M TODO 9215-B do Standard Methods for the Examination of

Water and Wastewater

5.1 PRINCPIOS DO MTODO

POUR PLATE OU PROFUNDIDADE
A tcnica de inoculao em profundidade baseia-se na inoculao de volumes
adequados da amostra em placas de Petri, com posterior adio do meio de
cultura adequado. Aps perodo de incubao, os microrganismos viveis
presentes na amostra, que possam se desenvolver nas condies determinadas,
formaro colnias que sero contadas com o auxlio de um contador de colnias.

5.2. - BACTRIAS HETEROTRFICAS

Contagem de heterotrficos em placa, formalmente conhecida Como Contagem
Padro em Placa, um procedimento para estimar o nmero de Bactrias
Heterotrficas vivas em gua e medir as mudanas durante tratamento de gua e
distribuio ou em piscinas.

5.2.1- Pour Plate 1.

2.

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9.

-- (mtodo 9215 B do Standard Methods)

Desembale as placas de Petri e identifique-as, fazendo duplicatas.

Segure o frasco da amostra pelo corpo dele, evitando tocar em seu gargalo.
Com a outra mo, retire a tampa, evitando tocar seu interior. Deposite a tampa
sobre a bancada do fluxo ou sobre outro frasco, com a parte interna voltada
para cima.
Pegue uma pipeta de 2 mL e a introduza no frasco da amostra evitando imergi-la
mais que 2,5 cm do nvel superior da amostra.
Com a mo livre, abra as placas de Petri o suficiente apenas para introduzir a
pipeta em um ngulo de 45 e descarregue 1 mL da amostra (gua) na placa.
Realizar em duplicata.
Esse volume de amostra sem diluio j leva em conta o rendimento de 30 a
300 COLNIAS/placa. Se houver suspeita de que a amostra exceder 300
colnias, proceda diluio da amostra utilizando 5 mL da amostra em 45 mL
de gua Tamponada ou gua-Peptona Estril. .
Saia do fluxo abaixe a tampa de vidro e pegue o meio PCA ou R2A agar
previamente fundido e resfriado 45C. Sanitize o frasco com aplicao de
soluo alcolica 70% e o coloque no fluxo.
Verta o meio sobre a placa (~ 15-20mL) contendo 1 mL de amostra, feche-a e
homogeneze-a com movimentos rotatrios e em sentido de oito. Espere
solidificar para invert-la.
Incube-as em estufa bacteriolgica a 36 2 por 48 horas. Findo este perodo
proceda leitura das placas utilizando o contador de colnias.
LEITURA DOS RESULTADOS: Faa a mdia das duplicatas e expresse o resultado
em UFC/mL.