a bioquniica es una ciencia que se ha desarrollado con un ritmo muy acelerado en el presente siglo.

Los logros alcanzados en los ltimos aos en el conocimiento de esta ciencia han influido decisivamente en el progreso de numerosas ramas cientficasafines, en particular en las hiomdicas. Muchos hallazgos de la bioqumica han incidido directa o indirectamente en la teora y la prctica mdica; por ello resulta imprescindible el dominio de los aspectos fundamentales de esta disciplina por parte de mdicos, estomatlogos, licenciadosen enfermera, y en general por todo el personal profesional relacionado con la asistencia, docencia e investigacin en el campo de las ciencias mdicas. El texto fue elaborado teniendo en cuenta los intereses de las diferentes especialidades de las ciencias mdicas. De igual modo, ste puedeser de utilidad a estudiantes de cualquier otra carrera biolgica. En el Tomo IV se tratan, adems, algunos aspectos especializados de la bioqumica de inters clnico actual, lo que permite a estudiantes de aos superiores y graduadosde las diferentes ramas de las ciencias mdicas complementar y aplicar conocimientosadquiridos al cursar las ciencias bsicas. Nuestros propsitos son contribuir a mejorar la comprensin de la disciplina Bioqumica y destacar su importancia en la formacin de profesionales de las especialidadesmdicas. Corresponde principalmente a nuestros estudiantes evaluar en qu medidaello se ha logrado.

LoB autores

CONTENIDO

C P T U 3 .Intmducci6n al metabosmo eeluiar A U )6

619

Metabolismo 619 Vertientes del metabolismo 620 Anabolismo 620 Catabolismo 621 Relaciones entre anabolismo y catabolismo 621 Vas metablicas 621 Ciclo metablico 622 Regulacin de una va metablica 623 Inversin de una va metablica 623 Aspectos generalesde la regulacindel metabolismo 625 Actividad de las enzimas 625 Cantidad de lasenzimas 625 Paso de sustancia a iravs de las membranas 626 Aspectosgenerales de la integracindel m e t a b o 626 Resumen 627 Ejercicios 627

Transporte de hidrgeno 637 h p o r t e de ADP-ATP 638 Transporte de fosfato 638 Transporte de Caz+ 639 Biognesis de la mitocondria 640 Transporte de protenas a lamitocondria 641 Transporte del citocromo 642 Esquemaglobal deobtencindeenergi'aporlaclua 642 Hidrlisis de las macromolculas 642 Formacin de los metabolitos comunes 642 Va degradativa final comn: respiracin celular 643 Fosforilaciones al nivel de snstrato y las fosforilaciones oxidativas 644 Resumen 644 Ejercicios 645

CAPTUU)38. Cielo de los dados tricarbo~eos647

Historia 647 Visin general del ciclo de Krebs 648 Orgenes y destinos del acetil-COA 0 6 5 Origen del acetil-COAde los glcidos 650 Reacciones del ciclo de Krebs 650 Primera reaccin: enzima cido ctrico sintasa 651 Segunda reaccin: enzima aconitasa 651 Tercera reaccin: enzima isoctrico deshidrogenasa 652 Cuarta reaccin: enzima alfa-ceto-glutrico deshidrogenasa 652 Quinta reaccin: enzima succinil-COA sintasa 653 Sexta reaccin: enzima succnico desbidrogenasa 654 Sptima reaccin: enzima fumarasa 654 Odava mdh:enzimamlirn deshidmgenasa 654 Estequiometra 655

C P T L 3 .flujocatab6lim de sustanciay energa 629 AfUO 7 Necesidades energticas del organismo 630 Fuentes de energa 630 Reacciones de hidrlisis 632 Energa de hidrlisis del ATP 633 Reacciones de oxidacin-reduccin 633 Cambiosenergticos en la reduccin del NAD' 634 Milucondria 634 Sistemastransportadores de la mitocondria 637

XM

Regulacin 655 Regulacin de la cido pirvico deshidrogenasa 655 Regulacin de la ctrico sintasa 656 Regulacin de la isoctrico deshidrogenasa 656 Regulacin de la alfa-ceto-glutrico deshidrogenasa 656 Funciones del ciclo de Krehs 656 Anaplerosis 657 Comprobacin isotpica del flujo de carbono en el ciclo 658 Asimetra del funcionamiento de las enzimas 659 Resumen 660 Ejercicios 661

Algunas caractersticasdel centro activo 691 Mecanismo ntimo de la catlisis del complejo V 691 Interacciones de las subunidades durante el mecanismo de sntesis del ATP 692 Control de la respiracin celular 692 Regulacin de la ATPsintasa 693 Aspectos generales de la regulacin de la respiracin celular 693 Desacopladores e inhibidores de la fosforilacin 694 Desacopladores 694 Inhibidores 695 Resumen 695 Ejercicios 696

C~pfirno Cadena transportadora de electrones 663 39.

Reacciones de oxidacin y reduccin 663 Relacin del potencial estndar con la energa libre 666 Destino de los cofactores reducidos, producidos en el catabolismo 666 Componentesde la cadena transportadorade eleetmnes 667 Flavoprotenas 667 Citocromos 668 Ferro-sulfo-protenas669 Cuproprotenas 669 Ubiquinona 669 Complejos de la cadena respiratoria 670 Complejo 1 671 Complejo 11 672 Complejo 111 673 Complejo lV 674 Secuencia del transporte electrnicoa lo largo de los complejos 675 Bombeo de protones acoplado al transporte de electrones 679 Aspectos generales de la regulacin de la velocidad del transporte de electrones 680 Resumen 681 Ejercicios 682

CAP~TULO Introduccin al metabolismo inter41. mediario 697 Funciones del metabolismo intermediario 697 Caractersticas del metabolismo intermediario 698 Pool metablico 699 Incorporacin de sustancias al metabolismo intermediario 700 Fuentes endgenas 700 Fuentes exgenas 700 Salida de sustancias del metabolkmo intermediario 701 Unidad funcional del metabolismo intermediario 702 Resumen 702 Ejercicios 703

CApfiUL0 42. Digestin y absorcin de los gi6cidos 709

Principales glcidos de la dieta humana 709 Digestin de los glcidos de la dieta 710 Absorcin intestinal de los monosacridos 713 Fosforilacin inicial de los monosacridos 715 Destinos metablicos de la glucosa 6 fosfato 717 Resumen 718 Ejercicios 718

CApfiuu, 40. Fosforilaein oxidativa

683 Teora quimioosmtica 683 Complejo V ATPsintasa 684 Funciones de la ATPsintasa 684 Estructura del complejo V: la ATPsintasa 684 Cociente PO 685 Localizacin de los sitios fosforilantes 687 Economa y eficiencia 688 Teora que explica la fosforilacin oxidativa 688 Evidencias que apoyan la teora quimioosmtica 689 Asimetra de la membrana interna mitocondrial 689 Mecanismo de la fosforilacin oxidativa 690 Relacin entre lafuena protn motriz y lasntesis reversible de ATP 691

CA~firn0 Metabosmn del glucgeno 721 43.

Importancia biolgica del almacenamiento en forma de glucgeno 721 Eficiencia del almacenamiento energtico en forma de glucgeno 722 Glucogenognesis 722 Formacin del precursor activo uridn difosfato glucosa: etapa de preiniciacin 723 Inicio de la sntesis: etapa de iniciacin 724 Alargamiento de la cadena de glucgeno 725

Terminacin 726 Glncogenlisis 726 Diferencias metablicas entre el glucgeno heptico y el muscular 728 Regulacin del metabolismo del glucgeno 729 Regulacin de la glucgeno fosforilasa 729 Regulacin de la glucgeno sintasa 735 Regulacin hormonal 738 Enfermedades por almacenamiento de glucgeno 739 Resumen 741 Ejercicios 741

Sntesis de lactosa 791 Biosntesis de glicoconjugados y glicoprotenas 792 Biosntesis de glicoconjugados 792 Biosntesis de glicoprotenas 792 Biosntesis de oligosacridos con enlace O-glicosdico 793 Biosntesis de oligosacridos con enlace Nglicosdicos 793 Sntesis de proteoglicanos 796 Resumen 798 Ejercicios 798

CAP~TULO Metabolismo de la glucasa 743 44.

Antecedentes histricos de la gluclisis 743 Glnclisis 744 Etapas de la gluclisis 745 Primera etapa: de glucosa a las 2 iriceasfdatadas 745 Segunda etapa: de 3 fosfogliceraldehdo a cido pirvico 747 Destinos metablicos del cido pirvico 752 Destinos del dinncletido de adenina y nicotinamida reducido formado en la reaccin oxidativa de la seguuda etapa de la gluclisis 755 Productashalesformadosapartirdel c i d o p i n i 755 Consideraciones energticas de la gluclisis 755 Incorporacinde otras hexosas a la va glncoltica 756 Glnconeognesis 758 Primer rodeo metablico 759 Segundo rodeo metablico 760 Regulacin de la gluclisis y la glnconeognesis 762 Interaccin del metabolismo de la glucosa entre tejidos diferentes 762 Ciclo de las pentosas 764 Alteraciones del metabolismo de la glucosa 766 Resumen 768 Ejercicios 769

CAPfirn0 47. Digestin y absorcin de los Ipidos 805

Digestin de los Ipidos 805 Triacilgliceroles 805 Funcin de los cidos biliares en la digestin y absorcin de los Ipidos 807 Fosftidos de glicerina 808 Colesterol y steres de colesterol 809 Absorcin de los Ipidos 809 cidos grasos y glicerol 809 Colesterol 810 Fosftidos de glicerina 810 Resumen 811 Ejercicios 811

c P U > l b m p r t e de ipidos y iipopmtenas 813 A U 48. T

Concepto e importancia de la fotosntesis 771 Clorofila y otros pigmentos fotosintticos 772 Cloroplastos 774 Unidad fotosinttica. Centros de reaccin 775 Reacciones de la fotosntesis 779 Fijacin del CO, y sntesisde glcidas. Ciclode Calnn 781 Regulacin deias reacciones oscuras 782 Resumen 784 Eiereicios 785 Mecanismos de transporte 814 Transporte por medio de la albmina plasmtica 814 Lipoprotenas plasmticas 815 Resumen 827 Ejercicios 828

CAP~TULOLipog6nesis 829 49.

