Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan

Inokulasi Mikroba

FPIKUnpad

1. Tujuan Praktikum ini bertujuan meningkatkan keterampilan praktikan dalam menginokulasi mikroba. 2. Landasan Teori Salah satu tahapan identifikasi mikroba adalah inokulasi mikroba. Inokulasi dimaksudkan untuk menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni. Inokulasi dapat dilakukan pada media cair (broth) atau padat (solid). Inokulasi mikroba pada media cair dapat dilakukan menggunakan media kaldu yang disimpan dalam labu Erlenmeyer. Inokulasi mikroba pada media padat dapat dilakukan pada agar lempeng, miring dan tegak. Inokulasi mikroba pada agar lempeng, yaitu menginokulasi mikroba ke agar lempeng untuk memurnikan mikroba. Inokulasi mikroba pada agar lempeng dapat dilakukan dengan tiga cara, yaitu lempeng gores (streak plate), lempeng tuang (pour plate), dan lempeng sebar (spread plate). Inokulasi mikroba dengan cara lempeng gores dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba pada agar lempeng dengan cara menggores (streaking) permukaan agar menggunakan jarum ose yang mengandung mikroba inokulan. Dengan teknik ini mikroba yang tumbuh akan tampak dalam bentuk goresan. Ada beberapa teknik menggores yang biasa digunakan (Gambar 1).

Mikrobiologi Perikanan

1

Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Gambar 1. Inokulasi mikroba dengan cara lempeng sebar dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di bagian permukaan media agar.jpg&imgrefurl Inokulasi mikroba dengan cara lempeng tuang dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di media agar dengan cara mencampurkan kultur mikroba ke media agar hangat yang masih cair. Cara inokulasi ini dapat dilakukan dengan dua cara.in/microbiology/microbiology-toolstechniques/images/various-methods-of-streaking. Pola goresan pada media agar Sumber : http://www. Mikrobiologi Perikanan 2 .studentsguide. Teknik ini bertujuan agar mikroba tumbuh tersebar merata di seluruh media agar. yaitu dengan pemipetan (pipetting) dan penghapusan (swabbing).

(a) (b) Gambar 3. Alat dan Bahan Mikrobiologi Perikanan 3 .clayton. Inokulasi mikroba pada agar miring (a) dan agar tegak (b) Sumber : http://a-s.clc.jpg 3. Agar tegak (deep).uc. Setiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang khas.jpg&imgrefurl Agar miring (slant). Inokulasi mikroba dengan metode tuang (a) dan pipet (b) http://biology.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad (a) Sumber : (b) Gambar 2. yaitu menginokulasi mikroba ke agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Bacterial_Inhibitio n/Pour_seeded_agar_P7231208md. yaitu menginokulasi mikroba ke agar tegak dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pictures/tsi.

Tabung reaksi d.2. Biakan fermentasi kubis 4. Inkubator e. Ose b. Pengambilan mikroba dilakukan dengan menggunakan ose sebagai berikut : Mikrobiologi Perikanan 4 . Prosedur Kerja Untuk menginokulasi mikroba. Agar tegak dan agar miring b. Sterilisasi dapat dilakukan secara kering atau basah. peralatan. semua peralatan dan lingkungan harus steril sehingga dapat dicegah kemungkinan terjadinya kontaminasi.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad 3. Bahan a. Tisu 3. Alat a.1. Lakukan pengambilan mikroba dari cairan fermentasi kubis dan inokulasikan ke media agar miring dan agar tegak. 2. Adapun tahapan inokulasi mikroba adalah : 1. pakaian dan praktikan sehingga dapat meminimalkan terjadinya kontaminasi . Sterilisasi ruang. Lampu Bunsen c.

Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Panaskan ujung ose hingga berpijar. Ose jangan diletakkan di atas meja untuk mencegah kontaminasi. Panaskan pula kawat baja hingga ke pangkal pegangan. Pegang tabung reaksi berisi mikroba dan tabung reaksi yang akan diinokulasi pada satu tangan. Buka kedua tutup tabung reaksi menggunakan tangan yang memegang ose Panaskan mulut tabung reaksi dengan melewatkan sekilas melalui api Ambil sample mikroba dari tabung reaksi menggunakan ose. sementara tangan lainnya tetap memegang ose. baik ose berbentuk lingkaran atau jarum Mikrobiologi Perikanan 5 . Dinginkan ose selama 10-20 detik. Bagian api berwarna biru paling panas sehingga bias memanaskan ose lebih cepat.

Inokulasi pada agar tegak dilakukan dengan menusukkan ose jarum ke dalam media agar hingga mencapai dasar tabung reaksi dan kemudian dicabut kembali.suny. Saat menginokulasi ke media agar tegak dan miring. Hasil Pengamatan Mikrobiologi Perikanan 6 . goreskan ose lingkaran ke permukaan media agar dengan pola lurus atau zigzag secara hati-hati tanpa ditekan sehingga tidak merusak permukaan agar.htm 3. Mikroba yang telah diinokulasi selanjutnya diinkubasi selama 2 x 24 jam di dalam incubator.clintoncc..edu/. Amati karakteristik koloni mikroba yang tumbuh. 4../Procaryotes. Sumber : faculty. 5.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Panaskan kembali mulut tabung reaksi sebelum ditutup Sentuhkan koloni mikroba pada ujung ose ke media tanpa merusak permukaan agar.

....................................... Kesimpulan apa yang Saudara dapatkan? .............. Mikrobiologi Perikanan 7 .... Pembahasan Buat pembahasan mengenai kegiatan praktikum inokulasi mikroba yang saudara kerjakan.............. ... ..............................................................................................................................Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Berdasarkan prosedur kerja yang dilaksanakan........ Gambar Agar miring Deskripsi Agar tegak 6................................................... Buat gambar pertumbuhan mikroba dari masing-masing teknik inokulasi................................ maka lakukan pengamatan terhadap hasil inokulasi...

.............................................................................. ................................................................... ............................................ .................................................................................................................. ............................................ .................................................................. ..... ........................................... ................................................................................................................................................. Pendalaman Untuk meningkatkan pemahaman mengenai proses inokulasi mikroba..................................................................................................................................................................... ................................................................ ............................................................ ......................................................................................... ...... ........................................................ ................................................................................................................................................................................... 7.................................... .......................... ......................... ...........................................................................................................................................................................Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad .............................................................................. ......................................................................................... .................................................... maka praktikan diwajibkan menjawab pertanyaan berikut ini : Mikrobiologi Perikanan 8 ................................................................................................................................................................................................................................................ .............................................................................

Mikrobiologi Perikanan 9 .L. A. Berdasarkan hasil yang diperoleh. 1989. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan.G. California. Microbiology : A Laboratory Manual. Sedarnawati dan S. Petunjuk Laboratorium Analisis Pangan. and N. Fardiaz. Sherman. Pustaka Apriyantono. D. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Apa tujuan utama inokulasi mikroba pada media lempeng agar? ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… 2. Menlo Park. Institut Pertanian Bogor. jelaskan oleh Saudara apa perbedaan tujuan inokulasi mikroba pada media agar miring dan agar tegak? ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… ………………………………………………………… 8. 1987.. N. Cappuccino J. The Benjamin/Cummings Publishing Company. Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Puspitasari.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad 1. Inc. Budiyanto.

A Laboratory Manual for Food Microbiology and Biotechnology.org/~lynn/ micro/techniques/streaking/secondary. Vandemark dan J.htm Streaking Agar Plates.edu/. W. Mikrobiologi Perikanan 10 .clayton. P./ Procaryotes.. http://www.. Seeley. Prokaryotes.suny.J.H.J.jpg&imgrefurl Post. 2008.W. 1988. Star Publishing Company. http://as. New York. A Laboratory Manual of Microbiology. Lee. H.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pict ures/tsi.J. http ://faculty. 2008.. F.clintoncc. Freeman and Company. Media Study Guide.Laboratoriu m Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIKUnpad Furlong. United State of America.madsci. Microbe in Action.