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NDICE

UNIVERSIDADNACIONALAUTNOMADEMXICO

Dr. Jos Narro Robles Rector Dr. Sergio M. Alcocer Martnez de Castro Secretario General Mtro. Juan Jos Prez Castaeda Secretario Administrativo Dra. Rosaura Ruiz Gutirrez Secretaria de Desarrollo Institucional MC Ramiro Jess Sandoval Secretario de Servicios a la Comunidad Lic. Luis Ral Gonzlez Prez Abogado General

ESCUELA NACIONAL DE ENFERMERA Y OBSTETRICIA


Lic. Severino Rubio Domnguez Director Mtra. Dolores Zarza Arizmendi Secretaria General Mtra. Gabriela Garza Infante Secretaria Administrativa Lic. Pilar Sosa Rojas Jefa de la Divisin de Estudios Profesionales

MANUAL DE PRCTICAS DE ECOLOGA Y SALUD


Gabriel Flix Burgos Ofelia Flores Jurez Vctor Valverde Molina Lilia Sevilla Romero Mara del Carmen Servin Rodas Martha Patricia Jurez Morales

LICENCIATURA EN ENFERMERA Y OBSTETRICIA 2009

NDICE
pgina

Prlogo. Introduccin PRCTICAS OBLIGATORIAS 1. Microscopio ptico. 2. Terrario... 3. Triada ecolgica.. 4. Clulas eucariota y procariotas.. 5. Respiracin anaerobia..

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13 22 37 39 47 55 64 69 73 78 85 91 102 107 112 117

6. Influencia de los factores biticos y abiticos.. 7. Contaminacin atmosfrica. 8. Tincin de Giemsa para observar leucocitos.. 9. Reaccin antgeno-anticuerpo. 10. Reacciones febriles.. 11. Tincin de Gram 12. Toma de muestras 13. Contaminacin de manos... 14. Ecologa microbiana ambiental. 15. Hongos. 16. Protozoarios...

17. Tenias .. 18. Nematodos..... PRACTICAS COMPLEMENTARIAS 19. Agua............................................................................................... 20. Tincin de Ziehl-Neelsen.............................................................. 21. Acuario........................................................................................... PRCTICAS DE INVESTIGACIN EXPERIMENTAL Construccin de columnas para el estudio de diferentes ecosistemas y sus interrelaciones............................................. Influencia de la concentracin salina en la morfologa de Artemia gracilis............................................................................. Glosario.................................................................................................. Abreviaturas.......................................................................................... Programa terico-prctico de Ecologa y Salud................................ Bibliografa............................................................................................

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142 147 152

159 165 167 173 174 182

PRLOGO
Con este manual, la Escuela Nacional de Enfermera y Obstetricia contina su proyecto de publicacin de textos, que tienen la caracterstica de ser materiales de apoyo actualizados, didcticos, grficos y econmicos al alcance de todos los estudiantes. En noviembre de 1985 se edit por primera vez el Manual de Prcticas de Ecologa y Salud para los estudiantes de Enfermera. En 1994 se elabor la segunda edicin con ilustraciones a colores y en ella se incluan prcticas nuevas, se eliminaron otras y se actualizaban las restantes. En 2005, aparece la tercera edicin, adecuada al Plan de Estudios para la Licenciatura en Enfermera y Obstetricia actualizacin 2000, se cambian de de obligatorias a complementarias las prcticas de acuario, microscopio y preparacin de medios de cultivo por no sacrificar peces, abordarse en otros niveles y ser funcin del tcnico de laboratorio respectivamente; se agregan prcticas de apoyo a la comprensin del ambiente y de aplicacin a la prctica de Enfermera, es el caso de las prcticas de clorofila, la distribucin de las comunidades microbianas, la fagocitosis y la contaminacin de las manos; se actualizan el resto de las prcticas y se mantiene la inclusin de ilustraciones para facilitar el proceso enseanza-aprendizaje. Esta cuarta edicin del Manual de prcticas de ecologia y salud conserva la organizacin adoptada el las ediciones anteriores, esto es la trada ecolgica, pero hace cambios importantes en los factores del ambiente al sustituir las prcticas obligatorias sobre observacin de diferentes tipos de clorofila y factores ambientales en la distribucin de las comunidades microbianas por su escasa relacin con los contenidos del programa de la asignatura y el mnimo apoyo en la formacin y el quehacer profesional del Licenciado (a) en Enfermera y Obstetricia por las prcticas de la trada

ecolgica y la influencia de los factores biticos y abiticos en el cambio de color de los peces. Se agregan prcticas complementarias y de investigacin, se amplan modifican y actualizan las restantes prcticas. Este manual dirigido a Enfermera no pretende incluir todos los temas en el amplsimo campo de la ecologa, inmunologa microbiologa y parasitologa, hay la confianza de que con la participacin de la Comisin de Revisin de Planes y Programas de Estudios del H. Consejo Tcnico de la ENEO-UNAM, de los profesores que imparten la asignatura, de los presidentes de academia de las reas de Enfermera y de los tcnicos de laboratorio, esta edicin y las subsecuentes se irn perfeccionando. Se agradece a los profesores que imparten la asignatura de ecologa y salud en la Licenciatura en Enfermera y Obstetricia sus valiosas aportaciones en la elaboracin de este manual y mi reconocimiento de manera especial a la profesora Ofelia Flores Jurez por sus propuestas de trada ecolgica, influencia de los factores abiticos y abiticos y la de investigacin titulada influencia de la concentracin salina en la morfologa de Artemisa gracilis; a la profesora Lilia Sevilla Romero por su prctica de respiracin anaerobia y al profesor Vctor Valverde Molina por su prctica de investigacin titulada Cultivo del alga espirulina en el laboratorio. Lic. Severino Rubio Domnguez. Director de la ENEO-UNAM. 2009.

INTRODUCCIN

En la actualidad la ecologa no slo se considera como una ciencia biolgica, sino tambin como una ciencia humana. El futuro de nuestra especie depende de lo bien que se logre comprender esta vision y aplicarla hacia un manejo ms sabio de los recursos naturales. El hombre vive con esta calidad de vida debido tanto a la organizacin econmica y el desarrollo cientfico y tecnolgico como a la economa natural (naturaleza) necesaria para la sustentabilidad a largo plazo y en realidad para la existencia misma del gnero humano. Tambin es cierto que los objetivos de salud pblica se constituyen as mismos dentro de las variantes de la ecologa, ya que no es posible imaginar al humano saludable en un mundo erosionado, escaso de recursos y contaminado. No hay que olvidar que despus de todo, el hombre pertenece a este frgil y bello planeta y no el planeta pertenece a este ser pensante y tecnolgico. Para fines de comprensin de la salud pblica e individual, del ecosistema se separan artificialmente a los factores del husped y del parsito que junto al ambiente determinan el proceso salud-enfermedad. El husped y el parsito han desarrollado a travs de los tiempos evolutivos una serie de relaciones estrechas que los han modificado mutuamente hasta lograr una simbiosis conocida como relacin husped-parsito. En este manual se describen ejercicios experimentales que muestran las caractersticas del ambiente, su deterioro y la contaminacin, as como las del husped y del parsito que determinan esta relacin, se hace nfasis en los mecanismos defensivos del husped y los factores que lo debilitan, as como en las caractersticas generales del parsito, las formas de evidenciar su presencia con fines diagnsticos y sus variadas formas de transmisin integradas al concepto de cadena infecciosa indispensable para fundamentar acciones de Enfermera tendientes a prevenir las enfermedades infecciosas. En todo lo anterior, no hay que olvidar que quien determin estos cambios fu el ambiente en las diferentes regiones del planeta y en los distintos tiempos evolutivos, pero hasta el tiempo actual la relacin del ambiente con el parsito y el husped y entre estos dos ltimos sigue cambiando, por lo que el proceso salud-enfermedad se vuelve cada da ms dinmico, lo que obliga a los profesionales de la salud, es el caso de Enfermera a estar actualizados en la trada ecolgica para cada una de las enfermedades ms importantes.

Al igual que las ediciones anteriores, este manual presenta una tabla de las abreviaturas frecuentemente utilizadas en ecologa y salud ubicada despus del glosario como anexo 1. A diferencia de las otras ediciones, el manual incluye en cada prctica una frase clave que se enuncia despus del ttulo en la parte superior derecha y es propuesta derivada de la experiencia docente del autor principal y de la consulta de variada informacin bibliogrfica que orienta, sintetiza y enfatiza el concepto medular de la prctica a realizar. Por ltimo, al ser el manual de prcticas de ecologa y salud un documento semiprogramado, se agregan actividades de busqueda de informacin que facilitan el aprendizaje de los temas abordados en cada prctica.

PROGRAMA DE PRCTICAS DE ECOLOGA Y SALUD

(48 horas)

Las prcticas de Laboratorio en Ecologa y Salud del plan de estudios de la Licenciatura en Enfermera y Obstetricia estn diseadas de tal forma que ayuden a los estudiantes a observar, comprender y reafirmar los conocimientos adquiridos durante el curso terico. La primera prctica es un recordatorio de las precauciones, cuidados y el uso correcto que se debe tener al manipular el microscopio ptico, para evitar un mal uso del equipo durante las prcticas siguientes. Las siguientes seis prcticas estn enfocadas al anlisis y comprensin de los factores del medio ambiente, como son el ecosistema, la triada ambientehospedero-agente, diversidad de organismos, respiracin anaerobia, el flujo de la energa, respuesta de los organismos a los factores biticos y abiticos, y la contaminacin ambiental, donde se hace especial nfasis en sta ltima, ya que se vive en tiempos de alto riesgo, debido a la explosin demogrfica, la expansin de las ciudades, la industrializacin y el incremento de vehculos automotores, de tal manera que cada uno de los que habitamos este planeta, tenemos la obligacin de cuidar y preservar la casa donde nos desarrollamos. En estas prcticas el alumno ir tomando conciencia de los riesgos de la

contaminacin del aire, agua, alimentos y suelo y las acciones que corresponde para evitarla en la promocin de la salud. Para los factores del hospedero se incluyen varias prcticas, donde se aplican los conocimientos de inmunologa, las clulas que participan en los mecanismos de defensa especfica e inespecfica, anticuerpo y las reacciones febriles. la reaccin antgeno-

En las prcticas siguientes, se aplican los conocimientos del agente etiolgico donde se estudian varios aspectos de los microorganismos (tincin, forma e identificacin parcial de las bacterias y de los hongos), las caractersticas morfolgicas de los parsitos (protozoarios, tenias y nematelmintos) que permiten al alumno comprender e identificar a los agentes causales de las enfermedades infecciosas y parasitarias. OBJETIVOS Identificar en un modelo ecolgico (ecosistema) los elementos e interrelaciones, as como la influencia de su alteracin sobre la flora y la fauna, para planear y aplicar acciones de enfermera en la comunidad. Identificar los mecanismos especficos e inespecficos que el hospedador utiliza para regular su relacin con el parsito, Identificar las caractersticas generales de los microorganismos y parsitos que ayuden al diagnstico y explique los mecanismos bsicos de patogenicidad. Realizar la toma de muestras ms utilizadas en el diagnstico microbiolgico, en donde el personal de enfermera es el responsable de ello A partir de la identificacin de factores que afectan la salud de una persona o grupos de personas, hacer un plan de atencin individual comunitario para la prevencin y control de las enfermedades infecciosas.

A travs de situaciones experimentales, los alumnos identificarn la interaccin del ambiente, hospedero y parsito en el proceso salud enfermedad y propondrn medidas para mejorar la salud y el medio ambiente. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE Las actividades de aprendizaje propuestas en este manual de prcticas se sustentan en los contenidos de cada una de las prcticas y se encuentran detalladas al final de cada una de ellas. Las actividades generales son Construccin de un ecosistema en el cual se observe la manutencin y el reciclaje de energa que se lleva a cabo dentro del mismo ecosistema Investigacin de los niveles de contaminacin de la atmsfera proponiendo medidas especficas para el saneamiento del medio ambiente en su comunidad. Construccin de un modelo ecolgico. Realizar in vitro pruebas inmunolgicas. Toma de muestras, observacin y cultivo de microorganismos para investigar la presencia de agentes patgenos. Observacin de protozoarios, de las formas adultas y larvarias de los principales helmintos parsitos. METODOLOGA La forma como se llevarn a cabo las prcticas ser la siguiente: En un primer momento se recuperar la informacin terica bsica de la materia y de otras asignaturas sobre la prctica que se realizar (sntesis inicial o apertura). En un segundo momento se llevar a cabo el desarrollo experimental de acuerdo con la metodologa previamente comentada y estudiada. En un tercer momento se analizarn los resultados, transfirindolos a

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situaciones generales. Finalmente, el alumno realizar las actividades de aprendizaje y expondr sus resultados y conclusiones. CRITERIOS DE ACREDITACIN Reporte analtico escrito de cada uno de los experimentos realizados en las sesiones prcticas llevando a cabo las actividades de aprendizaje e indicando las acciones de enfermera en las prcticas que as lo indiquen. Resolucin de casos.

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PRCTICA 1

OBJETIVOS Conocer las partes mecnicas, pticas y el sistema de iluminacin del microscopio. Manejar correctamente las partes mecnicas. Manejar adecuadamente el sistema ptico. Manejar adecuadamente el sistema de iluminacin. Conocer los cuidados que se deben tener con el microscopio. Identificar los factores que daan el microscopio. INTRODUCCIN Un microscopio simple es una lente de aumento ordinario con la cual se puede observar gran nmero de objetos microscpicos. El microscopio compuesto, difiere del microscopio simple, en que tiene dos sistemas de lentes, uno conocido como objetivo y el otro por ocular, el primero montado en el revlver y el segundo en el tubo del ocular; la imagen que el ojo observa, tiene un aumento igual al producto de la multiplicacin de la lente ocular por la lente objetivo. La potencia de un microscopio ptico compuesto se mide por el poder de resolucin que es la distancia que debe separar a los objetos puntiformes para que se vean como dos imgenes distintas.

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El poder de resolucin del microscopio ptico compuesto en condiciones ideales es de aproximadamente la mitad de la longitud de onda de la luz empleada por lo que si ilumina con luz amarilla de longitud de onda de 0.4 m, los dimetros ms pequeos distinguibles son aproximadamente de 0.2 m. En los microscopios de la escuela para calcular la mxima amplificacin que permita una adecuada resolucin se multiplica los dimetros del objetivo de inmersin (100 x) por los dimetros del ocular (15x), haciendo posible as la amplificacin del objeto 1,500 veces; por lo que objetos de 1.0 m, pueden ser amplificados a 1.5 mm, resultando as claramente visibles.

MATERIAL POR EQUIPO 1 microscopio 1 hoja papel seda. 1 lienzo 1 cubreobjetos. 1 portaobjetos

METODOLOGA Las partes mecnicas, pticas y el sistema de iluminacin del microscopio. Las diferentes partes del microscopio compuesto se ven en el diagrama; consta de: a. Sistema ptico: est formado por el ocular, los objetivos y el condensador. b. Sistema mecnico: est formado por una base, el brazo, el tubo, la platina, el revlver, el tornillo macromtrico, el tornillo micromtrico, los tornillos del diafragma y el condensador, el carro del microscopio y los seguros superior y lateral de la cremallera. c. Sistema de iluminacin: est formado por una fuente luminosa, un interruptor y los filtros de luz.

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El sistema ptimo puede ser muy variado segn el tipo de microscopio de que se trate; as puede tener un solo ocular o puede ser binocular, los objetivos por lo regular son 3 (seco dbil 10x, seco fuerte 43x y objetivo de inmersin 100x), montados en un revlver mvil y por ltimo el condensador que tiene un juego de lentes y filtros (diafragma) que sirve para concentrar y orientar los rayos luminosos sobre la preparacin. El sistema mecnico consta del tubo del ocular unido en su parte inferior a una torre giratoria la cual est montada en el extremo superior del brazo del microscopio y en la otra cara de este extremo est el revlver con sus 3 objetivos. En la parte media del brazo est la platina montada por engranes (cremalleras) la cual se sube o se baja por medio de dos tornillos, el ms grande llamado macromtrico o de movimientos rpidos y otro ms pequeo llamado micromtrico o de movimientos lentos. La cremallera puede tener dos tornillos, uno superior que limita los movimientos hacia arriba y otro lateral que frena a los engranes e impide los movimientos de los tornillos macromtricos y micromtricos. Sobre la platina esta el carro del microscopio, que por medio de dos tornillos desplaza a la preparacin a cualquier lado sobre la superficie de la platina. Por debajo de la platina se encuentra el condensador de la luz que es accionado por un tornillo hacia arriba o hacia abajo y, adems tiene una palanca para abrir o cerrar el diafragma, permitiendo el paso de mayor o menor cantidad de luz.

La lmpara del microscopio es una fuente de luz mvil, empotrada en la parte superior de la base del microscopio con un botn en la parte lateral de la base que sirve para encenderla, regular su intensidad o apagarla. La toma de la corriente elctrica se hace mediante un cable con una clavija en su extremo. Manejo adecuado del microscopio. 1 2 Sacar el microscopio de la cubierta de plstico o de su caja sosteniendo el brazo del microscopio con una mano y con la otra la base. Colocar el microscopio a aproximadamente 15 cm del borde de la mesa de laboratorio, de tal modo que el brazo del microscopio, puede hacia el

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operador. 3 Examinar el microscopio y, con la ayuda del diagrama, identificar sus componentes que se indican a continuacin: a) Ocular b) Carro del microscopio c) Revlver d) Objetivo seco dbil e) Objetivo seco fuerte f) Objetivo de inmersin. g) Platina h) Condensador. 4 5 6 i) Tornillo del diafragma. j) Tornillo del condensador. k) Tornillo micromtrico. l) Tornillo macromtrico m) Seguro superior de la cremallera. n) Seguro lateral de la cremallera. o) Fuente de luz.

Limpiar todos los lentes con papel seda. Conectar la fuente de luz y encenderla. Colocar el objetivo seco dbil en posicin paralela al haz de luz (sentir un "chasquido" cuando haya quedado bien colocado) Poner la preparacin del portaobjetos sobre la platina del microscopio. Acomodarla porcin de la preparacin que se va a examinar con los dos tornillos del carro del microscopio de tal manera que quede situada con la apertura central de la platina.

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Bajar el objetivo seco dbil con la ayuda del tornillo macromtrico a aproximadamente medio centmetro por encima del cubreobjetos.

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Elevar el condensador al mximo con la ayuda del tornillo del condensador.

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Observar por el ocular y luego mover el tornillo del diafragma de tal modo que ste se abra a su lmite mximo. Tal lmite se determina mirando por el ocular y observando los cambios en la intensidad de la luz al mismo tiempo que se manipula el tornillo del diafragma; si la luz es

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demasiado brillante hacer los ajustes necesarios. 12 A continuacin enfocar hacia arriba con el tornillo micromtrico hasta que la muestra se observe con toda claridad. 13 Para cambiar de objetivos girar el revlver del microscopio. El microscopio debe permanecer en foco con cualquier objetivo o requerir pequeos ajustes con el tornillo micromtrico. 14 Hay que recordar que algunos tipos de microscopios no tienen tope de bajada que detenga la platina antes de llegar a los objetivos, por lo que puede romper las lentes o estrellar la preparacin. Para evitar esto es necesario que el estudiante acerque la platina observando por un lado del microscopio y despus observar por el ocular girando el tornillo micromtrico hacia arriba con el objeto de evitar que la lente entre en contacto con la preparacin.

Cuidados que se deben tener con el microscopio y factores que daan su funcionamiento y conservacin. El buen funcionamiento del microscopio depende del mantenimiento adecuado y el uso correcto. A continuacin se dan algunas instrucciones tiles. 1. El microscopio debe ser guardado en un lugar seco y al cubierto del polvo. 2 Al trasladar el microscopio de un sitio a otro, se debe tomar el brazo del microscopio con una mano y colocar la otra mano debajo de la base para sostenerlo manteniendo el microscopio en posicin vertical. En el caso de que la fuente de luz no se de tipo integrado, llevar primero el microscopio a la mesa de laboratorio y despus volver por la fuente de luz. No transportar ambas partes al mismo tiempo.

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1.

Mantener el microscopio por lo menos a 15 centmetros del borde de la mesa de laboratorio.

2.

No manejar las lentes con los dedos; el sudor contiene cidos grasos y otras substancias que pueden opacar las lentes.

3.

Antes y despus de usar el microscopio, deben limpiarse las lentes accesibles con papel seda. Las lentes accesibles son: ocular, objetivos y condensador.

4.

Los lentes objetivos, el ocular y el condensador no deben ser desarmados por el estudiante porque podra permitir que se introdujera polvo al interior del microscopio el cual solo se podra limpiar mediante el desarme de las lentes y esto solo puede hacerlo personal especializado. Adems hay que recordar que el poder de resolucin del microscopio depende de que todos los lentes estn centrados y a la distancia correcta unas de otras.

5.

Cuando se usa aceite de inmersin, una vez terminada la observacin, hay que quitar el aceite que ha quedado en la lente, ya que si se deja, se seca y se adhiere a la lente, y despus es muy difcil quitarlo. Para limpiar de aceite la lente debe de usarse papel seda.

6.

Cuando no es posible limpiar las lentes accesibles en seco, pueden limpiarse con un papel seda impregnado con una pequesima cantidad de agua o xilol. No debe usarse exceso de xilol porque las lentes vienen montadas con blsamo de Canad, el cual es disuelto por el xilol (consultar con el profesor).

7.

Las partes mecnicas del microscopio se pueden limpiar simplemente con un lienzo hmedo con agua. La cremallera el tornillo macromtrico debe ser limpiada ocasionalmente con una pequea cantidad de aceite o grasa delgada. El tornillo micromtrico no necesita aceite.

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8.

Algunos microscopios presentan un seguro lateral de la cremallera; el cual consiste en un tornillo situado al lado derecho del brazo del microscopio prximo al tornillo macromtrico y es accionado por la perilla de mayor tamao. Una vez enfocada la preparacin puede fijarse a la platina apretando suavemente este seguro, por lo que si se requiere una vez ms enfocar o cambiar la preparacin debe aflojarse este seguro. No debe girarse los tornillos micromtricos y macromtricos mientras el seguro est apretado por que se destruye la rosca del tornillo.

9.

Hay que manejar con mucho cuidado el tornillo que desplaza hacia arriba o hacia abajo el condensador evitando forzar o con movimientos bruscos ya que tiene una rosca muy corta hecha de un material poco resistente.

10.

Si

el microscopio no funciona, notificarlo Inmediatamente al

profesor. 11. No permitir que ningn reactivo qumico entre en contacto con parte

alguna del microscopio. 12. Antes de guardar el microscopio, asegurarse siempre que el objetivo seco dbil est en la posicin de trabajo, es decir, en lnea con el tubo del microscopio. 13. Al desconectar el enchufe de la fuente de luz, no tirar del cable; se debe sujetar firmemente el enchufe y luego desconectarlo del contacto elctrico. 14. Si el microscopio tiene una cubierta o caja, asegurarse de que cubra por completo al microscopio o que quede bien fijo dentro de la caja. Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una

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introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Cules son los tipos de microscopios existentes? 2. Con qu material se limpian las partes mecnicas de un microscopio? 3. Cmo deben limpiarse los lentes de un microscopio? 4. Qu es el ocular y cuntos tiene un microscopio? 5. Que son los objetivos y cuntos tiene el revlver? 6. Por qu el objetivo de inmersin usa aceite? 7. En qu objetivo del microscopio se observan los microorganismos a mayor aumento? 8. En qu objetivos se observan las preparaciones en fresco? 9. Para qu sirven los tornillos micromtricos y macromtrico? 10. Cmo se calcula el poder de resolucin de un microscopio?

Figura 19-1

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PRCTICA 2

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El terrario es una simplificacin extrema de un sistema biolgico para estudiar sus componentes bsicos.

CTICA 1
OBJETIVOS Observar la variacin cuantitativa en el tejido vegetal y animal en el . ecosistema Calcular el aumento de biomasa vegetal y animal en el ecosistema. Identificar a los organismos auttrofos y hetertrofos en el ecosistema

INTRODUCCIN El terrario es un modelo ecolgico que permite investigar la vida de los organismos, el medio en que se desarrollan, las interacciones entre ellos y ambiente. Es de gran utilidad para comprender y cuantificar fenmenos tan importantes como la fotosntesis, la respiracin y el ciclo del agua. En la fotosntesis, la energa del espectro visible de la luz solar atrapada con la molcula fotorreceptora llamada clorofila, le permite a la planta combinar el bixido de carbono del aire y el agua que absorbe del suelo para producir oxgeno y glucosa (energa qumica), la cual se transforma durante la respiracin en una molcula de alta energa llamada trifosfato de adenosina (ATP) que utiliza para elaborar sus tejidos que al ser consumidos alimentan a los herbvoros y stos a su vez a los carnvoros. Cuando la planta, el herbvoro o el carnvoro no son consumidos por otro animal y mueren, el tejido que ellos contienen es degradado por microorganismos del suelo (bacterias y hongos)

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llamados reductores. Adems de la transformacin de la energa solar, la fotosntesis es importante debido a que durante este proceso se libera oxgeno al ambiente, el cual es indispensable para que las plantas, los animales y otros seres vivos lleven a cabo la respiracin aerobia. Desde el punto de vista qumico, el proceso fotosinttico incluye almacenamiento de una parte de la energa solar como energa de enlace en los alimentos. La ecuacin general de esta reaccin de oxidacin-reduccin puede escribirse como sigue: Luz CO2 +2H2A Energa (CH2O) + 2A,

La oxidacin es: 2HA La reduccin es: 4H + CO2 (CH2O) + H2O 4H + 2A

Para las plantas, las algas y las cianobacterias, A es el oxgeno, es decir, el agua se oxida con la liberacin del oxgeno gaseoso y el bixido de carbono se reduce a carbohidratos (CH2O), con la produccin de agua. Por lo que, el oxgeno de la siguiente ecuacin proviene del agua y la ecuacin general, sinttica y balanceada de la fotosntesis es como sigue: Reaccin general de la fotosntesis.
Clorofila

6CO2 + 12H2O + Energa


Bixido Agua de carbono solar

C6H12O6 + 602 + 6H2O


Glucosa Oxgeno Agua

La fotosntesis es un fenmeno complejo, variable en sus reactivos, condiciones de desarrollo y organismos que la realizan.

