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1.

PRUEBA DE COOMBS
La prueba de Coombs (tambin conocida como prueba de antiglobulina) es un examen
de sangre que se usa en inmunologa y hematologa
Fue descrita por primera vez por los cientficos: Rob Race, Arthur Morant, y Robin
Coombs (l por el cual la prueba era llamada) en 1945
Este anlisis puede detectar la presencia de anticuerpos en sueros que reaccionan con
antgenos en la superficie de los glbulos rojos (1) . Estos anticuerpos pueden fijarse a
los glbulos rojos y causar su destruccin prematura. (2) La adicin del reactivo
antiglobulina a los mismos ocasionar su aglutinacin. (3)
Hay dos tipos distintos de la prueba de Coombs: el directo y el indirecto. La prueba de
Coombs directa detecta anticuerpos ya unidos a la superficie de los glbulos rojos, y
la prueba de Coombs indirecta detecta anticuerpos libres que pueden reaccionar in
vitro con glbulos rojos que tienen antgenos especficos.

Ambas pruebas de Coombs emplean un antisuero llamado reactivo (suero) de Coombs,


que contiene anticuerpos de animales inmunizados dirigidos contra IgG, IgM,
y/o complemento humano. Estos anticuerpos se unen a los anticuerpos de los antgenos
que estn en la superficie de los glbulos rojos, causando aglutinacin de las
clulas. Esta aglutinacin observada corresponde a un resultado positivo, y la ausencia
de aglutinacin es un resultado negativo.

Equipamiento, locales, materiales y reactivos

1.1.

Centrfuga para tubos de mesa


Neveras de conservacin de sangre 4-6C
Aglutinoscopio.
Tubos de ensayo de13x100
Gradillas para tubos de ensayo
Jeringuillas de 10 o 20 mL
Agujas 20 o 21
Torundas
Ligaduras
Aplicadores de madera.
Anticoagulante EDTA o heparina
Alcohol al 70% o hibitane alcohlico
Suero de Coombs poliespecfico
Suero de Coombs monoespecfico anti IgG y anti C3d.
Solucin salina
COMMBS DIRECTO

Detecta los anticuerpos o componentes del complemento fijados in vivo en los


hemates de un paciente. (4) Muchas enfermedades y frmacos (quinidina,
metildopa y procainamida) pueden llevar a la produccin de estos anticuerpos.
Estos anticuerpos algunas veces destruyen los glbulos rojos y causan anemia. Esta
prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa
de anemia o ictericia. (5) Por ello, podemos aplicar dicha prueba al estudio de la
enfermedad hemoltica del recin nacido y de las anemias hemolticas, ya sean
autoinmunes o inducidas por frmacos y de las reacciones transfusionales (3)
Determina la existencia de glbulos rojos recubiertos con inmunoglobulinas y/o
complemento in vivo, en particular IgG y C3d (4)
APLICACIONES
o Enfermedad hemoltica del recin nacido
o Anemia hemoltica autoinmune
o Reaccin hemoltica post-transfusional
PROCEDIMIENTO: Combbs Directo
1 Lave tres veces los hemates del paciente con solucin salina fisiolgica.
2 Haga una suspensin de hemates lavados al 2-5 %.
3 Aada en un tubo debidamente rotulado dos gotas de la suspensin.
4 Aada dos gotas de Suero de Coombs poliespecfico.
5 Centrifugue un minuto a 1000 rpm.
6 Lea desprendiendo suavemente el botn sobre la lmpara aglutinoscopio.
1.2.

COOMBS INDIRECTO

Esta prueba consiste en buscar anticuerpos circulantes libres contra una serie de
glbulos rojos estandarizados. Esta prueba indirecta slo se usa rara vez para
diagnosticar una afeccin mdica y, con ms frecuencia, se utiliza para determinar
si una persona podra tener o no una reaccin a una transfusin de sangre. (5)
Determina la presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor
APLICACIONES
o Deteccin de anticuerpos irregulares
o Pruebas de compatibilidad
o Determinacin de fenotipos
o Identificacin y titulacin de anticuerpos
1.3.

COOMBS CRUZADO

El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes


politransfundidos, pacientes con antecedentes de reaccin post transfusional
hemoltica y a multparas para escoger sangre compatible.
PROCEDIMIENTO: Coombs indirecto y cruzado
1 Centrifugue la muestra de sangre 10 min a 3 000 rpm para obtener el suero
y decntelo en un tubo debidamente identificado.
2 Prepare una suspensin al 2-5 % con la mezcla de hemates O y en el caso
del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre a transfundir para
preparar la suspensin.
3 En un tubo debidamente rotulado aada dos gotas del suero y dos gotas de
la suspensin y mezcle bien.
4 Prepare un tubo control rotulado C+ (control positivo) y aada en l dos
gotas de la suspensin de hemates O y dos de suero hemoclasificador anti-D
y mezcle bien
5 Incube ambos tubos en un Bao de Mara a 37C por 30 minutos
6 Lave tres veces con solucin salina escurriendo totalmente el sobrenadante
del ltimo lavado.
7 Aada dos gotas de suero de Coombs poliespecfico a cada tubo.
8Centrifugue 1minuto a 1000 rpm. Lea desprendiendo suavemente el
botn en la lmpara aglutinoscopio.
1.4.

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

Si en la prueba de Coombs directo observa aglutinacin esto indica presencia de


anticuerpos y /o complemento unidos a los hemates in vivo, que actan contra
sus glbulos rojos, lo cual puede deberse a:

Anemia hemoltica autoinmunitaria sin otra causa

Leucemia linfoctica crnica u otro trastorno linfoproliferativo


Anemia hemoltica inducida por frmacos (muchos frmacos han sido
asociados con esta complicacin)
Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica del recin nacido)
Mononucleosis infecciosa
Infeccin por micoplasma
Sfilis
Lupus eritematoso sistmico u otra afeccin reumatolgica
Reaccin a transfusin como la ocasionada por unidades de sangre
cotejadas de manera impropia

Esta prueba tambin es anormal en algunas personas sin una causa clara,
especialmente entre los ancianos. Hasta el 3% de las personas que estn
hospitalizadas sin un trastorno sanguneo conocido tendrn un resultado
anormal en la prueba de Coombs directa.
Si en la prueba de Coombs indirecto se observa aglutinacin significa que
estamos en presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor por lo
que debe proceder al estudio e identificacin de l o los anticuerpos adquiridos.
Estos anticuerpos actuarn contra los glbulos rojos que el cuerpo asume como
extraos. Esto puede sugerir la presencia de:

Anemia hemoltica autoinmunitaria o inducida por frmacos


Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica)
Incompatibilidad sangunea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

Si en la prueba de Coombs cruzado se observa aglutinacin indica que estamos


en presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor por lo que las
unidades de sangre estudiadas que presenten este resultado no deben ser
transfundidas al paciente.

Referencias
1. PRUEBA DE COMMBS. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:
http://www.ecured.cu/Prueba_de_Coombs.
2. University of Marylan Medical Center. [Online].; 2014 [cited 2016 05 29.
Available from:
http://umm.edu/health/medical/spanishency/articles/prueba-de-coombs.
3. LINEAR CHEMICALS. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:
http://www.linear.es/ficheros/archivos/804_34100-C.pdf.
4. Santovenia AB, Campa JDdl, Prez MP. Manual de Prcticas Mdicas Hospital Hermanos Ameijeiras. [Online]. [cited 2016 05 29. Available
from:

http://www.sld.cu/galerias/pdf/sitios/hematologia/prueba_de_coombs.pdf.p
df.
5. CLINICA ADAM. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:
https://www.clinicadam.com/salud/5/003344.html.
6. Julia M, Guerra RES. REACTIVO ANTIGLOBULINA HUMANA. [Online]. [cited
2016 05 29. Available from:
http://www.drrondonpediatra.com/reactivo_antiglobulina_humana.htm.