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Exames Complementares em Dermatologia

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Corpsculos de Henderson-Paterson (molusco contagioso)

TCNICAS IMUNOLGICAS PARA A PESQUISA DE ANTGENOS VIRAIS. Alguns testes podem ser usados para a pesquisa de antgenos virais, como por exemplo testes usando anticorpos fluorescentes ou anticorpos monoclonais (ver Imunofluorescncia anteriormente neste captulo).

EXAMES VIROLGICOS NO DIAGNSTICO DE DOENAS VIRAIS


Microscpio ptico 400

Fig. 5.20 Molusco contagioso. Exame citolgico.

que podem ser nucleares ou citoplasmticos (citomegalovrus e poxvrus), clulas gigantes multinucleadas (herpes simplex e varicela-zster), coilcitos e degenerao balonizante (papilomavrus humano). Vrus corados com anticorpos fluorescentes no interior de clulas infectadas (imunofluorescncia direta) podem ser visualizados na microscopia ptica com luz UV. J a microscopia eletrnica permite a observao da morfologia e do tamanho das partculas virais, que podem ser, portanto, estudadas em detalhe, e assim permitir muitas vezes o diagnstico. CULTURA. A identificao dos vrus pode ser feita por meios de cultura contendo clulas vivas, j que a replicao dos vrus necessita das mesmas para a sua replicao. Um determinado efeito citoptico freqentemente produzido nestas culturas, o que possibilita uma identificao etiolgica. Outras formas para se identificar os vrus nas culturas so hemadsoro (feita atravs da anexao de eritrcitos superfcie das clulas infectadas pelo vrus), interferncia (feita por um segundo vrus na formao do efeito citoptico) e a mensurao do pH (constatado atravs da diminuio da produo de cido realizada pelas clulas infectadas que esto morrendo). Vrios tipos de testes que utilizam anticorpos conhecidos podem ser empregados para se fazer a deteco definitiva do vrus em cultura celular. Os principais exemplos so fixao de complemento, inibio da hemaglutinao e neutralizao do efeito citoptico. SOROLOGIA. Infeces podem ser diagnosticadas por meio de um aumento no ttulo de anticorpo. Durante a fase aguda de uma infeco viral, obtida uma amostra de sangue para sorologia, e uma segunda amostra obtida durante a fase de convalescncia (10-14 dias aps). Se houver um aumento de pelo menos 4 vezes do ttulo de anticorpo srico na segunda amostra, considera-se que o paciente est infectado. Outra maneira de se pesquisar infeco atravs da pesquisa de IgM em uma nica amostra de sangue. TCNICAS MOLECULARES PARA A PESQUISA DE MATERIAL GENTICO VIRAL. Mtodos como a PCR e a hibridizao podem ser usados para a deteco de cidos nuclicos virais (ver mais adiante neste captulo).

As leses cutneas causadas por vrus podem ser exclusivas do tegumento ou podem representar manifestao cutnea de uma infeco sistmica. Os principais vrus de interesse em dermatologia e os mtodos virolgicos para diagnosticlos sero discutidos a seguir. Papilomavrus humano: o diagnstico das verrugas , essencialmente, feito em bases clnicas. No entanto, a confirmao laboratorial pode ser necessria em leses atpicas, subclnicas e displsicas. Imunocitoqumica e imuno-histoqumica usando anticorpos podem ser utilizadas. Outros mtodos disponveis so PCR, exame microscpico de amostra de tecido (histopatologia), microscopia eletrnica e hibridizao em amostras de tecido ou in situ. Herpes simplex vrus tipos 1 e 2: o mtodo virolgico mais importante o isolamento do vrus em cultura celular. Entre 24 e 72 h um efeito citoptico tpico pode ser visualizado e o vrus pode ser identificado pelo uso do mtodo ELISA para deteco de glicoprotenas virais especficas, corando-se as clulas infectadas com anticorpo fluorescente, ou por imunoperoxidase. J o teste de Tzanck serve para um diagnstico rpido. O diagnstico de infeco pelo herpesvrus sugerido atravs da presena de clulas gigantes multinucleadas (ver a prxima seo). Devido ao fato de que muitos adultos j tm anticorpos circulantes e de que recorrncias raramente causam uma elevao significativa no ttulo de anticorpo, testes sorolgicos no so teis no diagnstico de infeces recorrentes de herpes. No entanto, no diagnstico de infeces primrias, testes sorolgicos, como o teste de neutralizao, podem ser utilizados. A microscopia eletrnica permite demonstrar o que conhecido como a imagem negativa do vrus. Vrus varicela-zster ou herpesvrus humano tipo 3: apesar de exames laboratoriais estarem disponveis, o diagnstico feito clinicamente. Clulas gigantes multinucleadas podem ser visualizadas no teste de Tzanck, possibilitando um diagnstico presuntivo. A cultura celular com identificao do vrus pode ser usada para diagnstico definitivo. A varicela pode ser diagnosticada por sorologia (por meio do aumento do ttulo de anticorpos); esta, porm, tem pouco valor no diagnstico do herpes-zster. Epstein-Barr vrus (EBV) ou herpesvrus humano tipo 4: este vrus pode causar a sndrome da mononucleose infecciosa. Ele pode produzir um exantema na fase aguda desta doena. A pesquisa dos anticorpos heterfilos (monoteste e reao de Paul-Bunnell-Davidhson) pode ser utilizada no diagnstico. Podem ser pesquisados tambm anticorpos contra o antgeno do capsdeo viral do EBV.