Funciones biolgicas de los triacilgliceroles 829 Precursores de la lipognesis 830 Biosntesis de los cidos grasos 830 Fuentes de acetil-COA citoplasmtico 831 Etapas del proceso 832 Balance general de la biosntesis de los cidos grasos 838 Fuentes de nicotinamn adeun dinucletido fosfatado reducido 838

CAP~TULO Sntesis de oligosac~ridosy gli46. ~oeonjugados787 Activacin de los monosacridos 787 Formacin de monosacridos derivados 789 Sntesis de disacridos 791

Destino del cido palmtico libre despus de la biosntesis 839 Alargamiento de la cadena de cidos grasos 839 Sntesisde cidos grasos insatnrados 840 Biosntesis de los triacilgliceroles 843 Activacin de los precursores 843 Etapas de la sntesis 844 Regulacin de la lipognesis 845 Resumen 847 Ejercicios 848

Funciones de los glicoesfingolpidos 886 Degradacin de los esfingolpidos 887 Resumen 888 Ejercicios 889

CmTULo 50. Liplisis

849 Caractersticasgenerales del proceso 849 Degradacin de los triacilglicerolesalmacenados 850 Destino del glicerol 851 Oxidacin de los cidos grasos 851 p oxidacin de los cidos grasos saturados de cadena par 852 p oxidacin de los cidos grasos de cadena impar 858 p oxidacin de los cidos grasos insaturados 859 p oxidacin de los cidos grasos en los peroxisomas 861 Otros tipos de oxidacin de los cidos grasos 861 Regulacin de la liplisis 862 Trastornos de la oxidacin de los cidos grasos relacionados con la funcin transportadorade la carnitina 864 Resumen 865 Ejercicios 865

C P T L 5 .Metabolipmo de los cuerpos eetcnicos 867 Au0 1 Cetognesis 867 Cetlisis 869 Regulacin del metabolismo de los cuerpos cetnicos 870 Desbalance entre la cetognesis y la cetlisis 872 Cetosis del ayuno 872 Cetoacidosis diabtica 873 Resumen 875 Ejercicios 875

c P T L 053. Metabosmo de los esteroides 891 AW. Biosntesis del colesterol 891 Etapas del proceso 892 Regulacin de la sntesis del colesterol 897 Regulacin heptica 897 Control de la sntesis de colesterol en los tejidos extrahepticos 898 Regulacin por la concentracin de colesterol intracelular 899 Receptores de lipoprotenas de alta densidad 899 Factores que influyen en el equilibrio hstico del colesterol 900 Destinos del colesterol 902 Sntesis de cidos biliares 902 Sntesis de hormonas esteroides 904 Sntesis de la hormona calcitriol 904 Colesterol y aterosclerosis 904 Componente celular 904 Factores moleculares 905 Lipoprotenas de baja densidad oxidadas 907 Lipoprotena (a) 907 Colesterol y enfermedad coronaria 908 Estilo de vida 908 Dieta hipocolesterolemizante 908 Resumen 909 Ejercicios 910

NITROGENAWS DE BAJO PESO MOLECLAR

CAPfiULo 52. Metabolismo de los fd6tidos de geerina y de los esfingoipidos 877

Biosntesis de los glicerofosftidos 877 Biosntesis de fosfatidilcolina y fosfatidiletanolamina 878 Biosntesis de fosfatidserina, fosfatidilglicerol e inositofosftidos 880 Regulacin de la sntesis de los glicerofosftidos 881 Ubicacin final de los glicerofosftidos en las membranas 882 Degradacin de los glicerofosftidos 884 Biosntesis de los esfingolpidos 884 Sntesis de glicoesfingolpidos 885

CAPflm.054. Digestin de Las protenas 917

Ciclo del nitrgeno en la naturaleza 917 Protenas de ladieta comn 918 Enzimas proteolticasdel tubo digestivo 919 Proteinasas 919 Peptidasas 919 Pepsina 919 Tripsina 920 Quimotripsina 921 Elastasa 921 Peptidasas digestivas 921

Digestibilidad de las protenas 922 Absorcin de aminocidos 922 Resumen 923 Ejercicios 924

C A P ~ L OMetabolismo general de los amino6ci55.

dos 925
Pool de aminocidos 925 Absorcin intestinal de aminocidos 926 Catabolismo de protenas hsticas 926 Sntesis de aminocidos 927 Sntesis de protenas 927 Sntesis de otros compuestos nitrogenados 928 Catabolismo de los aminocidos 928 Reacciones metablicas generales de los aminocidos 928 Desaminacin 928 Transaminacin 930 Descarboxilacin 933 Otras reacciones 934 Sntesis de aminocidos 935 Catabolismo de aminocidos 936 Sntesisde compuestosnitrogenados no protenicos 937 Sntesis de fosfocreatina 938 Aspectos del metabolismo individual d e los aminocidos 940 Errores congnitos del metabolismo de los aminocidos 940 Va catablica de la fenilalanina y la tirosina 942 Resumen 947 Ejercicios 948

Reacciones de recuperacin de bases 964 Sntesis de novo de nucletidos pirimidnicos 966 Sntesis de novo de nucletidos purnicos 969 Canalizacin metablica en la sntesis de nucletidos 975 Formacin de nuclesidos polifosfatados 976 Sntesis de desoxirrihonucletidos 976 Sntesis de nucletidos de timina 978 Catabolismo de nucletidos 978 Catabolismo de bases pirimidnicas 981 Catabolismo de bases purnicas 982 Aspectos de inters mdico en el metabolismo de los nucletidos 984 Enfermedades relacionadas con el nietaholismo de los nucletidos 984 Drogas con accin sobre el iiietabolisino de los nucletidos 984 Resumen 986 E,jercicios 987

0.c T U L A P

CAP~TULOEliminaci6n 56.

del nitrgeno del organismo 951 Excrecin renal del amonaco 951 Sntesis y excrecin de urea 952 Secuencia de reacciones de la ureognesis 953 Alteraciones metablicas del ciclo de la urea 958 Excrecin de otros compuestos nitrogenados 959 Resumen 959 Ejercicios 960

58. Metabolismo de las porrinas 989 Estmctura y funcin de las porfirinas 989 Sntesis de porfirinas y grupos bemo 991 Alteraciones metablicas de la sntesisde p o r 995 Porfina aguda intermitente 996 Porfiria eritropoytica congnita 996 Porria cutnea tarda 996 Coproporria hereditaria 997 Porria variegata 997 Protopofina 997 C a t a b o l i s m o d e p ~ ~ r i n 997 as Resumen 999 Ejercicios 1000

SECCI~N INTEGRACI~N REGULACI~N Y DEL METABOLISMO INTERMEDIARIO

CAPfirru, 57. Metabolismo de nude6tidos 961

Pool de nucletidos 961 Absorcin intestinal de nucletidos 962 Catabolismo de polinucletidos 963 Sntesis de nucletidos 963 Sntesis de polinucletidos 963 Formacin de compuestos que contienen nucletidos 964 Catabolismo de nucletidos 964 Biosntesis de nucletidos 964

C PT L 59. Comunicacin entre las clulas del orgaAUO nismo 1007 Evolucin de la comunicacin intercelular 1008 Comunicacin intercelular 1008 Tipos de seales 1009 Clasificacin de las seales en externas e internas 1009

Clasificacinde las seales en hormonas, mediadores qumicos locales y neurotransmisores 1010 Tipos de comunicacin intercelular 1012 Comunicacin a corta distancia 1012 Unin en hendidura 1012 Sinapsis 1013 Comunicacin a distancia 1013 Receptores 1014 Procesos regulados por los receptores 1014 Receptores hormonales 1014 Receptores hormonales intracelulares 1014 Receptores de membrana plasmtica 1015 Receptoresde membrana plasmtica que son canales inicos 1015 Receptores de membrana plasmtica que se acoplan aprotenas G 1015 Acciones desencadenadas por las protenas Gs 1017 Respuesta celular al AMPc 1019 Seales que regulan a la adeuil ciclasa mediante la protena Gs 1020 Desactivacin de los mecanismos producidos por las protenas Gs 1020 Acciones desencadenadas por la protena Gi 1020 Efecto de toxinas bacterianas sobre las protenas Gs y Gi 1020 Acciones desencadenadas por las protenas G , * 1021 Acciones desencadenadas por las protenas G, 1021 Acciones desencadenadaspor las protenas Gky G 1021 Desactivacin de la va de la fosfolipasa C 1023 Transcripcin de genes activados por la protena quinasa C 1025 Interaccin entre los diferentesmecanismos 1025 xido ntrico y monxido de carbono como mensajeros intercelulares 1026 Receptores de membrana que son enzimas en su dominio intracelular 1026 Receptores que tienen actividad de guanil ciclasa 1027 Receptores que tienen actividad de tirosn quinasa 1027 Receptores que se unen a tirosn quinasas 1029 Receptores quese unen a tirosn fosfatasas 1029 Receptores que se unen a protenas quinasas que fosforilanen serina o treonina 1030 Factores de crecimiento 1030 Interferones 1031 Eicosanoides 1032 Sntesis de prostaglandinas, prostaciclinas, tromboxanos y lencotrienos 1032 Resumen 1034 Ejercicios 1035

Sntesis de hormonas 1044 Sntesis de catecolaminas 1044 Sntesisde hormonas tiroideas 1045 Sntesis de hormonas polipeptdicas 1046 Sntesisde hormonas esteroides 1048 Transportede homonas por la sangre 1050 Mecanismos que degradan e inactivan las hormonas 1050 Otros tipos de regulaciones de la respuesta hormonal 1051 Agonistas y antagonistas de la accin hormonal 1053 Modelos hormonales 1054 Modelo del glucagn 1054 Modelo del cortisol 1058 Modelo de la insulina 1058 Adipocito como rgano endocrino 1061 Endocrinopatas 1061 Resumen 1062 Ejercicios 1064

C~~Tuz.0 Regulacin del metaboiismo 61.

1065 Concepto 1065 Diferentes tipos de mecanismos de regulacin metablica 1066 Disponibilidad de sustrato 1066 Compartimentacin celular 1067 Modificacin covalente 1069 Modificacin alostrica 1069 Induccin y represin enzimticas 1070 Especializacin celular 1070 Mecanismos mltiples 1072 0tro.r iiiw~ni~moc rrgiiladores 1072 Otro\ mensajeros de walri rrgulad~,ras1072 Resumen 1073 Ejercicios 1074

CAPfTULo 62. Integracin del metabosmo

1073 Manifestaciones de la integracin metablica 1075 Confluenciapor metabolito 1076 Confluencia en secuencia metablica 1077 Vinculacin entre anabolismoy catabolismo 1077 Integracin y regulacin metablicas en condiciones especficas 1078 Ejercicio fsico 1078 Ayuno prolongado 1081 Cetosis diabtica 1085 Resumen 1085 Ejercicios 1086

C~~firno Accin hormonal 6. 0

1037 Concepto de hormona 1037 Clasificacinde las hormonas 1037 Ciclo hormonal 1041 Especificidadhormonal 1043 Sistema neuroendocrino 1043

Introduccin a la seccin
as secciones anteriores trataron acerca de las estructuras y propiedades de las I~ioniolcnlas, slo en sus aspectos estructurales, sino tambin en relacin no con su funcin. Algunos de estos compuestos, las inacromolculas, conforman niolculas de mayor complejidad. Con respecto a stas se observ la relacin estrucliira-fiinciii, y cmo sus propiedades no son simpleniente la suma de sus componentes, sino que al formar una estructura de orden superior aparecen propiedades que les son propias. En la seccin IV pudimos ver cmo las macroinolculas se reconocen y unen debido a sus caractensticas estreo-qumicas,y al formar estructuras suprainacromoleculares de nuevo aparecen otras propiedades y funciones. Estas supraestructuras se encuentran representadas en las membranas y en los diferentes organelos subcelulares. En esa misma seccin se mencionaron las funciones principales, relacionadas con cada unode los organelos tratados, y en general se observ cmo estas funcionesdependan de su estructura. Se excluy de esa seccin el estudio detallado de la mitocondria, la cual, por su iinportancia en relacin con la respiracin celiilar, ser abordada aqu. A esta seccin VI le corresponde tratar acerca de las caractersticas generales de la organizacin de los procesos bioquinicos, por ser en esta parte donde por primera vez aparece un proceso bioqumico. Veremos, en el capitulo 36, Introduccin al inetabolismo celular, que un proceso bioqnniico ocurre por la sucesin de mltiples cambios graduales que se van efectuando sobre determinados compuestos,y que mediante ellos

se puede llegar a la sntesis de un compuesto comple,joo a su degradacin. Estas vas de sntesis o las degradativa no actuaii aisladas unas de otras, sino que forman parte de un todo, acoplndose e intercambiando energa y sustancia entre ellas de forma que la materia que se pierde es mnima. En los organisnios vivos rigen, en todo momento, los principios de mxima econoiiia y mxima eficiencia. Esto se logra al existir mecanismos que regulan coordinada e integradamente las diferentes vas metablicas. Los ' distintos tipos de regulacin son tratados con amplitud en otras secciones, ya \wnos algunos en laseccin de Enzinias; algunos de estos mecanismos sern niencionados en esta seccin. de En el segundo captulo, el 37, Flujo catal~lico sustancia y energa, se tratar, en general, de las reacciones catablicas involucradas en la obtencin de energa. En el siguiente, captulo 38, abordaremos la vid central de oxidacin final de los principales nutrientes, el ciclo de Krebs o ciclo de los cidos tricarboxilicos; y en los captulos 39 y 40, Cadena transportadora de electrones y Fosforilacin oxidativa, se describir cmo la energa liberada en la oxidacin de los compuestos es convertida en ese compuesto qumico rico en energa, capai de ser utilizado en mltiples procesos endergnicos que la requieren, el ATP. Finalmente, el captulo 41 presentar los aspectos relacionados con el concepto de metabolismo intermediario, el cual puede considerarse todava en evolucin. En algunos casos, este ttrmino se suele utilizar como sinnimo de metabolismo, pero lo ms frecuente es que se refiera al metabolismo energtico, es decir a los procesos relacionados con la liheracin de energa metahlicamente til. En este texto entenderemos como metabolismo intermediario aquellos procesos metablicos vinculados con la incorporacin, interconversin, degradacin y excrecin de conipuestos bioqumicos de ba,jo peso molecular. Se refiere, fundamentalmeute, al metabolisnio de los nionosacridos, aminocidos, cidos grasos y compuestos relacionados. No se incluyen en este concepto los procesos que tienen que ver con la sntesisde macromolculas, con la excepcin de la ~ntmir degradacin de1 gliicgeno. y proccsos que sson tratados como pnrtc del nictabolismo intcruiediario.

