Anda di halaman 1dari 3

BAB II.

METODE
2.1 Tempat dan Waktu
Adapun tempat dan waktu dilaksanakannya praktikum pemeriksaan susu dengan
menggunakan metode MPN adalah :
Hari/Tanggal
: Kamis, 14 April 2016
Waktu
: 13.00 WIB - Selesai
Tempat
: Laboratorium Terpadu Fakultas Kesehatan Masyarakat
Universitas Diponegoro
Tabel 2.1 Rincian Kegiatan Praktikum Pemeriksaan Susu
No Hari
1
Senin
2
Kamis

Tanggal
11 April 2016
14 April 2016

Kegiatan
Pembuatan media
Pemeriksaan susu
menggunakan metode

Jumat

15 April 2016

MPN
Pengecekan hasil uji
MPN pada susu

2.2 Populasi dan Sampling


Populasi dalam praktikum ini adalah semua jenis susu cair di wilayah Tembalang
Sample yang digunakan dalam praktikum ini adalah susu kemasan Dancow cair dengan
rincian sebagai berikut:
Netto
: 110 ml
Komposisi
: Susu sapi segar, gula, susu bubuk skim, bubuk kakao, pengemulsi
nabati (mengandung lesitin kedelai), premiks vitamin, perisa coklat, mineral.
Produksi
: PT Nestle Indonesia, Kejayan, Pasuruan 67172, Indonesia
2.3 Metode
2.3.1 Pembuatan Media
LB
Alat dan Bahan
Laktosa broth
Bromtimol Blue (BTB)
Aquades
Kapas
PH
Alat
Beaker glass
Erlenmeyer
Tabung reaksi
Tabung durham
Batang Pengaduk
Pipet
Suntikan
autoclave

Neraca
Rak tabung reaksi
Cara kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan yang dibutuhkan
2. Menimbang 13 gram Laktosa Broth kemudian dimasukkan ke dalam beaker glass
yang telah diisi 600 ml aquades.
3. Mengaduk larutan hingga homogen
4. Menambahkan larutan dengan indikator BTB sebanyak 10 tetes kemudian
mengaduknya kembali
5. Memeriksa pH larutan dengan kertas pH. pH larutan sekitar 7,2 jika terlalu asam
maka tambahkan KOH sebanyak 10 tetes kemudian cek kembali.
6. Memasukkan masing-masing 5 ml larutan ke dalam 8 tabung reaksi
7. Memasukkan tabung durham yang telah terisi penuh larutan LB ke dalam tabung
reaksi secara terbalik.
8. Menutup tabung reaksi dengan kapas.
9. Mensterilkan media dengan autoclave
PCA
Bahan
PCA
Aquades
PH meter
Kapas
Alat
Beaker glass
Erlenmeyer
Tabung reaksi
Batang Pengaduk
Pipet
Neraca
Cara kerja
1. Menyiapkan alat dan bahan
2. Menimbang 3 gram PCA kemudian memasukkannya ke dalam erlenmeyer yang
3.
4.
5.
6.

telah diisi 100 ml aquades


Mengaduk larutan hingga homogen
Memeriksa pH larutan. Larutan memiliki pH 7,2
Menutup erlenmeyer dengan kapas steril
Melakukan sterilisasi dengan autoclave
a. Pemeriksaan MPN pada Susu dengan metode 5.1.1
1. Menyiapkan alat dan bahan.
2. Mengisi 5 tabung reaksi pada media Laktosa Broth dengan sampel susu
yang digunakan masing-masing sebanyak 10 ml.
3. Kemudian menutupnya dengan kapas dan diinkubasi selam 24 jam
4. Melakukan pengenceran untuk 2 tabung reaksi. Memberikan 2 macam
label, yaitu untuk pengenceran 10-1, dan pengenceran 10-2.

5. Untuk pengenceran 10-1 dilakukan dengan cara mengisi tabung LB dengan


1 ml larutan sampel kemudian mengocoknya hingga homogen selama
kurang lebih 1 menit. Kemudian menutupnya dengan kapas
6. Untuk pengenceran 10-2 dilakukan dengan cara menggambil sampel dari
tabung pengencer 10-1 sebanyak 0,1 ml kemudian mengocoknya hingga
homogen kurang lebih selama 1 menit. Kemudian menutupnya dengan
kapas
7. Menginkubasi pada suhu 37o C selama 1 x 24 jam.
8. Mengamati perubahan warna medium dan timbulnya gelembung gas
dalam tabung durham.
9. Menghitung nilai MPN nya.
B. Pemeriksaan Hitung Kuman pada susu
1. Menyiapkan alat dan bahan
2. Mengambil 0,1 ml sampel susu dari tabung pengenceran terakhir (10-2)
kemudian menuangkannya ke dalam cawan petri.
3. Menuang media PCA ke dalam cawan petri yang telah berisi sampel dan
meratakannya.
4. Menunggu hingga media beku dan melakukan inkubasi 37 C selama 24
jam.
5. Mengamati hasil dan menghitung jumlah koloni yang tumbuh.
2.4 Pengolahan dan Analisis Data
a Tema A
b Tema B