Penting untuk : Memahami fungsi katalitik Memahami fenomena biologik, pengaruh suhu, pH dll. Prosudur pemurnian enzim
Pengukuran aktivitas enzim: Berdasar pada aktivitasnya. 1 IU, micromol P/menit Pada enzim tertentu : 1 IU, perobahan kepekatan pada 340nm sebesar 0,001 per menit Kecepatan reaksi : jumlah substrat yg diubah per satuan waktu jumlah produk yg terbentuk per satuan waktu
S ( P)
t
3
Kecepatan awal : Pada waktu kadar substrat, produk dan enzim, suhu, pH dapat diketahui dengan tepat. Pada awal reaksi. Pada waktu kurve perjalanan masih lurus. Biasanya berkurangnya substrat < 10%. Cara mengukur kecepatan awal Ambil bagian pada kurve perjalanan yang masih Berupa garis lurus (pada awal reaksi) Kecepatan awal berbanding lurus dengan kadar enzim
5
Persamaan Michaelis-Menten Vomax [S] Vo= ---------Km + [S] Apabila [S] <<< Km [S] >>> Km [S] = Km
7
[S] <<< Km
10
O + H 3N C C OH R pH = 3
O + H 3N C C O R pH = 7
O H2 N C C pH = 11 R
12
13
50 C
S P)
60 C 0 70 C 0 40 C 0 80 C t2 t
Pengaruh temperatur Makin tinggi temperatur Makin mudah rusak Enzim lebih stabil pada Temperatur yang rendah
S __ t
V Rata-rata S = __ t
40
50
600
70 0
80
14
Suhu
INHIBITOR
Berdasar ikatan enzim : -inhibitor reversibel -inhibitor irreversibel Berdasar sifat kinetika : -inhibitor kompetitif -inhibitor nonkompetitif
15
INHIBITOR KOMPETITIF
Selalu bersifat reversibel E+I EI ES + I
EI E ES
+
16
E + P
Inhibitor kompetitif reversibel Efeknya dapat dihilangkan dengan menambah substrat Analog substrat : Strukturnya mirip substrat
S S I
As.Suksinat
COOH CH 2 CH 2 CH 2 COOH
As. Fumarat
COOH CH 2 COOH
COOH COOH
CH 3 C H2 COOH
19
20
E+I
EI
ES + I
ESI
E I
21
22
23
24