Introduo Imunologia
O que a Imunologia?
Varola (smallpocks)
Origem da doena
Clera (galinhas)
Louis Pasteur (1878): Isolou o microrganismo que causa a clera nas galinhas
Pasteurella multocida.
1. Inoculou galinhas com as bactrias (com virulncia atenuada tinham ficado na
bancada) Os animais sobreviveram (no desenvolveram doena)
2. Inoculou com uma dose letal toxina da clera (fresca e virulenta) nas mesmas
galinhas Os animais sobreviveram
1
Observou
que
quando introduzia
um espinho de rosa
numa
larva
de
estrela do mar, uma
srie de clulas
foram para aquele
local para tentar
combater
aquela
leso (designou-as
de fagcitos).
(Captulo 3, 35)
(p.36)
Imunidade Adaptativa
(p.56)
Memria
quantidade.
Diversidade
Os genes que codificam os receptores para antignio dos linfcitos so obtidos pela
juno de unidades gnicas mais pequenas por um processo de recombinao
somtica (dos genes que codificam para as regies variaveis dos anticorpos e dos TCRs)
durante o desenvolvimento das clulas B e T. Estas so as nicas clulas somticas do
organismo que sofrem recombinao ao nvel do DNA
Cada linfcito tem uma recombinao nica da haver to grande diversidade!
Tolerncia
Imunidade humoral
Linfcitos B combatem microrganismos extracelulares (produo de anticorpos)
Imunidade celular (Linfcitos T) s reconhecem pptidos ligados a moleculas MHC
Linfcito T citotxico/citoltico combatem microrganismos que crescem
intracelularemente (replicao no hospedeiro e destruio das clulas, ex: vrus)
ou microrganismos que foram fagocitados.
Linfcito T auxiliar por intermdio de pequenas mensagens celulares (citocinas,
protenas) auxiliam na destruio de micorganismos fagocitados (por clulas
fagocticas)
Antignios e imunognos
Reconhecimento especfico de antignios: clula B
Reconhecimento especfico de antignios: clula T e complexo
Processamento de antignio
Antignios de histocompatilidade principal
Co-receptores e molculas co-estimuladoras
Funes efectoras da clula B
Funes efectoras da clula T
Respostas imunes primrias e secundrias
1. Antignios e imunognos
2.
(classe I ou II)
4. Processamento de antignio ?
5. Antignios de histocompatilidade principal
10
11
Imunoglobulinas g so bifuncionais:
Ligao ao antignio
Eliminao do antignio
12
Anticorpo = Ab = imunoglobulina = Ig
Molcula proteica produzida pelos linfcitos B
Apenas um tipo de anticorpo produzido por clula B
Liga-se a um antignio (Ag) especfico
Especfico para um antignio (em geral)
Reagentes muito especficos
2 formas: produo como protena de membrana ou protenas segregadas para
o espao extracelular
(Cap. 6, 97)
Ligao entre cadeias leves e pesadas por pontes perssulfureto (S-S) e tambm
intracadeia
Regio varivel (V) amina (+)
Regio constante (C) carboxilo (-)
Lao = Domnio Ig
(2 res. Cys ligados por S-S)
Cadeia leve: arranjo em folha
pragueada
Domnio constante (frame regions FR)
Domnio varivel (CDR)
3 regies determinantes de
complementaridade
=
regies
14
15
Classes de imunognios: Td e Ti
7.4. Resposta Humoral dependente de linfcitos T
(p.115)
17
Antignios Ti : 2 categorias
Ti-1 : activao policlonal dos linfcitos B (mitognios = subs. que induz diviso celular
mitose; em imunologia: subs. que estimulam inespecificamente a proliferao de
muitos clones distintos) activam clones distintos de linfocitos B produo de
anticorpos policlonais (diferentes especificidades)
Ex. compostos das paredes bacterianas (LPS: lipopolissacarideo), peptidoglicanos e c.
Lipoteicoico
Ti-2 : activam linfocitos B promovem agregao de imunoglobulinas da membrana
(mIg) de diferentes BCR (B-cell receptor) induz transduo intracelular de sinal
Estruturas altamente repetitivas. Ex. cpsulas bacterianas polissacardicas, epitopos
antignicos repetitivos existentes em partculas virais.
(p.116-7)
Enquanto as respostas das clulas B mediadas por antignios Ti (mol. noproteicas) eliminam rapidamente muitos agentes infecciosos, as respostas das clulas
B reguladas pelos linfcitos Th (T CD4+) produzem uma imunidade humoral com
maturao da afinidade dos anticorpos contra a maioria dos antignios proteicos.
Sinal 1: ligao do antignio Td provoca agregao de duas ou mais imunoglobulinas
de membrana (mIg) constitutivas do BCR
Sinal 2: interaco entre molculas CD40, existentes superfcie dos linfcitos B, e o
seu ligando CD40L, expresso superfcie do linfcito Th activado.
ocorre nos rgos linfides secundrios
18
Nota: Se o antignio for muito pequeno (ex. fenol) estes 2 passos no ocorrem pelo
que a clula B no activada: o fenol no um composto proteico, no pode ser
degradado em pequenos pptidos, no podendo assim ligar-se MHC (2) no h
informao de citocinas (3) clula B no prolifera e no se diferencia!
Para haver este tipo de resposta o composto estranho tem de ter um componente
proteico (da que o fenol seja um antignio e no um imunognio!). O fenol um
hapteno com um transportador (proteico) torna-se um imunognio (= complexo
hapteno-transportador):
19
20
A interaco antignio-anticorpo
Tipos de antignios
Imunognios: molculas que tm simultaneamente a capacidade de se ligarem a
anticorpos e de desencadear uma resposta imune
Haptenos: molculas que, embora tenham a capacidade de se ligar a um anticorpo,
no podem induzir uma reaco imune por si (i.e. no so imunognicas). Ex. : 2,4
DNP.
Epitopo: poro de um imunognio que se liga ao anticorpo. Tambm pode ser
designada por determinante antignico.
As ligaes antignio-anticorpo
Ligaes
21
22
b) Melhoramento
c) Adjuvante: composto que aumenta a
imunogenicidade do antignio
Dois componentes:
- Agentes que promovem a insolubilizao do
antignio
- Compostos microbianos que estimulam
produo de coestimuladores
d) Escolha do Animal
Quantidade de antignio disponvel
Quantidade de anticorpos desejada
Relao filogentica
Necessidade de anticorpos monoclonais !
Custos de manuteno
Facilidade de manuseamento
Cuidados com a manipulao dos animais
tica
23
Antisoros Monoclonais
Anticorpos derivados de apenas uma linha clonal reconhecem apenas 1 eptopo de um
antignio.
Utilidade dos anticorpos monoclonais devida a:
Especificidade de ligao
Produo ilimitada
Homogeneidade
25
26
27
(Captulo 2, 19)
(p.23)
Percursor
comum:
clula
estaminal hematopoitica (HSC)
possui capacidade dupla de se
auto renovar e diferenciar,
dando origem a outras clulas
origina 2 tipos de clulas
estaminais mais especializadas:
28
Localizao da
hematopoiese
A hematopoiese d-se na
medula ssea depois do
nascimento; antes disso
ocorre no fgado, bao e
estruturas embrionrias.
