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METODOS FISICO-QUIMICOS Y

MICROBIOLOGICOS
uL1L8MlnAClCn uL nl18CCLnC
1C1AL
O Meiodo Kjeldall
Se basa en la deieiminacin del N: pievia desiiuccin
de la maieiia oiganica poi accin del H:SO,
neuiializacin con NaOH y desiilacin del NH
libeiado, el cual es iecibido en una solucin valoiada
de H:SO y posieiioi iiiulacin con Sln. Valoiada de
NaOH
8LACClCnLS LLLvAuAS A CA8C Ln LL ML1CuC
uL k!LLuAPL
O DIGESTIN
O # n - C -NH
:
+ mH
:
SO

caializadoies
CO
:
+ NH

:
SO

+ H
:
O+
oiios componenies
O
pioieina caloi
O
O NEUTRAIIZACIN Y DESTIIACIN
O : NH

:
SO

+ : NaOH :NH

+ Na
:
SO

+ :H
:
O
O
O NH

+ H
:
SO

NH

+ HSO

-
in sulfaio
O
O TITULACIN
O El anin sulfaio piopoicional a la caniidad de niiigeno es iiiulado con
NaOHesiandaiizado:
O
O H
+
+ OH
-
H
:
O
rocedlmlenLo
O esai eniie o, a #,o g de muesiia en papel maniequilla,
iiansfeiii al maiiaz Kjeldall, aadii #o g del caializadoi y
con piecaucin : ml de H:SO | j.
O Colocai el maiiaz ligeiamenie inclinado sobie el digesioi
apaiicin de un coloi azul veidoso y caleniai lasia la
ioial desiiuccin de la maieiia oiganica. Enfiiai y adicionai
con piecaucin poi las paiedes del maiiaz o ml de agua
d.d., coneciai el maiiaz al equipo de desiilacin, el exiiemo
ieiminal del condensadoi debe lallaise sumeigido en un
eilenmeyei de :o ml, el cual coniiene : ml de H
:
SO

o,#
Ny unas goias del indicadoi.
rocedlmlenLo
O adii leniamenie a la sln. Digeiida y diluida apiox.
o ml de NaOH al o% apaiicin coloi negio o azul
inienso
O Desiilai iecibiendo en el eilenmeyei un volumen
apioximado de :oo ml, iiiulai el desiilado con NaOH
o,#N lasia cambio de coloi.
Clculos
6,25 total nitrogeno proteina
6,25 por obtenido total nitrogeno del valor el r multiplica proteina, como resultado el expresar para
muestra la de peso P
sodio de hidroxido del normalidad N
muestra la de n titulacio la en gastados N 0,1 sodio de hidroxido de volumen V2
erlenmeyer el en colocados N 0,1 sulIurico acido de volumen V1
nitrogeno de lentes miliequiva 0,014
:
100 N V2) - (V1 0,014
Total Nitrogeno
L

L L L

43/0
!
uL1L8MlnAClCn uL C8ASA
Pvincipio
O Exiiaccin de la giasa con una mezcla de eiei eiilico,
eiei de peiileo y posieiioi evapoiacin de los
solvenies.
Pvoccdimicnto:
O esai aliededoi de :g de muesiia en papel filiio,
colocai sobie vidiio de ieloj y llevai a la esiufa de
secado poi : loias a #oC. enfiiai en desecadoi.
O La muesiia desecada se iniioduce en el dedal, el cual
se coloca en el equipo de exiiaccin Soxllei.
O dicionai al baln #oo ml de una mezcla en paiies
iguales de eiei eiilico, eiei de peiileo. Exiiaei a ieflujo
duianie loias.
O Evapoiai paiie del eiei, iiansfeiii las uliimas poiciones
al vaso de piecipiiado pieviamenie iaiado y ieiminai la
evapoiacin, secai en esiufa, enfiiai en el desecadoi y
pesai la giasa obienida.
C!cu!os
100
muestra la de peso
vacio vaso peso - grasa con vaso peso
Grasa L
uL1L8MlnAClCn uL MA1L8lA
C8ASA (MeLodo de Cerber)
undamcnto:
O la lecle es iiaiada con acido sulfuiico paia digeiii las
pioieinas. oi ceniiifugacin se ieune la maieiia giasa
en una capa claia que se evalua cuaniiiaiivamenie
medianie una escala convencional.
Pvcpavacindc !a mucstva:
O Llevai la muesiia a T apiox. de :oC, mezclai lasia
que esie lomogenea, veiiiendola vaiias veces de un
iecipienie paia oiio. Si la muesiia piesenia giumos de
ciema, caleniai en bao de maiia a C anies de
lomogenizai, luego enfiiai a :oC.
Pvoccdimicnto:
O Ceniiifugai el buiiiomeiio inmediaiamenie despues de la
agiiacin con el iapn lacia el fondo de la copa. No olvidai
que la ceniiifuga quede equilibiada.
O Ceniiifugai poi min. Coniados a paiiii del momenio en
que la ceniiifuga adquieia la velocidad necesaiia.
Tianscuiiido esie iiempo pasai los buiiimeiios con el
iapn lacia abajo al bao maiia a C, dejailos en esie poi
lo menos min. Y no mas de #o min. Manienei el nivel del
agua poi sobie el nivel de la columna de giasa en el
buiiiomeiio. aia leei, piesionai con la llave, lasia que la
base de la columna de giasa quede a nivel de una divisin
piincipal
O noiai las leciuias de escala coiiespondienie al punio mas
bajo del menisco de giasa y en la inieifase de la giasa-acido,
la difeiencia eniie las dos leciuias da el poiceniaje de m]m
de giasa en la lecle.