En uiia celola coexisten iniiltiplescompuestos, unos forniiin parte de las iiieinbraiias y dc los distintos nrgaiielos, otros se encuentran libres, disneltos en los diferentes ciiipai~tiiiieiit celolarcs. La sntesis y degradacih de e s t o coiiipnestos. las variadas I~nicioiies las qne intervienen, dependen en allo grado de las eiiziiiias I>rcsciiliscii en cada cblnla. Al efectuarse el recoiiociiiiieiito entre las cnziiiias y sus sustratos, s i lleva a cal>(, tina rcaccibii y se posibilita la formac'ibii de un prodiicto. pero este iiltiiiio diviene sustrato de otra enziiiia u otras, y de esta manera. sucesivaniente ve T aii coiiforiiiaiido 1,1 . I.ntas de reacciones de un cleteriiiinado proceso. s Estas rutas de :ciiccioiies o estos procesos pueden conducir a la foriiiaciii dc uii coiiipuesto comple,jo(proceso biosinttico) o llevar a so degra<lacibii!a la I>tenii61i de energaa partir de aqu&l.Ases como se presentan en una ctlula procesos contrarios, pero qne se interrelacionan y que cstn regulados de fi)riiia que un organismo pueda niaiztniemcon vida. .Acerca de estos pi-occsos, que integran el iiietal>oli.sino,trataremos en este captulo.

Metabosmo
La vida es el recanibio continuo de materia con el medio exterior y cesa ciiando termina este recanibio. El inetabolisino es este coiitinno intercambio de materia con el medio, y coniprende las reacciones que transforman las sustancias provenientes del entorno en otros compuestos y energa, que son ntilizables por la clula. al mis1110 tiempo qne se realiza la eliminacin al medio de sustniicias no aprovecliables y energa en foriiia de calor. Estas reacciones ciiziniaticas que intervienen en el iiictaholisriio se encuentran altaniente reguladas y organizadas, y presentan ciertas regiilaridades. por lo que mOre la base de ellas podemos establecer los principios y las leyes que lo rigen. Si tomamos como ejeiiiplo un;i bacteria, la E.sclierichia col;. vemos que este orpiiisiiio puede vivir con un medio iiininio dc iiutrientcs -solucih acuosa que contiene slo glucosa y sales iniiierales. Cada uiia de estas cblolas proiariotas posee las distintas variedades de cidos iiiiclcicos existentes, numerosos <jeiiiplares de cada all niia de las diferentes protenas, y iniltiples copias de todas las otras I>ioiiioli.culas presentes. Coiitaiido coii esta I > a xmaterial, y las funciones y propieclades asociacles coii cada ~ u i de estas estructuras !cmi la relacin entre ellas, la E. col; toma del medio a

Catabolismo
Conipren<lelas reacciones qiie transforman los conipiiestus ms coinplejos en otros de menor complejidad. En estos procesos se lihera energa, y estas reacciones degradativas soti. por lo general, eierg611icas. La energa liberada no se pierde por completo, pues precisaniente niediante aa)plaiiiientos energticos (captnlo 14)parte de la energa liberada se conserva en enlaces qumicos en forma de SI'P; la otra parte se pierde como calor liberado al medio. Comiiinente, en los procesos catablicos los compuestos degradados se oxidan, y as en niuclias reacciones catahlicas se forman cofactores reducidos, NADH y FADH,. En esta seccin veremos cbmo el potencial de reduccin que entraan los mencionados cofactores reducidos se aprovecha en la sntesis de A1'I'. La funcibn esencial del catabolisnio es la de obtener energa ntilizal>le por la clula. Podemos ver en la figura 36.2 un esquema simplificado de un proceso catabblico, que representa la degradaci611de una molteula de glucosa.

Glucosa

Acetil- CnA

Relaejones entre anabolismo y catahnlismo

Si comparanios lo esliidiado acerca del anaholismo J' del cataholismo, podemos percatartios de que ambos prnct.ios son niu) diferentes entre s. En a t e par decontrarios se presenta una Incha latente en todo organismo viviente: la asimilacin y la coiistniccin por un lado, y la destruccih y la desasimilacin por el otro. Entre ambas vertientes del inetabolisnio se establece una interrelacin en lo que al intercambio de materia se refiere (Hg. 36.3). En el catal~olismo seliberalaenega que, en parte, queda capturada en las moltculas de Ai'P, y en parte, se desprende como calor, se liheran cofactores reducidos y se fortiiaii sustaucias de nieiior coiiiple.jidad estructural. En los procesos anablieos se forman compuestos de mayor coiiiple.jidad a partir de sustancias relativamente siruples; aqu se utiliza la euerga contenida en el Pil'Py 10s cofactores reducidos. Entre anabolisnto y catabolisnio existe un ciertoequilibrio; en los prinieros aos de la vida se encuentra favorecido el priuiero, y al final de la vida,el segundo. Cuando el equilibrio se desplaza definitivamente hacia el cataholismo, cesa la vida de ese organismo particular.

f .

.
~~~

Molcula compleja
~- -

/
/ADP+Pi

- . -

Vas metablicas
Los procesos catablicos y aiiah6licos estn organizados en vas o ciclos metali6liros y tienen caractersticas siniilares:

Molcula sencilla ' l

o!
~ ~

,.,

J
.
'

1. Casi sienipre ocurren como secuencias de reacciones que se suceden unas a otras, desde uuas pocas hasta decenas. y las transformaciones que en ellas ocurren se llevan a cabo de fornia gradnal. Comemando con uua sustancia inicial. 6sta se va transformando paso a paso, y gradiialinente fornia el producto final. 2. De este modo nos encontramos con, al menos, un snstrato inicial y un producto tinal. Entre ambos encontrarenios una serie de compnestos interniedios: los

'"p.

Kclaciotiri cl cat;ibulisnio.

niish"li*iiio

metaholitos interinediarios. El sustrato inicial o precnrsor, en la priniera riaccin se transforma en producto, pero a su vezste ser6 el sustratode la segunda reaccin,el cual devendr producto, y assucesivamente. 3. Cada vacumple con determinadas funcioncs; la obtencin de energa qnniicao la reposicin de determinada molcula. 4. Las sucesivas reacciones estn catalizadas por enzimas. 5. Laviaseencuentra regulada, y esta regulacin recae casi siempre en las reacciones iniciales de la va. 6. Generalmente, al menos una de las reacciones que la forman es irreversible. 7. Las vas tienen una deternliiidda localizacin celular. 8. Adems del compuesto inicial y final, en ella participm otra serie de compuestos, los cofactores. 9. Por sus caracteristicas, la va puede ser anal~lica catablica. o En la figura 36.4 se encuentra representada una va metablica. Eii ella podemos distinguir el sustrato inicial (A) y el producto final ( G ) .Las sustancias R,C,D, y F son metaholitos intermediarios. A se Iia transformado en G paso a paso, gradualmente, al irse operando las diversas reacciones de esta via,catalizadas por las e n h n a s E,,Ei,E,, E, y E,. El cambio quese opera sobre cada sustrato para transformarlo eii producto es a pequeo, pero si comparamos el sustrato inicial con el producto final de L va veremos que el cambio operado es de niayor envergadura. Estas pequea? transformaciones son tan comunes, que uno de los principios de la bioquiniica es el principio delos cambios

graduales.
ATP

ADP
C

H
\

H
\

/*
1

E,

D Y E;

u
% -

G
F
A

E,

E<

Rg. 36.1. Rqiresentrtriii de una va iiietaliiilira. Intervieiien 5 enziinas ( E , . Ii., E,, Ii, y l . La rcnrcibii irrriersihle cs la catalirada por In I:.. En I i re.aerin 1 intewiciie iin rofactor ; por reprcseiitado por H que Iranspwta al Sriipi, quiiiiico wpre~enf.i<lo el di-ciilo.

Ciclo metabiico
Un ciclo nietahlico es un caso cspecial de va inetablicn, constituye una determinadasecuenciacerratla de reacciones, en la que al menos uno de los productos de cada reacciii es sienipre el siistrato de la reaccin siguiente. Por supuesto que cumple coi1 las niisinas caractersticas de la via nietal~lica (Fig. 36.5).

Regulacin de una va metabiica

1)ijinios antes que en tina ruta rnetaldica, por lo menos uiia de las reacciones se eiiciieiitr;i catalizada por una enzima reguladora, lo cual cs el Factor fundamental que deterniina la velocidad de la ra, segn se encuentre actii,ada o iiiliil>idala enzima. \ I este tipo de eiiziiiias tamhin se le Iia denominado eiiziiiias marcapaso. Como cada una de las enziiiias de la va, con eucepcibn de In primera, depende del producto de la anterior, es por ello qiie si slo existe uiia enzima rcgulaclora al principio de una va, sta seencuentra regulada. La reaccibn catalizada por ellas, es por lo general, irreversible, y un meca~iisiiio muy comn de reguliicibii es la inliil)icin por proclucto final, o inhibicin fiidb;rch. en la que el producto final de la va -en este ejemplo el conipnesto G-, y en dependencia de su conceiitraci611,producira tina mayor o menor inliibicin de esta enzinia niarcapaso. A coiiceiitracioiies nfimas de G, la enzima se desiiiliil)e, la vid se acelera y se fornia G. El producto G ser consiiiiiido en dependencia de las iiecesid;ides celulares. Cuando las conce~itraciiies G aiinieriteii, ste actuara como de inhihidor de la E,, y la va se inhibir porque a lasenzimas subsiguientes (E,,E,y E,) le taltan los niet~holitos iriteriiiediarios que derivan del producto cle la E?. En las vas metal>licastambin dehenios reconocer las reacciones en las qiie se fornia 0 se consume hTP; en este caso es la propia reaccin 2 la que est acoplada a la Iiidrlisisdel A'I'P. Por ende, esta va,cn la que secoiisunie glol)aliiienteAI'I', es tina ra auahlica. Ha! vas en las que se consume A'I'Pen determinadas reacciones, pero en otras se sintetiza. Para decidir si se trata de una va catal~blica anahlicn, debemos o analizar sus caractersticas y si son nis los z\TP que se consumen que los que se pnducen o viceversa. Taml~iii debemos reconocer las reacciona en las que intervienen cofactores. En la figura 36.4 viinos que en la reaccin 4 un deterii~iiiatl grupo qiiiiiico se transfiere del compuesto D al cofactorH y se forma el producto 1. ;

Inversin de una va metabiica

Al nienos una de las eiiziiiias de una va metalilica deterniinada calaliza una reaccin irreversible, por lo que se puede decir que las vas, en general, son irrereisililes v. por lo tanto. no se podra foriiiar el sustrato inicial a partir del prodlich) final con la participacin de las niisiiias enzimas de la va directa. -\Iira I>ien,estonosig~iifica que el producto de una va no pueda ser reconvertido de nuevo en el sostiato iniciador de sta. Ello es posible, a veces. utilizando parte de la ia. es decir las enzimas re\wsiblcs v los pasos irreversibles pucdeii ser catalizados por otra u otras enzimas diferentes que se encuentren en la ctlula. 1.h el ojeoiplo de la figura 36.4, C podra de iiiiwo 1raiisforma1.ie i \ , e ~ ~ en dependencia de las condiciones celiil;ires; se podra trarisforniar gradiialmente en sta por medio de las eiiziiiias Es, E, y E, en orden inverso a la va dinxta. Otra enzima celular, por cjeinplola E,, transhrmaiia el niet?l>olito intermediario C en U, la niisnia eiiziiii;i (le la va directa, la E,, transformara R en :\ (Fig. 36.6).Por ende, tina misma secuencia de reaccionespuede ser compartida por prncesos anal)licos y catablicos. '~a~iil)iii va inversa tiene su regulacibii. En estos casos, generalmente 121 la enzinia o enzimas que catalizan los pasos irreversil>lesen el sentido inverso de la va, son tambin las eiiziiiias regiiladoras.

As, anal)olisino y catal>olismose regulan coordinadamente, y muchas veces es un niisino metaholito el que regula tanto la va directa como la iiiversa. pero si sil accibii en la va directa es la de inhibir la vid, en la va inversa su acciii ser activar la enzima marcapaso (Fig. 36.7).

La posil>ilidad de que una va nietal~lirapiierla funcionar de este niodo -el1 ambas direcciones- iio debe cleuomiiiarse reversihilidad de la va. ya qiie no soii las mismas eiirinias las que actiari en aiiihasdireccioiies. Kecomenrlamossea denoiiiiiiada iiiversin de la va 1, Ibgicameiite, ser posible si todas las enzimas estn situadas en el iiiisnio compartiiiiento celular o. en so elelecto, los nietaholitos interriiedi;irios qiie se formen en el otro compartimento celular atraviesen alguna iiieiiil>raiia,lo ciial puede representar otra regolaciii aclicioiial (Fig. 36.8).Es un heclio comiiii del iiietabolis~iio qiie exista esta posihiliclad de iiiversiii de reacciones y procesos. y por ello se Iia postulado el principio de reciprci<lacl.

Aspectos generales de la regulacin del metabolismo

Durante toda la vida existe un balance entre el anaholisino y el catabolismo; ninguno de estos procesos sobrepasa en cuanta exagerada al otro, y aunque en determinados momentos puede predominar uno sobre otru, rpidamente se retorna al halance entre anibos. Un hombre de 25 aos y 70 kg de peso puede mantenerse en este peso aproximadamente 40 aos si ingiere las canticlades de alimentos suficientes para satisfacer sus necesidades. Durante perodos de enfermedad podr adelgazar, durante perodos de reposo e ingestin de alimentos que sobrepasen sus necesidades podr aumentar de peso. A continuacin veremos lo qiie le podra ocurrir a un organismo si no existiera este Imlance entre anabolismo y catabolismo. Veamos la figura 36.9. En esta figura ol)servainos, en a , una ci.lula en la que existe un I)alance entre el aiial)olisrno y el catabolisnio. En 1) predominan los procesos anahlicos, los organitos se encuentran rechazados Iiacia la periferia, y el citoplasnia e s t i sohi.ec;irgado de ll~idos otras sustancias. En la sntesis de y stas se emplearon excesos de energa y de sustancias. En canibio, en c, existe un vaciamiento del citoplasma, las reservas energtticas estn casi agotadas por el exceso del catabolisino y hay una prohahle carencia de niateriales con que reponer las estructuras. Ambas situaciones, es ficil de imaginar, pueden llevar a la muerte celular. Precisamente la preservacin de la vida requiere mantener el equilibrio nietal~lico. este modo, durante la evolucin, las especies. en las que fueron De apareciendo 10s mecanismos que maiitenian este balance, fueron predominando sobre las otras. En estas clulas qiie iuaiitienen ese halance se cumplen 2 principios: el de la mxima economa y el de la mxinia eficiencia. Un buen kmlance entre aiiabolis~uo catabolisino se logra si en una clula y existen cantidades adecuadas de todos los compuestos que se requieren, sin que ninguno se encuentre en demasa o se carezca de alguno de ellos y. por lo tanto, exista un nivel energtico acleciiado. Ello sc Iia logrado por medio de la evolucin, con la aparicin de rnecanisnios que niantienen tina estreclia regulacin de todos los procesos inetaMlicos celulares. Estos niecanisiiios son los siguientes:

1. Regulacin sobre la actividad de las enzimas. 2. Regulacin sobre la cantidad de las enziinas. 3. Regulacin sobre la entrada y salida de sustancias a travs de las iiieiiihranas.

Actividad de las enzimas Todas las rutas inetablicas se encuentran reguladas. Una o varias reacciones en cada uno de estos prucesos estn catalizadas por eiiziinas que se Iiallan funcionando a determinada velocidad, en dependencia de niecanismos regulatorios, entre los cuales podemos niencioiiar la esisteiicia (le inhibidores o activadores -ya sean estos aloest6ricos o no- una modificacidn covaleiite, y las concen traciones de los propios sustratos y productos (captulo 16).

Cantidad de las enzimas Otra turma de regulacin de un proceso inetahlico es mediante la cantidad de una eii7iina presente en la clula en determinado momento. Como el r oluineii celular $e mantiene constaiite, un auiiieiito en la cantidad implica mayor concentracin. E ~ t e

tipo de regulacibn se expondr ms extensamente en el captulo que trata de la I>insiitesisde protenas. De fornia breve podernos decir que la cantidad de tina enzima se puede regular por la velocidad de su sntesis, al activarse o al inhibirse sta. La degradacin puede estar regulada tambin. Existen otras enrinias cuya velocidad de sntesis no se regula. Si en la va nietablica representada en la figura 36.4, la eiizinia niarcapaso E, se encuentra presente en la c6lula eii concentraciones nfimas, los sustratos de las eiiziinas suhsigiiientes s e r i n muy escasos, ya que fstos dependen del producto de la E,, y, por tanto, la va funcionar con lentitud. Si por el contrario hay cantidades suficientes de la E., todas las enziuias posteriores a ella tendrn suficiente sustrato, y la va fiincionar activamente (E'ig. 36.10).

hg. Jh.lO. I < r i ~ i i i i aa <lifCi.entcs COIICPIIII~. C~OWC. roiirenlrarionrs son $0 Las

infiniai. h) Sc encuentra a mqiires conc~nti.a~ioiie\. <piedetei-lu mina que se ~in,diizciiniii;t?irri cantidndridd producto <lew1a Itinm

Paso de sustancia a travs de las membranas

E1 aliiiieiitador de un ciclo metabblico, el sustrato inicial de una va metalilica o el sustrato de determinada enzima, pueden forniarse o provenir de un conipartirnento celular distinto al de laeiizinia del proceso que lo va a transformar. E n este caso, la sustancia debe atravesar una membrana, que puede ser la meinbrana plasnitica, la de la mitocuiidria, o la nuclear, por nieiicioiiar algunas. Cualquiera que sea el caso,la transformacin de la sustancia queda supeditada a su 11aw a travs de la niemlwiana. Por lo tanto, su paso deteriniiiar la conceiitraci~i que ella alcance en el compartinieiito donde se encuentre la enzima que la utilizar como sustrato; esto constituye un mecanismo de regulaciii (Fig. 36.1 1).El paso puede depender de su solubilidad en la membrana o de la existencia o no de un transportador de alguno de los tipos ya estudiados (captulo 20).

