BAB II ME TODE P R A KTIK U M 2.1 Waktu dan Tempat Praktikum dilaksanakan pada pukul 10.30-13.

00 WITA, hari selasa 12 Oktober 2010. Bertempat di Laboratorium Mikrobiologi Lab. Dasar Fakultas MIPA UNLAM, Banjarbaru. 2.2 Alat dan Bahan Alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung reaksi steril, cawan petri, v ortex mixer, efendorf pipet, pipet volumetrik, lampu spiritus, kertas label, alkohol 70%, spiritus, alumunium foil, kapas dan karet. Bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah media nutrient agar, media potato dextrose agar, aquades, sumber bakteri (air sungai, air kemasan, tanah bawah pohon dan tanah sampah). 2.3 Prosedur Kerja 2.3.1 Sampel Air (Isolasi dan Pemurnian Bakteri) Prosedur kerjanya meliputi : 1. Diambilnya 1 ml sampel air dengan efendorf pipet. 2. Diencerkan sampai 10 -6 (khusus sampel air kemasan pengenceran dilakukan samapi 10 -3, dengan mulut tabung reaksi yang dipanaskan terlebih dahulu dengan api bunsen). 3. Tabung reaksi kemudian dimasukkan pada v ortex mixer. 4. Diambil sampel sebanyak 1 ml dari pengenceran 10 - 4 dengan sistem doplo. 5. Dipanaskan cawan petri sekelilingnya dengan api bunsen. 6. Dimasukkan sampel dan ditambahkan media sampai memenuhi dasar cawan. 7. Diputar cawan petri searah angka delapan. 8. Direkatkan cawan petri dengan plastik penutup disekeliling cawan. 9. Dilakukan kembali pengenceran 10 -5 dan 10 -6. 10. Diinkubasi selama 2 x 24 jam. 11. Dari koloni yang terpisahkan dimurnikan secara goresan, selanjutnya dipindahkan ke media agar miring. 2.3.2 Sampel Tanah (Isolasi dan Pemurnian Jamur) Prosedur kerjanya meliputi : 1. Dibuatnya media P otato Dextrose Agar, yang mana sebagian dimasukkan ke dalam tabung reaksi @ 5 ml untuk media agar miring, sedangkan sisanya dimasukkan dalam labu erlenmeyer. 2. Disterilkan media pada suhu 121 0C selama 15 menit. 3. Dilanjutkan dengan serangkaian pengenceran sampel tanah dari 10 - 1 - 10 - 6 . 4. Dari pengenceran tertinggi dimasukkan 1 ml suspensi fungi ke dalam cawan petri steril, diratakan pada dasar cawan dengan digoyangkan. 5. Cawan-cawan yang berisi suspensi dituangkan dengan 10 -15 ml media PDA dengan suhu 45 0C, digoyangkan dengan dibentuk angka delapan dan dibiarkan memadat. 6. Diinkubasi terbalik pada suhu 28 0C selama 2 x 24 jam. 7. Dari koloni yang terpisah dimurnikan secara goresan, selanjutnya dipindahkan ke media agar miring.