ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

•SON TODAS AQUELLAS

PRÁCTICAS TENDIENTES A
DISMINUIR LA INCIDENCIA DE
ENFERMEDADES, EXCLUYENDO CONTROL
EL CONTROL QUÍMICO BIOLÓGICO
•COMO EL USO DE
MICROORGANISMOS
ANTAGONISTAS QUE
INTERFIEREN EN LA
SUPERVIVENCIA DE
PATÓGENOS O EN EL
DESARROLLO DE ACTIVIDADES
DETERMINANTES DE LA
ENFERMEDAD
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

•EN LA NATURALEZA EXISTE UNA

INTERACCIÓN CONTINUA ENTRE LOS
POTENCIALES PATÓGENOS Y SUS
ANTAGONISTAS DE FORMA TAL QUE ESTOS
ÚLTIMOS CONTRIBUYEN A QUE NO HAYA
ENFERMEDAD EN LA MAYORÍA DE LOS
CASOS

•ES DECIR, EL CONTROL BIOLÓGICO

FUNCIONA NATURALMENTE
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MECANISMOS DE ACCIÓN DE LOS

ANTAGONISTAS PARA CONTROLAR EL
DESARROLLO DE PATÓGENOS

•COMPETENCIA
•ANTIBIOSIS
•PREDACIÓN
•INDUCCIÓN DE RESISTENCIA
•PARASITISMO
•INTERACCIÓN DIRECTA CON EL PATÓGENO
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COMPETENCIA

Inhibición de Phytium por Pseudomonas fluorescens en un

medio con falta de Fe. Esta inhibición no ocurre cuando al
medio se agrega Fe.
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PARASITISMO

Hifas de Trichoderma sp. envolviendo hifas de Rizopus sp

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ANTIBIOTICOS

HISTORIA

EL TÉRMINO ANTIBIÓTICO FUE PROPUESTO

POR SELMAN A. WAKSMAN, (DESCUBRIDOR
DE LA ESTREPTOMICINA), PARA DEFINIR
SUSTANCIAS DOTADAS DE ACTIVIDAD
ANTIMICROBIANA Y EXTRAÍDAS DE
ESTRUCTURAS ORGÁNICAS VIVIENTES.
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•1889 JEAN PAUL VUILLEMIN, EN UN TRABAJO

TITULADO "SYMBIOSE ET ANTIBIOSE", CREA
EL TÉRMINO ANTIBIOSIS PARA DESCRIBIR LA
LUCHA ENTRE SERES VIVOS PARA LA
SUPERVIVENCIA

•WARD ADOPTA ESTA PALABRA PARA

DESCRIBIR EL ANTAGONISMO MICROBIANO
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ANTIBIOTICOS

•SON SUSTANCIAS MEDICINALES SEGURAS QUE

TIENEN EL PODER PARA DESTRUIR O DETENER
EL CRECIMIENTO DE ORGANISMOS INFECCIOSOS
EN EL CUERPO

•LOS ORGANISMOS PUEDEN SER BACTERIAS,

VIRUS, HONGOS O PROTOZOOS

•UN GRUPO PARTICULAR DE ESTOS AGENTES

CONSTITUYEN LAS DROGAS LLAMADAS
ANTIBIÓTICOS, DEL GRIEGO ANTI ("CONTRA") Y
BIOS ("VIDA")
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•ALGUNOS ANTIBIÓTICOS SON PRODUCIDOS POR

ORGANISMOS VIVIENTES TALES COMO
BACTERIAS, HONGOS, Y ESPORAS. OTROS SON EN
PARTE O TOTALMENTE SINTÉTICOS ES DECIR,
PRODUCIDOS ARTIFICIALMENTE

•LA PENICILINA ES QUIZÁS EL MEJOR

ANTIBIÓTICO CONOCIDO

•SU DESCUBRIMIENTO Y SU POSTERIOR

DESARROLLO HAN PERMITIDO A LA PROFESIÓN
MÉDICA TRATAR EFECTIVAMENTE MUCHAS
ENFERMEDADES INFECCIOSAS, INCLUYENDO
ALGUNAS QUE ALGUNA VEZ AMENAZARON LA
VIDA
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

ANTIBIOSIS

•LA RELACIÓN GENERAL ENTRE UN

ANTIBIÓTICO Y UN ORGANISMO
INFECCIOSO ES DE ANTIBIOSIS

•ESTA PALABRA REFIERE A UNA

ASOCIACIÓN DE DOS ORGANISMOS EN LA
QUE UNO ES DAÑADO O ES MATADO POR
EL OTRO
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Cultivo dual de Epicoccum nigrum y Sclerotinia

sclerotiorum mostrando la inhibición por antibiosis
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LA ACCIÓN DE ANTIBIÓTICOS

LOS ANTIBIÓTICOS PUEDEN SER

•BACTERIOSTÁTICOS (BLOQUEAN EL
CRECIMIENTO Y MULTIPLICACIÓN CELULAR)

•BACTERICIDAS (PRODUCEN LA MUERTE DE

LAS BACTERIAS)
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•LA PRUEBA DE LA ACCIÓN DE UN ANTIBIÓTICO

EN EL LABORATORIO MUESTRA CUANTA
EXPOSICIÓN A LA DROGA ES NECESARIA PARA
FRENAR LA REPRODUCCIÓN O PARA MATAR LAS
BACTERIAS

•AUNQUE A UNA GRAN CANTIDAD DE UN

ANTIBIÓTICO LE TOMARÍA UN TIEMPO MENOR
PARA MATAR LAS BACTERIAS QUE OCASIONAN
UNA ENFERMEDAD, TAL DOSIS COMÚNMENTE
HARÍA QUE EL ORGANISMO SUFRA DE UNA
ENFERMEDAD OCASIONADA POR LA DROGA
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ESPECTRO BACTERIANO

•LA ACCIÓN DE UN ANTIBIÓTICO SE MIDE EN

TÉRMINOS DE ESPECTRO BACTERIANO

•SE OBSERVA QUE ALGUNOS ANTIBIÓTICOS

COMO LA PENICILINA ACTÚAN EN UN SECTOR
RESTRINGIDO:
COCOS GRAM NEGATIVOS Y GRAM POSITIVOS,
ESPIROQUETAS Y BACTERIAS GRAM POSITIVAS

•POR ESTA RAZÓN SE LA DENOMINA DE

ESPECTRO LIMITADO
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•OTROS ANTIBIÓTICOS COMO LAS

TETRACICLINAS Y EL CLORANFENICOL,
LO HACEN EN MÚLTIPLES SECTORES Y
POR ESO SE LES ADJUDICA EL NOMBRE
DE AMPLIO ESPECTRO

•OTROS ANTIBIÓTICOS ACTÚAN SOBRE

UNA FRACCIÓN MUY LIMITADA, POR
EJEMPLO, NISTANINA SOBRE Candida
albicans. A ESTE TIPO DE ANTIBIÓTICO
SE LE LLAMA DE ESPECTRO SELECTIVO
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ANTIBIOGRAMA

•EL ANTIBIOGRAMA ES UN TEST DE

RESISTENCIA O SENSIBILIDAD DE LAS
BACTERIAS BAJO LA ACCIÓN DE DIVERSOS
ANTIBIÓTICOS

•SI UN MICROORGANISMO ESTÁ EN CONTACTO

CON LA DROGA Y AÚN ASÍ PERSISTE SU
CAPACIDAD VITAL, SE DEDUCE LA
INOPERANCIA FARMACOLÓGICA DEL
PRODUCTO PARA TAL BACTERIA:

“HAY RESISTENCIA AL ANTIBIÓTICO”

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•INVERSAMENTE SI LA ZONA QUE RODEA

AL ANTIBIÓTICO ESTÁ TOTALMENTE
LIBRE, O SEA, QUE NO HAY DESARROLLO
DE LA BACTERIA:
“ESTA ES SENSIBLE A LA DROGA”

•ESTA ZONA CIRCUNDANTE AL

ANTIBIÓTICO, LLAMADA HALO DE
INHIBICIÓN, ES DE GRAN VALOR
CLÍNICO PARA INICIAR, CONTINUAR O
MODIFICAR UNA TERAPIA
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

PRINCIPALES GRUPOS DE
ANTIBIOTICOS

•PENICILINAS
•CEFALOSPORINAS
•AMINOGLICÓSIDOS
•TETRACICLINAS
•MACROLIDAS
•POLIPÉPTIDOS
•SULFO DROGAS, COMO LA SULFONAMIDA
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Bacteria
Agrobacterium Galltrol
radiobacter Nogall
Bacillus spp.: Companion
HiStick N/T
Kodiak
Serenade
YieldShield
Burkholderia cepacia Deny
Intercept
Pseudomonas spp. BioJect Spot-Less
Bio-save
BlightBan
Cedomon
Streptomyces spp. Actinovate*
Mycostop
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Fungi
Ampelomyces AQ10
quisqualis
Candida oleophila Aspire
Coniothyrium Contans
minitans WG/Intercept WG
Myrothecium DiTera
verrucaria
(killed)
Trichoderma spp./ Plantshield/Rootshi
Gliocaldium spp. eld/T-22 Planter
box
Soilgard
Primastop
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PHYTOPATHOLOGY, Vol. 92, No. 11, 2002

