P. 1
kurva-kalibrasi

kurva-kalibrasi

|Views: 569|Likes:
Dipublikasikan oleh Addit CunKrinkk

More info:

Published by: Addit CunKrinkk on Oct 10, 2011
Hak Cipta:Attribution Non-commercial

Availability:

Read on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.
download as PPT, PDF, TXT or read online from Scribd
See more
See less

01/08/2014

pdf

text

original

Analisis Instrumen I

Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
Kalibrasi
Adalah suatu proses menghubungkan sinyal analitik
yang diukur (respon alat) dengan konsentrasi analit.
Metode Kalibrasi:
A. Kurva Kalibrasi (Kurva Baku)
B. Metode Adisi Standard
C. Metode Standard Internal
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
A. KURVA KALIBRASI
Sejumlah larutan baku dengan dengan variasi konsentrasi
disiapkan, kemudian diukur menggunakan instrumen, dan respon
instrumen dicatat.
Larutan Baku – Larutan analit yg telah diketahui konsentrasinya.
Larutan baku dibuat agar dalam pengukuran
menggunakan instrumen tidak melampaui batas
linearitas (LOL = Limit of Linearity) dari
instrumen.
Kurva Kalibrasi – Plot konsentrasi baku (X) versus respon
instrumen (Y).
Hubungan antara konsentrasi baku dan respon
instrumen adalah linier.
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
A. KURVA KALIBRASI
Konsentrasi Respon Instrumen (RI) RI terkoreksi (S
i
– S
bl
)
0,00 0.013 0.000
6.01 0.101 0.088
31.80 0.811 0.798
63.50 1.498 1.485
88.90 2.094 2.081
Sampel 0.924 0.875
Kurva Kalibrasi
0.0
0.5
1.0
1.5
2.0
2.5
0 20 40 60 80 100
Konsentrasi
R
I

t
e
r
k
o
r
e
k
s
i

1. Penyiapan Kurva Kalibrasi
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
A. KURVA KALIBRASI
x
i
y
i
x
i
2
y
i
2
x
i
y
i

Concentration IR Corr. IR
0.000 0.013 0.000 0.000000 0.000000 0.000000
6.010 0.101 0.088 36.120100 0.007744 0.528880
31.800 0.811 0.798 1011.240000 0.636804 25.376400
63.500 1.498 1.485 4032.250000 2.205225 94.297500
88.900 2.094 2.081 7903.210000 4.330561 185.000900
E =
190.210 4.452 12982.820100 7.180334 305.203680
Mean 38.042 0.890


Gunakan metode regresi linier untuk menghitung persamaan fitting y = mx + b
1. Penyiapan Kurva Kalibrasi
( )
( )
( )
( )
( )( )

intercept) - (Y (Slope)

yy xx
xy
xx xy
i i
i i i i xy
i
i i yy
i
i i xx
S S
S
r
m x - y b S S m
N
y x
y x y y x x S
N
y
y y y S
N
x
x x x S
·
=
= =
¿ ¿
¿
÷ = ÷
¿
÷ =
¿
¿
÷ =
¿
÷ =
¿
¿
÷ =
¿
÷ =
2
2
2
2
2
2
( )
( )
( )
( )
( )( )

intercept) - (Y (Slope)

yy xx
xy
xx xy
i i
i i i i xy
i
i i yy
i
i i xx
S S
S
r
m x - y b S S m
N
y x
y x y y x x S
N
y
y y y S
N
x
x x x S
·
=
= =
¿ ¿
¿ ÷ = ÷ ¿ ÷ =
¿
¿ ÷ = ¿ ÷ =
¿
¿ ÷ = ¿ ÷ =
2
2
2
2
2
2
( )
( )
( )
( )
( )( )

intercept) - (Y (Slope)

yy xx
xy
xx xy
i i
i i i i xy
i
i i yy
i
i i xx
S S
S
r
m x - y b S S m
N
y x
y x y y x x S
N
y
y y y S
N
x
x x x S
·
=
= =
¿ ¿
¿ ÷ = ÷ ¿ ÷ =
¿
¿ ÷ = ¿ ÷ =
¿
¿ ÷ = ¿ ÷ =
2
2
2
2
2
2
Metode Kalibrasi Alat
A. KURVA KALIBRASI
1. Penyiapan Kurva Kalibrasi
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
A. KURVA KALIBRASI
Gunakan persamaan fitting y = mx + b untuk menghitung
konsentrasi sampel
2. Interpretasi Kurva Kalibrasi
m = 0.0236 & b = -0.00881
y = 0.0236x – 0.00881

