Angiotensin-converting enzyme (ACE) inhibitor, antihipertensi dan kegiatan

antihyperlipidaemic hidrolisat protein (RPH) dari ubur-ubur Rhopilema

esculentum diselidiki. R. esculentum dihidrolisis secara berurutan dengan pepsin
dan papain, dan kemudian hidrolisat itu ultrafiltered dengan Da cut-off membran
2000. Ditemukan bahwa RPH berisi tingkat tinggi Gly, Glu, Pro, Asp dan Ala,
memiliki potensi aktivitas penghambatan ACE in vitro dengan IC50 1,28 mg / ml.
Itu juga menemukan bahwa tekanan darah sistolik berkurang nyata pada tikus
hipertensi spontan setelah pemberian oral tunggal dan kronis RPH, yang
menunjukkan bahwa RPH memiliki efek antihipertensi. Selain itu, pemberian oral
dari RPH penurunan kolesterol total serum dan trigliserida, dan meningkatkan
kolesterol high-density lipoprotein pada tikus diberi makan dengan diet tinggi
lemak. Hasil ini menunjukkan bahwa RPH mungkin terbukti menjadi makanan
fungsional yang menjanjikan untuk pencegahan dan pengobatan hipertensi dan
hiperlipidemia.

1. Perkenalan
Hipertensi merupakan masalah kesehatan umum dan serius kronis, dan
diidentifikasi sebagai faktor risiko utama untuk pengembangan arteriosclerosis,
stroke, infark miokard dan penyakit ginjal stadium akhir, mempengaruhi 15-20%
dari orang dewasa di dunia (Lin, Lv, & Li, 2012). Dalam beberapa tahun terakhir,
peptida antihipertensi makanan yang diturunkan telah menarik banyak perhatian
dari kedua peneliti dan konsumen. Mekanisme yang paling diterima dengan baik
mendasari efek darah penurun tekanan peptida makanan yang diturunkan
tampaknya menjadi penghambatan aktivitas enzim angiotensin-converting
(ACE). ACE inhibitor dapat menghambat konversi angiotensin I menjadi
angiotensin II dan meningkatkan kadar bradikinin. ACE inhibitor protein asal
hidrolisat telah diperoleh dari berbagai sumber makanan, termasuk sapi casein
(Miguel, Contreras, Recio, & Aleixandre, 2009), ganggang merah (Qu et al., 2010)
dan makanan hasil fermentasi (Je, Park, Byun, jung, & Kim, 2005). Namun, hanya
dalam penelitian vivo dapat meyakinkan memverifikasi efek antihipertensi dari
hidrolisat diberikan. Berbagai model hewan untuk uji hipertensi telah
dikembangkan selama 50 tahun terakhir, di antaranya model tikus yang paling
banyak digunakan adalah hipertensi spontan tikus (SHR). Sebagai SHR
mengembangkan banyak fitur dari kerusakan end-organ hipertensi, kegagalan
jantung dan disfungsi ginjal, telah digunakan dalam banyak studi pada hidrolisat
protein antihipertensi dan peptida (Miguel et al, 2007;. Nakano et al, 2006;.
Wang et al ., 2008). Hipertensi dan hiperlipidemia berinteraksi satu sama lain
dalam aterosklerosis dini (Okosun, Choi, Hash, & Dever, 2001;. Org et al, 2011;
Tohme, Jurjus, & K., 2005; Vuagnat et al, 2001.). Epidemiologi dan studi
eksperimental telah menunjukkan bahwa ACE inhibitor memiliki efek yang
menguntungkan dalam aterosklerosis awal selain aktivitas antihipertensi mereka
(Chobanian, Haudenschild, Nickerson, & Drago, 1990; Fennessy, Campbell, &
Campbell, 1994). studi farmakologi juga telah menunjukkan bahwa ACE inhibitor
dapat mengurangi kolesterol plasma pada hewan model yang berbeda (Kowala,
Grove, & Aberg, 1994; Sugano, Makino, & Yanaga, 1996). Kajian yang lebih

mutakhir telah melaporkan bahwa hidrolisat protein dari beberapa bahan

makanan, seperti sardinelle (Khaled et al., 2012), ikan (Wergedahl, Gudbrandsen,
Rost, & Berge, 2009), wijen (Biswas, Dhar, & Ghosh, 2010) dan kedelai (Aoyama,
Fukui, Takamatsu, Hashimoto, & Yamamoto, 2000; Zhong, Zhang, Ma, &
Shoemaker, 2007) dapat mempengaruhi konsentrasi kolesterol plasma dan
metabolisme asam lemak tak jenuh ganda. hidrolisat protein dapat bertindak
sebagai inhibitor ACE dan mengerahkan efek menguntungkan mereka dalam
aterosklerosis awal dengan mengatur lipid darah. Oleh karena itu, makanan
peptida berbasis protein dapat dikembangkan sebagai nutraceuticals dan
digunakan sebagai alternatif yang aman dan alami untuk obat sintetik untuk
pencegahan dan pengobatan hipertensi dan hiperlipidemia. Ubur-ubur telah
dieksploitasi secara komersial oleh Cina sebagai makanan penting bagi lebih dari
seribu tahun. Di antara spesies yang dapat dimakan, Rhopilema esculentum
Kishinouye adalah spesies yang paling berlimpah dan penting dalam perikanan
ubur-ubur Asia dan merupakan bisnis seafood juta dolar di Asia (Peggy Hsieh,
Leong, & Rudloe, 2001). R. esculentum, sebuah cnidarian dari keluarga
Rhopilema, termasuk kelas Scyphozoa dan urutan rhizostomae, dan
didistribusikan secara luas di Laut Cina Selatan, Laut Kuning dan Laut Bohai, dan
produktivitas tertinggi dari akhir musim panas ke musim gugur awal (Hong,
2002). Nilai obat dari ubur-ubur telah diakui untuk waktu yang lama (Hsieh &
Rudloe, 1994; Omori & Nakano, 2000). Hal ini diyakini menjadi obat yang efektif
terhadap hipertensi, arthritis, nyeri punggung bawah dan borok (Hsieh & Rudloe,
1994; Jiang & Zhang, 1994). Ubur-ubur juga diduga memperbaiki kelelahan dan
kelelahan, merangsang aliran darah selama siklus menstruasi pada wanita, dan
kemudahan banyak jenis bengkak (Peggy Hsieh et al., 2001). Analisis komposisi
kimia menunjukkan bahwa ubur-ubur terutama terdiri dari air (95,6%) dan
protein (4,5%) (Peggy Hsieh et al., 2001). Protein yang diisolasi dari ubur-ubur
memiliki banyak bioactivities, seperti aktivitas hemolisis, toksisitas hepatosit,
myotoxicity, toksisitas jantung, aktivitas antioksidan, aktivitas insektisida dan
neurotoksik (Cao et al, 1998;. Chung, Ratnapala, Cooke, & Yanagihara, 2001;
Gusman, Avian , Galil, Patriarca, & Rottini, 1997; Radwan, Gershwin, & Burnett,
2000;. Yu et al, 2005, 2006). Meskipun R. esculentum ubur-ubur telah lama diakui
sebagai memiliki efek mengurangi tekanan darah di Cina, efek antihipertensi
yang jarang dilaporkan, terutama dalam model SHR. Untuk yang terbaik dari
pengetahuan kita, tidak ada laporan tentang efek antihyperlipidaemic dari
hidrolisat protein yang telah diterbitkan. penelitian ini adalah untuk mengetahui
aktivitas ACE-inhibitor dan efek antihipertensi dari R. esculentum hidrolisat
protein setelah pemberian oral tunggal dan kronis pada SHR, dan efek
antihyperlipidaemic pada tikus hiperlipidemia tinggi lemak-diet-induced.
2. Bahan dan metode
2.1. bahan
R. esculentum ubur-ubur dikumpulkan di peternakan budidaya laut dari Homey
Group (Rongcheng Kota, Provinsi Shandong, China) pada bulan Agustus 2010,
dan segera disimpan pada 20 C untuk digunakan nanti. ACE, hippury-histidyl-

leusin dan captopril dibeli dari Sigma-Aldrich (St Louis, MO). Pepsin dan papain
yang dibeli dari Zhengzhou Jinde Kimia SCI-Tech Company (Provinsi Henan, Cina).
2.2. hewan
SHRs disediakan oleh Vital River Eksperimental Layanan Hewan (Beijing, China).
Wistar tikus galur dibeli dari Pusat Obat Baru Evaluasi Universitas Shandong
(Certifi- cate No. SKXK. 20.030.004, Jinan, China), acclimatised selama 1 minggu
sebelum eksperimen dengan chow laboratorium dan tekan ad libitum air, dan
dipelihara di bawah dikendalikan kondisi pada 24 1 C, kelembaban 50 10%,
dan 12/12 h cahaya / siklus gelap. Semua prosedur yang sesuai ketat dengan
undang-undang PR China pada penggunaan dan perawatan hewan laboratorium
dan dengan pedoman yang ditetapkan oleh Institut Hewan Eksperimental
Universitas Shandong, dan telah disetujui oleh komite etik universitas.
2.3. Persiapan hidrolisat enzimatik
R. esculentum dicuci dengan air tiga kali, untuk menghilangkan garam dan
kotoran lainnya. Sebuah hidrolisis dua langkah dari R. esculentum dilakukan
menurut laporan kami sebelumnya dengan beberapa modifikasi (Zhang et al.,
2010). protein kasar diperoleh dengan pencampuran dan grinding, dan kemudian
tersebar dalam air suling pada rasio 1: 7,5, dengan pH disesuaikan dengan 3,0
dengan 1 M HCl. Protein kasar dicerna dengan 2% (b / b dari total substrat)
pepsin (EC 3.4.23.1, 50.000 U / g) selama 3 jam pada 37 C, dan kemudian
hidrolisat itu disesuaikan dengan pH 5.0 dengan 1 M NaOH, diikuti oleh
penambahan papain (EC 3.4.22.2, 90.000 U / g) untuk campuran pada
konsentrasi 6%. Papain hidrolisis dilakukan pada 50 C selama 1 jam. Pada akhir
pengobatan, enzim tersebut tidak aktif dalam bak air di 100 C selama 10 menit.
materi dicerna disentrifugasi pada 4000 rpm / min selama 15 menit, dan
kemudian ultrafiltered dengan hidrofilik 2000 Da cut-off membran (Anhui PLUM
Membran Technology Co, Ltd), untuk menghasilkan fraksi protein dengan massa
molekul rendah dari 2000 Da . Berat molekul di bawah 2000 Da serapan dari
hidrolisat dihilangkan garamnya dengan peralatan nanofitration desalinasi (Anhui
PLUM Membran Technology Co, Ltd), freezedried dan disimpan pada 20 C
sebelum digunakan (RPH).
2.4. komposisi asam amino
Analisis asam amino dari RPH ditentukan mengikuti metode Adeyeye (2009)
dengan beberapa modifikasi kecil. Sekitar 30 mg RPH ditimbang dan dimasukkan
ke dalam ampul kaca. Tujuh mililiter 6 M HCl ditambahkan dan oksigen diusir
oleh memompa gas nitrogen ke dalam sampel. The ampul kaca disegel dengan
api Bunsen dan dimasukkan ke dalam oven pada suhu 110 C selama 22 jam. The
ampul dibiarkan dingin, dan material yang dihasilkan disaring untuk
menghilangkan humins. Filtrat kemudian diuapkan sampai kering pada 40 C di
bawah vakum dalam evaporator rotary. Setiap sampel dilarutkan dengan 3 ml
dapar asetat (pH 2.0) dan disimpan dalam botol plastik di freezer 20 C. analisis
asam amino dilakukan dengan menggunakan Technicon Sequential multisample
(TSM) Asam Amino Analyser (Technicon Instruments Corporation, New York, NY)

dengan kromatografi pertukaran ion (IEC) (FAO / WHO, 1991). Periode analisis
adalah 80 menit untuk masing-masing sampel. Laju aliran gas adalah 0,50 ml /
menit pada 60 C dengan reproduksi konsisten dalam 3%. Ketinggian bersih
masing-masing puncak yang dihasilkan oleh perekam grafik dari TSM (masingmasing mewakili asam amino) diukur dan dihitung. Data yang dilaporkan adalah
rata-rata dua penentuan. Norleucine digunakan sebagai standar internal.