NEUTRFILOS
30
Fagocitose
Clula com caractersticas fagocticas =
capaz
de
internalizar
grandes
partculas em vesculas: fagossoma
funde-se com lisossoma digesto
(enzimas hidrolticos)
EOSINFILOS
31
BASFILOS
32
MONCITOS
MACRFAGOS
Designaes de macrfagos residentes:
33
(Captulo 2, 19)
LINFCITOS
acentricamente
Citoplasma com poucos grnulos
Poucos mitocndrios
Aparelho de Golgi pequeno
Pouco retculo endoplasmtico rugoso (RER)
Poucos lisossomas
Os Linfcitos so:
20 40 % leuccitos
99 % clulas da linfa
~ 1012 linfcitos no homem adulto
55% dos Ly do sangue so clulas T CD4+
20% dos Ly do sangue so clulas T CD8+
10% dos Ly do sangue so clulas B
15% dos Ly do sangue so clulas NK e NKT
LINFCITOS T , LINFCITOS B
(Captulo 7 e 8)
(Captulo 9 e 10)
34
CLULAS DENDRTICAS
DCs na epiderme
(esq.) e glnglio
linftico (dir.)
(P. 21)
35
(Captulo 2, 24)
36
Em Murganho:
na medula ssea
que se d a
hematopoiese.
rgos linfides
primrios
ou
generativos:
(desenvolvimento
e maturao dos
linfcitos.
Expresso inicial
37
Gnglios linfticos
Bao
Tecidos associados: MALT e SALT
Medula ssea
38
Timo
39
AG MIGRAM NORMALMENTE NA LINFA E ENTRAM NOS GANGLIOS PELOS VASOS LINFTICOS AFERENTES,
Gnglio Linftico
Polpa vermelha > regio mt vascularizada onde passa 1 o sangue. Regio com mts
macrofagos que destroem plaquetas e eritrocitos danificados/velhos. D-se o
armazenamento o Fe e seu turnover. A separar as polpas h a zona marginal onde tmb
h mts macrofagos que destroem os corpos apoptiticos. A polpa branca constituida
por camadas linfides periartriulares (regio de linfcitos T PALS) e foliculos.
A grande diferena entre as reaces nos gnglios e do bao que os Ag no 1 entram
pela linfa e no 2 pelo sangue.
No so rgos encapsulados
Placas, folculos ou linfcitos encontram-se dispersos
41
42
Anticorpo primrio marcado com biotina. adicionado um composto que se vai ligar
biotina: vidina ou estreptavidina, permitindo 4 ligaes.
43
Marcadores moleculares
Marcadores mais comuns:
1. Radioistopos iodo
2. Enzimas
Baratos
Fceis de purificar
Muito estveis (importante manter actividade)
No muito grandes (permitem ligaes a outras molculas)
Facilmente conjugvel (fcil acoplar ao anticorpo)
Elevada actividade cataltica
Gama de substratos que permita originar produtos solveis e insolveis
Substrato: deve ser cromognico, incolor e originar produtos sluveis e
insolveis
Produtos: corados, solveis (determinao por curva-padro Abs) ou insolveis
(depositam-se no local do antignio)
3. Fluorforos
Existem centenas
44
Exemplos:
Anticorpo marcado com fluorescina (verde) e outro com rodamina (vermelho):
Amarelo significa que h sobreposio!
Para identificar os mitocndrios: marcao com anticorpos que reconheam protenas
da membrana mitocondrial (castanho).
4. Materiais electrodensos
Procedimentos padro
1. Bloqueio de locais inespecficos:
Anticorpos so protenas estas possuem locais de ligao inespecficos na clula:
temos de anular esta capacidade das protenas para no haver adeso s amostras dos
45
tecidos! Assim, utilizam-se protenas que tapam esses locais inespecficos onde o
anticorpo se poderia ligar. Immunoblotting: leite em p magra (rico em protenas)
Depois, adiciona-se o anticorpo.
2. Lavagens: com tampo isotnico para retirar o excesso de anticorpo (tambm se
fazem noutros passos para remover excesso de reagente
3. Curva-padro: j se pode detectar convenientemente o anticorpo secundrio
(substrato de E, fluorescncia)
46
2. Imunoprecipitao
47
Procedimento geral:
1. Preparao da soluo de antignio:
- Lise celular
- Marcao do antignio
Lise de clulas sem parede celular com misturas de inibidores de proteases, a
temperaturas baixas e com detergentes:
Suaves no inicos NP-40 ou o Triton X-100
Fortes condies desnaturantes mistura de detergentes inicos (SDS) e no
inicos
2. Clarificao/descontaminao do lisado
Objectivo: eliminar o maior nmero possvel de protenas contaminantes.
48
3. Immunoblotting
Princpio do immunoblotting:
Electroforese Transferncia para uma membrana Localizao do antignio com
anticorpos especficos
marcados
49
Permite:
(A)
51
Escolha de anticorpos:
Reconhecimento anticorpo-antignio: O anticorpo deve ter capacidade de
Notas:
Permite deteco de alteraes (na MM) sem ser necessrio purificar (ex.
glicosilaoes)
amostra de protena da clula lise celular e separao por MM
Separao ocorre por electroforese: a separao d-se segundo a massa molecular
(molculas com MM inferiores migram mais no gel)
SDS-PAGE: detergente aninico desnatura a protena (carga negativa, migra para o
nodo)
Transferncia do gel para o suporte mais resistente (nylon ou nitrocelulose) porque
o gel muito frgil
A transferncia pode ser feita na ser feita na vertical ou horizontal (ver figuras)
Verificar se as protenas migraram, corando o gel e a membrana (pode usar-se um
corante reversvel para ver se a transferncia foi bem sucedida)
Deteco com anticorpos
Deteco de antignios com anticorpos marcados:
1. ELISA
2. Imunohistoqumica
3. Imunofluorescncia
4. Citometria de fluxo
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Caractersticas:
Notas:
Exemplo: deteco de hormonas de crescimento
O marcador utilizado um enzima!
Permite quantificar antignio (nica tcnica capaz de o fazer!)
