A. PENETAPAN ANGKA PENYABUNAN, ANGKA IOD DAN ANGKA ASAM B. PENETAPAN KADAR TRIGLISERIDA METODE ENZIMATIK By Warsi, S. Si.

, Apt

Fosfolipid 8.DASAR TEORI Penggolongan lipida. Lipid gabungan : fosfolipid. Steroid 4. Terpen 3. Lilin 7. berdasarkan kemiripan Struktur : 1. Lemak 6. Derivat lipid : asam lemak. Asam lemak 5. Lipid sederhana : lemak/ gliserida. lilin 2. spingolipid 2. Lipid kompleks . dibagi golongan besar : 1. sterol Penggolongan lipida. gliserol. cerebrosida 3.

alkohol panas. Hidrolisis dengan basa : menjadi garam asam lemak dan gliserol (penyabunan). Larut dalam ester. 4. Lemak dengan atom C pendek larut dalam air. kloroform. lemak tumbuhan : zat cair 2. 6. Dibiarkan lama: timbul rasa dan bau yang tidak enak * hidrolisis * oksidasi peroksida aldehida . Lemak hewan : padat. 5. Lemak dengan titik lebur tinggi : asam lemak jenuh. * Derajat ketidakjenuhan asam lemak : dengan bilangan Iodium 3. benzena. lemak cair (minyak) mengandung asam lemak tidak jenuh.Lemak (Trigliserida) Trigliserida : ester asam lemak dan gliserol Sifat – sifat : 1.

ANALISA KUALITATIF 1. Reaksi : ? Prosedur : 1 tetes Sampel minyak/ lemak (tabung reaksi) + 1 ml kloroform teteskan larutan brom ad kuning permanen Catat jumlah larutan brom Blanko: 1 ml kloroform + larutan Brom . Uji ketidakjenuhan : untuk mengetahui derajat ketidakjenuhan minyak/ lemak. berdasarkan ada/ tidaknya ikatan rangkap.

biarkan 5’ Peroksida : warna kuning–merah (pembebasan Iodium) .2. Uji peroksida : untuk mengetahui tingkat kerusakan minyak/ lemak karena proses oksidasi/ hidrolitik. Reaksi : ? Prosedur : 1 ml sampel minyak/ lemak (tabung reaksi) + 1 ml kloroform + 2 ml asam asetat glasial + 1 tetes larutan KI 10 % kocok.

3. 15’ Ambil 3 ml larutkan dalam air (Larut) Penyabunan sempurna Kocok kuat Busa : sabun . Uji Penyabunan : untuk mengetahui terjadinya reaksi hidrolisis oleh alkali garam asam lemak (sabun) + gliserol Reaksi : ? Prosedur : 5 ml sampel minyak/ lemak (erlenmeyer) + 10 ml KOH alkoholis 10 % Panaskan W.B.

Makin kecil berat molekul.ANALISA KUANTITATIF ANGKA PENYABUNAN * Angka penyabunan : banyaknya mg KOH yang diperlukan untuk penyabunan sempurna 1 g lemak/ minyak. makin besar bilangan penyabunan Reaksi : ? . * Dasar reaksi : hidrolisis asam lemak oleh basa (Rx saponifikasi) * Besarnya bilangan penyabunan tergantung pada berat molekul lemak tersebut.

• Prosedur Timbang seksama 2.0 ml KOH alkoholis Refluks diatas penangas air ad penyabunan sempurna 30’ Teteskan dalam tabung reaksi (air) Bening (satu fase) : penyabunan sempurna Dinginkan + PP Titrasi dengan HCl ad merah jambu Blanko : idem (tanpa sampel) .5 g sampel + 25.

semakin besar bilangan Iodium • Dasar reaksi : reaksi adisi • Reaksi : ? .ANGKA IOD • Angka Iod : banyaknya gram Iod yang diabsorbsi oleh 100 g lipid • Untuk mengetahui derajat ketidakjenuhan asam lemak • Semakin banyak ikatan rangkap.

KI 15 %. Lakukan titrasi blanko. teruskan titrasi ad warna biru hilang.25 g sampel + 10 ml kloroform + 30 ml lar.1 N ad warna kuning hampir hilang + 2 ml lar. .• Prosedur Timbang 0. Iodine Hanus (lar Iodin Bromida dalam asam asetat glasial Diamkan 30’ sesekali dikocok + 10 ml lar. titrasi ad warna biru hampir hilang Kocok kuat. kocok kuat + Air 50 ml (telah didihkan dan didinginkan) Titrasi dg Natrium tiosulfat 0. kanji 1 %.

* Mengukur asam lemak bebas hasil hidrolisis gliserida. * Manfaat : mengetahui kualitas lemak/ minyak >>> Besar angka asam >>> jelek kualitasnya . suhu. Pengaruh air.ANGKA ASAM * Angka asam : jumlah mg KOH yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas yang terdapat dalam 1 g lemak/ minyak. enzim lipolitik/ proses pengolahan yang kurang baik. * Dasar reaksi : hidrolisis gliserida karena pengaruh faktor 2 di atas.

• Reaksi : ? • Prosedur Timbang 10–20 g sampel + 50 ml alkohol netral 95 % Refluk 10’ sambil diaduk Dinginkan + PP Titrasi dengan KOH 0.1 N ad merah jambu .

kedelai Linoleat Minyak wijen Asam Stearat C18H36O 2 .Sumber Minyak Asam Lemak Terbanyak Kelapa sawit Kelapa Palmitat C16H32O 2 Laurat C12H24O 2 BM 258 200 Susu Oleat C18H34O 2 C18H32O 2 282 278 384 Jagung.

Analisa Kualitatif : 1. Analisa Kuantitatif : metode Enzymatic Colorimetric Test dengan Glycerol–3–Phosphate Oxidase Phenol Aminoantipyrin (GPO–PAP) * Prinsip metode : penentuan trigliserida setelah pemisahan enzimatis oleh lipoprotein lipase . Uji peroksida 3.PENETAPAN KADAR TRIGLISERIDA METODE ENZIMATIK A. Uji penyabunan B. Uji ketidakjenuhan 2.

Mekanisme reaksi : Trigliserida Liprotein lipase Gliserol + Asam lemak Gliserol + ATP Gliserokinase Gliserol–3–Fosfat + ADP Gliserol–3–Fosfat + O 2 Dihidroksiaseton fosfat + H2O 2 2 H2O 2 + Aminoantipirin + 4–klorofenol Peoksidase Quinonimin + HCl + 4 H2O .

disentrifugasi 15’ kec 2000rpm Serum berada di bagian atas 2. diinkubasi 20’ 20–25 Baca tiap 2/ 5 menit (selama 30 menit) OT : absorban stabil 3. Mencari Operating Time Diambil 10 µl larutan standar + 1000 µl reagen kit. Pengambilan serum darah : 2 ml darah. Mencari panjang gelombang maksimum Idem : Diamkan sesuai OT.Langkah penetapan kadar : 1. Baca absorbansinya 450–550 nm (selang 5 nm) .

Baca absorbansinya sesuai panjang gelombang maximum Larutan Sampel Diambil 10 µl larutan standar + 1000 µl reagen kit. Baca absorbansinya sesuai panjang gelombang maximum . diinkubasi 20’ pada 20–25 Diamkan sesuai OT. diinkubasi 20’ pada 20–25 0C Diamkan sesuai OT.Larutan standar Diambil 10 µl larutan standar + 1000 µl reagen kit.

03:..3-.3 .4/-.909/.:/07..37. W $02.770.-847-840 5/ W &39:20309.34/:2 W .7.9.202.8 ./8 W #0.3.3 -08.8.5 802.3.7-.8.3 /.870.  W 3.3.8.3.3.24/.

8/.3 .74/3742/.73.W !7480/:7 %2-. .3 %97./4.809.4:.8-.2.3 997.34 .3//33.3997.9 .8. /.7  4.3997.4  2./.250  24741472  2.97:2948:1.8.73.7 .3/.2.-7:./ .3 2.9 907:8.257.73.:33 .3 8.9 7 2 90.8./.9.2.-7:.3 4.:.3:8 .8.257 .4:.//.7 4/30.3 8080..

8.9/.3.$ 3.8.202....5.8.2:2.3 907/..202.-0-.3/507:.2 .3 :39:203097.

7:.23.202.8.7 8:: 032549.  03::7.8.  !03.-0-.8/7488 807/.

 503. .3.920309.31..9.9.802.8.7:1.947/.703.3:7.3-.770.8/7488807/.::...8 .. 5748085034.

 08.3.200:.83.23.. .8.7.9.

3  8./: 33.2-/.250  2.3 !! %97.3  .8 W !7480/:7 %2-.443097.2-: ./207.W #0. #01: 8..8/03.

%07-.5.9           . 340.9   . 8.29.7.9 .2$90.3.$:2-073.8.202.9 0. $:8: !.5.:3 0/0. 0.03 8.:7.9 0.9 3.

9.!%!#%#$# % %  3.80 .9840545749035.91  &09/.397807/.80!034234. 4472097.03:.:.91 2094/032.8.:. 5028.-:3.90 /.  &503.3032.074  !485.%089/03.3  3.39573 ! !!  !73852094/0503039:.9.8.3  &50748/..8090.399.3.

809431481.80 ":34323    .808074 8.5749035.39573  4741034!048/.9     234.808074  481. 8074 %!80743.9   /748.9 ! 8074  481.0.382070.202.8 %7807/.

 /803971:.3./.2- a.7..9.5.3..7 507.389.039 /3:-..7  a 70.5.7  !03.3807:2/.2-./-.8 0../.7:9..3/.7. 752 $07:2-07.8  03.9.8   .93%20 .50309. 2/.3.

-847-... % .82:2 /02.2.  32 80.-  03.383.2039 80.3042-.3808:..32.2.3. . 2039  %.389.75.332  .-847-.

3808:.3/.7:9.5.3$.250 .2.389.3808:.039 /3:-.389.7 .32..32.7  a 70.8 5.7  a 70.389.2- a.3/.383.-847-.... 808:.7:9.2:2 .3042-.2.5. % .  .3042-.8 5.039 /3:-..2:2 .-847-.7:9.7:9.3.383.3/. 808:. % .3..2- a././..   .

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful