Espectroscopa

UV -VISIBLE

QFB Pedro Ayala MC

Antecedentes

Los Mtodos y/o Tcnicas que emplean instrumentos , analizan las muestras con el proposito de conocer alguna caracterstica fsica o qumica del analito y esto permite caracterizarlo, identificarlo o cuantificarlo. El equipo genera : A)Seal o Respuesta B)Tiempo de respuesta C)Resolucin (purificacin)

Cuando el Analito es sometido a un estudio bajo un instrumento, existen dos formas de generar una seal. Estas son : A) midiendo directamente la actividad del analito B) con un estimulo y midendo su respuesta

A) Actividad inica
(Muestra)

Electrodo (VOLTAJE)

B) Luz

(Muestra)

Fototubo (CORRIENTE)

Componentes bsicos de un instrumento analtico

Generador de seal Seal Elctrica , luminosa o Mecnica Medidor o escala

Seal De Salida

Transductor De entrada Seal Analtica

Transformador de seales

Transductor De salida

Registrador
12.301

EJEMPLO

Unidad Digital

Luz Mta

Luz

Electricidad

Fuente

Detector

Dispositivo de lectura

Componentes bsicos de un instrumento analtico

Generador de seal

Transductor De entrada

1.Dispositivos Analgicos Impresora luminosa 1. Amplificador 1. Fuente alfa numrica 2. Medidores (A/D) 2. Convertidor Estimulo elctrico 1. Electrodo 3. Monitor 3. Filtro 4.2. Fototubo Osciloscopio 5. 4. Integrador Registrador 3. Termopar

Transformador de seales

Transductor De salida

Ejemplos de Instrumentos Analticos

Balanza

pHmetro

Microondas

Refractmetro

Espectrofotmetro

GC

HPLC

AA

IR

HRMN

Turbidimetro

Fluormetro

ESPECTROFOTOMETRO

Radiacin electromagntica

l (nm) Longitud de onda

n
Ciclo Frecuencia (Ciclos/s)
(Hz)

C= l n

E=hn

Radiacin electromagntica

l = 450 nm C/l = n C = 3 X1017 nm/s n = 6.6 X 1014 Hz h = 6.62 X10-27 ergs-s E = 4.36 X10-12 ergs C= l n

E=hn

REFRACCIN

Radiacin monocromtica
Prisma Luz blanca Radiacin monocromtica

Refraccin

Espectro visible
Color l (nm)
630 780 590 630 560 590 490 560 450 490 380 - 450

REFRACCIN

Rayos g

Rayos X

Ultravioleta

Visible Infrarojo

Microondas T V

Radio

Longitud de onda (l)

Fraccin VIS del Espectro EM

Espectrofotmetro

Lmpara

computadora

Detector Celda

Selector
Payala@campus.cob.itesm.mx

Espectrofotometro

Lampara

computadora

Detector Celda

Selector
Payala@campus.cob.itesm.mx

Espectrofotometro

Lampara

computadora

Detector Celda

Selector
Payala@campus.cob.itesm.mx

Espectrofotmetro (doble haz)

Lmpara

Selector

Celda de muestra Detector Celda de referencia

I = Intensidad A= Absorbancia T= transmitancia

IR

IM

Absorbancia y Transmitancia A = Log I /Io A= computadora

log T A= - log (%T/100)

Log IR/IM= A

Absorbancia y Transmitancia

Io
Lmpara Selector Celda de muestra

Absorbancia

Transmitancia

A = Log I o/ I

T = I / Io

Absorbancia y transmitancia

A = Log 1/T
Absorbancia y transmitancia

A = - Log T

Absorbancia

= - Log (%T/100)
transmitancia

%T = (100) (AntiLog A)
Ejercicio
ABSORBANCIA
0.3

%T = 56 A=? 0.251

1 0

%TRANSMITANCIA

50

100

Absorbancia

Io
Lmpara Selector

I
Celda de muestra

1)

A= - log T

2)

A= ecl
Ley de Beer

Absorbancia

En funcin de la naturaleza y de la concentracin de la muestra

Ley de Lambert- Beer A= Absorbancia e =coeficiente de extincin C= concentracin molar l= longitud de celda (cm)

A= ecl

POR EJEMPLO. Cul es la A de una substancia al 2.5 X 10-5 M , con un e = 7,500 M-1cm-1 ?. A= 0.18

Curva de calibracin
A b s o r b a n c i a

Concentracin

ABSORBANCIA?
Muestra Problema

Problema

Patrn

Conc. Prob = (A Prob/A Patrn)(Conc. Patrn)

A Problema = 0.458 A Patrn = 0.765 Conc. Patrn= 145mg% Conc. Problema= ?
Conc. Problema = (0.458/0.765)(145mg%) Conc. Problema= 86.8

mg%

Espectro de Absorcin
A b s o r b a n c i a
25 mM

5 mM

l Max
Longitud de onda (nm)

Azul de metileno
A b s o r b a n c i a

l Max

Longitud de onda (nm)

660 nm

En general un compuesto puede absorber en la regin VIS si contiene al menos 5 grupos cromoforos conjugados y grupos auxocrmicos.

CONFIABILIDAD
Debe existir: 1. Exactitud 2. Precisin 3. Sensibilidad (Lmite de deteccin)

4. Especificidad

Calibracin Exactitud Incertidumbre

Fin