2.5. Penentuan ACE aktivitas penghambatan in vitro
Efek antihipertensi dari hidrolisat protein biasanya ditentukan berdasarkan
tingkat ACE inhibitor atau nilai IC50. Tingkat ACE inhibitor yang lebih tinggi atau
nilai IC50 yang lebih rendah menunjukkan aktivitas antihipertensi kuat. Tingkat
penghambatan ACE ditentukan berdasarkan persentase yang lebih rendah dari
daerah puncak asam hipurat, menggunakan metode HPLC disesuaikan (Cushman
& Cheung, 1971). Sebuah kolom Kromasil 100-C18 (4,6 250 mm, ukuran partikel
5 lm) dan L-2400 UV Detector (HITACHI L-2400, Jepang) yang digunakan dalam
sistem HPLC (HITACHI L-2000). solusi RPH pertama kali diencerkan 10 kali lipat
menggunakan pH 8,3 100 mM borat buffered saline (BBS). Pengencer (20 ll)
direaksikan dengan 10 ACE ll dalam bak air pada 37 C selama 5 menit, kemudian
200 ll 5.0 mM Hippuryl-Nya-Leu garam asetat pada 37 C selama 30 menit, dan
akhirnya reaksi diakhiri dengan penambahan 200 ll dari 1 M HCl dan 170 ll BBS.
Sebuah kosong juga disusun dengan menggunakan prosedur di atas tetapi
pengencer digantikan oleh 20 ll 100 mM BBS pada pH 8,3. Fase gerak yang
pelarut A, terdiri dari asam asetat / air suling (0,5: 99,5, v / v) dan pelarut B,
100% asetonitril. Sebelum analisis HPLC, masing-masing sampel disaring melalui
0.22- lm filter. Analisis HPLC dilakukan dengan menggunakan 20 ll sampel dan
fase gerak dari A: B (35:65) pada laju alir 1 ml / menit, UV detektor panjang
gelombang 228 nm, dan suhu deteksi 25 C. Tiga ulangan untuk setiap sampel
dilakukan. Tingkat ACE inhibitor (%) dihitung menggunakan persamaan berikut: R
DDA BTH = ATH 100% di mana R adalah tingkat ACE inhibitor (%), A adalah
luas puncak asam hipurat dalam kosong, dan B adalah puncak daerah asam
hipurat di pengencer. nilai IC50 (mg / ml) didefinisikan sebagai konsentrasi
sampel ketika tingkat penghambatan ACE yang mencapai 50%.
2.6. efek antihipertensi akut di SHRs
SHRs laki-laki berusia 10-15 minggu dan berat 250-300 g, yang digunakan dalam
penelitian ini. RPH (200 mg / kg, 400 mg / kg dan 800 mg / kg) dilarutkan dalam
2,0 ml air suling yang diberikan secara oral dengan intubasi lambung. air suling
menjabat sebagai kontrol negatif, dan captopril (50 mg / kg, Qilu Pharmaceutical
Co Ltd, Provinsi Shandong, Cina), inhibitor ACE dikenal, menjabat sebagai kontrol
positif. Tekanan darah sistolik (SBP) dari tikus diukur dengan metode ekor cuff
(Oh, Han, Wang, & Lee, 2007), sebelum administrasi dan 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 dan 8
jam setelah pemberian menggunakan alat ekor-cuff (NO. ZH0099 Non-Invasif
monitoring System Tekanan Darah, Huaibei, Cina). Denyut jantung (HR)
ditentukan pada waktu yang sama. Sebelum pengukuran, SHRs disimpan pada
37 C selama 10 menit untuk membuat denyutan arteri ekor terdeteksi. Untuk
menjamin keandalan pengukuran, tikus terbiasa prosedur satu minggu sebelum

percobaan. Perubahan SBP dihitung sebagai perbedaan antara nilai rata-rata dari
sepuluh pengukuran diperoleh sebelum dan setelah pemberian. Hasilnya
dinyatakan sebagai nilai mean SD (standar deviasi) selama minimal 8 tikus,
dan data dianalisis dengan ANOVA satu arah.
2.7. efek antihipertensi kronis di SHRs
SHRs dengan SBP lebih tinggi dari 175 mm Hg yang digunakan dalam penelitian
ini. Lima puluh SHRs sama-sama secara acak dibagi menjadi lima kelompok:
kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif dan tiga kelompok eksperimen
(menggunakan rendah, menengah dan tinggi dosis RPH). Hewan-hewan dalam
kelompok kontrol negatif diberikan secara oral dengan 2,0 ml air suling sekali
sehari, dan pada kelompok kontrol positif yang diberikan secara oral dengan
kaptopril dengan dosis 50 mg / kg. Tiga kelompok eksperimen menerima RPH
lisan dilarutkan dalam 2,0 ml air suling pada dosis 200, 400 dan 800 mg / kg
berat badan sekali sehari. Waktu administrasi eksperimental berlangsung selama
5 minggu pada semua kelompok, SBPs, HR dan berat badan diukur mingguan.
Untuk mengukur SBP, SHRs yang prewarmed pada 37 C selama 10 menit di
kandang menahan dalam kotak pemanasan. SBP diukur dengan metode tailcuff
seperti dilaporkan sebelumnya (Oh et al., 2007). Setiap hasil yang rata-rata dari
10 ulangan. Tikus diizinkan untuk tengok ke prosedur ini minimal 1 minggu
sebelum eksperimen.
2.8. efek Antihyperlipidaemic pada tinggi lemak hiperlipidemia diet-induced
Tikus Albino jantan Wistar regangan berat 150-200 g yang digunakan dalam
penelitian ini. Komposisi diet tinggi lemak adalah sebagai berikut: 18% kasein,
20% minyak kedelai, campuran garam 4%, 3% selulosa, dan 55% pati jagung.
Metode yang dijelaskan oleh Ghule, Ghante, Saoji, dan Yeole (2009) dipekerjakan
dalam penelitian ini. Tujuh puluh dua hewan sama-sama dibagi dalam enam
kelompok. Awalnya, mereka semua makan dengan diet chow selama satu
minggu sebagai periode untuk aklimatisasi. Setelah aklimatisasi, hewan dalam
kelompok I diberi makan dengan diet chow seluruh studi sebagai kontrol normal,
dan hewan dalam kelompok II-VI diberi makan dengan diet tinggi lemak selama
15 hari sebagai periode induksi. Selanjutnya, periode induksi diikuti oleh
pemberian oral 30-hari, di mana tikus terus menerus diberi makan dengan diet
tinggi lemak bersama dengan perlakuan yang berbeda. Hewan di kelompok saya
menerima diet normal saja; hewan dalam kelompok II diberikan secara oral
dengan garam sebagai lemak tinggi kelompok kontrol diet; hewan dalam
kelompok VI yang diberikan secara oral dengan atorvastatin suspensi (10 mg /
kg Hubei Sibao Pharmaceutical Co Ltd) sebagai kelompok kontrol positif; dan
hewan dalam kelompok III, IV dan V diberikan dengan RPH oleh gavage lisan
pada dosis 200, 400 dan 800 mg / kg selama 30 hari, masing-masing. Darah
ditarik dari pleksus retroorbital tikus di bawah eter anestesi ringan pada hari 0
(sebelum memulai induksi hiperlipidemia), Hari 15 (akhir periode induksi) dan
Hari 45 (akhir periode intervensi RPH). Hewan-hewan dipuasakan selama 18 jam
sebelum penarikan darah. Darah dikumpulkan dari bola mata dan disentrifugasi
untuk serum terpisah untuk estimasi profil lipid. Serum kolesterol total (TC),

trigliserida (TG) dan high-density lipoprotein kolesterol (HDL-C) tingkat dianalisis

dengan metode kolorimetri enzimatik (Spectra MR, DYNEX Technologies Inc,
Chantilly, VA) menggunakan kit yang tersedia secara komersial (dibeli dari
Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, Cina).
2.9. Analisis statistik
Data dinyatakan sebagai mean dan standar deviasi (SD) dari tiga penentuan
ulangan. Analisis varians (ANOVA) dilakukan dengan menggunakan software
Microcal Asal 6.0 (Microcal Software, Inc., Northampton, MA). nilai rata-rata
dibandingkan dengan menggunakan uji Tukey. P <0,05 dianggap signifikan
secara statistik.
3. Hasil dan Pembahasan
3.1. komposisi asam amino
Seperti yang ditunjukkan pada Tabel 1, tingkat tinggi Gly, Glu, Pro, Asp dan Ala
diamati di RPH. Dalam penelitian sebelumnya (Zhuang, Sun, & Li, 2010), Gly, Pro,
Glu, Ala dan Asp kaya di ACE fraksi penghambatan dari R. esculentum hidrolisat
kolagen. Hasil tersirat bahwa asam amino mungkin hadir dalam peptida
disiapkan dari hidrolisat R. esculentum. Gly, Glu, Pro, Asp dan Ala dari ACE
peptida hambat semua diamati pada banyak spesies laut lainnya, seperti rotifer
(DDTGHDFEDTGEAM) (Lee, Hong, Jeon, Kim, & Byun, 2009), teripang
(MEGAQEAQGD) (Zhao et al., Ta 2009), udang laut (IFVPAF) (Dia, Chen, Sun,
Zhang, & Zhou, 2006) dan ubur-ubur (IGDEPLANYL) (Morinaga et al., 2010).
Komposisi asam amino dari ACE peptida hambat telah diakui sebagai faktor
penting dalam memiliki ACE aktivitas penghambatan. hubungan aktivitasstruktur menunjukkan bahwa mengikat ACE yang sangat dipengaruhi oleh Cterminal urutan tripeptide substrat, dan diusulkan bahwa peptida, yang meliputi
asam amino hidrofobik pada posisi tersebut, adalah inhibitor poten (Lee et al.,
2009). Banyak didokumentasikan peptida ACE-inhibitor biasanya peptida pendek
dengan residu prolin pada akhir terminal karboksil. Juga, prolin dikenal tahan
terhadap degradasi oleh enzim pencernaan dan dapat lulus dari usus kecil ke
dalam sirkulasi darah di urutan peptida pendek (Korhonen & Pihlanto, 2006; Pan,
Luo, & Tanokura, 2005). Beberapa peptida ACE-inhibitor diisolasi dan dimurnikan
dari protein makanan mengerahkan fitur ini, seperti VPP dari susu (Hata et al.,
1996), GPP (Ma, Bae, Lee, & Yang, 2006) dari soba dan LAIPVNSP dari kedelai
(Kuba , Tana, Tawata, & Yasuda, 2005). Oleh karena itu hasil kami menunjukkan
bahwa ACE peptida penghambatan di RPH mungkin mengandung residu
hidrofobik C-terminal, terutama Pro dan Ala residu. Temuan ini akan terbukti
menjadi data yang bermakna untuk identifikasi struktural ACE peptida
penghambatan di RPH.
3.2. efek antihipertensi di SHRs
peptida bioaktif dapat dirilis oleh proteolisis enzimatik dari protein makanan dan
dapat bertindak sebagai potensi modulator fisiologis (Pihlanto-Leppl, 2001).
RPH menunjukkan aktivitas ACE-inhibitor potensial dengan nilai IC50 yang relatif

rendah dari 1,28 mg / ml, yang lebih tinggi daripada yang ditemukan dalam
fraksi retentat (IC50 = 5,65 mg / ml). Menurut penelitian sebelumnya (Huang,
Zhu, & Shen, 2006), efek antihipertensi mungkin disebabkan oleh ACE peptida
penghambatan dalam hidrolisat protein dengan berat molekul kurang dari 1000
Da. Oleh karena itu, 2000 Da cut-off membran hidrofilik digunakan untuk
memperoleh ACE peptida penghambatan dalam penelitian ini. Dalam studi akut,
SBP di SHRs diturunkan nyata setelah pemberian oral tunggal RPH (200, 400 dan
800 mg / kg). Penurunan maksimal dalam SBP dari SHRs diobati dengan dosis di
atas adalah 23,00 mm Hg, 27,34 mm Hg dan 30,41 mm Hg, masing-masing.
Tidak ada perubahan signifikan dalam HR diamati pada semua kelompok (Tabel
2). Dalam studi kronis, SBP umumnya lebih rendah dari 1 minggu percobaan
pada hewan diberikan RPH daripada di kontrol negatif. Dibandingkan dengan
kelompok kontrol negatif, ada penurunan yang signifikan dalam SBP dalam
kelompok RPH-diperlakukan setelah 5 minggu pengobatan berturut-turut.
Penurunan maksimal dalam SBP di SHRs diadministrasikan dengan 200, 400 dan
800 mg / kg adalah 31,42 mm Hg, 46,90 mm Hg dan 43,21 mm Hg, masingmasing (Tabel 3). Tidak ada perubahan signifikan dalam HR diamati dalam
pengobatan berturut-turut 5 minggu. Sebuah peningkatan yang stabil dalam
berat badan juga diamati pada SHRs (Tabel 3). Efek antihipertensi dari RPH in
vitro dan in vivo secara sistematis dievaluasi dalam penelitian ini. Nilai IC50 dari
RPH mirip dengan ACE aktivitas penghambatan beberapa hidrolisat protein
kasar, seperti Porphyra yezoensis (1,6 mg / ml) dan kuning telur (1,22 mg / ml)
(Qu et al, 2010;.. Yoshii et al, 2001). Kami berharap bahwa pemurnian tambahan
akan menghasilkan ACE kuat peptida hambat, mengetahui RPH yang merupakan
campuran terdiri dari banyak peptida dan konstituen lainnya. Dalam studi akut,
efek SBP penurun dalam kelompok dosis yang berbeda adalah kurang dari
captopril, dan efek antihipertensi adalah sementara. Fitur-fitur ini juga diamati
dalam penelitian lain sebelumnya (Je, Park, Jung, Park, & Kim, 2005; Miguel et al,
2009.). Meskipun pemberian oral kronis RPH bisa mengurangi SBP nyata, tidak
ada hubungan dosis-tergantung signifikan diamati antara tinggi dan menengahdosis kelompok selama periode percobaan. Ini mungkin sebagian disebabkan
oleh penghambatan memadai kegiatan ACE jaringan. Selain rennin sistem
angiotensin (RAS), banyak sistem lainnya (seperti sistem saraf otonom, sistem
endotelin, dan sistem oksida nitrat) juga berkontribusi terhadap kontrol tekanan
darah (Yoshii et al., 2001). Ada kemungkinan bahwa aktivasi kompensasi dari
sistem ini dapat mengurangi perbedaan antara tinggi dan menengah-dosis
kelompok dalam penelitian ini. Di atas semua, kami berspekulasi bahwa RPH itu
sebagian terlibat dalam RAS dan sistem kallikrein-kinin (KKS) untuk mengatur
tekanan darah. Baik HR atau berat badan berbeda antara kelompok. Temuan ini
tampaknya menyiratkan bahwa RPH tidak berpengaruh pada kondisi metabolik
kotor di SHRs. Efek antihipertensi dari RPH, bersama-sama dengan sedikit efek
pada kondisi fisik secara umum, berpotensi membuat RPH menjadi makanan
fisiologis fungsional.
