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Universidad del Valle.

Facultad de Ciencias Naturales.


Clulas eucariotas II: Difusin y smosis
Gmez J. D 1629814, Gutirrez A.F 1629573, Len D.S 1625846, Narvez G.A 1628873,
Muoz A.T 1630274.
Santiago de Cali, 6 de Mayo del 2016.

Eukaryotic cells II: Diffusion and osmosis


Gutirrez A.F 1629573, Gmez J. D 1629814, Len D.S 1625846, Narvez G.A 1628873,
Muoz A.T 1630274.
Friday, May 6th, 2016.
Duvan.leon@correounivalle.edu.co,
gustavo.narvaez@correounivalle.edu.co,
gamez.juan@correounivalle.edu.co,
andres.fabian.gutierrez@correounivalle.edu.co,
angie.tatiana.muoz@correounivalle.edu.co

Resumen

Introduccin
Todos los seres vivos estn conformados por una o ms clulas y estas a su vez estn
compuestas de distintos orgnulos que se pueden apreciar con ayuda del microscopio, para
poder lograrlo es necesario un buen manejo de este y un adecuado montaje; con esta idea se
prepararon los montajes de clulas a observar de: la mucosa bucal, sangre humana,
organismos celulares eucariticos (protozoos), y placas pre-montadas de un tejido animal
(ovarios de sapo) y cromosomas. A su vez se hizo la experimentacin del fenmeno fsico
llamado difusin, tomando en diferentes tubos de ensayo, agua destilada y adicionando en
cada uno de ellos distintas cantidades de gotas de azul de metileno al 1%, para as conocer
el tiempo en el cual se logra la mxima difusin (tiempo de difusin) y continuamente se
analiz la temperatura de difusin con ayuda de cuatro tubos de ensayo, cada uno con una
gota, exponindolos a diferentes temperaturas (4, 25, 37 y 65 C). Continuamente se realiz
el montaje respectivo para el anlisis de la difusin a travs de una membrana
semipermeable, llenando esta y amarrndola a una pipeta graduada de 1 mil para
posteriormente sumergirla en un recipiente con agua destilada para observar el traspaso de
soluciones dependiendo del gradiente de concentracin. Finalizando con la observacin de
la smosis en diversos montajes de Elodea y con ayuda del microscopio se logr observar
el comportamiento de los cloroplastos al agregar soluciones salinas con diferentes
concentraciones (0.9% y 5%) y agua destilada.
Objetivos
Esta prctica se realiz con la idea de aprender a realizar los respectivos montajes para
clulas animales, vegetales y protozoos logrando as reconocer e identificar diferentes
orgnulos, funciones y caractersticas de estas; pudiendo as conocer y entender los
procesos fsicos qumicos que suceden.
Marco terico
La clula es la unidad mnima de todo organismo vivo, capaz de actuar de manera
autnoma. Todo ser se considera vivo si al menos tiene una clula y que sea capaz de
realizar las tres funciones vitales: reproduccin, nutricin y relacin. Las clulas varan
dependiendo del organismo en su tamao, reproduccin, alimentacin, composicin; como
ya se mencion, existen organismos compuestos desde una clula (bacterias, protistas y
algunos protozoos) y otros por dos o ms (eucariotas), cada uno con caractersticas
maravillosas e independientes unas de las otras.
Las clulas eucariotas
Son los organismos que dan origen a los reinos protistas, animal, vegetal y hongo; estn
formados por dos o ms clulas, cada una con caractersticas distintivas como la existencia

de pared celular en las clulas vegetales, y particulares como un ncleo bien definido en las
clulas animales.
La clula animal
Como su nombre lo indica, son las clulas que conforman a los animales, los cuales estn
formados por miles de millones de estas, en su mayora hetertrofas y de respiracin
anaerbica, unas caractersticas importantes son que, a diferencia de las clulas vegetales,
estas carecen de pared celular lo cual ayuda a la intercomunicacin con el medio y tambin
su ncleo definido que lo delimita de otros orgnulos.
http://biologiacecyt16.blogspot.com.co/2013/02/la-celula.html.
La difusin
Es un fenmeno fsico que se d en las molculas, el cual consiste en el desplazamiento
neto de partculas de una regin de alta concentracin a una baja, inducido por el gradiente
de concentracin. Existen dos tipos de difusiones, facilitada y simple, donde la primera es
asistida por protenas o transportadores integrados a la membrana, y la segunda es el
proceso por el cual una sustancia atraviesa una membrana permeable sin ayuda, ni gasto de
energa, siguiendo el gradiente de concentracin. (Libro, biologa Vida en la tierra 8va
edicin, Audesirk pgina G7)
la smosis es la difusin de dos lquidos de diferentes concentraciones, se definen como
medio hipotnico (baja concentracin) o hipertnico (alta concentracin), o gases
separados por una membrana semipermeable, los cuales pasarn de una concentracin ms
diluida a la ms concentrada logrando as estabilizar la concentracin final.
https://milibrodebiologia.wordpress.com/tag/difusion/.

Metodologa
I.

OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES


1. Clulas de la mucosa bucal
Se tom muestra de mucosa bucal de un hombre y se realiz el respectivo montaje,
agregando en esta una gota de azul de metileno, terminado esto se pas a observar. este
mismo procedimiento se realiz con mucosa bucal de una mujer.
2. Clulas sanguneas
Se observaron las clulas sanguneas de una gota de sangre previamente montada. Se
dibujaron las clulas observadas y se caracterizaron los respectivos glbulos blancos y
rojos.
3. Observacin de Protistas
Se tom una gota de agua estancada y se realiz el respectivo montaje, en primera parte se
observ la gota de agua estancada sin ninguna sustancia, posteriormente se agreg una gota
de lugol y se visualiz nuevamente. Para finalizar se adicionaron dos gotas de glicerina
para as reducir la velocidad de los organismos y poderlos observar claramente.
4. Observacin de tejidos animales
Se observ una placa pre-montadas de la estructura de ovarios de sapos.
5. Observacin de cromosomas humanos
Se visualiz una placa premontada con cromosomas humanos, identificando la estructura,
color y cantidad de cromosomas presentes en la placa.
NOTA: Se realizaron esquemas y descripciones de lo observado en cada una de las
muestras.

II.

DIFUSION Y OSMOSIS
1. Difusin
1.1 Se depositaron 10 ml de agua destilada en 5 tubos de ensayos y se agreg a cada uno
un nmero de gotas de azul de metileno al 1.0% en el siguiente orden: TB.#1-1 gota,
TB.#2-2 gotas y as sucesivamente. Posteriormente se tom el tiempo de difusin de cada

una de las soluciones. Se realiz un grfico donde el eje Y corresponde al nmero de gotas
y el eje X el tiempo transcurrido de la difusin.
Efecto de la temperatura sobre la difusin
Se vertieron 10 ml de agua destilada en 4 tubos de ensayo, se expusieron a distintas
temperaturas (4, 25, 37 y 65C) y sucesivamente se aadi una gota de azul de metileno
los respectivos tubos. Se tom el tiempo de la distribucin del colorante y se grafic en el
plano cartesiano donde el eje Y es igual al valor de la temperatura y el eje X el tiempo
transcurrido hasta la uniformidad.
1.2 Difusin a travs de membranas
En el extremo de una pipeta graduada de 1mL se amarrio firmemente una membrana
semipermeable, se coloc una solucin de rojo congo e introdujo en una vaso de
precipitados con agua destilada, se registr el cambio en el volumen interno de la pipeta en
X cantidad de tiempo
2. Osmosis
2.1 Se tomaron 3 hojas de elodea y se realizaron sus respectivos montajes, en la primer
montaje se adiciono una gotas de solucin salina al 0.9%, en el segundo se adiciono una
gota de solucin salina al 5 % y finalmente en el tercer montaje se verti agua destilada.
Cada una de estas muestras fueron observadas respectivamente haciendo uso del
microscopio. Cabe mencionar que en cada una de las observaciones se realizaron esquemas
y descripciones de lo observado.
2.2 Se observ un experimento previamente montado con 3 das de anticipacin, el cual
consisti en dos zanahorias expuestas a dos condiciones diferentes, una de estas se
encontraba sumergida en agua mientras que la otra se encontraba sumergida en
agua+NaCl.
2.2.1 Se describieron las caractersticas fsicas de las zanahorias bajo ambas condiciones y
se explic el fenmeno ocurrido.

Resultados
I.

OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES


1. Clulas de la mucosa bucal
OBJETIV
O

ESQUEMA
Muestra
masculina

Muestra
femenina

40X

DESCRIPCIN
Muestra masculina

Muestra
femenina

Se observaron las
clulas de la saliva,
sus
respectivas
membranas
plasmticas y sus
ncleos.

Se
visualizaron
las
clulas
salivales,
sus
respectivas
membranas
plasmticas
y
ncleos, adems
se
pudo
identificar
el
corpsculo
de
Bar, el cual tena
una pigmentacin
verde-azulada

2. Clulas sanguneas
OBJETIVO

100X

ESQUEMA

DESCRIPCIN
Se pudo apreciar tres
linfocitos de color prpura
intenso, de aspecto circular,.
Se visualiz tambin varias
plaquetas y los glbulos
blancos,
Se
identific
tambin gran cantidad de
eritrocitos. Se determin que

los eritrocitos vistos, uno era


monocito,
otros
dos
basfilos y un neutrfilo.

3. Observacin de protistas.
OBJETIVO

ESQUEMA

DESCRIPCIN

10X

No se determin ningn tipo de estructura


o protista

40X

Se lograron identificar paramecios,


stylonychia, Chlamydomonas, nematodo,
spirostomum

4. Observacin de tejidos animales


OBJETIVO

4X

10X

ESQUEMA

DESCRIPCIN
Se
apreciaron
algunos
folculos
con
formas
ovaladas y regulares, sin
embargo algunos otros se
encontraban rotos debido
a que el tejido se encontraba
en formacin.
Se visualiz que dentro del
folculo
haba
muchos
puntos
pequeos
color
fucsia,
los
cuales
corresponden a las clulas
del tejido.
Se observaron, con mayor

40X

enfoque, las clulas del


tejido y se pudo identificar
sus respectivas membranas
plasmticas.

5. Observacin de Cromosomas humanos


OBJETIVO

ESQUEMA

DESCRIPCIN
Se determin que tenan
distintas formas, y tamaos,
adems
poseen
una
pigmentacin
rosa.
Se
contaron aproximadamente
46 cromosomas.

100X

Cuadro comparativo
Tabla 6. Orgnulos observados en cada tipo de clula
Orgnulos

Clula vegetal

Clula animal

Membrana plasmtica

Ncleo

Pared celular

Cloroplastos

II. DIFUSIN Y SMOSIS


1. Difusin
1.1 Difusin de gotas de azul de metileno
NGotas

Tiempo
Difusin
(min)

16,39

12,13

7,57

5,10

2,30

GRAFICA EN EL PLANO CARTESIANO

DIFUSION
6
5
f(x) = - 0.28x + 5.43
4

N Gotas

3
2
1
0

10

12

14

16

18

Tiempo difusion (Min)

Efecto de la temperatura sobre difusin


Temperatura
(C)
Tiempo
Difusin (min)

4
12,45

GRAFICA EN EL PLANO CARTESIANO

25

37

65

37,16

3,50

3,12

DIFUSION EN TEMPERATURAS
70
60
50
40

TEMPERATURA C

f(x) = - 0.69x + 42.47

30
20
10
0

10

15

20

25

30

35

40

TIEMPO DIFUSION (MIN)

2. smosis
ELODEA CON
DIFERENTES
SOLUCIONES

AGUA SIN AGREGADOS

ESQUEMA

DESCRIPCIN

Se observ con el objetivo


de 40x, alcanzando a ver
alrededor de 29 clulas con
su ncleos casi incoloros y
gran cantidad de cloroplastos
dispersos, movindose a
travs de la membrana y
dentro de la clula.
A
diferentes profundidades, se
pudo observar gran variacin
en
la
cantidad
de
cloroplastos, tambin se
observan unas pequeas
estructuras
de
formas
rectangulares, las cuales se
reconocieron como cristales
provenientes del agua.

SOLUCIN SALINA
0.9%

se observ con el objetivo de


40X y se pudo observar los
cloroplastos dispersos por
los espacios intracelulares,
movindose hasta llegar a un
punto de equilibrio donde
frenaron el movimiento

SOLUCIN SALINA AL
5%

Se observaron las clulas


vegetales, con su pared
celular
y
ncleo
transparente,
y
los
cloroplastos aglutinados o
agrupados en los espacios
intracelulares,
sin
movimiento
aparente
adems, parece que el color
verde de los cloroplastos es
ms intenso, creemos que es
debido a que se encuentran
unos detrs de otros.

AGUA DESTILADA

Se
observ
que
los
cloroplastos no perdieron su
movimiento y se mantenan
igual
a
la
primera
observacin

2.2 Observacin Zanahorias en distintos medios


ZANAHORIA
SUMERGIDA EN
MEDIOS

ESQUEMA

DESCRIPCIN

H2O

H20+ NaCl

Se observ que la zanahoria


en este medio tena varias
rupturas en su superficie y
por estas sala su pulpa.
Tambin se identific una
parcial despigmentacin en
su exterior
Se observ que la zanahoria
estaba deshidratada, y tena
una
superficie
rugosa,
tambin se pudo identificar
que tena despigmentacin
en su exterior.

Discusin
I. OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES
1. Clulas de la mucosa bucal
Se observ que en la muestra de la mucosa bucal masculina haba ausencia de corpsculos
de Bar, es una masa heterocromatina (regin genticamente inactiva), a diferencia de las
clulas salivales femeninas, las cuales si los contenan y se expresaban con pequeos
puntos de color verde-azulado en el interior de las clulas, adheridas a la membrana
nuclear. Esto se debe a que en las clulas de las mujeres uno de los dos cromosomas XX es
condensado al azar y permanece as por siempre, es por eso que el corpsculo de Bar
(cromosoma X inactivo) se puede identificar slo en las clulas femeninas.
[1] Benjamin A. Pierce; Gentica: Un enfoque conceptual, Captulo 4, pgina 88
2.

Clulas sanguneas
Se observ una muestra de clulas sanguneas en las cuales se pudo identificar eritrocitos,
leucocitos y plaquetas. Sus diferencias radican en que los eritrocitos predominan ante los
otros, estaban teidos de color rosa, y no poseen ncleo debido a que lo pierden, para de
esta manera aumentar el intercambio gaseoso, tambin debido a que no requieren sintetizar
nuevas protenas o lpidos y son formados en la mdula sea. Los glbulos rojos tampoco
requieren de mitocondrias ya que no necesitan un gasto de energa para el transporte de
oxgeno y dixido de carbono debido a que son arrastrados por el torrente sanguneo.

http://es.slideshare.net/dfaguilera06/atlas-de-hematologia-celulas-sanguineas-carmenbeatriz-naranjo-aristizbal
Los leucocitos estaban teidos de color prpura y se encontraban en menor cantidad,
tambin se logr identificar su ncleo. Los glbulos blancos son los encargados de
intervenir cuando una sustancia extraa entra en un nuestro organismo, y acta en defensa
de este. Existen cinco tipos, que varan no solo en su forma sino tambin en la funcin que
cumple cada uno, entre estos estn: Neutrfilo, Eosinfilo, Basfilo, Linfocito y Monocito.
https://books.google.com.co/books?
id=JafM_NwLl7MC&pg=PA51&dq=observacion+celulas+sanguineas&hl=es&sa=X&ved
=0ahUKEwi28L_ZysHMAhUHox4KHeDiDNEQ6AEIGzAA#v=onepage&q=observacion
%20celulas%20sanguineas&f=false
Las plaquetas se visualizaban como pequeos puntos, con una pigmentacin prpura igual
a la de los linfocitos. son pequeas clulas que circulan en la sangre, su funcion
bsicamente es reparar la estructura de los vasos sanguneos cuando se encuentran daados.
Las plaquetas funcionan como una especie de tapn las cuales al percatarse de una fisura
en la pared de las arterias, se aglomeran en gran cantidad para de esta manera parar la
hemorragia.
Fundacin
BBVA, 2007;
Libro
de la salud
cardiovascular
del Hospital Clnico San
Carlos y la Fundacin
BBVAcaptulo
29, pgina
269
http://www.wfh.org/es/page.aspx?pid=942
3. Observacin de protistos
4. Observacin de tejidos animales
5. Observacin de cromosomas humanos

