Escola Secundria Manuel Cargaleiro

Biologia e Geologia

Observao microscpica de clulas da epiderme da cebola

Ana Ferreira, n.1 Andreia Nunes, n. 7

Fogueteiro, 22 de Fevereiro de 2006

Observao microscpica de clulas eucariticas de epiderme da cebola

p. p. 1. Introduo Terica ........................................................................................................................ 2 2. Procedimento Experimental .....................................................................................................3 2.1. Material Utilizado ................................................................................................................... 3 2.2. Descrio da experincia ...................................................................................................... 3 3. Registo de Resultados .................................................................................................................. 4 4. Discusso .......................................................................................................................................... 7 5. Concluses ........................................................................................................................................ 9 6. Bibliografia ....................................................................................................................................10 7. Avaliao .......................................................................................................................................11

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Com este trabalho pretendemos observar e identificar as estruturas que constituem a epiderme da cebola ao M.O.C. (microscpio ptico composto), ou seja, conhecer a constituio das clulas eucariticas vegetais. Visamos, ainda, verificar o modo como alguns corantes actuam sobre diferentes estruturas celulares. O nosso objecto de estudo a epiderme da cebola, sendo esta uma pelcula fina, constituda por uma nica camada de clulas, que se encontra na superfcie cncava de cada uma das tnicas do bolbo da cebola. A clula a unidade bsica e funcional de todos os seres vivos, existindo dois tipos distintos de clulas: Procarticas so as clulas mais simples, pois no tm nem sistema endomembranar, nem um ncleo onde individualizar o DNA; Eucariticas so as mais complexas, pois tm o DNA individualizado no ncleo e tm um sistema endomembranar bastante rico. Dividem-se em dois grupos: animais e vegetais. Embora as clulas vegetais tenham organelos semelhantes aos das clulas animais, existem diferenas. As primeiras tm parede celular, cuja funo proteger e suportar as clulas, contm plastos, entre os quais os cloroplastos, e tm vacolos que atingem grandes dimenses com a idade, sendo estes ltimos responsveis pelo armazenamento de diversos tipos de substncias como protenas e acares. No entanto, todas as clulas eucariticas apresentam: Membrana celular limita exteriormente o citoplasma, sendo responsvel pelas trocas de substncias entre o meio intracelular e extracelular. Citoplasma espao intracelular ocupado por uma massa semifluida, onde se encontram dispersos os vrios organelos. Ncleo organelo de grandes dimenses, onde se encontra o DNA, delimitado por uma membrana nuclear, cuja funo controlar a actividade celular. Para se conseguir observar estas estruturas ao M.O.C., foi necessrio recorrer-se ao uso de corantes, neste caso concreto, utilizmos corantes vitais, que em baixas concentraes no danificam as clulas, como o caso do azul de metileno que evidencia o ncleo, a gua iodada que evidencia o ncleo e a parede celular e o vermelho neutro que evidencia o vacolo.

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2.1. Material Utilizado

M.O.C. (microscpio ptico composto); Lminas; Lamelas; Pina; Bisturi; Agulha de dissecao; Papel absorvente; Vermelho neutro; Azul de metileno; gua iodada; Cebola.

2.2. Descrio da Experincia

Retirmos trs lminas e sobre cada uma colocmos, respectivamente, uma gota de vermelho neutro, uma gota de azul de metileno e uma gota de gua iodada. Posteriormente, com a pina, retirmos trs pequenos pedaos da epiderme da parte cncava da tnica da cebola. Depositmos, com o auxlio da agulha de dissecao, cada fragmento de epiderme sobre o corante que se encontrava nas lminas. Cobrimos, cuidadosamente, as trs preparaes com as lamelas. Prendemos a primeira preparao ao M.O.C., atravs das pinas. Regulmos a fonte de luminosidade, utilizando o espelho, o condensador e o diafragma, e focmos a preparao inicialmente com o parafuso macroscpico e finalmente com o parafuso micromtrico, sempre na objectiva de menor ampliao, ou seja, na de 5X. Observmos cada uma das preparaes na objectiva de 10X, registando as observaes.

