Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan

Inokulasi Mikroba

FPIKUnpad

1. Tujuan Praktikum ini bertujuan meningkatkan keterampilan praktikan dalam menginokulasi mikroba. 2. Landasan Teori Salah satu tahapan identifikasi mikroba adalah inokulasi mikroba. Inokulasi dimaksudkan untuk menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni. Inokulasi dapat dilakukan pada media cair (broth) atau padat (solid). Inokulasi mikroba pada media cair dapat dilakukan menggunakan media kaldu yang disimpan dalam labu Erlenmeyer. Inokulasi mikroba pada media padat dapat dilakukan pada agar lempeng, miring dan tegak. Inokulasi mikroba pada agar lempeng, yaitu menginokulasi mikroba ke agar lempeng untuk memurnikan mikroba. Inokulasi mikroba pada agar lempeng dapat dilakukan dengan tiga cara, yaitu lempeng gores (streak plate), lempeng tuang (pour plate), dan lempeng sebar (spread plate). Inokulasi mikroba dengan cara lempeng gores dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba pada agar lempeng dengan cara menggores (streaking) permukaan agar menggunakan jarum ose yang mengandung mikroba inokulan. Dengan teknik ini mikroba yang tumbuh akan tampak dalam bentuk goresan. Ada beberapa teknik menggores yang biasa digunakan (Gambar 1).

Mikrobiologi Perikanan

1

in/microbiology/microbiology-toolstechniques/images/various-methods-of-streaking. Mikrobiologi Perikanan 2 . Inokulasi mikroba dengan cara lempeng sebar dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di bagian permukaan media agar. Cara inokulasi ini dapat dilakukan dengan dua cara.jpg&imgrefurl Inokulasi mikroba dengan cara lempeng tuang dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di media agar dengan cara mencampurkan kultur mikroba ke media agar hangat yang masih cair.studentsguide. Teknik ini bertujuan agar mikroba tumbuh tersebar merata di seluruh media agar. Pola goresan pada media agar Sumber : http://www.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Gambar 1. yaitu dengan pemipetan (pipetting) dan penghapusan (swabbing).

yaitu menginokulasi mikroba ke agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Bacterial_Inhibitio n/Pour_seeded_agar_P7231208md.jpg&imgrefurl Agar miring (slant).jpg 3.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pictures/tsi.uc. (a) (b) Gambar 3.clayton.clc. Alat dan Bahan Mikrobiologi Perikanan 3 . Inokulasi mikroba dengan metode tuang (a) dan pipet (b) http://biology.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad (a) Sumber : (b) Gambar 2. Setiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang khas. yaitu menginokulasi mikroba ke agar tegak dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh. Agar tegak (deep). Inokulasi mikroba pada agar miring (a) dan agar tegak (b) Sumber : http://a-s.

Lakukan pengambilan mikroba dari cairan fermentasi kubis dan inokulasikan ke media agar miring dan agar tegak. Adapun tahapan inokulasi mikroba adalah : 1. 2. Pengambilan mikroba dilakukan dengan menggunakan ose sebagai berikut : Mikrobiologi Perikanan 4 . Alat a. Sterilisasi ruang. semua peralatan dan lingkungan harus steril sehingga dapat dicegah kemungkinan terjadinya kontaminasi. Sterilisasi dapat dilakukan secara kering atau basah. peralatan.2.1. Prosedur Kerja Untuk menginokulasi mikroba. Bahan a. Agar tegak dan agar miring b. Tabung reaksi d. Ose b. Tisu 3. pakaian dan praktikan sehingga dapat meminimalkan terjadinya kontaminasi .Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad 3. Lampu Bunsen c. Biakan fermentasi kubis 4. Inkubator e.

Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Panaskan ujung ose hingga berpijar. Pegang tabung reaksi berisi mikroba dan tabung reaksi yang akan diinokulasi pada satu tangan. Dinginkan ose selama 10-20 detik. Buka kedua tutup tabung reaksi menggunakan tangan yang memegang ose Panaskan mulut tabung reaksi dengan melewatkan sekilas melalui api Ambil sample mikroba dari tabung reaksi menggunakan ose. Panaskan pula kawat baja hingga ke pangkal pegangan. baik ose berbentuk lingkaran atau jarum Mikrobiologi Perikanan 5 . Bagian api berwarna biru paling panas sehingga bias memanaskan ose lebih cepat. sementara tangan lainnya tetap memegang ose. Ose jangan diletakkan di atas meja untuk mencegah kontaminasi.

Mikroba yang telah diinokulasi selanjutnya diinkubasi selama 2 x 24 jam di dalam incubator. Sumber : faculty. goreskan ose lingkaran ke permukaan media agar dengan pola lurus atau zigzag secara hati-hati tanpa ditekan sehingga tidak merusak permukaan agar.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Panaskan kembali mulut tabung reaksi sebelum ditutup Sentuhkan koloni mikroba pada ujung ose ke media tanpa merusak permukaan agar. Saat menginokulasi ke media agar tegak dan miring. Hasil Pengamatan Mikrobiologi Perikanan 6 .edu/.clintoncc. Inokulasi pada agar tegak dilakukan dengan menusukkan ose jarum ke dalam media agar hingga mencapai dasar tabung reaksi dan kemudian dicabut kembali. Amati karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.. 5../Procaryotes. 4.suny.htm 3.

................................... Pembahasan Buat pembahasan mengenai kegiatan praktikum inokulasi mikroba yang saudara kerjakan................................................................................... ............... Gambar Agar miring Deskripsi Agar tegak 6.........................Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Berdasarkan prosedur kerja yang dilaksanakan.............................. ........................................ maka lakukan pengamatan terhadap hasil inokulasi. Buat gambar pertumbuhan mikroba dari masing-masing teknik inokulasi....................... Kesimpulan apa yang Saudara dapatkan? ................ Mikrobiologi Perikanan 7 ..........................

....... .................................... .......... ....................................................................................... ......................................................................................................... ........................................................ .............. ............................................................................................................................................................................................................................................... ................................................................................................................................................................................................................... maka praktikan diwajibkan menjawab pertanyaan berikut ini : Mikrobiologi Perikanan 8 ..................................................................... Pendalaman Untuk meningkatkan pemahaman mengenai proses inokulasi mikroba....................... ......................... ............................................................................................................ ...... ........................................................................... .................. ..................................................................................................................................... 7.................................................................................................................................................................................... ............................................................................................................. ................................................................................................................................... ..........................Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad ....................................................................................................................................................................................................................................................................................... ........................................................ ......... .......

Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Inc. Fardiaz. Pustaka Apriyantono. Microbiology : A Laboratory Manual.G. Puspitasari. Menlo Park.L. 1987. California.. Sherman. and N. The Benjamin/Cummings Publishing Company. Sedarnawati dan S.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad 1. A. Mikrobiologi Perikanan 9 . N. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Petunjuk Laboratorium Analisis Pangan. Apa tujuan utama inokulasi mikroba pada media lempeng agar? ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… 2. Berdasarkan hasil yang diperoleh. jelaskan oleh Saudara apa perbedaan tujuan inokulasi mikroba pada media agar miring dan agar tegak? ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… 8. Budiyanto. Cappuccino J. D. Institut Pertanian Bogor. 1989.

clayton.clintoncc. Seeley.W. F.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pict ures/tsi. http ://faculty. Media Study Guide. United State of America. New York. 1988. http://as. H..htm Streaking Agar Plates.edu/.suny.J.J.J. Lee. Freeman and Company.jpg&imgrefurl Post.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Furlong.madsci.. P. 2008. Vandemark dan J. Star Publishing Company. Microbe in Action. 2008./ Procaryotes. A Laboratory Manual of Microbiology. W.. Mikrobiologi Perikanan 10 . Prokaryotes. http://www.org/~lynn/ micro/techniques/streaking/secondary.H. A Laboratory Manual for Food Microbiology and Biotechnology.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful