1. 2. 3. 4.

5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16.

17.

Gunakan teknik deparafinasi standar pada jaringan. Jaringan diberi buffer sitrat, pH 6,0 dan teknik pengambilan epitop pada suhu tinggi Tambahkan reagen blocking pada jaringan dan diinkubasi dalam ruang tertutup selama 5 menit. Sambil memegang slide dengan sudut 45o, bilas jaringan 1X dengan Buffer pencuci selama minimal 15 detik. Tempelkan handuk kertas di ujung bawah slide untuk membuang sisa buffer Tambahkan antibodi primer pada seluruh jaringan dan diinkubasi dalam ruang tertutup pada suhu kamar selama 60 menit. Bilas spesimen seperti yang dilakukan pada Langkah 4. Tambahkan antibodi sekunder pada jaringan dan diinkubasi dalam ruang tertutup selama 10 menit. Bilas spesimen seperti yang dilakukan pada Langkah 4. Tambahkan larutan streptavidin-HRP pada jaringan dan diinkubasi dalam ruang tertutup selama 10 menit. Bilas spesimen seperti yang dilakukan pada Langkah 4. Tambahakan chromogen reagen pada jaringan dan diinkubasi dalam ruang tertutup selama 10 menit. Bilas spesimen seperti yang dilakukan pada Langkah 4. Tamabahkan larutan counterstain Hematoksilin pada jaringan dan diinkubasi dalam ruang tertutup selama 1 menit. Bilas spesimen seperti yang dilakukan pada Langkah 4. Tempatkan slide jaringan langsung ke dalam wadah yang diisi dengan air deionisasi sampai mounting. Pasang coverslip menggunakan media mounting berbahan dasar air atau untuk mounting permanen, dehidrasi jaringan dengan alkohol berseri, diimersikan dengan xylol, kemudian menerapkan media mounting berbahan xylol dan coverslip. Amati jaringan dengan mikroskop dan lakukan scoring dengan nilai scoring: 0 Tidak ada matriks mesangial yang terwarnai. 1 1-25% dari matriks mesangial terdapat warna pengecatan pada tuft glomerulus. 2 25- 50% dari tuft glomerulus terwarnai. 3 50-75% dari tuft glomerulus terwarnai. 4 >75% dari tuft glomerulus terwarnai.