Utilizadas placas com 16 poos: protenas/hormonas aderem ao fundo da placa
Amostra de soro contendo antignio: incubado com anticorpo
Anticorpo secundrio liga-se ao enzima
Substrato no corado sofre uma alterao e origina um produto corado e solvel
Quantificao do produto formado (curva de calibrao): [prod] proporcional
concentrao de hormona/componente de interesse
53
Mtodo Indirecto
Mtodo Sandwich
54
Imunocolorao
55
56
FACS
Pode ser mais verstil (mais complexo)
Clulas separadas conforme a carga (separao p/ expresso de receptores)
Grau de purificao elevado
O Citmetro:
Sistema fluido
57
Sistema ptico
Sistema electrnico
- Determinada e
- Variao da velocidade
- Clulas compelidas a estreitar (1 s clula passa pelo canal) obtm-se informao
clula a clula
- Incidncia de luz (laser)
58
59
Sistema electrnico
Computador: recebe os sinais elctricos e transforma-os em sinais digitais
Armazenamento e anlise de dados
60
61
62
Traar contornos de
regies mais
homogneas:
Anlise de parmetros
de fluorescncia
(gating das populaes)
63
64
Recirculao de linfcitos
(p. 25)
Local de infeco (leso), ex. corte, onde existem vasos linfticos entrada de
bactrias: so captadas por clula fagocticas (DCs e migram pelos vasos linfticos at
desaguar um GL vasos eferentes Ducto torxico Veia cava corao
Pulmes)
66
Despoletar da adeso: ligao coesa aos ligandos das integrinas, nas clulas
endoteliais o linfcito pra! (e pode penetrar no tecido)
(p. 58)
Selectinas (E endotlio; L
linfctos): ligam-se a protenas com vrias
cadeias de sidos (glicosilados)
Integrinas:
heterodmeros
activados
por
modificaes
confomacionais ligam-se a protenas de
adeso CAM da super famlia das
imunoglobulinas com
domnio de
fibronectina
67
Quimiocinas
1. Imunidade Inata I
68
- Pele intacta
- Olho: conjutiva do olho + lisozima das lgrimas (mata bactrias)
- Mucosas, membranas das mucosas (clulas epiteliais + muco) e epitlios
- Mucos: protenas altamente glisosiladas impedem penetrao de micorganismos
- Clios: empurram corpos estranhos
- Espirros e tosse: fluxo de libertao e expulso de microrganismos (movimento
mecnico)
- Estmago pH baixo 1 (helicobacter resistente!)
- Intestino: organismos comensais facilitam digesto ocupam locais de deposio de
patogenes
- Movimentos de fluxo/passagem de fluido (vias intestinais) expulso de
microrganismos atravs do vmito e fezes
- Sangue (protenas do sistema do complemento) destruio de microrganismos de
recrutamento de outras celulas
69
70
Barreiras fisiolgicas:
71
72
1. Macropinocitose
Invaginaes da membrana celular Internalizao (fluido extracelular que tmb
contem partculas mt pequenas) Degradao (vescula macropinoctica)
As primeiras vesculas
que se formam so os
endossomas
73
74
Opsonizao
75
Endossomas: precoces (pH 6,5), tardios (pH 5,5-6) fundem-se com vesculas
trans do Golgi
Endossomas + Lisossoma (proteases) = Endolisossoma
Entrada Fuso (com outras vesculas) Degradao Libertaao
76
77
Relembrando:
Exploso respiratria nos neutrfilos (mediada pela NADPH oxidase) leva
formao do anio radical superxido (O2-) H2O2 OCl- (agentes oxidantes
potentes que levam destruio dos micro)
78
79
componentes
das
paredes
celulares
de
a. Lisozima
b. Quitinases
c. Fosfolipase A2
2- Protenas e pptidos microbiocidas que disrompem a integridade das paredes
celulares nos microrganismos
a. BPI (protena catinica que se liga ao lipdo A do LPS. Funciona tb como
opsonina. Expressa nos neutrfilos)
b. Defensinas (pptidos pequenos activos contra: gram + e -, fungos,
parasitas e alguns vrus com invlucro. As alfa-defensinas so
produzidas por neutrfilos e clulas de Paneth. As beta-defensinas so
produzidas pelas clulas epiteliais mas no so armazenadas em
grnulos, so lanadas para o exterior logo depois de se formarem.)
c. Catelicidinas (constitudo por 2 domnios. O domnio NH2 (catelina) tem
37 res. aa. Ela clivada pela elastase dos neutrfilos ficando activa
(contra Gram + e e fungos)
3 Proteases de serinas microbiocidas
a. Serprocedinas (proteases com serinas no ca. So altamente
catinicas)
4 Protenas que sequestram Ferro e zinco
a. Lactoferrina (quelante de Fe. As bactrias precisam de Fe para crescer. A
hidrolise desta d origem lactofericina que leva directamente destruio
dos microrganismos)
b. NRAMP (na membrana dos vacuolos das clulas fagocticas e bombeia
para fora dos vacuolos o Fe, inibindo a proliferao dos micro dentro dos
vac
c. Calcopectina (Regies mt ricas em histidinas e queletam o Zn. Esto no
nos grnulos, mas no citoplasma dos neutrfilos)
5 Enzimas que do origem a derivados txicos de Oxignio e Azoto
a. NADPH oxidase, superoxidade dismutase, mieloperoxidase e NOS
6 Interferes do tipo I
80
Les
o
Pen
etra
o
de
bac
tri
as
Det
ecta
dos
por
mac
rfa
gos e fagocitados Libertao de mediadores inflamatrios depois, os neutrfilos
que circulam no sangue tmb vo migrar para o local da leso libertando tmb os
mediadores inflamatrios (TNF-alfa, IL-1, IL-6 e IL-8)
81
Resposta Inflamatria
82
83
84
85
86
Extravaso de linfcitos
Neutrfilos:
Os pptidos antimicrobiocidas levam morte directa do micro e produzem
protenas capazes de destruir esses micro quer intra como extracelularmente
Macrofagos:
Capazes de activar clulas T, pois so APC, expressam co-estimuladores que
produzem um 2 sinal
Produzem diferentes tipos de citocinas que levam diferenciao de clulas T.
Clulas Dendriticas
Produzem diferentes tipos de citocinas que levam diferenciao de clulas T.
87
Os neutrfilos tm a
capacidade de libertar os
contedos dos grnulos e
formar armadilhas
extracelular (formam uma
espcie de redes onde
aderem os micro
concentra-os naquela zona
o que vai facilitar a sua
destruio). Estas redes so
constuituidas por elastase,
mieloperoxidase e histonas
(microbiocidas)
88
90
91
92
1.
Relembrando: Uso do CFSE com citometria de fluxo
CFSE or CFDA-SE: carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester.
O CFSE (entra nas clulas e estas ficam fluorescentes) dividido igualmente entre as
93
3.
Proliferao de linfcitos: incorporao de BrdU
BrdU (bromodeoxyuridine) anlogo fluorescente da timidina
Injecta-se BrdU nos animais.
Retiram-se as clulas T e coram-se com Ab anti-BrdU.
Contam-se os ncleos que incorporaram o BrdU no seu DNA.
