Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan

Inokulasi Mikroba

FPIKUnpad

1. Tujuan Praktikum ini bertujuan meningkatkan keterampilan praktikan dalam menginokulasi mikroba. 2. Landasan Teori Salah satu tahapan identifikasi mikroba adalah inokulasi mikroba. Inokulasi dimaksudkan untuk menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni. Inokulasi dapat dilakukan pada media cair (broth) atau padat (solid). Inokulasi mikroba pada media cair dapat dilakukan menggunakan media kaldu yang disimpan dalam labu Erlenmeyer. Inokulasi mikroba pada media padat dapat dilakukan pada agar lempeng, miring dan tegak. Inokulasi mikroba pada agar lempeng, yaitu menginokulasi mikroba ke agar lempeng untuk memurnikan mikroba. Inokulasi mikroba pada agar lempeng dapat dilakukan dengan tiga cara, yaitu lempeng gores (streak plate), lempeng tuang (pour plate), dan lempeng sebar (spread plate). Inokulasi mikroba dengan cara lempeng gores dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba pada agar lempeng dengan cara menggores (streaking) permukaan agar menggunakan jarum ose yang mengandung mikroba inokulan. Dengan teknik ini mikroba yang tumbuh akan tampak dalam bentuk goresan. Ada beberapa teknik menggores yang biasa digunakan (Gambar 1).

Mikrobiologi Perikanan

1

Teknik ini bertujuan agar mikroba tumbuh tersebar merata di seluruh media agar. yaitu dengan pemipetan (pipetting) dan penghapusan (swabbing). Pola goresan pada media agar Sumber : http://www.in/microbiology/microbiology-toolstechniques/images/various-methods-of-streaking. Cara inokulasi ini dapat dilakukan dengan dua cara.studentsguide. Mikrobiologi Perikanan 2 .Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Gambar 1.jpg&imgrefurl Inokulasi mikroba dengan cara lempeng tuang dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di media agar dengan cara mencampurkan kultur mikroba ke media agar hangat yang masih cair. Inokulasi mikroba dengan cara lempeng sebar dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di bagian permukaan media agar.

(a) (b) Gambar 3. yaitu menginokulasi mikroba ke agar tegak dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh. Setiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang khas. Inokulasi mikroba dengan metode tuang (a) dan pipet (b) http://biology.jpg 3. yaitu menginokulasi mikroba ke agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad (a) Sumber : (b) Gambar 2.clc.clayton. Agar tegak (deep).edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Bacterial_Inhibitio n/Pour_seeded_agar_P7231208md. Inokulasi mikroba pada agar miring (a) dan agar tegak (b) Sumber : http://a-s. Alat dan Bahan Mikrobiologi Perikanan 3 .edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pictures/tsi.jpg&imgrefurl Agar miring (slant).uc.

Sterilisasi ruang. pakaian dan praktikan sehingga dapat meminimalkan terjadinya kontaminasi . 2. Adapun tahapan inokulasi mikroba adalah : 1. semua peralatan dan lingkungan harus steril sehingga dapat dicegah kemungkinan terjadinya kontaminasi. Inkubator e. Tisu 3. Ose b. Tabung reaksi d. Prosedur Kerja Untuk menginokulasi mikroba. peralatan. Biakan fermentasi kubis 4. Agar tegak dan agar miring b.2. Alat a.1. Pengambilan mikroba dilakukan dengan menggunakan ose sebagai berikut : Mikrobiologi Perikanan 4 . Bahan a. Sterilisasi dapat dilakukan secara kering atau basah. Lakukan pengambilan mikroba dari cairan fermentasi kubis dan inokulasikan ke media agar miring dan agar tegak. Lampu Bunsen c.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad 3.

