Matatula. A.J. : Subsb'tusi Media MS Dengan Air Kelapa . . .

SUBSTlTUSl MEDIA MS DENGAN AIR KELAPA DAN GANDASIL-D

PAbA KULTUR JARINGAN KRISAN

, - Avia Jolanda Matatula*)

t .

ABSTRACT

Matatula, A. J. 2003. Substitution o f MS Medium with Coconut Nater and

Gsndasil-D on Chrysanthemum Tissue Culture. Eugenia 9 (4) : 203-211.
The purpose ofthis research is to find right substitution of the MS medium with m n u t water and
Gandasil-D on the tissue culture of the chrysanthemum plant. The research results show that the
substitulion MS 50 % medium with oomnut water without Gaildasil-D gives the highest result on the plant
height, shoot fresh weight, and root fresh weigh1

Keywords: Coconut Water, Tissue Cuiture, Subsfitution, Ch~ysanthernum.

PENDAHULUAN Keberhasiian dalarn penggurraan

Di Indonesia krisan rnerupakan bu-
q
nga potong yang cukup populer dan men-
duduki urutan tertinggi di antara bunga
1 potong non anggrek (Sawono 1992). Hal
" d
ini disebabkan krisan rnernpunyai bat
yang harum, bentuk dan ukuran bunga
yang bervariasi serta wama yang ber-
aneka ragam sehingga rnernberikan daya
tank tersendiri (Ashari 1995).
Perrnintaan akan bunga potong khu-
susnya krisan di kota-kota besar seperti:
Jakarta, Bandung, Malang, Manado dan
Deilpasar rneningkat rata-rata 10 % per
tahun (Sawono 1992). Dengan sernakin
meningkatnya permintaan, makz perlu di-
upayakan sistern budidaya yang lebih
baik, kzrena dengan perbanyakan secara
., . konvensional rnernbutuhkan waktu yang
lebih lana dan kualitas tanaman yang di-
hasilkan kurzng baik. Salah satu alternatif
.- untuk rnendapatkan tanaman dalarn jurn-
iah banyak dan dalam waktu singkat ada-
lah dengan melakukan perbanyakan rne-
laiui teknik kuiturjaringan.
rnetode kultur jaringan sangat tergantung
pada media yang digunakan. Menurut
Gunawan (1987) untuk mendapatkan ha-
sii yang lebih baik, air kelapa sering di-
tambahkan ke dalam media kultur
jaringan.
Media MS (Murashige and Skoog)
mengandung unsur hara makm dan mikm
yang tinggi yang rnarnpu menjamin per-
tumbuhan jaringan tanaman (Gunawan
1987). Untuk rnembuat larutan MS diper-
lukan biaya yang cukup mahal karena
untuk rnembuai 1 liter MS diperiukan
biayd sekitar Rp. 3000,- (hasil perhitung-
an 3i Laboratorium Bioteknologi Fakultas
Pertanian Unsrat bulan Juni 2000). Untuk
usaha yang tidak terlalu besar biaya ter-
sebut tidak terlalu berarti, tetapi jika di-
usahakan pada skala industri yang cukup
besar maka biaya pembuatan media ter-
sekit rnenjadi sangat mahal. Oleh karena
itu perlu dicari bahan altematif lain yang
dapac rnensubstitusi sebagian media MS
dengan harga yang lebih murcrh.

Juwsan Budidaya Pertanian. Fakultas Pertanian UNPAlTl Arnbon

Eugenla 9 (4) Oktober 2003

Menurut Wattimer~a,Mandang, dan dapat membe~ikan informasi tentang

Purwito (1990) penambahan air keiapa substitusi media MS dengan air kelapa
sebanyak 5 % sampai 25 % dapat mem- dan Gandasil-D yang terbaik yang dapat
perbaiki pertumbuhan tunas, mendormg digunakan pada perbanyakan kultur jari-
pertumbuhan kalus dan mendorong mor- ngan tanaman krisan dengan media yang .-
fogenesis. Mandang (1993) mendapatkan lebih murah.
substitusi media MS dengan air keiapa
sarnpai. 40 % dapat meningkatkan per-
tumbuhan kultur tanamankrisan. -.,

