Anda di halaman 1dari 3

Uji aktivitas amilase (Metode kolorimetri dengan pereaksi

Lugol)
Tujuan :
1. Mengetahui aktivitas enzim amilase menggunakan metode kolorimetri
dengan pereaksi lugol
Prinsip :
1. Absorbansi
2. Ikatan Glikosidik
3. Metode Kolorimetri
4. Metode Caraway Somogyi

Reaksi :

(Winarno, 1995).
Dapus : Winarno, F.G., 1995. Enzim Pangan. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka
Utama.
Alat dan Bahan :
Alat :

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Batang Pengaduk
Gelas Kimia
Labu ukur
Micropipet
Microplate
Microplate reader
Penangas air
Pipet tetes
Spatel

Bahan:
1.
2.
3.
4.
5.

Amilum
Aquades
Larutan HCL
Larutan Iodium
Larutan sampel

Prosedur :
Pereaksi
-

Amilum 0,5%: 100 mg amilum dilarutkan dalam 20 mL aquadest, lalu


dipanaskan hingga larut sempurna. Dinginkan dan genapkan larutan

hingga 20 mL dengan aquades (konsentrasi 5000 ppm).


Iodium 0,015%: larutkan 300 mg KI dalam 10 mL aquadest, lalu
tambahkan 30 mg I2 dan aquadest hingga 20 mL. Ambil 2 mL larutan dan

encerkan dengan aquadest dalam labu ukur 20 mL.


Larutan HCl 30% dibuat sebanyak 100 ml
Masukkan 30 mL HCl pekat ke dalam labu ukur 100 mL yang telah berisi
50 mL aquades, genapkan volume hingga 100 mL dengan aquades.

Kurva Baku
Kurva standar amilum: 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; dan 0,5 mL amilum 5000 ppm
ditambah air hingga 3 mL. Tambahkan 0,5 mL asam klorida, 4 mL aquadest,
dan 0,5 mL iodium. Ukur absorbansi pada 627 nm.

Prosedur Uji Amilase

1.

0,025 mL sampel ditambah 3 mL larutan amilum dan inkubasi selama 7

2.
3.

menit.
Tambahkan 0,5 mL asam klorida, 4 mL aquadest, dan 0,5 mL iodium.
Ukur absorbansi pada 627 nm. Aktivitas amilase dihitung berdasarkan
penurunan kadar amilum.

Unit/mL

Abaku Asampel
Abaku

( mg ) starch terpakai
( ml ) enzim dalam campuran x volume total x t

Aktivitas Spesifik (U /mg) (

U
) 1/C
mL