94
95
Tetrmeros de pptidos-MHC
96
98
Tipos de Imunizao
Imunizao Activa: Vacinas
Transferncia de imunidade por anticorpos Imunizao Passiva
99
100
101
103
Imunidade Inata
- Especificidade para PAMP sempre igual (herdada)
- Receptores expressos por todas as clulas
- Resposta Imediata
- Gama larga de patogenes
- Interaco com gama larga de molculas
Imunidade Adaptativa
- Codificados em vrios segmentos que se recombinam
- Cada linfcito recombina de modo aleatrio (padres nicos, repeties quase
impossveis)
- Reconhecem pequenos segmentos especficos dos patogenes
104
So 9
TLR1,2,4,5,6 so expressos na membrana celular e reconhecem estruturas que esto
no exterior dos microganismos
Expressos na membrana ou compartimentos internos
TLR4 = reconhece lipopolissacridos
TLR5 = flagelina
TLR9 = DNA bacteriano
106
Ligandos
TLR
107
108
Receptores intracelulares
recrutamento
de
caspazes
(protenas
envolvidas
na
apoptose. Tm cido asprtico no
seu centro activo.)
Domnios
NBS:
oligomerizam mais que uma
cadeia activao de protenas
para apoptose
NOD 1 e 2 activam o nFkB:
oligomerizam transduao do
sinal activao do nFkB
expresso dos genes
(protenas
receptoras
que
reconhecem
fragmentos
de
peptidoglicanos ou dipptido muramilo)
Interferes tipo I
110
Expresso nos
dendrticas.
macrfagos
algumas
clulas
111
112
2.
Pentraxinas: funcionam como opsoninas e activam o complemento.
CRP (C reactive protein)
fosfatidilcolina dos microrganismos. Aspergillus fumigatus, Zimosano. Protenas do
complemento (C1q)
SAP (serum amyloid protein)
Ligandos: fosfatidiletanolamina dos microrganismos.
Salmonella thyphimurium. Protenas do complemento (C1q e C4bBP)
3. PGLYRP humanos: efeito bactericida
Peptidoglicanos
Zonas de contacto com exterior: pele, olhos, mucosas
PMN polymorphonuclear leucocytes
113
Interferes tipo I
As clulas infectadas por vrus segregam
interferes tipo I (citocinas que interferem com a
sntese viral, na clula ou nas clulas vizinhas)
Desempenham aces autcrinas e parcrinas, sob a
prpria clula ou sob outras (mesmo nas clulas no
infectadas).
So produzidas por clulas infectadas, ligando-se ao
receptor da celula (inibem sntese proteica RNA viral).
Induo de actividade antiviral por IFN-/
114
H diferentes tipos
de receptores activadores e
inibidores
Caracterstica
comum dos activadores:
reconhecimento de MHC I
Nos humanos, HLAA, HLA-B e HLA-C
O HLA-E pode por
vezes substituir os outros
trs
8. O sistema do complemento
115
Sistema do Complemento
116
Caractersticas
Amplificao
Sensibilidade
Controlo
(Processo de amplificao muito sensvel e regulado!)
Nomenclatura
Componentes da via clssica e terminais: C1 C9 (C de complemento!)
Quando uma protena quebrada (clivagem) os fragmentos resultantes designam-se
por:
a fragmento mais pequeno
b fragmento maior
Fragmentos a so quimiotcteis (recrutamento) para leuccitos inflamatrios.
Fragmentos b contribuem para a actividade enzimtica seguinte na cascata.
(Excepo: C2a o fragmento maior)
Um componente enzimaticamente activo escrito com uma linha por cima do nome.
Componentes da via alternativa at ao C3b designam-se por factores.
Ex: factor B, factor D
117
Regio CH3 fica voltada para cima e liga-se primeira protena do complemento
(C1)
IgM so mais eficazes que IgG (distncia fixa)
Estrutura do C1
Domnio de ligao ao C1 das
IgG: CH2
C1 s activado quando 2 dos
seus stios de ligao se ligam s
Ig
IgG ligam-se atravs do CH2:
formao de ponte entre 2 IgG e
o C1 (desencadeia a activao)
tem de haver distncia
ptima
So precisas 1 000 IgG ligada ao
antignio para 2 regies Fc
estarem prximas e se poderem ligar ao C1
Ligao do C1q a regies Fc das IgM e das IgG
118
119
Constituio do C1
120
121
122
123
Via Clssica
124
Via Alternativa
125
126
Colectinas
MBL mannose binding lectin
CRP C-reactive protein
127
128
Componentes terminais
Ligao C5b
C7 liga-se a C6
Regies hidrfobas expostas ligao membrana
C9 polimeriza na membrana forma buracos na membrana do patogene
entrada de gua e ies lise
129
C9 monmero 79 kDa
4 a 18 C9 no MAC com
dimetro interno de 100
130
Alvos do MAC
Entidades com membranas:
- Bactrias gram-negativas
- Alguns virus com envlucro
- Clulas do hospedeiro infectadas por virus que expressam antignios virais na
membrana
- Eritrcitos heterlogos
Resistem ao MAC
- Clulas no infectadas devido a protenas reguladoras
- Clulas com grande actividade metablica endocitam o MAC antes de este actuar.
Ex: clulas cancerosas
C1: MOLCULA COMPOSTA POR
C1Q, 2 MOLCULAS DE C1R E 2
MOLCULAS DE C1 S.
INIBIDOR DO C1 (C1INH ): O
C1 POSSUI UM CENTRO ACTIVO PARA O
INIBIDOR QUE IMPEDE QUE ESTE SE
LIGUE A UM ANTICORPO .
PELA CLIVAGEM DO
(IG G
OU
IGM)
A SSIM,
COMPLEMENTO NORMAL
FACTOR I
Quebra do C3b
132
C2
E ASSIM PREVENINDO A
FORMAO DO CONVERTASE
C3
CLSSICA .
QUE FRAGMENTA O
TAMBM O
C4B,
C3B
MAS
PROTENA DE LIGAO
(C4 BP)
QUE SERVE
C4B
IMPEDINDO A JUNO DO
C2 E LOGO
C3.
A FORMAO DO CONVERTASE DO
C3.
C3 VIA ALTERNATIVA
C4 VIA CLSSICA
O C8
ADIO DE
MAC. C9
C9
C5B67,
A
MEMBRANA : C5 B6789 OU
( FACTOR H
E FACTOR
I)
NO
O IMPEDIRAM .
135
MIRL: IMPEDE
POROS.
A POLIMERIZAO DO
C9
DO
C3B
136
AUTO -IMUNE
(ANTIGNIO
SEMPRE PRESENTE )
+ D EFICINCIAS
EM
C3 =
FUNES DO C3B:
CR3/CR4: integrina;
ligandos = molculas de
adeso celular;
envolvidos na
extravaso de
leuccitos, solubilizao
de complexos e
fagocitose.
Libertao de protenas
C3a, C4a e C5a
Reaco alrgica
sistmica fatal
(vasodilatao:
permeabilidade), para
baixar a tenso o sangue
137
Legenda:
enh enhancer
C codifica para o domnio constante
J 5 domnios/resduos J
V regies variveis, associado a um L (pptido lder) que constitui o primeiro pptido
formado, permitindo conduzir a protena nascente do citosol para o RE e depois
clivado e no vai aparecer na protena madura.
138
CH = C + C + C + C + C
C do origem s IgA
C do origem s IgM
C do origem s IgD
C do origem s IgE
C 4 x IgG
Cada regio constante encontrase subdividida em intres + exes +
regies transmembranares (a rosa na
imagem)
JH e L+VH, entre estas regies
existem regies DH (n=23), que conferem diversidade
Recombinao de segmentos
gnicos: os segmentos V podem
ligar-se ao acaso aos J
139
Cadeia leve
140
10.3. Os
imunoglobulinas
mecanismos
moleculares
dos
rearranjos
dos
genes
das
141
142
Adio de nuclotidos P
Adio de nucletidos N
144
Clulas
hematopoieticas
estaminais (rgo linfide 1:
medula ssea)
linfcito B (virgem
maduro) diferenciao (na
periferia rgos linfoides 2)
Clula hematopoitica
de linhagem negativa No
expressa nenhum marcador
caracterstica de linhagens
linfides
ou
mieloides.
Expressam c-kit em nveis muito
elevados.
Contacto com clulas do estroma (tudo o que no so linfcitos, colcho) da medula
ssea
Sada da medula: ainda no encontrou antignio (naive=virgem)
Activao: rgos linfoides secundrios
Desenvolvimento das clulas B: envolvidas integrinas, fundamental citocina IL7
(produzida pelas clulas do estroma) fase de
crescimento e expanso antes de recombinao dos genes
Ig
Nas clulas pr-B, existe cadeias leves substitutas (V-preB e lambeda5). Ligam-se a
glicoproteinas gp130/gp 35-65 (estas ultimas substituem as cadeias pesadas). como se se
originasse uma Ig Porque? Uma possibilidade para que haja a manuteno das clulas, para
no serem destrudas por apoptose. nestes clulas pr-B que se expressam tmb o RAG1 e
RAG2. Comea-se tambm os rearranjos de D e J. Expressa os receptores da IL-7
Nas clulas pr-B continuam-se a expressar as cadeias leves substituas.
Pre-B-1 recombinao de um segmento V com um segmento DJ nos genes das cadeias
pesadas.
Pre-B-2-1 Expressam a cadeia pesada (miu) e formam o receptor pr-BCR. Esta clula sofre
um sinal para ver se a protena miu foi expressa adequadamente na membrana ou no. Caso
no tiver sido, a clula morre.
Excluso alelica (d-se quando uma cadeia pesada foi bem expressa) inibe a RAG 1 e 2, a TDT,
pra a expresso das cadeias leves substitutas e de recpetores. Estimula a recombinao das
cadeias leves.
Recombinao D com J num alelo (me). Depois recombinao de V com DJ dando origem a
um mRNA funcional e uma protena (miu) funcional, inibindo a recombinao do alelo 2. Caso
no seja funcional vai tentar recombinar o alelo com pai. Se no der a clula morre.
Pre-B-2-2 Antes de recombinar os genes das cadeias leves (a primeira que comea sempre
a cadeia k) vai fazer RNA que no vo dar origem a protenas (estreis). Servem para tornar
mais expostas as regies onde se vo ligar as protenas que vo recombinar. Expressa
novamente RAG 1 e 2 e continua ainda em proliferao.
Pre-B-2-3 Comea a recombinar os genes das cadeias leves das Igs. Juno VJ
do alelo1 da cadeia k, dando-se a recombinao do alelo 1k. Se produzir um mRNA 1k
funcional inibe a recombinao do alelo 2 e inibe a recombinao do alelo lambeda.
147
J temos aqui uma clula B imatura expressa IgM. Recombinao acabou, mas
continua a expressar RAG1 e RAG2 e no proliferam nem se diferenciam em resposta
ligao de um antignio.
Processo de seleco positiva e negativa.
No final desta etapa, comeam a formar uma cadeia pesada Delta. Quando comea a
produzir estes dois Ig, torna-se uma clula madura.
Clulas
progenitoras
(hematopoiticas
estaminais)
comeam por expressar CD43 expresso de CD19:
primeiros fenmenos de recombinao da cadeia pesada
(simultaneamente de D para J nos 2 alelos)
Expresso do receptor da
clula B
Primeiro: Expresso
cadeia (5), no citoplasma e
148
Se a recombinao do 1
alelo no for eficaz, d-se a
recombinao do 2 alelo. Se
tambm este no for eficaz, a
clula morre
Uma recombinao eficaz
do 2 alelo leva transcrio da
protena (cadeia pesada)
149
Recombinaao da
cadeia leve:
alelo 1 k alelo 2 k
recombinao alelo
1 recombinao
alelo 2
150
151
2 hlices
Nas posies 2 e 8 h motivos mais frequentes que
permitem uma melhor adaptao s molculas MHC I
Vrias molculas MHC podem ligar-se ao mesmo pptido
e o mesmo MHC pode-se ligar a vrios pptidos =
Promiscuidade
Os resduos que variam so os que se encontram virados
para cima
MHC II
Duas cadeias polimrficas (2 pptidos, um alfa e
outro beta)
Domnio
de
Ig
(proximo
da
regio
transmembranar)
152
153
As
clula
s
MHC I
e II do
pai e
da
me
pode
m ser muito diferentes, da a
variabilidade gentica das populaes.
Ao conjunto dos loci do MHC I e II que se encontram num determinado cromossoma
chama-se haplotipo.
154
A
diminuio
da
expresso de molculas MHC I
ocorre
em
infeces
e
alteraes
tumorais.
A
variabilidade de molculas
MHC
permite
uma
apresentao muito maior de
Ag.
156
Activao Proliferao
Diferenciao
157
158
159
1. Ligao do antignio
2. Cinases Src prximas da membrana so activadas,
fosforilando as tirosinas
3. A Syk liga-se s tirosinas fosforiladas
4. Ocorre fosforilao da protena adaptadora BLNK
pela Syk
5. Ligao da BLNK ao Fosfolipase C2
6. Btk fosforila o fosfolipase C2 (activao) devido
atracagem que estabelece com este pelos resduos SH2
Transmisso de sinal pelo complexo BCR
Consequncias da activao:
160
expresso
B7
(coestimuladores)
. expresso MHC-II
. expresso de receptores de
citocinas e de BAFK (factor de
activao das clulas B)
. expresso receptor de
quimiocinas (CCR7) migrao
para o local de produo de
quimiocinas
162
Migrao das clulas T para os folculos Nos folculos d-se o contacto entre as
clulas B (activadas pelo antignio e pelos linfcitos Th) e os FDC (Clulas Foliculares
Dendrticas) 2 encontro triplo (Fase III) Congregao: reaco dos centros
germinativos Proliferao de clulas B e T (na periferia existem cl T que produzem
citocinas e molculas de membrana contribuindo para a expanso) Expanso clonal
massiva d origem formao de folculos secundrios, cobertos por um manto de cl
B virgens.
164
DURANTE A PROLIFERAO:
- Hipermutao somtica: pontuais nos genes das Ig, 1 milho de vezes mais frequente
que a mutao de DNA nas outras clulas, necessrias clulas T (CD40, CD40L e
citocinas).
