Anda di halaman 1dari 30

BAB I

PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Enzim Adalah sekelompok protein yang berfungsi sebagai katalisator untuk berbagai reaksi
kimia dalam sistim biologic. Hampir semua reaksi kimia dalam sistim biologis dikatalis oleh enzim.
Sisnteis enzim terjadi di dalam sel dan sebagian nesar enzim dapat diekstraksi dari sel tanpa
merusak fungsinya.

Enzim biasa juga disebut sebagai suatu protein yang mempunyai struktur tiga dimensi yang
mampu mengkatalisis reaksi-reaksi biologis. Untuk mengaktifkan kerja enzim dibutuhkan adanya
kofaktor, seperti ion logam, koenzim atau spesies yang lain. Enzim menaikan laju reaksi karena
enzim dapat menurunkan energi aktifasi substrat yang terlibat dalam reaksi. Enzim bekerja optimal
dalam kondisi yang optimal, diatas kondisi optimal aktifitas katalis enzim akan berkurang, demikian
pua dibawah kondisi optimal aktivitas katalitiknya akan menjadi kurang optimal.

Semua enzim pada hakekatnya adalah protein. Beberapa diantaranya mempunyai struktur
agak sederhana, sedangkan sebagian besar lainnya memiliki struktur rumit. Oleh karena enzim
adalah protein, maka interaksi antara enzim dengan molekul lain, sama halnya dengan protein
ditentukan oleh asam amino-asam amino yang ada dalam permukaan yang berhubungan dengan
medium. Sifat-sifat permukaan enzim dipengaruhi oleh larutan disekitarnya. Gugus-gugus
fungional enzim menggambarkan sifat asam-basa dan kelarutannya.

Suhu, pH, konsentrasi substrat, serta konsentrasi enzim sangat mempengaruhi aktifitas
katalitik enzim. Masing-masing enzim memiliki kondisi optimal. Aktivitas katalitik enzim
dipengaruhi oleh adanya inhibitor. Ada tiga jenis inhibitor yaitu:

- Inhibitor bersaing

- Indibitor tidak bersaing, dan

- Inhibitor bukan bersaing

Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang dapat menghasilkan
enzim sebanyak… mol setiap detik pada kondisi percobaan. Selanjutnya satu unit aktivitas spesifik
enzim didefinisikan sebagai jumlah enzim yang dapat menghasilkan satu… mol produk setiap detik
per gram protein enzim.

Dalam mulut manusia terdapat enzim amylase yang memiliki tugas-tugas yang penting
dalam proses reksi enzimatik untuk kepentingan metabolisme tubuh.

Berdasarkan fungsi dari enzim tersebut, maka enzim sngat berperan penting bagi kebutuhan
hidup manusia. Hal ininlah yang melatarbelakangi percobaan ini.

1.2 Rumusan Masalah


a. Seperti apa sifat-sifat pada enzim ?
b. Bagaimana prinsip kerja enzim dalam system biologi dan manfaatnya bagi kehidupan ?
c. Bagaiman keterampilan praktikan dalam melakukan percobaan enzim?
1.3 Tujuan
a. Kognitif : praktikan memahami sifat-sifat enzim
b. Afektif : praktikan menyadari prinsip kerja enzim dalam system biokimia, dan
manfaatnya bagi kehidupan.
c. Psikomotor : praktikan terampil dalam melakukan percobaan enzim.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
Proses (reaksi kimia) yang berlangsung dengan baik dalam tubuh dimungkinkan karena
adanya katalis yang disebut enzim. Berzelius (1837) mengusulkan nama “katalis” untuk zat-zat
yang dapat mempercepat reaksi tetapi zat itu sendiri tidak ikut bereaksi.

Proses kimia yang terjadi dengan pertolongan enzim telah dikenal sejak zaman dahulu
misalnya pembuatan anggur dengan cara fermentasi atau peragian. Demikian pula pembuatan asam
cuka termasuk proses kimia berdasarkan aktifitas enzim. Dahulu proses fermentasi (Pasteur)
dianggap hanya terjadi dengan adanya sel yang mengandung enzim. Anggapan tersebut berubah
setelah Buchner membuktikan bahwa cairan yang berasal dari ragi tanpa adanya sel hidup dapat
menyebabkan fermentasi gula menjadi alkohol dan karbondioksida. Hingga sekarang kata ‘enzim’
yang berarti ‘didalam ragi’ tetap dipakai untuk nama katalis dalam proses biokimia.

Enzim dikenal untuk pertama kalinya sebagai protein oleh Sumner pada tahun 1926 yang
telah berhasil mengisolasi urease dari ‘kata pedang’ (jack bean). Urease adalah enzim yang dapat
menguaraikan urea menjadi CO2 dan NH3. Beberapa tahun kemudian Notrhrop dan Kunitz dapat

mengisolasi pepsin, tripsin, kimotripsin. Selanjutnya makin banyak enzim yang telah dapat
diisolasi dan telah dibuktikan bahwa enzim tersebut adalah suatu protein.

Sejak tahun 1926 pengetahuan tentang enzim atau enzimologi berkembang dengan cepat.
Dari hasil penelitian para ahli biokimia ternyata banyak enzim yang mempunyai gugus bukan
protein, jadi termasuk golongan protein majemuk. Enzim semacam ini disebut holoenzim terdiri
atas protein (apoenzim) dan suatu gugus bukan protein. Sebagai contoh enzim katalase terdiri atas
protein dan ferriprotorfirin. Ada juga enzim yang terdiri atas protein dan logam, misalnya askorbat
oksidase adalah protein yang mengikat tembaga.

Gugus bukan protein ini dinamakan kofaktor ada yang terikat kuat pada protein, ada pula
yang tidak begitu kuat ikatannya. Gugus yang terikat kuat pada bagian protein, artinya yang sukar
terurai dalam larutan disebut gugus prostetik, sedangkan yang tidak begitu kuat ikatannya, dan
mudah dipisahkan secara dialisis disebut koenzim. Baik gugus prostetik maupun koenzim
merupakan bagian enzim yang memungkinkan enzim bekerja terhadap substrat, yaitu zat-zat yang
diubah atau direaksikan oleh enzim.
5.2.1.1 Tata Nama Enzim

Setiap proses biokimia yang terjadi dalam tubuh manusia menggunakan katalis enzim
tertentu. Untuk membedakannya maka tiap enzim diberi nama. Secara umum nama tiap enzim
disesuaikan dengan penambahan “ase” di belakangnya. Substrat adalah senyawa/zat yang bereaksi
dengan bantuan enzim. Contoh enzim yang menguraikan urea (substrat) dinamakan urease.

