1)Explique mediante un esquema la importancia de

C3 en el sistema de complemento.

2) Qu sucede cuando en la va alternativa del

complemento existe deficiencia de Factor B?
La deficiencia del factor D es de herencia autosmica recesiva. Los
pacientes con esta deficiencia presentan una elevada susceptibilidad a
padecer de infecciones causadas por Neumococcus, Haemophilus y
Staphilococcus , as como infecciones severas
con Neisseria meningitidis . Estos pacientes presentan una capacidad
disminuida para opsonizar determinados microorganismos
como Escherichia coli y Neisseria meningitidis que sern fagocitados
posteriormente por los neutrfilos, que forman parte de la respuesta
inmune innata. Esta deficiencia se caracteriza molecularmente por
mutaciones en el gen que codifica para este factor, el cual est ubicado
en el cromosoma 19. Estas mutaciones provocan la formacin de un
codon de parada prematuro o un cambio de codon.

3. Cul es la relacin existente entre el dficit de C4 y

la activacin de C3?
Activacin de C1
C1 es una protena multi-subunitaria que contiene tres diferentes protenas (C1q, C1r y
C1s), se une a la regin Fc de las molculas de anticuerpos IgG e IgM que han reaccionado
con el antgeno. El enlace de C1 al anticuerpo no ocurre si no est formado el complejo
antgeno-anticuerpo, adems el enlace de C1 al anticuerpo requiere de iones de calcio y
magnesio. (N.B. En algunos casos C1 puede enlazarse a agregados de
inmunoglobulinas [como IgG agregada] o a la superficie de ciertos patgenos an en
ausencia de anticuerpos). La unin de C1 a los anticuerpos es va C1q la cual debe enlazar
a por lo menos dos molculas de anticuerpos para permitir su fijacin firme. La unin de
C1q resulta en la activacin de C1r que a su vez activa C1s. El resultado es la formacin de
una C1qrs activada, la cual es una enzima que rompe a C4 en los fragmentos C4a y C4b.
Activacin de C4 y C2 (generacin de C3 convertasa)
El fragmento C4b se une a la membrana y el fragmento C4a se libera al medio ambiente.
La C1qrs activada tambin acta sobre C2 y lo degrada a C2a y C2b. C2a se une a la
membrana en asociacin con C4b, y C2b es liberado al medio ambiente. El complejo
C4bC2a resultante es una C3 convertasa, que rompe a C3 en C3a y C3b.
Activacin de C3 (generacin de C5 convertasa)
El fragmento C3b se une a la membrana en asociacin con C4b y C2a, y el C3a es liberado
al microambiente. El complejo C4bC2aC3b resultante es una C5 convertasa. La generacin
de C5 convertasa marca el final de la va clsica.

Muchos de los productos de la va clsica tienen actividades biolgicas importantes que

contribuyen a las defensas del cuerpo. Algunos de estos productos pueden tambin tener
efectos dainos si se producen de manera no regulada. La Tabla 2 resume las actividades
biolgicas de los componentes de la va clsica.

4) Explique el fundamento o principio de ensayo

CH50.
Explicacin del ensayo
La cascada del complemento, integrada por aproximadamente 20
protenas sricas, juega un papel importante en el sistema
inmunolgico. La actividad del complemento en muestras de suero
aporta informacin importante para el diagnstico de varias
enfermedades. Clnicamente, la actividad del complemento es un
indicador directo de las anormalidades del sistema del complemento, a
diferencia de los componentes inmunoreactivos del sistema. La actividad
del complemento puede ser relacionada con las fases activas del lupus
eritematoso sistmico, artritis reumatoide, vasculitis-crioglobulinemia,
algunas nefritis e inmunodeficiencias congnitas.1 Hasta el momento, el
ensayo ms utilizado para el complemento total ha sido el basado en la
hemlisis mediada por complemento de hemates sensibilizados con
anticuerpos.2 En este mtodo, se necesitan diluciones apropiadas del
suero para medir las lisis de las clulas indicadoras. Se ha desarrollado
un mtodo sencillo que no requiere diluciones del suero.3 Sin embargo,
ambos mtodos son complicados y laboriosos, y los reactivos son
inestables debido a la utilizacin de hemates. Adems, los sistemas
hemolticos son dificilmente automatizables debido a la inestabilidad de
las suspensiones de hemates. Los liposomas, integrados por lminas
concntricas de bicapas lipdicas separadas por espacios acuosos, han
sido ampliamente utilizados en el estudio del dao producido en las
membranas celulares por el sistema de complemento.4,5 Se haba
descrito anteriormente un ensayo homogneo para la actividad total del
complemento basado en la inmuno lisis de los liposomas.6 El grado de
lisis, se determinaba a travs de la actividad de la fosfatasa alcalina
englobada , y el procedimiento, el cual se realizaba de forma manual, no
poda aplicarse a los autoanalizadores. Este mtodo requera la adicin
de varios reactivos a los tubos de reaccin, un tiempo de reaccin
prolongado y la utilizacin de anticuerpos unidos a los liposomas, lo cual
podra provocar la agregacin y sedimentacin de los liposomas en el
reactivo preparado. Recientemente, hemos desarrollado un ensayo

homogneo automatizable basado en liposomas para la determinacin

de la actividad de complemento total en suero. Se emplea una poblacin
homognea de liposomas de pequeo tamao (200 nm), que
proporcionan una dispersin estable, y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
(G6PDH, EC 1.1.1.49) como enzima englobada (el pH ptimo de la
G6PDH es el neutro a diferencia del de la fosfatasa alcalina. Utilizando
estos liposomas, hemos desarrollado un ensayo completamente
automtico para la determinacin de la actividad total del complemento.
Principio del mtodo
Cuando la muestra se mezcla con los liposomas y el substrato, los
anticuerpos presentes en el reactivo se combinan con el dinitrofenil
(DNP) incorporado a los liposomas. El complejo antgeno-anticuerpo
activa el complemento presente en la muestra del paciente. El
complemento activado rompe la membrana del liposoma. El enzima,
G6PDH contenido en el liposoma, reacciona con el NAD y la glucosa-6fosfato (G6P) presentes en el reactivo. Durante la reaccin enzimtica el
NAD se reduce a NADH, incrementndose la absorbancia a 340 nm. El
incremento de absorbancia es proporcional a la actividad de
complemento en la muestra.

5. Cmo acta la properdina? Esquematice

)sta va se activa de manera ms temprana que la va clsica. Es independiente de complejos
antgeno-anticuerpo, lo cual le permite ser catalogada como una va intrnsecamente innata y
vigilante de la inmunidad dado que puede actuar en ausencia de inmunoglobulinas. Intervienen en
ella las protenas C3, factor B, factorD y properdina.
La va clsica involucra un paso llamado de amplificacin, donde el complejo 'Convertasa de C3'
genera C3a y C3b en cantidad. Este C3b interactuar opsonizando clulas blanco o agentes
patgenos. Tambin existe la posibilidad de que las protenas C3 sufran una hidrlisis espontnea
sin necesidad de que la va clsica est activada (recordar que esta va acta independientemente
de la presencia de complejos antgeno-anticuerpo).
Por lo tanto la activacin puede ser mediante dos mecanismos:
1.
Activacin secundaria a la actividad de la va clsica, que genera C3a y C3b.
2.

Por hidrlisis espontnea de C3 que forma C3a y C3b.

El C3b generado por cualquiera de las dos vas, se unir en la membrana a antgenos extraos.
Una vez afianzado a stos puede servir como sitio de unin del Factor soluble B.

El factor B unido a C3b genera el complejo C3bB que se encuentra estabilizado por magnesio y
que sufre un clivaje por parte de otro factor llamado Factor D. Dicho clivaje produce a partir del
factor B los productos Ba y Bb, el primero difunde hacia el plasma y el segundo queda anclado en
el complejo formandoC3bBb.
El complejo C3bBb funciona como Convertasa de C3 amplificando la reaccin tal como en la va
clsica. Tiene por sustrato a C3 generando mayor cantidad de C3ay C3b. Pero para que el
complejo C3bBb funcione requiere de la unin a una protena srica llamada Properdina.
Cuando la properdina se une al complejo, ste se estabiliza prolongando su vida media hasta
unos 30 minutos.
El C3b generado por el complejo C3bBb se une a este mismo constituyendo una molcula ms
grande llamada C3bBb3b, complejo anlogo al C4b2a3b de la va clsica tambin llamada
'Convertasa de C5'
C3bBb3b toma por sustrato a C5 generando C5a y C5b. C5a difunde hacia el plasma y C5b se fija
a la membrana de la clula blanco para continuar con el desenlace comn a todas las vas con la
formacin del complejo de ataque a la membrana. (C6 - C7 - C8 - C9).

6) Explique la funcin de la vitronectina.

La vitronectina es una abundante glicoprotena que se encuentra en el plasma sanguneo
y extracelular matriz. Se ha especulado sobre el papel de la vitronectina en la homeostasis y la
formacin de tumores.

Estructura
La vitronectina es una glicoprotena de 75 kDa que se compone de 459 residuos
de aminocidos cidos. Aproximadamente un tercio de la de peso molecular de la protena se
compone de hidratos de carbono. De vez en cuando, la protena se escinde despus el
residuo nmero 379 (arginina) para producir dos vitronectinas de cadena, donde las dos
partes estn conectadas por un disulfuro de bonos.Todava no se ha determinado
experimentalmente a su alta estructura resolucin.
La protena se compone de tres dominios de la protena:

Dominio N-terminal: El dominio somatomedina B (1-39)

Dominio central: con homologa a la hemopexina (desde 131 hasta 342)

Dominio C-terminal: tambin con homologa a la hemopexina (347-459)

Algunas estructuras han sido reportados para el dominio N-terminal. Inicialmente, la protena
cristalizada en complejo con uno de sus socios fisiolgicos: el inhibidor del activador del
plasmingeno tipo 1 del activador (PAI-1), y la estructura de este complejo se ha
resuelto [1]. Posteriormente, dos grupos informaron estructuras de dominio obtenidos por
Proceso de protones por resonancia magntica nuclear [2] [3].
Modelos de homologa se han producido para los dominios C-terminales y central.

Biologa
El dominio somatomedina B se une al tipo 1 inhibidor del activador del plasmingeno y la
estabiliza. Por lo tanto, vitronectiva sirve para regular la proteolisis para la activacin del
plasmingeno. Adicionalemnte, vitronectina es un componente de plaquetas y por tanto es
involucrado en el proceso de homeostasis. La vitronectina contiene una secuencia RGD que
sirve como sitio de unin integrinas de membrana, que sirve para acorar clulas a la matriz
extracelular. La somatomedina rea de Poltica B interacta conuroquinasa receptor: esta
interaccin ha sido implicado en la migracin celular y la seal de transduccin. Los altos
niveles plasmticos de PAI-1 y el receptor de uroquinasa se relacionan con progntisticos
negativos en pacientes con cncer. La adhesin celular y la migracin estn directamente
implicados en la metstasis del cncer, proporcionando un mecanismo explicativo de la
observacin anterior.