Panaskan pula kawat baja hingga ke pangkal pegangan. Pegang tabung reaksi berisi mikroba dan tabung reaksi yang akan diinokulasi pada satu tangan. sementara tangan lainnya tetap memegang ose. Bagian api berwarna biru paling panas sehingga bias memanaskan ose lebih cepat. Dinginkan ose selama 10-20 detik. baik ose berbentuk lingkaran atau jarum Mikrobiologi Perikanan 5 . Ose jangan diletakkan di atas meja untuk mencegah kontaminasi. Buka kedua tutup tabung reaksi menggunakan tangan yang memegang ose Panaskan mulut tabung reaksi dengan melewatkan sekilas melalui api Ambil sample mikroba dari tabung reaksi menggunakan ose.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Panaskan ujung ose hingga berpijar.

.edu/. Inokulasi pada agar tegak dilakukan dengan menusukkan ose jarum ke dalam media agar hingga mencapai dasar tabung reaksi dan kemudian dicabut kembali. goreskan ose lingkaran ke permukaan media agar dengan pola lurus atau zigzag secara hati-hati tanpa ditekan sehingga tidak merusak permukaan agar. Mikroba yang telah diinokulasi selanjutnya diinkubasi selama 2 x 24 jam di dalam incubator. Saat menginokulasi ke media agar tegak dan miring.htm 3./Procaryotes. Hasil Pengamatan Mikrobiologi Perikanan 6 . 5. 4. Sumber : faculty.clintoncc.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Panaskan kembali mulut tabung reaksi sebelum ditutup Sentuhkan koloni mikroba pada ujung ose ke media tanpa merusak permukaan agar.. Amati karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.suny.

............................................................................................................................................... maka lakukan pengamatan terhadap hasil inokulasi........................... Mikrobiologi Perikanan 7 .......................................... ......... Buat gambar pertumbuhan mikroba dari masing-masing teknik inokulasi.. Pembahasan Buat pembahasan mengenai kegiatan praktikum inokulasi mikroba yang saudara kerjakan........ Gambar Agar miring Deskripsi Agar tegak 6......... Kesimpulan apa yang Saudara dapatkan? .... ...............Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Berdasarkan prosedur kerja yang dilaksanakan...................................

..................................................... ......................... ........................ .............................................................................................................................................. ..... .......................................................................... ................................ ...................................................................................................................................................................................................................................... ................................ ................ ..................................................................................... ................... 7................................................................................... .......... ........................................................................................................... .................................................................................................................................... ......................................... ...............................................................................................................................................Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad .......................................... ................................................................ ....................................................................................................................................................... maka praktikan diwajibkan menjawab pertanyaan berikut ini : Mikrobiologi Perikanan 8 ............................................................................. ............................................................................................................................................................................... Pendalaman Untuk meningkatkan pemahaman mengenai proses inokulasi mikroba.......................................................... .......................................................................................................................................................................................................

Menlo Park. Sedarnawati dan S. Inc. Pustaka Apriyantono.. A. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Apa tujuan utama inokulasi mikroba pada media lempeng agar? ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… 2. and N. California. Mikrobiologi Perikanan 9 . Budiyanto.L. Microbiology : A Laboratory Manual. 1989. Fardiaz. Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Puspitasari.G. The Benjamin/Cummings Publishing Company. Institut Pertanian Bogor. D. 1987.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad 1. Berdasarkan hasil yang diperoleh. Sherman. jelaskan oleh Saudara apa perbedaan tujuan inokulasi mikroba pada media agar miring dan agar tegak? ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… 8. N. Cappuccino J. Petunjuk Laboratorium Analisis Pangan.

Lee. Freeman and Company. Seeley. Prokaryotes. 1988.clayton.. A Laboratory Manual for Food Microbiology and Biotechnology. Media Study Guide. http://www.htm Streaking Agar Plates.org/~lynn/ micro/techniques/streaking/secondary. http ://faculty.edu/. Mikrobiologi Perikanan 10 .Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Furlong. F. H.madsci.. 2008.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pict ures/tsi. W. P.J.W. Star Publishing Company. A Laboratory Manual of Microbiology. United State of America. http://as. 2008.clintoncc./ Procaryotes.jpg&imgrefurl Post. New York. Microbe in Action. Vandemark dan J.J.H.J.suny..

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful