PemeliharaandanKalibrasiAlat

Peralatanlaboratoriummerupakansalahsatufaktoryangdapatmempengaruhihasilpemeriksaan
laboratorium.Untukitualatperludipeliharadandikalibrasisacarateratur.Untukmeningkatkan
mutupemeriksaanlaboratorium,jugadiperlukanpemilihanalatyangtepat.

Pemilihanperalatanperlumemperhatikanhalhalsebagaiberikut:
Produksipabrikyangtelahdikenal
Memilikiketepatandanketelitianyangtinggi
Tersediateknisidansukucadangnyamudahdidapat
Tersediafasilitaspelayananpurnajual
Sedapatmungkintidaktergantungpadareagendarijenis/merektertentu
Pengoperasianmudahdanpraktis
Batasdeteksijelas
Setiapperalatanyangadaperludibuatprotappengoperasiannyasertadipantaupenggunaannya
dandiujimutusecaraberkala.

Beberapaperalatanlaboratoriumyangperludikalibrasiadalah:
a. DiluterMakro(Dilutermacro)
Kalibrasidapatdilakukandenganbeberapacara,antaralaindenganperbandinganpengeceran.
Cara:

Encerkanlarutanzatwarna(evansblue,BSPataubathophenanthroline)denganaquades
menggunakan diluter yang akan dikalibrasi. Lakukan hal yang sama dengan

menggunakanpipetataulabuukuryangbersertifikatkelasAdariNationalBureauStadar
(NBS).

Baca absorbans larutan warna hasil pengeceran dengan diluter menggunakan

spektrofotometeryangtelahdikalibrasi.Lakukanhalyangsamapadalarutanwarnahasil
pengencerandenganpipet/labuukur.

Catatkeduahasiltersebutdanbandingkan.
Diluterdalamkeadaanbaikbilapembacaanhasilkeduanyasamaatauhampirsama
(berbeda0,51%).

b. DiluterMikro(dilutermicro)
Halhalyangperludiperhatikanadalah:

Setiapkalisebelumalatdipakaiharusdirendamataudibasahidenganaquadesataubahan
pelarut yang sesuai selama 1 menit untuk menghindari timbulnya gelembung pada
waktulogamdilutermenyentuhcairan,sehinggavolumedidalamcakrammikrodiluter
berkurang.

Setelah direndam, segera tiriskan di atas kertas tissue/kertas penghisap untuk

menghilangkankelebihancairanyangmenempelpadalogam.

Untuk kalibrasi volume mikro diluter digunakan Diluter Delitery tester yaitu karton
penghisapdengangambaranlingkaranlingkarandengandiametertertentuyangmenunjukkan
volumetertentupula.Misalnyadiameter0,9cmmenunjukkanvolume0,025
Cara:

Tegakkan mikrodiluter yang telah berisi cairan di atas karton dengan diameter
lingkaranyangsesuaidenganvolumemikrodiluteryangakandikalibrasi.

Tempelkancakramdilutertepatpadatengahlingkaran.

Apabilacairanmembasahilingkaransampaibatastepinya,berartivolumecairandi
dalamcakramsesuaiatautepat.

Apabilacairantidakmencapaitepi,berartivolumekurangdariyangseharusnya,dan
sebaliknyabilacairanmelebarkeluarlingkaranberartivolumenyamelebihidariyang
seharusnya.

c. Inkubator(incubator)
Cara:
1) Catatsuhuinkubatorpadakartusetiapharisebelummulaibekerja.
2) Penyimpangansuhuyangmelebihi2oC,pengatursuhuperludisetelkembali.

d. Lemaries(Refrigerator/freezer)

Catatsuhusetiapharidengantermometeratausuhuyangterlihatpadadigital
displaypadafreezer.Termometeryangdigunakanharussesuaidengansuhualatyang
dikalibrasi,misalnya28oC,20oCatau76oC.

Secaraberkalaperiksadenganmenggunakantermometerstandar.
Cocokkanhasilyangdidapatantarasuuyangditunjukkanolehtermometerdigital
displaydengantermometerstandar.

e. Oven
Cara:
1) Secaraberkalalakukanpemeriksaansuhudenganmenggunakantermometer.

