MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS+.

Practica 2

Detección de Salmonella en alimentos

Objetivo.

Conocer las técnicas más comunes en alimentos para le detección de estos

microorganismos patógenos.

Material y equipo.

Autoclave. 1 tubo de 16x150 mm con tapa de rosca.

Licuadora. Matraces de vidrio de 500 ml.
Balanza granataria. Cajas petri.
Incubadora con termostato. Asa de platino o micromel.
Utensilios estériles (cuchillos, pinzas, Portaobjetos desengrasados.
espátulas) Microscopio óptico.
Pipetas bacteriológicas estériles de 10 y 1 ml.
Papel seda.

Medios de cultivo y reactivos.

Peptona. NaCl
Agar xilosa lisina desoxicolato XLD. Agar verde brillante BGA.
Agar nutritivo. Agar triple azúcar hierro TSI.
Caldo urea. Agar citrato de Simmons.
Agar sulfuro indol movilidad Agar lisina descarboxilasa LIA
Caldo Rapapport Vassiliadis
.
Procedimiento.

1.-Peenriquecimiento.
Transferir asépticamente 25 ml o 25 g de la muestra a un matraz con 225 ml de agua
peptonada. Licuar si fuera necesario durante un minuto. Incubar a 35°C durante 24 h.

2,-Enriquecimiento.
Transferir 0.1 ml del cultivo anterior a un tubo con 9.9 ml de caldo Rapapport
Vassiliadis. Incubar 24 h a 42°C.

3.-Aislamiento.
Sembrar por estría simple 2 placas de agar XLD y BGA. Incubar 24 h a 37°C.

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Dra. Keiko Shirai
4.-Identificacion bioquímica.

Seleccionar al menos dos colonias típicas sospechosas que se encuentren bien aisladas
de cada placa. Transferir con un asa de cada colonia seleccionada a la siguiente serie de
tubos que contienen los siguientes medios:

a) Agar TSI Sembrar por picadura en el fondo y por estría en la

superficie.

b) Agar LIA. Sembrar por picadura en el fondo y por estría en la

c) Agar citrato de Simmons. Sembrar por picadura en el fondo y por estría en la

superficie.

d) Caldo urea. Inocular el caldo.

Incubar los tubos de pruebas bioquímicas a 35°C por 24h. Comprobar los resultados
de las pruebas bioquímicas con la tabla de resultados de los microorganismos
enteropatógenos.

Cuestionario.

1. ¿Cuál es el fundamentos de los diferentes medios empleados en la practica indicando

cuáles son los inhibidores y cómo es el desarrollo típico de Salmonella en cada uno de
ellos?
2. ¿Por qué es importante detectar la presencia de Salmonella spp. en los alimentos?
3. ¿Indique las características generales de Salmonella?
4. ¿Qué condiciones promueven el crecimiento de Salmonella en alimentos y que puede
hacerse para retardar su crecimiento?
5. Mencione otras enfermedades causadas por la ingestión de alimentos contaminados por
microorganismos.