Tujuan dari studi ini adalah untuk menstabilkan pigmen kurkumin makanan oleh kompleksasi dengan ion divalen

seperti (Zn2 +, Cu2 +, Mg2 +, SE2 +), dalam "media hijau" dan mengevaluasi stabilitas in vitro dibandingkan dengan kurkumin sendirian. Kompleks kurkumin disusun oleh campuran mekanis kurkumin dan garam sulfat dari masing-masing logam (logam: 1/1mol kurkumin) menjadi tidak konvensional dan gliserol tidak beracun / pelarut air. Dua stoikiometri kompleks yang diperoleh, 1: 1 dan 1: 2 (logam / curcumin), masing-masing. Pada evaluasi dalam stabilitas in vitro, semua kompleks ditemukan untuk memberikan stabilitas yang lebih tinggi dari kurkumin saja. 1. Pengantar pigmen Alam adalah atribut kualitas penting dari makanan, dan memainkan peran penting dalam penerimaan sensor dan konsumen produk [1-3]. Curcumin, terjadi secara alami polifenolik phytoconstituent, terisolasi dari rimpang (Gambar 1) dari Curcuma longa Linn, adalah penting pewarna alami yang diizinkan digunakan dalam makanan, bergizi, dan farmasi preparat antara lain [4 8]. Kurkumin secara kimiawi (1E, 6E) -1,7-bis (4-hydroxy-3metoksifenil) hepta-1 ,6-dienne-3 ,5-dion. Memiliki pKa1, pKa2, dan pKa3 nilai 7,8, 8,5, dan 9.0, masing-masing, untuk tiga proton asam [9]. Hal ini tidak larut dalam air di bawah asam atau kondisi netral tetapi larut dalam kondisi alkali. Kurkumin tidak stabil mengalami degradasi hidrolitik cepat dalam kondisi netral atau alkali untuk feruloyl metana dan asam ferulat [10]. Karena tidak larut dalam medium air dan memiliki stabilitas yang buruk terhadap oksidasi, cahaya, alkalinitas, enzim dan panas, tidak bisa benar-benar digunakan secara luas dalam makanan dan industri pengolahan farmasi [11, 12]. Meskipun, pemaparan dari pigmen kurkumin basa makanan atau bahan mungkin sulit untuk menghindari. Untuk alasan ini, harus dilindungi curcumin dalam bentuk tertentu dari fisik dan kimia kerusakan sebelum aplikasi industri.

Kompleksasi kurkumin dengan logam transisi telah menarik banyak bunga selama beberapa tahun terakhir sebagai salah satu persyaratan yang berguna untuk pengobatan penyakit Alzheimer [13, 14] dan aktivitas antioksidan in vitro [15]. Selain itu, beberapa metallocomplexes kurkumin memiliki telah disintesis dikarakterisasi dan dievaluasi untuk berbagai kegiatan biologis [15-19]. Namun, semua ini metallocomplexes kurkumin disusun berdasarkan relatif tinggi suhu sintesis kondisi (refluks pada 100 C di bawah gas nitrogen selama 3 jam) dengan adanya pelarut organik