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En algunos tipos de fotosntesis bacteriana El H2A (el reductor) no es el agua, sino un compuesto inorgnico como sulfuro de hidrogeno (H2S), como sucede, en las bacterias pertenecientes a las famlias Clorobacteriaceae y Thiorhodaceae o un compuesto orgnico en las bacterias no sulfurosas prpuras y marrones (Athiorhodaceae), en consecuencia, no se libera oxgeno en estos procesos. La mayora de las plantas, fijan el bixido de carbono por el ciclo de Calvin o ciclo de las pentosas fosfato, una minoria reducen el bixido de carbono por el ciclo del cido dicarboxlico en condiciones diferentes de luz, temperatura y agua. Las plantas que reducen el bixido de carbono por el ciclo de Calvin o ciclo de las pentosas fosfato llevan a cabo la fotosntesis a intensidades luminosas y temperaturas moderadas. En contraste, las plantas que reducen el bixido de carbono por la va del cido dicarboxlico estn adaptadas a la luz brillante, altas temperaturas y emplean el agua de manera ms eficiente. Las implicaciones ecolgicas es que las plantas de las que depende el hombre para su alimentacin en su mayora utilizan el ciclo de Calvin o ciclo de las pentosas fosfato como el trigo, arroz, papa y la mayora de las verduras se desarrollan en la zona templada del hemisferio norte donde se practica agricultura mecanizada, en cambio las cosechas de orgen tropical como el maz, sorgo y caa de azcar son plantas que utilizan el ciclo del cido dicarboxlico. La respiracin es una oxidacin bitica que produce energa con descomposicin de la materia orgnica o inorgnica. En el ecosistema tierra los procesos heterotrficos de descomposicin (catabolismo) se equilibran de manera aproximada con el metabolismo auttrofo (anabolismo), aunque este equilibrio vara mucho localmente. Los tipos de respiracin son aproximadamente paralelos a los tipos de fotosntesis y se dividen en tres:

Tipo 1, la respiracin aerobia, en la cual el oxgeno gaseoso es el oxidante (aceptor de electrones). Tipo 2, la respiracin anaerobia, en la cual un compuesto

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inorgnico distinto al oxgeno es el oxidante. Tipo 3, la fermentacin, en la cual un compuesto orgnico es el oxidante. La respiracin aerobia es el fenmeno inverso a la fotosntesis, por el cual la materia orgnica (C6H12O6, recurdese glucosa) se descompone a CO2 y H2O con la liberacin de energa. Todas las plantas y animales superiores y la mayora de los procariotes y protistas obtienen su energa de este modo. La respiracin completa rinde CO2, H2O y energa, pero el proceso puede realizarse de manera incompleta liberando menos energa y compuestos orgnicos que pueden usarse posteriormente por otros organismos para obtener energa. La energa contenida en el carbohidrato se libera durante la respiracin mediante la glcolisis y el ciclo de Krebs realizadas en el citoplasma y las mitocondrias respectivamente. Reaccin general de la respiracin aerobia.
Mitocondrias

38 AMP + C6HI2O6 + 6O2


Monofosfato Glucosa de adenosina Oxgeno

38 ATP + 6CO2 + 6H20 + Calor


Trifosfato Bixido gua de adenosina de carbono

La energa liberada por la glucosa es almacenada en la molcula llamada trifosfato de adenosina (ATP), la cual puede usarse para sintetizar, degradar o transportar otras substancias necesarias para las clulas. La respiracin anaerobia la llevan a cabo los saprofitos como bacterias, levaduras, mohos y protozoarios. Las bacterias productoras de metano son ejemplos de anaerobios obligados que descomponen los compuestos orgnicos produciendo metano (CH4 ) utilizando como oxidantes carbonatos o carbono orgnico, empleando as ambos tipos de metabolismo anaerobio. Lo anterior, es de gran importancia desde el punto de vista ecolgico en la descomposicin de los residuos de las plantas y animales, y reduccin de sales en sedimentos profundos; adems de su uso industrial para la obtencin de cidos y alcoholes.

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La fermentacin, llevada a cabo por la mayora de los seres vivos, consiste en la descomposicin enzimtica de un compuesto orgnico, donde el oxidante (receptor de electrones) es tambin un compuesto orgnico. Ejemplos, la fermentacin alcohlica que desdobla los hidratos de carbono en alcohol etlico o la fermentacin actica que transforma el alcohol etlico en cido actico. Para medir la energa solar captada en forma de tejido por la planta, se calcula el aumento de peso de la planta y de la misma forma la energa qumica aprovechada por el herbvoro y el carnvoro. En esta prctica slo se determinar la cantidad de energa en forma de tejido almacenada por las plantas y los herbvoros. MATERIAL POR EQUIPO 1 recipiente de vidrio transparente, grande y de boca ancha con tapadera. 25 % del volumen del frasco de tierra de hoja sin parsitos macroscpicos . 5 % del volumen del frasco de tezontle finamente molido. 3 % del volumen del frasco de carbn vegetal finamente molido. 1 pliego de papel celofn transparente. 1 rollo de diurex ancho. 1 marcador permanente de color negro sin olor. 1 balanza analtica. 3 plantas compatibles entre s se sugieren plantas apropiadas para el terrario como Xerfitas (nopalito, maguellito, cactus, (bisnaga); mesfilas (cscara de nuez, lgrima, sapito); Suculentas ( dedito, cortina). 6 caracoles terrestres (traerlos de 4-8 semanas ms tarde).

METODOLOGA 1. Lavar el recipiente con agua y jabn, enjuagarlo bien con el fin de evitar

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que el jabn contamine el ambiente del terrario. 2. 3. 4. 5. 6. Etiquetar con el nmero de equipo, grupo y fecha. Colocar en el fondo del recipiente una pequea capa de tezontle de aproximadamente el 5% del volumen del recipiente. Colocar sobre el tezontle una capa de carbn vegetal de aproximadamente de 3 % del volumen del recipiente. Agregar la tierra de hoja en una cantidad aproximada al 25% del volumen del frasco. Sacar las plantas de la maceta o recipiente en el que se encuentren, quitar el exceso de tierra de las races.

Figura 2-1 Terrario Tierra de hoja Carbn

Tezontle

7. 8.

Pesar las plantas. Sembrar cuidadosamente las plantas evitando daar las races y espacindolas de acuerdo al tamao y tipo de planta.

9.

Agregar una pequea cantidad de agua, dejndola resbalar por los bordes del recipiente, evitando su exceso de acuerdo con la humedad

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del terrario y tipo de planta. 10. 11. 12. Pesar las plantas. Sembrar cuidadosamente las plantas evitando daar las races y espacindolas de acuerdo al tamao y tipo de planta. Agregar una pequea cantidad de agua, dejndola resbalar por los bordes del recipiente, evitando su exceso de acuerdo con la humedad del terrario y tipo de planta. Cubrir la boca del recipiente con papel celofn, cerrar hermticamente la tapa y sellar con diurex las orillas del papel celofn a la cara externa del recipiente. Colocar el terrario en un lugar donde reciba la cantidad adecuada de luz, de acuerdo al tipo de planta. Revisar a las 24 horas, la cantidad de agua. De haber un exceso, notable al empaarse las paredes internas del terrario, dejar el recipiente destapado hasta que la tierra adquiera el grado de humedad requerido. Tapar. Figura 2-2

13.

14. 15.

Terrario

16.

Los equipos con nmero non, pesar las plantas de 4 a 8 semanas ms

28

tarde y calcular el aumento de tejido (plantas) . Los equipos con nmero par, pesar 6 caracoles terrestres, numerarlos y colocarlos en el interior del terrario. Tapar sin sellar. 18. Despus de dos semanas, pesar los caracoles y calcular el aumento de Tejido animal. Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. 17. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Contesta en los cuadros siguientes lo que se pide. 2. Dibujos correspondientes. 3. Investigar los conceptos de productividad primaria neta y productividad primaria bruta. 5. Factores abiticos: a)

b)

c)

d)

6. Factores biticos: a)

b)

c)

d)

7. Elementos de la fotosntesis:

29

a)

b)

c) 8. Productos de la fotosntesis: a)

d)

b)

c) 9. Importancia de la fotosntesis: a)

d)

b)

c)

d)

30

Tabla 2-1 Nombre de planta Equipo 1


Peso de planta
Inicial Final

Equipo 3
Peso de planta
Inicial Final

Equipo 5
Peso de planta
Inicial Final

Equipo 7
Peso de planta
Inicial Final

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Tabla 2-2 Nmero de caracol Equipo 2


Peso de caracoles
Inicial Final

Equipo 4
Peso de caracoles
Inicial Final

Equipo 6
Peso de caracoles
Inicial Final

Equipo 8
Peso de caracoles
Inicial Final

1. 2. 3. Tabla 2-3 1. Aumento de tejido de las plantas:_________________________________ 2. Aumento de tejido de los caracoles :_______________________________ 3. Concepto de productividad primaria neta:___________________________

4. Productividad primaria bruta:_____________________________________

PRCTICA 3 PRCTICA 3

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La trada ecolgica, aborda el

proceso salud-enfermedad de una manera dinmica, articulada y multicausal.

OBJETIVOS

Identificar los componentes de la trada ecolgica Identificar los riesgos a los que se enfrenta el hospedero, en el ambiente actual. Fundamentar acciones preventivas de Enfermera, para resolver problemas de salud pblica.

INTRODUCCION Un concepto fundamental en la organizacin de los contenidos bsicos del programa terico-prctico de ecologa y salud es la trada ecolgica. A fines del siglo xix se conceba la enfermedad infecciosa como una entidad causada de manera exclusiva por un microorganismo patgeno; en el siglo xx los avances de la inmunologa permitieron comprender el papel de los mecanismos inespecficos y especficos de defensa en el desarrollo del proceso infeccioso. Posteriormente, con el estudio del ambiente fsico y social, result evidente que la aparicin de la enfermedad depende tambin en buena medida del ambiente y de las alteraciones ocasionadas por el hombre. Al extrapolar lo anterior a todas anormalidades, fue posible abordar la enfermedad desde un punto de vista multifactorial, con base en un trmino didctico llamado trada ecolgica. Segn este concepto, la enfermedad es consecuencia de tres grandes grupos de factores: ambientales, del husped y del parsito. El equilibrio de estos factores mantiene la salud de la persona y su alteracin conduce a la enfermedad.

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La ecologa humana demuestra que la salud y la enfermedad no constituyen simples estados opuestos, sino diferentes grados de adaptacin del organismo al ambiente en que vive, y que los mismos factores que fomentan esta adaptacin, al cambiar pueden actuar en sentido contrario produciendo la inadaptacin que constituye la enfermedad. Estos factores contenidos en la gentica del hombre y los microorganismos son modificados constantemente por el ambiente natural, psicolgico, cultural y social. El estudio de la salud y de la enfermedad no puede realizarse en el individuo y ni en la poblacin, aislados de su ambiente. Adems, la preocupacin primaria de la medicina, es el individuo considerado como un ser social, mas que la salud la enfermedad consideradas aisladamente. Por lo anterior, el personal de salud, debe considerar al enfermo como parte de una sociedad, como un individuo que vive con otros, y recibe las influencias del grupo. Estas influencias pueden ser positivas negativas para nuestra salud.

MATERIAL POR EQUIPO 4 portaobjetos 50 g de grenetina sin sabor ni color 1 cuchara sopera de plstico 125 ml de agua hirviendo 125 ml de agua fra 1 vaso de precipitados de 200 ml 1 vaso de precipitados de 500 ml 1 agitador de vidrio 1 mechero 1 tripi 1 rejilla de tela de asbesto 1 pincel delgado 1 caja con divisiones para 4 preparaciones microscpicas (construir previamente el alumno) 4 etiquetas autoadheribles 1 microscopio ptico 1 caja de lpices de colores (alumnos)

METODOLOGIA

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Actividades previas a la prctica. 1. Pegar una etiqueta adherible en un extremo de cuatro portaobjetos perfectamente limpios y secos 2. Poner a remojar los 50 g de grenetina en 125 ml de agua fra durante 20 min, verter la solucin anterior en 125 ml de agua hirviendo (con el mechero apagado), mezclar rpidamente con el agitador de vidrio, hasta obtener una solucin transparente. 3. Barnizar rpidamente, con la mezcla anterior, ayudndose del pincel, los cuatro portaobjetos perfectamente limpios y secos (no barnizar sobre la etiqueta), sostenga los portaobjetos del esmerilado lateral (sin dejar huellas digitales), cuidar de no poner los dedos sobre la pelcula de grenetina. Colocar los portaobjetos barnizados en posicin vertical, recargados en algn objeto, hasta que solidifique la pelcula de grenetina.

Figura 1-1

Etiqueta

Pelcula de grenetina

Portaobjetos

4. El profesor seleccionar a un alumno de cada equipo, al cual se le proporcionarn cuatro portaobjetos con una etiqueta y una pelcula de grenetina. El alumno llevar a su casa las laminillas, las transportara dentro de la caja con divisiones para preparaciones microscpicas (que construy previamente el alumno). El alumno colocar cada una de las

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laminillas en determinados sitios de su casa habitacin, por ejemplo, una en la azotea, otra en el patio, cerca de la ventana, cerca de la puerta principal, en el bao, sobre la almohada, en el tapete de la recamara, en la cocina, sobre un librero, cerca del auricular del telfono, etc, durante 12 horas. 5. Numerar las laminillas y escribir en la etiqueta el lugar donde se muestreo. Transportar dentro de la caja con divisiones para preparaciones microscpicas y llevar al laboratorio el da de la prctica.

Actividades en el laboratorio el da de la prctica 1. Observar en el microscopio a 10X (seco dbil) y a 40X (seco fuerte) las partculas que se hallan adherido al portaobjetos, y si es posible inferir si hay formas bacterianas o micticas. Hacer esquemas, analizar y tratar de explicar las causas por las cuales se encontraron en ese lugar.

RESULTADOS 1.- Realiza en hojas blancas en tu cuaderno de prcticas varios cuadros como el siguiente, dibujar los esquemas de sus observaciones microscpicas. Tabla 1-1 Num. equipo : Num. laminilla: Sitio muestreo: No. Aumentos: Partculas adheridas: Observacin al microscopio:

Por qu se encontraron las partculas en ese lugar de muestreo? : ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE De donde provienen esas partculas?: 2.- Realiza una investigacin sobre el dao que causan a la salud humana y al Son partculas orgnicas o inorgnicas?:

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ecosistema las partculas que encontraste. Tabla 1-2 Partculas adheridas Dao al Ecosistema* Dao a la salud** Podran desencadenar epidemias pandemias?***

*, **, *** Explicar mas ampliamente en una hoja. 3.- Realiza una investigacin sobre las medidas nacionales e internacionales, a diferentes niveles, que tengan como resultante el constante mejoramiento y cuidado del ambiente y con ello la prevencin y colaboracin en la resolucin de problemas de salud pblica: Nivel preventivo Nivel epidmico Nivel sociolgico Nivel ecolgico Nivel poblacional Nivel educativo Nivel legislativo Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. . ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

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1. Qu factores del medio ambiente influyen en el proceso de saludenfermedad? 2. Qu agentes fsicos, qumicos biolgicos localizaste en las preparaciones observadas ? 3. Cmo afectan la salud ? 4. En qu lugares donde se colocaron las laminillas hubo mayor incidencia de partculas? 5. Qu coincidencias y diferencias puedes establecer entre agente biolgico, hospedero y agente fsico-qumico del ambiente? 6. Es el ruido un agente ambiental que perjudique la salud? Por qu? 7. Que condiciones del componente de la trada ecolgica, conocido como hospedero (el hombre), determinan cierta susceptibilidad para adquirir enfermedades? 8. Qu factores socioeconmicos pueden favorecer la aparicin de las enfermedades? 9. Menciona cinco causas que estn provocando la desertificacin, la contaminacin atmosfrica, del suelo y del agua, y que has hecho, hars a partir de hoy, para auxiliar en su control

PRCTICA 4

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La anatoma intracelular define el tipo de clula; el nmero, la forma de nutricin, caractersticas antignicas y biomolculas a los reinos.

OBJETIVO Observar las principales caractersticas de las clulas eucariotas y procariotas en una preparacin en fresco.

INTRODUCCIN Antiguamente se crea que todos los seres vivos conocidos podran ser clasificados como plantas o animales, sin embargo con el descubrimiento de los microorganismos, los cuales comparten caractersticas de plantas y animales, se hizo evidente que esta clasificacin era inoperante. Despus de muchas clasificaciones previas, Whittaker en 1969, propuso la clasificacin de todos los seres vivos en cinco grandes reinos: Plantae, Fungi, Animalia, Protista (Protozoa) y Procariotae (Monera); basada en el nivel de organizacin: unicelular procariota (Monera), unicelular eucariota (protista), multinuclear (hongos) y multicelular (plantas y animales); forma de nutricin: absorcin, ingestin o fotosntesis y su lnea evolutiva. En 2002, Kendrick, aunando esto a otras tcnicas, la inmunologa y la biologa molecular, los clasifica hoy en da en siete reinos: Archeabacteria, Eubacteria, Chromista, Protozoa, Fungi, Plantae y Animalia. Aparte de algunos hongos, y de varios parsitos multicelulares, dos de los reinos de gran importancia en ecologa y salud son los reinos Protista y el Procariotae. Estos dos ltimos se diferencian por el tipo de clula de que estn formados. Los protistas, los hongos, las plantas y los animales son clulas eucariotas ("ncleo verdadero"), que poseen un ncleo observable, rodeado de una membrana y en su citoplasma contiene organelos rodeados por membranas como son las mitocondrias, retculo endoplsmico, aparato de Golgi y ribosomas de mayor tamao. Un ejemplo de clula eucariota unicelular son los protozoarios.

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En cambio, la clula del reino Procariotae es procariota (ncleo primitivo, sin ncleo verdadero), ya que su ncleo no est delimitado por membranas, no contiene organelos intracitoplsmicos aunque si existe su funcin, son de menor tamao y posee una pared celular qumicamente nica y de gran complejidad. Un ejemplo de clula procariota son las bacterias. El estudio de las bacterias es relativamente difcil debido a su tamao que vara de 0.1 a 10 m, por lo que no pueden ser observadas a simple vista y para su estudio es necesario el microscopio ptico ordinario. Para la observacin y estudio de las bacterias se utilizan diversos mtodos el ms simple es la observacin en fresco en el microscopio ptico ordinario en donde podemos observar a la bacteria viva e investigar su forma, tamao, agrupamiento, movilidad y reacciones a varios compuestos qumicos y sueros inmunes. Hay dos mtodos generales que se utilizan para estudios de esta naturaleza. Las tcnicas de gota suspendida y la preparacin en fresco. Ambos mtodos preservan la forma natural de las clulas y reducen los efectos de la distorsin que suelen ocurrir cuando las clulas se secan, fijan y/o tien. La observacin en fresco no muestra muchos detalles estructurales de las bacterias por lo que en bacteriologa frecuentemente se tie a las bacterias. Las tcnicas de tincin las podemos dividir de una manera general en dos grupos: tcnicas de coloracin simple y tcnicas de coloracin especial o diferencial. Las tcnicas de coloracin simple son aquellas en donde se emplea un slo colorante para teir. Ejemplo azul de metileno Las tcnicas de coloracin especial son aquellas en que se usan combinaciones de dos o ms colorantes. Ejemplos: Coloraciones de Gram, Ziehl-Neelsen, Giemsa, etc. MATERIAL POR EQUIPO 25 ml yogurt natural con cultivos lcticos (alumnos) 25 ml pulque blanco (natural) (alumnos) 1 muestra de agua estancada (de canales de Xochimilco

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Chapultepec) o de florero de varios das (alumnos). 1 trozo de 2 cm. de alimento (pan, tortilla, verdura o fruta con hongos) (alumnos) 1 jitomate pequeo (alumnos),1 cebolla pequea (alumnos), 3 hojas de planta siempreviva alga Elodea (alumnos) 2 mondadientes (palillos de madera limpios) (alumnos) 1 lanceta estril 1 torunda alcoholada 1 asa bacteriolgica. 10 portaobjetos. 10 cubreobjetos. 50 ml de Solucin salina al 0.9% (para todo el grupo) 1 navaja bistur 1 microscopio ptico 1 frasco gotero con solucin de azul de metileno. 3 hisopos. 2 pipeta Pasteur. Papel seda Aceite de inmersin 1 puente de coloracin

METODOLOGA Se sugiere que cada integrante del equipo procese 2 3 muestras para que terminen a tiempo.

I Observacin de clulas eucariotas. Reino Plantae Metafita


1. Clulas de epidermis de jitomate y siempreviva.-Del jitomate y siempreviva cortar un cuadrado de la piel de 1 cm por lado, raspar la parte interna con la navaja hasta que quede solamente la capa de epidermis transparente, en el caso de la siempreviva, y anaranjada, en el caso del jitomate; procurar no romper el cuadrado de epidermis; colocar cada epidermis vegetal sobre un portaobjetos y verter una gota de agua limpia en su superficie, colocar el cubreobjetos sobre la muestra, y observar al microscopio en los objetivos 10x y 40 x . Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

40

2. Clulas de la epidermis de las hojas catfilas de la cebolla.-De las hojas de cebolla, cortar un cuadrado de 1 cm por lado y separar la epidermis que se encuentra hacia la parte cncava de la hoja, colocarla sobre un portaobjetos y verter una gota de agua limpia y otra de azul de metileno sobre ella, colocar el cubreobjetos y observar al microscopio en los objetivos 10x y 40 x de acuerdo con la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan. 3. Clulas de hojas de alga Elodea.- se pueden observar: a) las clulas estomticas (clulas que forman el poro respiratorio, tienen forma de labios abiertos) y b) clulas de la epidermis general. Para observar ambas clulas, corte una hoja pequea de Elodea del extremo de la rama de la Elodea donde estn surgiendo hojas nuevas, no manipule fuerte la hojita porque destruye su superficie, colquela sobre un portaobjetos ms 1 gota de agua del acuario, coloque el cubreobjetos y observar al microscopio en los objetivos 10x y 40 x de acuerdo con la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

Reino Animalia Metazoa


4. Clulas de mucosa oral.-Con un hisopo hacer un ligero raspado sobre la mucosa oral para obtener clulas epiteliales, colocarlo sin batir sobre un portaobjeto, agregar dos gotas de azul de metileno, colocar el cubreobjeto y observar al microscopio en objetivos 10x y 40 x de acuerdo con la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las las caractersticas que se solicitan. 5. Clulas sanguneas.-Una persona del equipo lavar sus manos con agua y jabn, secar, hacer la asepsia con torunda alcoholada en yema de dedo anular, puncionar, colocar una gota muy pequea de sangre (recuerda que entre mas pequea sea tu muestra, es mejor para la observacin al microscopio ptico ya que la muestra debe dejar pasar la luz que se encuentra debajo de la platina y en observaciones de clulas, si estas fueran muy abundantes , estaran encimadas y no las observas bien, debes tener solo una capa de clulas para que las puedas observar mejor) en el centro del portaobjetos y agregar una gota de solucin salina al 0.9%, mezclar con la punta del cubreobjetos y colocarlo sobre la preparacin; observar al microscopio ptico 10x y 40x. Hacer dibujo en el cuadro correspondiente y contestar las caractersticas

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que se piden.

Reino Fungi
6. Clulas de levaduras de pulque - poner una gota pequea de pulque en un portaobjeto limpio, colocar el cubreobjetos y observar a 10 X y 40X

Reino Protista o Protozoa.


7. Protozoarios de agua estancada.- Tomar con pipeta pasteur una gota de agua del fondo de un recipiente que contenga agua estancada o de un florero de varios das, depositar sobre un portaobjeto y cubrir con el cubreobjeto y observar los protozoarios y algas con los objetivos 10x y 40x apoyndose en la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

II Observacin de clulas procariotas

Reino Procariote, Monera o Eubacteria


8. Sarro dental.-Colocar con el asa bacteriolgica una gota pequea de agua de la llave en el centro de un portaobjeto, tomar una muestra de sarro dental con un mondadientes, depositarla sobre las gotas de agua, mezclar, extender, dejar secar, cubrir la preparacin con azul de metileno durante un minuto, lavar suavemente con agua de la llave, ESPERAR A QUE SEQUE COMPLETAMENTE y observar las clulas bacterianas con los objetivos 10x, para enfoque, colocar una gota de aceite de inmersin, girar el revolver y enfocar a 100x enfocando ligeramente con el tornillo micromtrico. de acuerdo con la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan. 9. Lactobacilos de yogurt.- colocar una gota de agua pequea en el centro de un portaobjetos y en ella disolver una pequea cantidad de yogurt, como la cabeza de un alfiler metlico, colocar el cubreobjetos, observar al microscopio en 10X para enfoque, girar el revolver, colocar una gota de aceite de inmersin y observar a 100X. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan. 10. Bacterias de pulque.- Tomar una pequea cantidad de pulque (como la

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cabeza de un alfiler metlico) y colocarla en el centro de un portaobjetos, con 1 gota de agua, mezclar con la punta del cubreobjetos (el cubreobjetos se toma por los lados esmerilados, nunca se toma por su superficie) y colocarlo encima de la muestra, observar al microscopio en 10x, colocar una gota de aceite de inmersin sobre el cubre y girar el revolver para bajar el objetivo de 100x. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan. .Figura 3-1

ClulaeucariotaClulaprocariota

RESULTADOS

1.- Hacer dibujos y comparar con el libro la forma y tamao de las clulas eucariotas y procariotas. Tabla 3-1 Dibujo Caractersticas

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Nombre: bacterias de sarro dental Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 10x: Color natural: Reino:

Nombre: bacterias de pulque Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: *Tamao en 100x: Color natural: Reino: Nombre: lactobacilos de yogurth Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 100x: Color natural: Reino: Nombre: protozoarios de agua estancada Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 40x: Color natural: Reino: Nombre: levaduras en pulque Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 40x: Color natural:

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Reino: Nombre: clulas de epidermis de siempreviva Elodea jitomate cebolla Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 10x: Color natural: Reino: Nombre: clulas de mucosa oral Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 10x 40x: Color natural: Reino: Nombre: clulas sanguneas Tipo celular: Organelos que se observan: Forma celular: Tamao en 10x 40x: Color natural: Reino: * Tamao en 10x, aproximado, en fracciones respecto al campo de luz en 10x (ejemplo: la clula observada tiene un tamao aproximado a 1/10 del campo de luz del microscpio). ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Qu tipo de clula presentan las bacterias? 2. Qu tipo de clula presentan los protozoarios? 3. Qu tipo de clula presentan los metazoarios o helmintos? 4. Qu tipo de clula presentan los leucocitos? 5. Qu enfermedades infecciosas se identifican en el laboratorio por preparacin en fresco? 6. Mencione dos tcnicas de coloracin especial no tratadas en esta prctica. 7. En la evolucin; Cul de los dos tipos de clulas aparece primero?

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8. Qu estructuras bacterianas no se observan al microscopio ptico ordinario?

PRCTICA 5

La respiracin no es un proceso pulmonar; sino un fenmeno bioqumico intracelular que llevan a cabo todos los seres vivos.

