Jelajahi eBook
Kategori
Jelajahi Buku audio
Kategori
Jelajahi Majalah
Kategori
Jelajahi Dokumen
Kategori
Peralatanlaboratoriummerupakansalahsatufaktoryangdapatmempengaruhihasilpemeriksaan
laboratorium.Untukitualatperludipeliharadandikalibrasisacarateratur.Untukmeningkatkan
mutupemeriksaanlaboratorium,jugadiperlukanpemilihanalatyangtepat.
Pemilihanperalatanperlumemperhatikanhalhalsebagaiberikut:
Produksipabrikyangtelahdikenal
Memilikiketepatandanketelitianyangtinggi
Tersediateknisidansukucadangnyamudahdidapat
Tersediafasilitaspelayananpurnajual
Sedapatmungkintidaktergantungpadareagendarijenis/merektertentu
Pengoperasianmudahdanpraktis
Batasdeteksijelas
Setiapperalatanyangadaperludibuatprotappengoperasiannyasertadipantaupenggunaannya
dandiujimutusecaraberkala.
Beberapaperalatanlaboratoriumyangperludikalibrasiadalah:
a. DiluterMakro(Dilutermacro)
Kalibrasidapatdilakukandenganbeberapacara,antaralaindenganperbandinganpengeceran.
Cara:
Encerkanlarutanzatwarna(evansblue,BSPataubathophenanthroline)denganaquades
menggunakan diluter yang akan dikalibrasi. Lakukan hal yang sama dengan
menggunakanpipetataulabuukuryangbersertifikatkelasAdariNationalBureauStadar
(NBS).
Catatkeduahasiltersebutdanbandingkan.
Diluterdalamkeadaanbaikbilapembacaanhasilkeduanyasamaatauhampirsama
(berbeda0,51%).
b. DiluterMikro(dilutermicro)
Halhalyangperludiperhatikanadalah:
Setiapkalisebelumalatdipakaiharusdirendamataudibasahidenganaquadesataubahan
pelarut yang sesuai selama 1 menit untuk menghindari timbulnya gelembung pada
waktulogamdilutermenyentuhcairan,sehinggavolumedidalamcakrammikrodiluter
berkurang.
Untuk kalibrasi volume mikro diluter digunakan Diluter Delitery tester yaitu karton
penghisapdengangambaranlingkaranlingkarandengandiametertertentuyangmenunjukkan
volumetertentupula.Misalnyadiameter0,9cmmenunjukkanvolume0,025
Cara:
Tegakkan mikrodiluter yang telah berisi cairan di atas karton dengan diameter
lingkaranyangsesuaidenganvolumemikrodiluteryangakandikalibrasi.
Tempelkancakramdilutertepatpadatengahlingkaran.
Apabilacairanmembasahilingkaransampaibatastepinya,berartivolumecairandi
dalamcakramsesuaiatautepat.
Apabilacairantidakmencapaitepi,berartivolumekurangdariyangseharusnya,dan
sebaliknyabilacairanmelebarkeluarlingkaranberartivolumenyamelebihidariyang
seharusnya.
c. Inkubator(incubator)
Cara:
1) Catatsuhuinkubatorpadakartusetiapharisebelummulaibekerja.
2) Penyimpangansuhuyangmelebihi2oC,pengatursuhuperludisetelkembali.
d. Lemaries(Refrigerator/freezer)
Catatsuhusetiapharidengantermometeratausuhuyangterlihatpadadigital
displaypadafreezer.Termometeryangdigunakanharussesuaidengansuhualatyang
dikalibrasi,misalnya28oC,20oCatau76oC.
Secaraberkalaperiksadenganmenggunakantermometerstandar.
Cocokkanhasilyangdidapatantarasuuyangditunjukkanolehtermometerdigital
displaydengantermometerstandar.
e. Oven
Cara:
1) Secaraberkalalakukanpemeriksaansuhudenganmenggunakantermometer.
2) Cocokkanhasilyangdidapatantarasuhuyangtercantumdalamovendengansuhuyangdi
tunjukkanolehtermometerstandar.
f. Otoklaf(Autoclave)
Digunakanuntukmengujiapakahfungsialat,suhu,waktudantekanannyasudahbenar.
Pengujiandapatdilakukandenganmenggunakan:
1. Autoclaveindicatortape.
Cara:
Rekatkanindicatortapesecaramelingkarpadakemasanyangaikandisterilisasi.
Padaotoklafyangbesar,kemasandiletakkanpadabagianatasdanbagianbawahotoklaf.
Atursuhu,waktudantekanan
Hidupkanotoklaf
Setelahselesaibacaindicatortapedenganmelihatperubahanwarnaangterjadipada
garisgarisdiagonal.Bilaprosessterilisasiberjalandenganbaik,garisgarisdiagonal
berubahwarnadariputihmenjadicoklatkehitamhitaman.
2. Bacillusstearothermophilus
Cara:
Masukkanbacillusstearothermophilusdalambentukliofilisasidalamotoklaf.
Atursuhu,waktudantekanan
Hidupkanotoklaf.
Setelahselesai,ambilBacillusstearothermophilusdantamanpadaagardarah(bloodagar)dan
inkubasipadasuhu4060oCselama2448jam.
ProsessterilisasiberjalanbaikbilatidakadapertumbuhanBacillusstearothermophilus.
g. PeralatanElisa(Elisa,apparatus)
PeralatanElisaterdiridari:
1. ElisaReader
Yangperludikalibrasiadalah:
Liniaritasalat
Stabilitaspembacaan
Ketepatanpembacaan
Kalibrasiharusdilakukan:
Pertamakalialattersebutdipakai
Setelahpenggantianlampu
Secaraberkalauntukketepatanpembacaan
Carakalibrasisangatbervariasi,tergantungmerekdarialat,untukituperlumengikutipetunjuk
yangterdapatpadamasingmasingalat.
2. ElisaWasher
Yangperludikalibrasipadaalatiniadalah:
a). Volumedispenser
Waktudispensing,volumedidalamwasherharussesuaidengansertifikasimasingmasingalat.
Apabilavolumetidaktepat,dikalibrasisesuaidenganpetunjukyangadapadaalat.
b). Sisayangtertinggaldalamsumur(restvolume)
Sisayangtertinggaltidakbolehmelebihivolumeyangditentukanuntukmasingmasingalat.
Apabilavolumemelebihivolumeyangditentukanmakaalatperludikalibrasi.
c). Posisisumur
Halhalyangperludiperhatikanyaitupadawaktudispensingatauasperasi,bagianheadtidak
bolehmenyentuhtepiataudasarsumur.
3. Inkubator(Incubator)
Suhuyangdipakaiharussesuaidengansertifikasimasingmasingalatdandipantausetiapkali
digunakan.
4. Heatingblock
Suhuhaetingblockharusdikalibrasidengancara:
LetakkanalatNTCpadaruanganinkubasi.
PasangdigitalnilaiOhm.
AmatiperubahannilaiOhm.
Hasilyangdiperolehadalahsebesar702Ohmuntuksuhu37 oCdan557,5Ohmuntuksuhu50
C.
Bilahasilyangdiperolehtidaksesuaidengannilaidiatas,harusdilakukanpenyesuiandengan
caramemutarpotensioP3danP4yangterdapatdidalamhaetingblock.
h. pHmeter
Halhalyangperludiperhatikanadalah:
letakkankonektorpadapHmeteruntuktepatelektrodaharusdiperhatikandenganbaik,
jangansampaisalahmenghubungkankekonektorlain.
PadasaatmenuangcairankimiaharushatihatijangansampaitumpahkepHmeter,
karenaakanmerusakkomponendidalamnya.
Selaindaripadahalhaltersebutdiatas,perludilakukankitaankhususterhadapelektroda,
yaitu:
Penggunaanelektrodaharushatihatijangansampaiterbenturbendabendakeras,
karenaelektrodaterbuatdaribahangelasyangdapatpecah.
Cucielektrodasebelumdansesudahdigunakan
Kalibrasiperludilakukansetiapkaliakandigunakan.Dilakukandenganmenggunakan:
1. pHSimulator
Cara:
SiapkanalatpHmeteryangakandiperiksadanpHsimulator.
HubungkanpHsimulatorketombolyangdigunakanuntukmenghubungkandenganelektroda
padapHmeter.
Hubungkanmasingmasingalatyangtelahdisambungkantersebutkelistrik.
BerikaninputpH7daripHsimulatordanaturzero.
UlangitindakantersebutsampaipenunjukanpHmeterkonstandanmenunjuk7atau0mV.
KemudianberikaninputpH4padapHsimulator,amatidantepatkanpenunjukpadapHmeter
sampaimenunjukangka4denganmengaturkompensasitemperatur.
LakukanhalyangsamauntukinputpH9daripHsimulatorkepHmetersampaipenunjukkan
konstan.
pHmetersiapuntukdigunakan.
2. Larutanbufferstandar
Cara:
SiapkanlarutanlarutanbufferstandarpH4,7dan9,aquadestsertatissuehalus.
HubungkanpHmeterdenganelektrodagelas.
NyalakanpHmeter.
Bilaselektrodadenganaquadesyangbarudankeringkandengankertastissue,masukkanke
dalambeakerglassberisilarutanbufferpH7.
PeriksapenunjukkanpH,tepatkansampaimenunjukkanpH7denganmengaturzero.Ulangi
sampaikonstan.
Bilaelektrodadenganaquadestdankeringkandengankertastissue,lakukanhalyangsamake
dalamlarutanbufferpH4.periksapenunjukpH,tepetkansampaimenunjukkanpH4dengan
mengaturkompensasi.Ulangisampaimetermenunjukkanangkakonstan.
LakukanhalyangsamauntukbufferpH9.
pHbuffersiapuntukdigunakan.
i.
Pipet
Cara:
Timbangbotoltimbangandengantimbanganalitik,kemudiancatathasilnya,misalnyaAmg.
Isapaquadestyangsudahdiukursuhunyadenganpipetyangsudahdikalibrasi,masukkandalam
botoltimbang.Misalnyasuhuaquadest25,10C,tentukanberatjenisnya(BJ)denganmelihat
padatabelBJaquadestyaitu0,997017.(daftarberatjenisaquadestdapatdilihatpadatabel11di
bawahini).
Timbangbotoltimbanganyangsudahberisiaquadestdancatathasilnya,misalnyaBmg.
Hitungberataquadestyaitu(BA)mg.
Makavolumeaquadestadalah:
Berataquadest(BA)
Volume=BJaquadest(0,997017
Hitungperbedaanantaravolumehasilperhitungandiatasdenganvolumeyangdipipet.
Bataspenyimpanganyangmasihdiperbolehkansesuaidenganjenispipetdapatdilihatpadatabel
12dibawah.
Carakalibrasiinijugadapatdilakukanpulauntuklabuvolumetrikdangelasukurdanlainlain.
j.
Penangasair(Waterbath)
Yangperludipantauadalahsuhu.Carapemantauanpengatursuhusamasapertipemantauansuhu
padarefrigeratoratauoven.
k. Rotator(Shaker)
Kalibrasidapatdilakukandengancarasebagaiberikut:
1. Menggunakantachometer
Bilakecepatanantaratachometerdenganalatpengukurkecepatanpadarotatormenunjukkan
angkayangsama,berartialatdalamkeadaanbaik.
2. menggunakancarasederhanasebagaiberikut:
pegangpensilsecarategakdisampingplate.
Jalankanrotatorsambilmemilihjam
Hitungsentuhanplatepadapinsildalamwaktu1menit.
Bilajumlahhitungansesuaidenganalatpengukurkecepatan,berartialatdalamkeadaanbaik.
l.
Sentrifus(centrifuge)
Kalibrasisentrifusdilakukandenganmengukurkecepatanpermenitdanwaktu.Padarefrigerated
centrufugeselainkalibrasirpmdanwaktujugaperlukalibrasisuhu.
1. Kalibrasirpm
Dapatdilakukandenganmenggunakan:
a). Tachometermekanikyaitudengankabelyanglentur.
Cara:
Ujungkabelyangsatukaitkanpadakumparanmotordidalam,sedangkanujungyanglain
dihubungkandenganalatmeter.
Setsentrifuspadarpmtertentu,kemudianjalankan.
Catatrpmyangditunjukkanolehmeterpadatachometer.
Ulangibeberapakali,hitungratarata.
b). Tachometerelektrik
Letakkanbagianmagnitdikelilingcoil,sehinggamenimbulkanaliranlistrikbilaalatdijalankan.
Setsentrifuspadarpmtertentu.
Aliranlistrikyangtimbulakanmenggerakkanbagianmeter.
Catatrpmyangditunjukkanolehmeterpadatachometer.
Ulangibeberapakali,hitungratarata.
c). Strobelight
Alatinidigunakanbilatachometertidakdapatmenjangkaumotor.Kecepatanputar/rpmmasih
dapatditerimabilapenyimpangannilairataratatidaklebihdari5%.
2. Kalibrasialatpencatatwaktu(timer)
Dapatdilakukandenganmenggunakanstopwatch.
Cara:
Setsentrifuspadawaktuyangseringdipakai,misalnya5menit.
Jalankanalatdanbersamaandenganitujalankanstopwatch
Padawaktusentrifusberhenti,matikanstopwatch,catatwaktuyangditunjukkanstopwatch.
Ulangibeberapakali,hitungratarata.
Alatpencatatwaktu(timer)masihdapatditerimabilapenyimpangannilairataratatidaklebih
dari10%.
m. Spektrofotometer(spectrophotometer)
Kalibrasimeliputi:
1. Ketepatanpengukuranabsorban
Kalibrasidilakukantiapminggu,kalibrasidulakukandenganmemakailarutan50mgatau100
mg/lpotasiumbichromat(K2Cr2O7)0,8Nasamsulfat(H2SO4).Formatlarutantersebutdapat
dilihatpadatabeldibawahini.Larutantersebutmempunyainilaiabsorbanpadasetiappanjang
gelombang.
2. Ketepatanpanjanggelombang
Lakukankalibrasiinisetiap6bulan,kalibrasidapatmenggunakanbeberapacara:
a). Denganwarnasinar
Kalibrasiberdasarkanpengamatanwarna,hasilnyakurangteliti.
Cara:
Pada arah jalannya sinar diberi kertas putih dan amati warna yang timbul pada panjang
gelombangtertentu:
Hijaukebiruan:padapanjanggelombang500nm
Hijauterang:padapanjanggelombang525nm
Kuninghijau:padapanjanggelombang585nm
Toleransiyangmasihdianggapbaikadalah5nm.
b). DenganlampuDeuterium
HanyadapatdilakukanpadaspektrofotometerUVVis,cara:apakah%Tmaksimumadapada
panjanggelombang6560,4nm.
c). DenganfilterDidyniumatauHolmiumOxide
Cara:
Periksa%Tmin/AbsmaksdarifilterDidyniumatauHolmiumOxide.%TdariDidyniumfilter
ada pada panjang gelombang 586 3 nm, sedangkan % T min dari Holmium Oxide pada
panjanggelombang360,90,75nm.
d). Denganstandarfilterbersertifikat
Beberapaspektrofotometerdapatmenggunakanfilterstandarbersertifikatyangmempunyai%T
maksuntukpanjanggelombangtertentusepertiyangtercantumpadalabelnya.
Cara:
Bilaspektrofotometeryangakandikalibrasimempunyailebihdarisatusumber,gunakanlampu
Tungsten.
Masukkanstandarpanjanggelombang10nmdibawahstandarpanjanggelombang.
Atur%Tsehinggamenunjukkan8090%T.
Panjanggelombangdimasukkanperlahanlahansambilmengamati%T,%Tharusnaik,bila
tidaknaikulangilangkahlangkahtersebutdiatas.
Carilah panjang gelombang dimana terdapat % T maksimum dan catat panjang gelombang
tersebut.Batasyangdapatditoleransiadalahpanjanggelombangstandarsepertipadalabel5
nm.
3. Linearitasalat
Lakukankalibrasisetiap6bulan.
Kalibrasi linearitas dapat dilakukan dengan mengukur absorban pada panjang gelombang
tertentuterhadapkonsentrasitertentuterhadapkonsentrasilarutanyangberbedabedayang
telahdiketahuinilainya.
Pemeriksaandilakukandengan:
a). LarutanKaliumbikromat(K2Cr2O7)untukdaerahUV(<400nm),denganserialkonsentrasi.
Cara:
BuatstokK2Cr2O7 yaitudenganmelarutkan50mgKaliumbikromatdalam1literasamsulfat
0,01N.
Buat serial pengenceran stok kalium bikromat dengan larutan asam stok diencerkan hingga
menjadi25ml
10mlsulfat0,01Nsebagaiberikut:
10mlstokdiencerkanhinggamenjadi50ml
5stokdiencerkanmenjadi50ml
Ukurabsorbandarimasingmasingpengencerandenganmenggunakanblankoasamsulfat0,01
Npadapanjanggelombang350nm.
Hasildisebutlinierbilanilaiabsorbandarimasingmasingpengenceransepertiterlihatpada
tabel.
NilaiabsorbanpadaberbagaipengenceranlarutanK2Cr2O7
StokK2Cr2O7
10ml
pengenceran
25ml
(350)
0,214
10ml
50ml
0,107
5ml
50ml
0,054
Selain itu dapat pula dengan mencatat hubungan antara konsentrasi dan absorban dengan
menggunakankertasgrafikdanamatiapakahgrafikmenunjukkangarislurusatautidak.
b).Larutancobaltammoniumsulfatuntukdaerahpanjanggelombanglebihdari400nm.
Cara:
Buatlarutanstokcobaltammoniumsulfatyaitudenganmelarutkan8,0grcobaltammonium
dalam100mlasamsulfat1%v/v.
Buatpengenceranyangtepatdenganperbandingan1:2,1:3dan1:4.
Ukurabsorbandarimasingmasingpengencerandenganblankoasamsulfat1%padapanjang
gelombang512nm.Plothubunganantarakonsentrasidanabsorbanyangdibacapadakertas
grafikdanamatiapakahgrafiknyamenunjukkangarislurus.
c).Filterstandarbersertifikatyangtelahdiketahui%Tpadapanjanggelombangtertentu.
Cara:
Masukkanstandar100%T.
Setpanjanggelombangsesuaidenganyangtercantumpadatabel.
Atur%Thinggamenunjuk100%T.
Gantistandar100%Tdenganstandar0%T.
Ulangilangkahlangkahdiatashinggamenunjukkan0%Tdancatatnilai%Tnya.
Batastoleransiyangmasihdapatditerimasesuaidenganpetunjukproduktersebut.
4.
Straylight(stayenergy)
Staylightadalahcahayalaindiluarpanjanggelombangtertentuyangdiinginkan.Sumbernya
dapatberasaldarisinaryangbocordariluar,sinardaripanjanggelombanglainataudarialatitu
sendiri.Misalnyakerusakanmonokromatordanpembiasansinaryangjatuhpadakuvet.
Lakukankalibrasisetiap6bulan.Kalibrasidapatdilakukandenganbeberapacara:
a). Larutansodiumiodida
Larutansodiumiodidadalamairmempunyai%Tlebihkecildari1padapanjanggelombang260
nm.
b). Gelascorningvicor
Gelastidakakanmentransmisikancahayapadapanjanggelombang205nm.
c). Standarfilterbersertifikat
padastandartersebutterdapat3buahfilterSREdenganpanjanggelombang220nm,340nmdan
400nm.
Filterakanmenyerapcahayadiataspanjanggelombangtersebutdanakanmelewatkancahayadi
bawahpanjanggelombangtersebut.
Cara:
Masukkanstandar100%T
Setpanjanggelombang400nm.
Atur%Thinggamenunjukkan100%T.
Gantistandar100%TdenganstandarSRE400nmdancatatpembacaan%T.
UlangilangkahlangkahtersebutdiatasuntukfilterSRE340nmdan220nm.
Hasilyangmasihdapatditerimaadalah00,6%T.
n.
Timbangananalitik(AnalyticalBalance)
KalibrasianaktimbangandilakukandengananaktimbanganstandaryangbersertifikatkelasM,
yangmemperhatikannilainominalsetiapanaktimbangan,deviasisistematikdarinilainominal,
kelasketelitian,ketidakpastian,nilaimassadanmassajenisbahanatauvolume.
Carakalibrasianaktimbangan:
Periksalahtitiknol,jarumpenunjukangkaharusmenunjukkanangkanol.
Letakkananaktimbanganstandaryangteringan.
Timbanganaktimbanganyangdipakaiseharihari,Bacadancatathasil.
Ulangipenimbangandengananaktimbanganstandaryanglebihberat.
Anaktimbangandianggapmasihtepatbilaberatyangditunjukkanolehanaktimbangantidak
menyimpanglebihbesardari0,1%dariberatmasingmasinganaktimbanganstandar.
o.
Timbanganelektrik(ElectricalBalance)
Kalibrasi timbangan dilakukan setiap hari dengan memakai anak timbangan standar yang
bersertifikatkelasS.
Cara:
Lakukanpenimbangananaktimbanganstandar
Catathasiltimbangan
Ulangisampai5kalihitungnilairataratatoleransiperbedaanberatyangmasihdapatditerima
adalah:
1) Untukberat150mg=0,014mg
2) Untukberat100500mg=0,025mg
3) Untukberat15mg=0,054mg
p.
Termometer
Kalibrasidilakukansetiap6bulansekalidengancarasebagaiberikut:
Letakkanthermometeryangdikalibrasidanthermometerstandarbersertifikatberdekatandalam
ruangberAC(suhu20o25oC)dandiamkanselama1jam.
Catatsuhuyangditunjukkanolehkeduaalatthermometer.
Thermometer memenuhi syarat bila perbedaan pembacaan suhu antara kedua thermometer
adalah0,5oC.
Ulangipemeriksaandiatasdenganmenggunakansuhu30oC40oC(dalamoven).