Kelompok enzim sejenis diberi nama menurut fungsinya, misalnya hidrolase adalah
kelompok enzim yang mempunyai fungsi sebagai katalis dalam reaksi hidrolisis. Disamping nama
trivial (biasa) oleh Commission on Enziymes of the International Union of Biochemistry telah di
tetapkan pula tata nama yang sistematik, disesuaikan dengan pembagian atau penggolongan enzim
yang didasarkan pada fungsinya.

Suatu enzim bekerja khas terhadap suatu substrat tertentu. Kekhasan inilah ciri suatu enzim.
Ini sangat berbeda dengan katalis lain (bukan enzim) yang dapat bekerja terhadap berbagai macam
reaksi. Enzim urease hanya bekerja terhadap urea sebagai subsratnya namun ada juga enzim yang
berkerja lebih dari satu substrat namun enzim tersebut tetap mempunyai kekhasan tertentu.
Misalnya enzim esterase dapat menghidrolisis beberapa ester asam lemak tetapi tidak dapat
menghidrolisis subrat lain yang ester. Suatu contoh tentang kekhasan ini misalnya enzim arginase
bekerja terhadap L-arginin dan tidak terhadap D-arginin.

Suatu enzim dikatakan mempunyai kekhasan nisbi apabila ia dapat bekerja terhadap
beberapa substrat misalnya esterase dan D-asam amino oksidase yang dapat bekerja D-asam amino
dan L asam amino tetapi berbeda kecepatannya. Karena adanya kekhasan ini maka suatu enzim
dapat digunakan untuk memisahkan komponen D dari L pada suatu campuran rasemik. Suatu asam
amino tertentu sebagai substrat dapat mengalami berbagai reaksi dengan berbagai enzim. Kekhasan
reaksi bukan disebabkan oleh koenzim tetapi oleh apoenzim. Misalnya enzim dekarboksilase
bekerja sebagai katalis, sedangkan enzim transaminase bekerja terhadap pemindahan gugus –NH2,

tetapi mereka mempunyai koenzim yang sama yakni piridoksalfosfat.

5.2.1.2 Fungsi dan Cara Kerja Enzim

Fungsi suatu enzim ialah sebagai katalis untuk proses biokimia yang terjadi dalam sel
maupun luar sel. Suatu enzim dapat mempercepat reaksi 10 sampai 11 kali lebih cepat daripada
apabila reaksi tersebut dilakukan tanpa katalis. Berfungsi sebagai katalis yang sangat efisien, di
samping itu mempunyai derajat kekhasan yang tinggi. Seperti juga katalis lainya, enzim dapat
menurunkan energi aktivasi suatu reaksi kimia.
5.2.1.3 Kompleks Enzim –Substrat

Reaksi kimia ada yang membutuhkan energi (reaksi endergonik) dan adapula yang menghasilkan
energi atau mengeluarkan energi (eksergonik). Misalnya pembentukkan ikatan antara senyawa A
dengan senyawa B menjadi senyawa AB akan mengeluarkan energi. Terjadinya senyawa AB dari A
dan B membutuhkan energi sebesar P, yaitu selisih energi antara A dan B dengan AB. Sebaliknya
penguraian senyawa AB menjadi A dan B mengeluarkan energi sebesar P pula. Terurainya senyawa
AB tidak dapat berjalan dengan sendirinya tetapi harus terbentuk dulu senyawa AB aktif. Energi
yang dibutuhkan pada pembentukan AB aktif disebut energi aktivasi (a) makin besar harga a, makin
sukar terjadinya suatu reaksi. Dengan adanya katalis atau enzim, harga energi aktivasi diperkecil
atau diturunkan, dengan demikian akan dapat memudahkan atau mempercepat terjadinya suatu
reaksi.

Suatu enzim mempunyai kekhasan yaitu hanya bekerja pada suatu reaksi saja. Untuk dapat
bekerja pada suatu zat atau substrat harus ada hubungan atau kontak antara enzim dan substrat.
Suatu enzim mempunyai ukuran yang lebih besar daripada substrat. Oleh karena itu tidak seluruh
bagian enzim dapat berhubungan dengan substrat.

Hubungan antara substrat dengan enzim hanya terjadi pada bagian atau tempat tertentu saja.
Tempat atau bagian enzim yang mengadakan hubungan atau kontak dengan substrat dinamai bagian
aktif (actif site). Sisi aktif ini disebut juga sisi katalitik atau sisi pengikatan substrat. Sisi aktif
memiliki gugus fungsional spesifik untuk pengikatan molekul substrat spesifik. Ada dua model sisi
aktif dalam hubungannya dengan pengikatan substrat yakni:

1. Model Kunci dan anak kunci (Lock and Key), model ini dikemukakan oleh Fisher. Artinya
pengikatan substrat dan enzim ditentukan oleh persisnya struktur sisi aktif dan substrat. Sering
disebut model kaku karena hanya berguna untuk menerangkan mekanisme kerja enzim-enzim
tertentu.
2. Model Induced-fit, diajukan oleh Daniel Koshland. Merupakan model yang luwes karena
sisi pengikat substrat bukan merupakan struktur yang kaku. Sisi aktifnya dapat mengalami
perubahan konformasi sampai membentuk kedudukan yang tepat agar enzim dan substrat
membentuk ikatan.
Hubungan hanya mungkin terjadi apabila bagian aktif mempunyai ruang yang tepat dapat
menampung substrat. Apabila substrat mempunyai bentuk atau konformasi lain, maka tidak dapat
ditampung pada bagian aktif suatu enzim. Dalam hal ini enzim itu tidak dapat berfungsi terhadap
substrat. Hal ini menjelaskan mengapa tiap enzim mempunyai kekhasan terhadap substrat tertentu.