Air kelapa yang dihasilkan masyara- Penelitian ini diiaksanakaq di Labo-

kat selama ini kebanyakan ha'nya dibuang ratorium Bioteknologi Fakultas Pertanian
sebagai limbah. Padahal dengan melihat Universitas Sam Ratulangi Manado, mulai
berbagai kandungan yang terdapat pada dari bulan Maret sampai September 2002.
air kelapa, maka air kelapa dapat diguna- Bahan yang digunakan adaiah Eks-
kan sebagai bahan substitusi media MS. plan krisan (Chrysanthemum morifolium
Hal ini bertujuan untuk memperkecil biaya Ramat) berupa stek pucuk yang mempu-
untuk media yang sekarang ini makin nyai tiga daun yang telah diperbanyak se-
mahai harganya. cara in vitro, Gandasil-D, agar, media MS,
Beberapa peneliti mulai mencoba gula, NaOH, HCi, alkohol 70 %, alkohol
memodifikasi media MS dengan menggu- 95 %, spiritus, korek api, aquades, alumi-
nakan pupuk majemuk. Dengan memper- nium fo~l,kertas tissue, label, karet ge-
hitungkan 1:andungan nitrogen pada me- lang, dan air keiapa dari kelapa varietas
dium MS, Wang dan Hu (1982) berhasil Tenga umur 10 - 11 bulan yang U~peroleh
+.
memodifikasinya untuk in vitro tanman dari Balai Penelitlan Tanaman Kelapa
kentang. Menurut Purwito (1986) penggu- (BALiTW) Mapanget. Sedangkan peralat- ..
naan pupuk majemuk hyponex dapat me- an yang digunakan yakni : Botol kultur,
ningkatkan pertumbuhan tanaman ken- gzlas ukur, geias pengaduk, iabu ukur,
tang antara 30 - 40 %. Dengan demikian erlenmeyer, autoklaf, pipet, pinset gelas
maka pupuk daun majemuk (Gandasii-D) piala, guntiag, cawan petri, timbangan
diduga dapat digunakan. Untuk mengeta- analitik, pH meter, lampu spirtus, pisau,
hui seberapa banyak air kelapa dan pu- gun!ing, laminar air flow, penggaris dan
puk majemuk Gandasil-D yang a k a di- oven.
tambahkan ke media MS maka perlu di- Penelitian ini dirancang dalam ran-
teliti lebih lanjut. cangan acak lengkap (RAL) dan masing-
Penelitian ini bertujuan untuk men- masing perlakuan diulang sebanyak 8 kaii
dapatkan perlakuan yang tepat antara dengan tujuh perlakuan, yakni :
substitusi media MS dengan air kelapa
dan Gandasil-D pada kultur jalingan tzna-
man krisan. Hasil peneiitian ini diharapkan
M-tabla. A.J. : Subslhsi Media MS Dengan Air Kelapa . . .