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OBJETIVO Determinar la produccin de bixido de carbono durante la

fermentacin de la sacarosa a diferentes concentraciones, por la levadura Saccharomyces cerevisiae

INTRODUCCIN La respiracin es una funcin indispensable para la vida de todos los seres vivos, y se lleva a cabo de dos formas: respiracin aerobia, que la realizan la mayora de los seres vivos entre ellos el hombre y la respiracin anaerobia o fermentacin, llevada a cabo por algunas bacterias anaerobias estrictas como Clostridium tetani, C. perfringens, C. botulinum y Treponema pallidum causantes del ttanos, la gangrena gaseosa, el botulismo y la sfilis respectivamente. Otras bacterias y levaduras que siendo aerobias, pueden sobrevivir en condiciones de anaerobiosis, a estas se les denomina anaerobias facultativas, entre otras estn las enterobacterias como: Escherichia coli, Salmonella spp, Shigella spp, los cocos piogenos: Staphylococcus aureus; Strpetococcus spp. La gluclisis es la primera etapa de la fermentacin Existen varios tipos de fermentacin: la fermentacin, lctica alcohlica, propinica, y actica. La fermentacin lctica es un proceso celular anaerbico donde se utiliza glucosa para obtener energa y donde el producto de desecho es el cido lctico, slo se obtiene como eficiencia, dos molculas de ATP y bixido de carbono (CO2). Este proceso lo realizan muchas bacterias (bacterias lcticas) algunos protozoarios y en el tejido muscular cuando, a causa de una actividad motora intensa no hay aporte adecuado de oxgeno, se acumula cido lctico en las clulas musculares causando fatiga muscular. Los eritrocitos no tienen mitocondrias por los que obtienen energa a travs de la fermentacin lctica. La fermentacin alcohlica (denominada tambin como fermentacin del etanol o incluso fermentacin etlica) es un proceso biolgico de fermentacin en plena ausencia de aire (oxgeno - O2), originado por la

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actividad de algunos microorganismos como las levaduras que procesan los hidratos de carbono (por regla general azcares: como pueden ser por ejemplo la glucosa, la fructosa, la sacarosa, el almidn, etc.) para obtener como productos finales: un alcohol en forma de etanol (cuya frmula qumica es: CH3-CH2-OH), dixido de carbono (CO2) en forma de gas y DOS molculas de ATP que consumen los propios microorganismos en su metabolismo celular energtico anaerbico. Seguramente debe existir una relacin entre la cantidad de azcar disponible y el crecimiento de las levaduras. Qu relacin existe? En lugar de medir el crecimiento de las levaduras, que podra estar por encima de nuestras posibilidades por el momento, se puede medir la produccin de CO2 La relacin que se podra encontrar entre el crecimiento (produccin de CO2) y la concentracin de azcar podra ser de varios tipos. En la figura 1 se puede ver cuatro grficas que indican diferentes posibilidades de esta relacin. Producir Sacharomyces cereviseae diferentes cantidades de CO2 empleando diferentes concentraciones de un substrato conocido (Sacarosa)? Fig. 1 Concentracin de melaza y produccin de CO2 Fig. 1 Concentracin de melaza y produccin de CO2

En la figura 1 se presentan cuatro grficas que indican diversas maneras en que pudiera llevarse a cabo la produccin de CO2, graficando concentracin de bixido de carbono y concentracin de melaza. MATERIAL POR EQUIPO 1 probeta graduada de 100 ml. 10 tubos de ensayo de 25 por 200 ml con tapn de rosca. 10 tubos de ensayo 10X50 ml. 1 matraz Erlenmeyer de 125 ml. 1 matraz Erlenmeyer de 250 ml. 1 gradilla. 110 cuadros de papel aluminio de 4 X 4 cm papel parafilm. 1 regla marcada en mm.

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1 rollo de tela adhesiva. 1 agitador. 100 gramos de sacarosa (lo traer el alumno).

MATERIAL POR GRUPO 1 litro de solucin de levadura 10 litros de agua destilada 1 matraz Erlenmeyer de 1,000 ml. 1 paquete de levadura seca activa

METODOLOGA 1. Disolver 10 g de levadura en 1,000 ml de agua destilada. Procure agregar el agua poco a poco y agitar bien para lograr una mezcla uniforme. Se recomienda usar paquetes de levadura seca activa de la marca Fleshman, Leviatn y Flor, o bien otras marcas 2. Marque diez tubos de ensayo grandes de acuerdo con lo que indica la tabla. 3. Prepare la sacarosa al 60%. Coloque 90 g de azcar de caa en un matraz Erlenmeyer de 250 ml, agregue poco a poco y agitando constantemente 60 ml de agua destilada. 4. Haga diluciones seriadas de sacarosa colocando cada dilucin en un tubo como se indica en la figura 2. La solucin de sacarosa al 60% equivale a la cantidad que hay de este disacrido en la melaza.

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Figura 20-2

Figura 20-3

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5. En el tubo nmero uno coloque 25 ml de solucin de melaza (solucin al 100%), en el tubo dos coloque 25 ml. De melaza concentrada y 25 ml de agua destilada, del tubo 2 tome 25 ml de la solucin al 50% y pselo al tubo 3, agregue 25 ml de agua destilada y nuevamente tome 25 ml y pselo al tubo 4 as sucesivamente hasta completar los diez tubos. 6. Agregue 5 ml. de solucin de levadura, muy bien agitada a cada una de las diluciones de sacarosa dentro de cada tubo de ensayo.

Tabla 1

No de tubo

Concentraciones (%)

1 2 3 4 5 6

100 50 25 12.5 6.2 3.1

51

7 8 9 10

1.6 0.78 0.39 0.19

7. Coloque en posicin invertida cada uno de los tubos de ensayo pequeos dentro de los tubos grandes y llnelos de lquido siguiendo las siguientes instrucciones (ver figura 4): a) Practique el llenado de los tubos pequeos dentro de los tubos grandes primero con agua de la llave para adquirir la destreza necesaria que le permita trabajar despus con el lquido que tenga sacarosa. b) Introduzca en posicin invertida un tubo de ensayo pequeo en cada uno de los tubos grandes que contengan la mezcla de levadura y sacarosa y trate de que no queden burbujas dentro del tubo pequeo, balaceando el tubo grande 8. Tape los tubos grandes, que queden bien cerrados. 9. Pegue por fuera del tubo grande un fragmento de tela adhesiva marcada en mm. en un tramo de 4 5 cm. con la mayor precisin posible. Coloque la tela adhesiva a nivel con el punto donde llegue el tubo pequeo. 10. Coloque los tubos en una gradilla y en un sitio, del que anotar las condiciones ambientales. Condicin de luz, temperatura, humedad aproximada. Deje los tubos en estas condiciones durante 24 horas 11. Despus de 24 horas, observe por lo menos cinco minutos lo que sucedi en los tubos pequeos. Observe el gas que se produjo y deposit en el tubo pequeo. 12. Prepare una tabla donde anotar en una columna la concentracin de la sacarosa, en otra la cantidad de CO2 producido en mm. (gas en el tubo pequeo) y en una tercera las condiciones ambientales. Anote las cantidades obtenidas en su equipo y las que otros equipos de su grupo hayan obtenido. 13. Trace una grfica con las lecturas promedio de cada equipo. Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

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1. Grafique sus resultados 2. Compare la grfica obtenida con sus resultados con la que seleccion, antes de iniciar esta prctica. 3. Explique cualquier diferencia entre las grficas de sus resultados y la seleccionada 4. Describa la relacin que existe entre la concentracin del sustrato (sacarosa) y la cantidad de CO2 producido por las levaduras 5. Considera que la sacarosa es el sustrato ms adecuado para el metabolismo de las levaduras? 6. Que otros sustratos podra tal vez, dar mejores resultados que la sacarosa? 7. Cual es la eficiencia de ATP que obtiene la levadura con este proceso? 8. Menciona las tres etapas de la respiracin celular aerobia. 9. Cual es la eficiencia de ATP producida por una molcula de FADH2 y una de NADH+H 10. Menciona tres bacterias anaerobias de importancia mdica.

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PRCTICA 6

A travs del tiempo, el ambiente selecciona la forma y funcin de los seres vivos.

OBJETIVOS Observar la influencia de de la luz y la temperatura, en el comportamiento alimenticio en peces gupis. Investigar otros factores que provocan el cambio repentino de coloracin en peces goodeidos. INTRODUCCION La seleccin natural es el proceso mediante el cual los organismos logran adaptarse a las nuevas condiciones del medio, toda vez que poseen caractersticas que les proporcionan una ventaja competitiva y les permiten dejar una mayor descendencia. La adaptacin es el cambio de una caracterstica que incrementa la capacidad de un organismo para sobrevivir y reproducirse en un rea especfica. sta puede ser biolgica, psicolgica y social. La adaptacin biolgica, a su vez se subdivide en subtipos, el de inters para esta prctica es la adaptacin a los factores abiticos como la luz y la temperatura. La actividad de los animales es una resultante de la interaccin del organismo y el medio ambiente. Los factores ambientales como la luz y la temperatura entre otros, rigen el grado de actividad del animal. Por ejemplo, se observan cambios en su comportamiento si estn sometidos a luz intensa si sta es menor. Muchas investigaciones se han llevado a cabo para

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demostrar el papel de los factores ambintales en la vida de los organismos (ver Fry y Clark). Tambin Ali, ha realizado estudios sobre el efecto de la luz en actividades primarias para los organismos de un ecosistema, como en el caso de los peces, la formacin de cardmenes o la emigracin del salmn (Oncorhynchus) del Pacifico. Desde finales del siglo pasado, numerosos cientficos se han interesado por los cambios de color y las adaptaciones crpticas de la coloracin de los organismos, y por lo tanto, en los peces. Es decir, en la facultad que algunos peces tienen de modificar la coloracin del cuerpo , de acuerdo con el color y la apariencia del lugar donde se encuentran. Algunas veces los cambios son paulatinos, pero, en ocasiones, la transformacin es repentina y muy notable. Se sabe, sin lugar a dudas, que la coloracin de los peces, anfibios, reptiles , seres humanos y otros organismos, se debe a la presencia en la dermis, de clulas que en su interior llevan grnulos de pigmento, llamados cromatoforos melanocitos (melanina). Mediante la concentracin o expansin del pigmento dentro de la clula , aumenta disminuye el oscurecimiento de la superficie donde se alojan los cromatoforos melanocitos. La funcin de dichas clulas pigmentarias obedece a estmulos qumicos y nerviosos, influidos por secreciones hormonales. En esta prctica se investigar en vitro la influencia de la luz y la temperatura en el cambio de coloracin de los peces. MATERIAL POR EQUIPO 1 pecera de 15 x 7 cm de cristal. 6 peces llamados gupis entrenados dos semanas antes de la prctica (ver metodologa). 1 frasco en la presentacin mnima de alimento vivo para gupis dafnias. 1 caja de cartn forrada por dentro con papel cartulina negra cualquier otro papel negro, dentro de la cual quepa la pecera. 1 caja de cartn, con orificios de diferente dimetro, en todas las paredes, dentro de la cual quepa la pecera. 1 foco 40 watts. 1 extensin con soquet para el foco. 1 lienzo para tamizar las dafnias red fina. 1 frasco de vidrio transparente, limpio, de 250 ml con tapa de rosca y Empaque. 1 termmetro. 8 peces goodeidos peclidos y comprar alimento (4 hembras y 4

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machos) de acuario. METODOLOGA Dos semanas antes de la prctica iniciar el condicionamiento de respuesta al estmulo. . I. Influencia de la luz en los peces gupis. 1. Preguntar en el acuario donde se compren los gupis, a que hora del da los alimentan y que alimento les proporcionan, si no los alimentaban a una hora especifica, entrenarlos de la siguiente manera. 2. Los 3 gupis deben entrenarse (condicionarse) para que se alimenten con dafnia u otro alimento vivo en cuanto se aplique un estmulo, como golpear en un lado del acuario con una varilla de vidrio un lpiz. Los peces aprendern a esperar su alimento a la hora prefijada, despus de 2 semanas de entrenamiento. Durante el periodo de condicionamiento observar y anotar el numero de dafnias (u otro alimento vivo que recomienden en el acuario), que se comen los peces en un lapso de tiempo de 10 min, esto es, contar el numero de capturas que hace cada pez bien, colocar 30 dafnias dentro de la pecera a la hora que se alimentan, despus de los 10 min de alimentacin, retirar las dafnias y contarlas, se pueden retirar con un tamiz lienzo, por diferencia obtener el numero de dafnias ingeridas. 3. El da de la prctica, en el laboratorio, traer su peces condicionados, una caja de cartn forrada por dentro de papel cartulina negra cualquier otro papel negro, la cual invertir sobre la pecera (formando un cuarto oscuro), otra caja de cartn con orificios de diferentes dimetros, un foco con extensin y soquet, 4. Realizar las investigaciones siguientes en el laboratorio, el dia de la practica con peces gupis: Equipo 1 y 2 Peces condicionados a la luz, poner sobre la pecera la caja forrada de negro durante 10 min, retirar la caja, agregar 30 dafnias, golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar que los peces se alimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10 min), extraer las dafnias restantes,

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restar las faltantes para obtener la tasa alimenticia en oscuridad (promediar entre los 2 equipos) Figura 4-1

Caja de cartn invertida forrada por dentro con papel negro pecera

Equipo 3 y 4 Peces condicionados a la luz, colocar sobre la pecera la caja con orificios de diferentes dimetros y encender un foco por fuera de la caja de manera que la luz penetre por los orificios, mantenerla as durante 10 min, retirar la caja y apagar el foco, colocar dentro del acuario 30 dafnias, golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar que los peces se alimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10 min), extraer las dafnias restantes, restar las faltantes para obtener la tasa alimenticia a luz parcial (promediar entre los 2 equipos).

Figura 4-2

Caja de cartn invertida con agujeros de diferentes dimetros

pecera

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Equipo 5 y 6 Peces condicionados a la luz, encender un foco de 40 watts a 40 cm de la pecera y mantenerlo as 10 min, apagar el foco, colocar dentro del acuario 30 dafnias, golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar que los peces se alimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10 min), extraer las dafnias restantes, restar las faltantes para obtener la tasa alimenticia con luz artificial (promediar entre los 2 equipos) Figura 4-3 40 cm pecera

Equipo 7 y 8 (testigos) Peces condicionados a la luz, agregar 30 dafnias dentro de la pecera, golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar que los peces se alimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10 min), extraer las dafnias restantes, restar las faltantes para obtener la tasa alimenticia con luz natural (promediar entre los 2 equipos)

II. Influencia de la temperatura en los peces gupis. Equipo 1 y 2 (testigos) Peces condicionados a la luz, colocarlos en el frasco transparente con agua de acuario, anotar la temperatura del agua, 10 min observar el comportamiento de los peces, si aumenta disminuye su actividad, si responden al estimulo de golpeteo ligero del lpiz hacia el cristal, si siguen una dafnia, si la cazan. Figura 4-4

Termmetro

Frasco Agua de la llave

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Equipo 3 y 4 Peces condicionados a la luz, colocarlos en frasco transparente, introducirlo en otro recipiente con agua a 15 C ,mantenerlos as 10 min, anotar el comportamiento de los peces, si aumenta disminuye su actividad, si responden al estimulo de golpeteo ligero del lapiz hacia el cristal, si siguen una dafnia, si la cazan. Equipo 5 y 6 Peces condicionados a la luz, colocarlos en el frasco transparente, introducirlo en otro recipiente con agua a 25oC, mantenerlos as durante 10 min, anotar el comportamiento de los peces, si aumenta disminuye su actividad, si responden al estimulo de golpeteo ligero del lapiz hacia el cristal, si siguen una dafnia, si la cazan Equipo 7 y 8 Peces condicionados a la luz, colocarlos en el frasco transparente con agua de acuario, introducirlo en otro recipiente en el cual haya flujo constante de agua de la llave, anotar la temperatura del agua, 10 min observar el comportamiento de los peces, si aumenta disminuye su actividad, si responden al estimulo de golpeteo ligero del lapiz hacia el cristal, si siguen una dafnia, si la cazan. Figura 4-5

Llave Frasco

Agua

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III. Cambio de color en peces. Equipos 1,3,5,7: Colocar los machos de goodeidos peclidos en la pecera, colocar las hembras dentro de un frasco transparente y cerrado, sumergir el frasco anterior en el acuario durante 10 min. ,observar si se presenta cambio de color u oscurecimiento en la epidermis de los machos, Se present cambio de color u oscurecimiento?: __________________ Cunto tiempo tarda en definirse la coloracin en los peces?_________ Al retirar el frasco de hembras: Cul es el tiempo de duracin de la coloracin los machos?_________ Si se presento el cambio de coloracin u oscurecimiento entonces existe un estmulo visual que es el que desencadena ese cambio, este es un factor bitico que favorece el acercamiento, la identificacin de sexos y la reproduccin de la especies. Equipos 2,4,6,8: Colocar los machos goodeidos pecilidos en la pecera, colocar las hembras dentro de la misma pecera durante 10 min, observar si se presenta cambio de color y oscurecimiento en la epidermis de los machos, despus de los 10 min retirar a las hembras cuidando de no daarlas. Se presento cambio de coloracin u oscurecimiento?:_____________ Cunto tiempo tarda en definirse la coloracin en los peces?________ Al retirar a las hembras: Cul es el tiempo de duracin de la coloracin los machos?_________ Si se presento el cambio de coloracin u oscurecimiento entonces existe un estmulo qumico que es el que desencadena ese cambio, este es un factor bitico hormonal que favorece el acercamiento, la identificacin de sexos y la reproduccin de la especies.

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RESULTADOS

Tabla 4-1 I. Influencia de la luz en los peces gupis


equipos Factor abitico de experimentacion 1y2 peces condicionados con la luz + Caja negra 3y4 Peces condicionados con la luz + Caja con orificios 5y6 Peces condicionados con la luz + Foco 40 watts 7y8 Peces condicionados con la luz + Luz natural (testigos)

Tasa alimenticia en oscuridad Resultados

Tasa alimenticia a luz parcial

Tasa Alimenticia a luz artificial

Tasa alimenticia con luz natural

Tabla 4-2 II. Influencia de la temperatura en los peces gupis


equipos 1y2 Peces condicionados a la luz agua de acuario 3y4 Peces condicionados a la luz agua a 15oC 5y6 Peces condicionados a la luz agua a 25oC 7y8 Peces condicionados a la luz flujo constante de agua de la llave

Factor abitico de experimentacion Resultados de actividades

Tabla 4-3

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III. Cambio de color en peces: * Estmulo visual equipos


Se present cambio de color u oscurecimiento?: Cunto tiempo tarda en definirse la coloracin en los peces? Al retirar el frasco de hembras: Cul es el tiempo de duracin de la coloracin los machos?

Tabla 4-4 *
Estmulo hormonal

equipos
Se present cambio de color u oscurecimiento?: Cunto tiempo tarda en definirse la coloracin en los peces? Al retirar el frasco de hembras: Cul es el tiempo de duracin de la coloracin los machos?

Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

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1. Investigar algunos ejemplos ms en los cuales los factores abiticos repercuten en la fisiologa en la morfologa de las especies 2. Investigar como repercuten los factores abiticos en el comportamiento, en las actividades y en la fisiologa morfologa de seres humanos 3. Investigar algunas patologas humanas debidas a alteraciones de los factores abiticos en nuestro medio contemporneo.

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PRCTICA 7

La contaminacin y los nutrientes son los factores ambientales principales que limitan la salud y el desarrollo de todas las poblaciones que habitan este planeta.

OBJETIVOS Identificar las fuentes de la contaminacin en la Zona Metropolitana de la Ciudad de Mxico (ZMCM). Investigar los principales contaminantes del aire segn el ndice Metropolitano de la Calidad del Aire (IMECA), considerando el rea donde habitas. Valorar la influencia de las condiciones topogrficas, meteorolgicas y climticas de la ZMCM en el fenmeno de la contaminacin atmosfrica. Investigar la influencia de la contaminacin atmosfrica sobre las enfermedades, en especial las respiratorias Reconocer las medidas anticontaminantes para el invierno en la ZMCM y el plan de Contingencia ambiental en caso de rebasar los lmites establecidos por la Secretaria del Medio Ambiente y Recursos Naturales (Semarnat). Proponer acciones viables en el mbito individual y llevarlas al cabo para mejorar la calidad del aire en la ZMCM. Relacionar su presencia con las caractersticas del micro hbitat.

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INTRODUCCIN La contaminacin es el fenmeno social de agregar al ambiente sustancias, materiales de desecho, microorganismos, calor, radiactividad o ruido a una velocidad (cantidad y rapidez), que excede la capacidad del ambiente de procesarlos o dispersarlos. Inclusive puede darse el caso de que la sustancia sea algo provechosa en cantidades normales, pero daina en exceso. Algunos diccionarios como el "Websters New World Dictionary" la definen como el hecho de agregar algo a un ambiente que lo transforma en impuro, sucio o inadecuado para usarse, e implica corrupcin o descomposicin. El aire, mezcla de gases que rodea a la tierra est constituido principalmente de nitrgeno, oxgeno, argn, bixido de carbono y sus contaminantes ms importantes son el ozono, el bixido de azufre, monxido de carbono, xidos de nitrgeno, compuestos orgnicos voltiles (incluso hidrocarburos), partculas suspendidas totales y ruido. La contaminacin del aire es uno de los problemas ambientales ms importantes y se debe principalmente al uso de derivados de combustibles fsiles por los automviles, las industrias, las fuentes de produccin de energa y los servicios. La Zona Metropolitana de la Ciudad de Mxico comprende gran parte del Distrito Federal, 58 municipios del Estado de Mxico y uno de Hidalgo. sta enorme mancha urbana alberga en la actualidad aproximadamente 21 millones de habitantes (INEGI, 2000, aproximacin 2009), con 4 000 000 automviles y miles de industrias, sufre una contaminacin atmosfrica muy fuerte que se ve incrementada por factores geogrficos, climatolgicos y meteorolgicos. En el rea metropolitana de la ciudad de Mxico, la Secretaria de Medio Ambiente y Recursos Naturales (Semarnat), a travs de la Comisin Metropolitana para la Prevencin y Control de la Contaminacin Ambiental en la ZMCM, opera un sistema de monitoreo de los principales contaminantes del aire que se informa como ndice Metropolitano de la Calidad del aire (IMECA), con base al contaminante con ms alto nivel en la zona, y que habitualmente es el ozono.

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El IMECA indica el grado de contaminacin de la atmsfera en una escala arbitraria de 0 a 500 y se establece a partir de estudios epidemiolgicos y experimentales, de los efectos de las diferentes concentraciones de los contaminantes del aire sobre la salud a corto y mediano plazo. As por ejemplo, en un IMECA de 100 la concentracin de ozono es de 0.11 ppm que es el lmite permisible promedio por hora y en el de 500 IMECAS es de 0.6 ppm que provoca la muerte de personas enfermas y ancianas y sntomas a la poblacin sana que afectan sus actividades normales. Clasificacin del IMECA: De 0 a 100, bueno o satisfactorio De 101 a de 200 no satisfactorio De 201 a 300, malo De 300 o ms, muy malo.

Figura 5-1

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COMISIN METROPOLITANA PARA LA PREVENCIN Y CONTROL DE LA CONTAMINACIN AMBIENTAL EN EL VALLE DE MXICO ndice metropolitano de la calidad del aire

0-100 BUENO, SITUACIN FAVORABLE PARA LA REALIZACIN DE TODO TIPO DE ACTIVIDADES 101-200 NO SATISFACTORIO, MOLESTIAS MENORES EN PERSONAS SENSIBLES 201-300 MALO, AUMENTO DE MOLESTIAS E INTOLERANCIA RELATIVA AL EJERCICIO EN PERSONAS CON PADECIMIENTOS RESPIRATORIOS Y CARDIOVASCULARES ; 301 ms, MUY MALO
Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

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ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Identificar en cul de las siguientes zonas de la ZMCM est situada tu casa: centro, noroeste, noreste, suroeste, sureste y de acuerdo a esto, realizar las siguientes actividades: Con los datos del IMECA de todo un da luminoso, graficar la evolucin del contaminante contra el tiempo, analizar los resultados y comparar con otros equipos. Relacionar la actividad humana en la ZMCM con la hora del da y la distribucin de los contaminantes. Basndose en la informacin obtenida en el Instituto Nacional de Meteorologa, analizar la topografa y la corriente de los vientos con relacin a la concentracin de contaminantes. Relacionar la informacin anterior con el fenmeno de inversin trmica y su influencia en la contaminacin ambiental. Relacionar fisicoqumicamente la influencia de la neblina y la intensidad de la radiacin solar en la concentracin y transformacin de los contaminantes durante los meses invernales. Investigar la influencia de los principales contaminantes atmosfricos de la ZMCM en el Proceso Salud-Enfermedad. Proponer acciones de educacin para la salud que disminuyan el efecto de los contaminantes en el Proceso Salud-Enfermedad. De acuerdo con la clasificacin del IMECA; Cules son las medidas de contingencia ambiental establecidas por la Semarnat.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

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PRCTICA 8
TINCIN DE GIEMSA PARA LA OBSERVACIN DE LEUCOCITOS

Neutrofilo OBJETIVO

Eosinfilo

Basfio

Linfocito

Monocito

Identificar los cinco tipos de leucocitos por medio de un frotis de sangre teido con Giemsa o Wright.

INTRODUCCIN La sangre es el lquido tisular ms abundante, esta constituida por plasma y clulas. El plasma contiene agua principalmente, glucosa, protenas como inmunoglobulinas que funcionan como anticuerpos cuando han identificado a un antgeno, las protenas inactivas del complemento que ayudan a los anticuerpos para destruir a las clulas extraas, los factores de la coagulacin y otros componentes. Las clulas son: eritrocitos o glbulos rojos, responsables del transporte de oxgeno a todas las clulas son los ms abundantes, las plaquetas (trombocitos) elementos indispensables en el proceso de coagulacin y los leucocitos o glbulos blancos que participan en la respuesta inmune o defensa del organismo contra sustancias extraas o agentes infecctocontagiosos. Los leucocitos son clulas esfricas nucleadas se clasifican de acuerdo a las caractersticas de su ncleo en: mononucleares (linfocitos, monocitos, y macrfagos) y polimorfonucleares (neutrfilos, eosinfilos y basfilos) De acuerdo a sus granulaciones intracitoplasmicas, se clasifican en : granulocitos: (Neutrfilos, eosinfilos, y basfilos) y agranulocitos (monocitos y linfocitos)

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Los neutrfilos se denominan as porque sus grnulos no tienen afinidad ni por colorantes cidos, ni bsicos, su ncleo tiene de dos tres, cuatro o cinco lbulos y son los ms abundantes, su funcin es fagocitar agentes extraos. Los grnulos de los eosinfilos se tien con los colorantes cidos como la eosina y toman una coloracin rojiza o anaranjada, su ncleo presenta dos lbulos y son abundantes en infecciones parasitarias y alergias. Los grnulos de los basfilos se tien con colorantes bsicos, y tienen una funcin importante en el proceso inflamatorio. Los monocitos son clulas esfricas con un ncleo grande en forma de herradura o de rin, en su citoplasma no se observan granulaciones pero si una gran cantidad de lisosomas, microfibrillas y microtbulos Los linfocitos son clulas esfricas con un ncleo grande esfrico que llena casi toda la clula, el citoplasma se ve como un anillo, estas clulas son los responsables de la inmunidad especfica. Recuento de leucocitos Valores normales
GRUPO DE LEUCOCITOS Neutrfilos Linfocitos Monocitos Eosinfilos Basfilos VALOR PORCENTUAL 55 - 70 % 20 40 % 28 % 1 4 % 01 % VALOR ABSOLUTO 2,500 a 8000 /mm3 1,000 4,000 /mm3 100 700 /mm3 50 500 / mm3 25 100 /mm3

La medicin de porcentajes de leucocitos puede orientar al diagnstico de enfermedades infecciosas, inflamatorias y otros procesos. Cuando en la medicin de leucocitos se ven clulas jvenes, aparecen los neutrfilos con su ncleo en forma de bastn (cayado) y un aumento en el porcentaje de glbulos blancos polimorfonucleares(PMN), esto se denomina como desviacin a la izquierda, este trmino sugiere infecciones bacterianas agudas. La desviacin a la derecha, se dice cuando el porcentaje de linfocitos y monocitos se encuentra aumentado con respecto a los polimorfonucleares, se asocia en general a infecciones vricas. La eosinofilia, un incremento del porcentaje de eosinfilos, sugiere un cuadro alrgico o una infeccin parasitaria.

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MATERIAL POR EQUIPO 4 4 1 1 1 1 1 1 gotas de sangre de un voluntario. portaobjetos. puente de coloracin. frasco con colorante de Giemsa. frasco con metanol. microscopio. frasco con aceite de inmersin. frotes de sangre teidos por Giemsa,

METODOLOGA Mtodo de preparacin de frotis sanguneo. 1. Se pone de 1-2 cm del borde de un portaobjetos limpio y sin grasa, una gota de sangre (2-3 mm de dimetro) y el portaobjetos se deja sobre la mesa con la gota hacia arriba. 2. Se escoge para extender la sangre otro portaobjetos limpio, sin grasa y con un borde liso y regular. Este borde de extensin se pone sobre el portaobjetos que tiene la gota de sangre formando con el ngulo de 30, luego el borde del portaobjetos que sirve para extender la sangre se hace retroceder hasta que toque la gota de sangre que se encuentra dentro del ngulo agudo. 3. Inmediatamente, la gota se extiende a lo largo del borde del portaobjetos de extensin, el cual se hace deslizar en sentido contrario en forma rpida y uniforme. Tcnica de Giemsa: 1. Preparar un frotis de sangre, fijar la preparacin con alcohol metlico por

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5 minutos. 2. 3. 4. 5. Cubrir el frotis con colorante de Giemsa, taparlo para evitar que se seque. Dejar actuar el colorante durante 10 minutos. Lavar suavemente la preparacin con agua corriente, abriendo ligeramente la llave del agua. Dejar escurrir el agua, esperar a que la preparacin seque completamente y observar al microscopio con los objetivos seco fuerte e inmersin. 6. Observar al microscopio con los objetivos seco dbil para efoque, girar el revolver, agregar una gota de aceite de inmersin, observar las preparaciones de sangre teidas por Giemsa e identificar los diferentes tipos de leucocitos, hacer dibujos.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE Menciona las caractersticas de cada uno de los tipos de leucocitos Enuncia las propiedades de los leucocitos Cual es la funcin de los neutrfilos y monocitos Identifica la funcin de los linfocitos y sus tipos En que participan los basfilos y mastocitos Define los siguientes conceptos: neutrofilia, eosinofilia, neutropenia, leucopenia y leucocitosis 7. Has esquemas de los leucocitos observados 8. Diferencias entre granulocitos y agranulocitos 1. 2. 3. 4. 5. 6.

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PRCTICA 9

El procedimiento ms simple y til para demostrar la reaccin antgeno-anticuerpo es la tipificacin sangunea por la tcnica de aglutinacin.

OBJETIVO Observar la reaccin antgeno-anticuerpo mediante una prueba de aglutinacin. INTRODUCCIN Por su sencillez, sensibilidad y lectura visual las reacciones de aglutinacin son la base de muchas tcnicas en el laboratorio de inmunologa, una de tantas es la tipificacin sangunea. Las transfusiones sanguneas son una rutina en la prctica clnica, no obstante, an en nuestros das ocasionan peligros inmunitarios, estos riesgos pueden evitarse mediante pruebas de la sangre del donador y del receptor antes de la transfusin. Las membranas de los eritrocitos humanos contienen antgenos de grupos sanguneos. En el ao de 1901 Landsteiner public sus observaciones acerca de la aglutinacin de los eritrocitos de algunos de sus colaboradores al mezclarlos con el suero de otro individuo, este hecho permiti descubrir la presencia de antgenos en la membrana de los eritrocitos, en la actualidad se conocen alrededor de 20 sistemas de grupos sanguneos diferentes y cada ao se descubren ms.

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Sistema ABO En el grupo ABO, los antgenos son mucopolisacridos unidos a la membrana del eritrocito y otras clulas. La segregacin de estos antgenos est regida por las leyes de la herencia de Mendel. Los antgenos para el gene A y B son dominantes, O es recesivo; as cuando uno de los progenitores dona el gene A, y el otro dona el gene O el hijo tendr sangre A, su genotipo es AO, pero si ambos progenitores le heredan el gene A su genotipo es AA y su fenotipo A. El sistema ABO se forma a partir de los genotipos (AA, AO; BB, BO; AB; OO) y los fenotipos son cuatro A, B, AB y O. Los eritrocitos pueden aglutinar con un suero especfico, de ah que a sus antgenos tambin se les denomine aglutingenos. As cuando un eritrocito contiene al aglutingeno A la sangre es tipo A, cuando existe el aglutingeno B la sangre es tipo B, cuando existen los dos aglutingenos A y B la sangre es AB y cuando no hay aglutingeno la sangre es del grupo O. Por otro lado, cuando los eritrocitos de un individuo contienen aglutingeno A su plasma contiene anticuerpos conocidos como aglutininas anti-B. Cuando los eritrocitos contienen aglutingeno B el plasma contiene aglutinina anti A. Las aglutininas son inmunoglobulinas M que se forman en las primeras semanas de vida. Tabla 7-1 SISTEMA SANGUINEO ABO GRUPO SANGUINEO A B AB O GENOTIPO AGLUTINOGENO
(antgeno presente en la membrana de los eritrocitos)

AGLUTININA
(anticuerpo presente en el suero)

FRECUENCIA EN PORCENTAJE 19 7 1 73

AA o AO BB o BO AB OO

A B AB Ni A, ni B

Anti-B Anti-A ninguno Anti-A, anti-B

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La determinacin del grupo sanguneo por una reaccin de aglutinacin es til para identificar la compatibilidad donador-receptor en las transfusiones sanguneas, en el diagnstico de la enfermedad hemoltica del recin nacido por incompatibilidad ABO-Rh y como un recurso auxiliar para descartar la paternidad. Sistema Rh. El 85% de la poblacin blanca tiene el antgeno Rh (llamado Rh ya que se descubri un antgeno similar por suero producido en conejos inmunizados con eritrocitos de mono Rhesus). Ahora se sabe que el factor Rh es de naturaleza proteica con propiedades antignicas que se localizan nicamente en la superficie del eritrocito. Las personas que poseen este antgeno se les denomina Rh+ (positivo) y los que carecen de l Rh-(negativo). Es importante conocer este factor por ser el principal responsable de la enfermedad hemoltica del recin nacido (EHRN) o tambin llamada eritroblastosis fetal. Esta enfermedad es una forma de anemia hemoltica que afecta al feto y al neonato. Aparece cuando los aloanticuerpos maternos frente a antgenos eritrocitarios fetales atraviesan la placenta y causan la hemlisis de los hemates del feto y tambin en la determinacin de la compatibilidad donador receptor en las transfusiones sanguneas MATERIAL POR EQUIPO 1 1 3 3 2 juego de sueros hemotipificadores.( anti-A, anti-B y anti-D ) placas excavadas de porcelana. aplicadores de madera. torundas de algodn con alcohol. lancetas estriles.

METODOLOGA Limpiar el lbulo de la oreja con una torunda con alcohol. Hacer una puncin con lanceta estril. Depositar una gota de sangre en cada uno de 3 pocillos de una placa excavada de porcelana.

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Agregar a cada pocillo en forma separada una gota de los sueros hemotipificadores anti A, anti B y Anti Rh. Mezclar la sangre y el suero con ayuda de un aplicador de madera, hacer movimientos rotatorios suaves durante 3 minutos para que produzca una mezcla uniforme. Leer las aglutinaciones a simple vista, comparar con el cuadro e identificar a que grupo sanguneo pertenece la sangre en el sistema ABO y en el caso del sistema Rh identificarlo de acuerdo a la explicacin del profesor. Figura 7-1

Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

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ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Qu diferencia existe entre suero y plasma? 2. Qu diferencia hay entre una reaccin de aglutinacin y una de precipitacin? 3. Qu grupos sanguneos tiene el sistema ABO? 4. Adems del sistema ABO y Rh, mencione tres sistemas de grupos sanguneos. 5. En qu parte del eritrocito se ubican los antgenos de grupo? 6. Por qu es importante conocer el genotipo de los grupos sanguneos? 7. Porqu el antgeno Rh (D) genera ms EHRN que los antgenos del sistema ABO? 8. Tratamiento para evitar la EHRN. 9. Mencione tres infecciones virales transmitidas por transfusiones sanguneas. 10. Describa brevemente los fundamentos y las ventajas de las siguientes pruebas diagnsticas inmunolgicas: anlisis inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), inmunofluorescencia directa e indirecta e inmunoblotting (Western blotting). Consulte los libros de inmunologa citados en la bibliografa, particularmente la inmunologa bsica y clnica de Parslow y colaboradores, pginas 3-81, 131-231.

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PRCTICA 10

El diagnstico inmunolgico por serologa en muestra nica es presuntivo; en cambio, el diagnstico microbiolgico siempre confirma la infeccin.

OBJETIVO Realizar el diagnstico inmunolgico de la fiebre tifoidea y paratifoidea, brucelosis y tifus exantemtico. INTRODUCCIN La fiebre es un mecanismo de defensa caracterizado por hipertermia, taquicardia, taquipnea, debilidad, intranquilidad o estupor. Se acompaa de artralgias, mialgias, anorexia, sed, elevacin del pulso, oliguria, sudoracin, sequedad de las mucosas y en ocasiones diversos sntomas neurolgicos. Generalmente se presenta escalofro previo a la elevacin de la temperatura. Las enfermedades que presentan fiebre, tienen su origen en las infecciones, traumatismos, neoplasias, accidentes vasculares; por alteraciones hematopoyticas, inmunolgicas o del metabolismo. El factor comn es la lesin tisular, cuyos productos inducen a trastornos en la termorregulacin cerebral. Entre las enfermedades infecciosas que presentan el sndrome febril destacan la brucelosis, la fiebre tifoidea y paratifoidea, la escarlatina, neumonas, paludismo, fiebre recurrente, hepatitis viral, tularemia, peste y ntrax.

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Durante el curso de las enfermedades anteriores, el cuerpo humano forma anticuerpos, stos adems de ayudar a combatir la infeccin sirven para diagnosticar la enfermedad. El aumento de anticuerpos contra determinado microorganismo en el suero de un paciente, indica que est infectado, estuvo infectado recientemente, o fue vacunado. El ttulo o cantidad de anticuerpos se forma o aumenta lentamente a partir del sptimo da de evolucin de la enfermedad, alcanza su mximo al vigsimo da y decae ms tarde. Como regla general las pruebas de aglutinacin tienen mayor valor diagnstico si se practican en forma seriada, (sueros pares), para observar si el ttulo de la aglutinacin aumenta progresivamente. La prueba se fundamenta en que el suero de un paciente con anticuerpos al mezclarse en vitro con bacterias muertas (antgeno) causantes de la infeccin, producen agregados o cmulos, a sta, se le llama prueba de aglutinacin Las reacciones febriles, constituyen una serie de pruebas serolgicas, para demostrar la presencia de anticuerpos aglutinantes contra ciertas enfermedades causadas por bacterias, especialmente tifoidea, paratifoidea, brucelosis y tifus exantemtico; comnmente se les conoce como reaccin de Widal para el caso de tifoidea y paratifoidea, de Huddleson para la brucelosis y de Weil Flix para el caso de tifus exantemtico. Tabla 8-1

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Antgenos febriles

Bacteria / dx

Nombre / infeccin Tifoidea

Nombre / prueba Widal Widal

Salmonella typhi O Salmonella typhi H Salmonella paratyphi A Salmonella paratyphi B Brucella abortus Proteus OX 19

Salmonella typhi Salmonella typhi Salmonella paratyphi Salmonella paratyphi Brucella abortus Rickettsia prowazekii Tifus exantemtico Weil-Flix Tifoidea Paratifoidea Paratifoidea Brucelosis Huddleson

MATERIAL POR EQUIPO 1 centrfuga. 2 tubos de hemlisis (13 x 100 mm). 1 placa de vidrio plano para aglutinacin. 1 pipeta de 1.0 ml graduada en 0.001 (serolgica). 1 pipetas Pasteur (0.2 ml). 1 jeringa con aguja estril de 5.0 ml. 1 frasco con tintura de yodo al 3%. 1 lmpara. 3 aplicadores de madera. 1 frasco de alcohol isoproplico al 80% o alcohol etlico. 1 ligadura. 3 torundas de algodn.

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1 gradilla 1 lpiz graso 1 juego de antgenos febriles: Salmonella tvphi O. Salmonella tvphi "H Salmonella paratyphi A. Salmonella paratvphi B. Brucella abortus Proteus OX-19 METODOLOGA 1. Aplicar tintura de yodo con una torunda de algodn sobre la regin seleccionada para la venopuncin. Empezar por el sitio central de la venipuntura ejerciendo un moderado movimiento hacia afuera en crculos concntricos. Eliminar el exceso de yodo con una torunda de algodn impregnada de alcohol. Realizar la puncin de la vena y extraer 5.0 ml de sangre. En caso de llevar a cabo simultneamente el hemocultivo, tomar en condiciones de esterilidad frente al mechero el doble de volumen sanguneo y transferir inmediatamente 5.0 ml en el medio de cultivo correspondiente. Depositar la sangre en un tubo de hemlisis para obtener el suero. Dejar coagular y centrifugar a 2,000 rpm durante 10 minutos. Transferir el suero con una pipeta Pasteur a otro tubo de 13x100 mm y etiquetar.

2. 3.

4. 5. 6.

Prueba cualitativa 1. 2. Marcar con el lpiz graso sobre la placa de vidrio, 6 crculos de 3.5 cm de dimetro. Depositar con la pipeta serolgica 0.08 ml del suero por probar en cada

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3.

Agitar perfectamente cada uno de los antgenos y con el gotero que acompaa a cada frasco, depositar una gota de un antgeno diferente (0.03 ml) para cada crculo. Mezclar el suero y los antgenos con 6 aplicadores de madera limpios (uno para cada crculo). Agitar rotando enrgicamente 25 veces durante tres minutos, evitando que se mezclen las reacciones de los diferentes crculos. Frente a una lmpara, observar inmediatamente si hay o no aglutinacin y anotar cuales antgenos aglutinaron. Hasta aqu la prueba se considera cualitativa y se informa para cada antgeno.

4.

5.

Prueba cuantitativa La prueba cuantitativa se realiza de acuerdo con los resultados positivos. 1. Colocar el suero positivo en otra placa limpia preparada en forma semejante, marcar 4 crculos y de derecha a izquierda depositar los siguientes volmenes del suero con la pipeta serolgica 0.04, 0.02, 0.01 y 0.005 ml y agregar a cada uno de los cuatro crculos una gota (0.03 ml) del mismo antgeno que di positivo en la prueba cualitativa. 2. Seguir las indicaciones de los incisos 10 y 11. 3. Determinar el ttulo de anticuerpos o sea la dilucin mxima del suero donde es capaz de aglutinar. La correspondencia a las diluciones es 0.08 ml suero + 0.03 ml antgeno = 1:20 0.04 ml suero + 0.03 ml antgeno = 1:40 0.02 ml suero + 0.03 ml antgeno = 1:80 0.01 ml suero + 0.03 ml antgeno = 1:160 0.005 ml suero + 0.03 ml antgeno = 1:320 4. De acuerdo a tus resultados llena el cuadro siguiente

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Tabla 8-2 Antgeno Aglutinacin + Salmonella typhi O Salmonella typhi "H Salmonella paratyphi A. Salmonella paratyphi B. Brucella abortus Proteus OX-19 Entregar un informe escrito INDIVIDUAL de los resultados obtenidos en la prctica y en casos positivos, indicar a que ttulo de anticuerpos la prueba es de valor diagnstico. Ttulo de anticuerpos

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Investigar en el marbete del reactivo que son los antgenos comerciales usados en estas pruebas. 2. Qu clase de inmunoglobulinas mide la tcnica de aglutinacin? 3. Investigue dos enfermedades inmunolgicas importantes que cursan con fiebre. 4. Mencionar tres enfermedades infecciosas donde la reaccin antgenoanticuerpo sea de utilidad diagnstica. 5. Consultar en los libros de microbiologa e infectologa, a que ttulo la prueba se considera de valor diagnstico y por qu?.

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6. Porqu tenemos anticuerpos contra agentes etiolgicos infecciosos que nunca hemos padecido? 7. Mencione otras pruebas inmunolgicas para demostrar anticuerpos contra: Salmonella tvphi O. Salmonella tvphi "H Salmonella paratyphi A. Salmonella paratvphi B. Brucella abortus Proteus OX-19 8. Qu individuos dan la prueba falsa negativa? 9. Tiempo en que se vuelve negativo un resultado positivo a Salmonella typhi O. 10. Proponer tres medidas preventivas para la fiebre tifoidea y paratifoidea.

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PRCG TICA XX

INCI

PRCTICA 11

Con frecuencia, la tincin de las bacterias por la tcnica de Gram, es el primer paso indispensable para demostrar la infeccin, identificar a la bacteria e investigar el antibitico adecuado para su tratamiento.

OBJETIVOS Desarrollar la tcnica de coloracin de Gram Observar las principales formas y tipos de agrupamiento que presentan las bacterias. INTRODUCCIN Las bacterias ahora incluidas en dos reinos: Archeabacterias y Eubacterias; se distinguen porque las Archeobacterias no producen peptidoglucano, habitan en ambientes extremosos (p. ej., temperatura alta, gran salinidad, o pH bajo), forman metano y no causan enfermedades en el hombre. Las Eubacterias causantes de enfermedades en el hombre se dividen en tres grandes grupos: Eubacterias gramnegativas con pared celular, Eubacterias grampositivas con pared celular y Eubacterias sin pared celular. La observacin de las bacterias, es a menudo el primer paso en la identificacin; para facilitar su estudio, las bacterias se tien. Uno de los mtodos de tincin diferencial ms tiles para la observacin, diferenciacin e identificacin de las bacterias es el desarrollado por el histlogo Dans Hans Christian Gram, el cual divide a las bacterias en dos grandes grupos: bacterias grampositivas y bacterias gramnegativas, lo que adems, ayuda grandemente

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en la seleccin del antibitico adecuado para el tratamiento de la infeccin. La respuesta a la tincin de Gram es una caracterstica taxonmica importante de las bacterias. La propiedad de tincin de Gram parece ser fundamental, debido a que la reaccin que implica tiene correlacin con muchas otras propiedades. Una bacteria determinada, es siempre grampositiva o gramnegativa, slo cuando se cumplan una serie de condiciones ambientales particulares y en un cultivo joven. El procedimiento para tincin de Gram comienza con la preparacin de un frotis delgado de bacterias sobre la superficie de un portaobjetos, se fija con calor y se inicia el procedimiento propiamente con la aplicacin de un colorante bsico, el cristal violeta. A continuacin, de aplica una solucin de yodo; todas las bacterias adquieren un color azul en ese punto. Las clulas se tratan entonces con alcohol. Las bacterias grampositivas retienen el complejo cristal violeta-yodo, y permanecen azules; las bacterias gramnegativas se decoloran por completo por efecto del alcohol. En un ltimo paso, se aplica una contratincin con el colorante de color rojo llamado safranina, de tal manera que las bacterias gramnegativas decoloradas adquieran un color contrastante rojo y las grampositivas se aprecian de color violeta. La base de la reaccin diferencial de Gram es la estructura de la pared celular; las paredes de las bacterias grampositivas tienen ms capas (hasta 40) de peptidoglucano, comparado con las dos capas que presentan las bacterias gramnegativas. Adems de contener grandes cantidades de cido teicoico y teicurnico. Estos tres componentes no existen en esa proporcin o calidad en las bacterias gramnegativas y son los responsables de la retencin del primer colorante en la tincin de Gram. . De acuerdo a su forma las bacterias se pueden dividir en tres grupos: cocos, bacilos y espirilos. Los cocos son de forma esfrica que al agruparse en pares se les llama diplococos, en cadenas estreptococos o en racimos estafilococos. Los bacilos presentan una forma cilndrica y pueden formar cadenas o agruparse en empalizadas o letras chinas como sucede con el bacilo diftrico (Corynebacterium diphtheriae) sin embargo la mayora de los bacilos no presenta ningn agrupamiento particular. Los espirilos tienen una forma de espiral y no presentan ningn agrupamiento en especial. Los cocos de mayor importancia como causantes de enfermedad en el hombre pertenecen a los gneros estafilococos, estreptococos y neisseria, este ltimo de bacterias gramnegativas. En los bacilos destacan entre los

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gamnegativos, los gneros Escherichia, Pseudomonas, Vibrio, Hemophilus, Yersinia, Bordetella y Brucella. En los gramnegativos sobresalen los bacilos diftrico y tetnico. Ejemplo de espirilo, es el agente etiolgico de la sfilis llamado Treponema pallidum. MATERIAL POR EQUIPO METODOLOGA Tcnica de Gram. 1. 2. Agregar con el asa bacteriolgica una pequea gota de agua de la llave en el centro del portaobjetos. Esterilizar el asa con la llama del mechero y tomar una pequea cantidad de la bacteria crecida sobre el medio de cultivo, suspenderla en la gota de agua de la llave, extenderla con el asa. Esterilizar sta con la flama y dejar secar al aire. Fijar la preparacin al calor de la siguiente manera: tomar la preparacin por uno de sus extremos con unas pinzas de diseccin y calentar suavemente con la flama del mechero la cara inversa donde se depositaron las bacterias (Evitar la calcinacin de las bacterias, retirando la preparacin de la flama) hasta que el agua se haya evaporado completamente. 1 portaobjeto. 1 asa bacteriolgica. 1 tubo de 13 X 100 mm con cultivos de Bacillus sp., Staphylococcus sp.,Streptococcus sp. (Gram+). 1 tubo de 13 X 100 con cultivo de Escherichia coli. (Gram-). 1 equipo de coloracin de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol-acetona, safrarina). 1 puente de coloracin. 1 mechero bunsen. 1 pinzas de diseccin. 1 hoja de papel seda.

3.

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4. 5.

Cubrir la preparacin con cristal violeta durante un minuto. Lavar suavemente con agua corriente, abriendo ligeramente la llave, evitando que el chorro de agua caiga directamente sobre la preparacin hasta que el agua escurra sin colorante. Cubrir con lugol durante un minuto. Lavar de la manera indicada en el paso nmero. 5. Decolorar con alcohol-acetona aproximadamente por 30 segundos. Lavar de la manera indicada en el paso nmero 5. Cubrir con safranina por un minuto. Lavar de la manera indicada en el paso nmero 5. Dejar escurrir el agua, esperar a que la preparacin seque completamente, agregar una gota de aceite de inmersin sobre las bacterias teidas y observar con el objetivo de inmersin. Las bacterias grampositivas se teirn de color violeta y las gramnegativas de color rojo.

6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13.

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Figura 9-1

Figura 9-2

Bacterias gram positivas

Bacterias gram negativas

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Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados que incluyan las formas y agrupaciones bacterianas con sus respectivos nombres, , conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Existe pared celular en las clulas que forman los tejidos del hombre? 2. Qu diferencias bsicas hay entre la paredes celulares de una bacteria y un hongo? 3. A qu Gram pertenecen los estafilococos y los estreptococos? 4. A qu Gram pertenecen el gonococo y el meningococo? 5. Mencione tres gneros de bacterias grampositivas en forma de bacilo de importancia mdica. 6. Qu gnero bacteriano de inters mdico no se tie por la tincin de Gram? 7. Por qu debe esperar a que se seque completamente la preparacin, antes de agregar el aceite de inmersin? 8. Mencione tres antibiticos tiles para tratar las infecciones por bacterias grampositivas. 9. Mencione tres antibiticos tiles para tratar las infecciones por bacterias gramnegativas 10. Investigue a qu Gram pertenecen las bacterias Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes

XX

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PRCTICA 12
TOMA DE MUESTRAS

La calidad de la muestra y su pronto procesamiento por el laboratorio, es fundamental para que el resultado sa de valor diagnstico. La

OBJETIVOS Realizar la toma de muestras para el diagnstico microbiolgico de las enfermedades infecciosas. Identificar de manera presuntiva el principal agente etiolgico de la faringitis bacteriana. INTRODUCCIN El diagnstico microbiolgico se fundamenta en la demostracin del agente etiolgico o partes de ste y el inmunolgico, en la demostracin de la respuesta inmunitaria hacia el agente infeccioso. Los procedimientos de laboratorio empleados en el diagnstico de enfermedades infecciosas en el hombre incluyen lo siguiente: 1. Identificacin morfolgica del agente infeccioso en tinciones de las muestras o en cortes de tejido por observacin al microscopio. 2. Aislamiento e identificacin en cultivo del agente infeccioso. 3. Deteccin de antgeno del agente mediante anlisis inmunolgico o con tinciones con anticuerpos fluorescentes. 4. Hibridacin ADN-ADN o ADN-ARN para detectar genes especficos de patgenos en muestras recolectadas del paciente. 5. Deteccin y amplificacin de los cidos nucleicos del microorganismo causante en muestras del paciente.

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6. Demostracin significativa de anticuerpos o de respuesta inmunitaria mediada por clulas a un agente infeccioso. Puesto que no existe una prueba simple que permita el aislamiento y caracterizacin de todos los posibles patgenos, la informacin clnica es mucho ms importante para el diagnstico microbiolgico que para la qumica clnica o la hematologa. Se debe establecer el diagnstico presuntivo en lugar de esperar los resultados del laboratorio y cuando se solicita pruebas de laboratorio, se debe informar al personal del agente infeccioso que se sospecha. Despus de obtener la muestra apropiada, se debe iniciar el tratamiento con frmacos dirigidos a combatir el microorganismo que se sospecha causa la enfermedad en el paciente, el resultado que puede tardar das e incluso semanas, sirve para revalorar el diagnstico, la evolucin clnica y tal vez modificar el plan teraputico. El personal de Enfermera es el responsable directo e indirecto de la toma de muestras y su entrega al laboratorio. Por lo que es de suma importancia el conocimiento del sitio en donde deben tomar las muestras, tanto para la identificacin del agente etiolgico de una enfermedad infecciosa, como para tomar las precauciones y los mtodos que debern seguirse en la obtencin de la muestra patolgica con fines diagnsticos. El tipo de muestra que se examina est determinado por el sitio de infeccin y cuadro clnico. Si los sntomas o signos indican afeccin de algn rgano, se deben tomar muestras de esa fuente. En ausencia de sntomas o signos de localizacin, se toman primero muestras repetidas de sangre para cultivo, y las de otros sitios se consideran despus en secuencia, segn la probabilidad de afeccin de un rgano determinado en un paciente dado y de la facilidad para obtener las muestras Para todas las muestras se aplican algunas reglas generales: La cantidad del material debe ser la adecuada. La muestra debe de ser representativa del proceso infeccioso ( p. ej., esputo, no saliva; pus de la lesin adyacente, no de su trayecto fistuloso; una muestra de lo profundo de la herida, no de su superficie). Se debe evitar la contaminacin de la muestra utilizando slo equipo estril, precauciones aspticas y de ser necesario en ayunas. La muestra se debe enviar al laboratorio y examinarse pronto. Los medios especiales para transporte pueden ser tiles.