Aspectos generales de la integracin del metabolismo

Fig. 26.1 1. I<rpi-rsentaci<iiide la liiiiitari<iti qiie v,tablece sl ~wleerircee l

I<ri el iiietaholisnio celular no slo existe un equilibrio entre los procesos aiiiibblicos y catahlicos de un deterniinado compuesto, tambin existen p n w ;t ira\& dc iiiia iiiciiil>rariiirlc eqiiilil~rios entre el metabiilisino lipdico, glucdico, protenico y nucleotdico. iin iiietaholilo iiiteriiicr1i;ii-ia riiaado ~ ~ ~ c t : ~ l ~ ~ ~ ~ i ~ ; M ~ lequilibrio se logra no slo con los inecauisnios reguladores ya vistos. sino ~ e ~~. que adems existen los iiiecaiiisnios integradores. La aparicin. durante la evoluciii. de niecanismos integradores constituy iin logro qiie taiiibiii produjo en el predoiiiinio y perpetuacin de los or~anisinos los qne aparecieron. 1 3 estos iiiecanisnios iiitegradores existentes se evidencia el principio (le la iiiterrelaciii. Los iiiecaiiisnios integradores se iiiaiiifiestaii en riietabolitos qiie son coniuiies a diferentes vas o ciclos anahblicos o catal>licos, y uno de estos inetalmlitos intermediarios de un pi-ceso glucdico puede ser coriin a otros procesos glucdicos. couiun a un proceso glucdico y a uno lipdico, protenico, o puede Iialicr un nietaliolito interiiiediario conin a procesos proteiiicos y iiucleotdicos. Supongaiiios que en una determinada situacin celular se este catal>olizaiido un exceso de gluwsa. Cn nietabolito inteimediario de esta va, que tanil>iiies el i~iisiii pwticipa en la sntesis de cidos grasos o de aminocidos, es utilizado en que estas otras vas. As. el inetaholito iiitcriiiediario de esta degradaciii excesiia de glcidos. de la cual se ol>teiidraii cantidades energfticas que sobrepasaran las requeridas por la ci.lula, sera desvia<loa la forniaciii de otros conipuestos (Fig. 36.12). Esos rnetabolitos comunes a varias rutas nietahlicas constituyen los Ilaniados iiietaliolito de encrucijada. y son 10s que rclacioiian al conjunto de procesos que conforn~aii iiietal>olismocelular, Iiacickdolo un todo nico e integrado. el

" (
ATP

L + Pi ADP
Fig. 36.12. Rcprerciil:tciiiii iIc u n iiietaliolito d c cncriici,jada. El iiietaliolita C es coiiiii a 1;s iia rlc degradaii6ii dcl roiiqiucsto A y a ru rcr es precursor de la Iiiosiiifesis del eoiiqiucsto l.

Resumen
Las clulas viven mientras existe la posibilidad de recambio de materia con el medio externo; el coqjunto de reacciones que se realiza durante ese tiempo es el metabolismo. Este tiene 2 vertientes: el anabolismoy el catabolismo. Estos 2 proeesos son contrarios, pero se complementan y no pueden existir el uno sin el otro. El catabolismo posibilita la formacin de ATP y la oxidacin de compuestos de mayor complejidad estmctural en compuestos ms simples; el anabolismoparte de molculas sencillas y las transforma en sustancias ms elaboradas, pero requiere del potencial reductor de los cofactores reducidos que se forman como productos del catabolismo y de la energa contenida en el ATP. En el metabolismo la inmensa mayora de las reacciones estn catalizadas por enzimas, y adems, ocurren en secuencias en las que al menos uno de los pasos est regulado y es irreversible. Estas vas metablicas, si son cerradas, son denominadas ciclos metablicos. Las vas metablicas se regulan al alterarse la actividad o cantidad de alguna enzima, y tambin al verse controlado el paso a travs de una membrana de algn metaboiito involucrado en la va en cuestin. Las vas metablicas no ocurren independientemente unas de otras, sino que se interrelacionan, lo que integra al metabolismo en un proceso nico. La constancia de las transformaciones paso a paso, es lo que ha permitido que se hable del principio de L s cambios graduales; la posibilidad de inversin de vas y reacciones y la o relacin de unas vas con otras, ha permitido plantear el principio de la reciprocidad; y la regulacin, el de la mxima eficiencia y economa.

Ejercicios
l. Haga una tabla en la que se coinpareo las caractersticasdel anaholismo con las del

catabolismo. 2. Confeccione una tabla en la que se compare una vid con un ciclo metabblico. 3. Explique a qui. se le llama eiiziiiia marcapaso.

4. Iiscriha un e,jeniplo de cada uno de los tipos de regulaciii siguientes, iitilizando, como en el texto, letras del altabeto que representen diferentes sustratos v productos: a) RegiilaciNn sobre la cantidad de una enziina. h) RegulaciNn sohre Ia actividad de una enzima. c) Regulacibn a travtsde una nienihrana.

En los procesos catablicos, las biomolculas se oxidan a CO, y H,O, y parte de la energa que se libera queda retenida en formade energa qumica en las molculas de ,4TP. En estas transformaciones, los cofactores de oxidacin-reduccin tienen una funcin importante por cuanto los equivalentes de reduccin que ellos transportan son fundamentales para la conservacin de esa energa qumica. En la degradacin de protenas, glcidos y lpidos tambin rigen los principios de la mxima eficiencia y economa, y podemos ver que. aunque las etapas iniciales de la degradacin de cada uno deestos compuestos se llevan a cabo por rutas metahlicasdistintas, en las etapas ulteriores se forman metal~olitos comunes que confluyen en una ruta nica. De esta forma. las mismas enzimas son las que continan con la degradacin y oxidacin de todos ellos (Fig. 37.1 1.
Protenas
\

Glcidos
I

Triacilgliceroles

Primera etapa
----Fig. 37.1. Esqi~eina la degradstin total de de las siacremol6eulas a CO? y H.O. En 18 primera etapa sedegradan, por hidrlisis. hasta sus unidades estructurales. En la segunda etapa sigue la degradaeih, comienza In oxidacin y Fe llega s iiietabolituc comiiiics. l h la tereera ctalia, la va oxidati\ii cs comn.

Segunda etapa
-----

Terccri~ etapa

t
CO? + H1O + ATP

Al proceso de oxidacin de protenas, glcidos y lpidos, Iiasta la formacin de C o i y H,O, lo denominaremos flujo catahlico de sustancia y energa; su funcin principal es la obtencin de energa utilizable por la clula. Para estudiar a t e proceso lo dividimos en 3 partes. La piiniera es aqulla en la cual las macromolculai se hidrolizan, y quedan libres sus componentes o precursores; en la segunda, todos estos precursores, ya sea que provengan de lpidos, glcidos o protenas,

quedan transformados en un reducido nlinero de nietabolitos comunes; la tercera corresponde a una nica va degradativa fiiial, a CO, y H,O. Aques dondesecapta,en forma de ATP, la niayor parte de la energa que se lfiiereii los procesos catablicos y donde el 0, cumple su funcin como aceptor final de electrones; por esto, al conjunto de estos pkcesos se le denoniina respiracin celular. Es en la initocondria donde ocurre esta iiltima partc del flujo catablico de sustancia y energia, y este organelo tiene caractersticas estructurales propias que permiten que estos procesos se lleven a cabo con el nixinio de eficiencia y econonia.

Necesidades energticas del organismo

Existen diversos procesos en el organismo que requieren energa. Ellos son la sntesis de I~iomolculas, transporte activo de conipuestos a travs de las nieinbrael nas, la trasmisin del impulso nervioso, y la contraccin muscular, entre otros. Toinados en su conjunto, todos estos procesos endergnicns s w h los que determinaran las necesidades energticas del individuo, las cuales son diferentes en cada organismo vivo. Por ejemplo, en el humo sapiens. las necesidades de energa dependen de la edad, el sexo, el trabajo fsico, el clima y otros factores. En los fenmenos qumicos abiticos, el aporte energtico en forma de calor posibilita qne muchas reacciones endergnicas se lleven a cabo. No ocurre del misnio modo en la mayoria de los organismos vivos, en los que la temperatura se mantiene entre rangos muy estrechos de variacin y en los que las eiizimas catalizan la mayoria de las transformaciones. Estas protenas se desnaturalizarian si la elevacin de temperatura sobrepasara un cierto valor. En el proceso evolutivo, el acoplamiento euergtico represeot la mejor solucin (captulo 14). Los donantes energticos son las molculas ricas en energa cuya hidrlisis es exergnica; y entre todas las molculas de este tipo,el ATPes el transportador energtico universal, con lo cual se evidencia una vez ms, el origen nico de la vida. En ocasiones, durante la catlisis enzimtica de un proceso acoplado, la hidrlisis del ATP libera la energa que es utilizada en la reaccin catalizada por la enzima. La reaccin catalizada por la enzima sera endergnica, mientras que la hidrlisis del ATP sera la reaccin exergnica (Fig. 37.2). In vitro, cada mol de ATPlibera, aproximadamente, unas 7 3 kcal; in iiw, y en dependencia de las condiciones del medio,se ha calculado que podran liberarse hasta 12 kcal. Un hombre adulto de peso promedio requerira recibir,en condiciones hasales, unas 2 000 kcal diarias, por lo tanto si las utilizara todas, estara consumiendo, aproximadaniente, la energa liberada por 260 moles de ATP.

Fig. 37.2. Aeu~il;~iiiienta energtico. La mz i i m glucequinasa rataliza I;i I'osforilaciiin de la gliirosa. lista rcacriii es endrrgnica, y la eiiergia la aporta la Iiidrlisis del ATP.

Fuentes de energa
Las fuentes exgenas de energa son los alinientos. De los nulrientes que componen la dieta, los glcidos, las grasas y las proteinas son los que al degradarse aportan la energia que se requiere. La determinacin de las kilocaloras que aporta cada uno de estos nuti-ientesse puede llevar a cabo estudiando su cornbustin en una bomba calorinitrica. Enellaestos conipuestos son oxidados totaln~ente CO, y H,O, y al mismo a tiempo se mide la energa que se libera. Asse ve que el valor calrko de las proteinas es de 5 3 kcal.g1,el de los glcidos de 4,l kcalg', y el de las grasas de Y,3. La inisnia cantidad de energia que lilm-an in vitrola liberan N, viiosi son tambiGn oxidados a CO, y H,O, piies la energia contenida en un compuesto slo depende de su estado ini&l y final, y no de la va que se siga en su transformacin. La oxidacin de estos compuestos en el organismo aporta el mismo valor energtico para glcidos y grasas, pero no paralas protenas,las cuales no sufren la oxidacin completa en el organisnio, y por ello slo aportan 4,l kca1.g' en vez de 53.

Podenios observar que la oxidacin de los glcidos aporta menos cantidad de energa que las grasas (Fig. 37.3). Si a un animal alimentado solamente con uno de estos compuestos se le cletermina, en un respirinetro, la relaciii entre la cantidad de COZ se produce y la caiitique dad de 0, que se consume, por unidad de tiempo, se observa que en las grasas esta relacin es de 0,75 y eii los glcidos de 1. Esta relacin recibe el iiombre de cociente respiratorio (Fig. 37.4). Cociente respiratorio = CO, O, producido consumido

/O / C-H I H-7-OH HO- C-H I H-C-OH HI CH,OH

/O / 7-OH H-C-H H-$-H H-C-H

b-OH

H-k-H I CH3 cido caproico (C,,H,,OI)

Glucosa (C,?H,,O,)

Cociente respiratorio de la glucosa = 616 = I Cociente respiratorio del cido caproico = 618 = 0,75 Eii la bomba caloriiiitrica, los compuestos se oxidan violentamente, sin prodiicirse compuestos intermedios que se piiedan recuperar, y la eiiergia liberada por su combustin se disipa en forma de calor. La oxidacin total ocurre de modo diferente en los orgaiiismos ~ivos. fundanientalmente porque eii stos la liberacin del contenido energtico se lleva a cabo por pasos graduales: adems, un porciento de ella se coiiserva, y el proceso tiene lugar a temperatura constante (Fig. 37.5). Las reacciones de hidrlisis y de oxidacin-reduccin estn implicadas en las transferencias de energa entre sustratos y productos. La conservacin de esta energa se hace posible dehido a que estas reacciones estn catalizadas por enzinias. y ello posibilita el acoplamieiito energtico.

Fig. 37.4. ilcdicin del cociente respiratorio c n un respirbmetro. El aire espirado pura a t r a ~ de .\, s donde es capturado el COZ,iiiieiitras que rn el tambor rotatorio C se est instrihiendo. coi1 I;i pliimill~ el o~xeno D. censiiinido. Este ltimo se eiicueiitra en la canipaiia B. De la dieta del hombre depende el cociente respiratorio, que se calcula sustituyendo en la friiiulii luego de medir estos voinienes de gases.

!
I

Fig. 37.5. Esquema conipiti-ande la coiiibastin con la osidacin. al Representa la reaccin violenla que se produce en uiin I>oeiha calurimtrica en la que li> ciiergia se lihcra Ibriiscanieiite. b l Representa la oxidacin, por pasos, que ociirre en los erganismus y a teniperafura constnntc. La rncrga liberada en lai diferentes reaeciunca aiopladiis rii sislenias c~irimtiros puede scr utilizada en la forinariri dc conipueslos ricos eii energa ienio el ATP.

Glucosa
~

;l

Glucosa 37 ' C

ATP
~-:~:'

6C0, + 6 H 2 0

~~~

ATP
~~
~~~

+ -, ,
60,

' h

-+ 6H,0

Reacciones de bid16lisiF
La cantidad de energa que se lihera rn las reacciones de hidrlisis depende dela diferencia entre el contenido energtico de los rvactantes y el de los productos, y a su vez, el contenido energtico de un compuesto depende de su estructura nioleciilar. Analicemos la energa que se lihera en la hidnilisis de los enlaces en los que est involucrado el fosfato. 1.a energa lihre que se ohtiene en la hidrlisisde los enlaces fosfato de cualquiera de los coinpuestos de la tahla 37.1. puede ser cedida para la sntesis de alguno de los compuestos situados por debajo de aqul siempre que exista la enzima que permita el aioplamient~~ correspondiente. Tsbla37.1. Enerxa libre obtenida por ILIhidr(i1i.si.sd e los enlaces ricos en energa ((Gen kcalnwl-'1 Compuesto
cida fosfu-eniilpirniw

Energa
-14.8

Cabaniil-fiafato Creatina-fifatii Pirofusfatu ATP o Al>P <:lucwa-1-P Glucusa-6-P

-12.3 - 10.3 - 10.0

-7.3

.5,0 -3.3

Por ejemplo, la hidrlisis del cido fosfo-enolpirviio se acopla a la sntesis del ATP en una reaccin catalizada por la enzima piriivico quinasa. El componente exergnico del acoplaniiento es la Iiidr6lisis del primer compuesto mencionado, y el componente endergnico es la sntesis del :t'l'l! E 1 el centro activo de esta enzima se 1 produce el reconocimiento, y ocurre la ratlisis.
cido P~eiiolpinjvic~? + ADP
A

cido pinvico + ATP

Puditramos tamhin pensar en la hidrlisis de la fosfocreatina acoplada a lasntesis dela glucosa-1-P. Aunque en este ultimo ejemplo la energa liberada es suficiente, la enzima no existe en los seres vivos y, por ende, esta reaccin no se produce en ellos. La posicin intermedia del ATP, en cuanto al valor de su energia de hidrlisis, posibilita que ella sea un intercamhiador energtico entre molculas que estn por encima, en cuanto a la energa que contienen, y las de menor contenido energtico.

Energa de hidrlisis del ATP Analiceuios brevemente los factores queintervienen en laenergaqueseliberaen la hidrlisis del ATP. Los enlaces cuya Iiidrlisis libera ms energa son los enlaces anhdrido fosfricos.La liberacin de energa ocurre cuando en los productos aumenta la carga elctrica; este factor,a su vez, produce mayor solvatacin. Tambin debemos tener en cuenta la estabilidad de los compuestos que entraron a formar parte de la reaccin, que en este caso es niayor en los productos debido a las posibilidades de resonancia del fosfato. Como factor importante, en el ATP,se encuentra la inestabilidad debida a la cercania entre las cargas negativas de los fosfatos qne se repelen, y la cual disminuye en los productos de la hidrlisis, adems, el nmero de productos es mayor que el de reactantes.
Adrnosina -O-

6 8 6

b- O- &-

O-

b-O

Adenosina -0-

4-

O-

Recordemos que la reduccin de una molcula implica adicin de electrones, mientras que la oxidacin trae como consecuencia la prdida de ellos. En los organismos vivos, las reacciones de oxidacin-reduccin -o reacciones redox- producen frecuentemente traspasos de hidrgeno u oxgeno. Si una molculase oxida puede perder hidrgeno o ganar oxgeno y, por el contrario, al reducirse se puede ganar hidrgeno o perder oxgeno. Otra caracterstica de estas reacciones es que en ellas, por lo general. participan 2 sustratos; uno de ellos se oxida a expensas del otro, que se reduce, lo que es otro tipo de acoplamiento. Las reacciones redox siempre se acompaan de cambios energticos. En el siguiente ejemplo, al pasar 2 Iiidrgenos -2 protones ms 2 electrones- del cido succnico al FAD, y transformarse ste en FADH,, ocurri la reaccin redox; el FAD se redujo, el succnico se oxid. Parte de la energa pasa como potencial de reduccin al compuesto FA'ADH, y parte se pierde como calor. COOH
1

FA D

FADH?

H-C-H
1

,
7

CoOH 1 C -14
11

H-C-H
1

H-C

COOH
cido succinico

COOH
cido furnnco

El estudio de las cantidades de energa que se liberan en este tipo de reacciones se llevar a callo en un captulo posterior (captulo 39); hstenos conocer ahora que estos caml~ius electrones alteran la estructura molecular y, por ende, su contenido energde tico. Al igual que en las reacciones de hidrlisis, la energa que se libera va a depender de las diferencias de carga elctrica, solvatacin, estabilidad, posibilidades de resonancia e impedimentos estricos entre sustratos y productos. En las reacciones redox tambin intervienen las enzimas y, frecuentemente, uno de los componentes de estas reaccioneses iin cofactor que funciona en el transporte de Iiidrgenos -protn mselectrn- entre esa reaccin y una posterior. En el ejemplo que aparece a continuacin se observa como el NAD'se reduce a NADH, mientras qiie el otro sustrato de la enzima queda oxidado. Este pudiera ser un esquema simplificadode cualquier reaccin redox de derivados protenicos, glucidicos o lipdicos. El destino de los NADH puede ser diferente,segn observanios en la misnia figura; o sil potencial de reduccin es utilizado en otras reacciones, fundaiiientalniente I>iosintticas,despus de ser transferidos los hidrgenos al NADP', o bien es utilizado en la formacin de ATY.

NAD'

Cadena respiratoria ( forinaci6n de ATP )

o
Producto

,/"
. .

NH?

.
+DAN

NADPH (Biosnteiis )

NADP'

Cambios energticos en la reduccin de1 NADi

Si comparamos en la figura anterior el NAD' con el NADH podremos percatarnos de las diferencias estructurales, las cuales nos explican las diferencias de energa entre ellos. Varan los enlaces del anillo y el grado de hidrogenacin -quese nianifiesta en su enlace con el hidrgeno-, se producen cambios de resonancia en el anillo y en la solvatacin, ya que dc ion positivo que era se convierte en una molcula neutra, y al liberarse un protn hay camhios en el nniero de las partculas. Como cada enlace tiene una cantidad de energa asociada,esto determina una diferencia neta de energa entre las 2 fornias de este cofactor.

En 1894, I l t n ~ a n denominb bioblastos a cstos organelos. Ms adelante,en 1897, Benda us su nombre actual, por primera vez. En 1913, Otfo Warbirrgencuentra que

+H

K
NADH

las enzimas respiratorias estn asociadas a estas partculas, pero no fue hasta 1934,en que Bensley y Hoerr llegaron a aislarla, que se pudo avanzar realmente en el conocimiento bioquinico de este organelo (Fig. 37.6).

Hornogeneizacin en medio isot6iiico (rotura de cklulas)

Precipitado (ncleos y Ir-apnientos

Sobrenadante

Resuspeiisi~iiiy cciitrit'ugaciii en gradiente de dciisidad

Fip. 37.6. Csqiirma de nislaniicnto <Ir iiiia fraccin rica cn niitoconrlriar. Se rorihiiia la reiitrifugaci6ii difereiic i d ruii la rrnti.ifiip8iiUn e n gradiciitci de dcnsidarl.

Por ltiino, en 1948 G. H. Hogehoom y colaboradores demuestran su papel en la respiracin celular. La mitocondria es un organelo vesicular que no pertenece al sistema de las endomembranas. Consta de 2 membranas: la externa, que la recubre por completo; y la interna, que se repliega en su interior en forma de crestas. Entre anibas memhranas se encuentra el llamado espacio intermeinhranoso, y al material que queda dentro de la membrana interna se le denomina matriz (Fig. 37.7). El tamao, forma, volumen, distribucin y orientacin celular de las mitocondrias vara continuamente, en dependencia del tejido y de su actividad funcional. Su tamao promedio es de 2 pm de largo por 0,s de anclio. Por medio de iina ruptura suave con detergentes y centrifugaciones alternas, se han logrado separar las 2 nieniln-anas y el contenido de los diferentes espacios niitocondriales en diferentes fracciones (Fig. 37.8). Una vez separadas, puede analizarse la coniposicin de cada una de esas fracciones y la presencia de enziinas que pertenecen a procesos especficos. En cuanto a su composicin protenica se Iia visto que la porcin mitocondrial nis rica en protenas es la membrana interna (tabla 37.2).

'

Meiiibriina externa Espacio iiitei-rnerribranoso Menibriia interna Matriz initocoiidrial Crestas

I'ig. 37.7. Esqirenia dc una mitocondria. Se ampla el esquema de una parte de I;i nienil>raiiapara iiieslrar la doble menihrana, la doble capa lipidica de cada una, el espacio interni~nibi.;mary el grwor de estas porriunrs.

Mitocondrias aisladas Tratamiento con deterpites (ruptura de Iii iiiembraiiii externa) Centrifueacicii

l
Fig. 37.8. Esquema dc separacin de las mcnihranas miterondrialea. Se
ernplra la tcnica de la centrifugaii6ti diferencial. Una v r sepac radas, puede analirarce s u rontenido.

Memhriinas externas Tratamiento con detergentes ruDtura de las rnemhranx internasi

(enziinas del espacio interiiiembraiias)

Membranas internas (compoiientes de estas membranas)

Tabla 373. Coniposicin lipdica y proteira d e las rriembraria.s rnitocondriales" Membranaexterna Protena Lpidm Oh-m Menibrma interna

La niembrana interna es muy rica en un fosfolpido, el difosfatidil glicerol o cardiolipina (captulo 13), que representa el 10%de todos los fosfolpidos que aqulla contiene. La cardiolipina, a tales concentraciones, hace inipernieable la membrana interna, impidiendo el paso decasi todos los iones y de la mayora de las molculas sin carga. No ocurre as en la menibrand externa, que es permeable al paso de iones y mol6culas menores de 10 000 dalton. En el cuadro 37.1 puede verse la localizacin de diferentes procesos metablicos.
Cuadm 37.1. Localizacin de algunas protenas mitocondriales

Localizacin

Protenas mitocondriales Monoaniino oxidas, protena^ de los canales, enzimas del metabolismo de lpidm, acil COAsintetasa Adenatoquinasa, nucl&id<i difosfataca Pmtenas de la cadena del transporte electrnico, ATPsinxsa, carnitina-acil-tnnsferdw, pmtenas hansportadoms Enzima del ciclo de Krebs, enzimas de la oridxin de cidos grauis

Estos procesos se detectan al hallarse localizadas las enzimas especficas de cada uno en la fraccin mitocondrial analizada. En el cuadro 37.1 se puede ver la localizacin de algunas de estas protenas mitocondriales, cada una de las cuales tiene una funcin especfica. Estas funciones se examinarn cuando se estudien los diferentes pruccsos metablicos. No obstante, algunas de estas protenas, los sistemas transportadores, requieren un estudio previo, ya que es necesario conocerlas antes de presentar, en los prximos captulos, el proceso bioenergtico celular.

Sistemas transportadores de la mitocondria

Entre los transportadoresde intem generai seencuentran las laniaderai de hidrgenos,el transportador de ATP-ADPy el del fosfato (Pi). Hay otms tamhin iniportantes, como los del cido glutmico, el asprtico, los cidos tncarhoxilicos, el cido piruico, el cido P-enol p i ~ v i c o el Ca". y

Transporte de hidrgeno
Las molculas que transportan el potencial reductor, entre diferentes sistenias enzimticos, son los cofactores de oxidacin-redoccin. estudiados en el captulo 19. En alguna reaccin del cataholismo, el cofactor se reduce, y los hidrgenos que porta son cedidos en otra reaccin posterior. La mayora de los cofactores de oxidacin-reduccin que participan en el cataholismo son sustratos de los transportadores de electrones de la cadeiia respiratoria, la cual est localizada en la niembrana interna de la mitocondria. Debido a su peso niolecular, los cofactores no pueden atravesarla, pero existen mecanismos que permiten el paso de los hidrgenos que aqullos portan. y una vez atravesada la membrana iuterna,son incorporados de nuevo a cofactores redox que se encuentran dentro del organelo. Estos mecanismos son los siguientes: l. Lanzadera del glicerol fosfato. Un transporte mitocondrial (le Iiidrgeno es la lanzadera del glicerol fosfato encontrado en los msculos de vuelo de los insectos. Los hidrgenos son transferidos del NADH a la diliidroxiacetoiia-fosfato, coiivirtindose sta en glicerol-fosfato,el coa1 es incorporado a la niatriz por una protena transportadora especfica. Una vez en la matriz ocurre la reaccin inversa, pero los hidrgenos quedan incorporados al FADH.. El sistema enzimtico que interviene en la reaccin citoplasmtica y mitocondrial, toma el mismo nonihre, la glicero-fosfato deshidrogenasa, pero son diferentes protenas. La ventaja hiolgica de que el sistema intramitocondrial tenga corno aceptor de hidrgenos al FAD en vez de al NAD', hace posible que aun con altos gradientes de NADH en la niatriz mitocondrial, los hidrgenos puedan ser internalirados. Este sistema de lanzadera es unidireccional (Fig. 37.9).

CH,OH
1 1

H-C-OH

-..

+H - 7 - O H
CH,OP Glicerol - @ Lado mitocondrial

CH20P Glicerol-

Lado citoplasmtico

Fiz. 37.9. L a n ~ a d c r a hidrgenos del de glicerol-forfatii. L a glicen>l-fosfate d~shidrogenasa ritoplasrnitirn ticne contu cofacto'r al NhU*,niientras que el de la niitocondria utilira FAD. 1.8 entrada de hidrgcnos sc favorece al aumentar la relacin [VAI>H/NAI>*en el citoplastria.

2. Lanzadera del cido miico-asprtico. Otro transportador de Iiidrbgenos, en mamiferos, es el sistema de la lanzadera de los cidos mlico-aspirtico, que corista de 2 transportadores de membrana y 4 enzinias (Fig. 37.10). Este sisteiiia, a diferencia del anterior, es bidireccional. A mayor concentracin de cofactores reducidos en el citosol, se desplazan al interior de la mitocondria ms Iiidrbgenos, por intermedio de los compuestos que intervienen en esta lanzadera de hidrgenos, y viceversasi la concentracin de cofactores reducidos es mayor dentro de la ntocondria. Como se observa en la figura, en el lado citoplasmtico de la membrana, los Iiidrbgenos pasan del NADH al cido oxalactico, formndose el cido mlico. Este es transportado a travs de la membrana; una vez dentro de la mitocondria sucede lo contrario, y los hidrgenos quedan de nuevo en el NADII. El cido oxalactico no puede atravesar la membrana, ya que no existe transportador para este compuesto, sin eml~argo,el cido asprtico s lo tiene, por lo que el cido oxalactico se transforma en cido asprtico, y vicecersa si es necesario, por niedio de una timwninasa. cido U-ceto glutrico cido glutmico cido oxala~t3ico NADH cido aspi~ico cido -as@]-tico cido a-cetc elutrico cido glutmico

vS-

cido oxalactico NADH

H'\S
Lado citoplasmtico Lado miiocondrial

H '

Tkmporie de ADP-ATP
La niayora de los procesos endergnicos que utiliza al ATPse encuentran situados fuera de lamitocondria, y yase habasealado que la mayor partedel ATPse sintetiza en este organelo. El ATPy el ADPson 2 de loscompuestos que no atraviesan la membrana interna. Existe un transportador especficopara ellos: el iiitercambiador ATP-ADP. Esta proteina es un diinerode subunidades idnticas de 29 D, y comprende el 6% de toda la proteina de la nieinbrana interna initocondrial. El intercambio es electrognico, pues entra A D P y saca A W .lbte traupwest regido porelgradiente de ATPy el de protones (H'). El iiitercamhiador A'1.P-ADPes inhibido por el atractilsido y el cido boiigcrquico.

Para quelasintesis intrmitocondrial de KWse lleve a caho se requiere la presencia de ADP,pero tanihin de Pi. No se conoce niucho acerca de este transportador. Segn algunos investigadores, el Pi se intercambia cuando el transportador de los cidos dicarbosiicos transporta uno de estos cidos: cido mlico, cido succnico cido fimiiico. Otros invtstigadores sefialanqueel Pi es intercambiado por OH-.Pero la teora que gana nis adeptos S la que dice que es transportadocon un simpnrte. As vcnios como el gradientede protones creado por el transporte deelectrones (captulo39)es el responsable de la entrada tanto del ADP comodel Pi utilizadosen la fosforilacibn midatisa. El1 la figura 37.1 1pueden verse esquemas de ntos ltimos transportadora que deicribimos.

638

R~crq~itrnica Mdica

Membrana externa

Mernhrana externa

ADP-'

ATP~'

H'

cido pirvico

H.

pi - ?

Fig. 37.11. Sistmias de transporte mitorondrial. a) El iiitcrcaiiiliio i\TP-r\Dl'. b l III transporte del 6rirlo pirviw. cl El transporte de Pi.

Como veremos en el captulo 38, el Ca" es un regulador importante del ciclo de Krebs y tambin lo es de la contraccin muscular (capitnlo66). Al igual que el retculo endoplismico, la mitocondria mantiene las concentraciones de este ion en el citoplasma; ambos sirven de tampn de Ca'+c,. En la mitocondria, este ion tiene 2 transportadores, uno para su entrada y otro para su salida de este organelo. El de salida es un antiporte con Nab.Funciona siempre e independientemente de las coiicentracioiies de Ca"ci,. Se ha observado la existencia de este transportador fuiidaiiientalmcnte en el msculo, corazn y cerebro. El transportador de entrada est replado por su Km para el Ca" y por el potencial electroqumicode lamembrana (deltapsi). Como la Km del transportador para el Caz+ es mayor que las concentraciones de este ion en el citoplasma, su entrada depende del aumento de las concentracionesen el citoplasma.En lafigura37.12 podenios ohsewarlar cambios netos deentrada y salida dedicho ion en dependencia desus concentraciones.

1 1 1 1 1 1 1
I

Entrada de caz'
4
1

1 1 1 1 1
1

!A

1 1

Salida de caz+

Ilg. 37.12. Grifica del pasa dc Cd' por sus 2 transportadores mitucondi-iales. La acti\idad del transportatkir de salida es iiiilepriidieiite de las ronreiitrarieiies de C.'' ritoplasnitiras. Sr indica, en las iirdcnatliis, la actiddad de este traiispertadw. El de entrada s i depende iIc las ronccntrxiunc) eitoplasoiiiticac de este ion. Si se r e t a la actividad de aiiil>os transportadores para tina
[CiPld, determinada re puede ohtener la salida neta para crte ion ldrlta I I o su entratla (delta ,l neta.

1
1
1

1.10

[ ~ a ? ]( M )~ ~ ~

Biognesis de la mitocondria
La mitocondria se forma con el aporte de 2 sistenias de informacin que son: el genoma mitocondrial, que slo aporta la informacin de un reducido nmero de protenas, y el del ncleo celular, que contiene a1 resto. Existen complejos enzimticos mitocondriales en los que algunas de sus subunidades provienen de protenas sintetizadas en el citoplasma, y otras son de origen mitocondrial. El ADN mitocondrial es de doble banda y circular. Existeun solotipo de ADN por especie, pero pueden haber varias copias de l en una mitocondria, dispersas por la matriz y asociadas con la membrana interna. El ADN mitocondrial no est asociado con historias. En los mamferos, su peso uiolecular esde aproximadamente 11 000 000 de dalton. La secuencia del genoma mitocondrial del ser huniano seconoce en su totalidad; posee 16 569 pares de hases, y se ha estudiado la informacin contenida en l: 2 genes aportan la informacin para 2 tipos de ARN ribosomales, 22 genes codifican los 22 ARN, mitocondriales y 13 genes codifican protenas. A diferencia del genoma mitocondrial de levadura, el del ser humano no posee secciones no codificantes. En el ser huniano, la niayora de los segmentos codificantes de protenasse localizan en una de las bandas del ADN: los genes para los ARNt,en amhas bandas por igual. Las 2 bandas se transcriben completas a partir de promotores nicos en cada hebra, y se forma un ARN nico de cada hebra,luego 3 enzimas los procesan. En la figura 37.13 pueden verse cules son los genes que codifican rara protenas.
cit

ARN,

15s
1

ARN, 2IS

CoQ reducissa

...... . . . . . .

.>h. 11. ..............

>h. ii

sh. u

sh. u 3

sb. u 2 sb. u 6 sb. ii 8

7b.F
'

'.

ARN

Ci~cronii> oxidas

'. . .

~it&oino oxidas

~ T asa P

Fiz. 27.13. Gene5 de las proiciiar rodilcadus por cl gcnoma niitucondrinl huniano. lnlcrraladns cnlre las srruencias que coditirnn para las protenas y para los RNA+ se eniiicntran las srriienrias que codifican les RNA,. l a d o s los genes, menos una subunidad de la CoQ
reilurlmi 1 X K M , ,ar transcribrn a favor dr las nianecillas del reloj.

Con los 22 ARN, de la mitocondria, a diferencia de lo que ocurre en el citoplasma, que posee 31 ARN,, e lleva a cabo la traduccin, pues muchos de los ARN, reconocen en la tercera posicin a los 1 nucletidos. Adems, el cdigo gentico mitocondrial difiere, en algunos tripletes, del celular (cuadro 37.2). La codificacin de las enzimas requeridas para la replicacin, transcripcin y traduccin la aporta el ADN nuclear. Las caractersticas de la traduccin recuerdan ms a las de los procariotes que a las de

640

Rinqirmira Mdica

los eucariotes. Dado que en los mamferos el espermatozoide no aporta componentes citoplasmticos, los genes mitocondriales se heredan de la madre.
Cuadro 37.2. Coniparaciri del significado de triplefes del cdigo gentico univer~al y niitocondria

Triplete

Lectura en el cdigo universal linal ile

orC

Lectura en el cdigo mitocondrial

hi

UGA AUA AGA y AGG

met de iniciacin
final

La mayor parte de los Ipidos son importados. Se sintetizan en el retculo endoplsmicode la clula, y las protenas de transferencia de fosfolpidoslos transportan a la membrana externa mitocondrial. Las protenas de transferencia de los fosfolpidosson hidrosolubles. Cada protena reconoce slo un tipo de fosfolpido. Se cree que de allse transfieran a la membrana interna por los puntos de adhesin existentes entre las 2 membranas. Estas adherencias entre la memhrana extenia y la interna son visihles al microscopio electrnico, y se cree que en estos sitios se lleva a cabo el transporte tanto de protenas, como de Ipidos con destino a la membrana interna y a la matriz. El fosfatidil diglicerol, cardiolipina, sse sintetiza en la mitocondria. La mitocondria se divide, por lo regular, una vezen cada ciclo celular. La membrana externa comienza a inuaginase de forma circular, el surco se hace cada vez ms pmnunciado hasta producise la separacin en 2 partes aproximadamente iguales (Fig. 37.14). Esta divisin presupone una previa duplicacin del ADN mitocondrial, quese ha visto ocurre a lo largo del ciclo celular, y no en la fase S del ciclo celular (captulo 24).

- . . . ! .. . . .. . ',, . . < 1 L.

, .. *
:
,.

1 .

'

,-

Surco
iiig. 37.11. I>ivisien de la rnitocundria. Se elisirra el surco circular producto de la invaginari6n de la iiienibrana externa.

IIiinsporte de protenas a la mitocondria

Las protenas cuyo destino es mitocondrial (Pr-Mit), tienen en su extremo amino terminal secuencias, de 15a 70 residuos, ricas en aminocidos I>sicose hidroxilados. Estas secuencias nointeractan con el receptor de seal de protenas que se encuentra en el retculo endoplasmtico rugoso, sin emhargo, s interactan con protenas chaperonas, en este caso la Hsp 70 Heatshockproteinde70 D. Al unirse la Pr-Mit a la Hsp 70, sta mantiene desenrrollada a aqulla y ai es reconocida por un receptor de la membrana mitocondrial. En la mitocondria, la protena unida a la chaperona es reconocida por un receptor que est acoplado a un canal situado en puntos deunin entrela membrana interna y externa mitocondriales. La .secuencia N terminal de la Pr-Mit entra por el canal y varias protenas la entran y la alan a la matriz con gasto de energa. Una vez dentro de la matriz, la Pr-Mit se vuelve a unir a una Hsp 70 y a continuacin es traspasada a otra chaperona, la Hsp 60. Todos estos pasos se realizan con gasto energtico, pero adems la protena se ha mantenido desenrollada. La Hsp 60 es una protena compuesta por 14 subunidades organizadas en 2 anillos que dejan una cavidad central en la que pueden penetrar protenas hasta de 90 D. Dentro deesta chaperona, la Pr-Mit adquiere, por ltimo, su conformacin final y sale con gasto energtico (Fig. 37.15). Si el destino de la Pr-Mit no es la matriz, sino la membrana interna o el espacio intermembrauas, estas protenas siguen este mismo proceso anterior, dirigidas por secuencias amino terminales; a veces poseen 2 seales, una a continuacin de la otra en el mismo extremo. Una peptidasa mitocondrial hidroliza estos segmentos. Luego de entrara la matriz,se integrara a la membrana interna o la traspasara paracaer del lado del espacio intermembranas.

Fig. 37.15. Transporte d e protenas mitiicondrialw del citoplasma a In niitocondria. al La protenase sintctiza y sc une a la llsp 70 sil) adquirir sin conformacin tridimensionsl. h ) La protena mitocmdrial es reconocida por el reecptor nlitocundrial, ) sc interna por cl caiial. e) La protena cs alnda al interior, con gasto de cncrga, mediando varias prt,teiias d e la matriz. d ) Se U ~ a una C Hsp 70 niitoiondrinl. e ) Se inlruducr en cl espacio de la Hsp 61) y aqu adquicrc finulinente sir ronformacin. fl Al salir de In HSP 60 se dirige a su Iocsliraeibii definitiva.