Sehingga:
x = (y – b)/m
x = (y + 0.00881)/0.0236

dan:
x (konsentrasi sampel) = (0.875+0.00881)/0.0236
= 37.4

Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
• Digunakan untuk analit dalam matriks yang kompleks, yg
mengakibatkan terjadinya interferensi dalam respon instrumen (RI).
Contoh: darah, sedimen, serum, dll.
• Sering disebut juga metode SPIKING.
• Metode:
1. Siapkan beberapa aliquot identik, V
x
, dari sampel.
2. Tambahkan sejumlah volume tertentu secara bervariasi, V
s
,
larutan baku yang telah diketahui konsentrasinya, c
s
, pada tiap
aliquot.
3. Encerkan (add-kan) masing
2
larutan hingga volume tertentu, V
t

4. Ukurlah dengan instrumen untuk mendapatkan respon
instrumen, S
5. Hitung konsentrasi sampel, c
x
, dengan persamaan berikut:
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
• Persamaan Adisi Standard
t
x x
t
s s
V
c kV
V
c kV
S + =
S = sinyal atau respon instrumen
k = konstanta proporsionalitas
V
s
= volume standard yg ditambahkan
c
s
= konsentrasi standard
V
x
= volume aliquot sampel
c
x
= konsentrasi sample
V
t
= volume total pengenceran
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
• Plot respon instrumen (S) vs volume standard (V
s
)
b mV S
s
+ =
V
s
R
e
s
p
o
n
s

I
n
s
t
r
u
m
e
n


(

S

)

m =
A
y/
A
x
b = y-intercept
(V s ) 0
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
• Hitung konsentrasi sampel.
• Kombinasikan:
b mV S
s
+ = dan
t
x x
t
s s
V
c kV
V
c kV
S + =
x
s
x
mV
bc
c =
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
Contoh: Metode Adisi Standard
Arsenik in suatu sampel biologi ditetapkan dengan metode adisi standard.
10 mL aliquot sample dipipet ke dalam 5 buah labu takar 100 mL. Variasi
volume dari standard 22.1 ppm ditambahkan ke dalam 4 labu takar, masing
2

diencerkan hingga batas. Absorbansi masing
2
larutan ditentukan.
Sample (mL) Standard (mL) Absorbance
10.0 0.00 0.156
10.0 5.00 0.195
10.0 10.00 0.239
10.0 15.00 0.276
10.0 20.00 0.320
Hitung konsentrasi sampel!
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
Contoh: Metode Adisi Standard
Adisi Standard Arsenik
0.00
0.05
0.10
0.15
0.20
0.25
0.30
0.35
0.40
0.45
0 5 10 15 20
Volume Standard (V
s
)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
e

m = 0.00818
b = 0.1554
s m
= 0.000119
s b
= 0.001463
x
s
x
V m
c b
c
.
.
=
) 10 )( 00818 . 0 (
) 1 . 22 )( 1554 . 0 (
=
x
c
ppm 98 . 41 =
x
c
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
Contoh: Metode Adisi Standard
• Penggunaan Adisi Standard untuk menghitung konsentrasi sampel
1) Buat 2 larutan yg mengandung aliquot sampel yg sama, tambahkan
standar pada salah satu larutan. Encerkan hingga batas (100 mL)
( )
x
s s
x
V S S
V c S
c
1 2
1
÷
=
dimana: S
1
= respon instrumen sampel
S
2
= respon instrumen sampel + spike

2) Ukurlah respon instrumennya (absorbansi) pada kedua larutan.
3) Hitung konsentrasi sampel dengan persamaan berikut:
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
B. METODE ADISI STANDARD
Contoh: Standard Addition 2 titik
Sebanyak 25.0 mL aliquot larutan quinine diencerkan hingga
50.0 mL dan diukur absorbansinya, mempunyai absorbansi
0.416 pada 348 nm diukur dalam kuvet setebal 1.00 cm.
Sebanyak 25 mL aliquot kedua dicampur dengan 10.0 mL
larutan yg mengandung 23.4 ppm quinine. Setelah diencerkan
hingga50.0 mL, larutan ini memiliki absorbansi 0.610 (kuvet
1.00 cm pada panjang gelombang yg sama). Hitung
konsentrasi (ppm) quinine dalam sampel.