Hubungan atau kontak antara enzim dengan substrat menyebabkan terjadinya kompleks
enzim-substrat. Kompleks ini merupakan kompleks yang aktif, yang bersifat sementara dan akan
terurai lagi apabila reaksi yang diinginkan telah terjadi. Secara sederhana sekali penguraian suatu
senyawa atau substrat oleh suatu enzim dapat digambarkan sebagai berikut :

Enzim (E) + Substrat (S) Kompleks enzim-substrat( ES)


Enzim (E) + hasil reaksi (P)
Gambar 5.1 Model Pengikatan Enzim (E) dan Substrat (S)

5.2.1.4 Persamaan Michaelis-Menten

Hasil percobaan hidrolisis sukrosa menjadi glukosa dan frukrosa oleh enzim, ternyata
bahwa konsentrasi sukrosa rendah, kecepatan reaksi tergantung pada konsentrasi sukrosa. Namun
pada konsentrasi tinggi, kecepatan reaksinya tidak dipengaruhi lagi oleh pertambahan konsentrasi.
Ini menunjukkan bahwa enzim seolah-olah telah ‘jenuh’ dengan substrat, artinya tidak dapat lagi
menampung substrat.

Leonor Michelis dan Mauden Menten pada tahun 1913 mengajukan suatu hipotesis bahwa
dalam reaksi enzim terjadi lebih dahulu kompleks enzim-substrat yang kemudian menghasilkan
hasil reaksi dan enzim kembali. Hasil percobaan hidrolisis sukrosa tersebut dapat digambarkan
secara grafik sebagai berikut :

5.2.1.5 Penggolongan Enzim

Enzim digolongkan menurut reaksi yang diikutinya, sedangkan masing –masing enzim
diberi nama menurut nama substratnya, misalnya uriase dan lain-lain. Disamping itu adapula
beberapa enzim yang dikenal dengan nama lama misalnya pepsin, tripsin, dan lain-lain. Comision
on Enzymes of the International Union of Biochemistry, membagi enzim dalam enam golongan
besar. Penggolongan ini didasarkan atas reaksi kimia dimana enzim memegang peranan. Enam
golongan tersebut ialah; 1) Oksidoreduktase, 2) Transferase, 3) Hidrolase, 4) Liase, 5)
Isomerase, 6) Ligase.
Golongan 1. Oksidoreduktase

Enzim-enzim yang termasuk dalam golongan ini dibagi dalam dua golongan yaitu
dehidrogenase dan oksidase. Dehidrogenase bekerja pada reaksi-reaksi dehidrogenase, yaitu reaksi
pengambilan atom hidrogen dari suatu senyawa (donor). Hidrogen yang di lepas diterima oleh
senyawa lain (akseptor). Reaksi pembentukan aldehida dari alkohol adalah contoh reaksi
dehidrogenase. Enzim yang bekerja pada reaksi ini ialah alkohol dehidrolase. Di sini alkohol adalah
donor hydrogen, sedangkan senyawa yang menerima hidrogen adalah suatu koenzim
nikotinadenindinukleotida.

Alcohol dehidrogenase

Alkohol + NAD+ aldehida + NADH + H+

Gugus aldehida maupun keton dapat juga bertindak sebagai donor hidrogen, misalnya pada
reaksi pembentukan asam gliserat-3-fosfat (asam 3-fosfogliserat) dari gliseraldehida-3-fosfat (3-
fosfogliseraldehida).

Glutamat dehidrogenase adalah contoh enzim dehidrogenase yang bekerja terhadap asam glutamat
sebagai substrat. Enzim ini banyak terdapat pada mitokondria dalam semua sel jaringan. Dalam
reaksi ini asam glutamat diubah menjadi asam ketoglutarat.

Glutamat dehidrogenase

Asam Glutamat + NAD+ + H2O NH3 + asam ketoglutarat + NADH + H+

Reaksi ini khusus untuk L-asam glutamat sedangkan amonia yang terjadi pada reaksi inidapat
diubah menjadi urea dan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui urine.

Enzim-enzim oksidase juga bekerja sebagai katalis pada reaksi pengambilan hidrogen pada
suatu substrat. Dalam reaksi ini yang bertindak selaku aseptor hidrogen ialah oksigen. Sebagai
contoh enzim glukosa oksidase bekerja sebagai katalis pada reaksi oksidasi glukosa menjadi asam
glukonat.

Alcohol dehidrogenase
glukosa + O2 asam glukonat + H2O2
Xantin oksidase ialah enzim yang bekerja sebagai katalis pada reaksi oksidasi xantin menjadi asam
urat. Contoh lain enzim oksidase ialah asam amino oksidase, yang bekerja sebagai katalis pada
reaksi oksidasi asam-asam amino.

Glisin oksidase adalah enzim pada reaksi oksidasi glisin menjadi asam glioksilat. Enzim ini adalah
suatu flavoprotein, yaitu suatu senyawa yang terdiri atas flavin yang berkaitan dengan protein.
Enzim asam amino oksidase terdapat dalam jaringan hati dan ginjal.

Golongan 2. Transferase

Enzim yang termasuk golongan ini bekerja sebagai katalis pada reaksi pemindahan suatu
gugus dari suatu senyawa pada suatu senyawa lain. Beberapa contoh enzim termasuk golongan ini,
ialah metiltransferase, hidroksimetiltransferase, karboksiltransferase, asiltransferase, dan amino
transferase atau disebut juga transaminase. Enzim metiltransferase bekerja pada reaksi
pembentukan keratin dari asam guanidine asetat.

Pembentukan glisin dari serin merupakan reaksi pemindahan gugus hidroksi metil. Gugus
ini dilepas dari molekul serin dengan dibantu oleh enzim hidroksimetil
transferase.

Hidroksi metil transferase


CH2 - CH - COOH CH2 - COOH

OH NH2 THFA NH2

Serin Glisin

Dalam reaksi ini asam tetrahidrofolat (THFA) bekerja sebagai aseptor gugus beratom C satu.
Enzim transaminase bekerja pada reaksi transaminase yaitu suatu reaksi pemindahan gugus amino
dari suatu asam amino kepada senyawa lain. Contohnya asam glutamat + asam piruvat
menghasilkan asam ketoglutarat dan alanin.

Golongan 3. Hidrolase

Enzim yang termasuk dalam kelompok ini bekerja sebagai katalis pada reaksi hidrolisis. Ada
tiga jenis hidrolase, yaitu yang memecahkan ikatan ester, memecahkan glikosida dan yang
memecahkan ikatan peptida. Contoh ialah esterase, lipase, fosfatase, amilase, amino peptidase,
karboksi peptidase, pepsin, tripsin, kimotripsin.
Esterase ialah enzim yang memecah ikatan ester dengan cara hidrolisis. Esterase yang
terdapat dalam hati dapat memecah ester sederhana, misalnya etil butirat menjadi etanol dan asam
butirat. Lipase ialah enzim yang memecah ikatan ester pada lemak, sehingga terjadi asam lemak dan
gliserol. Fosfatase adalah enzim yang dapat memecah ikatan fosfat pada suatu senyawa, misalnya
glukosa –6-fosfat dapat dipecah menjadi glukosa dan asam fosfat. Bisa ular mengandung enzim ini.

Amilase dapat memecah ikatan-ikatan pada amilum hingga terbentuk maltosa. Ada tiga
macam enzim amilase, yaitu α-amilase, β-amilase, δ- amilase. α-amilase terdapat dalam saliva
(ludah) dan pankreas. Enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat pada amilum dan disebut endo
amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum. β-amilase
terutama terdapat pada tumbuhan dan dinamakan eksoamilase sebab memecah dua unit glukosa
yang terdapat pada ujung molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya terbentuk
maltosa. δ-amilase telah diketahui terdapat dalam hati. Enzim ini dapat memecah 1-4 dan 1-6 pada
glikogen dan menghasilkan glukosa.

Enzim yang bekerja sebagai katalis dalam reaksi pemecahan molekul protein dengan cara
hidrolisis disebut enzim proteolitik atau protease. Oleh karena yang dipecah adalah ikatan pada
rantai pepetida, maka enzim tersebut dinamakan juga peptidase. Ada dua macam peptidase, yaitu
endopeptidase dan eksopeptidase. Endopeptidase memecah protein pada tempat-tempat tertentu
dalam molekul protein dan biasanya tidak mempengaruhi gugus yang terletak diujung molekul.
Sebagai contoh endopeptidase ialah enzim pepsin yang terdapat dalam usus halus dan papain suatu
enzim yang terdapat dalam pepaya.

Eksopeptidase bekerja terhadap dua ujung molekul protein. Karboksipeptidase dapat melepas
asam amino yang memiliki gugus –COOH bebas pada ujung molekul protein, sedangkan amino
peptidase dapat melepas asam amino pada ujung lain yang memiliki gugus –NH2 bebas.

HOOC - C - NH - CO ---------------- NH - CO - CH – NH2

R karboksil amino R
peptidase peptidase
Dengan demikian eksopeptida melepas asam amino secara berurutan dimulai dari asam
amino pada molekul protein hingga seluruh molekul terpecah menjadi asam amino.
Golongan 4. Liase

Enzim golongan ini mempunyai peran penting dalam reaksi pemisahan suatu gugus dari suatu
substrat (bukan cara hidrolisis) atau sebaliknya. Contoh enzim golongan ini antara lain
dekarboksilase, aldolase, hidratase. Piruvat dekarboksilase adalah enzim yang bekerja pada reaksi
dekarboksilase asam piruvat dan menghasilkan aldehida.

O
CH2 - C – C CH3 – C – H + CO2

O OH O

Enzim aldolase bekerja pada reaksi pemecahan molekul fruktosa 1,6-difosfat menjadi dua molekul
triosa yaitu hidroksi aseton fosfat dan gliseraldehida-3-fosfat. Adapun enzim fumarat hidratase
berperan dalam reaksi penggabungan satu molekul H2O kepada molekul asam fumarat dan

membentuk asam malat.

Golongan 5. Isomerase

Enzim yang termasuk golongan ini bekerja pada reaksi perubahan intramolekuler, misalnya
reaksi perubahan glukosa menjadi fruktosa, perubahan senyawa L menjadi senyawa D, senyawa sis
menjadi senyawa trans dan lain-lain. Contoh enzim ini antara lain; ribulosafosfat epimerase dan
glukosafosfat isomerase. Enzim ribose epimerase merupakan katalis bagi reaksi epimerisasi
ribulosa. Dalam reaksi ini ribulosa-5- fosfat diubah menjadi xilulosa-5-fosfat. Disamping itu reaksi
isomerisasi glukosa –6-fosfat menjadi fruktosa-6- fosfat dapat berlangsung dengan bantuan enzim
glukosa fosfat isomerase.
epimerase
Ribulosa-5-fosfat xilulosa-5-fosfat

isomerase
Glukosa -6 -fosfat fruktosa -6-fosfat

Golongan 6 ligase

Enzim yang termasuk dalam golongan ini bekerja pada reaksi-reaksi penggabungan dua
molekul. Oleh karenanya enzim-enzim tersebut juga dinamakan sintetase. Ikatan yang terbentuk
dari penggabungan tersebut adalah ikatan C-O, C-S, C-N atau C-C. Contoh enzim golongan ini
ialah glutamin sintetase dan piruvat karboksilase. Enzim glutamin sintetase yang terdapat dalam
otak dan hati merupakan katalis dalam reaksi pembentukan glutamin dari asam glutamat.

Glutamin + ATP + NH4+ glutamin + ADP + Panorg

Di samping itu enzim karboksilase bekerja dalam reaksi pembentukan asam oksaloasetat dan asam
piruvat.

Asetil KoA
Asam piruvat + ATP + CO2 asam oksaloasetat + ADP + Panorg

Piruvat karboksilase

Reaksi ini merupakan sebagian dari reaksi metabolisme karbohidrat.


BAB III
METODOLOGI
3.1 Alat dan Bahan
Ø Alat

Gelas kimia 400 ml

Tabung reaksi Penangas air listrik

Pipet tetes Termometer

Neraca
Ø Bahan

a. Buah apel ( sampel )

b. Aquadest

c. Larutan NaI 2 %

d. Fenol 0,01 M

e. Resorcinol 0,01 M

f. Tripsin

g. P-nitrofenol

h. Pb-nitrat
3.1 Prosedur Kerja
3.1.1 Pembuatan Ekstrak enzim

Buah apel

~ dikupas
~ ditimbang 20 gram
~ dipotong kecil-kecil
~ dihaluskan
~ di+kan aquadest

Larutan apel

Campuran

~ dipindahkan ke dalam gelas kimia 100 ml


~ dibilas dengan 50 ml NaI 2 %

~ dibiarkan selama 2 menit


~ disaring ke dalam gelas kimia yang lain
ekstrak

Residu
3.1.2 Spesifikasi Enzim
1 ml aquadest, 1 ml fenol dan 1 ml resorcinol

3 ml ekstrak

~ dimasukkan dalam masing-masing ~ dimasukkan dalam masing2


tabung reaksi 1, 2, dan 3 tabung reaksi 1, 2 dan 3
~ disimpan dalam penangas air pada ~ disimpan dalam penangas selama

Suhu 37oC 5 menit


~ dituangkan dalam masing-masing
tabung reaksi 1,2 dan 3
larutan

~ dibiarkan selama 5 menit


~ dibandingkan warna pada setiap tabung
Yang merupakan substrat adalah resorcinol

~ ditentukan senyawa mana yang merupakan substrat


3.1.3 Konsentrasi Substrat
~ 25 tetes substrat

~ 20 tetes substrat + 5 tetes aquadest

~ 10 tetes substrat + 15 tetes aquadest

~ 5 tetes substrat + 20 tetes aquadest

Ekstrak apel

~ dimasukkan masing-masing ke dalam 4 ~ dimasukkan ke dalam 4 buah tabung


Buah tabung berbeda yang berbeda.

~ diletakkan dalam penangas air 37oC ~ diletakkan dalam penangas air 37oC

Selama 5 menit
~ dituangkan isinya ke dalam masing-
masing substrat

Larutan pada 4 buah tabung reaksi

~ di biarkan selama 10 menit


~ diamati perubahan warna yang terjadi
Terdapat perbedaan warna dari 4 buah tabung
3.1.4 Konsentrasi Enzim
~ 15 tetes substrat + 10 tetes air

~ 5 tetes substrat + 14 tetes aquadest

~ 1 tetes substrat + 18 tetes aquadest

Ekstrak apel

~ dimasukkan masing-masing ke dalam 3 ~ dimasukkan ke dalam 3 buah tabung


Buah tabung berbeda yang berbeda.

~ diletakkan dalam penangas air 37oC ~ diletakkan dalam penangas air 37oC

Selama 5 menit
~ dituangkan isinya ke dalam masing-
masing substrat

Larutan pada 3 buah tabung reaksi

~ di biarkan selama 10 menit


~ diamati perubahan warna yang terjadi
Terdapat perbedaan warna dari 3 buah tabung
3.1.5 Pengaruh pH
2 ml larutan pH 1

Tabung A

+ 15 tetes substrat
+ 15 tetes enzim
Larutan berwarna keruh

2 ml larutan pH 5

Tabung B

+ 15 tetes substrat
+ 15 tetes enzim
Larutan berwarna agak gelap

2 ml larutan pH 7

Tabung C

+ 15 tetes substrat
+ 15 tetes enzim
Larutan keruh agak gelap dibandingkan tabung B
2 ml larutan pH 10

Tabung D

+ 15 tetes substrat
+ 15 tetes enzim
Larutan keruh agak gelap dari tabung C

3.1.6 pengaruh Inhibitor


substrat

~ 10 tetes aquadest

~ 10 tetes P-nitrofenol

~ 10 tetes Pb-nitrat

~ dimasukkan dalam masing-masing tabung

larutan

~ ditentukan harga intensitas warna dengan


spektrofotometer

Harg intensitas larutan yang berbeda-beda


BAB IV
HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Pengamatan

a. Pambuatan ekstrak enzim

Perlakuan Pengamatan
a. 20 gram apel yang sudah dipotong- a. Warna awal putih kemudian menjadi
potong dimasukkan dalam mortar + 5 ml coklat
aquadest kemudian dihaluskan
b. Dicampurkan dalam gelas kimia 100 b. Warna menjadi coklat muda
ml kemudian ditambahkan NaI 2 %
c. Didiamkan 2 menit kemudian c. Warna menjadi kuning bening
disaring
b. spesifikasi enzim

Perlakuan Pengamatan
a. 3 tabung reaksi masing-masing
dimasukkan
Tabung 1 : 1 ml aquadest
Tabung 2 : 1 ml fenol 0,01 M
Tabung 3 : 1 ml resorcinol
Kemudian ekstrak yang didapat tadi
dimasukkan kedalm 3 tabung reaksi
masing-masing 3 ml
b. Dipanaskan 37oC selama 5 menit
c. Dicampurkan ekstrak
Aquadest + ekstrak Warna bening

Fenol + ekstrak Warna bening ada endapan

Resorcinol + ekstrak Warna bening


Senyawa yang merupakan substrat yaitu resorcinol karena warnanya mirip dengan ekstrak

c. Konsentrasi substrat

Perlakuan Pengamatan
Substrat dimasukkan ke 4 tabung reaksi Tabung 1 + ekstrak = kuning
masing-masing : Tabung 2 + ekstrak = kuning muda
Tabung 1 : 20 tetes + 5 tetes air Tabung 3 + ekstrak = kuning terang
Tabung 2 : 10 tetes + 15 tetes air Tabung 4 + ekstrak = kuning tua
Tabung 3 : 5 tetes + 10 tetes air
Tabung $ : 25 tetes
Dipanaskan 37oC dengan 4 tabung reaksi dari
ekstrak

d. konsentrasi enzim

Perlakuan Pengamatan
Tabung A : 15 tetes ekstrak + 10 tetes air Larutan Bening
Tabung B : 5 tetes ekstrak + 14 tetes air Larutan Bening
Tabung C : 1 tetes ekstrak + 18 tetes air Larutan Bening
Dipanaskan 20 menit
Tabung A + substrat Kuning gelap
Tabung B + substrat Kuning terang
Tabung C + substrat Kuning muda

e. pengaruh pH

Perlakuan Pengamatan
Tabung A : 2 ml larutan pH 1 + 15 tetes Larutan berwarna keruh
substrat + 15 tetes enzim
Tabung B : 2 ml larutan pH 5 + 15 tetes Larutan berwarna agak gelap
substrat + 15 tetes enzim
Tabung C : 2 ml larutan pH 7 + 15 tetes Larutan keruh agak gelap dibandingkan dengan
substrat + 15 tetes enzim tabung B
Tabung D : 2 ml larutan pH 10 + 15 tetes Larutan keruh agak gelap dibandingkan dengan
substrat + 15 tetes enzim tabung C
Catatan : semakin tinggi pH maka semkin
gelap warna larutannya.

f. pengaruh inhibitor

3 tabung reaksi

Tabung I : 10 tetes aquadest

Tabung II : 10 tetes P-nitrofenol


Tabung III : 10 tetes Pb-nitrat

Masing-masing dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang berisi substrat

Pengamatan

Warna P-nitrofenol Pb-nitrat aquadest


Warna tua 0,30 8,5 0,5
Warna sedang 0,1 2,2 0,1
Tak berwarna 0,5 0,2 0,2

Catatan : panjang gelombang 580 Å


4.1 Pembahasan

Proses (reaksi kimia) yang berlangsung dengan baik dalam tubuh dimungkinkan karena
adanya katalis yang disebut enzim. Selanjutnya makin banyak enzim yang telah dapat diisolasi dan
telah dibuktikan bahwa enzim tersebut adalah suatu protein.

