Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan

Inokulasi Mikroba

FPIK-Unpad

1. Tujuan Praktikum ini bertujuan meningkatkan keterampilan praktikan dalam menginokulasi mikroba. 2. Landasan Teori Salah satu tahapan identifikasi mikroba adalah inokulasi mikroba. Inokulasi dimaksudkan untuk

menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni. Inokulasi dapat dilakukan pada media cair (broth) atau padat (solid). Inokulasi

mikroba pada media cair dapat dilakukan menggunakan media kaldu yang disimpan dalam labu Erlenmeyer. Inokulasi mikroba pada media padat dapat dilakukan pada agar lempeng, miring dan tegak. Inokulasi mikroba pada agar lempeng, yaitu menginokulasi mikroba ke agar lempeng untuk memurnikan mikroba. Inokulasi mikroba pada agar lempeng dapat dilakukan dengan tiga cara, yaitu lempeng gores (streak plate), lempeng tuang (pour plate), dan lempeng sebar (spread plate). Inokulasi mikroba dengan cara lempeng gores dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba pada agar lempeng dengan cara menggores (streaking)

permukaan agar menggunakan jarum ose yang mengandung mikroba inokulan. Dengan teknik ini mikroba yang

tumbuh akan tampak dalam bentuk goresan. Ada beberapa

Mikrobiologi Perikanan

1

in/microbiology/microbiology-toolstechniques/images/various-methods-of-streaking. Inokulasi mikroba dengan cara lempeng sebar dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di bagian permukaan media agar. Mikrobiologi Perikanan 2 .Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad teknik menggores yang biasa digunakan (Gambar 1). Gambar 1.jpg&imgrefurl Inokulasi mikroba dengan cara lempeng tuang dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di media agar dengan cara mencampurkan kultur mikroba ke media agar hangat yang masih cair. Pola goresan pada media agar Sumber : http://www. Teknik ini bertujuan agar mikroba tumbuh tersebar merata di seluruh media agar. yaitu dengan pemipetan (pipetting) dan penghapusan (swabbing).studentsguide. Cara inokulasi ini dapat dilakukan dengan dua cara.

edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Bacterial_Inhibitio n/Pour_seeded_agar_P7231208md.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad (a) (b) Gambar 2. Agar tegak (deep). yaitu menginokulasi mikroba ke agar tegak dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh. Inokulasi mikroba dengan metode tuang (a) dan pipet (b) Sumber : http://biology. Inokulasi mikroba pada agar miring (a) dan agar tegak (b) Mikrobiologi Perikanan 3 .clc.jpg&imgrefurl Agar miring (slant). Setiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang khas.uc. (a) (b) Gambar 3. yaitu menginokulasi mikroba ke agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.

Lakukan pengambilan mikroba dari cairan fermentasi kubis dan inokulasikan ke media agar miring dan agar tegak. Pengambilan mikroba dilakukan dengan menggunakan ose sebagai berikut : Mikrobiologi Perikanan 4 . Alat dan Bahan 3. Sterilisasi dapat dilakukan secara kering atau basah. Ose b. Alat a. Biakan fermentasi kubis 4. Lampu Bunsen c. Bahan a. semua peralatan dan lingkungan harus steril sehingga dapat dicegah kemungkinan terjadinya kontaminasi.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pictures/tsi.jpg 3. Tabung reaksi d. Prosedur Kerja Untuk menginokulasi mikroba. Sterilisasi ruang. Tisu 3. Agar tegak dan agar miring b. Inkubator e. peralatan.1.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Sumber : http://a-s.clayton. 2. pakaian dan praktikan sehingga dapat meminimalkan terjadinya kontaminasi . Adapun tahapan inokulasi mikroba adalah : 1.2.

Buka kedua tutup tabung reaksi menggunakan tangan yang memegang ose Panaskan mulut tabung reaksi dengan melewatkan sekilas melalui api Ambil sample mikroba dari tabung reaksi menggunakan ose. baik ose berbentuk lingkaran atau jarum Mikrobiologi Perikanan 5 . Bagian api berwarna biru paling panas sehingga bias memanaskan ose lebih cepat. sementara tangan lainnya tetap memegang ose. Dinginkan ose selama 10-20 detik. Panaskan pula kawat baja hingga ke pangkal pegangan. Ose jangan diletakkan di atas meja untuk mencegah kontaminasi. Pegang tabung reaksi berisi mikroba dan tabung reaksi yang akan diinokulasi pada satu tangan.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Panaskan ujung ose hingga berpijar.

Mikrobiologi Perikanan 6 .suny..htm 3.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Panaskan kembali mulut tabung reaksi sebelum ditutup Sentuhkan koloni mikroba pada ujung ose ke media tanpa merusak permukaan agar. Sumber : faculty. Mikroba yang telah diinokulasi selanjutnya diinkubasi selama 2 x 24 jam di dalam incubator..edu/. Inokulasi pada agar tegak dilakukan dengan menusukkan ose jarum ke dalam media agar hingga mencapai dasar tabung reaksi dan kemudian dicabut kembali. Amati karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.clintoncc./Procaryotes. Saat menginokulasi ke media agar tegak dan miring. goreskan ose lingkaran ke permukaan media agar dengan pola lurus atau zigzag secara hati-hati tanpa ditekan sehingga tidak merusak permukaan agar. 4.

Gambar Agar miring Deskripsi Agar tegak 6. Hasil Pengamatan Berdasarkan prosedur kerja yang dilaksanakan. maka lakukan pengamatan terhadap hasil inokulasi. Buat gambar pertumbuhan mikroba dari masing-masing teknik inokulasi. Pembahasan Buat pembahasan mengenai kegiatan praktikum inokulasi mikroba yang saudara kerjakan.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad 5. Kesimpulan apa Mikrobiologi Perikanan 7 .

............................................................ ............................................................................................ ............... .......................................................................................................................................................................................................... ............ ........ ...................................................................... ........................................................................................ ....................................................Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad yang Saudara dapatkan? ......................................................................................... Mikrobiologi Perikanan 8 ... .............................. ................................. ............................................................................................................................................................... ............................................................................................. ................................................................................... ................................................................................................................................................................... ...... ................ ............................................................................................................................................................................................................................................................................................ ................................................................. ............................................................................................................................ ...... ...................................................................................................................................................................................................................................................................................................................... ..................................................................................................................................................

...... Berdasarkan hasil yang diperoleh.................... jelaskan oleh Saudara apa perbedaan tujuan inokulasi mikroba pada media agar miring dan agar tegak? «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« 8.... maka praktikan diwajibkan menjawab pertanyaan berikut ini : 1.. 7.......................... Pendalaman Untuk meningkatkan pemahaman mengenai proses inokulasi mikroba............Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad ........................... Apa tujuan utama inokulasi mikroba pada media lempeng agar? «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« 2.. Pustaka Mikrobiologi Perikanan 9 ....

F. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. W. 1988. N. P. Prokaryotes. Furlong.edu/. Inc. A Laboratory Manual of Microbiology.. Seeley.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pict ures/tsi. 2008. Microbe in Action.madsci. Menlo Park. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi.clintoncc.htm Streaking Agar Plates. H.org/~lynn/ micro/techniques/streaking/secondary. Star Publishing Company. California. 1987. Budiyanto. D. Petunjuk Laboratorium Analisis Pangan. Vandemark dan J. New York. Cappuccino J.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Apriyantono.L. The Benjamin/Cummings Publishing Company. and N. A.suny. Mikrobiologi Perikanan 10 . http://as. Sedarnawati dan S. 1989. Sherman. Lee. 2008... Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi./ Procaryotes. Fardiaz. Microbiology : A Laboratory Manual. A Laboratory Manual for Food Microbiology and Biotechnology. United State of America.. Freeman and Company.clayton. Institut Pertanian Bogor.H. Puspitasari.J.J.J.G.W. http://www.jpg&imgrefurl Post. Media Study Guide. http ://faculty.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful