ASISTENSI LIPIDA

A. PENETAPAN ANGKA PENYABUNAN, ANGKA IOD DAN ANGKA ASAM B. PENETAPAN KADAR TRIGLISERIDA METODE ENZIMATIK By Warsi, S. Si.

, Apt

Lemak 6. Lipid kompleks .DASAR TEORI Penggolongan lipida. cerebrosida 3. Terpen 3. spingolipid 2. Fosfolipid 8. Asam lemak 5. sterol Penggolongan lipida. Steroid 4. Lipid sederhana : lemak/ gliserida. Lilin 7. Derivat lipid : asam lemak. gliserol. berdasarkan kemiripan Struktur : 1. Lipid gabungan : fosfolipid. lilin 2. dibagi golongan besar : 1.

Lemak dengan titik lebur tinggi : asam lemak jenuh. Dibiarkan lama: timbul rasa dan bau yang tidak enak * hidrolisis * oksidasi peroksida aldehida . 6. * Derajat ketidakjenuhan asam lemak : dengan bilangan Iodium 3. Lemak dengan atom C pendek larut dalam air. kloroform.Lemak (Trigliserida) Trigliserida : ester asam lemak dan gliserol Sifat – sifat : 1. 5. alkohol panas. Lemak hewan : padat. benzena. Larut dalam ester. Hidrolisis dengan basa : menjadi garam asam lemak dan gliserol (penyabunan). 4. lemak tumbuhan : zat cair 2. lemak cair (minyak) mengandung asam lemak tidak jenuh.

berdasarkan ada/ tidaknya ikatan rangkap.ANALISA KUALITATIF 1. Uji ketidakjenuhan : untuk mengetahui derajat ketidakjenuhan minyak/ lemak. Reaksi : ? Prosedur : 1 tetes Sampel minyak/ lemak (tabung reaksi) + 1 ml kloroform teteskan larutan brom ad kuning permanen Catat jumlah larutan brom Blanko: 1 ml kloroform + larutan Brom .

Reaksi : ? Prosedur : 1 ml sampel minyak/ lemak (tabung reaksi) + 1 ml kloroform + 2 ml asam asetat glasial + 1 tetes larutan KI 10 % kocok.2. Uji peroksida : untuk mengetahui tingkat kerusakan minyak/ lemak karena proses oksidasi/ hidrolitik. biarkan 5’ Peroksida : warna kuning–merah (pembebasan Iodium) .

B.3. 15’ Ambil 3 ml larutkan dalam air (Larut) Penyabunan sempurna Kocok kuat Busa : sabun . Uji Penyabunan : untuk mengetahui terjadinya reaksi hidrolisis oleh alkali garam asam lemak (sabun) + gliserol Reaksi : ? Prosedur : 5 ml sampel minyak/ lemak (erlenmeyer) + 10 ml KOH alkoholis 10 % Panaskan W.

* Dasar reaksi : hidrolisis asam lemak oleh basa (Rx saponifikasi) * Besarnya bilangan penyabunan tergantung pada berat molekul lemak tersebut. Makin kecil berat molekul.ANALISA KUANTITATIF ANGKA PENYABUNAN * Angka penyabunan : banyaknya mg KOH yang diperlukan untuk penyabunan sempurna 1 g lemak/ minyak. makin besar bilangan penyabunan Reaksi : ? .

5 g sampel + 25.0 ml KOH alkoholis Refluks diatas penangas air ad penyabunan sempurna 30’ Teteskan dalam tabung reaksi (air) Bening (satu fase) : penyabunan sempurna Dinginkan + PP Titrasi dengan HCl ad merah jambu Blanko : idem (tanpa sampel) .• Prosedur Timbang seksama 2.

semakin besar bilangan Iodium • Dasar reaksi : reaksi adisi • Reaksi : ? .ANGKA IOD • Angka Iod : banyaknya gram Iod yang diabsorbsi oleh 100 g lipid • Untuk mengetahui derajat ketidakjenuhan asam lemak • Semakin banyak ikatan rangkap.

Lakukan titrasi blanko.25 g sampel + 10 ml kloroform + 30 ml lar.1 N ad warna kuning hampir hilang + 2 ml lar. Iodine Hanus (lar Iodin Bromida dalam asam asetat glasial Diamkan 30’ sesekali dikocok + 10 ml lar. . kanji 1 %.• Prosedur Timbang 0. titrasi ad warna biru hampir hilang Kocok kuat. kocok kuat + Air 50 ml (telah didihkan dan didinginkan) Titrasi dg Natrium tiosulfat 0. KI 15 %. teruskan titrasi ad warna biru hilang.

Pengaruh air. enzim lipolitik/ proses pengolahan yang kurang baik. * Manfaat : mengetahui kualitas lemak/ minyak >>> Besar angka asam >>> jelek kualitasnya .ANGKA ASAM * Angka asam : jumlah mg KOH yang diperlukan untuk menetralkan asam lemak bebas yang terdapat dalam 1 g lemak/ minyak. suhu. * Dasar reaksi : hidrolisis gliserida karena pengaruh faktor 2 di atas. * Mengukur asam lemak bebas hasil hidrolisis gliserida.

1 N ad merah jambu .• Reaksi : ? • Prosedur Timbang 10–20 g sampel + 50 ml alkohol netral 95 % Refluk 10’ sambil diaduk Dinginkan + PP Titrasi dengan KOH 0.

kedelai Linoleat Minyak wijen Asam Stearat C18H36O 2 .Sumber Minyak Asam Lemak Terbanyak Kelapa sawit Kelapa Palmitat C16H32O 2 Laurat C12H24O 2 BM 258 200 Susu Oleat C18H34O 2 C18H32O 2 282 278 384 Jagung.

Uji penyabunan B. Uji ketidakjenuhan 2. Uji peroksida 3. Analisa Kuantitatif : metode Enzymatic Colorimetric Test dengan Glycerol–3–Phosphate Oxidase Phenol Aminoantipyrin (GPO–PAP) * Prinsip metode : penentuan trigliserida setelah pemisahan enzimatis oleh lipoprotein lipase . Analisa Kualitatif : 1.PENETAPAN KADAR TRIGLISERIDA METODE ENZIMATIK A.

Mekanisme reaksi : Trigliserida Liprotein lipase Gliserol + Asam lemak Gliserol + ATP Gliserokinase Gliserol–3–Fosfat + ADP Gliserol–3–Fosfat + O 2 Dihidroksiaseton fosfat + H2O 2 2 H2O 2 + Aminoantipirin + 4–klorofenol Peoksidase Quinonimin + HCl + 4 H2O .

Mencari panjang gelombang maksimum Idem : Diamkan sesuai OT. Pengambilan serum darah : 2 ml darah. Baca absorbansinya 450–550 nm (selang 5 nm) . disentrifugasi 15’ kec 2000rpm Serum berada di bagian atas 2. Mencari Operating Time Diambil 10 µl larutan standar + 1000 µl reagen kit.Langkah penetapan kadar : 1. diinkubasi 20’ 20–25 Baca tiap 2/ 5 menit (selama 30 menit) OT : absorban stabil 3.

Larutan standar Diambil 10 µl larutan standar + 1000 µl reagen kit. diinkubasi 20’ pada 20–25 0C Diamkan sesuai OT. Baca absorbansinya sesuai panjang gelombang maximum . diinkubasi 20’ pada 20–25 Diamkan sesuai OT. Baca absorbansinya sesuai panjang gelombang maximum Larutan Sampel Diambil 10 µl larutan standar + 1000 µl reagen kit.

9.-847-840 5/ W &39:20309./8 W #0.:/07.3 .7.3.870.909/.3.34/:2 W .37.202.24/.8.3-.  W 3.770.3 -08..3. W $02.8 .5 802.3 /.4/-.03:.8.7-.8.3.3..

3 %97.4  2.34 .7 .9 .3997. ..W !7480/:7 %2-././4.2.3997.3:8 .-7:.74/3742/.73.8-.257.3/.3 997.809.3 8.8.9.2. /.97:2948:1.3 2.3 .:33 .-7:.7 4/30.73././ .3 4.9 907:8.//.:.73.8.7  4.3//33.4:.8.9 7 2 90.3 8080.257 .4:.8.2.250  24741472  2.8/.

8.-0-..202.8.$ 3.202.9/.2 ..3.3/507:..3 :39:203097.5.3 907/.8..2:2.

8.8.7:.-0-.  !03.202.  03::7.7 8:: 032549.8/7488 807/.23.

5748085034.703.8/7488807/..947/.7:1. ..8 .3-.3.802.920309.9.31.::.. 503.8.3:7.9.770..

23.7..83.3.9. . 08.8.200:.

2-: . #01: 8.3  8.8 W !7480/:7 %2-.W #0.443097..2-/.3  .250  2.3 !! %97./207.8/03./: 33.

3.9 . 340.%07-.9 0. 8.7.5.5.03 8. $:8: !.202.9           .9 3.:7.9   .29.8. 0.9 0.2$90.:3 0/0.$:2-073.

8.3  3.397807/.91  &09/.80!034234.!%!#%#$# % %  3..3032.%089/03.90 /.39573 ! !!  !73852094/0503039:.:.3.8090.:.8.03:.  &503.9.399.80 . 4472097.074  !485.-:3. 5028.91 2094/032.3  &50748/.9840545749035.9.

9     234.5749035.8 %7807/.202.808074 8. 8074 %!80743.382070.9 ! 8074  481.809431481.0.9   /748.808074  481.80 ":34323    .39573  4741034!048/.

039 /3:-.3807:2/.2-.5. 752 $07:2-07.2- a. /803971:../.7.7 507./.5.50309. 2/.7  !03...8 0.3.3.8   .9.3/.93%20 ..7:9.7.8  03.7  a 70.3.389..9./-.

.32.-  03.332  .3.2.-847-.2039 80.3042-.75..  32 80.3808:. % . .82:2 /02..383.-847-. 2039  %.2.389.

  .3..7:9.7  a 70..2.-847-.039 /3:-.039 /3:-. 808:.3/.2- a.32.3/.3$.8 5.7 .8 5.250 .383./.32.2:2 .   .5.7:9.3042-.2:2 .3808:.389.7:9... % ..383..3808:. % .7:9..3/.389.3.2.5.389. 808:.3042-.7  a 70.-847-./.2- a.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful