Dr. dr. Sulistiana Prabowo, M.S. Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Hang Tuah 1
PENDAHULUAN Biosintesis purin dan pirimidin diatur dan dikendalikan secara ketat melalui mekanisme umpan balik, sehingga diproduksi sesuai kebutuhan fisiologik. Biosintesis purin dan pirimidin meningkat pada pertumbuhan dan regenerasi jaringan, pada saat sel membelah dengan cepat. 2
Lanjutan PENDAHULUAN Purin dan pirimidin tidak esensial dalam makanan. Sedikit atau tidak ada purin dan pirimidin dalam makanan yang membentuk asam nukleat jaringan. 3
BIOSINTESIS PURIN Ada 3 proses : Sintesis dari senyawa amfibolik (sintesis de novo) Fosforibosilasi purin Fosforilasi nukleosida purin
SINTESIS INOSIN MONOFOSFAT (IMP)
PERUBAHAN IMP MENJADI
AMP DAN GMP
HAMBATAN BIOSINTESIS NUKLEOTIDA PURIN Karbon yang ditambahkan pada reaksi 4 & 10 berasal dari derivat tetrahidrofolat. Defisiensi purin biasanya menggambarkan defisiensi asam folat. Senyawa yang menghambat sintesis asam folat dan selanjutnya menghambat sintesis purin dipakai untuk khemoterapi kanker. 7
SALVAGE REACTION Perubahan purin, ribonukleosida dan deoksiribonukleosida purin menjadi mononukleotida melibatkan salvage reaction yang membutuhkan energi jauh lebih sedikit dibanding sintesis de novo. 9
Lanjutan SALVAGE REACTION
Fosforibosilasi dari purin bebas oleh PRPP membentuk 5mononukleotida purin : Pu + PR-PP PuRP + PPi Dua fosforibosil transferase mengubah adenin menjadi AMP, mengubah hipoxantin dan guanin menjadi IMP dan GMP. 10
11
Lanjutan SALVAGE REACTION
Transfer fosforil dari ATP ke ribonukleosida purin : PuR + ATP PuR-P + ADP Adenosin kinase mengkatalisis reaksi fosforilasi adenosin dan deoksiadenosin menjadi AMP dan dAMP. Deoksisitidin kinase memfosforilasi deoksisitidin dan 2-deoksiguanosin menjadi dCMP dan dGMP.
12
REDUKSI NDP (RIBONUKLEOSIDA DI
FOSFAT) MENJADI dNDP
Reduksi 2hidroksil dari
ribonukleosida di fosfat purin dan pirimidin oleh enzim ribonukleotida reduktase kompleks, membentuk deoksiribonukleosida di fosfat (dNDP). Kompleks enzim ini hanya aktif bila sel aktif mensintesis DNA. Reduksi ini membutuhkan tioredoksin, tioredoksin reduktase dan NADPH. 13
REDUKSI NDP MENJADI dNDP
Fig 34.5
14
BIOSINTESIS NUKLEOTIDA PURIN Hati merupakan tempat utama biosintesis nukleotida purin. Hati menyediakan purin dan nukleosida purin untuk penggunaan dan salvage reaction oleh jaringan yang tidak dapat melakukan biosintesis purin. 15
Lanjutan BIOSINTESIS NUKLEOTIDA PURIN Otak manusia memiliki kadar PRPP amidotransferase (reaksi 2) yang rendah, sehingga tergantung sebagian kepada purin eksogen. Eritrosit dan lekosit PMN tidak dapat mensintesis 5-fosforibosilamin (struktur III) sehingga memakai purin eksogen untuk membentuk nukleotida purin. 16
17
SALVAGE REACTION Mengubah ribonukleosida uridin dan sitidin, deoksiribonukleosida timidin dan deoksisitidin menjadi nukleotida masing-masing. Fosforiltransferase (kinase) tergantung ATP, mengkatalisis reaksi fosforilasi nukleosida difosfat 2-deoksisitidin, 2-deoksiguanosin dan 2-deoksiadenosin menjadi nukleosida trifosfat masing-masing. Enzim orotat fosforibosil transferase (reaksi 5) dari sintesis nukleotida pirimidin mengubah asam orotat menjadi orotidin monofosfat (OMP). 18
EFEK METHOTREXATE (ANTIKANKER)
Reaksi 12 adalah satu-satunya reaksi pada biosintesis pirimidin yang membutuhkan derivat tetrahidrofolat. Gugus metilen dari N5, N10 metilen tetrahidrofolat direduksi menjadi gugus metil yang ditransferkan, dan tetrahidrofolat dioksidasi menjadi dihidrofolat. Agar reaksi berjalan terus dihidrofolat harus direduksi kembali menjadi tetrahidrofolat oleh dihidrofolat reduktase. Sel yang membelah membutuhkan banyak TMP dan tetrahidrofolat. Methotrexate menghambat enzim dihidrofolat reduktase. 19
PENGENDALIAN BIOSINTESIS PURIN DAN PIRIMIDIN Biosintesis purin dan pirimidin paralel setiap mol, sehingga diduga dikendalikan secara terkoordinasi. Terjadi cross-regulation pada biosintesis purin dan pirimidin. Reaksi yang dikatalisis PRPP sintase (reaksi 1 pada metabolisme purin), yang menghasilkan prekursor yang dibutuhkan oleh biosintesis purin dan pirimidin (PRPP), dihambat oleh nukleotida purin dan pirimidin. 20
KATABOLISME PURIN Manusia mengubah adenosin dan guanosin menjadi asam urat. Adenosin diubah terlebih dahulu menjadi inosin oleh enzim adenosin deaminase. Pada mamalia yang bukan primata tingkat tinggi, urikase mengubah asam urat menjadi allantoin yang larut dalam air. Manusia tidak memiliki urikase, sehingga hasil akhir katabolisme purin adalah asam urat. 21
22
PENYAKIT GOUT Adalah kelainan metabolisme dari katabolisme purin. Berbagai macam kelainan genetik pada PRPP sintase secara klinik menunjukkan gejala klinik penyakit gout. Setiap kelainan, mis kenaikan Vmax , peningkatan afinitas terhadap ribosa5fosfat, resistensi terhadap feedback inhibition, menyebabkan overproduksi dan overekskresi dari katabolit purin. 23
Lanjutan PENYAKIT GOUT
Bila kadar asam urat serum melebihi batas kelarutan, sodium urat akan mengkristal pada jaringan lunak dan sendi, yang selanjutnya menimbulkan reaksi inflamasi, gouty arthritis. Tetapi sebagian besar kasus gout menunjukkan abnormalitas ginjal dalam menangani asam urat. 24
KATABOLISME PIRIMIDIN Hasil akhir katabolisme pirimidin sangat larut dalam air, yaitu CO2, NH3, -alanin, -aminoisobutirat. Manusia mungkin melakukan transaminasi -aminoisobutirat menjadi metilmalonat semialdehida yang selanjutnya membentuk suksinil-KoA. 25
26
OVERPRODUKSI KATABOLIT PIRIMIDIN Karena produk akhir katabolisme pirimidin sangat larut dalam air, jarang menimbulkan gejala klinik yang berarti. Hyperuricemia yang disertai dengan overproduksi berlebihan dari PRPP, terjadi overproduksi nukleotida pirimidin dan peningkatan ekskresi -alanin. Karena N5, N10 metilen tetrahidrofolat dibutuhkan pada sintesis TMP, kelainan metabolisme folat dan vitamin B12 menyebabkan defisiensi TMP. 27
OROTIC ACIDURIA PADA
REYES SYNDROME Akibat ketidakmampuan mitokondria yang rusak berat untuk menggunakan karbamoil fosfat, sehingga karbamoil fosfat digunakan untuk overproduksi asam orotat dalam sitosol. Orotic aciduria tipe I : kekurangan enzim orotat fosforibosil transferase dan orotidilat dekarboksilase (reaksi 5 & 6 biosintesis pirimidin). Orotic aciduria tipe II : kekurangan enzim orotidilat dekarboksilase (reaksi 6 biosintesis pirimidin). 28
ALLOPURINOL Merupakan substrat alternatif untuk orotat fosforibosil transferase, berkompetisi dengan asam orotat. Produk nukleotida yang dihasilkan juga menghambat enzim orotidilat dekarboksilase, sehingga menyebabkan orotic aciduria dan orotidinuria (peningkatan OMP dalam urine). 29