seperti etanol, metanol, atau aseton. Lainnya studi terbaru [20, 21] menyarankan penyusunan kurkumin-fosfolipid kompleks dalam kondisi sintesis halus (suhu tidak melebihi 60 C selama 2 jam) untuk hepatoprotektif aplikasi. Namun, pelarut organik seperti diklorometana dan heksana tidak dikecualikan dari persiapan eksperimental kompleks kurkumin-fosfolipid. Salah satu kepentingan kelompok kami adalah untuk mengembangkan baru "hijau rute "untuk melindungi dan menstabilkan biomolekul alam dengan menggunakan gliserol kimia untuk makanan, pertanian farmasi,, dan kosmetik aplikasi. Dalam tulisan ini, kami menyelidiki suatu kompleksasi kurkumin dengan ion divalen tersebut (Cu2 Zn2 +, +, Mg2 +, SE2 +) dengan campuran mekanis, tanpa konvensional pelarut organik. Penyusunan metallocomplexes. dilakukan di hadapan air / gliserol pelarut pada
25 C. Memperoleh kompleks ditandai oleh IR dan UV metode spektroskopi. Mendukung bukti yang diperoleh stoikiometri telah diusulkan dari TG-DTA termal analisis. 2. Bagian Eksperimental 2.1.Materials. Curcumin (95%), gliserol (99%), sulfat seng (ZnSO4 7H2O, 22%), Tembaga sulfat (CuSO4 5H2O ; 25%), Magnesium sulfat (MgSO4 7H2O ; 49,1%), Natrium Selenite (Na2SeO3, 45%), yang diperoleh dari Laboratorium Phod'e S.A.S. (Albi, Perancis). 2.2. Persiapan M2 Kompleks +-Kurkumin. Seng sulfat (ZnSO4 7H2O, 22%) adalah mekanis dicampur dalam mortar dengan kurkumin (M2 +: Kurkumin 1 / 1 mol) sampai homogen campuran bubuk diperoleh. Kemudian gliserol / air (1: 1 v / v) solusi telah ditambahkan ke dalam campuran diikuti oleh mekanik gemetar di 25 C sampai kombinasi pucat diperoleh. Kemudian, pucat produk dikeringkan pada suhu kamar pada 50 C sampai penguapan air. Free gliserol dihapus dengan mencuci dengan air suling. Serbuk kompleks kurkumin Zn2 +-adalah diperoleh. Kompleks lainnya berasal dari ion sulfat lain sumber dibuat dengan metode yang sama. 2.3. Assay. Isi kurkumin dalam kompleks adalah ditentukan secara spektrofotometri. 5mg dari kompleks dilarutkan dalam 10 ml DMSO (dimetilsulfoksida) dan diaduk selama 1 jam pada pengaduk magnetik. Konsentrasi kurkumin dalam kompleks ditentukan dengan mengukur absorbansi larutan sehingga diperoleh pada 435 nm. 2.4. FT-IR Spectroscopy. FT-IR spektroskopi kurkumin dan Zn-kurkumin kompleks dilakukan pada fourriertransformed spektrofotometer inframerah (Bruker VEKTOR

22) dilengkapi dengan detektor DTGS resolusi penyihir adalah tetap untuk 4 cm-1. Pelet sampel (10 mg) dan kalium bromida

(200 mg) telah disusun oleh menekan bubuk di 5 bar selama 5 menit di tekan KBr dan spektrum itu scan pada kisaran bilangan gelombang 4000-850 cm-1. 2.5. Spektroskopi UV-Visible. HP 8452 dioda array UV / spektrofotometer tampak digunakan untuk merekam spektrum kurkumin dan kompleks kurkumin dalam DMSO pelarut. Spektrum ini dipindai pada kisaran bilangan gelombang 350-600 nm. 2.6. Analisis Termogravimetri. Termogram kurkumin kompleks dicatat menggunakan diferensial scanning kalorimeter (Seiko SSC 5200H). Sampel (20-40 mg) disegel di platinum crimp panci, dan dipanaskan di kecepatan 10 C / menit dari 25 C sampai 600 C dalam atmosfir udara. 2.7. Dalam Stabilitas Vitro. Dalam vitro kinetika degradasi kurkumin dari semua kompleks kurkumin diikuti spektrofotometri antara 350 dan 600 nm. 10mg kurkumin kompleks diinkubasi pada suhu 37 C dalam 100 ml buffer solusi pada berbagai pH 2,0-10,0. Kinetis reaksi degradasi kurkumin dan kompleks tersebut adalah diikuti antara 0-120 menit dan 0-24 jam, masing-masing.
3. Hasil dan Diskusi Metode penyusunan kompleks kurkumin adalah ditemukan direproduksi menghasilkan 98% produk. Pada pengujian kompleks, ditemukan mengandung tentang 45%, 60%, 61%, dan 50% dari kurkumin untuk Mg-kurkumin, Cu-kurkumin, Zn-crucumin, dan kompleks Se-kurkumin, masing. 3.1. FT-IR Karakterisasi. Gambar 2 membandingkan spektrum inframerah kurkumin dan semua kompleks kurkumin. Spektrum kurkumin dapat diberikan sebagai berikut: (i) Dua pita lebar di 3600 dan 3560 cm-1 dikaitkan untuk getaran kelompok bebas hidroksil-dari fenol (Ar-OH) dan kelompok alkohol (R-OH), masing-masing, (ii) Dua band pada 1882 dan 1857 cm-1 dihubungkan dengan getaran ikatan C-H dari kelompok alkena (RCH = CH2), (iii) Sebuah band intens di 1725 cm-1 disebabkan oleh getaran ikatan karbonil (C = O) disertai oleh sebuah bahu kecil di 1762-cm 1 karena Keto-enol tautomerisme senyawa kurkumin, (iv) Pohon band pada 1406, 1332, 1320 cm-1 berasal modus getaran perpanjangan C-O dari alkohol dan fenol kelompok. Dibandingkan dengan spektrum referensi kurkumin, semua kompleks menunjukkan penurunan yang besar dalam intensitas (C = O) band karbonil, disertai pergeseran ( = 53-75 cm-1) dengan nilai-nilai gelombang tinggi (Tabel 1). Selain itu,

bersih penurunan intensitas hidroksil (OH) gratis kelompok kurkumin diamati dalam kasus-kurkumin Mg dan Cu-kurkumin kompleks, tapi benar-benar menghilang untuk Securcumin dan Zn-kurkumin kompleks. Kedua atas fenomena menunjukkan bahwa interaksi telah terjadi beberapa pada lokasi tersebut dan keterlibatannya dalam kompleksasi oleh baru menciptakan hubungan antara logam dan senyawa kurkumin.

3.2. UV-Visible Karakterisasi. Kurkumin larut dalam sebagian besar pelarut organik, lipid, dan solusi misel, dan tidak larut dalam larutan netral. The kompleks kurkumin tidak larut dalam pelarut organik seperti metanol dan asetonitril, dan hanya larut dalam DMSO, dan netral dan negatif dibebankan solusi misel. Hal ini juga larut dalam lipid dan membran. Sebuah spektrum UV-terlihat kompleks dalam DMSO menunjukkan serapan pada 435nm maksimum ditetapkan ke band * kurkumin (Gambar 3). Dibandingkan dengan curcumin, kompleks dalam DMSO menunjukkan maksimum penyerapan digeser oleh (1-8 nm), yang bervariasi antara (427 434 nm), dan bahu di (410-413 nm) dan (448 451 nm) yang dikaitkan dengan logam kurkumin (M2 +) biaya transfer, formed.We kompleks spesifik percaya bahwa variasi puncak penyerapan kurkumin dan bahu penampakan di kompleks yang berbeda tergantung pada sifat logam (M2 +) implikasi ion. 3.3. Analisis Termogravimetri. Mendukung bukti struktur kompleks yang disarankan oleh analisis termal. The TG-DTA pengukuran dari semua kompleks dilakukan di udara di atas rentang temperatur 25-600 C (Gambar 4). 3.3.1. Kurkumin. Itu termal stabil sampai dengan 160 C. Di atas suhu ini kita mengamati puncak endoterm pada 174 C (penurunan berat badan: ditemukan 3,3%, calcd 3,1%.) terkait dengan deshydroxylation kelompok OH oleh penghapusan dua air molekul. Setelah 400 kurkumin C benar-benar terurai. 3.3.2. Zn-Kurkumin dan Kompleks Mg-Kurkumin. Mereka termal stabil sampai dengan 65 C. Di atas yang satu ini suhu molekul air kristal dihilangkan dalam satu langkah di 93 C dan 102 C, masing-masing, (penurunan berat badan: ditemukan 3,2%, calcd. 3,0%). Keberadaan sebuah kompleks anhidrat [Mg (L) (H2O)] dan [Zn (L) (H2O)] dapat terlihat dari dataran tinggi antara 90 dan 150 C. Kemudian, berat sampel dua kompleks menurun hingga 205 C yang mungkin berhubungan dengan penghapusan air terkoordinasi molekul, yang mengarah pada pembentukan [Mg (L)] dan [Zn (L)] spesies (penurunan berat badan: ditemukan 11,2%, 11,4% calcd.). The menengah stabil dalam interval 160-220 C. Setelah

