FLUJO
Manuel Oviedo Martínez
Hematología
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UABC
Consiste en una placa gruesa de cristal en
forma de porta, cuya porción central está
dividida en tres bandas perpendiculares al
eje longitudinal de la cámara.
De ellas, las dos laterales se hallan
FSC y SSC)
emite fluorescencia (parámetros FL1.
FL2. FL3)(1).
Fase pre-citometría: preparación de los
reactivos, preparación de las células,
diseño del protocolo y coloración de las
células con los reactivos fluorescentes.
Fase de citometría de flujo : involucra
el procesamiento de las células
marcadas y la recolección de los datos
para cada una de las medidas
(parámetros) realizados en cada célula
individual.
Fase de análisis: análisis de los datos
recolectados
La mezcla de células
teñidas con diferentes
fluorocromos es
forzada a pasar a
través de una aguja
creando una delgada
fila de líquido que
contiene las células.
A medida que cada
célula pasa en frente
del láser, desvía el
rayo incidente y las
moléculas teñidas
unidas a la célula van a
ser excitadas y emiten
Tubos fotomultiplicadores detectan
tanto la luz desviada y las emisiones
fluorescentes, la información es
digitalizada y procesada por el
computador.
Los resultados son presentados a
almacenamiento
Temperatura con gran
exactitud
no están graduadas y
exactas
Es más exacta la
enjuagárseles
con el líquido de
dilución
Azul de Cresilo Brillante
Solución fisiológica al 0.5% para tinción de reticulocitos, la substancia
granulo filamentosa de éstos se tiñe de azul negro.
Presentación por 100 ml.
Reactivo de Turk
Solución de violeta de genciana ácido acético, lista para su uso.
Para conteo de leucocitos en Cámara de Neubauer.
Thrombo - Count
Solución de oxalato de potasio con cloruro de mercurio,
Para conteo directo de trombocitos.
Presentación por 50 ml.
Reactivo de Hayem´s
Solución de cloruro de mercurio isotónica para conteo en eritrocitos
en la cámara.
El ácido acético contenido en la solución de
Türk hemoliza los eritrocitos y el colorante
contenido tiñe los leucocitos.
Llenado de la pipeta
Aspirar sangre en una pipeta de leucocitos
La dilución es 1:10.
También es posible una dilución de 1: 20