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Se debe asegurar que las muestras significativas para el diagnstico de infecciones bacterianas y micticas se obtengan antes de administrar antimicrobianos; de lo contrario, terminar el tratamiento o interrumpirlo, esperar a que se elimine el antimicrobiano del organismo y repetir la toma de la muestra. La respuesta al tratamiento antimicrobiano en los padecimientos infecciosos es ms favorable cuando se conoce el agente causal y se emplea el tratamiento especfico para la erradicacin del microorganismo que, cuando con base a la experiencia clnica y epidemiolgica, se emplea un tratamiento emprico que puede cubrir las posibilidades etiolgicas del padecimiento. La diversidad de los padecimientos infecciosos condiciona un gran nmero de tipos y fuentes de muestras susceptibles de estudio microbiolgico. El recipiente con la muestra debe contener la siguiente informacin: Nombre del paciente. Nmero de registro. Edad. El sexo. La cama. El tipo de muestra. Fecha de recoleccin. Nombre del mdico solicitante. Usar guantes y cubre bocas en los procedimientos que se requieran.

Los resultados de las pruebas de laboratorio dependen principalmente de la calidad de la muestra, el momento y el cuidado con que se recolectaron, as como la eficiencia tcnica y experiencia del personal del laboratorio. Las tcnicas empleadas para caracterizar agentes infecciosos varan mucho segn el sndrome clnico y el tipo de agente causal considerado, ya sea virus, bacteria, hongo u otro parsito. Exudado farngeo Las vas respiratorias se dividen en superiores e inferiores. Las infecciones del tubo respiratorio superior son la faringitis, laringitis, epiglottis, amigdalitis y sinusitis y las del tubo respiratorio bajo son las neumonas, las

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bronconeumonas y la tuberculosis Las muestras de mayor utilidad diagnstica son: el exudado farngeo, el exudado nasofarngeo, el exudado nasal, el lavado bronquial o el esputo. Las vas respiratorias contienen una gran cantidad y variedad de microorganismos y las bacterias ms frecuentemente involucradas en las enfermedades anteriores son: Streptoccocus pyogenes (Estreptococo beta hemoltico), Streptococcus pneumoniae (Neumococo), Staphvlococcus aureus (Estafilococo dorado), Neisseria meningitidis (meningococo), Mycobacterium tuberculosis, Haemophilus influenzae y enterobacterias. MATERIAL POR EQUIPO 2 1 1 1 1 3 1 1 1 1 hisopos estriles. caja de gelosa sangre. caja de gelosa chocolate caja de gelosa s-s asa bacteriolgica. portaobjetos. puente de coloracin. equipo de colorantes para la tincin de Gram. mechero Bunsen. rollo de papel adhesivo (maskingtape).

METODOLOGA 1. 2. 3. Marcar en la base de una placa de gelosa sangre el nombre del paciente, muestra, equipo, grupo y fecha. Pedir al paciente que extienda la cabeza hacia atrs y que abra la boca. Con una lmpara iluminar perfectamente la faringe e inspeccionar zonas eritematosas, inflamadas, necrosadas, ulceradas o con membranas. Instruir al paciente para que respire profundo y hacer que la lengua descienda suavemente con un abate lenguas.

4.

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5.

Deslizar un hisopo estril en las zonas con las alteraciones antes mencionadas, cuidando de no tocar la lengua, los dientes y las paredes de la cavidad bucal. Pedirle al paciente que emita un aah para elevar la vula y ayudar a reducir el reflejo de la nusea. Pasar el hisopo rpidamente de un lado a otro de la faringe posterior a fin de obtener una muestra adecuada. En condiciones de esterilidad (con mechero), frotar el hisopo sobre una de las orillas del medio de gelosa sangre y extender por estra cruzada con asa bacteriolgica estril y fra de acuerdo con las instrucciones del profesor. Incubarla placa en forma invertida a 37C durante 24 horas. Observar la morfologa colonial, particularmente de las colonias de hemlisis beta hacer tincin de Gram e intentar dar una identificacin presuntiva con base a la morfologa microscpica y colonial.

6. 7. 8.

9. 10.

En el diagnstico de tuberculosis (TB) pulmonar debe tomarse esputo preferentemente la primera muestra de la maana al levantarse el enfermo, ya que durante la noche se acumula gran cantidad de secrecin bronquial en el aparato respiratorio lo cual sale con facilidad al empezar a toser el enfermo Figura 11-1

Exudado faringeo

Exudado nasal

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1. Marcar en la base de una placa de gelosa chocolate el nombre del paciente, muestra, equipo, grupo y fecha. 2. Pedir al paciente que extienda la cabeza hacia atrs 3. Con un hisopo estril girarlo en la mucosa de la fosa nasal. . 4. En condiciones de esterilidad (con mechero), frotar el hisopo sobre una de las orillas del medio de gelosa chocolate y extender por estra cruzada con asa bacteriolgica estril y fra de acuerdo con las instrucciones del profesor. 5. Incubarla placa en forma invertida a 37C durante 24 horas. 6. Observar la morfologa colonial, particularmente de las colonias de hemlisis beta hacer tincin de Gram e intentar dar una identificacin presuntiva con base a la morfologa microscpica y colonial.

Coprocultivo. Al cultivo de microorganismos, principalmente bacterias a partir de la materia fecal se le llama coprocultivo y a la observacin al microscopio ptico de quistes, trofozoitos, huevos o parsitos microscpicos de protozoarios y helmintos procedentes de la materia fecal se le conoce como coproparasitoscpico. En el coprocultivo se puede hacer el diagnstico de tifoidea, paratifoidea, disentera bacilar, gastroenteritis, clera y gastritis. Las bacterias ms frecuentemente involucradas son Salmonella, Shigella, Escherichia coli, Yersinia, Vibrio cholerae, Campylobacter y Helicobacter. Las muestras para bsqueda de rotavirus se manejan aparte, ya que se hace una suspensin en solucin salina de fosfato y se congela hasta su procesamiento. El examen coproparasitoscpico se toma en otro frasco y se enva a la seccin de parasitologa. METODOLOGA 1. Colocarlas muestras en un recipiente limpio, seco, de boca ancha y tapa hermtica. 2. La cantidad de materia fecal debe ser del tamao de una nuez.

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3. 4. 5. 6.

Recolectar la muestra en papel aluminio o encerado. No recolectar del inodoro o del suelo. No tomar laxantes ni administrarse supositorios o medios de contraste, los cuales interfieren con el cultivo. Entregar la muestra al laboratorio en un tiempo no mayor de 30 minutos despus de la defecacin. Las muestras diarreicas en nios se pueden recolectar con un hisopo rectal y procesarlas de inmediato cuando se pretende recuperar bacterias como Shigella y Campylobacter o diferir su procesamiento hasta por dos horas colocando el hisopo con la muestra en un medio de trasporte adecuado. Seleccionar con el asa bacteriolgica porciones purulentas. sanguinolentas o mucosas de la materia fecal y sembrar una pequea cantidad en la placa de gelosa S-S Etiquetar e incubar en posicin invertida la placa a 37 C durante 24 horas 9. Observar la morfologa colonial, hacer tincin de Gram e intentar dar una identificacin presuntiva con base a la morfologa microscpica y colonial.

7.

8.

Hemocultivo Al estudio microbiolgico de la sangre se le conoce como hemocultivo, con el se puede hacer el diagnstico especfico de las infecciones bacterianas sistmicas donde el sndrome caracterstico es la fiebre como son: brucelosis, fiebre tifoidea y paratifoidea, osteomielitis, , tifo, fiebre recurrente, tularemia, peste, ntrax, y otras septicemias. Las principales bacterias involucradas son: Brucella, Salmonella, enterobacterias, Streptococcus, Staphylococcus, Rickettsia, Francisella, Yersinia,

METODOLOGA

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1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

Explicar al paciente el procedimiento. Usar guantes y cubrebocas al tomar las muestras. Colocar la almohadilla debajo del brazo del paciente. Elegir la vena palpando la piel antes de desinfectarla. Aplicar sobre la piel alrededor del lugar donde se har la puncin, en un crculo de 5 cm de dimetro con tintura de yodo al 2%. Eliminar el exceso de yodo con un algodn impregnado de alcohol isoproplico al 80%. Realizar la puncin de la vena y extraer de 2 a 5 ml de sangre en forma asptica. El volumen depende del medio bifsico de cultivo empleado y si el paciente es nio o adulto. Transferir al medio de cultivo perforando con la aguja el tapn interno de hule sin romper la atmsfera interna de bixido de carbono del medio de cultivo. Agitar y entregar al laboratorio.

9.

Urocultivo. Al cultivo de microorganismos a partir de la orina se le conoce como urocultivo. Las enfermedades diagnosticadas por este mtodo son las que afectan a la vejiga (cistitis) y el rin (pielonefritis). Escherichia coli es el agente etiolgico de ms del 80% de estas infecciones, el resto las causan Staphylococcus, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, Streptococcus y Pseudomonas. El criterio para considerar que la bacteria cultivada es el agente causante de la infeccin es cuantitativo, las bacterias provenientes de la vejiga o del rin durante su residencia en la vejiga utilizan la orina como medio de cultivo, alcanzando una poblacin superior a 100, 000 bacterias por mililitro de orina, en cambio las que son arrastradas de la vagina, mucosas y piel circundante nunca llegan a esta cifra y se les considera contaminantes. La muestra de eleccin para hacer el diagnstico es la primera orina de la maana tomada por el mtodo de chorro medio. En recin nacidos, nios y ancianos la toma por este mtodo puede dificultarse, por lo que la muestra puede recibirse en una bolsa de plstico estril. MATERIAL POR EQUIPO 1 caja de petri con gelosa sangre de borrego al 5 %.

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1 1 2 1 1 1 1 1 1

caja de petri con gelosa EMB McConkey. asa calibrada en 0.001 ml. portaobjetos. cubreobjeto. tubo de hemlisis de 13 X 100 mm. equipo de Gram. microscopio. hoja de papel seda. frasco con aceite de inmersin.

METODOLOGA Adultos 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Preguntar a la paciente, si se ba y no esta menstruando. Si las respuestas son positivas, proceder a la toma de muestra; en caso contrario, pedir que cambie su cita. Preguntar a la paciente si tiene deseos de orinar (no inducir la miccin tomando agua). Solicitar a la paciente que se lave las manos y se las seque. Indicar a la paciente que se siente en el inodoro para facilitar la separacin de los labios mayores que cubren la vagina y el meato urinario. Indicar a la paciente que se descubra el orificio urinario, separando los labios con el pulgar y el ndice. Solicitar a la paciente que se lave la zona alrededor del meato urinario, con una gasa estril humedecida con agua y con jabn, haciendo movimientos de adelante hacia atrs. Limpiar de la misma manera con gasa estril humedecida con solucin salina estril. A los varones se les indica que con sus dedos jale hacia atrs la piel que cubre la cabeza del pene, esto es el prepucio y limpiar la zona del glande y meato urinario con gasa estril humedecida con solucin salina. En ambos sexos la muestra debe tomarse por el mtodo del chorro medio, que consiste en que el paciente debe desechar la primera porcin de la orina y recibir la parte media del chorro en un frasco estril

8.

9.

99

de boca ancha. 10. 11. Terminar de orinar en el inodoro. Agitar el frasco, anotar las caractersticas de la orina.

12. Depositar 10 ml de orina en un tubo de centrfuga, tarar y centrifugar a 3,000 rpm durante 15 min, decantar el sobrenadante y hacer dos frotis con el sedimento: En el primero, colocar de una a dos gotas de orina entre portaobjeto y cubreobjeto y observar al microscopio (40X). Reportar promedio de leucocitos por campo microscpio. En el segundo, colocar una gota de orina en un portaobjeto, dejar secar,fijar y teir por gram. Observar al microscpio (100X). Reportar promedio de bacterias por campo microscpico. 13. Con el asa calibrada, tomar una asada de la orina y estriar masivamente sobre una caja con gelosa sangre. Hacer el mismo procedimiento sobre una caja con gelosa EMB MacConkey. Incubar las placas en posicin invertida a 37 C por 48 horas. Observar si hubo crecimiento. Para que el nmero de colonias sea contable deben de haberse desarrollado de 25 a 250 colonias por placa de medio de cultivo. Hacer una tincin de gram para la identificacin presuntiva. 14. El mtodo oficial recomienda hacer una dilucin de orina 1 :100 en solucin salina estril (se coloca 9.9 ml de salina ms 0.1 ml de orina) y siembra masivamente sobre una caja con gelosa corazn cerebro. Para que el nmero de colonias sea contable deben de haberse desarrollado de 25 a 250 colonias por placa de medio de cultivo. Este paso no se har en la prctica porque se necesita orina de personas con infeccin bacteriana. Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1 Qu precauciones deber tener al tomar una muestra de un sitio

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2 3 4 5 6 7 8 9 10

normalmente estril? Qu precauciones deber tener al tomar una muestra de un sitio normalmente contaminado? A qu temperatura de conserva mejor una muestra? Cul es el tiempo lmite de entrega y procesamiento, para que una muestra de materia fecal sea til para el coprocultivo? Cul es la bacteria causante de la mayora de las infecciones de las vas urinarias? Qu bacteria aislada del hemocultivo la adquiri el paciente al consumir leche contaminada? Cul es el momento clnico apropiado en la toma sangunea para hemocultivo? Cul es el agente etiolgico ms importante de las infecciones de las vas respiratorias superiores? Qu caractersticas debe tener una muestra de materia fecal que haga sospechar de infeccin? Cuntas muestras deben tomarse de un hemocultivo, cuando las primeras resultan negativas?

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PRCTICA 13

Las manos de la Enfermera (o) en el hospital, son el problema y la solucin en la transmisin de las infecciones intrahospitalarias.

OBJETIVO Cuantificar por cultivo e identificar por su morfologa microscpica las diferentes poblaciones microbianas presentes en las manos. INTRODUCCIN El contacto entre el husped y el parsito conduce a diversas relaciones; as, la presencia temporal sin multiplicacin de los microorganismos sobre el husped se le conoce como contaminacin, trmino tambin utilizado para referirse a la presencia de microorganismos sobre o dentro de objetos inanimados. A la presencia y multiplicacin de los microorganismos sobre la piel o las mucosas del husped se le llama colonizacin, que si se acompaa de una respuesta inmunolgica con o sin invasin a tejidos o sntomas se le define como infeccin, pudiendo ser de dos tipos: infeccin sub clnica o infeccin con sntomas, mejor llamada enfermedad infecciosa. El trmino flora microbiana normal o mejor referida como microbiota

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normal, para no darle la connotacin de vegetales a las bacterias que habitan la piel y las mucosas de personas sanas a una edad determinada. Los microorganismos presentes en la superficie del cuerpo son comensales. La piel y las mucosas del hombre normalmente albergan un gran nmero de microorganismos, particularmente en aquellos sitios anatmicos de continua exposicin y contacto con el ambiente, donde abundan los nutrimentos y la temperatura y la humedad son favorables, la piel es particularmente rica en microorganismos como contaminantes, microbiota normal transitoria o microbiota normal residente, en las manos, las axilas, la regin ano-genital, el intestino, la boca y la vagina. Los microorganismos que alberga la piel pueden clasificarse en dos grupos: microbiota residente, que consta de tipos relativamente fijos de microorganismos presentes con regularidad en cierta regin a una edad determinada; cuando se altera, se restablece por si misma prontamente; microbiota transitoria, que consiste en microorganismos no patgenos, o potencialmente patgenos, que habitan la piel durante horas, das o semanas; se deriva del ambiente y no produce enfermedad, tampoco se establece por si misma de manera permanente sobre la superficie.. En general, los miembros de la microbiota transitoria tienen poco significado, mientras la microbiota residente normal permanezca intacta. Sin embargo, si la microbiota residente se altera, los microorganismos transitorios pueden colonizar, proliferar y producir enfermedad. Los microorganismos residentes predominantes de la piel son bacilos difteroides aerbicos y anaerbicos (p. ej; Corynebacterium, Propionibacterium), Staphylococcus epidermidis y ocasionalmente S.aureus y especies de Peptostreptococcus; bacilos grampositivos aerbicos formadores de esporas y ubicuos en el aire, agua y suelo; Streptococcus viridans, Streptococcus faecalis y bacilos coliformes gramnegativos y Acinetobacter. Con frecuencia, se encuentran hongos y levaduras en los pliegues cutneos; las micobacterias no patgenas acidorresistentes se observan en reas abundantes en secreciones sebceas (genitales y odo externo). La contaminacin de las manos es de gran importancia en la trasmisin de enfermedades infecciosas al paciente hospitalizado o en la contaminacin de los alimentos en el ambiente comunitario. El servicio de Enfermera juega un papel clave en la trasmisin de las enfermedades infecciosas dentro de un hospital, derivado del ntimo, frecuente

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y continuo contacto que el personal de Enfermera tiene con sus pacientes. No hay que olvidar que las manos de la Enfermera (o) tienen contacto directo con pacientes infectados y que estos, debilitados por su enfermedad de ingreso y por los procedimientos diagnsticos y teraputicos invasivos que frecuentemente se emplean en el nosocomio, son ms susceptibles a las infecciones. En las manos normalmente no residen grandes poblaciones microbianas, pero el contacto con los pacientes infectados y los materiales e instrumentos contaminados, las convierte en transmisoras de muchas infecciones. En esta prctica se realizar un cultivo de bacterias a partir de un lavado de manos para cuantificar el nmero y tipo morfolgico de microorganismos.

MATERIAL POR EQUIPO 2 placas de gelosa de Mueller-Hinton. 2 placas de gelosa sangre. 1 matraz conteniendo 200 ml de solucin salina estril. 1 recipiente estril de aluminio. 1 esptula de vidrio estril. 2 pipetas de 1.0 ml estriles. 2 tubos de 16 x 150 con rosca de 9.0 ml de solucin salina estril. 1 microscopio. 1 equipo de colorantes de Gram. 1 portaobjeto. 1 cepillo de uas estril. METODOLOGA 1. Solicitar a un alumno de cada equipo que no se lave las manos desde

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que se despierte en la maana hasta la realizacin de la prctica. 2. Vaciar frente al mechero 200 ml de la solucin salina estril en el recipiente de aluminio. 3. En el recipiente, frente al mechero, lavarse las manos enrgicamente con cepillado de uas. 4. En condiciones de esterilidad tomar con la pipeta 1.0 ml de esta solucin de lavado y mezclar con el tubo que contiene 9.0 ml de solucin salina, agitar y pasar 1.0 ml al segundo tubo y agitar. 5. Depositar 0.1 ml.de la solucin de lavado, del primer tubo y del segundo tubo sobre las gelosas de Mueller-Hinton y sangre y distribuir uniformemente con una esptula de vidrio estril sobre toda la superficie de ambos medios, sembrando medios de cultivo diferentes para cada caso (concentrado, 1:10 y 1:100). 6. Tapar las gelosas, etiquetar con la inicial del nombre, grupo y fecha. 7. Incubar las placas en posicin invertida a 37 C durante 48 horas en la incubadora. 8. Para que el nmero de colonias sea contable en ambos medios deben de haberse desarrollado de 25 a 250 colonias por placa de medio de cultivo. 9. Hacer tincin de Gram de una colonia representativa de cada poblacin bacteriana. 10. Considerando el volumen de lavado, alcuota y dilucin, calcular el nmero total de bacterias por mililitro crecidas en ambos medios de cultivo. 11. Informar el Gram, la forma y la agrupacin de cada una de las poblaciones bacterianas cultivadas, as como la cantidad de bacterias por mililitro. Figura 12-1

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Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Qu tan abundante es la microbiota residente normal en las palmas de las manos? 2. Cul es el gnero bacteriano ms abundante en las palmas de las manos? 3. Durante una puncin venosa; Qu bacteria de la microbiota residente normal puede pasar a la sangre y causar septicemias? 4. Cul es la mejor medida preventiva de infecciones intrahospitalarias a travs de las manos de la Enfermera(o)? 5. De dnde provienen las bacterias coliformes en las manos de la Enfermera(o). 6. Qu tipos de infecciones intrahospitalarias causan las bacterias coliformes? 7. Qu gneros bacterianos no son eliminados de la piel durante el lavado quirrgico de las manos? 8. En qu servicios hospitalarios no debe laborar la Enfermera)o) con infeccin superficial y benigna estafiloccica? 9. Qu parte de las manos puede albergar el mayor nmero de huevos, quistes y bacterias? 10. Qu enfermedades gastrointestinales se transmiten por manos contaminadas?

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PRCTICA 14

Los microorganismos existen en todos los ambientes, pero el hombre es el principal reservorio y transmisor de los microorganismos que causan enfermedad

OBJETIVO Investigar la distribucin y abundancia de los microorganismos en el medio ambiente. INTRODUCCIN Los microorganismos estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y se les puede encontrar prcticamente en cualquier sitio como aire, agua, alimentos, tierra, y en la piel y mucosas del hombre. A partir de estos sitios los microorganismos pueden invadir el cuerpo del hombre y causar enfermedades, tal es el caso de las infecciones de la piel y de las mucosas transmitidas por contacto directo; las infecciones gastrointestinales transmitidas por el agua y los alimentos, las infecciones de las vas respiratorias adquiridas por aire contaminado o el ttanos y la gangrena gaseosa adquiridas al ponerse en contacto tierra contaminada con esporas sobre una herida profunda. Los principales hbitat de los microorganismos son el suelo y el agua. El aire es un reservorio de microorganismos, pero en este sitio no hay multiplicacin; para que haya condiciones de crecimiento es necesario un abasto adecuado de agua y nutrimentos, adems de otros factores. Los

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requerimientos para la supervivencia no son tan numerosos como para el crecimiento. Algunos microorganismos del aire resisten la desecacin intensa, escacez de nutrimentos y amplias variaciones de temperatura, logrando sobrevivir, y an as, su permanencia en este medio es breve. Las formas resistentes pueden ser bacilos esporulados grampositivos, quistes de protozoarios, huevos de helmintos, hongos y bacterias en forma de coco, que resisten mejor por su menor superficie por masa o por la presencia de pigmentos que los protegen contra radiaciones nocivas. El hombre expele gran cantidad de microorganismos al estornudar, toser o hablar, los cuales alcanzan altas concentraciones en sitios cerrados y hacinados y se transmiten en distancias cortas a huspedes susceptibles. El nmero de microorganismos presentes en el aire es dificil de precisar con exactitud. Para cuantificarlos se exponen las placas de gelosa sangre de 15 a 60 minutos para que se adhieran por gravedad, y se identifican y cuentan las colonias despus de incubar. Otro mejor mtodo es filtrar un volumen determinado de aire y cultivar el contenido del filtro. El recuento de microorganismos transportados por el aire vara ampliamente, segn el lugar, corrientes de aire, momento del da, la estacin del ao, las condiciones climticas y otros factores. En un lugar urbano con alta densidad local de poblacin, puede ser desde pocos centenares hasta muchos miles por metro cuadrado. En esta prctica se har cultivo de microorganismos del aire, de las mucosas de las vas respiratorias y de la leche. MATERIAL POR EQUIPO 5 ml de leche pasteurizada. 3 placas de gelosa sangre. 3 placas de gelosa chocolate. 1 pipeta serolgica estril. 1 asa bacteriolgica. 1 puente de coloracin. 1 portaobjetos. 1 microscopio.

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1 1 1 1 1 1 1

frasco con aceite de inmersin. equipo de colorantes de Gram. frasco con clorhidrato de tetrametil-p-fenilendamina al 1 %. hoja de papel de seda. mechero bunsen. pinzas de diseccin. rollo de papel adhesivo (maskingtape)

METODOLOGA 1. Para cultivar los microorganismos del medio ambiente se usarn los medios de gelosa sangre y gelosa chocolate. 2. Para el cultivo de los microorganismos de las mucosas de las vas respiratorias, toser directamente a una distancia aproximada de 10 cm sobre la superficie de cada uno de los medios de cultivo. Tapar y etiquetar con el nmero de equipo, el grupo, la fecha y el tipo de muestra. 3. Para el estudio de los microorganismos del aire, dejar destapados sobre la mesa de trabajo durante 10 minutos cada uno de los medios de cultivo. Tapar y etiquetar. 4. Para el estudio microbiolgico de la leche, depositar 0.1 mI con la pipeta serolgica estril sobre la orilla del medio de gelosa sangre y extender con asa bacteriolgica por estra cruzada para aislamiento. En el caso de la gelosa chocolate, depositar el mismo volumen en el centro de la gelosa y extender con el asa bacteriolgica en forma homognea en toda la superficie para cuantificacin de microorganismos. Tapar y etiquetar. 5. Colocarlas placas en posicin invertida a 37C por 24 horas.

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6. Describirla morfologa colonial por su forma, tamao, superficie, elevacin, borde y consistencia y contar el nmero de colonias crecidas sobre la gelosa chocolate. 7. A partir de cada una de las colonias diferentes, hacer tincin de Gram y observar al microscopio con objetivo de inmersin la morfologa agrupacin y afinidad a la tincin de Gram. 8. Realizarlas pruebas de catalasa con perxido de hidrgeno al 3% y la de oxidasa con una solucin al 1% de clorhidrato de tetrametil-pfenilendiamina. Ambas pruebas se realizan agregando una gota del reactivo sobre el crecimiento en sitios separados. En la prueba positiva de catalasa se forman burbujas de oxgeno al descomponerse el perxido de hidrgeno y en la de oxidasa se observa el ennegrecimiento de las colonias debido a la oxidacin del reactivo 9. Hacer una identificacin presuntiva de las bacterias grampositivas y bacterias gramnegativas. Hay que mencionar que en muchos de los casos no bastan estos datos para identificar al microorganismo, por lo que se recurre a pruebas del metabolismo microbiano, sembrando a la bacteria por identificar en medios con diferentes carbohidratos y aminocidos, para que de acuerdo a su actividad enzimtica al compararla en tablas de resultados previamente establecidos en los libros de microbiologa mdica hacer la identificacin. Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

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1. Cules son los gneros bacterianos que se encuentran en el aire contaminado de sitios con grandes concentraciones humanas? 2. En qu medidas se informa la cantidad de microorganismos en el aire? 3. Cules son los microorganismos de la biota normal de las vas respiratorias superiores? 4. Cules son las principales complicaciones y secuelas de una faringoamigdalitis por Streptococcus pyogenes. 5. Cmo se previene la fiebre reumtica? 6. Qu tipo de alimentos frecuentemente transmiten la tifoidea? 7. Qu favorece las infecciones de las vas urinarias en mujeres? 8. Por qu debe refrigerarse la leche pasteurizada? 9. Qu es una leche pasteurizada, ultra pasteurizada, desodorizada y preferente ? 10. Qu determina que una herida profunda contaminada con esporas desarrolle gangrena o ttanos?