- Mudana de isotipo da cadeia pesada: cessa a produo de c que leva produo
de IgM, passando a ser produzidas outras: , , , etc. que do origem a IgE, IgG, e IgA,
respectivamente.
Pra a diviso e as clulas migram para uma zona com menos clulas onde existem
FDC Regio branca ou clara, a existem fenmenos de mutao que do origem a
fenmenos de mutao que podem passar a ter diferente capacidade de se ligar ao
antignio.
Apenas as que tm mutaes que resultam em maior afinidade se ligam ao
antignio das FDC e recebem estmulo de sobrevivncia.
Nos centrocitos existe ento um processo de seleco (no h proliferao): as
clulas que no se encontrem ligadas a factores de sobrevivncia (no receberam
estmulo) esto destinadas a morrer apoptose; se ocorrer ligao s FDC ocorre a
expresso de protenas anti-apoptose (Bcl-2) e voltam regio escura Novo ciclo
(Hipermutao Somtica).
sada dos centros germinativos temos clulas de memria com muito maior
afinidade para o antignio que as clulas B que entraram; clulas B de memria e
os plasmcitos de longa durao (diferenciao) migram para a medula ssea.
O MECANISMO DE RECOMBINAO NA MUDANA DE ISOTIPO
166
Cadeia pesada: a jusante de cada regio constante existe uma regio S: Switch
repeties tandem muito ricas em guaninas.
Antes de se dar a mudana de isotipo (intragnica) ocorre a quebra e aproximao
de 2 regies S, ligando-se uma outra, a regio do meio desaparece e a regio que
existe junto de vdj a 1 a ser expressa: c c = IgG IgE
Enzima de recombinao AID: desaminase da citidina especfico dos folculos.
Tem de haver transcrio do DNA (seguido de processamento mas no traduzido,
estril) para que as 2 regies S sejam abertas e o DNA seja exposto e as citidinas
substitudas por uracilos.
AID muda o C a U UNG retira os U e a endonuclease corta
UNG = glicosilase do uracilo buracos: nucletidos sem bases, zonas de possvel
actuao do endonuclease Reaparao do DNA: ligao de 2 zonas S, no se
sabe como apenas que envolve Ape1.
Para a produo de anticorpos de maior afinidade necessrio: Clulas T auxiliares
produtoras de citocinas que expressem CD40 para se ligar ao CD40L de clulas B,
expresso de AID e transcrio das regies S.
167
168
169
170
171
MHC II
Duas cadeias polimrficas
A abertura maior:
permite a ligao a um pptido
maior
Grande variabilidade (+ de
600 variantes)
173
A
diminuio
da
expresso de molculas MHC
ocorre
em
infeces
e
alteraes tumorais
176
177
Via endgena
Antignios produzidos no interior da clula: podem ser prprios ou aqueles que
passaram para o citosol.
Associao a MHC I activao Tc CD8+ morte das clulas infectadas
Via exgena
Antignios provenientes do exterior. Apenas as APC fazem esta via.
Pptidos associados a MHC II activao de Th CD4+ (auxiliam clulas B)
destruio dos patogenes
ER endoplasmic reticulum
TAP transporter associated with antigen processing
ERAP ER aminopeptidase associated with antigen processing
178
Ubiquitinao de protenas
180
181
Papel de HLA-DM/H-2M
182
183
TCR:
CDR3
CDR1 CDR2
185
PERIFERIA
CENTRO
PERIFERIA
186
ORGANIZAO GENMICA
TCR
SEMELHANTES NO HOMEM,
MURGANHO E IDNTICOS AOS GENES
DAS CADEIAS LEVES DAS IG;
H OMEM: 61 SEGMENTOS J
(NAS IG ERAM 6) NA CADEIA (AUMENTO
DAS COMBINAES POSSVEIS );
SEGMENTO C (REGIO CONSTANTE) E
42 SEGMENTOS V;
187
TCR
SEGMENTOS VARIVEIS : V, D E
J (VRIOS);
SEGMENTO CONSTANTE : C (S
EXISTE 1).
TCR
C1 EC 2 DESEMPENHAM A
MESMA FUNO (RECONHECER E LIGAR AO
AG).
TCR
188
189
DJ);
REGIES DE LIGAO = OS CDR3 SO EXPRESSOS NOS LOCAIS DE JUNO DAS REGIES D E J,
ZONAS DE MAIOR VARIABILIDADE ;
VARIABILIDADE MUITO MAIOR QUE A DAS IG: 1015-1018 ;
AFINIDADE TCR << AFINIDADE IG.
MUITO RPIDA;
190
CENTRO DA LIGAO;
GRANDE FLEXIBILIDADE DE LIGAO;
MUITO PRXIMO DO PPTIDO, ZONAS QUE MAIS CONTRIBUEM PARA A LIGAO ;
MAIOR HIPTESE DE VARIABILIDADE E RECONHECIMENTO;
CDR3 O QUE TEM MAIOR FLEXIBILIDADE QUANDO SE LIGA AO PPTIDO : REACTIVIDADE
CRUZADA CADA TCR CONSEGUE RECONHECER MAIS QUE UM PPTIDO DEVIDO SUA
FLEXIBILIDADE .
ASSOCIADOS
S
CAUDAS
CITOPLASMTICAS ESTO CINASES S RC E
RLK QUE ESTO NORMALMENTE
INACTIVADOS , A LIGAO DO TCR ACTIVA OS
CINASES ( DESFOSFORILADAS ) MAIS PRXIMOS
DOS RESDUOS ICAM E ESTES DESENCADEIAM
A
RESPOSTA
ATRAVS
DE
VRIAS
FOSFORILAES ;
191
DN=double negative
192
Murganhos RAG -/-: CD8- CD4-, onde uns so CD44+CD25- e outros CD44-CD25+
A seleco
Consiste:
1. Proliferao inicial com proteco da apoptose (DNISP) (as filhas tm a mm cadeia Beta, mas
as alfas podem ser diferente)
2. Proliferao mais tardia (ISP-DP)
193
A fase DP CD4+CD8+
Qd a clula esta em CD4hiCD8lo se houver uma sinalizao continua vai haver a inibio de um
silenciador que esta a montante do gene da ZDTB7B e a clula diferencia-se em CD4. Qd o sinal
descontinuo o silenciador continua activado sendo inibido a expresso deste gene e o factor
de transcrio no produzido, ficando as clulas CD8.
A medula tmica e a tolerncia central
Na medula:
As mTEC
Controlam a expresso de antignios especficos de tecido (TSA).
Expressam molculas MHC I e II e co-estimuladoras CD40, CD80 e CD86 necessrias
para a eliminao de clulas T auto- reactivas.
Expressam o AIRE (factor de transcrio)
As DC:
No expressam TSA mas fazem a apresentao cruzada de antignios provenientes de
outras clulas a clulas T.
Expressam CD40, CD80 e CD86
O AIRE leva transcrio de protenas especificas de vrios rgos. Se os timocitos
reconhecerem fortemente estas protenas, morrem. Assim, os que vo sair no reconhecem
fortemente as protenas que so expressas da periferia. (seleco negativa)
Expresso ectpica de genes nas clulas epiteliais tmicas
195
196
Sinal 2:
co-estimulao. Ligao da CD80/86 (expressas nas APC quando
ativadas) ao CD28 (expresso nas clulas T)
Sinal 3:
citocinas
Aglomerao de receptores na
membrana jangadas lipdicas,
alteraes
transitrias
na
membrana (+ enriquecidas em
colesterol e esfingolpidos); tal
devido aglomerao de
protenas de transduo de sinal
197
de
factores
de
CD3: subunidades / e /
TCR: subunidades /
Resduos tirosina (Y) dos ITAM so
fosforilados por cinases (Lck) activao
198
199
Activao do PLC-1
201
19.
Activa
o de
clulas
T
continu
ao
1.
19.
SINAL 2: coestimulao
O CD28
expresso
constitutivamente
nas
clulas
T
virgens,
os
restantes
s
202
quando so activadas
Receptores da imunidade inata existentes nas APC reconhecem grandes padres moleculares
PAMPs (ex: DNA ou RNA viral, peptidoglicano)
APC activadas por patogenes (grandes padres moleculares) expresso de molculas coestimuladoras (B7 ligando do CD28) e MHC
Sem infeco no ocorre activao das clulas T, no h necessidade de resposta
Necessrios pelo menos 2 sinais para haver resposta!
Aps activao das clulas T ocorre produo de citocinas (factor de crescimento celular),
permitindo a expanso e diferenciao
CD28
Glicoprotena da superfamlia das Ig (90kDa),
homodmero com uma ligao perssulfureto entre as duas
cadeias
Expressa constitutivamente em clulas T em repouso e
activadas. Expresso aumentada aps ligao de pMHC ao TCR.
Ligandos do CD28: B7-1 e B7-2
CD28 contribui reforando vias de transduo de sinal
mas tambm contribui para outras vias que no envolvem
directamente o TCR
A ligao do CD28 aos seus ligandos aumenta a
produo pelas clulas T de:
CD80 (B7-1)
203
Aps interaco das APC com as clulas T a sua expresso aumentada nas APC s 48
horas diminuindo rapidamente s 72 horas
CD86 (B7-2)
Aps interaco das APC com as clulas T a sua expresso rapidamente aumentada
nas APC, mantendo-se assim at s 96 horas
CD40 CD40L
CD40L: importante para tornar APC mais adequadas a
apresentar o antignio
Interaco com CD40, expresso constitutivamente pelas
APC
Clula virgem CD40L
PAMP + TLR APC expressa CD80 + CD86 interaco
com CD40 expresso constitutivamente torna-se independente,
j no precisa receber sinais de outros patognios
LICENCIAMENTO DAS APC
204
No expresso constitutivamente
Apresenta 20 vezes mais afinidade
para o CD80 e CD86 que o CD28
Sinalizao negativa reguladora
B7 : CTLA-4 transduo de sinal
sinais inibitrios inibio de cinases,
expresso fosfatases (SHP-2) mecanismo
de desfosforilao paragem da
proliferao
206
207
208
209
210
(produzem intracelularmente para activao da NDPH oxidase + EROs e ERNs) clula superactivada
secreo de citocinas
211
212
213
Clulas Th17:
214
CD4+ - Th2
21. A DIFERENICAO
DAS
- clulas B so activadas
CLULAS TC E FUNES
EFECTORAS
- mais activas
no combate a
DAS CTL
bac. extracelulares
215
AS APC ACTIVAM AS CLULAS CD4+ E CD8+, AS DCS SO AS MAIS IMPORTANTES POIS PODEM
ACTIVAR OS 2 TIPOS DE CLULAS T EM SIMULTNEO;
CLULAS TH CD4+ SO NECESSRIAS PARA A ACTIVAO DAS CD8+;
TRINGULO AMOROSO : TH CD4+ + DC + TC CD8+ - LIGAO ATRAVS DO MHC I;
IL-2 E RECEPTOR ENVOLVIDO FACTOR DE CRESCIMENTO;
CLULA TH ACTIVADA PRODUO DE CITOCINAS ACTIVAO DAS CLULAS TC
DIFERENCIAO DESTAS CLULAS EM CLULAS T CITOTXICAS (CTL);
A ACTIVAO DAS CD8+ PODE OCORRER DE 3 MANEIRAS
216
B)
C)
217
218
219
220
221
PERFORINAS:
HOMLOGA DA C9 (PROTENA DO COMPLEMENTO QUE FAZ POROS NA MEMBRANA);
POLIMERIZA: MONMERO COM 65 KD A;
EXISTE EM CTL E NK;
PH NEUTRO = SINAPSE = [CA2+]
PORO COM DIMETRO DE 20NM, MAIS PEQUENO QUE O DO C9.
222
223
GRANZIMAS:
PODEM
6-P 1
SAEM
PROTEASES DE SERINA
(NO
COM CIDOS);
224
FASL: INSERIDA NA MEMBRANA CITOPLASMTICAS DAS CTL, INTERAGE COM FAS DAS CLULAALVO.
225
226
228
229
CASPASES EXISTEM SOB A FORMA DE PR-ENZIMAS COM UMA UNIDADE GRANDE E OUTRA
PEQUENA QUE SE AUTO -ASSOCIAM ( DIMERIZAO PEQUENA + PEQUENA E GRANDE +
GRANDE ).
SUBSTRATOS DOS CASPASES: PROTENAS ESTRUTURAIS SO SUBSTRATOS PREFERENCIAIS
DOS CASPASES EXECUTORES; ACTUAM SOBRE AS HISTONAS , LMINAS DO NCLEO ,
PROTENAS DE REPARAO DO DNA E AT DO PRPRIO METABOLISMO DO DNA,
PROTENAS DE TRANSDUO DO SINAL ( CINASES , STAT S ) PROTENAS ENVOLVIDAS
MECANISMOS BSICOS DE SOBREVIVNCIA DA CLULA ACTIVAM ALGUNS DNASES.
230
GRANZIMA A:
231
COMPLEXO 7:
GRANZIMA B:
TAMBM
ACTIVAO DO APOPTOSSOMA;
FASL E FAS:
VIA EXTRNSECA;
PR-CASPASE 8 CASPASE 3 ACTUA DIRECTAMENTE HIDROLISANDO
Clulas dendrticas
Caractersticas
Origem miloide
So clulas com morfologia dendrtica (pelo menos num estdio)
Apresentam uma expresso elevada de molculas MHC I e II (nenhuma clula
expressa tanto) e uma expresso intermdia a alta de molculas coestimuladoras (fundamental para activao clulas T)
Motilidade
Especializao de funo com o tempo, isto , mudana de um modo de
captura de antignio para um modo de estimulao de clulas T (DCs imaturas
capturam antignios; maduras apresentam-nos s clulas T)
Clulas de Langerhans
Clulas veladas
Captao de antignio
DC presentes nos vasos aferentes linfticos
Entram nos GL, mas no saem. Sofrem a apoptose.
