al respecto.
Causas de cetonuria:

Metablicas Diabetes mellitus mal controlada (es decir, la hiperglucemia


diabtica mal manejada) (generalmente DM1) Glucosuria renal (ocasional)
Enfermedades por almacenamiento del glucgeno
Factores dietticos Ayuno prolongado y la desnutricin Dietas con excesivo
contenido en grasas
Aumento de los requerimientos metablicos Hipertiroidismo Fiebre
Embarazo y lactancia

CONCLUSIN

BIBLIOGRAFA

http://es.slideshare.net/ingridjohanasierramejia/practica-cuerposcetnicos-9

http://www.avancesveterinaria.uchile.cl/index.php/ACV/article/viewFile/
4797/10979
http://www.aliciacrocco.com.ar/2014/03/cetosis-presencia-de-cuerposcetonicos-o-cetonas/
http://escuela.med.puc.cl/paginas/publicaciones/manualped/AnalOrina
.html
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003585.htm