II. DIFUSION Y OSMOSIS


1.1 DIFUSIN
El proceso de difusin es el movimiento continuo de molculas individuales en el que unas
molculas rebotan con la otra en direcciones aleatorias, a medida que pasa el tiempo estos

movimientos aleatorios producen un movimiento neto, de las regiones de alta concentracin


a las de baja concentracin. Cuando estos movimientos no presentan factores que se
opongan a ellos, el movimiento de las molculas de las regiones de concentracin alta a las
de baja concentracin continuar, hasta que esta sustancia est dispersa de manera
uniforme en el fluido o en el aire. Cuando se encuentran en este estado de dispersin
uniforme es denominado equilibrio dinmico, ya no hay gradiente de concentracin,
cuando sucede esto se dice que la sustancia ha alcanzado un equilibrio con su ambiente.
Cundo se agrega X nmeros de gotas de colorante en X volumen de agua se presenta X
tiempos de uniformidad o difusin debido a que las molculas del colorante se dispersan en
el agua desde la regin de concentracin alta de colorante, hacia el agua circundante, donde
la concentracin del colorante es baja. Al principio de la difusin se presenta un gradiente
de concentracin muy alta y el colorante se difunde con mayor rapidez. A medida que que
disminuya las diferencias en concentracin (entre el agua y el colorante), el colorante se
difunde de forma cada vez ms lenta. Ya explicado esto, se puede analizar el fenmeno
ocurrido en las muestras. En el caso de las muestra 1 y 5 se obtuvo tal diferencia en los
tiempos de difusin debido a que la cantidad de gotas del colorante introducido
diferenciaba de una con la otra, es decir que en la muestra 1 se obtuvo mayor tiempo de
difusin ya que el gradiente de concentracin de la gota introducida era mucho menor al
gradiente de concentracin de las gotas introducidas a la muestra 5; en otras palabras
entre mayor nmero de gotas, mayor concentracin del colorante, mayor movimiento de
molculas y menor tiempo de difusin, obteniendo as una uniformidad o equilibrio
dinmico con mayor rapidez.1
En el caso de las muestras a diferentes temperaturas se presentaron tal diferencia en los
tiempos de difusin debido a que la direccin y velocidad de difusin de una sustancia est
determinada por otros factores adems del gradiente de concentracin, como es el caso de
la temperatura. la difusin es directamente proporcional a la temperatura, es decir que
mayor temperatura, habr mayor velocidad en el movimiento de las molculas. 2 Cuando
una sustancia se encuentra a una temperatura muy alta sus partculas tienden a desunirse
1 Audesirk, et al. (2003) La vida en la tierra. Sexta edicin [En lnea]
https://books.google.com.co/books?id=uO486v7GcoC&printsec=frontcover&dq=audesirk+biologia+la+vida+en+la+tierra&hl=es&
sa=X&sqi=2&redir_esc=y#v=onepage&q=difusi%C3%B3n&f=true Pg 60.

2 Silverthorn, et al. (2008) Fisiologa Humana un enfoque integrado. Cuarta edicin. 1ra
reimpresin. Editorial mdica panamericana. [En linea]
https://books.google.com.co/books?
id=X5sKQuyd8q0C&pg=PA134&lpg=PA134&dq=temperatura+en+la+difusion&source
=bl&ots=ALe-IIl9lI&sig=7U57lj7m0xUYIPZm4l3hLnqC2c&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjf6bGR9sHMAhUHKB4KHci6C6EQ6AEITzAI#v=on
epage&q=temperatura%20altas&f=true . Pg 134.

una de la otra, aumentando su energa cintica produciendo as mismo un movimiento o


desplazamiento molecular ms rpido y largo, por otra parte en el caso de temperaturas
bajas es lo contrario a menor temperatura las partculas se condensan, disminuyendo su
velocidad cintica y as mismo produciendo un movimiento o desplazamiento molecular
ms lento.
1.2 Difusin a travs de membranas
En este proceso se determin que despus de x cantidad de tiempo transcurrido el volumen
de la pipeta aumenta 1ml. Este resultado se debe al fenmeno de transporte pasivo que
permite una membrana semipermeable. Una membrana es una estructura que permite la
separacin entre lo que hay en interior y exterior de esta, es decir que hay considerables
gradientes concentracin de iones y molculas entre un lado y otro de la membrana. En su
papel la membrana proporciona dos tipos de movimiento: transporte pasivo y transporte
activo. En este caso el transporte pasivo permiti que entraran y salieran sustancias bajando
por gradientes de concentracin. Este tipo de movimiento o transporte no requiere un gasto
de energa, ya que la energa potencial que presentan los gradientes de concentracin
impulsa el movimiento y controla la direccin del movimiento, hacia adentro o fuera de la
membrana.3
2. OSMOSIS
La smosis es la difusin del agua a travs de una membrana semipermeable, es decir la
smosis es el proceso en el cual se equilibra la concentracin de agua a ambos lados de la
membrana. En la smosis se habla de alta concentracin de agua o baja concentracin de
agua esto quiere decir que al aadir cualquier sustancia a agua pura esta desplaza alguna de
las molculas de agua, generando as un menor contenido de agua, Cuando ms alta es la
concentracin de sustancias disueltas, menor ser la concentracin de agua. La smosis
desempea un papel importante en la vida de las clulas puesto que permite la regulacin o
equilibrio de la concentracin del agua dentro y fuera de la clula. En el 1er ejemplar se
obtuvo que no hubo ningn cambio en la estructura interna y externa de la clula, dado que
no hubo cambio de gradiente de concentracin en ninguno de las dos lados de la clula, en
el 2do ejemplar de clulas vegetales con solucin salina al 0.9% se obtuvieron tales
resultados debido a que la solucin tiene una concentracin menor de soluto, produciendo
as que la clula introdujera agua en su estructura interna e hinchado. Esto se da puesto que
hubo un cambio de gradiente de concentracin (agua) en la parte externa de la clula y est
busc un equilibrio en ambas partes de su estructura, estas soluciones son hipotnicas.
Finalmente la clula en solucin salina al 5% presentaba una concentracin de sal alta (es
3 Audesirk, et al. (2003) La vida en la tierra. Sexta edicin [En lnea]
https://books.google.com.co/books?id=uO486v7GcoC&printsec=frontcover&dq=audesirk+biologia+la+vida+en+la+tierra&hl=es&
sa=X&sqi=2&redir_esc=y#v=onepage&q=difusi%C3%B3n&f=true Pg 61-63

decir, la solucin tiene una concentracin ms baja de agua), esto produjo que saliera agua
de las clulas por smosis, estas se encogieron, dejando salir agua de su estructura hasta
llegar al equilibrio total en ambas partes de las clulas, estas son soluciones hipertnicas.
2.2 Observacin zanahorias en distintos medios
Se observaron dos zanahorias que fueron sumergidas en agua y en agua + NaCl
respectivamente. Para el primer caso se obtuvo una solucin hipotnica debido a que en el
interior de la zanahoria se encontraba una menor cantidad de agua que en el lugar donde fue
expuesta, es por esto que tiende a buscar un equilibrio entre ambas, por consiguiente tendr
que ingresar a la zanahoria gran abundancia de agua. De esta manera se puede determinar
porque la zanahoria tiende a hincharse tanto e incluso a reventarse y formar rupturas en su
superficie.
http://www.um.es/molecula/sales06.htm
Para el segundo caso se presenta una solucin hipertnica debido a que se encuentra una
mayor concentracin de soluto (NaCl) en el medio externo donde fue expuesta la
zanahoria, en contraste con la concentracin intracelular, este es el motivo por el cual sta
pierde agua y se deshidrata, as pues tiende a verse su superficie rugosa.
Editorial Universidad de Costa Rica, 2005; Bacteriologa General: Principios Y
Prcticas de Laboratorio- Pgina 157

Bibliografa

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