2) Cocokkanhasilyangdidapatantarasuhuyangtercantumdalamovendengansuhuyangdi
tunjukkanolehtermometerstandar.

f. Otoklaf(Autoclave)
Digunakanuntukmengujiapakahfungsialat,suhu,waktudantekanannyasudahbenar.
Pengujiandapatdilakukandenganmenggunakan:
1. Autoclaveindicatortape.
Cara:

Rekatkanindicatortapesecaramelingkarpadakemasanyangaikandisterilisasi.
Padaotoklafyangbesar,kemasandiletakkanpadabagianatasdanbagianbawahotoklaf.
Atursuhu,waktudantekanan

Hidupkanotoklaf

Setelahselesaibacaindicatortapedenganmelihatperubahanwarnaangterjadipada
garisgarisdiagonal.Bilaprosessterilisasiberjalandenganbaik,garisgarisdiagonal
berubahwarnadariputihmenjadicoklatkehitamhitaman.

2. Bacillusstearothermophilus
Cara:

Masukkanbacillusstearothermophilusdalambentukliofilisasidalamotoklaf.

Atursuhu,waktudantekanan

Hidupkanotoklaf.

Setelahselesai,ambilBacillusstearothermophilusdantamanpadaagardarah(bloodagar)dan
inkubasipadasuhu4060oCselama2448jam.

ProsessterilisasiberjalanbaikbilatidakadapertumbuhanBacillusstearothermophilus.

g. PeralatanElisa(Elisa,apparatus)
PeralatanElisaterdiridari:
1. ElisaReader
Yangperludikalibrasiadalah:

Liniaritasalat

Stabilitaspembacaan

Ketepatanpembacaan

Kalibrasiharusdilakukan:

Pertamakalialattersebutdipakai

Setelahpenggantianlampu

Secaraberkalauntukketepatanpembacaan
Carakalibrasisangatbervariasi,tergantungmerekdarialat,untukituperlumengikutipetunjuk
yangterdapatpadamasingmasingalat.

2. ElisaWasher
Yangperludikalibrasipadaalatiniadalah:
a). Volumedispenser
Waktudispensing,volumedidalamwasherharussesuaidengansertifikasimasingmasingalat.
Apabilavolumetidaktepat,dikalibrasisesuaidenganpetunjukyangadapadaalat.
b). Sisayangtertinggaldalamsumur(restvolume)
Sisayangtertinggaltidakbolehmelebihivolumeyangditentukanuntukmasingmasingalat.
Apabilavolumemelebihivolumeyangditentukanmakaalatperludikalibrasi.

c). Posisisumur
Halhalyangperludiperhatikanyaitupadawaktudispensingatauasperasi,bagianheadtidak
bolehmenyentuhtepiataudasarsumur.

3. Inkubator(Incubator)
Suhuyangdipakaiharussesuaidengansertifikasimasingmasingalatdandipantausetiapkali
digunakan.

4. Heatingblock
Suhuhaetingblockharusdikalibrasidengancara:
LetakkanalatNTCpadaruanganinkubasi.
PasangdigitalnilaiOhm.
AmatiperubahannilaiOhm.
Hasilyangdiperolehadalahsebesar702Ohmuntuksuhu37 oCdan557,5Ohmuntuksuhu50
C.

Bilahasilyangdiperolehtidaksesuaidengannilaidiatas,harusdilakukanpenyesuiandengan
caramemutarpotensioP3danP4yangterdapatdidalamhaetingblock.

h. pHmeter
Halhalyangperludiperhatikanadalah:

letakkankonektorpadapHmeteruntuktepatelektrodaharusdiperhatikandenganbaik,
jangansampaisalahmenghubungkankekonektorlain.

PadasaatmenuangcairankimiaharushatihatijangansampaitumpahkepHmeter,
karenaakanmerusakkomponendidalamnya.

Selaindaripadahalhaltersebutdiatas,perludilakukankitaankhususterhadapelektroda,
yaitu:

Penggunaanelektrodaharushatihatijangansampaiterbenturbendabendakeras,
karenaelektrodaterbuatdaribahangelasyangdapatpecah.

Cucielektrodasebelumdansesudahdigunakan

Kalibrasiperludilakukansetiapkaliakandigunakan.Dilakukandenganmenggunakan:
1. pHSimulator
Cara:
SiapkanalatpHmeteryangakandiperiksadanpHsimulator.
HubungkanpHsimulatorketombolyangdigunakanuntukmenghubungkandenganelektroda
padapHmeter.
Hubungkanmasingmasingalatyangtelahdisambungkantersebutkelistrik.
BerikaninputpH7daripHsimulatordanaturzero.
UlangitindakantersebutsampaipenunjukanpHmeterkonstandanmenunjuk7atau0mV.
KemudianberikaninputpH4padapHsimulator,amatidantepatkanpenunjukpadapHmeter
sampaimenunjukangka4denganmengaturkompensasitemperatur.
LakukanhalyangsamauntukinputpH9daripHsimulatorkepHmetersampaipenunjukkan
konstan.
pHmetersiapuntukdigunakan.

2. Larutanbufferstandar
Cara:
SiapkanlarutanlarutanbufferstandarpH4,7dan9,aquadestsertatissuehalus.
HubungkanpHmeterdenganelektrodagelas.
NyalakanpHmeter.
Bilaselektrodadenganaquadesyangbarudankeringkandengankertastissue,masukkanke
dalambeakerglassberisilarutanbufferpH7.

PeriksapenunjukkanpH,tepatkansampaimenunjukkanpH7denganmengaturzero.Ulangi
sampaikonstan.

Bilaelektrodadenganaquadestdankeringkandengankertastissue,lakukanhalyangsamake
dalamlarutanbufferpH4.periksapenunjukpH,tepetkansampaimenunjukkanpH4dengan
mengaturkompensasi.Ulangisampaimetermenunjukkanangkakonstan.
LakukanhalyangsamauntukbufferpH9.
pHbuffersiapuntukdigunakan.

i.

Pipet

Cara:
Timbangbotoltimbangandengantimbanganalitik,kemudiancatathasilnya,misalnyaAmg.
Isapaquadestyangsudahdiukursuhunyadenganpipetyangsudahdikalibrasi,masukkandalam
botoltimbang.Misalnyasuhuaquadest25,10C,tentukanberatjenisnya(BJ)denganmelihat
padatabelBJaquadestyaitu0,997017.(daftarberatjenisaquadestdapatdilihatpadatabel11di
bawahini).

 Timbangbotoltimbanganyangsudahberisiaquadestdancatathasilnya,misalnyaBmg.
Hitungberataquadestyaitu(BA)mg.
Makavolumeaquadestadalah:
Berataquadest(BA)
Volume=BJaquadest(0,997017
Hitungperbedaanantaravolumehasilperhitungandiatasdenganvolumeyangdipipet.
Bataspenyimpanganyangmasihdiperbolehkansesuaidenganjenispipetdapatdilihatpadatabel
12dibawah.
Carakalibrasiinijugadapatdilakukanpulauntuklabuvolumetrikdangelasukurdanlainlain.

j.

Penangasair(Waterbath)
Yangperludipantauadalahsuhu.Carapemantauanpengatursuhusamasapertipemantauansuhu
padarefrigeratoratauoven.

k. Rotator(Shaker)
Kalibrasidapatdilakukandengancarasebagaiberikut:
1. Menggunakantachometer
Bilakecepatanantaratachometerdenganalatpengukurkecepatanpadarotatormenunjukkan
angkayangsama,berartialatdalamkeadaanbaik.
2. menggunakancarasederhanasebagaiberikut:

pegangpensilsecarategakdisampingplate.

Jalankanrotatorsambilmemilihjam

Hitungsentuhanplatepadapinsildalamwaktu1menit.

Bilajumlahhitungansesuaidenganalatpengukurkecepatan,berartialatdalamkeadaanbaik.

l.

Sentrifus(centrifuge)
Kalibrasisentrifusdilakukandenganmengukurkecepatanpermenitdanwaktu.Padarefrigerated
centrufugeselainkalibrasirpmdanwaktujugaperlukalibrasisuhu.

1. Kalibrasirpm
Dapatdilakukandenganmenggunakan:
a). Tachometermekanikyaitudengankabelyanglentur.
Cara:
Ujungkabelyangsatukaitkanpadakumparanmotordidalam,sedangkanujungyanglain
dihubungkandenganalatmeter.
Setsentrifuspadarpmtertentu,kemudianjalankan.
Catatrpmyangditunjukkanolehmeterpadatachometer.
Ulangibeberapakali,hitungratarata.
b). Tachometerelektrik
Letakkanbagianmagnitdikelilingcoil,sehinggamenimbulkanaliranlistrikbilaalatdijalankan.
Setsentrifuspadarpmtertentu.
Aliranlistrikyangtimbulakanmenggerakkanbagianmeter.
Catatrpmyangditunjukkanolehmeterpadatachometer.

Ulangibeberapakali,hitungratarata.
c). Strobelight

Alatinidigunakanbilatachometertidakdapatmenjangkaumotor.Kecepatanputar/rpmmasih
dapatditerimabilapenyimpangannilairataratatidaklebihdari5%.
2. Kalibrasialatpencatatwaktu(timer)
Dapatdilakukandenganmenggunakanstopwatch.
Cara:
Setsentrifuspadawaktuyangseringdipakai,misalnya5menit.
Jalankanalatdanbersamaandenganitujalankanstopwatch
Padawaktusentrifusberhenti,matikanstopwatch,catatwaktuyangditunjukkanstopwatch.
Ulangibeberapakali,hitungratarata.
Alatpencatatwaktu(timer)masihdapatditerimabilapenyimpangannilairataratatidaklebih
dari10%.

m. Spektrofotometer(spectrophotometer)
Kalibrasimeliputi:
1. Ketepatanpengukuranabsorban
Kalibrasidilakukantiapminggu,kalibrasidulakukandenganmemakailarutan50mgatau100
mg/lpotasiumbichromat(K2Cr2O7)0,8Nasamsulfat(H2SO4).Formatlarutantersebutdapat
dilihatpadatabeldibawahini.Larutantersebutmempunyainilaiabsorbanpadasetiappanjang
gelombang.

2. Ketepatanpanjanggelombang
Lakukankalibrasiinisetiap6bulan,kalibrasidapatmenggunakanbeberapacara:
a). Denganwarnasinar

Kalibrasiberdasarkanpengamatanwarna,hasilnyakurangteliti.
Cara:
Pada arah jalannya sinar diberi kertas putih dan amati warna yang timbul pada panjang
gelombangtertentu:

Hijaukebiruan:padapanjanggelombang500nm

Hijauterang:padapanjanggelombang525nm

Kuninghijau:padapanjanggelombang585nm
Toleransiyangmasihdianggapbaikadalah5nm.

b). DenganlampuDeuterium
HanyadapatdilakukanpadaspektrofotometerUVVis,cara:apakah%Tmaksimumadapada
panjanggelombang6560,4nm.

c). DenganfilterDidyniumatauHolmiumOxide
Cara:
Periksa%Tmin/AbsmaksdarifilterDidyniumatauHolmiumOxide.%TdariDidyniumfilter
ada pada panjang gelombang 586 3 nm, sedangkan % T min dari Holmium Oxide pada
panjanggelombang360,90,75nm.

d). Denganstandarfilterbersertifikat
Beberapaspektrofotometerdapatmenggunakanfilterstandarbersertifikatyangmempunyai%T
maksuntukpanjanggelombangtertentusepertiyangtercantumpadalabelnya.
Cara:

 Bilaspektrofotometeryangakandikalibrasimempunyailebihdarisatusumber,gunakanlampu
Tungsten.
Masukkanstandarpanjanggelombang10nmdibawahstandarpanjanggelombang.

Atur%Tsehinggamenunjukkan8090%T.

Panjanggelombangdimasukkanperlahanlahansambilmengamati%T,%Tharusnaik,bila
tidaknaikulangilangkahlangkahtersebutdiatas.
Carilah panjang gelombang dimana terdapat % T maksimum dan catat panjang gelombang
tersebut.Batasyangdapatditoleransiadalahpanjanggelombangstandarsepertipadalabel5
nm.

3. Linearitasalat
Lakukankalibrasisetiap6bulan.
Kalibrasi linearitas dapat dilakukan dengan mengukur absorban pada panjang gelombang
tertentuterhadapkonsentrasitertentuterhadapkonsentrasilarutanyangberbedabedayang
telahdiketahuinilainya.
Pemeriksaandilakukandengan:
a). LarutanKaliumbikromat(K2Cr2O7)untukdaerahUV(<400nm),denganserialkonsentrasi.
Cara:
BuatstokK2Cr2O7 yaitudenganmelarutkan50mgKaliumbikromatdalam1literasamsulfat
0,01N.
Buat serial pengenceran stok kalium bikromat dengan larutan asam stok diencerkan hingga
menjadi25ml

10mlsulfat0,01Nsebagaiberikut:
10mlstokdiencerkanhinggamenjadi50ml
5stokdiencerkanmenjadi50ml
Ukurabsorbandarimasingmasingpengencerandenganmenggunakanblankoasamsulfat0,01
Npadapanjanggelombang350nm.
Hasildisebutlinierbilanilaiabsorbandarimasingmasingpengenceransepertiterlihatpada
tabel.
NilaiabsorbanpadaberbagaipengenceranlarutanK2Cr2O7
StokK2Cr2O7

Vol setelah Nilai absorban

10ml

pengenceran
25ml

(350)
0,214

10ml

50ml

0,107

5ml
50ml
0,054
Selain itu dapat pula dengan mencatat hubungan antara konsentrasi dan absorban dengan
menggunakankertasgrafikdanamatiapakahgrafikmenunjukkangarislurusatautidak.
b).Larutancobaltammoniumsulfatuntukdaerahpanjanggelombanglebihdari400nm.
Cara:
Buatlarutanstokcobaltammoniumsulfatyaitudenganmelarutkan8,0grcobaltammonium
dalam100mlasamsulfat1%v/v.
Buatpengenceranyangtepatdenganperbandingan1:2,1:3dan1:4.
Ukurabsorbandarimasingmasingpengencerandenganblankoasamsulfat1%padapanjang
gelombang512nm.Plothubunganantarakonsentrasidanabsorbanyangdibacapadakertas
grafikdanamatiapakahgrafiknyamenunjukkangarislurus.

c).Filterstandarbersertifikatyangtelahdiketahui%Tpadapanjanggelombangtertentu.
Cara:
Masukkanstandar100%T.
Setpanjanggelombangsesuaidenganyangtercantumpadatabel.
Atur%Thinggamenunjuk100%T.
Gantistandar100%Tdenganstandar0%T.
Ulangilangkahlangkahdiatashinggamenunjukkan0%Tdancatatnilai%Tnya.
Batastoleransiyangmasihdapatditerimasesuaidenganpetunjukproduktersebut.

4.

Straylight(stayenergy)
Staylightadalahcahayalaindiluarpanjanggelombangtertentuyangdiinginkan.Sumbernya
dapatberasaldarisinaryangbocordariluar,sinardaripanjanggelombanglainataudarialatitu
sendiri.Misalnyakerusakanmonokromatordanpembiasansinaryangjatuhpadakuvet.
Lakukankalibrasisetiap6bulan.Kalibrasidapatdilakukandenganbeberapacara:

a). Larutansodiumiodida
Larutansodiumiodidadalamairmempunyai%Tlebihkecildari1padapanjanggelombang260
nm.
b). Gelascorningvicor
Gelastidakakanmentransmisikancahayapadapanjanggelombang205nm.
c). Standarfilterbersertifikat
padastandartersebutterdapat3buahfilterSREdenganpanjanggelombang220nm,340nmdan
400nm.

Filterakanmenyerapcahayadiataspanjanggelombangtersebutdanakanmelewatkancahayadi
bawahpanjanggelombangtersebut.
Cara:
Masukkanstandar100%T
Setpanjanggelombang400nm.
Atur%Thinggamenunjukkan100%T.
Gantistandar100%TdenganstandarSRE400nmdancatatpembacaan%T.
UlangilangkahlangkahtersebutdiatasuntukfilterSRE340nmdan220nm.
Hasilyangmasihdapatditerimaadalah00,6%T.

n.

Timbangananalitik(AnalyticalBalance)
KalibrasianaktimbangandilakukandengananaktimbanganstandaryangbersertifikatkelasM,
yangmemperhatikannilainominalsetiapanaktimbangan,deviasisistematikdarinilainominal,
kelasketelitian,ketidakpastian,nilaimassadanmassajenisbahanatauvolume.
Carakalibrasianaktimbangan:
Periksalahtitiknol,jarumpenunjukangkaharusmenunjukkanangkanol.
Letakkananaktimbanganstandaryangteringan.
Timbanganaktimbanganyangdipakaiseharihari,Bacadancatathasil.
Ulangipenimbangandengananaktimbanganstandaryanglebihberat.
Anaktimbangandianggapmasihtepatbilaberatyangditunjukkanolehanaktimbangantidak
menyimpanglebihbesardari0,1%dariberatmasingmasinganaktimbanganstandar.

o.

Timbanganelektrik(ElectricalBalance)

Kalibrasi timbangan dilakukan setiap hari dengan memakai anak timbangan standar yang
bersertifikatkelasS.
Cara:
Lakukanpenimbangananaktimbanganstandar
Catathasiltimbangan
Ulangisampai5kalihitungnilairataratatoleransiperbedaanberatyangmasihdapatditerima
adalah:
1) Untukberat150mg=0,014mg
2) Untukberat100500mg=0,025mg
3) Untukberat15mg=0,054mg
p.

Termometer
Kalibrasidilakukansetiap6bulansekalidengancarasebagaiberikut:
Letakkanthermometeryangdikalibrasidanthermometerstandarbersertifikatberdekatandalam
ruangberAC(suhu20o25oC)dandiamkanselama1jam.
Catatsuhuyangditunjukkanolehkeduaalatthermometer.
Thermometer memenuhi syarat bila perbedaan pembacaan suhu antara kedua thermometer
adalah0,5oC.
Ulangipemeriksaandiatasdenganmenggunakansuhu30oC40oC(dalamoven).