I
Komposisi Media
Perlakuan (MS Air Kelapa Gandasil-D)
p
& (%) (gll)
100

Model maternatik rancangar. acak bahan berat basah tunas, jumlah akar dan
lengkap rnenurut Gaspersz (q989) se- berat basah akar tanarnan krisan secara
bagai berikut : in vifrs. Sedangkan perlakuan yang dico-
Yij U + T ~ +,IE......................(1)
bakan terhadap jumlah tunas tanaman
krisan berpengaruh tidak nyata. Pengaruh
Variabel yang diamati ialah jumlah perlakuan media MS yang disubstitusi de-
tunas, jurnlah daun, tinggi tanaman, berat ngan air kelapa dan Gandasil-D terhadap
basah tunas, berat basah akar, dan jum- pertambahan tinggi tanaman, jumlah
lah akar. Pengamatan dilakukan enam daun, jurnlah tunas, pertarnbahan berat
minggu setelah kultur dengan cara me- basah tunas, jurnlah akar dan berat basah
ngeluarkan tanaman dari botol kultur. Da- akar secara umurn disajikan pada Tabel
ta yang diperoleh dianalisis dengan anali- 1.
sis ragarn dan dilanjutkan dengan uji Be- Pada Tabel 1 secara umum dapat
da Nyata Jujur (BNJ). dilihat bahwa perlakuan media MS 50 %
yang disubstitusi dengan air kelapa 50 %
HASlL DAN PEMBAHASAN tanpa Gandasil-D mernberikan hasil yang
tertinggi terhadap pertarnbahan tinggi ta-
Hasil analisis statistik menunjukkan naman, jumlah daun, pertarnbahan berat
bahwa perlakuan media MS, air kelapa basah tunas dan berat basah akar tana-
dan Gandasil-9 yang dicobakan berpe- man krisan dibanding dengan perlakuan
ngaruh sangat nyata terhadap pertarnbah- lainnya.
an tinggi tanaman, jumlah daun, pertam-
7
MahbJla, A.J. :Subsfitusi Media MS Dengan Air Kelapa
yang ditanbahkan Gandasil-D tanpa air
kelapa s m a halnya dengan yang dida-
patkan Mandang (1993) terhadap penggu-
naan sumber N-berbeda pada tanaman
.- krisan. Diduga akumuiasi amonium dapat
menjadi toksik bagi tanaman akibat amo-
niak (NH3) yarlg mempengaruhi pertum-
: v
buhan dan matabolisme tanaman. Bunnet
dalam Mandang (1993) menyatakan bah-
wa NH3 rrienjadi toksik karena dapat me-
lewati membran-membran sel. Menumt
Herper eta1 dalam Mandang (1993) bsgi-
ar! luar membran klorofil impermeabel
terhadap NH4 tetapi dapat dilalui oleh
NH3. Efek toksik N-NH4 karena keja NH3
ydtu merupakan uncoupling factor dalam
fotofosforilasi di membran tilakoid khloro-
plas (Gibbs dan Calo dalan~Mandang
1993). Hal ini juga membuktikan bahwa
NH3dapat menghambat respirasi (Mengel
dan Kirby 1982 ).
,. Perlakuan media MS yang disubsti-
tusi dengan' 50 % air kelapa dan 3,4 gll
Gandasil-D juga menekan pertumbuhan
, . tinggi tanaman krisan. Tertekannya per-
tumbuhan tinggi tanaman pada media
yang ditambahkan Gandasii-0 dengan air
kelapa Fama halnya dengan yang dida-
patkan Mandang (1993) terhadap penggu-
naan N-N03- pada tanaman krisan secara
in vitro. Diduga N yang terkandung dalam
Gandasil-D adalah N-N03-. Untuk absorb-
si nitrat membutuhkan pH yar.g rendan,
sedangkan pH media yang diberl N-KO3
tinggi (Mandang 1993). Akibat tingginya
pH media menyebabkan terhambatnya
pengambilan P karena terjadi presipitasi P
dalam media. Menurut Hartman, Mills dan
.. Jones (1986) pemberian nitrat akan
menghambat pengambilan P. Tanaman
% - yang kekurangan P memperlihatkan war-
na daun kekuning-kuriingan serta tanam-
an rnenjadi kerdii.
Dengan meningkatnya tinggi tanam-
an maAa jumlah daunpun meningkat. Me-
ningkatnya tinggi tanaman dan jumlah
daun akan mempengaruhi berat basah tu-
nas. Ini berarti pertumbuhan tunas yang
meliputi tinggi tanaman, jumlah daun, dan
berat basah tunas dipengaruhi oleh subs-
titusi air kelapa. Hal ini disebabkan di d a
lam air kelapa terkandung komponen-
komponen yang dapat menunjang per-
tumbghan tanaman krisan, di antaranya
fitohormon. Fitohormon yang terkandung
dalam air kelapa yaitu sitokinin dan auk-
sin. Tuleckc dkk (1961) menyatakan bah-
wa air kelapa terdeteksi mengandung si-
tokinin sebanyak 5,8 mgll dan auksin se-
bar~yzk0,07 mgll dalam air kelapa tua.
Dengan menambahkan 50 % air kelapa
bel.arti sebanyak 2,9 mgll sitokinin dan
0,035 mgll auksin yang ditambahkan ke
media. Menurut Wattimena (1986) sitoki-
nin berperan dalam pembelahan sel tana-
. . ..
man terutama mempengaruni met?ooiis-
me asam nukleat dan sintesis protein.
Protein berpengaruh terhadap pembelah-
an sel tanaman.
Menurut Gunawan (1987) auksin
berperan dalam proses merubah sifat-
sifzt osmotik dari vakuola dan berpenga-
mh terhadap perpanjangan sel tanaman
sedangkan sitokinin berpengaruh pada
pembelahan sel dan diferensiasi sel. PC
manjangan sel ke arah vertikal yang di-
ikuti dengan pembesaran sel akan m e
ningkatkan bobot basah tanaman, Pe-
ningkatan bobot basah tanaman terutama
diseoabkan meningkatnya pengambilan
air oleh sel tanaman. Air serta zat peng-
atur iumbuh dan nutrisi yang terkandung
dalam air kelapa masuk ke dalam sel dan
dirlding sel mengembang, dengan makin
besaniya sel yang terbentuk akan berpe
ngaruh terhadap berat basah tunas
tanainan.
Substitusi media MS dengan air
kelapa 50 % meningkatkan berat basah
tunas namun tidak berbeda dengan perla-
kuan F yaitu substitusi media MS dengan
air kelapa 50 % dan 1,7 gli Gandasil-D.
 Pada perlakuan media MS yang disubsti-
tusi dengan air kelapa dan 1,7 gll Ganda-
sii-D terlihat bahwa pertumbuhan tanam-
an lebih kokoh dan ukuran daun yang ie-
bih besar dibanding dengan perletaan
media MS yang disubstitusi dengan air
keiapa tanpa Gandasii-D namun wanla
daunnya agak kekuningan.
ana am an dalam pertumbuhan dan
perkembangannya membutuhkan unsur
hara diantaranya N dan K. Menurut
Daiwis (1986) nitrogen me~pakansaiah
satu unsur mineral pokok yang sangat
penting bagi pertumbuhan tanaman kare-
na nitrogen dibutuhkan dalam fase vege-
tatif terutama untuk merangsang pertum-
buhan termasuk pembentukan itlorofil
daun yang sangat penting untuk fotosin-
tesis. Selain itu nitrogen merupakan unsur
utama bagi pertumbuhan tanaman sebab
merupakan penyusun bagi semua protein
dan asam amino yang dengan denlikian
merupakan penyusun protoplasma secara
keseiuruhan. Pemberian N dapat msrang-
sang sintesis sitokinin yang dapat ber-
fungsi untuk merangsang pembe~tukan
tunas (Mengel dan Kirby 1987). Jumlah
nitrogen yang terkandung dalam media
MS sebanyak 0,84 gll sedangkan jumlah
nitrogen yang terkandung dalam perlaku-
an media MS yang disubstitusi dengan
50 % air kelapa dan 1,7 gll Gandasil-D
sebanyak 1,087 gll. Karena jumlah nitro-
gen yang terkandung dalam per!akuan
media MS yang disubstitusi dengan 50 %
air kelapa dan 1,7 gll Gandasil-D iebih ba-
nyak nienyebabkan ukuran daun lebih le
bar dibanding dengan perlakuan media
MS 100 %.
Apabila unsur nitrogen yang tersedia
lebih banyak dari unsur iainnys, maka ta-
naman akan menghasilkan protein lebih
banyak dan daun dapat tumbuh lebih le-
bar: Oleh sebab itu diduga lebamya daun
yang tersedia bagi proses fotosintes~sse-
banding dengan jumlah N yang tersedia
(Saif~din1986). Sebagaimana yang telah
dijelaskan bahwa diduga N yang terkan-
dung dalam Gandasil-D adalah N-NO3se-
hingga menghambat pengambilan P da-
lam rnedia mengakibatkan tanaman keku-
rangan P. Akibat dari tanaman kekurang-
an P menyebabkan warna daun agak ke-
kuning-kuningan dan tanaman menjadi
kerdil. Unsur K diperiukan tanaman untuk
menguatkan daun, menebaikan daun,
pembesaran daun oan meningkatkan da-
ya serap air (Samadi 1997). Ismunadji,
dkk (1976) menyatakan bahwa pemberian
K dapat nienekan laju transpirasi, berpe-
ran dalam metabolisme alr (hidratasi),
nlemacu fotosintesis, membentuk batzng
lebih kuat dan berpengaruh krhadap pro-
duksi.
Secara visual pengaruh 'perlakuan
media MS yang disubstitusi dengan air
kelapa tanpa dan dengan 1,7 gA Ganda-
sll-D terhadap berat basah tunas tanaman , a
Krisan secara in vibo dapat dilihat pada
Gambar 1.
dumlah akar terbanyzk didapat dari ..
perlakuan media MS 100 % namun tidak
berbeda dengan perlakuan MS yang di-
substitusi 50 % air kelapa. Hal hi dise-
babkan unsur hara mikro yang tersedia
seperti Zn dan vitamin pada media akan
mempengaruhi pertumbuhan akar tanam-
an (Wilter dan Skoog dalam George dan
Sherrington 1984). Tersedianya unsur-
unsur tersebut dapat memacu pertumbuh-
an akar yang lebih banyak. Namun berda-
sarkan hasil pengamatan terlihat bahwa
jumlah akar pada perlakuan media MS
1CO % lebih banyak tetapi ukuran akarnya
kecil-kecii dan halus berbeda dengan per- . ?
lakuan media MS yang disubstittusi de-
ngan 50 O;o air kelapa. Air kelapa telah la-
ma diketahui sebagai sumber zat peng-
~.
atur tumbuh yang kaya bagi pertumbuhan
tanaman secara in vitm, di antaranya auk-
sin yang berfungsi merangsang pertum-
buhan aka. Menurut Wattimena (1988)
I Matatula. A.J. : Substausi Media MS Dengan Air Kelapa . . .

peran dari auksin yaitu mendorong pem--
besaran sel-sei pada akar. Sehingga da-
pat dikatakan auksin yang tersedia dalarn
air kelapa rnarnpu memacu pertumbuhan
akar.
Berat basah akar tananian krisan
tertinggi (0,55 mg) dihasilkan pada perla-
kuan media MS yang disubstitusi dengan
50 % air kelapa tanpa Gandasil-D. Hal ini
seperti yang teiah dikatakan terdahuiu
bahwa air kelapa selain menaandung sito-
kinin juga mengandung IAA (indole Acetic
Acid) yang merupakan kelom~okauksin.
Hasil penelitian Delvin Abidin
(1982)Pemberian IAA akan menyebabkan
rneningkatnya berat basah akar. Terbukti
pada penelitian ini berat basah akar tan*
man krisan dipengaruhi oleh perlakuan
media MS Yang disubstitusi dengan 50 %
air kelapa.

Gambar 1. Penampiian Tanaman Krisan in vifm pada Umur 6 Minggu Setelah Kultur
pada Perlakuan Media MS yang Disubstitusi Air Keiapa Tanpa Gandasil-D
(MsoA~oGo)dan Dengan Gandasil-D (Mso&oG,,T)
- ?

KESIMPULAN man knsan secara in vitro dibanding

., Berdasarkan hasil dan pembahasan
dapat dis~mpulkanbahwa :
1. Substitusi media MS 50 % dengan
50 % air keiapa memberikan hasil
yang terbaik pada perturnbuhan tana-
dengan perlakuan media MS 100 %.
2. Tinggi Tanaman tertinggi diperoleh
pada perlakuan media MS 50 % yang
disubstitusi dengan air kelapa tanpa
Gandasil-D, dan disusul oleh perlaku-
an media MS 50 % tanpa substltusi.
ldatatula. A.J : Substausi Media MS Dengan Air Kelapa .
--
Sarwono, B. 1992. Mempertahankan Ke-
segaran Bunga Potong. Trubus 23.
Wang, Y.T., and C.Y. Hu. 1982. In vifro
mass tu&nzation and virus free
seed potato production in
Thaiwan. Amer.
Wattimena, G. A. 1988. Zat Pengatur
Turnbuh Tanaman. PAU Biotekno-
logi. IPB. Bogor.
. .
, J. Mandang dan A.
Purwito. 1990. Pemanfaatan Air
Kelapa Muda Pada Kuitur Janngan
Tanaman. Seminar Nasional II
Agrokimia. IPB.
Widyawan, R. dan S. Prahastuti, 1994.
Bunga Pofong. Pusat Dokumentasi
Dan Informasi Ilmiah, LIPI.
Jakarta.