235
236
Constituintes de microorganismos
Citocinas inflamatrias (TNF, IL-1)
Clulas T (interaces CD40L:CD40)
Stress (necrose, transplantes)
Captao de antignio
Receptores
das
DC
semelhantes a lectinas do
tipo C
237
Processamento de antignio
DC encontram o antignio na periferia e migram para os GL onde os apresentam a
clulas T.
Esta caracterstica resulta de:
1. Alterao na vida mdia das MHC II entre as DC imaturas e as DC maduras.
Decomposiao das vesculas endocticas e ligao aos pptidos das MHC II.
Nas DC imaturas as MHC II so rapidamente internalizadas e recicladas com uma vida
mdia de cerca de 10 horas. Enquanto as DC so imaturas, os pptidos no se ligam
fenda das MHC II (s est ligado o pptido invarivel), depois so clivadas (zona CLIP) e
os pptidos j se podem ligar fenda das MHCII.
Nas DC maduras h uma sntese extensa e rpida de MHC II e a sua vida mdia de
cerca de 100 horas.
238
Via especfica das DCs. Apresentao cruzada de antignio a clulas T (CD8 +) atravs de
molculas MHC I
2. Apresentao de antignios endgenos (MHC I) a clulas T CD8+
3. Apresentao de antignios endgenos (MHC II) a clulas T CD4+
239
Propriedades de migrao
Envolve quimiocinas e a expresso de diferentes receptores na membrana das DC.
Aquando do processo de maturao as DC passam a expressar CCR7 que reconhece as
quimiocinas CCL19 e CCL21 que so expressas nos GL na regio das clulas T.
Direco de migrao: gradiente de concentrao dos ligandos (sada dos aferentes e
entrada nos GL). expresso de receptor na maturao
Libertao de citocinas
Libertaao de citocinas importantes para o inicio da resposta imune.
IL-12: aps a estimulao por microorganismos as DC so a principal fonte de IL-12, em
particular as DC CD8+ virgem dif. clula Th1.
IL-23: produzida principalmente por DC activadas IFN produzida por DC
plasmacitides. Inibe a produo de IL-12 por DC durante infeces virais.
Sobrevivncia e manuteno de clulas Th17.
IL-2: mRNA da IL-2 aumenta 4-6 horas aps encontro com microrganismos. Factor de
crescimento das clulas T efectoras.
IL2 + IFN estimulao de NK produo de IFN manuteno de NK e
activao de macrfagos pelas Th1
240
23.
inata
Ponte entre a
imunidade
e adaptativa:
Clulas NK
Clulas NK
Clulas linfides
So
clulas linfides
com origem na
medula ssea
241
Clulas NK Funes
i) Citotoxicidade Natural
ii) ADCC
Antignios virais reconhecidos por
IgG ligado a CD16 expresso na membrana das NK
mecanismo de transduo de sinal activao da
clula libertao de grnulos morte da clula
infectada
242
Secreo de citocinas
243
244
CD94 - 30kDa uma glicoprotena de membrana tipo II. uma lectina tipo C.
CD94 associa-se a NKG2A ou NKG2B, ambas de 40 kDa e com longas caudas
citoplasmticas com ITIM.
CD94/NKG2A liga-se ao HLA-E (homem) e ao Qa-1b
(murganho)
HLA-E uma molcula MHC classe 1b no clssica cuja fenda
de ligao ao pptido ocupada por sequncias leader das
outras molculas MHC classe I.
245
246
247
DCs activam NK
Cytolysis = morte
NK = maturao de DC ou levar sua lise
Mais tardio: Dc NK IFN- diferenciao clulas T Th1 auxilio de
macrfagos + auxilio CD8+ CTL
249
Citocinas Propriedades
Citocinas Funes
As concentraes a que actuam so muito pequenas, da ordem do picomolar (mM 10 3, M 10 -6, nM 10 -9, pM 10 -12)
Frequentemente tm actividades redundantes
Citocinas estrutura
A estrutura em -jelly roll tem a forma de um sino formada por homodmeros, ex:
famlia TNF
A estrutura em boto de cistena formada por homodmeros ligados por pontes
perssulfureto, ex: famlia TGF
As quimiocinas classificam-se de acordo com a presena de resduos de cistena na
extremidade amina, ex: CC, CXC, CX3C e C
251
Receptores de citocinas
252
253
254
255
TNF-
Concentraes baixas
. Aco sobre clulas endoteliais, mais separadas
. Recrutamento de leuccitos
. Vasodilatao local
. Activao e produo de citocinas: sinal
256
Moderadas
. Clulas endoteliais e fibroblastos activados em maior extenso
. produo de clulas hematopoiticas
. Efeito endcrino no crebro: T do corpo (impedir crescimento bacteriano)
. Hepatcitos: produo de protenas fase aguda (opsoninas)
. prostaglandinas: vasodilatao e recrutamento
. coagulao nos vasos sanguneos
. Glndulas supra-renais: glucocorticides
. Activao de osteoclastos (macrfagos do osso)
. IL-2, 6, 8, TNF = aces redundantes
Elevadas
. Fgado + glbulos vermelhos
a ser destrudos choque
cptico TNF
. Vasodilatao brutal
. volume
. Corao + enfraquecido
oxignio e nutrientes no
chegam a todos os stios
. crebro sem sangue
. hipoglicmia: carncia da
produo de glucose e
consumo elevado
257
258
259
. = 20 tipos; = 1 tipo
. Interferem com a proliferao de vrus
. Ligam-se aos receptores das clulas transduo de sinal activao de GTPases
inactivao de RNA viral: RNAses degradam RNA; inibio da translao do RNA viral; inibio
da transcrio do RNA viral
260
. Anti-inflamatrias
. activao eosinfilos, neutrfilos
. Produo Treg e Th2
. Inibem produo de citocinas de Th1
. Estimulam diferentes T naive em Th2
261
Quimiocinas receptores
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270
CAPACIDADE
271
(LINFCITOS T = MESES.
272
273
REMOO
TCR
(INTERACO
PARA ANTIGNIOS
FORTE ) OU ANERGIA
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275
ANTI -
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280
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CLULAS TH3 MAS INDUZIDAS NA PERIFERIA ATRAVS DE DCI QUE AMADURECEM NA PRESENA DE
IL-10 (DCS MODULADAS ) SEGREGAO DE TGF- + IL-10 + IL-35 (CITOCINAS
IMUNOSUPRESSORAS); SEM SINAIS DE PERIGOS E OUTROS MIGRA PARA OS NDULOS LINFTICOS ,
MAS COM CITOCINAS MIGRA PARA OS GNGLIOS E TORNAM -SE TREGS TOLERANTES .
283
CLULAS T SUPRESSORAS (TS CD8+) INTERAGEM COM DC MODULADAS QUE EXPRESSAM ILT3
E ILT4
284