FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS PANCASILA JAKARTA 2016
I.
JUDUL PERCOBAAN
Penetapan Kadar flavonoid total dari Extractum Orthosiphonis Folium
II.
TUJUAN PERCOBAAN Menetapkan kadar flavonoid total dari ekstrak daun kumis kucing dengan spektrofotometri UV-VIS
III.
DASAR PENETAPAN Sejumlah ekstrak daun kumis kucing ditimbang seksama setara dengan 200 mg simplisia dan di masukkan ke dalam labu alas bulat. Ditambahkan 1 ml larutan HMT, 20 ml aseton dan 2 ml larutan HCL dan dilakukan hidrolisis dengan cara direfluks selama 30 menit. Campuran di saring menggunakan kapas, filtrat yang di peroleh dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml. Residu di refluks kembali dengan 20 ml aseton selama 50 menit dan disaring, filtrate di campur kedalam labu tentukur 100 ml dan di tambahkan aseton sampai tanda. Diambil sejumlah 20,0 ml filtrate dan dimasukkan ke dalam corong pisah, ditambah 20 ml air dan di ekstraksi 3 kali, tiap kali dengan 15 ml etil asetat. Fase etil asetat di kumpulkan dan di tambah dengan etil asetat sampai 50,0 ml dalam labu tentukur. Ukur serapan dengan menggunakan spektrofotometer uv-vis pada panjang gelombang serapan maksimum lebih kurang 433nm dengan pembanding.
IV. TEORI a. Teori tentang simplisia Klasifikasi Divisio Subdivisio Kelas Ordo Familia Genus Species Nama daerah
Nama simplisia Uraian tumbuhan Tumbuh di dataran rendah dan daerah ketinggian sedang. Kecuali di Indonesia, ditemukan juga di Asia Tengah, Cina, kepulauan Pasifik dan Australia. Terna, tumbuh tegak, pada bagian bawah berakar dibagian bukubukunya, tinggi sampai 2m, batang bersegi empat agak beralur, berambut pendek atau gundul. Helai daun berbentuk bundar telur lonjong, lanset, bundar telur atau belah ketupat yang dimulai dari pangkalnya, lancip, atau tumpul, panjang 1cm sampai 10cm, lebar 7,5mm sampai 5cm; urat daun
sepanjang tepi rambut tipis atau gundul, kedua permukaan berbintik-bintik
karena adanya kelenjar yang jumlahnya sangat banyak, panjang tangkai 3cm. Perbungaan berupa tandan yang keluar diujung cabang, panjang 7cm sampai 29cm, ditutupi oleh rambut pendek berwarna ungu dan kemudian menjadi putih; gagang berambut pendek dan jarang, panjang 1mm sampai 6mm. Kelopak bunga berkelenjar, urat dan pangkal berambut pendek dan jarang sedangkan di bagian yang paling atas gundul. Bunga bibir, mahkota berwarna ungu pucat atau putih, panjang 13mm sampai 27mm, dibagian atas ditutupi oleh rambut pendek yang berwarna ungu atau putih, panjang tabung 10mm sampai 18mm, panjang bibir 4,5mm sampai 10mm, helai bunga tumpul, bundar. Benang sari lebih panjang dari tabung bunga dan melebihi bibir bunga bagian atas. Buah geluk berwarna coklat gelap, panjang 1,75mm sampai 2mm. Khasiat Berkhasiat sebagai antiradang, peluruh kencing (diuretik), menghilangkan panas dan lembap, serta menghancurkan batu saluran kencing. Kandungan kimia Orthosiphon glikosida, zat samak, minyak atsiri,minyak lemak, saponin, garam kalsium, mioinositol, dan sinensetin. Kalium berkhasiat diuretik dan pelarut batu saluran kencing, sinensetin berkhasiat antibakteri. Mengandung minyak atsiri 0,02-0,06% terdiri dari 60 macam sesquiterpens dan senyawa fenolik. 0,2% flavonoid lipofil dengan kandungan utama sinensetin, eupatorin, skutellarein, tetrametil eter, salvigenin, rhamnazin; glikosida flavonol, turunan asam kafeat (terutama asam rosmarinat dan asam 2,3-dikaffeoil tartarat ), metilripariokromen A 6-(7,8-dimetoksi-2,2dimetil [2H,1-benzopiran]-il), saponin serta garam kalsium (3%) dan myoinositol.4,9,13) Hasil ekstraksi daun dan bunga Orthosiphon stamineus ditemukan metilripariokromen A atau 6-(7,8-dimetoksietanon).
Indikasi Infeksi ginjal akut dan kronis, infeksi kandung kencing (sistitis), kencing batu, sembab karena timbunan cairan di jaringan (edema), kencing manis (diabetes melitus), tekanan darah tinggi (hipertensi), rematik (gout) Persyaratan simplisia Daun kumis kucing adalah daun dan pucuk Orthosiphon aristatus (BI.) Miq., dikumpulkan pada waktu berbunga. Pemerian: bau aromatik, rasa agak asin, agak pahit dan kelat.
b. KLT Densitometer Pada perkembangan metode Kromatografi saat ini pemakaian "Thin Layer Chromato Scanner" yang lebih dikenal dengan nama densitometer makin banyak dipakai secara luas oleh peneliti/ilmuwan. Densitometri adalah metode analisi instrumental yang berdasarkan interaksi radiasi elektromagnetik dengan analit yang merupakan bercak atau noda pada lempeng KLT. Interaksi radiasi elektromagnetik dengan noda pada lempeng KLT yang ditentukan adalah adsorpsi, transmisi, pantulan (refleksi) pendar fluor atau pemadaman pendar fluor dari radiasi semula. Keunggulannya adalah dititikberatkan untuk analisis analit-analit dengan kadar sangat kecil yang perlu dilakukan pemisahan terlebih dahulu dengan KLT. Metode ini yang banyak diguanak dalam analisis kualitatif maupun kuantitatif di bidang farmasi terutama di bidang analisis obat bahan alam. Kromatografi Lapis Tips (KLT) merupakan metode pemisahan komponen-komponen atas dasar perbedaan adsorpsi atau partisi oleh fase diam di bawah ngerakan pelarut pengembang/pengembang campur.
Fase Diam Bahan padat pada penyangga : pelat elas/logam atau plastik dengan ketebalan 0,25 mm. Fase diam yang banyak dipakai : silika gel yang dicampur CaSO4 ; adsorben lain yang juga banyak dipakai : alumnia, kieselguhr, celite, serbuk selulose, serbuk poliamida, kanji dan sephadex. Jenis fase diam : sama seperti pada KCKT dikenal beberapa macam sifat polaritas. Silikal gel dikenal sebagai fase diam polar, yang dapat dibuat menjadi non polar (RP = Reversed Phase) setelah dilakukan pengikatan hidroksilnya dengan : C2, C8, atau C18. Mekanisme pemisahan adalah : adsorpsi,partisi, penukar ion atau fase terbalik (adsorpsi-partisi). Apabila sampel bersifat non polar maka pelarut pengembangnya non polar. Sedangkan bila sample bersifat polar, maka pelarut pengembangnya bersifat polar. Ukuran fase diam 1-25 million dalam keadaan uniform/seragam, akan menghasilkan pemisahan baik dan aliran fase gerak cepat dan merata. Pada prinsipnya pemisahan KLT diusahakan dilakukan dalam keadaan netral.
Profil Kromatogram Kromatogram KLT akan tampak setelah visualisasi dengan cara fisika atau kimia. Bila proses pemisahan baik akan menghasilkan bercak atau noda bulat. Bila pemisahan kurang sempurna bercak atau noda berekor, penyebabnya antara lain : pemilihan fase gerak yang tidak tepat dan ketidakjenuhan chamber. Penotolan sample dengan mikropipet dan selama eluasi suhu harus dijaga, karena kenaikan suhu berpengaruh kepada Rf.
Faktor retardasi : Rf adalah jarak migrasi komponen (bercak) dibagi jarak migrasi fase gerak
Rf = dR / dM = hRf / 100
Desintometri S. Levi dan R Reisfeld telah mengangkat metode densitometri ke tingkat analisis kuantitatif ultra mikro. Keduanya telah berhasil menentukan antara lain testosterone dalam cairan biologis pada rentang kadar 1-250 ng, dan kolesterol 4 -150 ng dengan pendar fluor pada noda (kromatogram) KLT. Prinsip penentuan dengan metode desintometri hampir sama dengan metode spektrofotometri. Penetuan kadar analit yang dikorelasikan dengan area / luas noda pada KLT akan lebih terjamin kesahihannya dibanding dengan metode KCKT atau KGC, sebab area noda kromatogram diukur pada posisi diam atau "zig-zag"menyeluruh.
V.
ALAT DAN BAHAN
Alat : o o o o o o o o o o o
Labu Tentukur 50 ml Erlenmeyer Timbangan analitik Labu tentukur 100 ml Kaca Arloji Kapas Kompor Corong pisah Pipet volum Beaker Glass Spektrofotometer uv-vis Shimadzu 1700
Flavonoid Total (%) : 9.9 x 10-4 (0.3314-0.1674) X 2.5 X 100% = 0,35%
0.7227-0.1449 VIII.
0.2004
PEMBAHASAN 1. Flavonoid total yang terukur merupakan sumbangan dari golongan flavon dan flavonol yang terdapat pada ekstrak, karena hanya kedua kelompok inilah yang mampu membentuk kompleks stabil dengan AlCl3. 2. Penetapan flavonoid total pada praktikum ini menggunakan pereaksi geser dengan menggunakan pereaksi geser AlCl3. 3. Panjang gelombang maksimal yang ditentukan yaitu setelah mengalami pergeseran, karena pada metode ini tidak melakukan isolasi jadi setelah terjadi pergeseran hanya flavonoid saja yang terukur. 4. Hidrolisis dilakukan untuk memecah glikosida dalam ekstrak menjadi aglikon dan glikon flavonoid. Aglikon flavonoid disari oleh etil asetat.
IX.
KESIMPULAN
Kadar flavonoid total di dalam ekstrak dari daun kumis kucing (Orthosiphon aristatus) adalah 0,35%
XII. DAFTAR PUSTAKA
Markham. K.R.1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid . Bandung. Penerbit ITB Farmakope Herbal Indonesia . 2008. Edisi 1. Departemen Kesehatan Republik Indonesia Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Materia Medika Indonesia Jilid III.1979
Dokumen Serupa dengan Penetapan Kadar Flavonoid Total Orthosiphon
![Penentuan Kadar Flavonoid Total Dan Aktifitas Antioksidan Dari Daun Dewa (Gynura Pseudochina [Lour] Dc) Dengan Spektrofotometer Uv-Visibel](https://imgv2-2-f.scribdassets.com/img/document/148348590/149x198/dede0baab2/1445962780?v=1)