250 C kita amati dekomposisi kimia kurkumin tanpa pembentukan intermediet termal stabil sampai 600 C. Pada ZnO suhu dan oksida MgO dapat terbentuk. 3.3.3. Cu-Kurkumin Kompleks. Itu termal stabil sampai 60 C. Di atas ini salah satu suhu molekul kristal air dieliminasi dalam dua langkah-langkah di 88 C dan 122 C (berat rugi: ditemukan 2,6% dan 7,4%, calcd. 3,0% dan 7,2%, Resp.). The adanya suatu [(L) Cu (H2O)] anhydrous kompleks dapat jelas. Kemudian, berat sampel kompleks menurun hingga untuk 185 C yang mungkin berhubungan dengan penghapusan dari molekul air yang terkoordinasi, yang menyebabkan pembentukan dari [Cu (L)] specie (penurunan berat badan: ditemukan 11,0%, 11,2% calcd.). Pada 237 C kita amati puncak endoterm kecil yang dapat dikaitkan dengan penghapusan Ligan terkoordinasi. Dekomposisi kimia kurkumin antara 350-500 C diperoleh. Sebuah produk yang stabil dekomposisi termal ada setelah 500 C. Ini mungkin terkait dengan pembentukan Oksida CuO. 3.3.4. Se-Kurkumin Kompleks. Itu termal stabil sampai 150 C. Satu molekul air kristal dihilangkan dalam kisaran 80-150 C. Pada kisaran 152-190 C (penurunan berat badan: ditemukan 1,78%, calcd. 1,80%) kita mengamati puncak endoterm berpusat pada 165 C yang dapat berhubungan dengan deshydroxylation yang kelompok OH dua ligan kurkumin terhubung ke satu atom selenium oleh penghapusan empat molekul air

(menyimpulkan dengan berat badan yang diperoleh). Berikutnya dekomposisi di 487 C adalah eksotermik yang dapat berhubungan dengan degradasi senyawa ligan kurkumin total. Selenium oksida (SEO) dapat dibentuk setelah 550 C. Termogram kompleks kurkumin didapatkan pada Gambar 4. Analisis termal membuktikan bahwa dua stoikiometri kompleks diperoleh (Gambar 5), 1: 1 dan 1: 2 (logam / ion), masing-masing. Perbedaan koordinasi
geometri yang mungkin disebabkan oleh berbagai fisikokimia properti dari masing-masing ion logam yang terlibat dalam reaksi kompleksasi, seperti elektro-negatif, sinar nuklir, polaritas, kelarutan, dan elektronik konfigurasi. Namun, studi sebelumnya [16, 17] menunjukkan bahwa faktor lain seperti, rasio molar reaktan, sifat pelarut yang digunakan, atau sumber kimia logam ion, yang terlibat dalam geometri koordinasi yang dihasilkan kompleks.

3.4. Stabilitas Evaluasi 3.4.1. Kurkumin. Telah menunjukkan bahwa kurkumin memiliki miskin cahaya stabilitas. Tentang penurunan 5% pada absorbansi karena kurkumin telah diukur selama waktu untuk

khas sampel persiapan saat jelas daripada ambar gelas digunakan [22]. Kurkumin terurai ketika terkena sinar matahari, baik dalam ekstrak etanol dan metanol dan sebagai vanili, padat, asam vanilat, aldehida ferulat dan Asam ferulat telah diidentifikasi sebagai produk degradasi [23]. Ketika curcumin telah ditambahkan ke dalam 0,1 M buffer fosfat, pH = 7 (kondisi fisiologis in vitro), mayoritas kurkumin adalah terdegradasi setelah 1 jam. Serangkaian nilai pH from2 sampai 10 dalam larutan buffer yang diuji untuk degradasi ini. Gambar 6 menunjukkan kinetika kurkumin terdegradasi pada berbagai nilai pH, 37 C, menggunakan HP 8452 UV dioda / terlihat spektrofotometer. Entitas persen dari sisa kurkumin konsentrasi terhadap waktu yang cukup linier pada semua pH nilai-nilai diuji, menunjukkan degradasi yang diikuti jelas orde pertama kinetika pada suhu 37 C. Dalam karya ini, kami menemukan bahwa lebih dari 90% dari curcumin cepat membusuk dalam sistem buffer pada neutralbasic kondisi pH. Stabilitas meningkat dari kurkumin dalam kondisi pH asam dapat disumbangkan oleh konjugasi diena struktur. Namun, ketika pH disesuaikan kondisi netral-dasar, proton dihapus dari kelompok fenolik, yang mengarah ke kehancuran struktur ini. 3.4.2. Kurkumin Complex. Kinetika demetalation dari kurkumin kompleks dilakukan di berbagai buffer pH. Kompleks terurai melalui reaksi umum xMLn (total) + Buffer solusi (x - 1) M2 + + n (x - 1) L (terdegradasi) + yMLn (residu), (1) mana terdegradasi kurkumin (L (rusak)) entitas tidak diukur spektrofotometri. Dalam media asam, kompleks terurai melalui ML (total) + 2H + - M2 + + H2L (terdegradasi), (2) di mana M = Logam ion dan L = Ligan kurkumin =. Ditemukan bahwa semua kompleks sangat stabil di dimurnikan air (pH = 6,5) sampai dengan 30 jam pada suhu 37 C. Semua kompleks cepat membusuk pada asam pH 2 (Gambar 7) dan disosiasi kompleks menurun pada lebih tinggi (dasar) pH10.0 (data tidak ditampilkan), menunjukkan bahwa stabilitas kompleks tergantung pada konsentrasi proton. Seperti disajikan pada Gambar 7, pemisahan kompleks adalah dalam kesetimbangan oleh degradasi 50% dalam buffer pH 7,0. The disosiasi ditemukan menjadi 90% dalam buffer asam (pH 2). Semua membusuk kompleks mencapai kesetimbangan sebuah konstanta tingkat setelah 13 jam dalam buffer pH 2,0 dan 7,0. Namun, stabilitas dari kompleks dibandingkan dengan

kurkumin saja, untuk interval waktu yang sama, jauh lebih tinggi. Sebagai indikasi, di buffer pH 7,0, kurkumin benar-benar terdegradasi setelah 1 jam, sedangkan pada kondisi yang sama; kurang dari 5% dari kompleks adalah terdegradasi (Gambar 8). Oleh karena itu, stabilitas kurkumin pada pH 7 telah dikalikan dengan faktor dari 20 setelah kompleksasi dengan ion logam.
4. Kesimpulan Untuk pertama kalinya, kurkumin kompleks dengan ion divalen berhasil dibuat "media hijau" gliserol / air pelarut. Kompleks yang ditandai dengan spektroskopi (IR, UV) dan analisis termogravimetri. Mereka fisikokimia stabilitas dievaluasi "in vitro," di mana kondisi dekat dengan yang fisiologis. Dalam FT-IR, logam-kurkumin link digarisbawahi oleh penurunan band karbonil (CO) intensitas kurkumin dibarengi dengan pergeseran (70 nm) ke tinggi gelombang nomor. Linkage ini juga dikonfirmasi oleh UV analisis di mana biaya transfer antara kurkumin dan logam (kurkumin M2 +) yang diamati. Struktur Pendukung kompleks disintesis disarankan oleh analisis termal yang menunjukkan dua stoikiometri yang berbeda (1: 1 dan 1: 2 (ion / curcumin)). Memang, kita sebelum memeriksa struktur masing-masing memiliki berbeda sifat fisikokimia seperti konduktivitas suatu, polaritas, elektro-negatif, ukuran molekul, dan tercatat dan pelepasan senyawa aktif (kurkumin), yang tidak tanpa berpengaruh pada aplikasi biologi.

Selain itu, koneksi dibuat antara molekul didasarkan pada link elektrostatik antara kurkumin dan oligoelements, yang reversibel di bidang tindakan, untuk Misalnya, dalam saluran pedesaan. Ini link fisik telah menunjukkan dari "in vitro" studi yang mereka mampu melindungi kurkumin terhadap degradasi kimia di media netral dan dasar untuk lama jangka waktu (30 jam), yang memberikan banyak harapan untuk perusahaan industri aplikasi. Di sisi lain, kami percaya bahwa kompleks kurkumin sintesis dalam pelarut yang tidak konvensional dan tidak beracun, untuk Misalnya, gliserol dan turunannya (ester lemak gliserol) membuka jalan baru untuk stabilisasi bahan aktif dalam makanan dan bidang farmasi sangat kompleks dapat dibentuk "in situ" di dalam formulasi produk kesehatan tanpa kebutuhan isolasi pelarut. Selain, gliserol dan perusahaan derivatif dapat memainkan peran yang baik dalam solubilisasi dan difusi molekul organik yang larut atau kurang larut dalam air tanpa forgotting yang lainnya konvensional peran yang datang dalam banyak aplikasi.

Penghargaan atau sambutan Para penulis mengucapkan terima kasih yang tulus mereka ke pusat CRMP (Conseil R'egional de la r'egion Midi-Pyr'en'ees DAERRECH / 08005118) untuk dukungan keuangan untuk pekerjaan ini.