CENTRO BACHILLERATO TECNOLÓGICO industrial y de servicios No.

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Desarrollar Técnicas Parasitológicas

INTRODUCCIÓN

Las parasitosis causadas por protozoos y helmintos han sido responsables de un gran número de
enfermedades y de pérdidas de vidas humanas, y su impacto en la salud pública es enorme. Aun cuando
en los últimos años ha habido esfuerzos importantes para controlar la prevalencia de las enfermedades
parasitarias con medidas tradicionales, como medidas higiénicas, sanitarias y tratamientos masivos, el
número de casos a nivel mundial ha aumentado.

El técnico en análisis clínicos debe conocer las distintas técnicas habituales, así como los fundamentos y
principios básicos que contribuyan a la integración de una base científica sólida.

Toma de muestra

Se dará instrucciones al paciente acerca de cómo deberá recoger la muestra de materia fecal.
• Para que la muestra recogida sea adecuada debe impedirse que el paciente ingiera medicamentos
a base de carbón, sales de bario, magnesio, bismuto y purgantes.
• Deberá recomendarse que desde unas 72 horas antes de la toma de muestra se reduzca de la dieta
las féculas y verduras.

Métodos de recolección

1. Obtenida por expulsión natural

2. Utilización de purgantes. Recomendada en aquellas personas cuyo hábito de defecación no es
muy regular, esta se utiliza en casos de amibiasis intestinal crónica y en Estrongiloidosis
3. Por medio de una cucharilla rectal. Método utilizado en lactantes o en niños pequeños.

Manejo de la muestra

• Usar frascos y/o envases de boca ancha (vidrio, plástico o cartón), con tapa de rosca, deben estar
bien lavados y aclarados.
• Las muestras deben estar libres de contaminantes como tierra, agua u orina.
• Los envases deberán guardarse en lugares frescos, pues con el calor se aceleran los fenómenos
de degradación por bacterias y con el frio se pueden destruir los quistes y trofozoitos de
protozoos.
• Las heces diarreicas deben ser examinadas en el transcurso de la primera media hora después de
la expulsión
• Los frascos deberán etiquetarse en forma adecuada con el nombre de la persona completo, edad,
sexo, fecha y hora de expulsión de la muestra.

Conservadores

Si las circunstancias en que ha de realizarse la toma de muestras, impone un retraso en su examen

superior a 24 horas, deberán añadirse elementos que actúen como conservadores o fijadores. Entre los
más utilizados para este fin se encuentran el formol al 5% y/o 10% y glicerina al 50% agregando de 2 a 3
veces más el contenido de la materia fecal en el frasco, el fijador de merthiolate-Iodo-Formaldehido
(M.I.F) y el alcohol polivinílico. Una vez que se tiene la muestra en el laboratorio se ha de proceder al
análisis parasitológico.

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Desarrollar Técnicas Parasitológicas

Practica Núm. 1
COPROLÓGICO

Objetivo
Realizar un estudio coprológico, es decir el estado físico que presenta la materia fecal.
Aplicar el método CPS cualitativo directo para la identificación de parásitos que infectan al hombre.
Aplica las Normas Oficial Mexicanas.

Análisis coprológico

Introducción y fundamento. El estudio en el laboratorio de muestras fecales de origen humano permite

obtener datos en los cuales permite determinar:
• Situación de la función digestiva
• Infecciones causadas por bacterias, virus y hongos.

Examen

Para las enfermedades ocasionadas por parásitos se toman en consideración las siguientes características
de la materia fecal:
 Cantidad y frecuencia: la cantidad es aproximadamente de 100 a 200 gr., y la frecuencia de cada
24 horas.
 Forma y consistencia: debe ser pastosa y de olor característico o fétido y la consistencia blanda,
liquida o sólida.
 Color: el color normal es amarillo claro pero puede mostrarse café, verde, o amarillo obscuro.
 Olor: puede reportarse como característico o fétido.
 Moco: la presencia de moco indica gastritis, ulcera o amibiasis.
 Sangre: indica hemorragia intestinal por ulceras perforadas con medicamentos o ácidos,
hemorroides y amibiasis.

Observaciones microscópicas

 Restos alimenticios: fibras de carne residuos de grasa y restos vegetales.

 Eritrocitos: se deben a ulceras y hemorragias en los intestinos.
 Bacterias: grampositivas y gramnegativas.
 Parásitos: trofozoítos, quistes de protozoos; larvas o huevecillos de helmintos.

Observaciones Químicas

 Sangre oculta
 Pigmentos biliares
 Elementos pancreáticos
 Grasas.

Exámenes Coproparasitoscopicos

En la actualidad se cuenta con tres métodos para detectar parasitosis y se efectúan de acuerdo al
procedimiento y el tipo de parásitos, según sus síntomas y signos. Los parásitos se encuentran en tres
formas: trofozoíto, prequiste y quiste; larvas o huevecillos de helmintos.

 Directo
 De Faust
 De Graham o raspado anal.

Actividad de aprendizaje 1

 Aplicar la técnica de CPS y coprológico de una muestra de materia fecal.

 Presentar un reporte de su resultado.

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 Aplicar las Normas Oficiales Mexicanas

Practica Núm. 2
COPROPARASITOSCOPICO

Análisis directo

Un examen CPS es el estudio de materia fecal, para la búsqueda e identificación de formas parasitarias
intestinales. Puede ser cualitativo o cuantitativo. Las muestras fecales son seriadas con un mínimo de tres;
deben colocarse en un frasco de boca ancha, guardado en un lugar fresco.

Material y reactivos:
 Portaobjetos y cubreobjetos
 Aplicadores de madera
 Asa bacteriológica
 Solución de lugol
 Solución salina fisiológica
 Muestra biológica e materia fecal

Procedimiento

 Como primera fase se observa la muestra biológica realizando un examen físico. Describiendo:
color, olor, forma, consistencia, y mencionando por medio de una cruz (+) la cantidad presente
de moco, pus y sangre (coprológico); si el médico lo pide se puede hacer el examen químico,
pH, sangre oculta en heces etc.
 En un extremo del portaobjetos se coloca una gota de lugol, y en otro extremo una gota de
solución salina fisiológica.
 Con el asa bacteriológica, se toma un poco de muestra, y se efectúa una emulsión, en cada una de
las gotas.
 Se coloca el cubreobjetos a cada una de las emulsiones y se realiza la observación microscópica.
 Para realizar un examen directo el tiempo es importante por lo que la muestra debe mantenerse a
37º C y procesarse en la siguiente hora. Este método es de utilidad para la detección en fresco de
trofozoítos. En la suspensión teñida con lugol se puede identificar con facilidad quistes de
protozoarios como Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Balantidium coli, así como huevos
de helmintos.

Actividad de aprendizaje 1

 Aplicar la técnica de CPS y coprológico de una muestra de materia fecal.

 Presentar un reporte de su resultado.
 Aplicar las Normas Oficiales Mexicanas.

Actividad de aprendizaje 2

Conteste las siguientes preguntas

 Explique las siguientes relaciones entre seres vivos: comensalismo, simbiosis y parasitismo.
 ¿Cuáles son las vías de entrada de los parásitos?
 ¿Cuáles son las vías de transmisión?
 Investigar que es un huésped definitivo, intermediario y paraténico, poniendo un ejemplo de cada
uno.
 ¿Cuál es el examen mas frecuente que se realiza en el estudio de materia fecal?
 ¿Cuáles otros métodos de estudio de materia fecal existen?
 ¿Por qué es importante que el procesamiento de la muestra debe ser lo más rápido posible?
 Cuando no es posible realizar el estudio de manera rápida se hace uso de conservadores. ¿Cuáles
son los más utilizados?

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 ¿Cuáles son los métodos de recolección de materia fecal?

Practica No. 3
MÉTODO DE CONCENTRACIÓN DE FAUST

Es un examen coproparasitoscópico de concentración por centrifugación-flotación.

Fundamento

Este es el método mas usado, no es muy efectivo para muestras de heces ricas en grasas, y como sucede
en algunos métodos de flotación, no concentra muy bien los huevos de la mayoría de especies de
trematodos. Es accesible para la mayoría de los laboratorios de análisis, sirviendo para la búsqueda de
protozoarios y helmintos a la vez. Las heces que contengan huevos de trematodos o de algunas tenias,
quedan mejor concentrados cuando se usa alguna de las técnicas de sedimentación. En este método se
precipitan los parásitos por centrifugación después de haber filtrado la muestra.

Material y equipo

Solución de sulfato de zinc con peso especifico de 1.180

Solución de lugol
Tubos de ensayo de 13 x 100 mm
Vasos de papel sin cera, aproximadamente de 50 ml.
Gasa cortada en cuadros de 10 cm. De lado
Asa de alambre, terminada en circulo de 5 a 6 mm de diámetro
Portaobjeto de 75 x 40 mm
Cubreobjetos de 22 por 22
Aplicadores e madera
Centrifuga que alcance cuando menos 2000 rpm.

Material biológico:

Materia fecal

Técnica:

• Con un aplicador, tomar una muestra (aproximadamente 1/3 de ml) de materia fecal en un vaso
de papel, y se le agrega 1.0 ml de agua mezclar perfectamente con la ayuda de un aplicador de
madera.
• Llenar uno de los tubos de ensaye con agua y vaciarla al vaso de papel.
• Mezclar perfectamente y después llenar el tubo de ensaye con la suspensión de heces en agua.
• Balancear con otro tubo de ensaye lleno de agua y centrifugar durante un minuto a 2000 rpm.
• Descartar el sobrenadante
• Agregar 1.0 ml de solución de sulfato de zinc al sedimento y mezclar agitando el tubo o bien con
un aplicador.
• Llenar el tubo con más solución de sulfato de zinc hasta 2-3 mm del borde.
• Pasar la suspensión por la gasa que se ha puesto sobre el vaso de papel, desechar la gasa,
regresar la suspensión al tubo y agregar suficiente sulfato de zinc para llenar el tubo hasta 2-3
mm del borde
• de una gasa. Después se centrifuga a 1500 rpm durante 5 min.
• Después se decanta y el sobrante del sedimento se le agrega sulfato de zinc y con un agitador se
mezcla bien y se vuelve a centrifugar a 1500.

Nota: si la suspensión está relativamente clara, se puede omitir el paso anterior.

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• Centrifugar un minuto a 2000 rpm., dejando que la centrifuga pare espontáneamente.

• Una vez que la centrifuga paró, se prepara un portaobjetos colocando una gota de solución de
lugol.
• Usando el asa recientemente flameada, tomar varias cargas de la película sobrenadante,
emulsionándola con el lugol.
• Cubrir con el cubreobjetos y observar al microscopio, primero enfocando con el objetivo de 10X
y enseguida observar con el Objetivo 40X.

Forma de reportar

Para reportar los hallazgos en las preparaciones, primero se describe la fase o estadío y en seguida el
nombre del parásito, con su nombre genérico con mayúscula y el especifico con minúscula, subrayando
ambos o escribiéndolo con letra cursiva. Por ejemplo:

Quiste de Giardia lamblia

Huevos de Ascaris lumbricoides
Larvas de Strongyloides stercolaris

Actividades de aprendizaje 1

 Aplicar la técnica de CPS método de concentración-flotación de Faust así como el coprológico

correspondiente de una muestra de materia fecal.
 Presentar un reporte de su resultado.
 Aplicar las Normas Oficiales Mexicanas.

Actividad de aprendizaje 2

Conteste las siguientes preguntas

• ¿Cuál es el fundamento del CPS método de Faust?

• ¿Qué se investiga con este método?

• ¿Cuál es la finalidad del Lugol?

• ¿Cuáles son las fuentes de error comunes en el método?

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Practica Núm. 4
MÉTODO GRAHAM

Este es el clásico método de raspado peri anal para la obtención de huevos de Enterobius vermicularis,
Áscaris lumbricoides, Tenia solium, Tenia Saginata, Himenolepis nana y diminuta además de Trichuris
trichuria.

En 1876 Heller fue el primero que efectúo este método y diagnosticó Oxiuros.
Para hacer este estudio en 1941 Graham introdujo la técnica de raspado anal utilizando cinta adhesiva,
mas tarde en 1946 Mazzoti diagnostico huevecillos de Taenia sp.

Material

a) Vidriería: portaobjetos de 25 x 75 mm
b) Aparatos: microscopio compuesto
c) Otros:
 cinta de celofán adhesiva de 12 mm de ancho
 abate lenguas

TÉCNICA:

• Se le da instrucciones al paciente para que llegue temprano al laboratorio, para la toma de

muestra.
• La muestra se toma de un paciente que no se haya bañado o defecado, para evitar el arrastre
mecánico de los huevos de oxiuros.
• Se toma un abate lenguas y se le coloca cinta adhesiva con el pegamento hacia fuera; se sujetan
ambos extremos con los dedos pulgar e índice.
• Se coloca al paciente en posición genupectoral, se le habré la región peri anal y se hace un
raspado sobre la región peri anal moviendo el abate lenguas con la cinta hacia arriba, abajo,
izquierda y derecha; por ultimo se hace un raspado en la región peri anal.
• Se separa cuidadosamente la cinta del abate lenguas
• Se adhiere la cinta al porta objetos, anotando en un extremo del mismo, nombre, edad y sexo del
paciente.
• Se lleva la preparación al microscopio y se observa con objetivos seco débil y seco fuerte.

Forma de reportar

Para reportar los hallazgos en las preparaciones, primero se describe la fase o estadío y en seguida el
nombre del parásito, con su nombre genérico con mayúscula y el especifico con minúscula, subrayando
ambos o escribiéndolo con letra cursiva. Por ejemplo:

Quiste de Giardia lamblia

Huevos de Ascaris lumbricoides
Larvas de Strongyloides stercolaris

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Practica No. 5
GOTA GRUESA

Fundamento

Se usa principalmente para infecciones por Plasmodium sp. Y Tripanosoma cruzi. La gota gruesa es una
técnica de concentración para búsqueda de parásitos sanguíneos; se fundamenta en el hecho de que al
laquear los glóbulos rojos, pierden toda la hemoglobina, lo que hace que los eritrocitos que están
acumulados no impiden la observación de los parásitos.

Material

• Reactivos:
 Alcohol metílico
 Agua de la llave
• Vidriería: portaobjetos de 25 x 75 mm

Método

1. En un portaobjetos desengrasado se coloca una gota de sangre

2. Con la punta de la lanceta, de una aguja o el ángulo de otro portaobjetos, se desfibrina y se
extiende un poco haciendo un cuadrado de unos 5 mm de lado.
3. Se deja secar al abrigo del polvo y moscas.
4. Después que se secó se guarda y hasta el día siguiente se introduce en un recipiente con agua de
la llave para deshemoglobinizar; el procedimiento se considera completo hasta que la gota se ve
blanca y traslúcida.
5. Se saca del agua, se deja escurrir y secar y se procede a su tinción como si fuera un frotis
sanguíneo.
Nota: La técnica de tinción para protozoarios hemáticos puede hacerse con el método de Wright o de
Giemsa

Tinción de Wright

Esta técnica es específica para protozoarios hemáticos.

Reactivos:
• Colorante de Wright
• Solución buffer para Wright o
• Agua destilada

Método:

1. Se coloca el frotis, sin fijar, en un puente de varillas de vidrio para tinción

2. Se pone el colorante de Wright con gotero, contando las gotas que sean necesarias para cubrir la
preparación.
3. Se deja actuar el colorante tres minutos, (se pueden ensayar varios tiempos).
4. Se le agrega el mismo número de gotas, que se usaron de colorante, de un buffer de fosfatos de
pH 7.0; se deja actuar de 1 a 5 minutos.
5. Se lava suavemente con agua de la llave.
6. Se seca y se observa.

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Actividad 1

1. Realizar una toma de muestra y aplicar la técnica de gota gruesa.

2. Reportar el resultado y entregar al facilitador.

Actividad 2
Conteste correctamente lo que a continuación se pide

1) ¿Cuál es la utilidad del método de Gota gruesa?

2) ¿Cuál es su fundamento?
3) ¿Cuál es el método de tinción para protozoarios hemáticos?
4) Describa la técnica de tinción para protozoarios hemáticos

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Practica No. 6
Sangre oculta en heces fecales

Introducción

Esta prueba se utiliza principalmente para la detección del cáncer de colon y recto, también puede
detectar sangre que proviene de cualquier otro lugar del tracto digestivo.

La prueba de sangre oculta en heces se utiliza para la detección de residuos de sangre no visible en las
heces de un individuo.

Algunas de las causas más frecuentes de un resultado positivo en la prueba son:

 Ulcera péptica
 Inflamación del intestino, ocasionadas por infección.
 Cáncer de estómago, colon o recto.
 Hemorroides
 Medicamentos que irritan el tracto digestivo, como los antiinflamatorios no esteroideos.

“Un resultado positivo indica la presencia de sangre oculta en las heces de un individuo”

Preparación del paciente

Deben evitarse alimentos y suplementos antes de recoger la muestra ya que pueden producir falsos
resultados
En general se aconseja evitar la carne roja, algunas frutas y verduras, la vitamina C y los suplementos de
hierro, así como los medicamentos antiinflamatorios no esteroideos antes de la recogida de la muestra de
heces. Asimismo, no se recomienda realizar la prueba en presencia de estreñimiento, hemorroides o
menstruación.

Muestra

Materia fecal recolectada después de realizar una dieta. Recolectar muestras seriadas al menos dos.
Se puede conservar la materia fecal a temperatura ambiente durante 2 días.

Recolectar las heces directamente en el recipiente plástico, que no hayan estado en contacto con el agua
del sanitario pues el cloro del agua puede causar reacciones falsamente positivas. El paciente no debe
recibir vitamina C durante 1-3 días antes de la prueba. Se debe restringir la ingesta de carnes rojas, de
vegetales ricos en peroxidasa (rábano, nabo, alcachofa, setas, raíces, brócoli, frijoles, coliflor, naranja,
manzana, banano, uvas) 72 horas antes de la recolección de la muestra, para disminuir la incidencia de
resultados positivos-falsos. El uso de drogas anti-inflamatorias no esteroideos también puede alterar el
test. El alcohol y la aspirina, especialmente juntos, y otros irritantes gástricos deben evitarse.

Método

Se dará instrucciones al paciente acerca de cómo deberá recoger la muestra de materia fecal. Para que la
muestra recogida sea adecuada debe impedirse que el paciente ingiera medicamentos.

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Se aplica una pequeña muestra de heces a una tira o tableta química y se añade a una pequeña cantidad de
líquido o solución. Un cambio a color azul a los pocos segundos de la adición de la solución de la muestra
de heces indica la presencia de sangre oculta.

Actividades

Aplica la técnica de sangre oculta en sangre. Realiza tú reporte en tu libreta de reporte de laboratorio.
En tú cuaderno de apuntes, realiza el dibujo del proceso de búsqueda de sangre oculta

Contesta a las siguientes preguntas:

1. ¿Cuál es la utilidad clínica de la prueba?

2. ¿Cuáles son las causas más frecuentes de una prueba positiva?
3. ¿Qué sustancias químicas interfieren en el resultado de la prueba?
4. ¿Cuáles son las recomendaciones que se piden al paciente antes de la
prueba?
5. ¿Cómo se manifiesta una reacción positiva?

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GUIA DE OBSERVACIÓN

Cuadro de identificación
Nombre del alumno
Nombre del facilitador: QFB Mª Teresa Argandoña Vega
Plantel: C. B.T.i.s No. 1 Localidad y estado: Fresnillo, Zacatecas
Fecha: Submódulo: Desarrollar Técnicas Parasitológicas

Contenido:

Instrucciones: verificar que el alumno aplique las medidas básicas de seguridad e higiene durante el desarrollo de la
práctica en el laboratorio. Marcar con una “X” la columna que corresponda según el desempeño del alumno, en caso
de señalar “no” señalar en la columna de observaciones el porqué. Se marcara NA (no aplica) cuando el aspecto a
observar no se presente en virtud de la situación de la evaluación, la evidencia se deberá obtener en otro momento y
registrarlo en la columna de observaciones.
Criterios de evaluación Se especificará el valor que se asigna a cada uno de los aspectos.

Aspecto a observar SI NO NA % %
Llega con puntualidad a la practica 10

Antes de iniciar la practica cuenta

Bata y equipo de seguridad 10
Cuenta con el material solicitado con anterioridad 10
La muestra biológica presenta la identificación apropiada 10
Leyó con anterioridad la practica 10

Durante la práctica:
Permanece con la bata y el equipo de protección 10
Verifica si el área de trabajo se encuentra en condiciones adecuadas de limpieza 10
y orden
Maneja los materiales y substancias con la debida precaución de acuerdo al 10
reactivo que se está usando
Identifica los materiales peligrosos 10
Identifica los símbolos de comunicación de riesgo 10
Maneja los RPBI de acuerdo a la NOM-087-ECOL-SSA1-2002 10
Participa de manera activa en la practica 10
Se integra cordialmente en el equipo 10
10
Al término de la practica:
Se responsabiliza de su área de trabajo que esté en condiciones de limpieza y 10
orden.
Entrega su reporte en la fecha y hora acordada. 10
Entrega su reporte de actividad del manual en la fecha y hora acordada 10
Es realizada en la fecha y hora acordada 10

El porcentaje de cumplimiento de prácticas de laboratorio corresponde al 30%

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