Cloning molekul, struktur gen dan ekspresi dua gen

peroxisomal 3-ketoacyl-CoA thiolase tikus

Ringkasan

Latar belakang : Pada tikus, dua gen peroxisomal 3-ketoacyl-CoA (A dan B) telah dilakukan
cloning. Dimana hanya satu gen thiolase yang ditemukan pada manusia. Tujuan dari studi ini
telah dilakukan cloning gen thiolase yang berbeda pada tikus, yang mengatur ekspresi kedua
jaringannya danpenggabungan aktivitas enzimatiknya.

Laporan : Pada studi ini telah dilakukan cloning dan karakterisasi dua gen peroxisomal 3-
ketoacyl-CoA tikus (A dan B). Kedua gen thiolase A dan B mengandung 12 ekson dan 11 intron.
Dengan menggunakan RNA yang diekstrak dari hati tikus, dilakukan cloning yang
menghubungkan dua cDNAs. Thiolase A dan B dari cDNAs memiliki sebuah kerangka baca dari
1272 nukleotida yang mengkode protein dari 424 asam amino. Di dalam urutan pengkodean, dua
gen thiolase ditunjukkan ≈97% sekuensing nukleotida yang identik dan ≈96% identik pada
tingkat asam amino. Ekspresi pada jaringan khusus dari dua gen peroxisomal 3-ketoacyl-CoA
telah dipelajari pada mice. Thiolase A mRNA terutama diekspresikan di dalam hati dan usus,
sementara itu thiolase B mRNA esensial ditunjukkan ekspresi pada hati dan tingkat yang lebih
lemah pada ginjal, usus dan jaringan sel darah putih. Thiolase A dan B mengekspresikan pada
jaringan lain seperti otak atau otot, meskipun jaringan ini sangat lemah terutama yang terlibat
dalam penyampaian pesan peroxisom. Pada tingkat enzim, aktivitas thiolase