Anda di halaman 1dari 12

Part yang dikerjakan only

Abstrak dan metode only!!!!!!!!!!


Yang lain kagak ya,,,mau perbaiki tulisan merah ini bisa,, atau bwt lembaran
sendiri juga ga masalah

Efficacy of Probiotic Therapy on Atopic Dermatitis in Children: A Randomized, Doubleblind, Placebo-controlled Trial
Khasiat Probiotik Terapi pada Dermatitis Atopik pada Anak: A Acak, Double-blind,
kontrol placebo
EFIKASI TERAPI PROBIOTIK PADA DERMATITIS ATOPIK PADA ANAK:
RANDOMIZED DOUBLE BLIND PLACEBO CONTROLLED TRIAL.
Purpose: To evaluate a therapeutic efficacy of probiotics mixture (probiotics) in the treatment of
children with mild-to-moderate atopic dermatitis (AD).
Tujuan: Untuk mengevaluasi keberhasilan terapi campuran probiotik (probiotik) dalam
pengobatan anak-anak dengan dermatitis atopik ringan sampai sedang (AD).
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui efikasi terapeutik dari campuran probiotik pada
terapi dermatitis atopic derajat sedang dan ringan pada anak.
Methods: Randomized, double-blind, placebo-controlled, parallel trial with a washout period of
2 weeks and an intervention period for 6 weeks, conducted from November 2010 to October
2011.
Metode: Acak, double-blind, terkontrol plasebo, percobaan paralel dengan periode washout dari
2 minggu dan periode intervensi selama 6 minggu, dilakukan dari bulan November 2010 sampai
Oktober 2011.
Metode : metode yang digunakan adalah metode acak buta ganda placebo terkontrol
( randomized double blind controlled trial) periode penelitian ini yaitu periode washout 2 minggu
dan periode intervensi 6 minggu dilakukan dari bulan November 2010 sampai oktober 2011.

One hundred children with mild to moderate AD (2-9 years old) were randomly allocated to the
probiotics (Lactobacilluss casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, and
Bifidobacterium lactis) or placebo groups.
Seratus anak-anak dengan ringan sampai sedang AD (2-9 tahun) secara acak dialokasikan ke
probiotik (Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus plantarum, dan
Bifidobacterium lactis) atau kelompok plasebo.
Seratus anak dengan dermatitis atopic ringan sampai sedang ( berusia 2 sampai 9 tahun) secara
acak dimasukkan ke dalam kelompok probiotik((Lactobacilluss casei, Lactobacillus rhamnosus,
Lactobacillus plantarum, and Bifidobacterium lactis) dan kelompok plasebo
The assessment of efficacy was based on the change in eczema area severity index (EASI),
visual analogue scale for pruritus (VASP), fecal cell counts of each strains (log10[cell counts/g
stool]), and serum cytokine levels (Interleukin-4 [IL-4]; IL-10; Tumor necrosis factor alpha,
[TNF-]) in weeks 0 and 6.
Penilaian keberhasilan didasarkan pada perubahan indeks eksim daerah keparahan (EASI), skala
analog visual untuk pruritus (VASP), jumlah sel tinja dari setiap strain (log10 [sel jumlah / g
feses]), dan tingkat serum sitokin (Interleukin -4 [IL-4]; IL-10; Tumor necrosis factor alpha,
[TNF-]) di minggu 0 dan 6.
Penilaian keberhasilan didasarkan pada perubahan indeks daerah keparahan ekzema (EASI),
skala analog visual untuk pruritus (VASP), jumlah sel tinja dari setiap strain (log10 [sel jumlah /
g feses]), dan tingkat serum sitokin (Interleukin -4 [IL-4]; IL-10; Tumor necrosis factor alpha,
[TNF-]) di minggu 0 dan 6.
Results:
hasil:
Demographics and baseline characteristics at the week 0 were not significantly different between
the 2 groups. The significant increments in fecal-cell counts were observed in the probiotcs
group at week 6 (P=0.00), while the cytokine levels between the 2 groups were not significantly
different in week 6 (IL-4, P=0.50; IL-10, P=0.58; TNF-, P=0.82).

Demografi dan karakteristik awal pada minggu 0 tidak berbeda secara signifikan antara 2
kelompok. Kelipatannya signifikan dalam jumlah fecal-sel yang diamati pada kelompok
probiotik pada minggu 6 (P = 0.00), sedangkan tingkat sitokin antara 2 kelompok tidak berbeda
secara signifikan dalam seminggu 6 (IL-4, P = 0,50; IL-10 , PE = 0.58; TNF-, P = 0.82).
The probiotics significantly improved clinical severity after 6 weeks intervention of probiotics;
however, the placebo group also showed significant improvement (EASI; P=0.00, VASP;
P=0.00).
Probiotik secara signifikan meningkatkan perbaikan klinis setelah intervensi 6 minggu,
kelompok plasebo juga menunjukkan peningkatan yang signifikan (EASI; P = 0.00, VASP; P =
0.00).
Conclusions:
kesimpulan:
Our findings showed that probiotics successfully colonized in the intestine after 6 weeks
intervention; nevertheless, we could not find an additional therapeutic or immunomodulatory
effects on the treatment of AD.
Temuan kami menunjukkan bahwa probiotik berhasil berkembang dalam usus setelah intervensi
6 minggu; Namun demikian, kita tidak bisa menemukan efek terapi atau imunomodulator
tambahan pada pengobatan AD.
Further long-term studies will be necessary to clarify the therapeutic efficacy of probiotics.
studi jangka panjang lebih lanjut diperlukan untuk memperjelas kemanjuran terapi probiotik.
Key Words: Atopic dermatitis; cytokines; placebo-controlled trial; probiotics; Randomized
Controlled Trial
Kata kunci: dermatitis atopik; sitokin; placebo-controlled trial; probiotik;Percobaan acak
Terkendali
MATERIALS AND METHODS

Patients and study setting


BAHAN DAN METODE
Pasien dan pengaturan studi
This study was performed between November 2010 and October 2011. One hundred children (2
to 9 years of age) with mildto-moderate AD were recruited from the Pediatric Allergy and
Respiratory Center of Soonchunhyang University Hospital, a tertiary medical center located in
Seoul, Korea.
Penelitian ini dilakukan antara November 2010 dan Oktober 2011. Seratus anak (2-9 tahun)
dengan AD ringan sampai sedang direkrut dari pusat alergi dan pernafasan anak Rumah Sakit
Universitas Soonchunhyang, pusat medis tersier yang terletak di Seoul, Korea.
Diagnosis of AD was performed using the diagnostic criteria set forth by Hanifin and Rajka in
1980.12 The study protocol was approved by the Soonchunhyang University Hospital Research
Ethics Committee prior to initiation of the study.
Diagnosis AD dilakukan dengan menggunakan kriteria diagnostik yang ditetapkan oleh Hanifin
dan Rajka di tahun 1980. Protokol penelitian telah disetujui oleh komite etik penelitian rumah
sakit Soonchunhyang University sebelum memulai penelitian.
Written informed consent was obtained from each patient and his or her parents at the time of
recruitment and before the study-related interview was performed.
informed consent diperoleh dari masing-masing pasien dan orang tuanya pada saat perekrutan
dan sebelum wawancara terkait studi yang dilakukan.
Study design
desain penelitian
This study was designed as double-blind, placebo-controlled, randomized parallel trial with a 2week washout period prior to intervention.

Penelitian ini dirancang sebagai penelitian parallel acak terkontrol placebo ,buta ganda dengan
periode washout 2 minggu sebelum intervensi.
Enrollment criteria
kriteria inklusi
The severity of AD was assessed using the SCORAD index13 at the time of enrollment. Children
with mild-to-moderate AD (SCORAD score 40) were included.
Tingkat keparahan AD dinilai menggunakan indeks SCORAD 13 pada saat pendaftaran. Anakanak dengan AD ringan sampai sedang (skor SCORAD 40) dimasukkan.
Exclusion criteria
Kriteria Eksklusi
The exclusion criteria used in this study were children with (1) severe AD (SCORAD score >40),
(2) exposure to commercial probiotic products during the previous 4 weeks, (3) acute
gastrointestinal infections, (4) chronic underlying disease or baseline factors predisposing to the
infection (e.g., neurologic disease, metabolic disease, chronic respiratory disease, congenital
anomaly of the heart, gastrointestinal system, or lung),
Kriteria eksklusi yang digunakan dalam penelitian ini adalah anak-anak dengan (1) AD parah
(SCORAD skor> 40), (2) paparan produk probiotik komersial selama sebelumnya 4 minggu (3)
infeksi saluran pencernaan akut, (4) penyakit yang mendasari kronis atau faktor dasar
predisposisi infeksi (misalnya, penyakit neurologis, penyakit metabolik, penyakit pernapasan
kronis, kelainan kongenital jantung, sistem pencernaan, atau paru-paru),
(5) known or suspected immunodeficiency, (6) prematurity, and (7) receiving antibiotic, systemic
corticosteroid, immunosuppressive, or Chinese herbal therapies within 4 weeks prior to
enrollment.
(5) diketahui atau diduga immunodeficiency, (6) prematuritas, dan (7) menerima antibiotik,
kortikosteroid sistemik, imunosupresif, atau terapi herbal Cina dalam waktu 4 minggu sebelum
pendaftaran.

Sample size
Ukuran sampel
Sample size was calculated assuming a 30% reduction in Eczema Area and Severity Index
(EASI) score in the probiotics group and a 15% reduction in the placebo group at week 6,
applied with 5% significance levels and 90% power.
Ukuran sampel dihitung dengan asumsi pengurangan 30% di daerah Eksim dan Indeks
Keparahan (EASI) skor pada kelompok probiotik dan pengurangan 15% pada kelompok plasebo
pada minggu 6, diterapkan dengan tingkat signifikansi 5% dan kekuatan 90%.
On the basis of our pilot data, ~40 children are required for each group. Ultimately, a sample size
of 100 children was deemed necessary with reference to an expected drop-out rate of 20%.
Wash-out period At the time of enrollment, parents were trained in appropriate bathing and skin
care practices, and received instructions regarding the application of topical emollients.
Atas dasar data pilot kami, ~ 40 anak-anak diperlukan untuk masing-masing kelompok. Pada
akhirnya, ukuran sampel 100 anak dianggap perlu dengan mengacu tingkat drop-out yang
diperkirakan sekitar 20%. Periode wash out Pada saat pendaftaran, orang tua dilatih tata cara
mandi dan perawatan kulit yang tepat, dan menerima instruksi mengenai penerapan emolien
topikal.
Use of topical corticosteroids (TCSs), topical calcineurin inhibitors (TCIs), oral antihistamines,
or any commercial probiotic-containing products was stopped 2 weeks prior to initiation of the
study (week 0).
Penggunaan kortikosteroid topikal (TCSs), inhibitor kalsineurin topikal (TCIs), antihistamin oral
atau komersial produk yang mengandung probiotik dihentikan 2 minggu sebelum memulai studi
(minggu 0).
Intervention and assignments
Intervensi dan tugas

The probiotics mixture consisted of L. casei, L. rhamnosus, L. plantarum, and B. lactis in


glucose anhydrous crystalline powder derived from cornstarch. The study preparation was
manufactured by CellBiotec (Seoul, Korea).
Campuran probiotik terdiri dari L. casei, L. rhamnosus, L. plantarum, dan B. lactis glukosa
serbuk anhidrat kristal yang berasal dari tepung jagung. Preparat penelitian diproduksi oleh
CellBiotec (Seoul, Korea).
A single dose of the preparation contained 1109 colony forming units (CFU) of each bacterial
strain; the placebo consisted of pure glucose anhydrous crystalline powder. The probiotics
mixture and placebo controls were identical in color, taste, smell, packing, and manner of
administration.
Dosis tunggal preparat mengandung 1 109 koloni unit (CFU) dari masing-masing strain
bakteri; plasebo terdiri dari glukosa murni anhidrat bubuk kristal. Probiotik campuran dan
plasebo kontrol identik dalam warna, rasa, bau, kemasan, dan cara administrasi.
All formulations were dispensed by a pharmacist not associated with the study; both
investigators and study subjects were blinded to the identity of the intervention. Both
preparations were administered in warm water or juice immediately after meals, twice a day
(2109 CFU in each strain) for 6 weeks.
Semua formulasi dibagikan oleh seorang apoteker tidak terkait dengan penelitian ini; baik
peneliti dan subjek penelitian tidak mengetahui identitas intervensi. Kedua preparat diberikan
dalam air hangat atau jus segera setelah makan, dua kali sehari (2 109 CFU di masing-masing
strain) selama 6 minggu.
During the study period, neither TCSs nor TCIs were allowed for either group.
Selama masa penelitian, baik TCSs atau TCIs tidak diizinkan untuk kedua kelompok.
Randomization
pengacakan

Randomization software14 was used to randomly allocate children to receive either the
probiotics mixture (probiotics group, n=50) or placebo control (placebo group, n=50) for 6
weeks.
Software pengacakan14 digunakan untuk mengacak guna mengalokasikan anak untuk menerima
campuran probiotik (kelompok probiotik, n = 50) atau kontrol plasebo (kelompok plasebo, n =
50) selama 6 minggu.
Drop-out criteria
Kriteria drop out
The drop-out criteria included patients with poor compliance in either the probiotics or placebo
groups (<80% of study protocol), severe flare-ups requiring oral steroid or oral antibiotic
therapy, and infectious diseases (i.e., upper respiratory infection, lower respiratory infection,
acute gastroenteritis, urinary tract infection) which made the interpretation of outcomes difficult.
Kriteria drop-out termasuk pasien dengan kepatuhan yang rendah baik dalam kelompok
probiotik atau kelompok plasebo (<80% dari protokol penelitian), flare-up berat yang
membutuhkan steroid oral atau terapi antibiotik oral, dan penyakit menular (yaitu, infeksi saluran
pernapasan atas, pernafasan bagian bawah infeksi, gastroenteritis akut, infeksi saluran kemih)
yang membuat interpretasi dari hasil sulit.
Outcome measurement
hasil pengukuran
Measurements were taken at the beginning (week 0) and end (week 6) of the study. Efficacy of
probiotics was assessed on the basis of clinical improvement as determined by EASI and visual
analog scale for pruritus (VASP) scores, as the primary outcome.
Pengukuran dilakukan pada awal (minggu 0) dan akhir (minggu 6) penelitian. Khasiat probiotik
dinilai atas dasar perbaikan klinis sebagaimana ditentukan oleh EASI dan skala analog visual
untuk pruritus (VASP) skor, sebagai hasil utama.

As secondary outcomes we compared fecal CFUs for each probiotic strain (L. casei, L.
rhamnosus, L. plantarum, and B. lactis), and serum cytokine levels (interleukin-4, IL-4;
interleukin 10, IL-10; tumor necrosis factor alpha, TNF-) in weeks 0 and 6.
Sebagai hasil sekunder peneliti membandingkan CFUs tinja untuk masing-masing strain
probiotik (L. casei, L. rhamnosus, L. plantarum, dan B. lactis), dan tingkat serum sitokin
(interleukin-4, IL-4, interleukin 10, IL-10; tumor necrosis factor alpha, TNF-) dalam minggu 0
dan 6.
Atopic sensitization
sensitisasi atopik
Serum total immunoglobulin E (IgE) and specific IgE for food allergens (cows milk, egg white,
soy, peanuts, and cod) and aero-allergens (Dermatophagoides farinae, D. pteronyssinus, dog hair,
and Aspergillus fumigatus) were measured using ImmunoCAP (Phadia AB, Uppsala, Sweden) in
week 0.
Serum Total imunoglobulin E (IgE) dan IgE spesifik untuk alergen makanan (susu sapi, putih
telur, kedelai, kacang tanah, dan cod) dan aero-alergen (Dermatophagoides farinae, D.
pteronyssinus, anjing rambut, dan Aspergillus fumigatus) diukur dengan menggunakan
ImmunoCAP (Phadia AB, Uppsala, Swedia) di minggu 0.
Allergen sensitization was defined as specific IgE levels 0.35 kU/L, which is the positive cutoff
value recommended by the manufacturer.
Sensitisasi alergen didefinisikan sebagai kadar IgE spesifik 0.35 kU / L, yang merupakan nilai
cutoff positif direkomendasikan oleh produsen.
Fecal samples and real-time quantitative PCR (RT-qPCR)
sampel tinja dan real-time PCR kuantitatif (RT-qPCR)
Each fecal sample was collected at the subjects home in a sterile container, frozen, and then
transported to the laboratory, where it was stored at -80C prior to analysis. RT-qPCR was
performed using a LightCycler 480 system (Roche, Germany).

Setiap sampel tinja dikumpulkan di rumah subjek dalam wadah steril, beku, dan kemudian
diangkut ke laboratorium, di mana ia disimpan pada -80 C sebelum analisis. RT-qPCR
dilakukan dengan menggunakan LightCycler 480 sistem (Roche, Jerman).
Primers were synthesized commercially by Bioneer (Daejeon, Korea), and the specificity of each
primer was verified using DNA isolated from closely and distantly related bacteria as a template.
Primer disintesis secara komersial oleh bioneer (Daejeon, Korea), dan kekhususan masingmasing primer diverifikasi menggunakan DNA diisolasi dari bakteri erat dan jauh terkait sebagai
template.
Quantitative PCR was performed in a 96-well plate in a final volume of 20 L. Reaction
mixtures consisted of 1-L fecal DNA, 0.5-L primers (10 pmol each), 10-L SYBR Green I
master mix (Roche, Germany), and 8-L H2O. PCR amplification was carried out under the
following conditions: pre-incubation at 94C for 4 min, followed by 55 cycles of amplification
(denaturation at 94C for 15 seconds, primer annealing at 55C for 15 seconds, and elongation at
72C for 20 seconds).
PCR kuantitatif dilakukan dalam piring 96-baik dalam volume akhir 20 uL. campuran reaksi
terdiri dari DNA tinja 1-uL, 0,5-uL primer (10 pmol masing-masing), 10-uL SYBR Green saya
menguasai campuran (Roche, Jerman), dan 8-uL H2O. PCR amplifikasi dilakukan dengan
ketentuan sebagai berikut: pre-inkubasi pada 94 C selama 4 menit, diikuti oleh 55 siklus
amplifikasi (denaturasi pada 94 C selama 15 detik, primer annealing pada 55 C selama 15
detik, dan perpanjangan saat 72 C selama 20 detik).
The melting curve was analyzed by heating the reaction from 50 to 90C with a temperature
transition time of 5C/sec.
The melting curve was analyzed by heating the reaction from 50 to 90C with a temperature
transition time of 5C/sec.
Kurva pencairan di analisa dengan memanaskan reaksi dari 50 derajat menuju 90 derajat dengan
transisi temperature 5 derajat setiap detik.
Fecal cell count

Jumlah sel tinja


Standard curves were constructed to convert the cross point (Cp) value obtained from the qPCR
analysis to cell counts. The total number of cells in 1 mL of pure culture was determined using a
hemocytometer (Marienfeld, Germany).
kurva standar dibangun untuk mengkonversi nilai titik persilangan (Cp) yang diperoleh dari
analisis qPCR untuk jumlah sel. Jumlah sel dalam 1 mL dari kultur murni ditentukan dengan
menggunakan hemositometer (Marienfeld, Jerman).
Genomic DNA was prepared from these suspensions, as described above, quantified using an espect spectrophotometer (Malcom, Tokyo, Japan), and 10-fold serially diluted. Cp values for
each of the dilutions were plotted against the corresponding cell number. Bacterial cell numbers
in 1-g feces were calculated using the standard curve.
Genomik DNA dibuat dari suspensi ini, seperti dijelaskan di atas, diukur menggunakan
spektrofotometer e-spect (Malcom, Tokyo, Jepang), dan 10 kali lipat serial diencerkan. nilai Cp
untuk masing-masing pengenceran diplotkan terhadap jumlah sel yang sesuai. jumlah sel bakteri
dalam 1-g feses dihitung dengan menggunakan kurva standar.
Statistical analysis
Analisis statistik
The primary goal for data analysis was estimating the clinical improvement of the probiotics
group relative to the placebo group. The secondary goal was to compare differences in fecal cell
composition and serum cytokines levels between the two groups.
Tujuan utama untuk analisis data memperkirakan perbaikan klinis dari kelompok probiotik
dibandingkan dengan kelompok plasebo. Tujuan kedua adalah untuk membandingkan perbedaan
tingkat komposisi sel dan level serum sitokin antara kedua kelompok.
We performed the Chi-square test or Fishers exact test for nominal variables. Comparisons of
continuous variables within groups were performed using a paired t-test for normally distributed
data, or Wilcoxons matched-pairs signed-ranks test if the data were not normally distributed.

Kami melakukan uji Chi-square atau uji Fisher untuk variabel nominal. Perbandingan variabel
kontinu dalam kelompok yang dilakukan menggunakan uji t berpasangan untuk data terdistribusi
normal, atau uji Wilcoxon jika data tidak terdistribusi normal.
Comparisons of continuous variables between groups were performed using independent-sample
Students t-test for normally distributed data, or the Mann-Whitney U-test for non-normally
distributed data.
Perbandingan antara variable diantara kedua kelompok dilakukan menggunakan independent
sample students t test untuk data yang terdistribusi normal atau Mann Whitney U test untuk
yang tidak terdistribusi normal.
All calculated P values were 2-tailed; P values <0.05 were considered statistically significant. All
analyses were performed using SPSS, version 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).
Semua nilai P yang telah dihitung adalah 2-tailed; Nilai P <0,05 dianggap signifikan secara
statistik. Semua analisa dilakukan dengan menggunakan SPSS, versi 15.0 (SPSS Inc, Chicago,
IL, USA).