Anda di halaman 1dari 24

KINETIKA ENZIM

Penting untuk : Memahami fungsi katalitik Memahami fenomena biologik, pengaruh suhu, pH dll. Prosudur pemurnian enzim

Pengukuran aktivitas enzim: Berdasar pada aktivitasnya. 1 IU, micromol P/menit Pada enzim tertentu : 1 IU, perobahan kepekatan pada 340nm sebesar 0,001 per menit Kecepatan reaksi : jumlah substrat yg diubah per satuan waktu jumlah produk yg terbentuk per satuan waktu

S ( P)

t
3

Kurve Perjalanan dari suatu reaksi enzimatik

Kec di 0 = tg A __ Kec di A = = A Kec di B = tg S ( P) A 0 A B C t B C Kec rata-rata B __ di B= B Kec rata-rata C __ di C = C

Kecepatan awal : Pada waktu kadar substrat, produk dan enzim, suhu, pH dapat diketahui dengan tepat. Pada awal reaksi. Pada waktu kurve perjalanan masih lurus. Biasanya berkurangnya substrat < 10%. Cara mengukur kecepatan awal Ambil bagian pada kurve perjalanan yang masih Berupa garis lurus (pada awal reaksi) Kecepatan awal berbanding lurus dengan kadar enzim
5

Pengaruh kadar substrat terhadap reaksi enzimatik


Melakukan beberapa kali percobaan kondisi sama kecuali kadar substrat Kadar substrat absis ( x ) Kecepatan awal Vo ordinat ( y ) Kurve berbentuk hiperbola

Persamaan Michaelis-Menten Vomax [S] Vo= ---------Km + [S] Apabila [S] <<< Km [S] >>> Km [S] = Km
7

[S] <<< Km

Double reciprocal atau Lineweaver-Burk plot

10

Pengaruh pH terhadap reaksi enzimatik


pH mempengaruhi muatan Muatan mempengaruhi struktur enzim Selanjutnya akan mempengaruhi reaksi E S Akibatnya kecepatan reaksi dipengaruhi
11

O + H 3N C C OH R pH = 3

O + H 3N C C O R pH = 7

O H2 N C C pH = 11 R
12

Pengaruh pH 1)Pepsin pH optimum 1,6

2) Glukosa 6 fosfatase pH optimum 7,8

13

50 C
S P)

60 C 0 70 C 0 40 C 0 80 C t2 t

Pengaruh temperatur Makin tinggi temperatur Makin mudah rusak Enzim lebih stabil pada Temperatur yang rendah

S __ t

V Rata-rata S = __ t

40

50

600

70 0

80

14

Suhu

INHIBITOR
Berdasar ikatan enzim : -inhibitor reversibel -inhibitor irreversibel Berdasar sifat kinetika : -inhibitor kompetitif -inhibitor nonkompetitif
15

INHIBITOR KOMPETITIF
Selalu bersifat reversibel E+I EI ES + I

EI E ES
+
16

E + P

Inhibitor kompetitif reversibel Efeknya dapat dihilangkan dengan menambah substrat Analog substrat : Strukturnya mirip substrat

S S I

Terikat di aktif site


17

COOH Suksinat dehidrogenase COOH CH 2 CH 2 HOOC COOH

As.Suksinat
COOH CH 2 CH 2 CH 2 COOH

As. Fumarat

COOH CH 2 COOH

COOH COOH

CH 3 C H2 COOH

As.Glutarat As.Malonat As.Oksalat As.Propionat


18

19

20

Inhibtor nonkompetitif : a) Inhibitor nonkompetitif reversibel


Dpt berikatan dgn E bebas juga dengan ES komplek

E+I

EI

ES + I

ESI

Terikat tidak pada aktif site Strukturnya tidak mirip substrat

E I

21

22

23

Inhibitor nonkompetitif irriversibel


Berikatan dgn enzim secara irriversibel Merobah seluruh konformasi enzim Enzim menjadi inaktif Secara kinetika mirip nonkompetitif reversibel Menurunkan Vmax Tidak menurunkan Km Contoh : Hg++, Ag++, Ba++

24