Estudio
de
algunos
factores
que
afectan
establecimiento de un mtodo espectrofotomtrico.
el
Fundamento.
La espectrometra es un mtodo qumico que se utiliza para cuantificar la
concentracin de analitos utilizando la luz. A los mtodos que se auxilian con la
luz para llevar a cabo un anlisis cuantitativo se le conoce como mtodos
espectrofotomtricos, estos pueden tener una sub-clasificacin dependiendo
de la longitud de onda que utilicen para el anlisis entre los ms conocidos
estn: espectrometra de absorcin visible (colorimetra), ultravioleta e
infrarrojo.
Para considerar a un mtodo espectrofotomtrico como cuantitativo primero
debe de cumplir ciertas reglas como:
Objetivos.
%T 400 (NiSO4 )
21.8
21.3
21.5
21.5
22.6
22
22.4
22.3
21.6
21.6
21.3
21.7
22.5
22.4
21.6
El dimetro interno equivalente hace referencia a que los tubos deben de tener
la misma medida de dimetro a lo largo del tubo para evitar
variaciones
en
los resultados, y superficies pticamente equivalentes se
refiere a que en la superficie del tubo debe de ser de tal manera que la luz
pase de manera homognea a travs de l, y del resto de los tubos.
Curva de calibracin.
Tabla 2. Curva de calibracin de Fe 3+ por el mtodo del NH4SCN.
Tubo No
Fe3+ (g/mL)
A480
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
0,11634375
0,34903125
0,6980625
1,1634375
1,74515625
2,326875
2,90859375
3,4903125
4,07203125
4,65375
5,8171875
8,1440625
0,01772877
0,05948352
0,11463878
0,19314197
0,35556141
0,37468755
0,45717457
0,57675413
0,67366414
0,71896663
0,90308999
1,21467016
A ajustada por
regresin
lineal.
0,0734438
0,10553141
0,15366282
0,21783803
0,29805705
0,37827606
0,45849508
0,53871409
0,61893311
0,69915213
0,85959016
1,18046622
13
12,7978125
1,74472749
1,82221834
Fe3+
(g/mL)
0,1163437
5
0,3490312
5
0,6980625
Log [Fe3+]
0,9342569
4
0,4571356
9
0,1561056
9
A480
%T
Absortan
cia
0,0177287
7
96
0,0594835
2
87,2
12,8
0,1146387
8
76,8
23,2
1,1634375
1,7451562
5
2,326875
2,9085937
5
3,4903125
4,0720312
5
10
4,65375
11
5,8171875
12
8,1440625
13
12,797812
5
0,0657430
58
0,2418343
17
0,3667730
54
0,4636830
67
0,5428643
13
0,6098111
02
0,6678030
49
0,7647130
62
0,9108410
98
1,1071357
43
0,1931419
7
0,3555614
1
0,3746875
5
0,4571745
7
0,5767541
3
0,6736641
4
0,7189666
3
0,9030899
9
1,2146701
6
1,7447274
9
64,1
35,9
44,1
55,9
42,2
57,8
34,9
65,1
26,5
73,5
21,2
78,8
19,1
80,9
12,5
87,5
6,1
93,9
1,8
98,2
%Ep=
230.3
pendiente
%Ep=
230.3
=3.11
73.908
A480
0.550
0.482
0.456
0.423
0.399
Como se puede observar el color no es estable a lo largo del tiempo por lo que
las lecturas se deben hacer inmediatamente despus de haber agregado el
NH4SCN.
Efecto de la concentracin del cromgeno.
Tabla 5. Efecto de la concentracin de SCN- en la determinacin de Fe 3+.
SCN(g/mL)
290,412
871,236
2904,12
5808,24
8712,36
11616,48
14520,6
Tubo No
1
2
3
4
5
6
7
Fe3+ (g/mL)
SCN-/Fe3+
A480
4,188375
4,188375
4,188375
4,188375
4,188375
4,188375
4,188375
69,3376309
208,012893
693,376309
1386,75262
2080,12893
2773,50524
3466,88155
0,24033216
0,40011693
0,54515514
0,62525165
0,65560773
0,69250396
0,74472749
En este caso como se puede ver en la grfica falta un poco ms para alcanzar
el punto de saturacin pero la mejor concentracin que se puede usar segn la
grfica es 14520,6 g/mL.
Efecto del pH en el desarrollo de la reaccin entre el Fe 3+ y el SCN- .
Tabla 6. Efecto del pH.
Tubo No
1
2
3
4
5
pH
1
2
3
7
9
A480
0.892
0.926
0.919
0.026
0.037
A480 inicial
0.899
0.899
0.899
0.899
A480 final
0.317
0.130
0.867
0.844
A480
0.582
0.769
0.032
0.055
Valor optimo
2
Inmediatamente despus de agregar
el cromgeno.
14520,6 g/mL.
1,1634375 a 4,07203125 g/mL y
3.11
LDD=
3 Sb
m
y ^
yi 2
Sb=
LDD=
3 ( 0.04729 )
g
=1.0288
0.1379
mL
Discusin.
Como se puede observar hay diversos factores que se deben tomar en cuenta
para la implementacin de un mtodo espectrofotomtrico, lo primero es la
seleccin de las celdas que como ya vimos, deben ser pticamente
equivalentes y de dimetro interno equivalente ya que si no cumplen con estos
requisitos puede provocarse luz parasita lo que afectara en las lecturas de
absorbancia y transmitancia.
Otro factor que afecta en este tipo de mtodos es el tiempo de duracin del
producto colorido, porque no se sabe con exactitud si el reactivo que se va a
producir es estable en un periodo largo de tiempo, en el caso se la reaccin
que se llev a cabo nos pudimos dar cuenta que esta es muy poco estable por
lo que a los pocos minutos el color de la reaccin comenzara a decaer
dndonos falsos negativos por lo que se debe realizar la lectura
inmediatamente despus de comenzar la reaccin.
La concentracin del cromgeno es otro factor que tambin hay que tomar en
cuenta ya que de este depende que haya una mxima absorbancia, adems de
que si se agrega mas esta absorbancia no cambiara por lo cual se estara
desperdiciando reactivo. Debido a esto es importante saber el punto de
saturacin.
El pH tambin afecta a la reaccin por lo cual hay que saber en cual se
desempea mejor la reaccin, en nuestro caso pudimos darnos cuenta que la
reaccin se debe llevar a cabo en un pH acido de alrededor de 2 porque en pH
alcalino el cromgeno (SCN-) se neutraliza evitando la reaccin con el ion Fe 3+
haciendo que no haya desarrollo de color y por lo tanto nos de falsos
negativos.
Y por ltimo pudimos notar que la presencia de cierto aniones en la reaccin
hacen que esta se modifique e intervenga con el desarrollo de color, en este
caso se us tartrato de sodio, fluoruro de sodio, oxalato de sodio y fosfato de
potasio. Lo que se pudo observar es que el tartrato y el fosfato casi no
interfieren en la reaccin pero el fluoruro y el oxalato si, esto es porque el
hierro es mas a fin con el fluoruro debido a su alta electronegatividad y al
oxalato porque forma compuestos de coordinacin lo cual hace que haya una
competencia entre los iones y el SCN - para unirse con el hierro.
Conclusin.
Para un buen establecimiento de un mtodo espectrofotomtrico es necesario
elegir inicialmente tubos con superficies pticas equivalentes y dimetros
similares, al igual que controlar variables como pH, tiempo, concentracin de
analitos y presencia de interferencias. Adems de que debe realizarse un
amplio estudio del elemento a analizar y ver si este mtodo es el mejor para l.
Bibliografa.
D.A. Skoog, J.J. Leary, 1994, Anlisis Instrumental, McGraw-Hill, 4ta. Edicin,
Apndice 1.
Torres Cartas Sagrario, Gmez Benito Carmen. Tcnicas instrumentales.
Manual de Laboratorio. Editorial Universidad Politcnica de Valencia. pp. 6061.