Gibson Assembly

One Step Isothermal DNA Assembly

Meutia Diva Hakim

Mhd Fauzi Ramadhani Nasution
Habibah Tulillah
Clarissa Maretha Sulaiman

10612006
10612025
10612032
10612064

Latar Belakang
Ditemukan enzim ligase dan restriksi endonuclease.
Menginisiasi perkembangan ilmu DNA sehingga muncul teknologi
DNA rekombinan.
DNA assembly: teknologi menggabungkan potongan DNA menjadi
satu untai DNA yang panjang.
Teknologi ini dapat digunakan untuk konstruksi vektor DNA, serta
sebagai tools untuk molecular engineering dan biologi sintetik.

Sejarah

Gibson Assembly: Mekanisme

T5 Exonuclease

T5 Exonuclease

T5 Exonuclease

T5 Exonuclease

T5 Exonuclease

T5 Exonuclease

Phusion Polymerase

Phusion Polymerase

Phusion Polymerase

Phusion Polymerase

Taq Ligase

Taq Ligase

Gibson Assembly: Kelebihan & Kekurangan

Kelebihan
1. Tidak memerlukan sisi restriksi
2. Produk yang dihasilkan merupakan sequence yang lengkap
3. Bisa menggabungkan lebih dari 10 potongan DNA dalam 1 waktu
reaksi (1 jam)
Kekurangan
1. Membutuhkan primer khusus dengan harga yang relative mahal
2.Bisa terjadi kesalahan dalam penyusunan ulang sequence namun
frekuensinya rendah
3. Adanya struktur sekunder manghalangi penyusunan ulang
sequence

Daftar Pustaka
Gibson, D. G. 2011. Enzymatic Assembly of Overlapping DNA
Fragments. Methods in Enzymology 498: 349-361.
Gibson, D. G., L. Young, R. Y. Chuang, J. C. Venter, C. A. Hutchison, & H.
O. Smith. 2009. Enzymatic Assembly of DNA Molecules up to Several
Hundred Kilobases. Nature Methods (6)5: 343-345.