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Nas pginas seguintes seguem-se os esquemas que representam as observaes efectuadas pelos dois elementos do grupo. Cada folha tem trs esquemas, correspondendo cada um a uma das preparaes contendo um determinado corante.

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As nossas observaes tiveram como objecto de estudo a epiderme da cebola, pois esta apresenta apenas uma camada de clulas, permitindo-nos, deste modo, observar clulas eucariticas vegetais.

Fig. 1 Esquematizao de uma clula eucaritica vegetal, evidenciando os seus diversos constituintes.

Contudo, existem dois aspectos que dificultam a observao dos componentes celulares, sendo eles as pequenas dimenses das clulas e dos seus organelos, assim como a sua transparncia e consequente falta de contraste entre as estruturas. Por este motivo, existem algumas tcnicas de microscopia que facilitam a visualizao das micro-estruturas biolgicas como o caso da colorao. A colorao bastante importante em microscopia, pois permite evidenciar diversos componentes celulares, alterando o menos possvel as suas caractersticas originais, proporcionando assim um trabalho mais pormenorizado e credvel ao

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observador. Esta tcnica baseia-se no facto de determinados constituintes celulares absorverem alguns corantes, enquanto que outras estruturas no o fazem. Foi atravs do conhecimento desta tcnica, que utilizmos o azul de metileno, a gua iodada ou soluo de Lugol e o vermelho neutro, para evidenciar o ncleo, a parede celular e os vacolos das clulas da epiderme da cebola. Atravs da utilizao do azul de metileno (corante que usado em baixa concentrao penetra na clula sem a matar corante vital) atravs da tcnica de imerso (consiste em colocar o corante na lmina, actuando como meio de montagem, seguindo-se a colocao do material em estudo), este manteve o citoplasma e alguns organitos incolores, tendo apenas sido absorvido pelo ncleo, que ficou com uma tonalidade azul. Nesta observao, tivemos algumas dificuldades em visualizar os ncleos das clulas, pois este corante bastante escuro, tornando a observao difcil. Utilizando a gua iodada, que tambm um corante vital, foi-nos possvel observar, de forma acentuada, a parede celular e o ncleo, 150X ampliados, uma vez que s estes componentes celulares absorveram o corante, ficando com uma tonalidade amarela, permitindo-nos, assim, realar estruturas que no contrastavam suficientemente umas em relao s outras. Por outro lado, ao utilizar o vermelho neutro, que semelhana dos outros dois corantes utilizados tambm um corante vital, este introduziu-se no vacolo, conferindo-lhe uma cor rosada ou avermelhada. Os vacolos observados variavam em tamanho, pois existiam alguns com dimenses bastante grandes, ocupando praticamente toda a clula, o que nos levou a concluir que se tratava de uma clula j antiga, com grande quantidade de substncias armazenadas, uma vez que as dimenses dos vacolos nas clulas eucariticas vegetais aumenta com a idade. No entanto, sendo as clulas da epiderme da cebola clulas eucariticas vegetais era de esperar que se observassem cloroplastos, o que no acontece, pois a cebola um caule subterrneo, logo no efectua a fotossntese (processo de sntese de matria orgnica que ocorre nas clulas dos produtores, envolvendo os pigmentos que se encontram nos cloroplastos) e, por isso, no tem cloroplastos, pois no precisa desses organitos.

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Com esta actividade experimental foi-nos possvel ter um contacto mais prximo com a microscopia e as suas tcnicas, de entre as quais se destaca a colorao, pois foi esta tcnica que nos permitiu observar de forma clara as clulas eucariticas vegetais assim como os seus constituintes. Podemos observar o modo como os corantes utilizados, azul de metileno, gua iodada e vermelho neutro, actuaram sobre diferentes estruturas celulares, isto , o modo como estes eram absorvidos por uns organitos e no por outros. Os resultados obtidos corresponderam exactamente ao previsto inicialmente, tendo todos os objectivos sido cumpridos.

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Nota conceptual: ________________________ Nota processual: ________________________ Nota comunicacional: ___________________

Observaes: _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________

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