3.3. Efek Antihyperlipidaemic di tinggi lemak tikus hiperlipidemia diet-induced
perubahan signifikan dalam TC serum, TG dan HDL-C yang diamati setelah 15
hari makan dengan diet tinggi lemak (Gambar. 1). TC meningkat dari 1,14 mM ke

2,62 mM, TG meningkat dari 0,38 mM menjadi 0,62 mM, dan HDL-C menurun
dari 1,33 mM menjadi 1,21 mM, menunjukkan bahwa model tikus
hyperlipidaemic cocok untuk penelitian ini. Efek dari RPH di TC serum, TG dan
HDL-C pada tikus hyperlipidaemic dievaluasi (Tabel 4). Administrasi RPH selama
30 hari dengan dosis 800 mg / kg dikurangi TC dan TG signifikan, dibandingkan
dengan kelompok kontrol diet tinggi lemak. Penurunan TG adalah sebanding
dengan yang dari atorvastatin standar positif. Selain itu, TG, tetapi tidak
kolesterol, juga menurun secara signifikan pada kelompok menengah-dosis (400
mg / kg RPH). Menariknya, HDL-C meningkat secara signifikan pada kelompok
lowdose (200 mg / kg RPH) setelah pengobatan 30 hari dibandingkan dengan
kelompok kontrol diet tinggi lemak. Namun, tidak berpengaruh signifikan
terhadap HDL-C diamati pada kelompok atorvastatin. Beberapa studi
menunjukkan bahwa peningkatan HDL-C dan penurunan TC dan TG dikaitkan
dengan penurunan risiko penyakit jantung (Harrison, Kathy, Hornig, & Drexler,
2003). Kebanyakan obat antihyperlipidaemic dapat mengurangi baik TC dan
tingkat TG signifikan (Wilson, 1990). Dalam penelitian ini, RPH secara signifikan
meningkatkan tingkat HDL-C dan penurunan tingkat TC dan TG. Ini merupakan
keuntungan penting dalam pencegahan dan pengobatan hiperkolesterolemia,
khususnya di kalangan orang Cina, yang hiperkolesterolemia prevalently
menyajikan dirinya sebagai lipoprotein kelainan (Hu, Yang, & Tong, 2005).
Hiperlipidemia
merupakan
faktor
risiko
penting
yang
menyebabkan
aterosklerosis dan penyakit kardiovaskular (Ghule et al., 2009). Ada bukti bahwa
ada hubungan yang signifikan antara hiperlipidemia, aktivasi RAS dan penyakit
aterosklerosis (Creager et al, 1992;. Pepme, 1996). Pada pasien dengan
aterosklerosis dan hiperlipidemia, disfungsi endotel koroner biasanya menyebar
dan mempengaruhi tonus vasomotor, aktivitas platelet, trombosis, fibrinolisis,
dan regulasi sel inflamasi. Angiotensin II, oksidan penting, mengubah mengikat
kolesterol-density lipoprotein-rendah (LDL-C) ke reseptor dan meningkatkan
penyerapan endotel LDL-C. Terapi dengan inhibitor ACE muncul untuk
menghilangkan efek tak diinginkan (Pitt, 1997). Selain itu, pengembangan dan
perkembangan hiperlipidemia juga terkait dengan kerusakan lipid peroksidasi
dan peningkatan kadar radikal bebas (Rodrigez-Porcel et al., 2001). Aktivitas
antihyperlipidaemic R. esculentum mungkin disebabkan penghambatan ACE dan
aktivitas antioksidan (Yu et al., 2006). Berpotensi, RPH mungkin memiliki aditif
atau efek sinergis pada perkembangan aterosklerosis.
4. Kesimpulan
Ditemukan dalam penelitian ini bahwa RPH memiliki ACE inhibitor, antihipertensi
dan kegiatan antihyperlipidaemic. Sebagai inhibitor ACE potensial, RPH berisi
tingkat tinggi Gly, Glu, Pro, Asp dan Ala. Single dan oral kronis RPH bisa
mengurangi SBP tanpa pengaruh signifikan terhadap HR dan berat badan.
Sementara itu, RPH juga dapat menurunkan TC dan TG dan meningkatkan HDL-C
di tinggi lemak tikus diet-makan. Faktor-faktor fungsional, yang memiliki efek
ganda pada antihipertensi dan antihyperlipidaemia, telah jarang dilaporkan. RPH
mungkin terbukti menjadi agen fungsional menjanjikan untuk pencegahan dan
pengobatan hipertensi, hiperlipidemia dan penyakit kardiovaskular lainnya.