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PRCTICA 15
LOS HON

Los hongos que causan enfermedades infecciosas en el hombre, son pocos, benignos y superficiales en huspedes inmunocompetentes, pero difciles de tratar. SS

OBJETIVO Observar la morfologa microscpica y colonial de los hongos.

INTRODUCCIN Los hongos son organismos pertenecientes al reino Fungi, formados por clulas eucariotas, capaces de nutrirse al consumir otros organismos (hetertrofos), con pared celular formada de quitina, celulosa y polipptidos y carecen de clorofila. Al carecer de ste pigmento, los hongos no pueden realizar la fotosntesis y deben nutrirse a partir de la materia orgnica ya elaborada; tienen la habilidad de descomponer organismos muertos o de vivir en organismos como parsitos. Por lo anterior, los hongos tienen gran importancia para conservar el equilibrio en la naturaleza; adems, intervienen en la produccin del humus del suelo, como alimento o se utilizan en la elaboracin de pan, vino, cerveza, quesos, salsa de soya, cido ctrico, antibiticos y algunos pueden causar infecciones e intoxicaciones en el hombre y en los animales. Los hongos estn formados por clulas eucariontas que crecen como tubos o filamentos de longitud variable y de un grosor mayor a un micrmetro llamadas hifas; las cuales pueden tener o no separaciones internas llamadas tabiques o septos. Los hongos inferiores no presentan separaciones internas y

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el protoplasma fluye libremente, en los hongos superiores existen tabiques transversales, los cuales presentan poros que permiten el paso del citoplasma y el ncleo, de ah que las hifas no consten de clulas sino de compartimientos. Al conjunto de filamentos o hifas ramificados y entrelazados se le conoce como micelio, y est constituido de dos partes: a) micelio vegetativo, responsable del desarrollo, la nutricin, la fijacin y la edificacin de la parte reproductora y b) micelio reproductor o areo donde se forman los rganos de reproduccin. Cuando el micelio est constituido por hifas sin separaciones se le nombra micelio cenoctico y cuando presenta septos, micelio tabicado. A los hongos que forman micelio de les llama mohos.Menos a menudo, los hongos estn formados por estructuras unicelulares ovoides o esfricas, de paredes delgadas de 4 a 10 micrmetros de dimetro llamadas levaduras. Existen hongos macroscpicos y microscpicos; los que causan infecciones en el hombre son microscpicos y suman alrededor de 100 especies. Las enfermedades causadas por hongos microscpicos se les llama micosis y toman el nombre de la parte del organismo que invaden, ejemplo, onicomicosis, en el caso de las uas o del nombre del gnero de hongo que las causa, ejemplo Coccidiodes immitis la coccidiodomicosis). Segn su localizacin, las micosis se clasifican en tres grandes grupos: superficiales, profundas (subcutneas, sistmicas) y oportunistas. Los hongos que tienen una fase parastica en forma de levadura y una saprfita con micelio se llaman dimorfos; si crecen a una temperatura ambiental de 20 a 25 C, presentan la forma de micelio y si la temperatura es de 37 C, forman levaduras. Los hongos de inters mdico son microscpicos y slo se pueden observar a simple vista las colonias miceliales o levaduriformes crecidas sobre un medio de cultivo apropiado (Sabouraud). La identificacin de los hongos se basa en las caractersticas microscpicas de las hifas, formas de reproduccin, morfologa colonial, fermentacin de azcares y las pruebas inmunolgicas de sensibilidad cutnea y las reacciones serolgicas. Existe un nmero limitado de antibiticos que pueden emplearse para

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tratar las infecciones micticas. Casi todos tienen una o ms limitaciones, como sus efectos adversos intensos, el espectro antimicrobiano reducido, la escasa penetracin a ciertos tejidos y la capacidad de inducir la seleccin de cepas resistentes. Los ms recientes y de desarrollo creciente son los inhibidores de la sntesis de ergosterol, pertenecientes al grupo de los imidazoles como el miconazol, clotrimazol, ketoconazol, fluconazol, itraconazol y otros. Los gneros de mayor importancia en Mxico son: Epidermophyton, Trichophyton y Microsporum que causan las tias; Coccidioides immitis que causa la coccidioidomicosis, Histoplasma capsulatum agente etiolgico de la histoplasmosis y el hongo levaduriforme llamado Candida que puede causar infecciones en la mayor parte de los rganos y tejidos del humano. MATERIALPOR EQUIPO 1 1 2 2 1 1 1 1 1 microscopio. asa bacteriolgica. portaobjetos. cubreobjetos. frasco de azul de anilina. cultivo de Candida sp. pedazo de pan o tortilla con hongos miceliales. mechero Bunsen. hoja de papel seda.

METODOLOGA 1 2 3 Depositar sobre un portaobjetos una gota de azul de anilina. Destapar cerca de la llama del mechero el tubo que contiene el cultivo de Candida sp. Flamear el asa bacteriolgica, introducirla en el tubo que contiene el cultivo enfrindola en una parte libre de l y tomar una pequesima cantidad. Colocar esta cantidad de cultivo en la gota de azul de anilina. Homogeneizar.

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En el caso del pan o tortilla tomar directamente con el asa bacteriolgica el micelio crecido sobre la superficie de estos alimentos y colocarlo sobre la gota de anilina contenida en otro portaobjetos. Depositar un cubreobjetos sobre cada una de las preparaciones. Observar al microscopio en el objetivo seco dbil y seco fuerte. Dibujar lo observado y comparar con los esquemas del libro de micologa mdica ilustrada. Con base a la morfologa colonial y a lo observado en el microscopio tratar de llegar a una identificacin presuntiva de los hongos estudiados. Figura 15-1

6 7 8 9

Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una

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introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Cules son las dos formas caractersticas de los hongos? 2. Cul es el medio de cultivo ms usado para el cultivo de los hongos? 3. Qu diferencias existen entre las colonias de los hongos y de las bacterias ? 4. Qu es un dermatofito? 5. Describa brevemente como se hace el diagnstico microbiolgico de las tias 6. Mencione tres gneros de hongos que causan micosis superficiales. 7. Mencione el factor local ambiental que favorece la tia de los pies. 8. Mencione cuatro micosis profundas existentes en Mxico? 9. Cul es el reservorio de Histoplasma capsulatum? 10. Cul es la medida preventiva ms importante en la candidiasis Oral?

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PRCTICA 16

Los protozoarios ms importantes que parasitan al hombre, utilizan vectores mecnicos o biolgicos para su transmisin.

OBJETIVOS Observar diversos protozoarios de inters mdico y conocer sus principales caractersticas. Realizar la tcnica de coloracin de Giemsa. INTRODUCCIN La palabra protozoario se deriva del griego proto, primero, y zoo, animal; es decir, son los primeros animales. Son organismos microscpicos que miden de 2 a 60 m, unicelulares, eucariotes y hetertrofos, en donde cada clula es la responsable de todas las funciones que caracterizan a un organismo multicelular como la ingestin, digestin, excrecin, reproduccin, movilidad, etc. Por lo general presentan dos estados de desarrollo: el de trofozoto, que es la forma vegetativa y mvil causante del dao y el de quiste, que es la forma inmvil de resistencia responsable de la transmisin. De acuerdo con sus organelos de locomocin, los protozoarios se dividen en cuatro grandes clases: Sarcodinos, flagelados, ciliados y esporozoarios los cuales se mueven respectivamente por pseudpodos, flagelos, cilios y los esporozoarios que generalmente no presentan movilidad. El diagnstico de laboratorio de estas parasitosis se realiza por la observacin al microscopio de los caractersticos quistes y trofozotos de cada

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especie a partir de diversas muestras como materias fecales, biopsias, sangre y otros lquidos tisulares. El examen de laboratorio para demostrar la presencia de protozoarios y helmintos intestinales, se le llama coproparasitoscpico, se basa en la observacin al microscopio de los caractersticos trofozotos, quistes y huevos; en el diagnstico del paludismo es de gran utilidad la tcnica de Giemsa para teir las clulas sanguneas e identificar las diferentes especies de Plasmodium dentro y fuera de los eritrocitos y en la tricomoniasis, el diagnstico se efecta por examen directo o Papanicolaou de las secreciones genitales para demostrar el flagelado. Existe una gran variedad de frmacos contra los protozoarios, destacan el metronidazol y la nitazoxanida en el tratamiento de la amibiasis, giardiasis, balantidiasis y tricomoniasis; la cloroquina con primaquina en el manejo del paludismo y la pirimetamina en la medicacin contra la toxoplasmosis. Las parasitosis constituyen un problema de salud pblica en los pases en desarrollo, sobre todo en las comunidades rurales donde los hbitos de higiene son deficientes. Las principales medidas preventivas dependen de la forma de transmisin de cada parasitosis. En las intestinales, la adecuada disposicin de excretas, la buena calidad de agua y alimentos, el lavado de manos antes de comer, despus de ir al bao y antes de preparar los alimentos y el control de la fauna nociva, especialmente moscas, impiden la transmisin de estas parasitosis. Entre los protozoarios de mayor importancia mdica en Mxico, destacan: Entamoeba histolytica (amibas), diversas especies del gnero Plasmodium, Trichomonas vaginalis, ToxopIasma gondii y Leishmania mexicana, causando respectivamente la amibiasis, el paludismo, la trichomoniasis, la toxoplamosis y la leishmaniasis. El trofozoto de Entamoeba histotytica mide de 15 a 30 m, se mueve por seudpodos, con movimientos rpidos y unidireccionales. El citoplasma est dividido en ectoplasma, que es hialino y transparente, y el endoplasma, que es granuloso y puede contener eritrocitos. El ncleo es esfrico, con cromatina granular distribuida en forma regular en la periferia y un endosoma o cariosoma central caracterstico. El quiste maduro mide de 15 a 20 m, es esfrico, con doble membrana y cuatro ncleos. Se encuentra en la luz del colon y en heces semipastosas formadas.

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Los plasmodios presentan diferentes formas de acuerdo a la especie y al estado de desarrollo: trofozotos, merozotos, esquizontes, plasmodios, gametocitos o esporozotos. El trofozoto de tamao menor a 7 m, se caracteriza por tener ncleo y citoplasma homogneo, as como una gran vacuola que desplaza al citoplasma y al ncleo hacia la periferia, lo que le da forma de anillo. Los plasmodios durante la enfermedad, se ubican caractersticamente dentro de los eritrocitos, lo que permite la identificacin del gnero y la especie con fines diagnstico. Trichomonas vaginalis slo presenta el estadio de trofozoto, con apariencia de pera, y mide de 7 a 30 m de largo por 4 a 15 m de ancho. Posee una membrana ondulante y en su extremo anterior se observa un penacho de cuatro flagelos, en tanto que otro bordea la membrana ondulante. Cerca del blefaroplasto se inicia el axostilo, que es puntiagudo y sobrepasa el polo posterior del cuerpo. El ncleo es excntrico y muy grande, con endosoma. Es un organismo muy resistente, ya que tolera hasta cinco das fuera del husped. La enfermedad se transmite por contacto sexual, pero tambin por toallas, asientos de excusados, materiales de exploracin ginecolgica y otros fmites contaminados con secreciones genitales. MATERIAL POR EQUIPO 1 microscopio. 1 frasco con aceite de inmersin. 1 frotes de sangre teidos por Giemsa, procedente de personas con paludismo. 1 preparacin fija de Entamoeba histolytica. (quiste y otra de trofozoito) 1 preparacin fija de Giardia lamblia. (quiste y otra de trofozoito) 1 preparacin fija de diferentes especies de Plasmodium. 1 tubo de 13 x 100 con secreciones recientes (1-8 horas) de Trichomonas vaginalis. 1 hoja de papel seda. 1 preparacin fija de Tripanosoma cruzii 1 preparacin fija de Tripanosoma brucei 1 preparacin fija de Entamoeba proteus

METODOLOGA

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1. En comparacin con las figuras del libro de parasitologa, hacer una identificacin presuntiva de la especie Plasmodium y de la forma, tamao y caractersticas del ncleo en el caso de amibas. 2. En comparacin con las figuras del libro de parasitologa, hacer una identificacin presuntiva de la especie de Entamoeba histolytica y su diferenciacin de otras amibas intestinales. 3. Dibujar sus observaciones y sealar con sus nombres tcnicos los protozoarios estudiados. 4. Identificar los eritrocitos y leucocitos comparando con una tabla de hematologa e investigar la presencia de Plasmodium dentro de los eritrocitos apoyndose en las figuras de los libros. Hacer dibujos a colores con sus respectivos nombres. Figura 16-1

Plasmodium vivax

Figura 16-2.

Plasmodium vivax.

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Figura 16-3.

Plasmodium falciparum

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Plasmodium malariae

Plasmodium malariae.

Figura 16-4.

Plasmodium malariae

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Figura 16-5

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Figura 16-6

Figura 16-7

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Figura 16-8

Figura 16-9

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Figura 16-10

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Figura 16-11

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Figura 16-12

Figura 16-13

Trofozoto deEntamoebahistolyticaQuiste deEntamoebahistolytica Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Parte del aparato digestivo frecuentemente atacado en la amibiasis:

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2. El vector mecnico ms importante en la transmisin de la amibiasis: 3. En las heces diarreicas frescas, de un paciente con sntomas de amibiasis; Qu estadio del parsito debe buscarse? 4. Qu grupo etario es ms susceptible a la gardiasis? 5. Cul es la principal forma de transmisin de la tricomoniasis? 6. La muestra apropiada para el diagnstico de la tricomoniasis: 7. Las principales clulas que se parasitan en el paludismo sintomtico: 8. Mencione la principal tcnica para el diagnstico del paludismo: 9. Cul es el husped definitivo de Toxoplasma gondii? 10. En qu personas es particularmente peligrosa la toxoplasmosis?

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PRCTICA 17

La teniasis adquirida al ingerir cisticercos en la carne contaminada generalmente es benigna, pero, la cisticercosis por ingerir huevos en los alimentos contaminados generalmente es grave.

OBJETIVO Observacin de huevos, cisticercos, progltidos y parsitos adultos de las tenias de mayor importancia mdica. INTRODUCCIN Los metazoarios o helmintos son un grupo de organismos pluricelulares, macroscpicos, caracterizados por una segmentacin del vulo y comnmente llamados gusanos. Esta divisin del reino animal comprende varias ramas o Phyla, las de inters como parsitos del hombre son la Platyhelminthes y Nemathelminthes, a las cuales pertenecen las clases Cestoda, Trematoda y Nematoda. De stas, slo se tratar a los cstodos y nemtodos. Cstodos son gusanos planos y los nemtodos son gusanos redondos. Ambos estn formados por clulas eucariontes y son hetertrofos comunes de zonas tropicales. Las tenias son cstodos segmentados, sin cavidad celmica que miden desde 10 mm para el caso de la tenia enana hasta varios metros para el caso de la solitaria, son hermafroditas, presentan un sistema nervioso simple, carecen de aparato digestivo y presentan un aparato reproductor desarrollado. El cuerpo del parsito adulto est constituido por la cabeza o excolex, que es

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del tamao de la cabeza de un alfiler; el cuello, zona de crecimiento, y el estrbilo, que constituye el resto del cuerpo y est formado por segmentos llamados progltidos. La longitud total del parsito adulto puede medir de 5 a 10 metros. Carece de aparato digestivo, de modo que su nutricin se realiza a travs de la cutcula de todo el estrbilo. El aparato reproductor est muy desarrollado y en cada uno de los progltidios (los segmentos del estrbilo) se presenta tanto el aparato masculino como el femenino y tiene ms huevos a medida que se separa del esclex de la tenia. La tenia adulta vive en el intestino delgado del hombre, por lo que los huevos salen en la materia fecal libre o dentro del progltidio. La forma larvaria o cisticerco mide de 0.5 a 1.0 cm de dimetro; es una vescula blanquecina llena de lquido con el esclex invaginado. Los huevos son esfricos u ovoides miden de 20 a 40 m de dimetro, de doble pared gruesa y radiada, y en su interior se localiza el embrin hexacanto o oncosfera. En su forma adulta las tenias que con mayor frecuencia parasitan el intestino del hombre son: Hymenolepis nana y las solitarias Taenia saginata y Taenia solium. Las tenias presentan tres estados de desarrollo: Parsito adulto, vulgarmente llamado solitaria. Cisticerco, que es la forma larvaria. Huevo, que contiene el embrin hexacanto u oncosfera. El ciclo biolgico se inicia cuando las personas infectadas con tenias adultas eliminan en las heces huevos y progltidos grvidos de color blanquecino. Si las heces, se depositan en el suelo y los cerdos o las reses estn sueltos, ingieren la materia fecal con huevos de tenia. Cuando los huevos llegan al intestino del cerdo o de la res, liberan los embriones hexacantos, los cuales atraviesan la pared intestinal y, a travs de la sangre, pueden establecerse en los msculos del lomo y piernas traseras, pared inferior de la lengua, tejido subcutneo o diversos rganos, donde pierden sus ganchos y se enquistan, transformndose en cisticercos. El hombre se infecta al ingerir carne de cerdo o de res con cisticercos insuficientemente cocida. Ya en el intestino delgado del hombre, el cisticerco se libera, se desenvaina y se fija en el intestino delgado (duodeno) hasta que se convierte en tenia adulta, capaz de producir miles de huevos diarios, ser eliminados en las heces y causar una enfermedad intestinal generalmente benigna llamada teniasis. Cuando el

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hombre ingiere huevos al consumir agua o alimentos contaminados con materia fecal de un paciente con teniasis, se libera el embrin hexacanto; ste llega al duodeno en 24 a 48 horas, atraviesa la pared intestinal y alcanza el tejido subcutneo, msculo estriado y cardiaco, ojos, hgado, pulmn y cerebro, desarrollando una peligrosa enfermedad llamada cisticercosis. MATERIAL POR EQUIPO 1 1 1 1 1 1 microscopio estereoscpico. microscopio ptico ordinario. preparacin fija de huevos de tenias. preparacin fija de progltidos de tenias. frasco de 50 ml con cisticercos en formol al 5% frasco de 500 ml con esclices de tenia en formol al 5%.

METODOLOGA 1. Observar los huevos de las tenias en el microscopio ptico con el objetivo seco fuerte. Comparar con las figuras del manual y de los libros de parasitologa y hacer dibujos con sus respectivos nombres tcnicos. 2. Observar los progltidos al microscopio estereoscpico, comparar con las figuras y hacer dibujos. 3. Observar los cisticercos y tenias adultas a simple vista, comparar sus tamaos y sus caractersticas morfolgicas, hacer dibujos y sealarlas por sus nombres tcnicos. Figura 17-1 a. b. FF Figura 17-2

132

Figura 17-3

Figura 17-4

133

Figura 17-5

Figura 17-6

134

Figura 17-7

Huevos de tenia

Cisticercos

Tenia adulta

Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Cmo se reproducen las tenias? 2. Cul es el husped definitivo de de las tenias? 3. Mencione el nombre de la tenia ms pequea que parasita al hombre. 4. Describa la forma de cmo adquiere el hombre la teniasis. 5. Describa la forma de cmo adquiere el hombre la cisticercosis. 6. Describa la forma de cmo adquiere el cerdo la cisticercosis. 7. Mencione tres medidas para evitar la teniasis en el humano. 8. Mencione tres medidas para evitar la cisticercosis en el humano. 9. Cmo se hace el diagnstico de laboratorio en la teniasis? 10. Cmo se hace el diagnstico de laboratorio en la cisticercosis?

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PRCTICA 18

OBJETIVO Observacin de huevos y parsitos adultos de los gusanos cilndricos de mayor importancia mdica.

INTRODUCCIN Los nemtodos o nematelmintos son gusanos redondos que miden desde unos cuantos milmetros hasta varios centmetros, tienen sexos separados, tubo digestivo completo terminado en ano y una cavidad celmica en la que circula la hemolinfa y en donde se alojan libremente los distintos rganos y aparatos, incluyendo un aparato reproductor desarrollado y el sistema nervioso. En trminos generales, las hembras son de mayor longitud y los machos tienen la extremidad caudal enrollada. A lo largo de su ciclo biolgico, los nematodos pasan por diversos estadios larvales hasta llegar a su estado adulto con rganos sexuales maduros. Todos producen huevos, pero algunas especies son ovovivparas y en ellas la eclosin del huevo ocurre en el tero. Existe un gran nmero de especies parsitas del humano y muchas ms parsitas de animales, que ocasionalmente pueden parasitar al hombre; desde luego que entre los nematodos hay, adems, otras especies de vida libre. Strongyloides es el nico parsito facultativo, pues tiene la opcin de vivir en un husped como parsito o completar todo su ciclo biolgico en la naturaleza, como animal de vida libre.

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Entre los nemtodos parsitos, la mayor parte tiene un solo husped, que por supuesto funciona como husped definitivo; la mayor parte de ellos son parsitos peridicos, pues pasan algunas semanas fuera de su husped, durante la transmisin. Las filarias tienen, adems, un husped intermediario, regularmente un artrpodo, y son parsitos permanentes, pues en ningn momento estn fuera de los huspedes. Los nemtodos cuentan con diferentes mecanismos de infeccin: Autoinfeccin; sta existe en Enterobius y Strogyloides, por lo cual stos son los dos nicos gusanos redondos que pueden aumentar su poblacin en un husped sin que ste se exponga a la reinfeccin. Contagio; esto es por contacto personal con individuos infectados, ejemplificado slo en Enterobius. Fecalismo;es decir por la ingestin de materias fecales humanas frescas, mecanismo vlido para Enterobius , Strongyloides y Necator. Por suelo; mecanismo en el cual las formas infectantes se adquieren a partir del suelo, pues los huevos de los parsitos no son infectantes en el momento de la evacuacin y requieren varias semanas de metamorfosis. Ascaris lumbricoides y Trichuris trichiura slo se transmiten a travs del suelo. Necator americanus y Strongyloides tambin pueden usar este mecanismo. Ingestin de carne mal cocida de animales infectados, cuyo ejemplo tpico es Trichinella spiralis. Por artrpodos que tambin actan como huspedes intermediarios, como ocurre con todas las filarias. Los nematelmintos infectan al hombre tanto sus larvas como sus gusanos adultos y se alojan segn la especie, de diversos rganos como intestino, tejido subcutneo, pulmn, sangre, etc. El nematelminto ms importante en Mxico es Ascaris lumbricoides o tambin conocido como lombriz intestinal que causa la enfermedad llamada Ascariasis. Se trata de un gusano de 15 a 40 cm de largo por 5 a 10 mm de ancho, se aloja en el intestino delgado, vive de 12 a 18 meses. Los huevos aparecen en la materia fecal, son ovalados, miden de 40 a 80 m y requieren de condiciones ambientales apropiadas en el suelo, para tres semanas ms tarde tornarse infectantes.

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El nemtodo Trichuris trichiura, tambin llamado tricocfalo, debido a lo delgado de la parte anterior (tricho, cabello y cfalo, cabeza) causa la tricocefalosis. Tiene aproximadamente 4 cm de largo, los machos son de menor tamao y su regin caudal est incurvada ventralmente. Los huevos eliminados en las heces no estn embrionados y requieren de 2 a 3 semanas en suelo sombreado y hmedo para tornarse infectivos, son de forma ovoide o de barril y poseen una membrana vitelina y una membrana externa ms gruesa y resistente; en los extremos tienen dos tapones mucilaginosos que les la apariencia de limn. La parasitosis afecta el ciego y se transmite por el suelo. Enterobius vermicularis o tambin conocido como oxiuro, causa la oxiuriasis. Son parsitos pequeos, de 1 cm de longitud, delgados como alfileres y puntiagudos en sus extremos. Los huevos son infectivos desde el momento de su expulsin por las hembras en la regin peri anal, no son transmitidos por el suelo, sino a travs de las manos, ropa interior y de cama que contamina objetos, alimentos y agua. En las noches, las hembras depositan los huevos en las mrgenes del ano, provocando prurito anal nocturno y que al rascarse se depositan en las ua, Las muestras con fines diagnsticos se toman de los pliegues anales. Los huevos, ovoides y asimtricos, poseen una cubierta delgada y transparente que deja ver la larva desarrollada y activa (embrionados). Otros nematelmintos importantes son: Necator americanus, Onchocerca volvulus y Trichinella spiralis agentes etiolgicos de la uncinariasis, oncocercosis y triquinosis respectivamente. MATERIAL POR EQUIPO 1 1 1 1 1 microscopio estereoscpico. microscopio ptico ordinario. preparacin fija de huevos de A. lumbricoides (lombriz intestinal). preparacin fija de huevos de Trichuris trichiura (tricocfalos). preparacin fija de huevos de Enterobius vermicularis (oxiuros).

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2 parsitos adultos (macho y hembra) de A.lumbricoides en formol al 5%. 2 parsitos adultos (macho y hembra) de T. trichiura en formol al 5%. 1 preparacin fija del parsito adulto de E. vermicularis. 1 hoja de papel seda. METODOLOGA 1. Observar los huevos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura y Enterobius vermicularis con los objetivos seco dbil y seco fuerte del microscopio ptico ordinario. 2. Observar los parsitos adultos de Trichuris trichiura y Enterobius vermicularis en el microscopio estereoscpico. Observar a simple vista los parsitos adultos hembra y macho de Ascaris lumbricoides. Hacer dibujos y comparar con las figuras del manual y de libros de parasitologa. Figura 18-1

3.

4.

Figura 18-2

139

Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Qu nemtodos se transmiten a partir del suelo? 2. Qu nematelmintos se transmiten por vectores biolgicos? 3. De qu forma y tamao aproximado son los scaris? 4. En donde se alojan los parsitos adultos causantes de la ascariasis? 5. A partir de que sitio ambiental se transmite la ascariasis? 6. Cul es el examen de laboratorio para el diagnstico de la ascariasis? 7. Mencione tres medidas para prevenir la ascariasis. 8. Complicacin frecuente de la tricocefalosis: 9. En nios; Cul es el sntoma caracterstico de la oxuriasis? 10. Cul es la va de penetracin de las uncinarias en el hombre?

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PRCTICA 19

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El agua no se crea, ni se destruye, solo se contamina; por lo que, el agua dulce y no contaminada ser un recurso muy codiciado por las sociedades futuras.

OBJETIVO Determinar la calidad del agua por mtodo qumico y microbiolgico.

INTRODUCCIN El agua, forma parte de una gran variedad de materiales en la naturaleza, tanto vivos como inanimados. Esta singular ubicuidad del agua y su insustituible participacin en los procesos biolgicos obedece a las caractersticas fsico qumicas que posee como: el ser lquida, transparente, con sabor caracterstico, inodora, azul plida en capa profunda; de otra manera incolora, congela a 0 C, hierve a 100 C a una presin de 760 mm de Hg, prcticamente incomprimible, con alto calor especfico, poderosa capacidad solvente, funciona como dipolo, presenta los tres estados fsicos, siendo menos denso el slido que el lquido; constituye alrededor del 70% del peso corporal humano en donde tiene importante papel en la regulacin trmica. A pesar de que el agua abunda en el planeta, existe escasez de este vital lquido en la sociedad moderna. Esta carencia se explica porque el 97% est contenida en los mares en forma de agua salada, el 2.25% en forma de hielo en los polos y el restante 0.75% formado por ros, lagos, agua subterrnea, etc., frecuentemente est situado lejos de las grandes poblaciones humanas. A lo anterior se agrega el hecho de que las actividades humanas contaminan rpidamente el agua. Se calcula que el hombre promedio de los Estados Unidos de Amrica

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consume diariamente 200 litros de agua slo en sus necesidades domsticas y ms de 13,000 litros indirectamente en el costo de produccin de alimentos, vestido, calzado, instrumentos culturales, etc. El agua tiene mltiples usos, los ms importantes son: bebidas, culinario, higiene personal, recreativo en piscinas, riego, aseo de utensilios, lavado de alimentos y retiro de desechos e industriales. Debido a su uso, el agua es muy importante en la transmisin de enfermedades bacterianas, virales y parasitarias en el humano, tales como gastroenteritis, paratifoideas, tifoidea, clera, poliomielitis, amibiasis y varias helmintiasis. Lo anterior obliga a consumir agua de calidad (potable), para lo cual es indispensable su purificacin, transporte y almacenamiento adecuados. La purificacin se realiza por mtodos fsicos, qumicos y biolgicos. El mtodo qumico mediante el uso de desinfectantes (cloro gaseoso, hipoclorito de sodio, hipoclorito de calcio y dixido de cloro) es el ms ventajoso y utilizado. Si el pH del agua es menor de 8.0 un cloro residual libre de 0.2 mg/l destruir las bacterias en un perodo de contacto de 10 minutos, a cualquier' temperatura (por el mtodo de la ortotolidina concentraciones de cloro libre de 0.1 a 0.3 ppm se consideran satisfactorias). Con relacin al transporte, los riesgos de contaminacin dependen de la limpieza de la red de tuberas o de los recipientes utilizados. Para su almacenamiento se aconseja cubrir correctamente los tinacos o cisternas y lavarlos por lo menos cada 6 meses, preferentemente al inicio de la poca de lluvias y antes de su trmino. El control de la potabilidad de las aguas cloradas se hace por mtodos qumicos y bacteriolgicos. El mtodo qumico de la ortotolidina es rpido y til. Los mtodos bacteriolgicos en la identificacin presuntiva y cuantificacin de bacterias indicadoras de contaminacin fecal (colformes y enterococos) se emplean rutinariamente. El agua potable debe de tener menos de 50 bacterias mesoflicas por mililitro de agua y menos 2.2 colformes por cada 100 mililitros de agua. En esta prctica se determinar el cloro residual y el nmero de

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mesoflicos y coliformes en diferentes tipos de agua. MATERIAL POR EQUIPO 1 tubo de 13 x 100 mm limpios enjuagados con agua destilada. 5 tubos de 22 x 175 mm 20 ml con caldo lactosado al 0.75% con campana de fermentacin. 1 frasco con reactivo de ortotolidina. 1 fotocolormetro de Taylor. 1 pipeta serolgica (1 ml). 20 ml de agar fundido para cuenta estndar. 1 caja de Petri estril. 1 aparato para contar colonias.

METODOLOGA Determinacin de cloro residual 1. En un tubo limpio enjuagado con agua destilada y varias veces con el agua por examinar. 2. Tomar de 1 a 2 ml de la muestra de agua y adicionar 2 gotas del reactivo de ortotolidina. 3. Invertir el tubo y comparar el color desarrollado con la escala del colormetro de Taylor. 4. Calcular la concentracin de cloro residual en correspondencia a la del color en el colormetro de Taylor. Prueba presuntiva para determinar el nmero ms probable de organismos coliformes (NMP) 1 Inocular con 10 ml. de la muestra de agua cada uno de 5 tubos de fermentacin de caldo con lactosa al 0.75 % de concentracin. 2 Incubar a 35 C durante 48 horas. 3 Observar cuidadosamente en cada tubo la presencia de gas en cualquier cantidad dentro de la campana de fermentacin. El tubo positivo mostrar adems denso desarrollo bacteriano. La ausencia de gas en todos los tubos hace negativa la prueba. 4 Determinar el nmero ms probable (NMP) de organismos colformes en la muestra de acuerdo a la tabla.

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CUADRO DE RESULTADOS. MUESTRA

Cloro residual (mg/l)

Organismos coliformes ppm/100ml

5. 6.

Investigar el efecto del exceso de cloro en el agua sobre el proceso salud-enfermedad. Elaborar informe y discutirlo a nivel de seminario.

TABLA 13-1. NUMERO MAS PROBABLE DE ORGANISMOS, LIMITES PARA VARIAS COMBINACIONES DE RESULTADOS POSITIVOS Y NEGATIVOS CUANDO SON USADOS 5 TUBOS CON 10 ml. DE MUESTRA. Nmero de tubos positivos MPN/100 ml Lmites de confianza (95%) Mnimo Mximo

0 1 2 3 4 5

<2.2 2.2 5.1 9.2 16 >16

0 0.1 0.5 1.6 3.3 8.0

6.0 12.6 19.2 29.2 52.9 Infinito

Cuenta Estndar 1 Colocar con una pipeta estril 1.0 ml de la muestra de agua en 20 ml de agar fundido para cuenta estndar a la temperatura de 3840C y vaciar en caja de Petri estril 2 3 Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Qu es el agua potable? 2. Qu es el agua destilada? Homogenizar, dejar gelificar, invertir la placa e incubar a 35 C durante 24 horas. Contar el nmero de colonias si est en los lmites de 25 a 250 y Reportar.

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3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10.

Qu es el agua desionizada? Qu es el agua dura? Cuntos ppm de cloro tiene el agua potable? Qu otros desinfectantes se utilizan para potabilizar el agua? Qu otros mtodos no qumicos existen para potabilizar el agua? Por qu el agua no debe contener coliformes? Que efecto sobre la salud tiene el agua con alto contenido de cloro? Investigar qu agua tiene ms cloro libre, la de la cisterna o la de la llave?

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PRCTICA 20

LL La tincion de Ziehl-Neelsen es til en el diagnstico microscpico presuntivo de la tuberculosis y la lepra, demuestra si el paciente es contagioso y permite un seguimiento del tratamiento.

OBJETIVOSBACILOS

CIDO-ALCOHOL RESIST

Realizar la tcnica de coloracin para el bacilo de la tuberculosis.

Observacin de preparaciones de esputo de pacientes tuberculosos teidas por la tcnica de Ziehl-Neelsen. Observacin de preparaciones de lesiones cutneas de pacientes leprosos teidas por la tcnica de Ziehl-Neelsen. INTRODUCCIN Las micobacterias son bacterias en forma de bacilos, aerbicos y no formadores de esporas. Aunque se tien con dificultad, una vez teidos resisten la decoloracin con cido o alcohol y por tanto se les denomina bacilos cido-alcohol resistentes(BAAR). El Mycobacterium tuberculosis es un patgeno muy importante que causa la tuberculosis en el hombre. Mycobacterium leprae es la causa de la lepra. Mycobacterium aviumintracellulare y otras micobacterias atpicas son patgenos oportunistas que con frecuencia infectan a pacientes con SIDA y en ocasiones producen enfermedad en pacientes con sistema inmunitario normal.El nmero de especies de micobacterias que infectan al hombre es de aproximadamente 20. La tuberculosis y la lepra son dos enfermedades crnicas que afectan al

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humano, la tuberculosis afecta diversas partes del cuerpo sobre todo el pulmn, en cambio la lepra afecta primordialmente la piel, las mucosas y los nervios perifricos. Mycobacterium tuberculosis es un bacilo recto, delgado y de extremos redondos que mide de 0.4 x 3 m. En medios artificiales se observan formas cocoides y filamentosas. Las micobacterias no se pueden clasificar como grampositivas o gramnegativas. Una vez teidas con colorantes bsicos (cristal violeta) resisten la decoloracin con alcohol cualquiera que sea el tratamiento con yodo. El bacilo leproso es ligeramente ms grueso y largo, que el tuberculoso, ya que mide de 1 a 7 m de longitud por 0.2 a 1.4 de dimetro y se encuentra de manera predominante dentro de clulas mononucleares modificadas llamadas clulas leprosas y se agrupa en palizadas. Ambas especies se caracterizan por tener una pared celular nica y muy rica en lpidos que le permite ser tratado con cidos y/o lcalis diluidos sin romperse. Esta propiedad que no presentan otras bacterias fundamenta la tcnica de coloracin de Ziehl-Neelsen que permite teir a las micobacterias sin deteriorarse y es de gran utilidad en la identificacin del bacilo de la tuberculosis y el bacilo de la lepra. La tcnica de Ziehl-Neelsen para bacilos cido alcohol resistentes (BAAR) es ventajosa sobre otros mtodos diagnsticos porque permite la identificacin presuntiva y rpida de las lesiones tuberculosas o leprosas activas y demuestra si el paciente es transmisor (bacilfero) de estas enfermedades. Otros mtodos diagnsticos para la tuberculosis son: el clnico, el cultivo e identificacin de la cepa, la prueba de la tuberculina, la radiografa del trax y los mtodos histolgicos. En esta prctica se realizar la tcnica de Ziehl-Neelsen a partir de cultivos puros de micobacterias saprfitas y se observarn frotes de esputo de pacientes tuberculosos, y lesiones cutneas de pacientes leprosos teidos por la tcnica de Ziehl-Neelsen. MATERIAL POR EQUIPO 1 portaobjeto. 1 asa bacteriolgica. 1 preparacin teida del esputo de paciente tuberculoso.

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1 1 1 1 1 1 1 1

preparacin teida de lesiones cutneas en pacientes leprosos. tubo de 13 X 100 mm con cultivo de Mycobacterium phlei. equipo de coloracin de Ziehl-Neelsen. puente de coloracin. mechero Bunsen. pinzas de diseccin. hoja de papel seda. frasco pequeo con aceite de inmersin.

METODOLOGA Tcnica de Ziehl-Neelsen. 1. Agregar con el asa bacteriolgica una pequea gota de agua de la llave en el centro del portaobjetos. 2. Tomar con el asa bacteriolgica una pequea cantidad de la bacteria crecida sobre el medio de cultivo, suspenderla y extenderla en la gota de agua. Dejar secar al aire. Fijar la preparacin de la siguiente manera: Tomar la preparacin por uno de sus extremos con unas pinzas de diseccin, calentar suavemente con la flama del mechero la cara inversa donde se depositaron las bacterias hasta que se haya evaporado el agua completamente (Evitar la calcinacin de las bacterias retirando la preparacin de la flama). Cubrir la preparacin con solucin de fucsina y calentar a emisin de vapores durante 5 a 7 minutos, cuidando de que el colorante no hierva o se seque (para evitar esto agregar ms fucsina). Lavar suavemente con agua corriente, abriendo ligeramente la llave y evitando que el chorro de agua caiga directamente sobre la preparacin hasta que el agua escurra sin colorante. Decolorar con la mezcla alcohol-cido hasta que no escurra ya ms colorante. Lavar de la manera indicada en el paso nmero 5. Cubrir la preparacin con una solucin azul de metileno durante un minuto.

3.

4.

5.

6. 7. 8.

149

9. 10.

Repetir el paso del inciso nmero 5.

Dejar escurrir el agua, esperar a que la preparacin seque completamente, agregar una gota de aceite de inmersin. y observar con el objetivo de inmersin. Las bacterias cido-alcohol resistentes se teirn de color rojo. Las BAAR negativas se observan teidas con el colorante de contraste ( Azul). Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. Mencione dos especies de micobacterias que infectan al ser humano. Adems de M. tuberculosis y M. bovis ; Qu otras especies causan enfermedad en el hombre? Qu otro gnero bacteriano se tie con la tcnica de Ziehl-Neelsen? Mencione tres mtodos de diagnstico de laboratorio en la tuberculosis. Mencione dos mtodos de diagnstico de laboratorio en la lepra. Cul es el mejor esquema de tratamiento en la tuberculosis? Cules son las dos medidas de prevencin ms importantes en la tuberculosis? En qu se basa la campaa antituberculosa en Mxico? Cul es la diferencia entre una clula tuberculosa y una leprosa? Cul es la complicacin ms frecuente en la lepra?

150

Figura 10-1

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PRCTICA 21

OBJETIVO
Determinar el efecto de los contaminantes sobre la fauna del acuario.

INTRODUCCIN

El acuario es una muestra ecolgica que permite el estudio de la fauna y la flora acutica. An cuando el acuario no representa con exactitud el medio ambiente natural en l es posible estudiar algunos aspectos importantes de la comunidad y su ambiente como son la reproduccin, la alimentacin, la productividad y la contaminacin. Los ecosistemas naturales reciben siempre, ciertas cantidades de substancias extraas, las cuales se degradan, se diluyen o se filtran, a travs de los procesos naturales. Sin embargo, cuando la entrada de estas sustancias extraas resulta demasiado grande, los procesos naturales no pueden controlarla, las comunidades son afectadas y se dice entonces que se presenta una contaminacin, por lo que, la contaminacin del aire, del agua, de los alimentos y del medio ambiente en general es bsicamente un problema de exceso de cantidad y rapidez.

En el caso del agua, la contaminacin se debe principalmente a la gran descarga de desperdicios derivados de la industria, de la agricultura moderna y del hogar. As como los del crecimiento explosivo de la poblacin y la distribucin de sta en los sitios donde no estn las grandes reservas de agua dulce.

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En esta prctica se estudiar el efecto nocivo de un detergente y un insecticida sobre la fauna del acuario. MATERIAL POR EQUIPO 1 acuario rectangular de vidrio de aproximadamente 50 x 24 cm de base por 23 cm de altura. 1 compresor de aire. 1 filtro interior de caja. 1 difusor de aire. 1 calentador sumergible de 20 a 30 watts. 1 termmetro. 1 kilogramo de arena de ro o grava fina de cuarzo para acuario. 5 plantas de acuario (acorus enano, acorus verde, acorus rayado, adenostema, ambulia, anubias, aponogeton, bacopa, mil hojas, etc.). 3 peces (pez colorn, cebrita, guppy, etc.). 1 frasco de la mnima presentacin de alimento para peces (mosquitos liofilizados, escamas,o lombrices liofilizadas, etc.). 1 frasco con 5.0 ml de DDT. 1 bolsa con 10 g de detergente. METODOLOGA 1 Lavar la parte interna del acuario con agua de la llave sin utilizar detergente. 2 3 4 5 6 Etiquetar con el nmero de grupo, equipo y fecha. Colocar el acuario en su sitio definitivo con la cantidad de luz adecuada (2 a 4 horas de luz directa). No deber moverse posteriormente. Colocar dentro del acuario los difusores de aire y el filtro de caja. Lavar la arena con agua de la llave en un recipiente de plstico hasta que el agua salga limpia. Extender la arena o grava sobre los tubos difusores de aire hasta una altura de 6 7 cm del fondo.

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7 8 9

Agregar agua de la llave hasta 10 cm abajo del borde superior del acuario. Colocar el calentador en uno de los extremos del acuario, evitando: enterrarlo en la arena o adherirlo al cristal. Neutralizar el cloro del agua con el reactivo comercial que contiene tiosulfato de sodio, agregando dos gotas del reactivo por cada litro de agua del acuario. Sembrar las plantas en la arena bajo el agua. Conectar el filtro, el compresor y el calentador a un enchufe y comprobar que todo funcione correctamente. Esperar el tiempo necesario para que la temperatura se estabilice (lecturas peridicas en el termmetro). Aadir los peces dejando flotar la bolsa que los contiene, unos 15 minutos, para igualar la temperatura (previamente debe quitar algo de agua al acuario para que no rebase al colocar la bolsa). Alimentar a los peces de dos a tres veces al da, con la cantidad que solamente son capaces de consumir en dos o tres minutos. Cambiar los filtros y el 10% del agua semanalmente. Agregar 1,000 mg(ul) de DDT por litro de agua del acuario (1,000 ppm) o un gramo de un detergente comercial por litro de agua del acuario (1000,000 ppm). Observar el comportamiento de los peces, anotar sus observaciones, compararlas con el libro y hacer dibujos.

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Figura 21-1

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Acuario Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados, conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa. ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE 1. Qu tipo de agua se emplea en los acuarios? 2. Mencione un neutralizante de cloro para el acuario. 3. Que funcin tiene el azul de metileno en el acuario? 4. Se debe sellar el acuario? 5. Qu contienen los alimentos comerciales de peces? 6. Quienes son los productores en el acuario? 7. Quienes son los consumidores en el acuario? 8. Defina el trmino contaminacin del agua. 9. Mencione los cuatro tipos de contaminacin del agua. 10. Mencione tres insecticidas usados en el hogar que contaminan el agua.

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PRCTICA PROPUESTA POR EL PROFESOR VICTOR VALVERDE MOLINA

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PRACTICA DE INVESTIGACIN

CONSTRUCCIN DE COLUMNAS PARA EL ESTUDIO DE DIFERENTES ECOSISTEMAS Y SU INTERRELACIONES

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OBJETIVO: Promover la investigacin en temas ambientales e impulsar el desarrollo de estrategias para neutralizar el deterioro ambiental.

Introduccin El ecosistema suele definirse como una unidad natural de partes vivientes e inertes, con interacciones mutuas que mantienen estable un sistema en donde se lleva a cabo un intercambio de sustancias entre los organismos vivos y los elementos inertes de manera cclica. Un ecosistema, de acuerdo a la definicin anterior, puede ser tan grande como el planeta, el ocano, el bosque, o tan pequeo como una pecera donde el recambio de materiales sigue un camino circular. Los factores fsico-qumicos y biolgicos, influyen de manera contundente en la formacin de los diferentes ambientes, dando como resultado una gran diversidad de ellos. A su vez las relaciones entre los organismos y sus ambientes son el resultado de la seleccin natural, de lo cual se desprende que todos los fenmenos ecolgicos tienen una explicacin evolutiva. Es as que todos los seres vivos tienen una manera de vivir que depende de su estructura y fisiologa y tambin del tipo de ambiente en el que viven. Cuanto ms se aprende acerca de cualquier clase de planta o animal, se ve con creciente claridad que cada especie ha sufrido adaptaciones para sobrevivir en un conjunto particular de circunstancias ambientales. Cada una puede demostrar adaptaciones al viento, al sol, a la humedad, la temperatura, la salinidad y otros aspectos del medio ambiente actual que desafa a la naturaleza y a los mecanismos adaptativos, y por ende los evolutivos. La ecologa se ocupa del estudio cientfico de las interrelaciones entre los organismos y sus ambientes, y por tanto de los factores fsicos y biolgicos que influyen en estas relaciones. Razn ms que suficiente para que los profesionales de la salud incursionen en este mbito y emitan sus propuestas

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para los tiempos tan complicados que nos han tocado vivir en relacin al deterioro ambiental. Nota.-De comn acuerdo el profesor y el alumno decidirn las lneas de investigacin que consideren pertinentes como pueden ser: el efecto de los contaminantes (gases, lquidos o slidos) sobre los componentes biticos de los diferentes ecosistemas; buscar plantas resistentes a los contaminantes, generados por ejemplo en la ciudad de Mxico, con la finalidad de proponer proyectos de azoteas verdes para fijar contaminantes de la atmsfera, absorcin de las radiaciones y produccin de oxgeno; influencia de la contaminacin sonora en los organismos, etc.

MATERIALES: Botellas de refresco de 2L limpias (transparentes). Azul de bromotimol Termmetro adherible Tubos de ensaye de 13 x 100. Cuchillos o tijeras Martillo y clavo (para realizar los agujeros en las tapas de la botella) Cordn de algodn Cinta tipo adhesiva ancha y transparente para ensamblar los sitios de unin de los segmentos de las botellas Mezcla de tierra negra y de hoja, grava, plantas, y/o semillas. Una malla tejida Animales como grillos, escarabajos, gusanos, caracoles, y araas. etc. Peces de agua dulce pequeos (guppy, charal, gato, o carpa dorada). Plantas acuticas. Piedras para acuario.

METODOLOGA. Construir cada una de las unidades de la eco-columna por separado, para que los organismos se adapten a las nuevas condiciones: ecosistema templado, rido y acutico.

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Se introducen tubos de ensaye de 13 X 100 con azul de bromotimol (BTB, un indicador cido-base lquido, en presencia de bixido de carbono de azul pasa amarillo variando su intensidad dependiendo de la cantidad de CO2) y termmetros. Al tener instaladas las unidades individuales de la eco-columna se procede a tomar los datos en cada una de ellas. Lecturas bsicas e indirectas de las condiciones fsicas (la temperatura, el pH, el oxgeno disuelto, y los nitratos disueltos, etc.). Una vez establecidas las unidades de la eco-columna se ensamblan y unen con cinta adhesiva en las partes de unin o contacto.

Construccin la hidrosfera/biosfera: Recortar la parte superior de la botella. Llenar la botella con 2/3 de agua destilada o agua de la llave reposada. Adicionar al acuario rocas, plantas y luego los peces con todo y la bolsa durante 15 minutos, para adaptarlos a la temperatura del agua de la botella. Colocar las unidades de la eco-columna cerca de la luz del sol.

Construccin la litosfera/biosfera/atmosfera: Las unidades de la eco-columna que contienen las plantas necesitan tener una fuente de agua, por lo que se disea un sistema de hidratacin con un cordn de la siguiente manera: Corta el fondo de una botella limpia y vaca. Con un martillo clavar y realizar un agujero (o agujeros) en el tapn de plstico.

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Pasar el cordn de algodn a travs del agujero para que el cordn quede en medio de la tapa. Introducir el cordn en el agua de la botella que funge como acuario.

Colocar en el fondo del recipiente una pequea capa de tezontle. Colocar sobre el tezontle una capa de carbn vegetal. Agregar la tierra de hoja. Sacar las plantas del recipiente en el que se encuentren, quitar el exceso de tierra de las races. Pesar las plantas. Sembrar cuidadosamente las plantas evitando daar las races y espacindolas de acuerdo al tamao y tipo de planta. Agregar una pequea cantidad de agua, dejndola resbalar por los bordes del recipiente, evitando su exceso de acuerdo con la humedad del terrario y tipo de planta. Colocar el terrario en un lugar donde reciba la cantidad adecuada de luz, de acuerdo al tipo de planta. Agradecimientos: En especial al profesor Castillo Romero Jos Miguel y a los integrantes del rea de Ciencias Experimentales que se renen en el seminario de biologa Alfonso L. Herrera del Colegio de ciencias y Humanidades Plantel (1) Azcapotzalco, UNAM. Por las sugerencias y materiales, para elaborar esta prctica

ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE.

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Investigue por qu las plantas suculentas y de ornato, son las mejores canditatas para llevar a cabo proyectos de azoteas verdes. Explique de qu manera la vegetacin impide el calentamiento de las ciudades. BIBLIOGRAFA: Henriquez, Laura. Los sistemas de la Tierra en una botella. The Science Teacher, 2000. pp. 48-51.

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PRCTICA PROPUESTA POR LA PROFESORA OFELIA FLORES JUREZ

PRCTICA DE INVESTIGACIN

INFLUENCIA DE LA CONCENTRACIN SALINA EN LA MORFOLOGA DE Artemia gracilis Verril (Crustcea)

OBJETIVO Comprobar la presencia de polimorfismo, debida a la variacin de la concentracin salina de un medio acutico, en Artemia gracilis Verril.

INTRODUCCION Ya se conoce de anterioridad que los factores abiticos, referentes al sustrato terrestre acutico influyen en los organismos que habitan ese ambiente, como ejemplo se encuentra Artemia gracilis, la cual se ve tan afectada que altera su patrn corporal (ver Bond y Kuenen). Un ejemplo del proceso anterior, lo constituye el pequeo crustceo, Artemia gracilis, comn en varias localidades de Amrica, presenta morfologa que vara de acuerdo con la concentracin salina de su medio ambiente. En general, la parte proporcional de la longitud del cuerpo, ocupada por el abdomen y el trax, vara segn la concentracin salina, como sucede tambin con el nmero de cerdas cirros que se encuentran en el borde posterior del ltimo segmento abdominal. A esta particularidad, de modificar su

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morfologa de acuerdo a algn factor exgeno endgeno, se le conoce como polimorfismo de la especie.

MATERIAL huevecillos de Artemia gracilis obtenidos en un acuario 1 pecera de 15x7 cm de cristal 4 frascos de 250 ml de cristal transparente con tapa 1 red fina para larvas de Artemia gracilis Agua de mar natural preparada (adquirir en acuario) Alga elodea u otras algas de acuario frescas Cloruro de sodio 1 esptula 4 vasos de precipitados 100 a 200 ml 1balanza analtica 1 microscopio estereoscopico 1 caja de Petri levadura seca en polvo

METODOLOGIA 1. Los huevecillos se deben poner a incubar con agua de mar artificial natural, en frascos con diferente concentracin de cloruro de sodio, las concentraciones son de 15%, 16%, 17% y 18%. Para mayor informacin, consultar el libro Culture Methods for Invertebrate Animals, citado en la bibliografa. 2. Se debe logar establecer un cultivo de algas, alimento y hbitat conveniente para los crustceos. 3. Cuando eclosionen del huevecillo, los pequeos organismos, se alimentaran de sus membranas secundarias, trasladarlos a un recipiente de mayor tamao con algas frescas (elodea u otras adquiridas en acuarios), esta algas requieren abundante iluminacin natural, y agua de la misma salinidad con la que se incubaron los huevecillos. 4. Se le debe suministrar al cultivo una vez a la semana cada dos semanas, una pequea cantidad de levadura seca, El nivel del agua del acuario debe mantenerse mediante la diccin de agua destilada nicamente. Es conveniente agregar al agua de cultivo , muy pequeas cantidades de

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cloruro de estroncio, yoduro de potasio, borato de sodio cido brico, 1 2 mg/L. 5. Obtener una segunda y tercera generacin de organismos, conservando constantes las concentraciones de salinidad. 6. En cada generacin medir la longitud del trax y del abdomen de animales vivos, (si es necesario, bajo el microscopio estereoscpico, sobre una tapa de caja Petri), y contar el numero de cerdas (pelos caudales) 7. Emplear metodologa estadsticas cualquier diferencia que se observe. para precisar la significancia de

BIBLIOGRAFIA - Bond, R.M., 1993. Observations on Artemia franciscana Kellog, especially on the relation of environment to morphology. Int. Rev. der ges. Hydrobiol. und Hydrographie. 28: 117-125 - Kuenen, D. J.., 1999. Systematical and physiological notes on the brine shrimp artemia. Arch. Neerlandaises des Zoologie. 3: 365-449 - Galtsoff, P. S. y otros. 1989. Culture methods for invertebrate animals. Dover Publications, New York

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GLOSARIO
Acumulacin de pus en una cavidad anormal formada por desintegracin de tejidos. El paso de una sustancia o frmaco a travs de las membranas de las clulas del cuerpo hasta llegar al torrente sanguneo. Compuesto que origina iones hidrgeno cuando se disocia en solucin. Organismo que vive y crece en presencia de oxgeno libre. Producto coloidal hidroflico desecado que se obtiene de algas que no es afectado por las enzimas bacterianas por lo que se utiliza en la elaboracin de medios de cultivo para Bacteriologa. Agregacin o unin de partculas insolubles como resultado de su interaccin con anticuerpos especficos denominados aglutininas. Tipo especifico de anticuerpo que manifiesta su interaccin con el antgeno mediante la aglutinacin. Lquido incoloro y voltil derivado de un hidrocarburo en el que se sustituye un hidrgeno por un hidroxilo (OH). Compuesto orgnico de formula general R-CH-NH2 en el cual R representa una cadena aliftica. COOH. Es la unidad bsica de las protenas Microorganismo que vive y crece en ausencia completa o casi completa de oxgeno molecular. Reaccin de hipersensibilidad (alergia) en que los anticuerpos IgE se unen a las clulas cebadas y basfilos y hacen que stos produzcan las sustancias mediadoras de la anafilaxia (histamina y prostaglandinas), que a su vez originan aumento en la permeabilidad de los vasos sanguneos, contraccin del msculo liso y produccin de moco. Ejemplos la fiebre del heno, asma bronquial, urticaria y choque anafilctico. Sustancia qumica producida por bacterias y hongos, la cual es capaz de destruir a otras bacterias y hongos sin causar dao en el hombre. Inmunoglobulina esencial en el sistema inmunitario producida por el tejido linfoide en respuesta a un antgeno. Sustancia de naturaleza proteica o polisacrida la cual al introducirla en el cuerpo estimula la produccin de su anticuerpo correspondiente.

Absceso Absorcin

cido Aerobio Agar

Aglutinacin

Aglutinina Alcohol Aminocido

Anaerobio Anafilaxia

Antibiotico

Anticuerpo Antgeno

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Antimicrobiano Antisptico ATP Bacilo Bactericida Bacteriosttico Cpside

Sustancia que destruye, inhibe, suprime o previene el crecimiento de microorganismo. Agente que inhibe el crecimiento y reproduccin de microorganismos sobre superficies vivas. Trifosfato de adenosina Compuesto qumico que acta como un portador de energa de los sistemas biolgicos. Bacteria en forma de bastn. Sustancia capaz de destruir y lisar bacterias. Sustancia capaz de detener o inhibir el crecimiento y reproduccin de las bacterias. Capa de protenas que envuelve al virin compuesta de unidades llamadas cpsomeros de simetra cbica o helicoidal. Cubierta membranosa de ciertos microorganismos. Compuesto orgnico que contiene carbono, hidrgeno y oxgeno. Ejemplos: azcares, dextrinas, almidones y celulosas. Animal que ingiere carne y al hacerlo obtiene su energa de forma indirecta a partir de los herbvoros. Grupo de microorganismos dotados de propiedades o cualidades especficas, que derivan de fuentes definidas y se conservan por cultivos sucesivos o por inoculaciones en animales de experimentacin. Secuencia de eventos que se repiten regularmente. Pigmento verde de las plantas el cual es esencial en el proceso de la fotosntesis. Bacteria en forma esfrica. Bacterias que se parecen morfolgicamente a Echerichia coli y que comparten la caracterstica de fermentar la lactosa. Grupo o masa de microorganismos en un cultivo que se han derivado de una sola clula. Observable sobre los medios de cultivo slidos. Sustancia qumica capaz de proporcionar color a la materia sobre la que se aplica, utilizada para teir microorganismos. Asociacin ms o menos ntima entre microorganismos de diferentes especies sin causarse dao y produciendo cierto beneficio para uno de ellos. Todas las poblaciones de organismos que existen e interaccionan en un rea determinada. Inflamacin de la delgada membrana de recubrimiento del ojo y revestimiento de los prpados.

Cpsula Carbohidratos

Carnvoro Cepa

Ciclo Clorofila Coco Coliformes

Colonia

Colorante

Comensalismo

Comunidad Conjuntivitis

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Contagio Consumidor

Contaminacin

DDT Desinfectante Diagnstico Ecosistema Endmico Endotoxina

Energa Entrico Enterobacteria Enterococo Enzima

Epidmico

Eritrocito

Especie

Estril Evaporacin

Trasmisin de organismos patgenos por contacto con una persona infectada o por objetos o vehculos contaminados. Organismo que deriva su nutricin ya sea directamente a partir de las plantas o indirectamente a partir de un herbvoro. Adicin de sedimentos, nutrimentos, venenos, ruido o calor a un ecosistema a la velocidad que excede la capacidad de este para procesarlos o distribuirlos. Dicloro-difenil-tricloro-etano. Hidrocarburo hidrogenado insoluble en agua utilizado ampliamente como insecticida. Sustancia usada para destruir microorganismos sobre objetos inanimados. Conclusin alcanzada al identificar el padecimiento en un paciente. La comunidad, en la relacin con el medio ambiente inanimado que actan como un todo. Caracterizado por una escasa frecuencia, y presencia constante en una comunidad. Enfermedad endmica. Veneno producido por bacterias gram negativas, el cual se libera cuando la bacteria es destruida. Su liberacin produce fiebre, escalofros, choque, etc. Capacidad de producir trabajo. Relativo al intestino. Familia de bacterias en forma de bacilos, gram negativos que colonizan el intestino. Grupo de bacterias pertenecientes a los estreptococos y que normalmente habitan en el intestino. Sustancia cataltica de naturaleza proteica, sintetizada por clulas vivas y que tiene una accin especifica al promover un cambio qumico. Relativo a enfermedades que se presentan en brotes extensos o con una frecuencia excepcionalmente alta durante ciertas pocas y en ciertos lugares. Clula madura anucleada y agranular en forma de disco bicncavo de la sangre de los vertebrados cuyo pigmento trasportador de oxgeno, la hemoglobina, es responsable del color rojo de la sangre fresca. Conjunto de individuos que se parecen ms entre s que entre todos los dems, que se cruzan entre s y dan progenie fecunda. Libre de microorganismos y sus formas de resistencia. Proceso mediante el cual el agua lquida se trasforma en vapor de agua.

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Evolucin Exotoxina Exudado Fenotipo Fermentacin Floculacin Fotosntesis

Genotipo Hematologa Hemlisis Herbvoro Hifa Husped Husped definitivo Husped intermediario Husped reservorio Huevo Ictericia Incubacin Incubadora Infeccin Inflamacin Inmunidad activa

Proceso que permite que las poblaciones modifiquen sus caractersticas a travs del tiempo. Veneno producido por un microorganismo vivo y el cual es liberado al medio externo. Material fluido procedente de un tejido inflamado. Conjunto de caractersticas observables de un organismo o grupo. Descomposicin de molculas complejas principalmente carbohidratos por accin de las enzimas. Acmulos de partculas finamente divididas, o de partculas coloidales formando copos visibles que se precipitan. Proceso por el cual los carbohidratos simples son sintetizados a partir de bixido de carbono y agua por los cloroplastos de las clulas vegetales en presencia de luz. Constitucin hereditaria de un organismo que resulta de su combinacin especifica de genes. Ciencia que estudia la sangre, naturaleza, funciones y trastornos. Destruccin de glbulos rojos con la consecuente liberacin de hemoglobina. Animal que se alimenta de plantas Cada uno de los filamentos aislados que constituyen el micelio de los hongos. Organismo que alberga y nutre a otro. Organismo que alberga y nutre a un parsito adulto o en el que tiene lugar la reproduccin de ste. Organismo que alberga las formas inmaduras o asexuadas del parsito. Husped animal de un organismo que puede parasitar al hombre, el cual se infecta a partir de dicho animal. Forma incipiente del embrin de los helmintos Coloracin amarilla de la piel y conjuntivas causada por hiperbilirrubinemia. Tiempo requerido para inducir el desarrollo y replicacin de microorganismos o clulas en un medio de cultivo. Aparato utilizado para proporcionar un medio controlado para el desarrollo de microorganismos o clulas. Invasin del organismo por microorganismos patgenos que se reproducen y se multiplican. Respuesta defensiva del organismo frente a un agente infeccioso o irritante. Puede ser crnica o aguda. Inmunidad que posee un husped como resultado de una enfermedad, infeccin no reconocible o por vacunacin.

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Inmunidad que se adquiere a travs de la administracin de anticuerpos preparados en otro individuo o en otros animales. Inmunoglobulina Anticuerpo producido por el organismo. Etapa inmadura en el ciclo evolutivo de diversos parsitos Larva que alcanzan la forma adulta sufriendo metamorfosis. Clula sangunea incolora, ms o menos ameboidea, que Leucocito tiene ncleo y citoplasma. Sustancia orgnica gras que tiene la propiedad de ser Lpido insoluble en agua y soluble en alcohol, cloroformo, ter y otros solventes orgnicos. Bacteria que se desarrolla a temperaturas moderadas con Mesoflica un ptimo de 37C Conjunto de procesos qumicos de los seres vivos para Metabolismo sintetizar sustancias alimenticias en elementos complejos y para trasformar sustancias complejas en otras ms sencillas con produccin de energa. Producto de una reaccin enzimtica Metabolito Grupo de filamentos ramificados de los hongos formados Micelio por un conjunto de hifas. Ciencia que trata del estudio de los hongos Micologa Infeccin o enfermedad causada por un hongo Micosis Sustancia necesaria para el crecimiento y desarrollo Nutrimento normal de un organismo Aparato que sirve para observar las estructuras del huevo Ovoscopio embrionado Organismo que vive en el interior de otro o sobre l y se Parsito alimenta del mismo Mtodo usado en la destruccin de bacterias patgenas en Pasteurizacin los alimentos, se realiza por calentamiento sin afectar el valor nutritivo ni el sabor del alimento Cualidad que poseen los microorganismos para producir Patogenicidad enfermedad Secuencia de eventos que caracteriza el desarrollo de una Patognesis enfermedad Organismo capaz de producir enfermedad Patgeno Porcin lquida de la sangre o de la linfa constituida por Plasma una mezcla de protenas, electrlitos, glucosa y grasas sin elementos formes. Grupo de organismos de una misma especie que viven Poblacin dentro de un rea dada. Carbohidrato formado por la condensacin de dos o ms Polisacrido monosacridos. Ejemplos almidn y celulosa. Inmunidad pasiva

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Productividad neta Productores

Protena Psicroflica Purulento Quiste Respiracin

Sales

Sanguinolento Suero Tarar Termoflicas

Titulacin Trofozoito VDRL Virulencia

Velocidad en que las plantas almacenan en forma de materia orgnica, la energa que le sobra despus de la respiracin. Organismos capaces de convertir la energa radiante procedente del sol en energa qumica (elaboracin de compuestos de carbono ricos en energa). Compuesto orgnico nitrogenado de alto peso molecular constituido de aminocidos Bacteria que se desarrolla a una temperatura de 0 a 30C con ptimo de 15 a 20C. Contiene, consiste o forma pus. Dicese en parasitologa a la forma de resistencia del embrin de los protozoarios. Proceso qumico que presenta en el interior de la clula (mitocondrias), consistente en la liberacin de la energa qumica que permite desarrollar los procesos metabolicos. Grupo de sustancias resultantes de la reaccin entre cidos y bases con sustitucin de los tomos de hidrgeno de un cido por radicales bsicos Teido o mezclado con sangre. Lquido sin clulas ni fibringeno, de color mbar que queda tras la coagulacin de la sangre. Equilibrio o contrapeso; deduccin hecha del peso del envase Bacterias resistentes a la desnaturalizacin trmica, soportan temperaturas de 45 a 100 C y se multiplican preferentemente de 50 a 60 C. Determinacin cuantitativa de una sustancia qumica o biolgica (anticuerpo) contenida en otro medio (suero). Forma activa, mvil y de alimentacin de un protozoario. Prueba serolgica empleada en el diagnstico de la sfilis (Venereal Disease Research Laboratory). Grado de patogenicidad de una cepa especfica y se mide por el nmero de microorganismos que se necesitan para matar animales de una especie determinada en condiciones establecidas y en un perodo definido.

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ANEXO 1

ABREVIATURAS
Unidad Metro Milmetro Micrmetro (Micra) Nanmetro Kilogramo Gramo Miligramo Microgramo Nanogramo Litro Mililitro Microlitro AMP ATP BAAR C Ppm Ppb Rpm DDT Sp Spp TB Abreviatura m mm m nm kg g mg g (mcg) ng L ml (mL) l Magnitud 10 3 10-3 10-6 10-9 10 3 10-3 10-3 mm m m m g kg g (10-6 Kg)

10-6 g (10-9 kg) 10-9 g (10-12 kg) 10 3 ml 10-3 L 10-6 L Monofosfato de adenosina Trifosfato de adenosina Bacilos cido alcohol resistentes Grados centgrados Partes por milln Partes por billn Revoluciones por minuto Diclorodifeniltricloroetano Especie desconocida Especies desconocidas Tuberculosis

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Programa de la asignatura ECOLOGA Y SALUD Clave 1205 Valor 15 CRDITOS Ubicacin 2. SEMESTRE Duracin 144 horas (96 horas teora, 48 horas prctica) Carcter de la asignatura OBLIGATORIA Tipo de la asignatura TERICO PRCTICA rea de pertenencia ENFERMERA Y SALUD EN MXICO La ecologa es la ciencia que estudia las interacciones de los organismos vivos y sus ambientes, es decir los ecosistemas. El aspecto que ms interesa es la relacin entre el ambiente, los organismos, y el ser humano sobre todo, las relaciones sociales y el desarrollo histrico de los seres humanos que determinan la calidad del ambiente y, por ende, del proceso salud-enfermedad. La asignatura Ecologa y Salud se relaciona con: Atencin a la Salud en Mxico y Socio antropologa, al rescatar de stas elementos tericos sobre sociologa, antropologa, polticas y recursos para la salud en Mxico que contribuyan a fundamentar la determinacin histrico-social en la concepcin del proceso salud-enfermedad. Lo mismo que con las asignaturas de: Anatoma y Fisiologa Humana I y II al permitir la identificacin de la parte y funcin afectada en su relacin con el parsito y el ambiente; con Nutricin para comprender cmo las alteraciones del ambiente afectan la produccin de alimentos y al husped predisponindolo a las enfermedades, y apoya a las materias consecuentes del Proceso SaludEnfermedad del Nio, del Adolescente, del Adulto y del Anciano. Al permitir la identificacin etiolgica de diferentes patologas, as como su transmisin y prevencin. Contribuye a fundamentar los procedimientos empleados en las enfermeras; y en Farmacologa colabora al entendimiento de los mecanismos de accin y usos clnicos de los antimicrobianos y antiparasitarios. La asignatura ofrece un panorama general del proceso salud-enfermedad, desde el punto de vista multicausal, e integrada a las asignaturas de las ciencias sociales; permite entender el fenmeno salud-enfermedad como un proceso social e histrico. Asimismo, enmarca a la persona dentro del entorno ecolgico lo que permitir fundamentar posteriormente los cuidados de enfermera en el fomento, promocin de salud y la prevencin de las infecciones.

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El programa apoyado en la trada ecolgica est dividido en tres secciones: la primera aborda los contenidos relacionados con conceptos bsicos y factores del ambiente; la segunda seccin est enfocada a los mecanismos de defensa del husped y la tercera a los factores del parsito. OBJETIVO GENERAL Explicar la interdependencia de los procesos ecolgicos con el hombre y la influencia de las relaciones sociales, culturales y econmicas sobre el proceso salud-enfermedad, asimismo promover medidas ecolgicas de proteccin y mejoramiento del ambiente as como el desarrollo de una cultura ecolgica. UNIDAD I. CONCEPTOS BSICOS. (8 horas) La Ecologa y Salud ofrece una concepcin global e integrada de las interacciones del ser humano con su ambiente y la influencia de stas en el proceso salud-enfermedad, entendindolo como un fenmeno social determinado por causas ecolgicas, econmicas y culturales. Esta concepcin integral permite al profesional de enfermera dentro de su mbito de accin establecer medidas ecolgicas para preservar la salud e impedir la enfermedad. Explicar el proceso salud-enfermedad desde la perspectiva ecolgica e identificar de manera general la participacin de enfermera en este proceso. 1.1 La concepcin actual de ecologa. 1.2 La ecologa y su relacin con otras ciencias. 1.3 El proceso salud-enfermedad desde distintos enfoques. 1.4 El proceso salud-enfermedad como fenmeno ecolgico en la relacin husped-parsito. 1.5 La trada ecolgica. 1.6 La cadena infecciosa. 1.7 La participacin del personal de enfermera en medidas ecolgicas que atiendan la conservacin de la salud la prevencin de la enfermedad. UNIDAD II. LOS FACTORES DEL AMBIENTE EN EL PROCESO SALUDENFERMEDAD. (28 horas) El conocimiento de los factores abiticos y biticos de un ecosistema, as como las relaciones socioeconmicas y el desarrollo histrico del humano, que determinan la calidad del entorno, son indispensables para fundamentar el anlisis y las acciones de enfermera en el proceso salud-enfermedad, dentro de la relacin husped-parsito.

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Analizar las interacciones obligatorias entre el entorno bitico y abitico y sus alteraciones por la sociedad, identificando los factores que permiten fundamentar acciones de enfermera en la relacin husped-parsito que desplazan el proceso hacia la salud o la enfermedad. 2.1 El ecosistema, unidad bsica en ecologa. 2.1.1 Los niveles de organizacin de la materia. 2.1.2 Las bases de la ecologa, los sistemas y sus diferentes tipos. 2.1.3 El ecosistema y su estructura. 2.2 La energa y su transformacin. 2.2.1 Leyes de la termodinmica. 2.2.2 Fotosntesis. 2.2.3 Respiracin. 2.3 Las cadenas alimenticias y su repercusin en el ser humano. 2.3.1 Niveles trficos. 2.3.2 Cadenas y redes alimenticias. 2.3.3 Pirmides alimenticias. 2.4 Los ciclos en la regulacin de los ecosistemas. 2.4.1 El ciclo del agua y su importancia en la distribucin de energa y contaminantes. 2.4.2 Los ciclos del nitrgeno y fsforo, su importancia en el equilibrio del ecosistema y en la produccin de alimentos. 2.5 Ecologa de las poblaciones. 2.5.1 Caractersticas y dinmica de la poblacin. 2.5.2 Factores que determinan la magnitud de una poblacin. 2.5.3 Poblacin humana. 2.5.3.1 El crecimiento de la poblacin humana y la explosin demogrfica en Mxico. 2.5.3.2 2.5.3.3 2.5.3.4 Los diferentes tipos de ecosistemas. La influencia de los ecosistemas en el proceso salud enfermedad. Participacin de enfermera en la orientacin del individuo, la familia y la comunidad, en el cuidado del ecosistema. 2.6 La contaminacin de la atmsfera, del agua, del suelo y de los alimentos. 2.6.1 Los tipos de contaminantes.

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2.6.2 Las principales fuentes de contaminacin. 2.6.3 Riesgos a la salud por la contaminacin del aire, agua, suelo y alimentos, medidas de solucin. 2.6.4 La explosin demogrfica en Mxico. 2.6.5 Acciones de enfermera a nivel familiar en el manejo del agua, alimentos y saneamiento ambiental en la prevencin y control de las enfermedades transmisibles. 2.6.6 Participacin de enfermera en la orientacin a la comunidad en el manejo de los residuos orgnicos, para la fertilizacin de los suelos. UNIDAD III. LOS FACTORES DEL HUSPED EN EL PROCESO SALUDENFERMEDAD (16 horas) El conocimiento de los mecanismos inespecficos y especficos que el husped utiliza para regular su relacin en el entorno y el parsito, es necesario para explicar la relacin husped-parsito en su ambiente de cambio continuo. De igual manera, se requiere conocer las principales alteraciones que pueden sufrir estos mecanismos, a fin de evitar o atenuar sus consecuencias. Estas alteraciones debilitan al husped favoreciendo el proceso hacia la enfermedad; entre las principales destacan las provocadas por la contaminacin ambiental, riesgos laborales, desnutricin, heridas, quemaduras, defectos inmunitarios, ciruga, farmacoterapia, radioterapia y procedimientos invasivos y de diagnstico. Asimismo, se mencionar la participacin de enfermera en la conservacin de la homeostasis, vacunacin, seroterapia, procedimientos diagnsticos, teraputicos y en la prevencin de las infecciones intrahospitalarias. Explicar los mecanismos inespecficos y especficos que el husped utiliza para regular su relacin con el entorno y el parsito, las causas que alteran estos mecanismos y las medidas preventivas de enfermera en el paciente debilitado a fin de evitar o atenuar el desarrollo de la enfermedad. 3.1La adaptacin del individuo al medio ambiente, homeostasis. 3.2 Inmunidad no especfica del hombre frente al contacto con el ambiente y el parsito. 3.2.1 Barreras fsicas. 3.2.2 Barreras qumicas. 3.2.3 Barreras fisiolgicas. 3.2.4 Inflamacin.

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3.2.5 Fagocitosis. 3.2.6 Complemento. 3.3 Inmunidad especfica del hombre frente al ambiente y el parsito. 3.3.1 Antgenos. 3.3.2 Anticuerpos. 3.3.3 Reaccin antgeno-anticuerpo. 3.3.4 Inmunidad mediada por clulas. 3.3.5 Tipos de hipersensibilidad y su influencia en las enfermedades autoinmunitarias. 3.3.6 Inmunidad activa natural y artificial. 3.3.7 Inmunidad pasiva, natural y artificial. 3.3.8 Caractersticasmicrobiolgicas e inmunolgicas de las vacunas y los sueros. UNIDAD IV. LOS FACTORES DEL PARSITO EN EL PROCESO SALUDENFERMEDAD (44 horas). En esta unidad se abordarn de manera general, las caractersticas del agente que ayudan a su identificacin y los mecanismos de patogenicidad que permiten entender el dao causado en el husped. Se analizarn las caractersticas ms importantes del parsito en su transmisin: el hbitat, la resistencia, la puerta de entrada y salida en el husped, los reservorios y los medios de transmisin que faciliten el entendimiento de las medidas de prevencin, teraputicas y de control de las enfermedades infecciosas. Finalmente, se integrarn los aprendizajes de las unidades anteriores para comprender cmo las alteraciones ambientales afectan al husped y al parsito, favoreciendo el desarrollo de la enfermedad, lo que permitir al profesional de enfermera promover medidas de saneamiento y conservacin del ambiente que redunden en mejores niveles de salud. Tomando como referencia las principales patologas infecciosas y la calidad del ambiente en Mxico, el alumno explicar las caractersticas de los agentes causales, los mecanismos de transmisin, de patogenicidad y las medidas preventivas y teraputicas de enfermera en el mbito individual, familiar y comunitario. 4.1 Generalidades de las bacterias, de los virus y de los hongos; mecanismos de patogenicidad, transmisin y diagnostico as como las medidas especficas

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de enfermera sobre la cadena infecciosa que permite el control y la prevencin de las enfermedades.

BACTERIAS TRANSMITIDAS POR VIA RESPIRATORIA

VIRUS DERMOTROPOS

HONGOS MICOSIS SUPERFICIALES

Sarampin Staphylococcus spp. Varicela Streptococcus spp. Rubola Mycobacterium ssp. Herpes Zoster Herpes Simple Neisseria meningitidis

Hongos de las Tias

TRANSMITIDAS POR NEUROTROPOS CONTACTO SEXUAL Neisseria gonorrhoeae Rabia Chlamydia trachomatis Polio Treponema pallidum TRANSMITIDAS POR VA ENTRICA Enterobacterias Vibrio cholerae Brucella ssp. Campylobacter jejuni Helicobacter pylori TRANSMITIDAS POR OTROS MEDIOS Y ARTROPODOS Pseudomonas spp . Clostridium spp. Rickettsia spp. VISCEROTROPOS Parotiditis Hepatitis Virus de la Inmunodeficiencia humana (SIDA) Catarro comn

MICOSIS PROFUNDAS Histoplasma capsulatum Coccidioides immitis MICOSIS OPORTUNISTAS Cndida albicans

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4.2 Generalidades de los protozoarios, helmintos y artrpodos, mecanismos de patogenicidad, transmisin, diagnstico; as como las medidas especficas de enfermera sobre la cadena infecciosa que permite el control y prevencin de las enfermedades. HELMINTOS INTESTINALES Taenia spp. Ascaris lumbricoides Necator americanus Trichuris trichiura TISULARES Onchocerca volvulus Trichinella spiralis Taenia solium (Cisticerco) ARTROPODOS Sarcoptes scabiei Pediculus spp. Enterobius vermicularis

PROTOZOARIOS INTESTINALES Entamoeba Giardia. TISULARES Plasmodium spp. Toxoplasma gondii histolytica

UROGENITALES Trichomonas vaginalis Quiste hidatdico 4.3 El husped predisponente. 4.3.1La infeccin intrahospitalaria 4.3.2 personal de enfermera como problema y solucin en la infeccin intrahospitalaria. METODOLOGA DE ENSEANZA APRENDIZAJE. Como estrategias bsicas de trabajo se sugieren aquellas que posibiliten en el alumno el desarrollo de las capacidades de bsqueda, investigacin, anlisis, relacin, reflexin, expresin y creatividad, por lo que se propone que el abordaje de las unidades se haga a travs del planteamiento de problemas significativos que generen en los alumnos la bsqueda de informacin para su explicacin y alternativas de solucin. La forma de trabajo puede ser en pequeos grupos para presentar posteriormente, en sesiones plenarias, sus conclusiones; exposicin por parte del profesor, lecturas dirigidas, ejercicios con crucigramas, sociodramas, elaboracin de folletos, carteles, trpticos y prcticas de laboratorio, visitas a Universum, casa ecolgica y ex-Escuela de Enfermera. El

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Otras estrategias que pueden contribuir al desarrollo de las capacidades antes mencionadas son las actividades extra ulicas como: pequeas investigaciones de campo que pueden ser en su entorno familiar y/o comunitario, visitas a casas ecolgicas, elaboracin de composta; Y la contaminacin de su entorno que permitan fundamentar acciones de enfermera en el mbito individual, familiar y comunitario en la solucin de problemas de salud cuyos resultados sern expuestos a todo el grupo. Cabe sealar que la riqueza de estas actividades depender de la movilizacin que el docente promueva de la informacin obtenida, sea para cuestionarla, relacionarla, ampliarla, etctera. La utilizacin de recursos audiovisuales representa un gran apoyo para el estudio de esta asignatura, por lo que se sugiere que el maestro y el alumno tengan un papel activo en su presentacin.

CRITERIOS DE ACREDITACIN -Construccin de esquemas conceptuales de cada unidad. -Grupos de discusin. -Lectura de material especfico. -Comentario o crtica de lo ledo. -Resolucin de problemas. -Presentacin de fichas bibliogrficas. -Preparacin y presentacin de exposiciones. -Participacin del alumno durante la clase (en forma personal o integrado a un grupo). -Exmenes escritos (4) que verifiquen el aprendizaje de los contenidos bsicos del curso. -Presentacin por escrito de temas (3) selectos del programa. -Reporte analtico de visitas a lugares de inters ecolgico.

BIBLIOGRAFA BSICA.

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