 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

•EL CONTROL DE ENFERMEADES EN

PLANTAS CAUSADAS POR BACTERIAS SE
REALIZA:
CONSIDERANDO LA RESISTENCIA DE LA
PLANTA A LA ENFERMEDAD
CON METODOS CULTURALES LOS CUALES
PUEDEN SER DIFICILES DE IMPLEMENTAR EN
CULTIVOS PERENNES COMO LOS FRUTALES
•EL USO DE CONTROLES QUÍMICOS ES
LIMITADO DEBIDO A SU COSTO, POCA
EFECTIVIDAD Y ELEVADA TOXICIDAD
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

ESTREPTOMICINA Y OXYTETRACICLINA
SON USADOS PARA EL CONTROL DEL
TIZON DE FUEGO, UNA SERIA
ENFERMEDAD QUE ATACA ARBOLES DE
PERA Y MANZANA , CAUSADO POR LA
BACTERIA Erwinia amylovora
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Erwinia sp.
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

Erwinia sp.
ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

•LA OXYTETRACICLINA ES MENOS EFECTIVA

QUE LA ESTREPTOMICINA Y SE EMPLEA SOLO
EN PERA
•MIENTRAS QUE LA ESTREPTOMICINA ES
EFICAZ HASTA QUE LA BACTERIA ADQUIERA
RESISTENCIA
•DEBIDO A LA RESISTENCIA DE E. amylovora,
SE HACE NECESARIO IMPLEMENTAR UN
CONTROL BIOLÓGICO ENFOCADO
PRINCIPALMENTE A SUPRIMIR LA FASE DE
CRECIMIENTO EPIFITICA DEL PATOGENO
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

OXYTETRACICLINA

ESTREPTOMICINA
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Pantoea agglomerans (syn Erwinia herbicola)

HA SIDO UTILIZADA PARA CONTRARESTAR LA
ENFERMEDAD DEL TIZON DE FUEGO
DEBIDO A LA PRODUCCION DE ANTIBIOTICOS
INHIBITORIOS DE E. amylovora
ESTOS ANTIBIOTICOS SON CONOCIDOS
COMO:
•HERBICOLINAS
•PANTOCINAS
•MICROCINAS
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SE CARACTERIZAN PRINCIPALMENTE:

•INHIBICION INVERSA ADICIONANDO

UN AMINO ACIDO EXOGENO (HISTIDINA,
LEUCINA Y ARGININA) AL MEDIO DEL
CULTIVO
•SENSIBILIDAD A TEMPERATURAS Y ph
EXTREMOS
•INACTIVACION POR PROTEASAS O
PENICILINASAS
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•SE HAN SECUENCIADO LOS GENES

INVOLUCRADOS EN LA SINTESIS DE
ANTIBIOTICOS EN P. agglomerans, Y SE
LOCALIZAN EN SU CROMOSOMA O EN SUS
PLASMIDOS

•LOS AMINOACIDOS PRESENTES EN

ALGUNOS FRUTOS PUEDEN INHIBIR LA
ACCION DE ALGUNOS ANTIBIOTICOS
PRODUCIDOS POR P. agglomerans
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SE CREE QUE EL ANTIBIOTICO PRODUCIDOS

POR P. agglomerans CONTRIBUYE AL CONTROL
DEL TIZON DE FUEGO:

•AISLADOS DE E. amylovora HAN SIDO

SUCEPTIBLES AL ANTIBIOTICO EN CAJAS DE
CULTIVO

•P. agglomerans O SEMIPREPARADOS DEL

ANTIBIOTICO APLICADO A REBANADAS DE
PERA INOCULADAS CON EL PATOGENO
REDUCEN LA NECROSIS Y RETARDAN EL
CRECIMIENTO DE E. amylovora
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EN EL SIGUIENTE TRABAJO:

•SE OBTUVO UNA CEPA TRANSFORMADA

DE Escherichia coli CON UN PLASMIDO DE
12 Kb AISLADO DE E. herbicola Y PRODUCE
ANTIBIOTICOS QUE REDUCEN EL
CRECIMIENTO DEL PATOGENO Y LOS
SINTOMAS DE LA ENFERMEDAD EN LA
PLANTA
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•TAMBIÉN SE OBTUVIERON CEPAS MUTANTES

Eh318, DEFICIENTES EN LA PRODUCCION DE
PANTOCINA A O PANTOCINA B, Y CEPAS
DEFICIENTES EN LA PRODUCCION DE AMBOS
ANTIBIOTICOS

•LOS MUTANTES DEFICENTES EN UNO SOLO

DE LOS ANTIBIOTICOS PRESENTARON LA
MISMA CAPACIDAD PARA CONTROLAR LA
ENFERMEDAD, MIENTRAS QUE LAS CEPAS
MUTADAS PARA AMBOS ANTIBIOTICOS
PRESENTARON MENOR SUPRESION QUE LA
CEPA PARENTAL
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MATERIALES Y
METODOS

CEPAS
BACTERIANAS
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MATERIALES Y
METODOS

DISEÑO EXPERIMENTAL
•BLOQUES DE 0,5 Ha DE PERA (Pyrus
communis)
TRATAMIENTOS
•ARBOLES INDIVIDUALES EN
PARCELAS EN UN DISEÑO EN BLOQUES
COMPLETAMENTE AL AZAR
•CADA TRATAMIENTO CON 5 REPLICAS
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•BACTERIAS CRECIDAS EN AGAR NUTRITIVO

MAS 1% DE GLYCEROL, DURANTE 4 DÍAS A
25ºC
•DE UN CULTIVO EN CAJAS, LAS BACTERIAS
FUERON RASPADAS Y RESUSPENDIDAS EN
BUFFER FOSFATO 20mM ESTERIL, A UNA
CONCENTRACION DE ≈1X1010 CFU/ml,
MEDIDA EN ESPECTROFOTOMETRO
•TRANSPORTADAS EN HIELO AL CAMPO Y
DILUIDAS CON AGUA A UNA CONCENTRACION
1X108 A 3X108 CFU/ml, ANTES DE SER
ESPARCIDAS
ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

•APROXIMADAMENTE DE 2 A 4 LITROS DE
LA SUSPENSION CELULAR FUE APLICADA
A LOS ARBOLES INDIVIDUALES
•SE UTILIZARON CONTROLES CON
APLICACIONES DE :
AGUA
SULFATO DE ESTREPTOMICINA 100 µ g/ml
OXYTETRACICLINA 200 µ g/ml
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RECUPERACION DE LAS BACTERIAS DE

FLORES
•LAS FLORES ABIERTAS DE PERA CON
ANTERAS NEGRAS MADURAS, FUERON
COLECTADAS DESPUES DE LA APLICACION
DEL SEGUNDO TRATAMIENTO Y DURANTE LA
FLORACION HASTA QUE LOS SINTOMAS DEL
TIZON DE FUEGO FUERON VISIBLES
•LAS BACTERIAS SE AISLARON SOBRE
MEDIO AGAR PSEUDOMONAS CON 50µ g DE
CICLOHEXAMIDA Y 50µ g DE KANAMICINA
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EVALUACION DE LA ENFERMEDAD
•LAS FLORES CON SINTOMAS DE TIZON DE
FUEGO FUERON CONTADAS Y REMOVIDAS
INMEDIATAMENTE DE LOS ARBOLES EN
UN TIEMPO DE 5 SEMANAS COMENZANDO
CUANDO LOS SINTOMAS FUERON
VISIBLES
•LOS SINTOMAS FUERON:
NECROSIS
MARCHITEZ
EXUDADO BACTERIANO
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RESULTADOS
DINAMICA DE LA POBLACION DE Eh252 Y 10:12
SOBRE LAS FLORES DE PERA
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ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
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POBLACION
DE Ea153N
SOBRE LAS
FLORES DE
PERA
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POBLACION DE Ea153N SOBRE LAS FLORES DE PERA

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SUPRESION DEL TIZON DE FUEGO POR P. agglomerans

Y ANTIBIOTICOS COMERCIALES
ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

•LA AGALLA DE LA CORONA ES UNA

IMPORTANTE ENFERMEDAD CAUSADA POR
Agrobacterium spp. LA CUAL INFECTA UN
AMPLIO RANGO DE CULTIVOS, COMO LAS
ROSAS Y TORONJA
•CONTROL BIOLÓGICO HA SIDO ÚTIL
UTILIZANDO LA CEPA NO PATOGENICA
Agrobacterium rhizogenes K84 Y K1026
•LAS DOS CEPAS PRODUCEN EL ANTIBIOTICO
AGROCINA 84, EL CUAL ESPECIFICAMENTE
INHIBE LA ACTIVIDAD DE VARIAS CEPAS
PATOGENAS DE Agrobacterium spp.
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Agrobacterium rhizogenes
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AGALLA DE LA CORONA
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LA CEPA K84 CONTIENE TRES PLASMIDOS:

•pAgK84 (48Kb), QUE CODIFICA PARA LA
PRODUCCION DE AGROCINA 84
•pAgK434 (300 A 400 Kb), QUE CODIFICA
PARA LA PRODUCCION DE AGROCINA 434
•pAtK84b (173 Kb), QUE CODIFICA
PROTEÍNAS INVOLUCRADAS EN EL
CATBOLISMO DE LA NOPALINA
LOS GENES INVOLUCRADOS EN LA
BIOSINTESIS DE LA AGROCINA 84 HAN SIDO
CARACTERIZADOS Y LOCALIZADOS EN UN
SEGMENTO DE 21 Kb DE pAgK84
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•EL OBJETIVO DE ESTE ESTUDIO FUE EL DE

CONSTRUIR VARIAS CEPAS DE K84 CON LA
COMBINACION DE LOS TRES PLASMIDOS
•ADEMAS PROBAR LA EFICACIA DE ESTAS
CEPAS COMO CONTROL BIOLÓGICO DE
A. rhizogenes
•TAMBIÉN SE EVALUO EL PAPEL DE LA
AGROCINA 434 COMO CONTROL BIOLÓGICO,
CON LA OBTENCION DE MUTANTES MEDIANTE
EL USO DEL TRANSPOSON Tn5-mob
 ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO

MATERIALES Y METODOS

BACTERIAL STRAINS AND GROWTH MEDIA

THE BACTERIAL STRAINS AND PLASMIDS USED IN THIS
STUDY AND THEIR RELEVANT CHARACTERISTICS ARE
SHOWN IN TABLE 1
THE MEDIA USED FOR MAINTENANCE OF AGROBACTERIUM
STRAINS AND FOR FILTER MATINGS WERE BERGENSEN'S
MEDIUM AND TY MEDIUM (TRYPTONE [5 G/LITER], YEAST
EXTRACT [3 G/LITER], CACL2 · 6H2O [1.3 G/LITER],
DIFCO BACTO AGAR [15 G/LITER]).
ANTIBIOSIS COMO CONTROL BIOLOGICO
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MATERIALES Y METODOS

BACTERIAL CONJUGATIONS
BACTERIAL CONJUGATIONS WERE CONDUCTED ON 25-
MM-DIAMETER, 0.22-µM-PORE-SIZE NITROCELLULOSE
FILTERS ON TY PLATES, WITH DONOR AND RECIPIENT
STRAINS GROWN OVERNIGHT ON MATING FILTERS
BEFORE BEING PLATED ONTO SELECTIVE MEDIUM. FOR
SELECTION OF TRANSCONJUGANTS FROM BACTERIAL
MATINGS WITH AGROBACTERIUM TUMEFACIENS AS
DONOR AND A. RHIZOGENES AS RECIPIENT, A MEDIUM
SELECTIVE FOR A. RHIZOGENES WAS USED. MULTIPLE
PATCH MATINGS WERE CONDUCTED WITH A
MULTIPRONGED METAL REPLICATOR.
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MATERIALES Y METODOS

GROWTH TESTS TO DIFFERENTIATE BETWEEN

A. rhizogenes AND A. tumefaciens

(iii) 3-KETOLACTOSE PRODUCTION

(iv) GROWTH ON 2% NACL
(v)MAXIMUM GROWTH TEMPERATURE
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MATERIALES Y METODOS

•AGROCIN 434 PURIFICATION

•HVPE

•AGROCIN 84 AND 434 BIOASSAYS

•PREPARATION OF ALMOND SEEDLINGS

•ALMOND SEEDLING ASSAY FOR

BIOLOGICAL CONTROL OF CROWN GALL
(ROOT INOCULATION)

•STATISTICAL ANALYSIS
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RESULTADOS
AISLAMIENTO DE PLASMIDOS DE LA CEPA K1347,
K1351(pAtK84b), K1352(pAgK84), K1353(pAgK84, pAtK84b),
Isolation of K1355 (pAgK434, pAgK84::Tn5)

FIG. 1. Plasmid profiles of A. rhizogenes K84 and its derivatives.

Lanes: A, K1352; B, K1143; C, K1351; D, K434; E, K1353; F,
K1355; G, K84; H, K1347. Chr. DNA, chromosomal DNA
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EVALUACION DEL CONTROL BIOLÓGICO DEL PATOGENO

A. rhizogenes K27 EN RAICES GERMINADAS DE ALMENDRA
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COMPARACION DE LA INHIBICION DEL PATOGENO POR LAS CEPAS

MUTANTES K1143 Y Tn5 , DEFICIENTES EN LA PRODUCCION DE
AGROCINA 434