S
1
= 0.416
S
2
= 0.610
V
s
= 10 mL
c
s
= 23.4 ppm
V
x
= 25.0 mL

ppm 07 . 20
) 0 . 25 )( 416 . 0 610 . 0 (
) 0 . 10 )( 4 . 23 )( 416 . 0 (
=
÷
=
x
c
( )
x
s s
x
V S S
V c S
c
1 2
1
÷
=
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
C. METODE STANDARD INTERNAL
• Umumnya digunakan dalam GC dan HPLC
• Suatu senyawa reference/pembanding (standard internal) dengan
volume/massa yg konstan ditambahkan ke dalam larutan standar
dan sampel.
• Rasio analit terhadap standard internal digunakan sebagai sumbu
Y dalam plot kurva kalibrasi dan untuk menetapkan sampel.
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
C. METODE STANDARD INTERNAL
Hexane Calibration Curve
y = 31641x + 142659
R
2
= 0.8171
0.00E+00
5.00E+05
1.00E+06
1.50E+06
2.00E+06
2.50E+06
0 10 20 30 40 50 60
Conc. (ppt hexane)
P
e
a
k

A
r
e
a
Analisis Instrumen I
Arie BS
Metode Kalibrasi Alat
C. METODE STANDARD INTERNAL
Hexane/Octane Calibration Curve
y = 0.0359x + 0.0772
R
2
= 0.9998
0
0.5
1
1.5
2
2.5
0 10 20 30 40 50 60
Conc. (ppt hexane)
H
e
a
x
n
e
/
O
c
t
a
n
e

P
e
a
k

A
r
e
a

Larutan baku dibuat agar dalam pengukuran menggunakan instrumen tidak melampaui batas linearitas (LOL = Limit of Linearity) dari instrumen. Hubungan antara konsentrasi baku dan respon instrumen adalah linier. KURVA KALIBRASI Sejumlah larutan baku dengan dengan variasi konsentrasi disiapkan. Larutan Baku – Larutan analit yg telah diketahui konsentrasinya. dan respon instrumen dicatat. Kurva Kalibrasi – Plot konsentrasi baku (X) versus respon instrumen (Y).Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat A. Arie BS . kemudian diukur menggunakan instrumen.

80 63.0 0.90 Sampel 2.498 RI terkoreksi (Si – Sbl) 0.013 0.5 0.00 6.101 0.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat A.000 0.924 Kurva Kalibrasi 2.875 RI terkoreksi 1.50 1.811 1. KURVA KALIBRASI Konsentrasi 0.0 0 20 40 60 80 100 Arie BS Konsentrasi .081 0.485 88.01 31.5 2.5 1.0 2. Penyiapan Kurva Kalibrasi Respon Instrumen (RI) 0.798 1.088 0.094 0.

900 2.000 0.000000 0.297500 S yy    yi   4032.452  N N S xy    xi  x  yi  y    xi y Mean 38.636804 xi  N  x 1.890 S xy    xi  x  yi  y    xi yi   x y S xy    xi  x  yi  y    xi yi   i  i N xi  m  S xy S xx (Slope ) b  y -x m (Y .101 0.203680 190.013 0.0812  x  7903.528880i  2  x 2 2 S xx   x  x    25. Penyiapan Kurva Kalibrasi Gunakan metode regresi linier untuk menghitung persamaan fitting y = mx + b xi yi x i2 y i2 xiyi Concentration IR Corr.240000 i 20.000000 0. IR 0.210000 4.210xx   xi  x    xi  12982.500   xi  x  1.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat A.042 0.376400 Sy 31.000000 6.007744 0.811 0. KURVA KALIBRASI 1.205225 94.498 2  S 63.in m  S xy S xx (Slope) b  y -x m (Y .250000 N xx  88.000 0.094 2 2.485 xi2 2  i 2.798 1011.180334   yi  y    yi  4.820100 7.330561 185.010 0.intercept) r S xy r  S xx  S yy m  S xy S xx (Slope) b y - S xy S xx  S yy r S xy S xx  S yy Arie BS .088 36.120100 0.000900 2  yi 2 2 i S S yy  305.800 0.