. Dari hasil penelitian para ahli biokimia ternyata banyak enzim yang mempunyai gugus
bukan protein, jadi termasuk golongan protein majemuk. Enzim semacam ini disebut holoenzim
terdiri atas protein (apoenzim) dan suatu gugus bukan protein. Sebagai contoh enzim katalase terdiri
atas protein dan ferriprotorfirin. Ada juga enzim yang terdiri atas protein dan logam, misalnya
askorbat oksidase adalah protein yang mengikat tembaga.

Gugus bukan protein ini dinamakan kofaktor ada yang terikat kuat pada protein, ada pula
yang tidak begitu kuat ikatannya. Gugus yang terikat kuat pada bagian protein, artinya yang sukar
terurai dalam larutan disebut gugus prostetik, sedangkan yang tidak begitu kuat ikatannya, dan
mudah dipisahkan secara dialisis disebut koenzim. Baik gugus prostetik maupun koenzim
merupakan bagian enzim yang memungkinkan enzim bekerja terhadap substrat, yaitu zat-zat yang
diubah atau direaksikan oleh enzim.

Fungsi suatu enzim ialah sebagai katalis untuk proses biokimia yang terjadi dalam sel
maupun luar sel. Suatu enzim dapat mempercepat reaksi 10 sampai 11 kali lebih cepat daripada
apabila reaksi tersebut dilakukan tanpa katalis. Berfungsi sebagai katalis yang sangat efisien, di
samping itu mempunyai derajat kekhasan yang tinggi. Seperti juga katalis lainya, enzim dapat
menurunkan energi aktivasi suatu reaksi kimia.

Suatu enzim mempunyai kekhasan yaitu hanya bekerja pada suatu reaksi saja. Untuk dapat
bekerja pada suatu zat atau substrat harus ada hubungan atau kontak antara enzim dan substrat.
Suatu enzim mempunyai ukuran yang lebih besar daripada substrat. Oleh karena itu tidak seluruh
bagian enzim dapat berhubungan dengan substrat.

Dalam praktikum kali ini kita akan membahas tentang suatu enzim yang menyebabkan
warna kecoklatan pada buah apel yang dikupas ataupun enzim yang berperan pada proses
pencoklatan pada buah-buah tertentu. Perubahan warna tersebut disebabkan oleh terbentukknya
kinon sebagai hasil oksidasi terhadap substratnya. Perubahan warna tersebut akan digunakan dalam
percobaan ini untuk mempelajari reaksi yang terjadi.

Dalam hal ini kita akan membahas beberapa eksperimen yang termasuk pada kinetika enzim
yakni sbb ;
1) Pembuatan ekstrak enzim

Pada percobaan ini kita akan terlebih dahulu membuat ekstrak enzim, yang kemudian
ekstrak enzim yang di peroleh tersebut digunakan untuk eksperimen selanjutnya.

Adapun langkah pertama yang dilakukan yakni menyiapkan kurang lebih 20 gram apel yang
sudah dikupas kemudian dipotong-potong kecil-kecil. Dimasukkan kedalam mortal dan
ditambahkan 5 ml aquades, setelah itu dihaluskan sampai benar-benar halus, kemudian
dipindahkan kedalam gelas kimia 100 ml, dan dibilas dengan 50 ml NaF 2%. Tujuan dari
penambahan larutan NaF yakni agar supaya enzim yang berperan dalam proses pencoklatan
dalam apel itu tertarik dalam larutan tsb sehingga ekstrak yang dihasilkan lebih banyak.
Kemudian dibiarkan selama 2 menit sebelum disaring kedalam gelas kimia lain yang bersih.
Setelah melalui proses penyaringan di dapatlah ekstrak yang mengandung enzim yang berasal
dari sampel buah Apel.

2) Spesifikasi Enzim

Pada percobaan ini akan dipelajari bagaimana sifat kekhasan enzim terhadap substrat
dengan menggunakan tiga macam senyawa yang mempunyai struktur mirip satu sama lain. Satu
dari tiga senyawa tersebut merupakan substrat untuk enzim yang di teliti, yang selanjutnya akan
disebut sebagai substrat saja pada percobaan-percobaan selanjutnya.

Suatu enzim mempunyai kekhasan yaitu hanya bekerja pada suatu reaksi saja. Untuk dapat
bekerja pada suatu zat atau substrat harus ada hubungan atau kontak antara enzim dan substrat.
Suatu enzim mempunyai ukuran yang lebih besar daripada substrat. Oleh karena itu tidak
seluruh bagian enzim dapat berhubungan dengan substrat.

Adapun yang Pertama-tama dilakukan dalam ercobaan ini yakni menyiapkan 3 buah tabung
reaksi yang masing-masing berisi 1 ml aquades untuk tabung 1, 1 ml katekol 0,01 M untuk
tabung 2, dan 1 ml resorsinol 0,01 M untuk tabung 3. Kemudian ketiga tabung tersebut

disimpan dalam penangas air pada suhu 370 C. Dimana dalam hal ini suhu tersebut merupakan
variabel terikat pada praktikum ini. Tiga tabung lainnya digunakan untuk menyimpan masing-
masing 3 ml ekstrak apel (enzim) yang sudah diperoleh sebelumnya dan setelah itu di masukkan
dalam penangas air selama 5 menit. Setelah itu sesegera mungkin tuangkan ekstrak enzim
kedalam masing-masing tabung dan biarkan selama 5 menit lagi. dibandingkan warna pada tiap-
tiap tabung. Pada tabung 1 terlihat bahwa warna yang terbentuk berupa warna coklat pudar,
pada tabung 2 warna coklat muda dan pada tabung 3 terbentuk warna coklat tua yang kemudian
ini di jadikan sebagai substrat.

Adapun hubungan antara substrat dengan enzim hanya terjadi pada bagian atau tempat
tertentu saja. Tempat atau bagian enzim yang mengadakan hubungan atau kontak dengan
substrat dinamai bagian aktif (actif site). Sisi aktif ini disebut juga sisi katalitik atau sisi
pengikatan substrat. Sisi aktif memiliki gugus fungsional spesifik.

Hubungan hanya mungkin terjadi apabila bagian aktif mempunyai ruang yang tepat dapat
menampung substrat. Apabila substrat mempunyai bentuk atau konformasi lain, maka tidak
dapat ditampung pada bagian aktif suatu enzim. Dalam hal ini enzim itu tidak dapat berfungsi
terhadap substrat. Hal ini menjelaskan mengapa tiap enzim mempunyai kekhasan terhadap
substrat tertentu.

Hubungan atau kontak antara enzim dengan substrat menyebabkan terjadinya kompleks
enzim-substrat. Kompleks ini merupakan kompleks yang aktif, yang bersifat sementara dan
akan terurai lagi apabila reaksi yang diinginkan telah terjadi. Secara sederhana sekali
penguraian suatu senyawa atau substrat oleh suatu enzim dapat digambarkan sebagai berikut :

3) Konsentrasi Substrat

Pada percobaan ini langkah awal yang harus dilakukan adalah dengan menyiapkan 4 buah
tabung reaksi yang masing-masing diberi kode a, b, c, d dan masing-masing diisi dengan 25
tetes substrat 0,01 M untuk tabung a, 20 tetes substrat 0,01 M dan 5 tetes aquades untuk tabung
b, 10 tetes substrat 0,01 M dan 15 tetes aquades untuk tabung c, dan untuk tabung d diisi dengan
5 tetes substrat 0,01 M + 20 tetes aquades. Setelah itu diletakkan ke-4 tabung tsb dalam
penangas pada suhu 370 C.

Digunakan 4 tabung lain untuk menyimpan ekstrak (enzim) dan kemudian diletakkan dalam
penangas air pada suhu 370 C , seperti pada percobaan sebelumnya suhu merupakan variabel
terikat, dimana suhu tetap terus dijaga agar tetap konstan. Setelah empat tabung tersebut berada
5 menit dalam penangas, segera tuangkan isinya kedalam tabung yang berisi substrat, dan
dibiarkan tabung-tabung tersebut selama 10 menit berikutnya. Diamati perubahan warna yang
terjadi dalam ke-4 tabung. Terlihat bahwa pada tabung 1 menunjukkan warna yang kompleks
yakni warna coklat tua, pada tabung 2 warna coklat muda sedangkan pada tabung 3 coklat
pudar.

Hasil eksperimen menunjukkan bahwa dengan konsentrasi enzim yang tetap, maka
pertambahan konsentrasi substrat akan menaikkan kecepatan reaksi. Akan tetapi pada batas
konsentrasi tertentu, tidak terjadi kenaikan kecepatan reaksi walaupun konsentrasi substrat
diperbesar.
Keadaan ini telah di terangkan oleh Michaelis-Menten dengan hipotesis mereka tentang
terjadinya kompleks enzim substrat. Persamaan Miichaelis-Menten yang telah membuktikan
hipotesis mereka telah dijelaskan di muka. Untuk dapat terjadi kompleks enzim substrat,
diperlukan adanya kontak antara enzim dengan substrat. Kontak ini terjadi pada suatu tempat
atau bagian enzim yang disebut bagian aktif.

Pada konsentrasi substrat rendah, bagian aktif enzim ini hanya menampung substrat sedikit.
Bila konsentrasi substrat diperbesar, makin banyak substrat yang dapat berhubungan dengan
enzim pada bagian aktif tersebut. Dengan demikian konsentrasi kompleks enzim substrat makin
besar dan hal ini menyebabkan makin besarnya kecepatan reaksi. Pada suatu batas konsentrasi
substrat tertentu, semua bagian aktif telah dipenuhi oleh substrat atau telah jenuh dengan
substrat. Dalam keadaan ini, bertambah besarnya konsentrasi substrat tidak menyebabkan
bertambah besarnya kosentrasi kompleks substrat, sehingga jumlah hasil reaksinya pun tidak
bertambah besar.

4) Konsentrasi Enzim

Pada percobaan ini langkah-langkanya seperti pada percobaan 3, akan tetapi ada ssedikit
perbedaan dari volume masing-masing enzim. Adapun langkah awal yang dilakukan yakni
menyiapkan 3 buah tabung reaksi yang masing-masing berisi 15 tetes ekstrak (enzim) untuk
tabung 1, 5 tetes enzim + 10 tetes aquades untuk tabung 2, dan 1 tetes enzim + 14 tetes aquades
untuk tabung 3.

Menggunakan 3 tabung lain untuk menyimpan substrat yang masing-masing tabung tersebut
berisi 15 ml substrat, setelah itu di masukkan ke dalam penangas air dengan tetap menjaga suhu
tetap konstan, Kemudian pada 5 menit awal digunakan untuk pra inkubasi dan diikuti 20 menit
waktu inkubasi. Kemudian larutan tersebut sesegera mungkin di campurkan , lalu di diamkan
selama beberapa menit. Setelah hal ini dilakukan terlihat bahwa terjadi perubahan warna pada
setiap tabung. Pada tabung 1 warna yang muncul yakni warna coklat tua, pada tabung 2 warna
coklat muda, dan untuk tabung 3 warna coklat pudar.

Seperti pada katalis lain, kecepatan suatu reaksi yang menggunakan enzim tergantung pada
konsentrasi enzim tersebut. Pada suatu konsentrasi substrat tertentu, reaksi pertambahan dengan
bertambahnya konsentrasi enzim.

5) Pengaruh pH

Untuk mempraktikumkan pengaruh pH , kita dapat menggunakan larutan dengan pH tertentu


yang digunakan sebagai medium. Adapun langkah awal yang dilakukan yakni dengan
menyiapakan 4 buah tabung reaksi. Pada tabung 1 berisi 2 ml larutan dengan pH 1, pH 5, pH
7, dan Ph 10. Kemudian mengambil 4 tabung lainnya yang berisi 15 tetes substrat pada tiap-tiap
tabung, dan 4 tabung yang lainnya lagi di isi dngan 15 tetes enzim pada tiap-tiap tabung.

Setelah 12 tabung tersebut terisi maka tabung yang berisi laruan pH di inkubasi selama 15
menit pada suhu 370C. Setelah di inkubasi selama kurang lebih 15 menit segera ditambahkan
substrat yang juga telah di inkubasi kemudian ditambahkan enzim, sebisa mungkin di usahakan
agar penambahan enzim dilakukan dalam waktu yang bersamaan.

Kemudian setelah proses ini dilakukan yeng teramati bahwa pada tabung 1 warna yang
muncul berupa warna coklat tua pada kondisi ini enzim-substrat berada pada pH 1 dimana tepat
pada range asam, dan tabung 2 berwarna coklat muda yang berada pada suasana asam pH = 5,
untuk tabung 3 berwarna coklat lebih muda dari pada tabung 2 tadi pH = 7,ini berada pada
kondisi normal. sedangkan pada tabung 4 dengan pH = 10 enzim-substrat berada pada kondisi
basa dan warna larutannya coklat pudar.

Seperti protein pada umumnya, struktur ion enzim tergantung pada pH lingkunganya. Enzim
dapat berbentuk ion positif, ion negatif atau ion bermuatan ganda (zwitter ion). Dengan
demikian perubahan pH lingkungan akan berpengaruh terhadap efektifitas bagian aktif enzim
dalam membentuk kompleks enzim substrat.

Di samping pengaruh terhadap struktur ion pada enzim, pH rendah atau pH tinggi dapat pula
menyebabkan terjadinya proses denaturasi dan ini akan mengakibatkan menurunya aktifitas
enzim. Gambar grafik berikut menunjukan hubungan antara aktifitas enzim dengan pH. Dari
bentuk kurva pada gambar tersebut, tampak bahwa ada suatu pH tertentu atau daerah pH yang
dapat menyebabkan kecepatan reaksi paling tinggi. pH tersebut dinamakan pH optimum.
------------------------

Aktifitas enzim

6) Pengaruh Suhu

Pada percobaan ini terlebih dahulu dirancang suatu set percobaan untuk mempelajari
pengaruh suhu terhadap reaksi enzim. Dengan mengambil suhu 0 0 C, 100 C, 250 C, 350 C, 500
C, dan 800 C. Zat yang digunakan adalah 15 tetes substrat, dan 15 tetes ekstrak enzim,
kemudian dilakukan pra inkubasi selama 10 menit, setelah itu dilakukan inkubasi dengan tetap
berusaha menjaga suhu agar tetap konstan. Kemudian sesegera mungkin mencampurkan
substrat kedalam tabung yang berisi enzim dan diusahakan agar setiap set memperoleh waktu
inkubasi yang sama.

Disini terlihat bahwa pada suhu rendah reaksi kimia berlangsung lambat, sedangkan pada
suhu yang lebih tinggi reaksi berlangsung lebih cepat. Kerena enzim adalah protein, maka
kenaikan suhu dapat menyebabkan terjadinya proses denaturasi, maka bagian aktif enzim akan
terganggu dan dengan demikian konsentrasi efektif enzim menjadi berkurang dan kecepatan
reaksinya pun akan menurun.

Kenaikan suhu sebelum terjadinya proses denaturasi dapat menaikkan kecepatan reaksi
diartikan sebagai kenaikan kecepatan reaksi sebagai akibat kenaikan suhu 10°C. Koefisien suhu
ini diberi symbol Q10 untuk reaksi yang menggunakan enzim, Q10 ini berkisar antara 1,1 hingga
3,0 artinya setiap kenaikan suhu 10°C, kecepatan reaksi mengalami kenaikan 1,1 hingga 3,0
kali. Namun kenaikan suhu pada saat mulai terjadinya proses denaturasi akan mengurangi
kecepatan reaksi. Oleh karena ada dua pengaruh yang berlawanan, maka akan terjadi suatu titk
optimum, yaitu suhu yang paling tepat bagi suatu reaksi yang menggunakan enzim yang
tertentu. Gambar berikut menunjukan hubungan antara kecepatan reaksi (V) dengan suhu.

kec.
rx

0 suhu
Suhu optimum

Hubungan Antara Suhu dengan Kecepatan Reaksi

Titik 0 menunjukkan suhu optimum, yaitu suhu yang menyebabkan terjadinya reaksi
kimia dengan kecepatan paling besar. Tiap enzim mempunyai suhu optimum tertentu: pada
umumnya enzim yang terdapat pada hewan mempunyai suhu optimum antara 40°C-50°C,
sedangkan pada tumbuhan antara 50°C-60°C. Sebagian enzim terdanaturasi pada suhu di atas
60°C.
BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Dari percobaan serta tinjauan pustaka yang ada, maka dapat dismpulkan bahwa :
Comision on Enzymes of the International Union of Biochemistry, enzim dibagi dalam
enam golongan besar berdasarkan reaksi : 1)Oksidoreduktase, 2) Transferase, 3) Hidrolase, 4)
Liase, 5) Isomerase, dan 6. Ligase.

Beberapa factor yang mempengaruhi kerja enzim adalah sebagai berikut; konsentrasi
substrat, pH, temperature (suhu), dan inhibitor (reversible dan nonrevesibel).

Kofaktor suatu enzim terdiri atas: gugus prostetik, koenzim dan activator. Gugus prostetik
ialah kelompok kofaktor yang terikat pada enzim dan tidak mudah terlepas dari enzimnya. Suatu
koenzim adalah molekul organic terkecil, tahan terhadap panas, yang mudah terdisosiasi dan dapat
dipisahkan dari enzimnya, dengan cara dialisis. Contoh koenzim ialah NAD, NADP, asam tetra
hidrofosfat, tiamin pirofosfat (TPP). Activator pada umumnya ialah ion-ion logam yang dapat

terikat atau mudah terlepas dari enzim. Contoh activator logam ialah K+, Mn++, Mg++, Cu++, Zn++.
DAFTAR PUSTAKA
Fessenden. 1986. Kimia Organik Jilid 2. Jakarta : Erlangga.

Girindra, A. 1986. Biokimia I. Gramedia, Jakarta.

Hawab, HM. 2004. Pengantar Biokimia. Jakarta : Bayu Media Publishing.

Lehninger. 1991. Dasar-dasar Biokimia Jilid 1. Jakarta : Erlangga

Poedjiyadi, Anna dkk. 2006. Dasar-DasarBiokimia. Jakarta : UI-Press.9

Suminar & Petrucci. 1999. Kimia Dasar Prinsip dan Terapan Modern. Jakarta : Erlangga

Team Teaching. 2010. Modul Dasar-Dasar Biokimia. Gorontalo

http://www.pengetahuan-protein.html/januari/10/2010

http://www. Chem-Is-Try.Org_SitusKimiaIndonesia_.com.maret/05/2009