Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan

Inokulasi Mikroba

FPIK-Unpad

1. Tujuan Praktikum ini bertujuan meningkatkan keterampilan praktikan dalam menginokulasi mikroba. 2. Landasan Teori Salah satu tahapan identifikasi mikroba adalah inokulasi mikroba. Inokulasi dimaksudkan untuk

menumbuhkan, meremajakan mikroba dan mendapatkan populasi mikroba yang murni. Inokulasi dapat dilakukan pada media cair (broth) atau padat (solid). Inokulasi

mikroba pada media cair dapat dilakukan menggunakan media kaldu yang disimpan dalam labu Erlenmeyer. Inokulasi mikroba pada media padat dapat dilakukan pada agar lempeng, miring dan tegak. Inokulasi mikroba pada agar lempeng, yaitu menginokulasi mikroba ke agar lempeng untuk memurnikan mikroba. Inokulasi mikroba pada agar lempeng dapat dilakukan dengan tiga cara, yaitu lempeng gores (streak plate), lempeng tuang (pour plate), dan lempeng sebar (spread plate). Inokulasi mikroba dengan cara lempeng gores dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba pada agar lempeng dengan cara menggores (streaking)

permukaan agar menggunakan jarum ose yang mengandung mikroba inokulan. Dengan teknik ini mikroba yang

tumbuh akan tampak dalam bentuk goresan. Ada beberapa

Mikrobiologi Perikanan

1

in/microbiology/microbiology-toolstechniques/images/various-methods-of-streaking. Teknik ini bertujuan agar mikroba tumbuh tersebar merata di seluruh media agar.studentsguide. Cara inokulasi ini dapat dilakukan dengan dua cara. Gambar 1. Mikrobiologi Perikanan 2 .jpg&imgrefurl Inokulasi mikroba dengan cara lempeng tuang dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di media agar dengan cara mencampurkan kultur mikroba ke media agar hangat yang masih cair. Pola goresan pada media agar Sumber : http://www.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad teknik menggores yang biasa digunakan (Gambar 1). Inokulasi mikroba dengan cara lempeng sebar dimaksudkan untuk menumbuhkan mikroba di bagian permukaan media agar. yaitu dengan pemipetan (pipetting) dan penghapusan (swabbing).

edu/fankhauser/Labs/Microbiology/Bacterial_Inhibitio n/Pour_seeded_agar_P7231208md.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad (a) (b) Gambar 2.uc. (a) (b) Gambar 3. Setiap bakteri memiliki karakteristik koloni yang khas.jpg&imgrefurl Agar miring (slant).clc. yaitu menginokulasi mikroba ke agar miring di dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh. yaitu menginokulasi mikroba ke agar tegak dalam tabung reaksi untuk melihat karakteristik koloni mikroba yang tumbuh. Inokulasi mikroba dengan metode tuang (a) dan pipet (b) Sumber : http://biology. Agar tegak (deep). Inokulasi mikroba pada agar miring (a) dan agar tegak (b) Mikrobiologi Perikanan 3 .

Tabung reaksi d. 2. Tisu 3. Pengambilan mikroba dilakukan dengan menggunakan ose sebagai berikut : Mikrobiologi Perikanan 4 . Agar tegak dan agar miring b. Adapun tahapan inokulasi mikroba adalah : 1. Biakan fermentasi kubis 4. Bahan a.jpg 3.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Sumber : http://a-s. Prosedur Kerja Untuk menginokulasi mikroba. pakaian dan praktikan sehingga dapat meminimalkan terjadinya kontaminasi . peralatan. Sterilisasi ruang.1.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pictures/tsi. Alat dan Bahan 3. Lakukan pengambilan mikroba dari cairan fermentasi kubis dan inokulasikan ke media agar miring dan agar tegak. Ose b.2. Lampu Bunsen c. Alat a. semua peralatan dan lingkungan harus steril sehingga dapat dicegah kemungkinan terjadinya kontaminasi. Sterilisasi dapat dilakukan secara kering atau basah.clayton. Inkubator e.

Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Panaskan ujung ose hingga berpijar. Dinginkan ose selama 10-20 detik. Bagian api berwarna biru paling panas sehingga bias memanaskan ose lebih cepat. Panaskan pula kawat baja hingga ke pangkal pegangan. Buka kedua tutup tabung reaksi menggunakan tangan yang memegang ose Panaskan mulut tabung reaksi dengan melewatkan sekilas melalui api Ambil sample mikroba dari tabung reaksi menggunakan ose. sementara tangan lainnya tetap memegang ose. baik ose berbentuk lingkaran atau jarum Mikrobiologi Perikanan 5 . Pegang tabung reaksi berisi mikroba dan tabung reaksi yang akan diinokulasi pada satu tangan. Ose jangan diletakkan di atas meja untuk mencegah kontaminasi.

Sumber : faculty.. Inokulasi pada agar tegak dilakukan dengan menusukkan ose jarum ke dalam media agar hingga mencapai dasar tabung reaksi dan kemudian dicabut kembali. goreskan ose lingkaran ke permukaan media agar dengan pola lurus atau zigzag secara hati-hati tanpa ditekan sehingga tidak merusak permukaan agar./Procaryotes. Mikrobiologi Perikanan 6 .Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Panaskan kembali mulut tabung reaksi sebelum ditutup Sentuhkan koloni mikroba pada ujung ose ke media tanpa merusak permukaan agar.htm 3.edu/.clintoncc. Saat menginokulasi ke media agar tegak dan miring. 4. Mikroba yang telah diinokulasi selanjutnya diinkubasi selama 2 x 24 jam di dalam incubator.suny.. Amati karakteristik koloni mikroba yang tumbuh.

Buat gambar pertumbuhan mikroba dari masing-masing teknik inokulasi. Pembahasan Buat pembahasan mengenai kegiatan praktikum inokulasi mikroba yang saudara kerjakan. Kesimpulan apa Mikrobiologi Perikanan 7 . Hasil Pengamatan Berdasarkan prosedur kerja yang dilaksanakan. maka lakukan pengamatan terhadap hasil inokulasi.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad 5. Gambar Agar miring Deskripsi Agar tegak 6.

......................................................................... .................................................................... Mikrobiologi Perikanan 8 ........................................................... ...................................................................................................... ................................................................................................................ ..................................................................................................................................................................................................................... ........................ ....Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad yang Saudara dapatkan? ........................................................... .............................................................. ............................... ................... ............................................................................................................................................................................................................................ ....................................................................................... ...................................................................................................................................................................................... .......................................................................................................... ........................ ........................................... ................................. .............. .............................................................................................................................. .................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................... ........................................................................................................ ....................................... .................

..Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad ......... jelaskan oleh Saudara apa perbedaan tujuan inokulasi mikroba pada media agar miring dan agar tegak? «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« 8................. Pustaka Mikrobiologi Perikanan 9 ....... Apa tujuan utama inokulasi mikroba pada media lempeng agar? «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« «««««««««««««««««««««« 2........... maka praktikan diwajibkan menjawab pertanyaan berikut ini : 1.............................. Berdasarkan hasil yang diperoleh.. Pendalaman Untuk meningkatkan pemahaman mengenai proses inokulasi mikroba..... 7....................

Sherman. Vandemark dan J.J. Direktorat Jenderal Pendidikan Tinggi. Mikrobiologi Perikanan 10 .L..org/~lynn/ micro/techniques/streaking/secondary. http://www. Puspitasari.W. Furlong. and N. F./ Procaryotes. W. Fardiaz. Microbe in Action. A Laboratory Manual for Food Microbiology and Biotechnology. Sedarnawati dan S. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan. http ://faculty. United State of America.H. 1989. P. Freeman and Company. New York.edu/.htm Streaking Agar Plates.Laboratorium Teknologi Industri Hasil Perikanan Inokulasi Mikroba FPIK-Unpad Apriyantono. http://as. 1988.. Budiyanto. N. Star Publishing Company.clintoncc. Pusat Antar Universitas Pangan dan Gizi. Microbiology : A Laboratory Manual. Inc.clayton. Lee.suny. The Benjamin/Cummings Publishing Company. Cappuccino J. California. Menlo Park. Media Study Guide.. Institut Pertanian Bogor. D.G. 1987. H. A Laboratory Manual of Microbiology.. Petunjuk Laboratorium Analisis Pangan. 2008. 2008.J. A. Seeley.jpg&imgrefurl Post. Prokaryotes.J.edu/furlong/BIOL2250LAB/Reviews/pict ures/tsi.madsci.