KURVA KALIBRASI 1.Metode Kalibrasi Alat A. Penyiapan Kurva Kalibrasi .

875+0.00881 Sehingga: x = (y – b)/m x = (y + 0. Interpretasi Kurva Kalibrasi Gunakan persamaan fitting y = mx + b untuk menghitung konsentrasi sampel m = 0.00881)/0.4 Arie BS .0236 dan: x (konsentrasi sampel) = (0.0236 & b = -0.0236x – 0.00881)/0.0236 = 37.00881 y = 0. KURVA KALIBRASI 2.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat A.

Hitung konsentrasi sampel. yg mengakibatkan terjadinya interferensi dalam respon instrumen (RI). Ukurlah dengan instrumen untuk mendapatkan respon instrumen. METODE ADISI STANDARD • Digunakan untuk analit dalam matriks yang kompleks. Tambahkan sejumlah volume tertentu secara bervariasi. serum. pada tiap aliquot. dengan persamaan berikut: Arie BS . • Metode: 1. 3. 2. S 5. dll. cs. Siapkan beberapa aliquot identik. dari sampel. Vx. • Sering disebut juga metode SPIKING. Encerkan (add-kan) masing2 larutan hingga volume tertentu. Vs. larutan baku yang telah diketahui konsentrasinya. cx. Contoh: darah.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B. Vt 4. sedimen.

METODE ADISI STANDARD • Persamaan Adisi Standard kVs cs kVx cx S  Vt Vt S= k = Vs = cs = Vx = cx = Vt = sinyal atau respon instrumen konstanta proporsionalitas volume standard yg ditambahkan konsentrasi standard volume aliquot sampel konsentrasi sample volume total pengenceran Arie BS .Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B.

Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B. METODE ADISI STANDARD • Plot respon instrumen (S) vs volume standard (Vs) m = D y/ D x Respons Instrumen ( S ) b = y-intercept (V s ) 0 Vs S  mV s  b Arie BS .

METODE ADISI STANDARD • Hitung konsentrasi sampel. • Kombinasikan: S  mV s  b dan kVs cs kVx cx S  Vt Vt bcs cx  mV x Arie BS .Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B.

Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B. METODE ADISI STANDARD Contoh: Metode Adisi Standard Arsenik in suatu sampel biologi ditetapkan dengan metode adisi standard.0 10. Variasi volume dari standard 22.0 10. 10 mL aliquot sample dipipet ke dalam 5 buah labu takar 100 mL.0 10.00 5.0 10.00 Absorbance 0.00 20.239 0. Sample (mL) 10. masing2 diencerkan hingga batas.195 10.276 0.0 Standard (mL) 0. Absorbansi masing2 larutan ditentukan.156 0.00 15.320 Hitung konsentrasi sampel! Arie BS .00 0.1 ppm ditambahkan ke dalam 4 labu takar.

00 0 m = 0.1) (0.10 0.1554 sm = 0.45 0.30 0.25 0.000119 sb = 0.Vx cx  (0.00818 b = 0.cs cx  m.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B.1554 )( 22 .05 0. METODE ADISI STANDARD Contoh: Metode Adisi Standard Adisi Standard Arsenik 0.15 0.00818 )(10 ) Absorbance 0.35 b.40 0.001463 cx  41 .98 ppm 5 10 15 20 Volume Standard (Vs ) Arie BS .20 0.

Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B. Encerkan hingga batas (100 mL) 2) Ukurlah respon instrumennya (absorbansi) pada kedua larutan. METODE ADISI STANDARD Contoh: Metode Adisi Standard • Penggunaan Adisi Standard untuk menghitung konsentrasi sampel 1) Buat 2 larutan yg mengandung aliquot sampel yg sama. tambahkan standar pada salah satu larutan. 3) Hitung konsentrasi sampel dengan persamaan berikut: S1csVs cx  S2  S1 Vx dimana: S1 = respon instrumen sampel S2 = respon instrumen sampel + spike Arie BS .

07 ppm (0.0 mL aliquot larutan quinine diencerkan hingga 50. Sebanyak 25 mL aliquot kedua dicampur dengan 10. S1 = 0.610 Vs = 10 mL cs = 23.0 mL larutan yg mengandung 23. larutan ini memiliki absorbansi 0.610  0. Hitung konsentrasi (ppm) quinine dalam sampel. mempunyai absorbansi 0.0) .610 (kuvet 1.0 mL Arie BS S1csVs cx  S2  S1 Vx cx  (0. METODE ADISI STANDARD Contoh: Standard Addition 2 titik Sebanyak 25.4 ppm quinine.416 )( 23 .00 cm.4)(10 .0 mL.416 S2 = 0.416 pada 348 nm diukur dalam kuvet setebal 1. Setelah diencerkan hingga50.0)  20 .00 cm pada panjang gelombang yg sama).0 mL dan diukur absorbansinya.416 )( 25 .Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat B.4 ppm Vx = 25.

METODE STANDARD INTERNAL • Umumnya digunakan dalam GC dan HPLC • Suatu senyawa reference/pembanding (standard internal) dengan volume/massa yg konstan ditambahkan ke dalam larutan standar dan sampel.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat C. Arie BS . • Rasio analit terhadap standard internal digunakan sebagai sumbu Y dalam plot kurva kalibrasi dan untuk menetapkan sampel.

Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat C.00E+06 y = 31641x + 142659 R2 = 0.50E+06 2.00E+00 0 10 20 30 40 50 60 Conc. METODE STANDARD INTERNAL Hexane Calibration Curve 2.00E+05 0.50E+06 1.8171 Peak Area 1. (ppt hexane) Arie BS .00E+06 5.

0772 2 R2 = 0.0359x + 0. METODE STANDARD INTERNAL Hexane/Octane Calibration Curve 2.9998 Heaxne/Octane Peak Area 1.5 0 0 10 20 30 40 50 60 Conc. (ppt hexane) Arie BS .5 y = 0.5 1 0.Analisis Instrumen I Metode Kalibrasi Alat C.

32/::7/./.3/::7.38. 2025:3.3/.        552    .07.883897:203 094/0.3.28.8'8 .6:490/:./.3/:3 5526:330 $090.3.2.-847-. 9:3 4380397.07.25./.-847-..5.383.2:..7:9.3203..3.8.7///94399 $0-.36:330/03.33.3 2 .098090-.-7..2  $0-.6:49.  2/. 2 . 2.7:9.-847-.38   :.2.8  552 '  2 70$ $.  $  $ ' .3 3.250 $   $   '8  2 .33202.3042-.9  % $$%# 4394$9.3.7:9./03.09  . .38 5.25:7/03.8 552 6:330/.

3/./:3.3! W $:.0.8.2/.9:803.7010703..-7.3.9  % $%#%# W &2:23..883897:203 094/0..

7/39073. /03.3/3 89.3.3/.502-.4:20.

3/9..88..7/.5.8:2-:/./.-7.3:39:20309.2.250 70$ .84.2549:7.8/.2-.250 W #.30/.2.389.589.9907.7:9..38.3./:3..3/.3/.38.7/39073. 4389.380-.. ..

9  % $%#%# 0.  5590.30 70$ .                  43.883897:203 094/0.-7.943:7.3.30.0          #    !0.70.-7.8.

30.9  % $%#%# 0.8.3.-7.883897:203 094/0.

-7.30.9.0        #    0.30. .943:7.

          43.30 70$ . .30!0.9.70.  5590.

You're Reading a Free Preview

Mengunduh
scribd
/*********** DO NOT ALTER ANYTHING BELOW THIS LINE ! ************/ var s_code=s.t();if(s_code)document.write(s_code)//-->