Guia Micro Ali Mentos

GUIA DOS MTODOS DE
REFERNCIA
MICROBIOLOGIA PARA ALIMENTOS
*Disponveis no Brasil os meios desidratados.
BIOKAR Diagnstico coloca o seu conhecimento sua disposio para fornecer

solues simples e rpidas para atender suas necessidades.
Os laboratrios de microbiologia devem obedecer os critrios regulamentares que esto
em constante evoluo, e por isso que ns oferecemos este guia de mtodos de
referncia para ajud-lo diariamente na aplicao das normas s suas atividades.
SUMRIO:
B:
Bacillus cereus presuntivo
Contagem
Pgina 4
Bacillus cereus
Pesquisa e Contagem
Pgina 5-6
(suspeito em pequena quantidade)
C:
Campylobacter spp.
Pesquisa e Contagem Parte 1
Pgina 7
Campylobacter spp.
Pgina 8
Clostridium perfringens
Contagem
Pgina 9
Coliformes (Contagem de colnias)
Contagem
Pgina 10
Coliformes
Pesquisa e Contagem
Pgina 11
Coliformes presuntivo
Contagem
Pgina 11
Coliformes termorresistentes
Contagem
Pgina 12
(suspeito em pequena quantidade)
E:
Enterobacteriaceae
Pgina 13
Pgina 14
(com pr-enriquecimento)
Enterobacteriaceae
Enterobacteriaceae presuntivo
Contagem
Pgina 14
Escherichia coli -glicuronidase +
Contagem Parte 1
Pagina 15
Contagem Parte 2
Pagina 15
Contagem Parte 3
Pagina 16
Escherichia coli O157
Pesquisa
Pagina 17
Escherichia coli presuntivo
Contagem
Pagina 18
Leveduras e fungos
Contagem
Pgina 19
Leveduras e fungos
Contagem
Pgina 20
Contagem
Pgina 21
L:
(produtos com atividade de gua superior 0,95)
Leveduras e fungos
(produtos com atividade de gua inferior 0,95)
Listeria monocytogenes
Pesquisa Emenda 1
Pgina 22-24
Contagem Emenda 1
Pgina 25-26
Pesquisa Emenda 1
Pgina 27-28
S:
Salmonella spp.
Shigella spp.
Pesquisa
Pgina 29-30
Staphylococcus coagulase +
Contagem Parte 1 Emenda 1
Pgina 31
Contagem Parte 2 Emenda 1
Pgina 32
(gar com fibrinognio plasma de coelho)
Contagem Parte 2
Pgina 33-34
(carga bacteriana baixa)
V:
Vibrio parahaemolyticus e cholerae
Pesquisa Parte 1
Pgina 35
Vibrio spp.
Pesquisa Parte 2
Pgina 36
(outras espcies que no parahaemolyticus e cholerae)
Y:
Yersinia enterolitica patognica presuntiva
Pesquisa
Pgina 37-38
NORMAS GERAIS:
Contagem das bactrias anaerbicas sulfito-redutoras
Pgina 39
Contagem das bactrias mesfilas lticas
Pgina 39
Contagem das bactrias sulfito-redutoras
Pgina 40
Contagem dos microrganismos
Pgina 40
Contagem dos microrganismos (mtodo espiral)
Pgina 41
Contagem dos microrganismos psicrotrficos
Pgina 41
Preparao das amostras, da suspenso me e das diluies

decimais em razo das anlises microbiolgicas Parte 1: regras
gerais para a preparao da diluio me e das diluies decimais
Pgina 42

especficas para a preparao de produtos de carne e derivados.
Pgina 42

especficas para a preparao de produtos de peixe.
Pgina 43

especficas para a preparao de produtos que no sejam derivados
de leite, carne e peixe.
Pgina 43

especficas para a preparao de produtos de leite e derivados.
Pgina 44
MTODOS DE ROTINA:
Mtodos de rotina para a contagem de Staphylococcus coagulase

positiva (+) para a contagem de colnias 37C Parte 1: tcnica
com confirmao das colnias.
Pgina 45
Enumerao de fungos e leveduras por contagem de colnias 25C
Pgina 46
ANEXOS:
Anexo A: outras normas de referncia em microbiologia de alimentos
Pgina 47
Anexo B: mtodos alternativos rpidos em microbiologia de alimentos
Pgina 48-51
Para maiores informaes entre em contato com a gente.

NF EN ISO 7932
V08-023
Mtodo horizontal para a contagem de Bacillus cereus presuntivo

Tcnica por contagem de colnias 30C
(Julho 2005)
Princpios: - Semeadura em superfcie.
- Incubao em anaerobiose 30C por 18 48 horas.
- Confirmao pelos ensaios especficos.
Meio de Cultura
Diluente
gar seletivo para B. Cereus

(base segundo MOSSEL)
BK116HA frasco 500g
Total (1)
Soluo de polimixina B
Suplemento Seletivo Polimixina B
Emulso de gema de ovo
Emulso estril de gema de ovo

com polimixina B
BS05508 10 flaconetes 50 mL
Total

BM03808 20 placas 90 mm
Total
Meio completo (gar-gar MYP)
Meios de
confirmao
Conformidade
Se refere parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto ser analisado.

Meio base
Meios gar
BIOKAR Diagnstico
Meio base: base sangue n2
BS00708 10 flaconetes
gar Triptona-Soja
(base para gar sangue)
BK028HA frasco 500g
Sangue de carneiro desfibrinado
(1) A triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.
Total
Equivalente
-
NF EN ISO 21871
V08 - 063
Mtodos horizontais para a contagem de Bacillus cereus presuntivo

com baixa carga bacteriana
Tcnica do nmero mais provvel e mtodo de pesquisa
(Julho 2006)
Princpios: - Enriquecimento seletivo dos meios simples para dupla concentrao 30C
por 48 horas para o mtodo de contagem.
- Enriquecimento seletivo 30C por 48 horas para o mtodo de pesquisa.
- Isolamento seletivo em meio PEMBA 37C por 18 48 horas.
- Confirmao das colnias suspeitas por teste de hemlise ou por exame
microscpico.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio
enriquecimento
seletivo
Meio base Caldo de triptona, soja Caldo Triptona-Casena de soja

e polimixina (TSPB)
BK046HA frasco 500g
BK046GC embalagem 5 Kg
Soluo de polimixina B
Meio de base PEMBA
Soluo de Polimixina B
Meio seletivo
slido
Outros meios Meio de base MYP

seletivos
slidos
Total (1)
Total
Total

Total

com polimixina B
Total

BK116HA frasco 500g
Total (1)
Soluo de Polimixina B

Total

com polimixina B
Total

Total
Meio completo (gar MYP)
Soluo oxalato verde malaquita

Reagentes
para a
Soluo preto Sudan B
identificao
em
Xileno
microscpico
Soluo de Safranina
Total
Meio de
confirmao
Meio base: base sangue n2
gar Triptona-Soja
(base para gar sangue)
BK028HA frasco 500g

estril
Equivalente
-
NF EN ISO 10272-1
V08 - 026-1
Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de Campylobacter spp.
Parte 1: Mtodo de pesquisa.
(Janeiro 2006)
Princpios: - Enriquecimento seletivo em atmosfera microaerfila 37C por 4 6 horas,
em seguida 41,5C por 44 4 horas.
- Isolamento seletivo em dois meios em atmosfera microaerfila por 41,5C por
44 4 horas.
- Confirmao por repique em meio no seletivo, em seguida exames
microscpicos e ensaios bioqumicos e de crescimento apropriado.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Meio
de Caldo de Bolton
enriquecimento
Primeiro
meio de
isolamento
gar modificado cefoperazona,

com carbono e desoxicloreto
(mCCD)
Segundo
meio de
isolamento
A escolha pode ser feita pelo laboratrio de anlise.
Meio base gar Columbia com gar Columbia (base)

sangue
BK019HA frasco 500g
estril
Parcial (1)
Reagente para a pesquisa de

oxidase
Soluo de perxido de hidrognio

3%
Reagentes para a pesquisa da

hidrlise de hipurato
Caldo Brucella
Meios e
reagentes
para
confirmao
e
identificao
Meio de base gar Mueller gar MULLER-HINTON

Hinton com sangue
BK048HA frasco 500g
estril
Parcial (2)
-
Discos impregnados de cido

nalidixico (30 g), cefalotina (30
g) e acetato de indoxila
(1) Presena de polipeptona (17g), de peptona pancretica de corao (3g) e de extrato autoltico de
levedura (3g) em vez de extrato enzimtico de tecidos animais (23g).
(2) Presena de infuso de carne (2g) ao invs de extrato enzimtico de tecidos animais (6g) e de amido
solvel (1,5g).
NF EN ISO 10272-3
V08 - 026-3
Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de Campylobacter spp.
Parte 3: Mtodo de semi-quantitativo.
(Junho 2010)
Princpios: - Enriquecimento seletivo em atmosfera microaerfila 37C por 4 6 horas,
em seguida 41,5C por 44 4 horas.
- Isolamento seletivo em dois meios em atmosfera microaerfila por 41,5C por
44 4 horas.
- Confirmao por repique em meio no seletivo, em seguida exames
microscpicos e ensaios bioqumicos e de crescimento apropriado.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Meio
de Caldo de Bolton
enriquecimento lquido
Primeiro
meio de
isolamento
gar modificado cefoperazona,

com carbono e desoxicloreto
(mCCD)
Meio base gar Columbia com gar Columbia (base)

sangue
BK019HA frasco 500g
estril
Parcial (1)

oxidase

3%
Reagentes para a pesquisa da

hidrlise de hipurato
Caldo Brucella
Meios e
reagentes
para
confirmao
e
identificao
Meio de base gar Mueller gar MULLER-HINTON

Hinton com sangue
BK048HA frasco 500g
estril
Parcial (2)
-
Discos impregnados de cido

nalidixico (30 g), cefalotina (30
g) e acetato de indoxila
(1) Presena de polipeptona (17g), de peptona pancretica de corao (3g) e de extrato autoltico de
levedura (3g) em vez de extrato enzimtico de tecidos animais (23g).
(2) Presena de infuso de carne (2g) ao invs de extrato enzimtico de tecidos animais (6g) e de amido
solvel (1,5g).
NF EN ISO 7937
V 08 - 019
Mtodo horizontal para a contagem de Clostridium perfringens

Tcnica por contagem de colnias
(Fevereiro 2005)
Princpios:
- Semeadura da massa em uma camada dupla.

- Incubao por 20 2 horas 37C.
- Confirmao pela adio de um meio Lactose Sulfito (A); ou pela adio
de um meio nitrato motilidade e de um meio lactose gelatina (B).
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

Meio de base gar triptona-sulfito gar TSC (base)
com cicloserina (SC)
BK031HA frasco 500g
Meio de
cultura
Soluo de D-cicloserina
Suplemento
Seletivo
cicloserina 200mg
500mg
Reagente de Meio tioglicolato lquido

confirmao
(A)
de
bissulfito
DTotal
qsp
Caldo tioglicolato com resazurina

BK017HA frasco 500g
BM08208 50 tubos 10 mL
Meio lactose sulfito

Soluo
anidro
Total (1)
Caldo Lactose-Sulfito
BK140HA frasco 500g
Total (1)
Total (1)
dissdico
Soluo de citrato de ferro III

amoniacal
Sangue desfibrinado de cavalo ou

de ovelha

nitrito
Soluo de cido 5-amino-2naftaleno-sulfnico (5-2-ANSA)
Soluo de cido sulfanlico
Zinco pulverizado
Meio lactose gelatina
Reagente de Meio nitrato motilidade

confirmao
(B)
NF ISO 4834/FIL 73B

T 08-015
Mtodo horizontal para a contagem de coliformes

Mtodo por contagem de colnias
(Julho 2006)
Princpios: - Incubao 30 ou 37C por 24 horas.
- Confirmao se necessrio do nmero de colnias por fermentao da
lactose 30 ou 37C por 24 horas.
Meio de Cultura
Diluente
Meio seletivo
slido
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

gar Bile Vermelho Violeta
(VRBL)
gar lactose bile com cristal violeta BK152HA frasco 500g
e vermelho neutro (VRBL)
BM03408 10 flaconetes 100 mL
Caldo lactose bile verde brilhante
Meio de
confirmao

(BLBVB)
BK002HA frasco 500g
BM01108 50 tubos 10 mL com
cloro
Total
Total
NF ISO 4831/FIL 73B

V 08-016
Mtodo horizontal para a pesquisa e a contagem de coliformes
Tcnica do nmero mais provvel
(Outubro 2006)
Princpios: - Enriquecimento seletivo 30 ou 37C por 24 48 horas.
- Semeadura de um meio de confirmao a partir da cultura com desordem
e/ou uma produo de gs seguida de incubao 30 ou 37C por 24 48 horas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio de
enriquecimento
Caldo com triptose e lauril sulfato
Meio de
confirmao
Caldo Laurilsulfato-Triptose
BK010HA frasco 500g com cloro
cloro (concentrao simples)
BM09808 - 50 tubos 10 mL com
cloro (concentrao dupla)
(BLBVB)
BK002HA frasco 500g
cloro
Total (1)
Total (2)
(1) Presena de uma Triptona ao invs de digesto enzimtica de leite e protenas animais.
NF V 08 - 050
V 08 - 050
Contagem de coliformes presuntivos por contagem de colnias obtidas 30C
(Abril 2009)
Princpios: - Semeadura em profundidade.
- Incubao 30C por 24 2 horas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio de
cultura

(VRBL)
Total
NF V 08 - 060
V 08 - 060
Enumerao dos coliformes termorresistentes por contagem

de colnias obtidas 44C
(Abril 2009)
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio de
cultura

(VRBL)
Total
NF ISO 21528-1
V 08 - 039-1
Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de Enterobacteriaceae

Parte 1: pesquisa e contagem atravs da tcnica NPP com prenriquecimento.
(Dezembro 2004)
Princpios: - Pr-enriquecimento em meio no seletivo lquido 37 ou 30C (1) por 18
2 horas.
- Enriquecimento seletivo lquido 37 ou 30C (1) por 18 2 horas.
- Isolamento seletivo 37 ou 30C (1) por 18 2 horas.
- Confirmao por repique em meio no seletivo, testando a fermentao de
glicose e pesquisa de oxidase.
Meio de Cultura
Diluente
Soluo de
tamponada
gua
BIOKAR Diagnstico
EPT (20g/L) (2)

BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L) (3)
peptonada BK018HA frasco 500g
BM13108 3 embalagens 3 L
Conformidade
Total
Meio lquido
de enriquecimento
seletivo
Caldo tamponado bile, verde

brilhante com glicose (meio EE)
Caldo de enriquecimento para

Enterobactrias (EE segundo
MOSSEL)
BK127HA frasco 500g
Meio seletivo gar bile, cristal violeta e glicose

slido
gar VRBG
BK011HA frasco 500g
gar Nutriente
Meios e
reagentes de
confirmao
gar Nutriente 2%
BK185HA frasco 500g
Dicloridrato de N, N, N',Ntetrametil-p-fenileno diamina
Meio de
confirmao
gar glicose
gar Glicose
Parcial (4)
Total
Equivalente
Total (5)
(1) A temperatura de 30C pode ser escolhida quando a contagem das enterobactrias realizada num
contexto de um procedimento tecnolgico e compreende as enterobactrias psicotrficas.
(2) Frmula inclui 9,0 g/L de fosfato dissdico dodecaidratado (massa molar 358,14).
(3) Frmula inclui 3,56 g/L de fosfato dissdico anidro (massa molar 141,96).
(4) Frmula contm 10 g/L de peptona pancretica de carne ao invs de digesto enzimtica de tecidos
animais descritos e 15 mg/L de Verde Brilhante ao invs de 0,0135 g/L descrito.
NF ISO 21528-1
V 08 - 039-1
Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de Enterobacteriaceae

Parte 2: mtodo para contagem de colnias.
(Dezembro 2004)
Princpios: - Isolamento seletivo 37 ou 30C (1) por 18 2 horas.
- Confirmao por repique em meio no seletivo, testando a fermentao de
glicose e pesquisa de oxidase.
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Meio seletivo gar bile, cristal violeta e glicose

slido
gar VRBG
BK011HA frasco 500g
gar Nutriente
Meios e
reagentes de
confirmao
gar Nutriente 2%
BK185HA frasco 500g
Dicloridrato de N, N, N',Ntetrametil-p-fenileno diamina
Meio de
confirmao
Conformidade
gar Glicose
gar Glicose
Total
Equivalente
Total (5)
(1) A temperatura de 30C pode ser escolhida quando a contagem das enterobactrias realizada num
contexto de um procedimento tecnolgico e compreende as enterobactrias psicotrficas.
NF V 08 - 054
V 08 - 054
Pesquisa e Contagem dos esporos de microrganismos

anaerbicos sulfito- redutase (Clostridia)
Parte 1: Mtodo atravs de filtrao por membrana
(Abril 2009)
- Incubao 30 ou 37C por 24 2 horas.
Meio de Cultura
Diluente
Meio de
cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
gar bile com cristal violeta e

glicose (VRBG)
gar VRBG
BK011HA frasco 500g
BK011GC embalagem 5 K
Total
NF ISO 16649-1
V 08 - 031-1
Mtodo horizontal para a contagem de Escherichia coli -glicuronidase +
Parte 1: tcnica da contagem de colnias 44C atravs de membranas e de
5 bromo-4-cloro-3-indolil -D-glicuronato
(Agosto 2001)
Princpios: - Semeadura em membrana de celulose posto sobre o meio MMGA e
incubao por 4 horas 37C.
- Isolamento por transferncia da membrana sobre meio TBX, e incubao
por 18 24 horas 44C.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio de
cultura
Meio com glutamato modificado
Meio seletivo Meio triptona-bile-glicuronato (TBX) gar TBX
BK146HA frasco 500g

BK146HM frasco 100g
Total (1)
NF ISO 16649-2
V 08 - 031-2
Parte 2: tcnica da contagem de colnias 44C atravs de 5 bromo-4-cloro3-indolil -D-glicuronato
(Julho 2001)
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
BK146HA frasco 500g

BK146HM frasco 100g
Total (1)
NF ISO 16649-3
V 08 - 031-3
Parte 3: tcnica do nmero mais provvel utilizando 5 bromo-4-cloro-3indolil -D-glicuronato
(Dezembro 2005)
Princpios: - Enriquecimento seletivo 37 por 24 2 horas.
- Para cada tubo que apresentar uma produo cida, colocar em sub-cultura
44C por 20 24 horas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio de
cultura
Meio com glutamato modificado
Caldo de glutamato
BK186HA frasco 500g
Total
BK146HA frasco 500g

BK146HM frasco 100g
Total (1)
NF EN ISO 16654
V 08 - 032
(Julho 2001)
Mtodo horizontal para a pesquisa de Escherichia coli O157
Princpios: - Enriquecimento 41,5 1C por 6 horas seguido por repetio de 12 18

horas.
- Separao e concentrao dos microrganismos atravs de anticorpos bile
imunomagnticos revestidos por anti-E. Coli O157.
- Isolamento por cultura secundria de bile imunomagnticos com captura de
bactrias em gar MacConkey com sorbitol-cefixime telurito (CT-SMAC) e, a escolha do
laboratrio, um segundo gar de isolamento seletivo.
- Confirmao das colnias sorbitol negativas isoladas por CT-SMAC e das
colnias caractersticas de E. coli O157 isoladas no segundo meio de isolamento, para a
pesquisa de produo de indol e de aglutinao em soro anti-E. coli O157.
Meio de Cultura
Meio de
enriquecimento
Separao
imunomagntica
(IMS)
BIOKAR Diagnstico
Caldo Triptona de soja modificado

(mTSB)
Caldo Triptona de Soja

modificado (mTSB base)
BK150HA frasco 500g
Soluo de Novobiocina
Suplemento
Novobiocina (10 mg)
Suplemento
Novobiocina (40 mg)
Total (1)
Seletivo
Total
Seletivo
Bile imunomagntico anti-E. coli

O157
Tampo fosfato modificado 0,01

ml/L pH 7,2
gar MacConkey Sorbitol (CTSMAC base)

BK147HA frasco 500g (1)
Total (1)
Meio de base
Primeiro
meio de
isolamento
seletivo
Conformidade
Soluo de bissulfito dissdico

anidrotelurito de potssio
Suplemento cefixima-telurito
para gar CT-SMAC
Soluo de cefixima
BS03708 10 flaconetes qsp 500
mL
Segundo
meio
escolha do laboratrio
Meio de sub- gar nutriente

cultura
gar Nutriente 2%
BK18508 frasco 500g
Total (1)
Confirmao Meio triptona/triptofano
Caldo com Triptofano

BK163HA frasco 500g
Total
Confirmao Reagente
de
pesquisa de indol
Kovacs
para
Identificao Soluo salina

Soro anti-E. coli O157
sorolgica
NF ISO 7251
V 08 - 020 Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de Escherichia coli presuntiva
Tcnica do nmero mais provvel
(Julho 2005)
Princpios: - Enriquecimento seletivo 37 por 48 horas para o mtodo de pesquisa.
- Enriquecimento seletivo dos meios simples e dupla concentrao para o
mtodo de contagem.
- Para cada tubo que apresentar um aspecto turvo, opaco ou degenerao
gasosa, fazer uma sub-cultura em meio seletivo lquido 44C por 48 horas.
- Se uma degenerao de gs for observada, realizar uma sub-cultura com
gua peptonada livre de indol 44C por 48 horas.
- Exame da produo de indol resultante da degradao do triptofano dos
constituintes das peptonas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio de
enriquecimento
seletivo
Caldo lauril sulfato
Caldo Laurilsulfato-Triptose
BK010HA frasco 500g
cloro (concentrao simples)
BM09808 - 50 tubos 10 mL com
cloro (concentrao dupla)
Meio seletivo Caldo EC
Caldo EC
BK162HA frasco 500g
Exame para
a produo
de indol
gua peptonada sem indol
Exame para
a produo
de indol
Reagente
de
pesquisa de indol
Kovacs
gua Peptonada sem indol

BK084HA frasco 500g
para
Total (1)
Total (1)
Total (1)
NF V08-036
V 08 - 036
Mtodo horizontal para a contagem de leveduras e fungos que

se desenvolvem em produtos com baixa atividade de gua
(Maio 2003)
- Incubao 25C por 5 dias.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente

(1)
Meio de
cultura
Meio dicloran 18% com glicerina

(DG)
Meio Dicloran-Glicerina (DG 18)

(base)
BK170HA frasco 500g
Total (2) (3)
(1) A adio de Tween 80 ao meio lquido de diluio escolhido, a uma concentrao de 0,033 g/L, pode
facilitar a enumerao dos fungos.
(2) A forma desidratada necessita da adio de 220 g de glicerina por litro de gar base.
NF ISO 21527-1
V 08 - 040-1
Mtodo horizontal para a contagem de leveduras e fungos

Parte 1: Tcnica para contagem de colnias em produtos
com atividade de gua superior 0,95
(Novembro 2008)
- Incubao 25 1C por 5 dias em anaerobiose.
Meio de Cultura
Diluente
Meio de
cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

(1) (2)
gua peptonada 0,1%
gua Peptonada
Meio dicloran-rosa bengalacloranfenicol
gar Dicloran-Rosa BengalaCloranfenicol

BK198HA frasco 500g
(7)
Total (3)
Total
Adio facultativa de cloridrato de

clortetraciclina (4)
Adio facultativa de elementos

trao (5)
Adio facultativa de Tergitol (6)
(2) Exceto em casos de uma preparao especfica de amostra para o ensaio, recomendado a utilizao
de gua peptonada 0,1% (concentrao em massa) como diluente.
(4) Quando a proliferao bacteriana pode representar um problema, recomendada a utilizao de
cloranfenicol (50 mg/L) e clortetraciclina (50 mg/L).
(5) Para que os fungos apresentem toda a sua morfologia, 1 mL de uma soluo de elementos trao
(ZnSO4.7H2Og; CuSO4.5H2Og; qsp 100 mL H2O) pode ser adicionada 1L de meio.
(6) Afim de evitar a proliferao de certos microrganismos (Mucoraceae) recomendada a adio de
Tergitol (1 mL/L) ao meio de cultura.
(7) A frmula completa inclui 50 mg/L de cloranfenicol, 50 mg/L de cloridrato de clortetraciclina, 1 mg/L de
ZnSO4.7H2Og; CuSO4.5H2Og e 1mL/L de tergitol.
NF ISO 21527-2
V 08 - 040-2
Mtodo horizontal para a contagem de leveduras e fungos

Parte 2: Tcnica para contagem de colnias em produtos
com atividade de gua inferior 0,95
(Novembro 2008)
- Incubao 25 1C por 5 7 dias em anaerobiose.
Meio de Cultura
Diluente
Meio de
cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

(1) (2) (3)
gua peptonada 0,1%
gua Peptonada
Meio dicloran 18% com glicerina

(DG)
Meio Dicloran-Glicerina (DG 18)

(base)
BK170HA frasco 500g
Total (4)
Total (4) (5)
Adio facultativa de cloridrato de

clortetraciclina (6)
Adio facultativa de elementos

trao (7)
(2) A utilizao de um diluente que comporte uma quantidade suficiente de soluto (20 30% de glicerina ou
de D-glicose) recomendada para reduzir o choque osmtico dos fungos xerfilos e das leveduras
osmfilas quando as diluies em srie so realisadas.
(3) Exceto em casos de uma preparao especfica de amostra para o ensaio, recomendado a utilizao
de gua peptonada 0,1% (concentrao em massa) como diluente.
(5) A apresentao comercial desidratada necessita da adio de 220 g de glicerina por litro de gar abse.
(6) Quando a proliferao bacteriana pode representar um problema, recomendada a utilizao de
cloranfenicol (50 mg/L) e clortetraciclina (50 mg/L).
(7) Para que os fungos apresentem toda a sua morfologia, 1 mL de uma soluo de elementos trao
(ZnSO4.7H2Og; CuSO4.5H2Og; qsp 100 mL H2O) pode ser adicionada 1L de meio.
NF EN ISO 11290-1
V 08 - 028-1
Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de

Parte 1: Mtodo de pesquisa.
(Fevereiro 1997)
Princpios: - Enriquecimento primrio em meio seletivo com concentrao reduzida de
agentes seletivos 30C por 24 horas.
- Enriquecimento secundrio em meio seletivo lquido com concentrao
completa de agentes seletivos 35 ou 37C por 48 horas.
- Isolamento seletivo 30, 35 ou 37C e exame aps 24 horas e, se
necessrio, aps 48 horas.
- Confirmao por meio de ensaios bioqumicos, fisiolgicos e
morfolgicos apropriados.
v
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Caldo Demi-Fraser (base sem

citrato de ferro III amoniacal)
Soluo de cloreto de ltio
BK173HA frasco 500g
Soluo de sal de sdio de cido
nalidxico
citrato de ferro III amoniacal, nem
cido nalidxico, nem acriflavina)
Soluo de cloridrato de acriflavina BK133HA frasco 500g
Conformidade
Caldo Demi-Fraser (meio de base)
Meio de
enriquecimento
seletivo
primrio
Suplemento Seletivo para Caldo

Demi-Fraser
BS03008 10 flaconetes qp 500
mL
BS03208 8 flaconetes qsp 2,25L
amoniacal
Soluo estril de Citrato frrico

amoniacal 5%
BS06208 7 tubos 10 mL
Meio completo
Caldo Demi-Fraser (pronto para

uso)
Total
Total
Total (1)
Caldo Fraser (meio de base)
Meio de
enriquecimento
seletivo
secundrio
Caldo Fraser (base sem citrato

de ferro III amoniacal)
Soluo de cloreto de ltio
BK115HA frasco 500g
Caldo Fraser (base sem citrato
Soluo de sal de sdio de cido
de ferro III amoniacal, nem cido
nalidxico
nalidxico, nem acriflavina)
BK133HA frasco 500g
Soluo de cloridrato de acriflavina BK133GC embalagem 5 Kg
Total (1)
Suplemento Seletivo para Caldo

Fraser
BS03108 10 flaconetes qp 500
mL
Total (1)
Total

amoniacal
Meio completo
Meio de
isolamento
seletivo

amoniacal 5%
Caldo Fraser (pronto para uso)
Primeiro meio: gar Oxford
gar OXFORD (base)

BK110HA frasco 500g
Suplemento para gar Oxford
Suplemento Seletivo para gar

OXFORD (CCCFA)
mL
Segundo meio: gar PALCAM
gar PALCAM (base)

BK145HA frasco 500g
Total
Total (1)
Total (2)
Total
Total (2)
Soluo de sulfato de polimixina B

Soluo de cloridrato de acriflavina PALCAM
Soluo de ceftazidima de sdio
mL
pentaidratada
BS04908 8 flaconetes qsp 2,25 L
Meio completo
Confirmao
Caldo triptona de soja extrato de

levedura (TSYEB)
Sangue desfibrinado de ovelha
Caldo para a Meio de base

utilizao de
Soluo de carboidratos
carboidratos
gar motilidade
Tampo
Total (2)
gar triptona de soja extrato de

levedura (TSYEA)
gar sangue Meio de base

de ovelha
Meio e
cultura de
CAMP
gar PALMAN (pronto para uso)

Total
Meio de base
Meio com sangue de ovelha
Triptona Soja (base para gar

sangue)
BK028HA frasco 500g
-
Equivalente
-

sangue)
BK028HA frasco 500g
-
Equivalente
-
PBS
NF EN ISO 11290-1/A1
V 08 028-1/A1
NF EN ISO 11290-1 Parte 1 EMENDA 1:
Modificao dos meios de isolamento, para a pesquisa de hemlise
e introduo de dados sobre a preciso
(Fevereiro 2004)
Meio de Cultura
Meio de
isolamento
seletivo
Primeiro meio: gar Listeria

segundo Ottaviani e Agosti.
Segundo meio: segundo o

laboratrio.
BIOKAR Diagnstico
COMPASS Listeria gar
BT00808 6 flaconetes 200 mL +
suplementos
-
Conformidade
Total (3)
(1) A frmula inclui 9,60 g/L de fosfato dissdico anidro ao invs de 12 g/L de L d'hidrogenofosfato dissdico
diidratado descrito.
(3) ALOA um exemplo de meio apropriado disponvel no mercado. Esta informao dada com a inteno
de utilizao da ISO 11290 e no significa que os meios no recomendados pela ISO que no foram citados
acima no devem ser utilizados.
NF EN ISO 11290-2
V 08 - 028-2
Mtodo horizontal para a pesquisa e contagem de

Parte 2: Mtodo de contagem.
(Agosto 1998)
Princpios: - Revivificao por 1 hora 20C.
- Semeadura em meio slido e incubao 35 ou 37 C e avaliao em 24 e
48 horas.
- Confirmao das colnias presuntivas de L. monocytogenes.
Meio de Cultura
Diluente
Conformidade

Soluo de gua peptonada
tamponada
Meio de
enriquecimento
seletivo
BIOKAR Diagnstico
Caldo Demi-Fraser (meio de base)
EPT (20g/L) (1)

BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L) (2)
BK018HA frasco 500g
citrato de ferro III amoniacal)
BK173HA frasco 500g
citrato de ferro III amoniacal, nem
cido nalidxico, nem acriflavina)
BK133HA frasco 500g

amoniacal

amoniacal 5%
Segundo meio: gar PALCAM
gar PALCAM (base)

BK145HA frasco 500g
Total (1)
Total (2)
Total
Total (1)
Soluo de sulfato de polimixina B
Meio de
isolamento
seletivo
Confirmao

Soluo de cloridrato de acriflavina PALCAM
Soluo de ceftazidima de sdio
mL
pentaidratada
Meio completo
gar PALMAN (pronto para uso)

Total
Total (1)
gar triptona de soja extrato de

levedura (TSYEA)
Caldo triptona de soja extrato de

levedura (TSYEB)
gar sangue Meio de base

de ovelha

sangue)
BK028HA frasco 500g
Equivalente
Sangue desfibrinado de ovelha
Caldo para a Meio de base

utilizao de
Soluo de carboidratos
carboidratos
gar motilidade
Meio e
cultura de
CAMP
Tampo
Meio de base
Meio com sangue de ovelha

sangue)
BK028HA frasco 500g
-
Equivalente
-
PBS
NF EN ISO 11290-1/A1
V 08 028-1/A1
NF EN ISO 11290-1 Parte 2 EMENDA 1:

Modificao do meio de isolamento
(Fevereiro 2004)
Meio de Cultura
Meio de
isolamento
seletivo
Primeiro meio: gar Listeria

segundo Ottaviani e Agosti.
BIOKAR Diagnstico
BT00808 6 flaconetes 200 mL +
suplementos
Conformidade
Total (3)

(2) A frmula inclui 9,60 g/L de fosfato dissdico anidro ao invs de 12 g/L de L d'hidrogenofosfato dissdico
diidratado descrito.
(3) ALOA um exemplo de meio apropriado disponvel no mercado. Esta informao dada com a inteno
de utilizao da ISO 11290 e no significa que os meios no recomendados pela ISO que no foram citados
acima no devem ser utilizados.
NF EN ISO 6579
V 08 - 013
Mtodo horizontal para a pesquisa de Salmonella spp.
(Dezembro 2002)
Princpios: - Pr-enriquecimento em meio no seletivo lquido 37 1C por 18 2
horas.
- Enriquecimento em meio seletivo lquido 41,5 1C e 37 1C por 24 3
horas.
- Semeadura em dois meios slidos, XLD e um outro meio slido apropriado, em
complemento do XLD.
- Incubao do primeiro meio 37 1C por 24 3 horas e do segundo meio
seletivo segundo as recomendaes do fabricante.
- Confirmao por meio de ensaios bioqumicos e sorolgicos apropriados.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Meio de pr- Soluo de gua peptonada

enriquecimen tamponada
to no
seletivo
EPT (20g/L) (1)

BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L) (2)
BK018HA frasco 500g
Caldo Rappaport-Vassiliadis Soja

Primeiro
(Caldo RVS)
meio de
enriquecimen
to seletivo
Caldo Rappaport-Vassiliadis Soja

(Caldo RVS)
BK148HA frasco 500g
Caldo Muller-Kauffmann com

Primeiro
tetrationato novobiocina (MKTTn)
meio de
(base)
enriquecimen
to seletivo

tetrationato novobiocina (base
MKTTn sem iodo, sem
novobiocina)
BK169HA frasco 500g
tetrationato novobiocina (base
MKTTn sem iodo)
BK028HA frasco 500g
Soluo de iodo-iodeto
Suplemento Seletivo
Novobiocina (10 mg)
mL
Suplemento Seletivo
Novobiocina (40 mg)
BS05608 8 flaconetes qsp 1L
Meio completo

tetrationato novobiocina (pronto
para uso)
Conformidade
Total
Total (3)
Total (4)
Total
Total
Meio de
isolamento
gar Xilose Lisina Desoxicolato

(XLD)
gar XLD (ISO 6579)

BK168HA frasco 500g
Total
O segundo meio a escolha do laboratrio.
Meio de sub- gar Nutriente

cultura
gar Nutriente 2%
BK185HA frasco 500g
Bm11808 50 tubos 18 mL
Reagente de gar citrato de ferro com 3

confirmao acares (gar TSI)
gar TSI
BK059HA frasco 500g
Total (4)
Total (4) (6)
gar Uria (Christensen) (base)
Soluo de uria
Meio para descarboxilao de

galactosidase
Soluo tampo
Soluo d'ONPG
Meio de Voges-Proskauer (VP)
Soluo de creatina
Soluo de 1-naftol em etanol
Soluo de hidrxido de potssio
Meio triptona-triptofano
Caldo Triptofano
BK163HA frasco 500g
Total (4)
Reagente de Kovacs
gar nutriente semi-slido
Soluo salina fisiolgica
(3) Frmula inclui cloreto de magnsio anidro ao invs da forma hexaidratada descrita.
(5) Sua qualidade intrnseca deve ser complementada por aquelas do gar XLD e permitir a deteco de
Salmonella lactose + (incluindo typhi e paratyphi).
(6) Triptose 14 g/L ao invs de 20 g/L de peptona descrito.
NF EN ISO 6579/A1
V 08 013/A1
NF EN ISO 6579 EMENDA 1 Anexo D:
Pesquisa de Salmonella spp. em fezes de animais e em amostras
ambientais em estado de produo primria
(Outubro 2007)
Meio de Cultura
Meio de
isolamento
seletivo
Meio semi-slido de RappaportVassiliadis modificado (MRSV)
BIOKAR Diagnstico
gar MRSV (ISO 6579)
BK191HA frasco 500g
Conformidade
Total
NF EN ISO 21567
V 08 *Disponveis
- 411
Mtodo
horizontal
para a pesquisa de Shigella spp.
no Brasil
os meios
desidratados.
(Maro 2005)
Princpios: - Enriquecimento seletivo em anaerobiose 41,5 1C por 16 20 horas.
- Isolamento em 3 meios de cultura diferentes 37 1C por 20 24 horas.
- Confirmao por ensaios bioqumicos e sorolgicos apropriados.
Meio de Cultura
Caldo Shigella
Meio de
enriquecimento
Meio de
isolamento
Reagentes
de
confirmao
(ensaios
bioqumicos)
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Suplemento Seletivo
Novobiocina (10 mg)
mL
Suplemento Seletivo
Novobiocina (40 mg)
BS05608 8 flaconetes qsp 1L
Total
gar MacConkey
gar MacConkey
BK050HA frasco 500g
Total (1)
gar Xilose Desoxicolato (XLD)
gar XLD (ISO 6579)

BK168HA frasco 500g
Total
gar Entrico Hektoen (HE)
gar Hektoen
BK067HA frasco 500g
Parcial
gar Nutriente
gar Nutriente 2%
BK185HA frasco 500g
Total (1)
gar Triplo Acar-Ferro (TSI)
gar TSI
BK059HA frasco 500g
Parcial (1)(3)
gar Nutriente semi-slido
gar Uria (base)
Soluo de Uria
Meio de descarboxilao de Llisina
Meio de descarboxilao de Lornitina
Reagente para ensaio de indol
Meio triptona/DL-triptofano
Reagente indol de Kovacs
Reagente galactosidase
Soluo tampo
Soluo salina
Caldo roxo de bromocresol
gar acetato de sdio
gar Citrato Christensen
Caldo Mucato
Caldo de ensaio
Caldo controle
Anti-soro de Shigella spp.

(2) Taxa de fucsina cida 40 mg/L, ao invs de 0,1g/L descrito.
(3) Taxa de triptona 14 g/L ao invs de 20 g/L da peptona descrita.
NF EN ISO 6888-1
V 08 - 014-1
Mtodo horizontal para a contagem de estafilococos coagulase +

(Staphylococcus aureus e outras espcies)
Parte 1: tcnica utilizando gar Baird-Parker
(Fevereiro 1999)
- Incubao 35 ou 37C (1) e leitura dos resultados em 24 e 48 horas.
- Confirmao por pesquisa de coagulase.
Meio de Cultura
Diluente
Conformidade

gar Baird-Parker meio base
gar BAIRD-PARKER (base)

BK055HA frasco 500g
Soluo de telurito de potssio
Emulso de gema de ovo com

telurito de potssio
Total
Soluo de sulfametazina
(sulfametazina, sulfadimidina) (3)
Suplemento
Seletivo
Sulfametazina 25 mg
mL
Total
Meio completo
Meio completo BAIRD-PARKER

gema de ovo telurito
Total
gar
BIOKAR Diagnstico
Reagente de Caldo crebro-corao

confirmao
Plasma de coelho
Caldo Crebro-Corao
BK015HA frasco 500g
Plasma de coelho liofilizado
BR00208 10 frascos / 20 reaes
Total (2)
Parcial (4)
Total
(1) A temperatura est sujeita a um acordo entre as partes interessadas e indicada no relatrio de ensaio.
(3) Aditivo facultativo, justificado pela suspeita de presena de Proteus.
(4) Presena de peptona pancretica de gelatina ao invs de tecido animal digerido enzimaticamente.
NF EN ISO 6888-2
V 08 - 014-2

Parte 1: tcnica utilizando gar com plasma de coelho e fibrinognio E
(Outubro 1999)
- Incubao 35 ou 37C (1) e leitura por 18 24 horas e, se necessrio,
prolongamento por mais 24 horas.
Meio de Cultura
Diluente
Conformidade

Meio de base gar com plasma
de coelho e fibrinognio

BK055HA frasco 500g
Suplemento Plasma de Coelho

Fibrinognio
mL
mL
Soluo de fibrinognio bovino
gar
BIOKAR Diagnstico
Soluo de plasma de coelho e

inibidor de tripsina
Meio completo

BT00508 kit 6 frascos 90 mL + 6
suplementos qsp 100 mL
BT01008 - kit 6 frascos 190 mL + 6
Total (2)
Total
Total (2)
(1) A temperatura est sujeita a um acordo entre as partes interessadas e indicada no relatrio de ensaio.
NF EN ISO 6888-3
V 08 - 014-3

Parte 3: pesquisa pelo mtodo NPP para carga bacteriana baixa
(Junho 2003)
Princpios: - Enriquecimento seletivo em anaerobiose 37C por 24 48 horas.
- Semeadura para meio seletivo depois de 24 horas a partir dos tubos que
apresentaram reduo de telurito e depois de 48 horas para os outros.
- Confirmao por uma reao de coagulase.
Meio de Cultura
Diluente
Meio de
enriquecimento
Caldo de Giolitti e Cantoni

modificado base concentrao
simples
Caldo GIOLITTI e CANTONI com

Tween 80
BK159HA frasco 500g
Total (1)
Caldo de Giolitti e Cantoni

modificado base concentrao
dupla
Caldo GIOLITTI e CANTONI com

Tween 80
BK159HA frasco 500g
Total (1)
gar bacteriolgico tipo A

A1010HA frasco 500g
A1010GC embalagem 5 Kg
gar bacteriolgico tipo E
A1012HA frasco 500g
Total

BK055HA frasco 500g
Total (1)

telurito de potssio
Total
Suplemento
Seletivo
Sulfametazina 25 mg
mL
Total
Meio completo

Total (1)


BK055HA frasco 500g
Total (1)
gar Soluo (20 g/L)
gar
Conformidade
gar Soluo
BIOKAR Diagnstico
Reagente de
confirmao Soluo de telurito de potssio

Fibrinognio
mL
mL
Total
Total
Meio completo


confirmao
Caldo Crebro-Corao
BK015HA frasco 500g
Reagente de Plasma de coelho

confirmao

Total (1)
Total (3)
Total

NF ISO/TS 21872-1
V 08 - 064-1
Mtodo horizontal para a pesquisa de Vibrio spp potencialmente

enteropatognicos
Parte 3: pesquisa de Vibrio parahaemolyticus e Vibrio cholerae
(Junho 2007)
Princpios: - Enriquecimento seletivo 37C por 6 1 horas para produtos congelados
ou 41,5C para produtos frescos.
- Enriquecimento seletivo secundrio 41,5C por 18 1 horas (1).
- Semeadura em dois meios slidos, TCBS e um outro meio slido apropriado,
em complemento do TCBS.
- Incubao do primeiro meio 37C por 24 3 horas e do segundo meio
- Confirmao por meio de ensaios bioqumicos apropriados.
Meio de Cultura
Meio de
enriquecimento
gua salina peptonada alcalina

(EPAS)
Primeiro
meio de
isolamento
gar com tiossulfato, citrato, bile e

sacarose (TCBS)
Meio de sub- gar salino nutritivo (GNS)

cultura
Reagente
para
identificao
presuntiva

oxidase
Reagente de gar salino com ferro e trs

confirmao acares
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
gar TCBS
BK040HA frasco 500g
Total (2)
gar TSI
BK059HA frasco 500g
Total
Meio salino para a deteco de

ornitina descarboxilase (ODC)
Meio salino para a deteco de Llisina descarboxilase (LDC)

arginina diidrolase (ADH)
Soluo de ONPG
gua peptona salina
Soluo de cloreto de sdio
Soluo tampo
Meio salino com triptofano
Reagente de Kovacs
(1) A segunda etapa de enriquecimento necessria para os produtos congelados, secos ou salinos.
(2) Os 8 g/L de bile de carne so decompostos da seguinte maneira: 5g/L de bile de carne bacteriolgica e 3
g/L de cloreto de sdio.
NF ISO/TS 21872-2
V 08 - 064-2
Mtodo horizontal para a pesquisa de Vibrio spp potencialmente

enteropatognicos
Parte 2: pesquisa de outras espcies que no
Vibrio parahaemolyticus e Vibrio cholerae
(Junho 2007)
Princpios: - Enriquecimento seletivo 37C por 6 1 horas para produtos congelados
ou 41,5C para produtos frescos.
- Enriquecimento seletivo secundrio 41,5C por 18 1 horas (1).
- Semeadura em dois meios slidos, TCBS e um outro meio slido apropriado,
em complemento do TCBS.
- Incubao do primeiro meio 37C por 24 3 horas e do segundo meio
- Confirmao por meio de ensaios bioqumicos apropriados.
Meio de Cultura
Meio de
enriquecimento
gua salina peptonada alcalina

(EPAS)
Primeiro
meio de
isolamento
gar com tiossulfato, citrato, bile e

sacarose (TCBS)
Meio de sub- gar salino nutritivo (GNS)

cultura
Reagente
para
identificao
presuntiva

oxidase
Reagente de gar salino com ferro e trs

confirmao acares
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
gar TCBS
BK040HA frasco 500g
Total (2)
gar TSI
BK059HA frasco 500g
Total

ornitina descarboxilase (ODC)
Meio salino para a deteco de Llisina descarboxilase (LDC)

arginina diidrolase (ADH)
Soluo de ONPG
gua peptona salina
Soluo tampo
Meio salino com triptofano
Reagente de Kovacs
(1) A segunda etapa de enriquecimento necessria para os produtos congelados, secos ou salinos.
(2) Os 8 g/L de bile de carne so decompostos da seguinte maneira: 5g/L de bile de carne bacteriolgica e 3
g/L de cloreto de sdio.
NF EN ISO 10273
V 08 - 027
Mtodo horizontal para a pesquisa de Yersinia enterocolitica

presumivelmente patognica
(Dezembro 2003)
Princpios: - Enriquecimento seletivo em dois meios: caldo PBS 25C por 3 5 dias e
caldo ITC 25C por 48 horas.
- Incubao dos dois meios 30C, e anlise depois de 24 e 48 horas.
- Confirmao por meio de ensaios bioqumicos, biotipagem, visando a
pesquisa de critrios de patogenicidade e de eventuais ensaios sorolgicos apropriados.
Meio de Cultura
Meio de
enriquecimento
Meio de
isolamento
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Caldo peptona, sorbitol e sais

biliares
Caldo l'IrgasanTM, ticarcilina e

cloreto de potssio (ITC) meio
base
Soluo de ticarcilina (1 mg/mL)
Soluo etanlica de l'IrgasanTM
Soluo de cloreto de potssio

(100 mg/mL)
gar cefsulodina, l'IrgasanTM,

novobiocina (CIN) meio base
Soluo etanlica de l'IrgasanTM
Soluo de cefsulodina (15 mg/mL)
Soluo de novobiocina (2,5

mg/mL)
gar Salmonella/Shigella com

desoxicolato de sdio e cloreto de
clcio (SSDC)
gar Nutriente
Meio uria-indol
Meio e
reagentes de
Reagente de Kovacs
identificao
gar Kligler
gar Nutriente 2%
BK185HA frasco 500g
Total (1)
gar de KLIGLER
BK034HA frasco 500g
Parcial (1)(2)

oxidase
Meio de descarboxilao de
oxidase

lisina

ornitina
Meio de fermentao dos acares

(ramnose, sacarose, trealose ou
xilose) 100 mg/mL
Meio Citrato de Simmons
Meio utilizado para os ensaios

Tween-estearase
gar tripto-casena de soja (TSA)

BK047HA frasco 500g
Total (1)
gar triptona-casena-soja para a

pesquisa de pirazinamidase
Soluo de sulfato de ferro III

amoniacal para a revelao da
pirazinamidase
gar triptona-casena-soja com

magnsio e oxalato meio base
gar tripto-casena de soja (TSA)

BK047HA frasco 500g
Total (1)
Soluo de cloreto de magnsio
Soluo de oxalato de sdio
Soluo de glicose
Outros
reagentes
Outros
reagentes
Soluo de hidrxido de potssio e

soluo de cloreto de sdio
Outros
reagentes
Caldo infuso de pele de bezerro
Outros
reagentes
Glicerina estril
gar triptona-casena-soja

(2) Presena de citrato frrico amoniacal (0,5 g/L) ao invs de sulfato de ferro (III) (0,2 g/L) preconizado;
taxa de tiossulfato de sdio 0,5 g/L ao invs de 0,3 g/L preconizado.
NF EN ISO 15213
V 08 - 029
Mtodo horizontal para a contagem de bactrias sultito-redutoras

que se desenvolvem em condies anaerbicas
(Setembro 2003)
Princpios: - Semeadura das massas em placa ou tubos.
- Incubao em anaerobiose 37 1C por 24 e 48 horas (leitura final 48h).
Meio de Cultura
Diluente
gar
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

Soluo peptona-salina
Caldo Triptona-Sal
BK014HA frasco 500g
Total (1)
gar Sulfito de Ferro
gar TSC (base)

BK031HA frasco 500g
Total (1)

(2) Se forem utilizados tubos, a incubao em jarra de anaerobiose no necessria.
NF EN ISO 15214
V 08 - 030
Mtodo horizontal para a contagem de bactrias mesfilas lticas

(Setembro 1998)
Princpios: - Semeadura em profundidade (eventualmente em superfcie).
- Incubao em anaerobiose 30C por 72 horas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio e
cultura
Meio MRS (de Man, Rogosa e

Sharpe) pH 5,7
gar MRS
BK089HA frasco 500g
Parcial (1) (2)
(1) De Man, J.C., Rogosa, M., and Sharpe, M.E. 1960. A medium for the cultivation of lactobacilli. J. App.
Bacteriol., 23, (1): 130-135.
(2) Presena de polipetona (10 g/L) ao invs de casena digerida enzimaticamente (10 g/L) preconizada e
taxa de extrato (autoltico) de levedura 5 g/L ao invs de 4 g/L preconizada.
NF V 08-061
V 08 - 061
Contagem de bactrias anaerbicas sulfito- redutoras

(Dezembro 2009)
Princpios: - Semeadura em profundidade (placa ou tubos).
- Incubao em anaerobiose 46C por 20 2 horas.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Diluente
Meio e
cultura
Meio de base gar triptona-sulfito gar TSC (base)

sem gema de ovo
BK031HA frasco 500g
Soluo de D-cicloserina
Total (1)
Suplemento
Seletivo
Dcicloserina 200 mg
mL
NF EN ISO 4833
V 08 - 011
Mtodo horizontal para a contagem de microrganismos

(Maio 2003)
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

gar Contagem de Placa (PCA)
BK144HA frasco 500g
gar
Total (1)
gar contagem de placa (PCA)
Meio de
Meio de revestimento duplo (3)
revestimento
duplo
gar
Contagem
em
desnatado (PCA)
BK161HA frasco 500g
leite
Total (1) (2)

A1010HA frasco 500g
A1010GC embalagem 5 kg
A1012HA frasco 500g

(2) Em caso de anlise de produtos lticos.
(3) Se necessrio (no caso de microrganismos que invadem a superfcie do gar para contagem).
Total
XP NF V 08-034
XP V 08 - 034
Enumerao de microrganismos por contagem de colnias

obtidas 30C depois de semeadas pelo mtodo espiral
(Setembro 2010)
Princpios: - Semeadura automtica.
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

BK144HA frasco 500g
gar
Total (1)

gar
Contagem
em
desnatado (PCA)
BK161HA frasco 500g
gar no
Meio de revestimento duplo (3)
nutritivo dito
gar branco
leite
Total (1) (2)

A1010HA frasco 500g
A1012HA frasco 500g
Total

(3) Se necessrio (no caso de microrganismos que invadem a superfcie do gar para contagem).
NF ISO 17410
V 08 - 033
Mtodo horizontal para a contagem de microrganismos psicotrficos
(Novembro 2001)
- Incubao em anaerobiose 6,5C por 10 dias.
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

BK144HA frasco 500g
Meio de
contagem
Total (1)

gar
Contagem
em
desnatado (PCA)
BK161HA frasco 500g

leite
Total (1) (2)
NF EN ISO 6887-1
V 08 - 010-1
Preparao da amostra, da suspenso me e das diluies decimais
para a anlise de microrganismos Parte 1: regras gerais para a preparao
da suspenso me e das diluies decimais.
(Setembro 1999)
Princpios: - Preparao da suspenso me.
- Preparao, se necessrio, das diluies decimais.
Meio de Cultura
BIOKAR Diagnstico
Caldo Triptona-Sal
BK014HA frasco 500g
Soluo de gua peptonada

tamponada
EPT (20g/L) (2)

BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L) (3)
BK018HA frasco 500g
Diluentes de
uso geral
Conformidade
Total
Total (1)
Diluentes
para as
necessidades
particulares
NF EN ISO 6887-2
V 08 - 010-2
para a anlise de microrganismos Parte 2: regras especficas para a
preparao de carnes e derivados.
(Janeiro 2004)
- Preparao de uma suspenso de pr-enriquecimento ou enriquecimento.
Meio de Cultura
Diluentes de
uso geral
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Se refere NF EN ISO 68871:1999, 5.2. pg 56
gua peptonada tamponada
Diluentes
para as
necessidades Suplemento roxo de bromocresol
particulares
Caldo Triptona-Sal
BK014HA frasco 500g
Total (1)
-
NF EN ISO 6887-3
V 08 - 010-3
preparao de peixe.
(Janeiro 2004)
Meio de Cultura
Diluentes de
uso geral
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Soluo peptona-salina com roxo

Diluentes
de bromocresol meio base
para as
particulares
Caldo Triptona-Sal
BK014HA frasco 500g
-
Soluo de peptona
gua Peptonada
BM16408 3 frascos 3 L
Total (1)
-

*Disponveis
NF EN
ISO 6887-3no Brasil os meios desidratados.
V 08 - 010-3
para a anlise de microrganismos Parte 4: regras especficas para outros
produtos que no leite, carne, peixe e derivados.
(Janeiro 2004)

Meio de Cultura
Diluentes de
uso geral
BIOKAR Diagnstico
Conformidade
Soluo peptona-salina com roxo

Diluentes
de bromocresol meio base
para as
particulares
Soluo de peptona
Caldo Triptona-Sal
BK014HA frasco 500g
-
gua Peptonada
Total (1)
-
NF EN ISO 6887-5
V 08 - 010-5
preparao de leite e derivados.
(Outubro 2010)
Meio de Cultura
Diluentes de
uso geral
Caldo Triptona-Sal
BK014HA frasco 500g
Soluo de Ringer diluda
Soluo de Ringer
BR00108 100 comprimidos
Soluo de peptona-salina
Soluo tampo fosfato
Diluentes
para as
necessidades
particulares
BIOKAR Diagnstico
Soluo de citrato de sdio

Soluo de hidrognio fosfato
dipotssico
Soluo de hidrognio fosfato
dipotssico com agente
antiespumante
Soluo de tripolifosfato
Diluente de uso geral com soluo
de amilase
gua peptonada tamponada com
roxo de bromocresol meio base
gua Peptonada
EPT (20g/L) (2)
BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L) (3)
BK018HA frasco 500g
Conformidade
Total (1)
Total
Total (1)
-
Total
Total (1)
-
EPT (20g/L) (2)

BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L) (3)
BK018HA frasco 500g
Total
Suplemento roxo de bromocresol

NF V08-057-1
V 08 - 057-1
Mtodo de rotina para a enumerao de estafilococos coagulase +

por contagem de colnias 37C
Parte 1: tcnica com confirmao de colnias.
(Janeiro 2004)
Princpios: - Semeadura em superfcie de um meio seletivo.
- Incubao 37C em anaerobiose por 24 48 horas.
- Confirmao por ensaio de coagulase.
Meio de Cultura
Diluente
Meios e
Reagentes
de
confirmao
Conformidade


BK055HA frasco 500g
Total (1)

telurito de potssio
Total (1)
Suplemento
Seletivo
Sulfametazina 25 mg
mL
Total
Meio completo

Total (1)


BK055HA frasco 500g
Total (1)

Fibrinognio
mL
mL
gar
BIOKAR Diagnstico

Meio completo

confirmao
Caldo Crebro-Corao
BK015HA frasco 500g
Reagente de Plasma de coelho

confirmao

Total
Total (1)
Total (3)
Total

NF V08-059
V 08 - 059
Mtodo de rotina para a enumerao de fungos e leveduras

por contagem de colnias 25C
(Novembro 2002)
Princpios: - Semeadura em profundidade de um meio de cultura.
- Incubao 25C em anaerobiose por 5 dias.
Meio de Cultura
Diluente
BIOKAR Diagnstico
Conformidade

gar glicose com Cloranfenicol
Meio de
cultura
gar Glicose com Cloranfenicol

(YGC)
BK007HA frasco 500g
Total
gar glicose com oxitetraciclina (1) gar Glicose com Oxitetraciclina

(base OGA)
BK053HA frasco 500g
Total
Soluo de gentamicina (2)
Total
Suplemento Seletivo
Gentamicina 25 mg
(1) O cloranfenicol pode ser substitudo por oxitetraciclina.

(2) Adio facultativa, justificada pela suspeita da presena de contaminao por bactrias gram positivas.
ANEXO A: outras normas de referncia em microbiologia de alimentos
Tcnica de amostragem de
superfcies, atravs de placas de
contato e swabs
NF ISO 18593
T 08-035
Dezembro 2004
Determinao da atividade da gua
NF ISO 21807
T 08-038
Janeiro 2005
Exigncias gerais e recomendaes
NF EN ISO 7218
T 08-002
Outubro 2007
Diretrizes para a preparao e

produo de meios de cultura. Parte
1: diretrizes gerais que garantem a
qualidade atravs da preparao de
meios de cultura em laboratrios
XP CEN ISO/TS 11133-1
T 08-104-1
Maro 2009
Guia para a preparao e produo

de meios de cultura. Parte 2: guia
geral para os ensaios de
desempenho dos meios de cultura
XP CEN ISO/TS 11133-2
T 08-104-2
Janeiro 2004
Emenda 1: microrganismos por

anlise recomendada e meios de
cultura mais usados
XP CEN ISO/TS 11133-2 (A1)
T 08-104-2 (A1)
Fevereiro 2011
ANEXO B: Mtodos alternativos rpidos em microbiologia de alimentos
Mtodo COMPASS Bacillus cereus gar

Mtodo de referncia: NF EN ISO 7932, pg 6.
Mtodo de contagem de Bacillus cereus presuntivo sem confirmao em

produtos de alimentao humana e animal.
BKR 23/06 02/10
Mtodos alternativos de anlise para
produtos agroalimentares.
www.afnor-validation.org
Princpios: semeadura em superfcie ou profundidade de COMPASS Bacillus cereus

gar 30 1C por 24 27 horas.
Diluente

COMPASS Bacillus cereus gar BM 13008 10 flaconetes 100 mL
Meio seletivo
Suplemento Seletivo para COMPASS Bacillus cereus gar BS06908 10 flaconetes

qsp 100 mL
COMPASS Bacillus cereus gar BM12608 - 20 placas 90 mm
Mtodo COMPASS Listeria gar (pesquisa)

Mtodo de referncia: NF EN ISO 11290-1/A1, pg 26 - 27.
Mtodo de pesquisa de Listeria monocytogenes em produtos de alimentao

humana e amostras de meio ambiente.
BKR 23/02 11/02
Princpios:
- enriquecimento em caldo Demi-FRASER 24 2 h 30 1C.
- semeadura em COMPASS Listeria gar e incubao 37 1C por 24 2 horas.
- confirmao de uma colnia caracterstica.
Caldo Demi-FRASER
BK173HA frasco 500g
BK173GC frasco 5 Kg
BM01608 10 frascos 225 mL
BM13308 3 frascos 3L
Suplemento Seletivo Demi-FRASER
BS03008 10 frascos qsp 500 mL
BS03208 8 frascos qsp 2,25L
Kit COMPASS Listeria gar
BT00808 6 frascos 200 mL (R1),
6 frascos suplemento seletivo qsp 200 mL (R2),
frascos suplemento seletivo qsp 200 mL (R3)
CONFIRM' L. mono
Caldo BM16208 18 frascos
gar BM13908 - 10 placas 90 mm
gar PALCAM
BK145HA frasco 500g
BS00408 10 frascos qsp 500 mL
BS04908 8 frascos qsp 2,5 L
Mtodo COMPASS Listeria gar (contagem)

Mtodo de referncia: NF EN ISO 11290-1/A1, pg 28 - 29.
Mtodo de contagem de Listeria monocytogenes em produtos de

alimentao humana e amostras de meio ambiente.
BKR 23/05 12/07
Princpios:
- suspenso em gua peptonada tamponada.
- semeadura em COMPASS Listeria gar e incubao 37 1C e leitura depois de 48
3 horas.
- confirmao de uma colnia caracterstica por repique.
EPT (20g/L)
BK131HA frasco 500g
EPT (25g/L)
BK018HA frasco 500g
Kit COMPASS Listeria gar
BT00808 6 frascos 200 mL (R1),
6 frascos suplemento seletivo qsp 200 mL (R2),
frascos suplemento seletivo qsp 200 mL (R3)
CONFIRM' L. mono
Caldo BM16208 18 frascos
gar BM13908 - 10 placas 90 mm
Mtodo IRIS Salmonella gar

Mtodo de referncia: NF EN ISO 6579, pg 30 - 31.
Mtodo de pesquisa de Salmonella spp. em produtos de alimentao

humana e amostras de meio ambiente.
BKR 23/07 10/11
Princpios:
- enriquecimento em meio seletivo Salmonella Enriquecimento 18 2 h 41,5 1C.
- semeadura em IRIS Salmonella gar e incubao 37 1C por 24 3 horas.
- confirmao de uma colnia caracterstica por CONFIRM' Salmonella.
Enriquecimento de Salmonella
BK194HA frasco 500g
Enriquecimento de Salmonella + Tween 80
Suplemento IRIS Salmonella
BS07708 embalagem com 120 comprimidos
IRIS Salmonella gar
CONFIRM' Salmonella
BT01108 kit de aglutinao em latex (50 T)
ANEXO C: Lista dos principais meios de cultura para a microbiologia de alimentos.
PRODUTO
APRESENTAO
gar Seletivo B. Cereus segundo MOSSEL BK116HA frasco 500g

BM03808 20 placas de 90 mm
BS06608 10 frascos 50 mL
Emulso estril de gema de ovo com
polimixina B
gar Triptona-soja
BK028HA frasco 500g
Caldo Triptona-casena-soja (TSB)
BK046HA frasco 500g

gar Columbia
BK019HA frasco 500g
gar MULLER-HINTON
BK048HA frasco 500g
gar Triptona Sulfito Cicloserina (TSC)

Meio base desidratado (s/ D-cicloserina)
BK031HA frasco 500g
Suplemento Seletivo D-cicloserina 200 mg
BS00608 kit com 10 frascos
Emulso gema de ovo
Caldo Tioglicolato com resazurina
BK017HA frasco 500g

Caldo Lactose-Sulfito
BK140HA frasco 500g
gar VRBL
BK152HA frasco 500g

BK002HA frasco 500g

BM01108 50 tubos 10 mL com cloro
Caldo Laurilsulfato-triptose
BK010HA frasco 500g

BM09708 - 50 tubos 10 mL com cloro
(concentrao simples)
BM0908 - 50 tubos 10 mL com cloro
(concentrao dupla)
gua Peptonada Tamponada 20 g/L
BK131HA frasco 500g

gua Peptonada Tamponada 25,5 g/L
BK018HA frasco 500g

Caldo
de
enterobactrias
enriquecimento
Caldo
Mller-Kauffmann
novobiocina
para BK127HA frasco 500g
tetrationato- Meio pronto para uso

Meio base desidratado
BK16908 frasco 500g
Suplemento Seletivo Novobiocina 10 mg
BS03308 embalagem com 10 frascos
Suplemento Seletivo Novobiocina 40 mg
BS05608 embalagem com 8 frascos
Caldo Rappaport-VASSILIADIS
BK136HA frasco 500g
gar VRGB
BK011HA frasco 100g

Caldo Rappaport-VASSILIADIS Soja (RVS) Meio pronto para uso

Meio desidratado
BK148HA frasco 500g
gar Nutriente 2%
BK185HA frasco 500g
gar Glicose
gar TBX
BK146HA frasco 500g

BK146HM frasco 100g
Caldo com glutamato
Bk186HA frasco 500g
Caldo casena-soja modificado (mTBS)
BK150HA frasco 500g
gar MacConkey
BK050HA frasco 500g
gar MacConkey Sorbitol (CT-SMAC)
BK147HA frasco 500g

Suplemento Seletivo cefixima-telurito
BS03708 10 flaconetes qsp 500 mL
Caldo de triptofano
BK163HA frasco 500g

Caldo EC
BK162HA frasco 500g
gar DG 18
BK170HA frasco 500g

gar DRBC
BK198HA frasco 500g

Caldo Demi-Fraser
Base sem citrato de ferro III amoniacal

BK173HA frasco 500g
Base sem citrato de ferro III amoniacal, nem
cido nalidxico e nem acriflavina

BK133HA frasco 500g
Suplemento seletivo para Caldo DemiFraser
Soluo estril de citrato frrico amoniacal
5%
gar Oxford
BK110HA frasco 500g

Suplemento seletivo para gar Oxford
gar Palcam
BK145HA frasco 500g

Suplemento seletivo para gar Palcam
gar TSI
BK059HA frasco 500g
gar de Hektoen
BK067HA frasco 500g
gar BAIRD-PARKER
BK055HA frasco 500g

BM06708 - 20 placas 90 mm
BM15908 - 20 placas 55 mm
Caldo Crebro-Corao
BK015HA frasco 500g

BR00208 10 flaconetes 20 reaes
Caldo de GIOLITTI e CANTONI com Tween BK159HA frasco 500g

80
A1010HA frasco 500g

A1012HA frasco 500g

gar TCBS
BK040HA frasco 500g
gar KLIGLER
BK034HA frasco 500g
gar Tripto-Casena Soja (TSA)
BK047HA frasco 500g

Caldo Triptona-Salino
BK014HA frasco 500g

gar TSC
BK031HA frasco 500g

gar MRS
BK089HA frasco 500g

BK144HA frasco 500g

gar YGC
BK007HA frasco 500g

gar OGA
BK053HA frasco 500g

Suplemento seletivo oxitetraciclina 50 mg
Suplemento Seletivo Gentamicina
Apresentaes
A) gar:
PRONTO:
Placas de Petri (ainda no
disponveis no Brasil):
- Pacote com 120 unidades de
55 e 90 mm;
55 e 90 mm;
55 e 90 mm.
PRONTO PARA SOLUBILIZAR:
Flaconetes (ainda no
disponveis no Brasil)::
- 10 flaconetes de 100 mL;
DESIDRATADO:
Frascos:
- Embalagem de 500g;
- Embalagem de 5 Kg.
Apresentaes
B) Caldos:
PRONTO PARA USO:
Frascos (ainda no
- 10 frascos de 90 mL;
- 10 frascos de 100 mL;
- 10 frascos de 200 mL.
Tubos (ainda no
- 50 tubos de 9 mL;
- 50 tubos de 10 mL;
- 5 tubos de 5 e 7 mL.
Embalagens flexveis
(ainda no disponveis no
Brasil):
- 3 embalagens de 3L;
- 2 embalagens de 5L.
DESIDRATADO:
Frascos:
- Embalagem de 500g;
- Embalagem de 5 Kg.
BIOKAR Diagnostics Qualidade

O Controle de Qualidade da Biokar Diagnostics certifica o desempenho de seus
produtos em conformidade com os padres ISO:
Testes de desempenho;
Condies de transporte;
Testes de esterilidade;
Testes de neutralizao;
Anlises das caractersticas fsico-qumicas (pH, aspecto...).
BIOKAR Diagnostics certificada

de acordo com as normas padro
de gerenciamento ISO 9001:2008.
A Biokar Diagnostics prope um acesso direto documentao tcnica de seus

produtos nos sites:
Ficha Tcnica;
Ficha de Segurana;
Laudo de Anlise.
Acesse nossos sites:

www.biokar-diagnostics.com
OU
www.solabia.com.br

Guia Micro Ali Mentos

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GUIA DOS MTODOS DE

MICROBIOLOGIA PARA ALIMENTOS

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

BIOKAR Diagnstico coloca o seu conhecimento sua disposio para fornecer

(suspeito em pequena quantidade)

Pesquisa e Contagem Parte 1

Pesquisa e Contagem Parte 3

Coliformes (Contagem de colnias)

(suspeito em pequena quantidade)

Pesquisa e Contagem Parte 1

Pesquisa e Contagem Parte 2

Escherichia coli -glicuronidase +

Escherichia coli -glicuronidase +

Escherichia coli -glicuronidase +

Escherichia coli O157

Escherichia coli presuntivo

(produtos com atividade de gua superior 0,95)

Contagem Parte 1 Emenda 1

Contagem Parte 2 Emenda 1

(gar com fibrinognio plasma de coelho)

(carga bacteriana baixa)

(outras espcies que no parahaemolyticus e cholerae)

Contagem das bactrias anaerbicas sulfito-redutoras

Contagem das bactrias mesfilas lticas

Contagem das bactrias sulfito-redutoras

Contagem dos microrganismos

Contagem dos microrganismos (mtodo espiral)

Contagem dos microrganismos psicrotrficos

Preparao das amostras, da suspenso me e das diluies

Preparao das amostras, da suspenso me e das diluies

Preparao das amostras, da suspenso me e das diluies

Preparao das amostras, da suspenso me e das diluies

Preparao das amostras, da suspenso me e das diluies

Mtodos de rotina para a contagem de Staphylococcus coagulase

Enumerao de fungos e leveduras por contagem de colnias 25C

Anexo A: outras normas de referncia em microbiologia de alimentos

Anexo B: mtodos alternativos rpidos em microbiologia de alimentos

Para maiores informaes entre em contato com a gente.

Mtodo horizontal para a contagem de Bacillus cereus presuntivo

gar seletivo para B. Cereus

Suplemento Seletivo Polimixina B

Emulso de gema de ovo

Emulso estril de gema de ovo

gar seletivo para B. Cereus

Meio completo (gar-gar MYP)

Se refere parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto ser analisado.

Meio base: base sangue n2

Sangue de carneiro desfibrinado

(1) A triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

Mtodos horizontais para a contagem de Bacillus cereus presuntivo

Se refere parte da norma NF EN ISO 6887 correspondente ao produto ser analisado.

Meio base Caldo de triptona, soja Caldo Triptona-Casena de soja

Outros meios Meio de base MYP

Suplemento Seletivo Polimixina B

Emulso estril de gema de ovo

Emulso estril de gema de ovo

gar seletivo para B. Cereus

Suplemento Seletivo Polimixina B

Emulso de gema de ovo

Emulso estril de gema de ovo

Emulso estril de gema de ovo

gar seletivo para B. Cereus

Meio completo (gar MYP)