Hsp 10 14 ADP Hsp 60 ( 14 ADP) +14Pi ATP

Hsp 70

'

,-... .

,:.
. .

Hsp 10
I
m

ATP ATP

ATP
. . .

ATP
,

ATPA{ T

\ATP

ATP Hsp 60

Ii.ausporte del citoemmo c

El citocromo c constituye una protena soluble en solucionesacuosas, y su localizas cin mitocondrid e el lado externo de la membrana interna. El citocromocse sintelb en cl citoplasma celular como apocitocromo c, y sigue la misma ruta descrita antes. Esta protena no tiene una seal que posteriormente a su localizacin se hidroliza, sino que es parte de su propia estructura. No es hasta quese encuentra en la cara citoplasmticade la rneml>ranainterna que le es incorporado el grupo hemo por la cit c hemo liara.

Esquema global de obtencin de energa por la cluia

Los nutrientes pueden tener un origen exgenoo endgeno. Los primeros ingresan al organismo con la dieta, son hidroliaados en el tubo digestivopor las enzimas y dan como productarsw monmeros constituyentes.stos se absorben por la mucaia intestina1,son transportados por lasangre y asllegan a las diferentes clulas del organismo. Los segunpor dos, son eudgenos, resultan hidrolii~dos las enzima lirosumales y los otros sistemas hidrolticos celulares y siis precursores; se prnducen intracelularmente.
Formacin de los metabolitos comunes
Los precursores de las macroniolciilas de origen alinientario. o los provenientes de la propia clula, y las otras pequeas molculas forman el poolde bioniolculas
642

I\iqfwk~i MMWR

-aminocidos, monosacridos y cidos grasos, fundanientalmente- que irn transformndose cada vez ms en compuestos comunes: el acetil-COAy ciertos intermediarios del ciclo de los cidos tricarboxfiicos o ciclo de Krebs. Estos procesos ocurren, fundainentalmente, en el citosol y, en parte, en la mitocondria. Los glcidos y los triacilgliceroles se transforman en acetil-COA,y tambin algunos de los aminocidos de las protenas; los otros aminocidos se convierten en cido pirvico o intermediarios del ciclode Krebs (Fig. 37.16).

Fig. 37.16. Esquema global d e ohteiiriii de enri-gi;i por la clula. Se representa cs<~iieiiiiiraiiienIc r o n rl partiriicntii citoplasiiitico <Ir una r6lula y iiiia niitocaiidria. [>arte de &la aumentada de taiiiaiio y, n s u X P I , aiiinentada de lamaii parte d r In iiieiiihratia interna. I.as fle,. '1s. cireiiliris en lii iiiat~iz representan cl ciclo d e t i r c l m LOS cofartores redimidos. crin el o+ geno en la niciiihraiin intri-tia. soii lor Iireciirsurcs del iigiis. 1 la energi.1 quese libera cn csfas rcaicioncs s r utilira rii la forinnriiiii dc ~ATI'.

En estas transformaciones -de los precursores a los metabolitos comnnes- se forma, aproximadamente,una tercera partedel total de los cofactores reducidos y de los ATP . . que se producen en todo el proceso catablico de estos compuestos hasta CO, y H,O.

Va degradativa nal comn: respiracin celular

Esta ocurre en la niitocondria, parte en la membrana interna y parte en la matriz niitocondrial. La respiracin celular comprende 3 procesos: el ciclo de Krebs, la cadena transportadora de electrones y la fosforilaciii oxidativa. Al conjunto de los 2 ltimos procesos se le denomina cadena respiratoria. El sistema de la fosforilaciii oxidativa (eodergnico) es el proceso enzimtico formador de los ATP y est acoplado energticamente al transporte electrnico (exergnico)(Fig. 37.16). Se considera que la localizacin del ciclo de los cidos tricarboxfiicos es la inatrii mitocondrial, ya que la mayor parte de las eiizimas de este proceso se hallan en este compartiniento. La cadena respiratoria se locilliza en la niembraiia interna. Como piidimos ver en la figura 37.16, los prodiiclos finales del ciclo de Krebs son CO,, una molcula de GTP-que equivale a un ATP- y cofactores reducidos. A su vez, los cofactores reducidos son los siistratos iniciales de la cadena transportadora deelectrones. El aceptorfinal de los electrones es el O,, que transportado por la Iienioglobina difiinde a la clula y a la niitocondria a travrde todas las nieml>ranas

debido a su tamao. La reduccin del O, favorece su nnin a los protones y se forma agua. Perode nmcha mayor importanciaes la formacin de las molculas de ATP. Al existir sistemas enzimticos acopladores, se aprovecha la energia que se lihera en el transporteelectrnico,y se llevan a cabo las reacciones endergnicas de sntesis de las molculas ricas en energa. De esta formase comerva,cn las niolculas de ATP, parte de la energa que ingres en el organismo mediante los alimentos. Este proceso desntesis de ATP, que se realiza acoplado al transporte electrnico, se denomina fosforilacin oxidativa.

Fosforilaciones a nivel de sustratos y las fosforiiaciones oxidativas Para establecer una distincin entre el proceso desintesis de los ATP, formados en reacciones acopladas a la cadena respiratoria, que requiere O, como aceptor final de este proceso y que se denomina fosforilacinoxidativa, se conoce como fosforilacin a nivel de sustratos a los ATPque se forman sin la intervencin de la cadena respiratoria. Las fosforilaciones a nivel de sustratos ocurren en reacciones catablicasdel proceso degradativo de protenas, glcidos o lipidos. El CI'P mencionado con10 producto del ciclo de Krebs se forma por una fosforilacina nivelde sustrato.

Resumen
Mltiples procesos que ocurren en los organismos vivos requieren un aporte energtico: la contraccin muscular, el transporte de sustancias a travs de las membranas, la trasmisin del impulso nervioso y los procesos de biosntesk. Las necesidades energticas vm'an de un individuo a otro, en dependencia de factores como la edad, el sexo y el ejercicio sico. Como donantes de energa en estas pmcesos endergnicos est el ATP, cuya energa de hidrlisis puede llegar a 12 kcal.mo1-l in vivo. Esta molcula, a su vez, se forma a parr de la energa que se libera en la oxidacin de Upidos, glcidos y protenas. La mxima cantidad de energa se obtiene cuando estos compuestos se degradan totalmente a CO, y H,O. El acoplamientoentre reacciones exergbnicas y endergnicas es posible debido a la existencia de enzimas que reconocen y W o r man, en su centm activo, los componentes involucrados en ambos procesos. Al comienzo de su degradacin, las m t a son espeecas para cada compuesto; cada ~ vez ms aqullas contluyen y, nalmente, se conforma una mta nica, comn para los catabolitasnaies de los 3tipos de compuestos. En esta tercera porcin de la va es donde se conserva la mayor parte de la energa; esto ocurre en la mitocondria, en el proceso de la respiracin celular, y comprende el ciclo de los cidos tricarbodieos y la cadena respiratoria, formada esta ltima por la cadena transportadora de electrones y la fosforilacin oxidativa. La mitocondria es un organelo vesicular formado por una doble membrana, en la que se encuentran protenas de superficie e integrales. Esta estmctura est mpartimentada deforma que en cada una delas membranas y espacios podemos loeazar enzimas propias de diferentes procesos. En la matriz, que es el espacio interior, se localiza el ciclo de Krebs, y en la membrana interna, la cadena respiratoria La membrana interna es impermeable a iones y a essi todos los compuestos sin carga, pero existen sistemas transportadores que obvian esta situacin. La mitocondrh se forma, fundamentalmente, con la informacin gentica nuclear, pues el genoma del organelo aporta la informacin de muy pocas protenas y cidos nucleicos. Las protenas que se forman en el citoplasma celular se incorporan a las diversas localizaciones mitocondriaies por medio de transportadores de protenas.

En la matriz mitocondrial ocurre la ltima etapa de la oxidacin de los nutricutes, aqulia comn a gieidos, pidos y protenas. En el ciclo de Krebs s conluyen los metabolitos comunes y e donde, a parr de ellos, se forman los CO, y los cofadores reducidos. stos, a su vez, son los sustratos de la cadena respiratoria, sistema energtico acoplado, formado por la cadena transportadora de electrones -componente exergnico- y la fosforilacin oxidativa -componente endergnico. E1 0, es el aceptor nal de electrones de la cadena respiratoria. Al paso de los electmnes por sus complejos parte de la energa se conserva en molculas de ATP.

Ejercicios
1. Represente la estructura de la sacarosa y la del cido graso formado por 12 carbonos. :Cul de los 2 tiene un grado de oxidacin mayor? Halle el cociente respiratorio que se obtendra si a un animal se le alimentara solamente con sacarosa o con dicho cido graso. 2. Diga si es posible y explique: a) Puedeser utilizada la energa de hidrlisis de la glucosa--fosfatoen la sntesis de ATP? b) puede utilizarse la energa de Iiidrlisis del ATP en la sntesis del glicerol-3-fosfato? c) :Y la energa de la creatina-fosfato puede utilizarse en la sntesis del ATP? d) ;Puede usarse la energa del pirofosfato (Pi-Pi)en la sntesis de la glucosa-6-fosfato? 3. Con los datos de la tabla 37.1 represente un acoplamiento eiiergttico y describa cmo intervienen cada uno de sus componentes. 4. Se observa a continuacin la reaccin de un acoplamiento redox. Basndonos en los conocimientos adquiridos, cul es la funcin de cada componente?

5. ;Cmo intervienen las mitocondrias en el proceso de ol>tenciude energa por la clula? 6. .Influye el tipo de alimento que se ingiera, en la cantidad de energa que pueda obtenerse de l en el proceso catablico del organismo? Explique. 7. Cul es la diferencia entre la fosforilacin oxidativa y la fosforilacin al nivel de sustrato? Busque algn ejemplo no niencionado en este captulo. 8. Cmo se sintetizan las enzimas que participan en los procesos mitocondriales'! Explique. 9. Busque la estructura de la cardiolipina. Por qutcree usted que su abundancia en la membrana interna de la mitocondria sea la que le confierapropiedades diferentes en cuantoasu permeabilidad con respectoa la membrana externa? 10. Tiene importancia el hecho de que la fosforilacin oxidativa y el transporte electrnicose encuentren en la menihrana interna de la initocondria? 11. ;Qu papel desempea el transporte de hidrgenos niitocondriales en la obtencin de energa en la clula? 12. Qu papel desempea el traslocador ATP-ADPen la obtencin de energa?

Conocemos, por el contenido de los captulos anteriores, qne los orpanisnios oxidan los nutrientes y obtienen de stos la energa necesaria para la realizacin de los procesos endergnicos. Algunos de estos organisnios, denoniinados anaerobios, realizan la funcin de oxidacin sin la participacin del oxgeno. Otros, los aerobios, utilizan el oxgeno como aceptor final de los electrones. Los organismos aerobios, a diferencia de los aiiaerobios, extraen mayor cantidad de energa de los nutrientes, y es porque los prinieros los oxidan completaiiieiite transformndolos en CO, y H,O; mientras que en las ctlulas anaerohias, en dependencia del tipo de organisii;o, e~-~ro<lucto de la degradacin, por ejemplo en los final glcidos, slo llega hasta cido lctico, cido actico, etanol u otros. La degradaciii anaerobia es un catabolisiiio poco eficiente si tenemos en cuenta que en la okidaciii conipleta hasta CO, y H,O, de 1mol de monosacrido -por ejemplo, la glucosa- se forma casi 20 veces ms kWqiie en su degradacin anaerohia. Esta mayor capacidad se debe, fundamentalmente, a la existencia de procesos como el ciclo de los cidos tricarhoxilicos v la cadena respiratoria en la va aerohia. El ciclo de los cidos tricarboxlicos. tambitn llamado ciclo del cido ctrico o ciclo de Krebs, es la va degradativa final tanto del nietaholisino de glcidos conlo de los aminocidos y cidos grasos. Esta va no s61o interesa por su participacin en la oxidacin de estos coiiipuestos, sino porque adems, es una va de interaccin con niiichos otros procesos, anahlicos o catahlicos, del metabolismo de los glcidos, protenas, cidos nucleicos, porfirinas y Ipidos.

Historia
El descubridor del ciclo de los cidos tricarboxlicos, Hans Krelx, se gradu de medicina en el ao 1925. Ms tarde continu sus estudios bajo la tutora de Ofto Warbiirg y Ottokle.verlioff, y fueron sus condiscpulos Oclioa. H N y WtzLipniann (captulo 1).En el ao 1932 da a conocer, junto con Kurt Henselait, su primer gran desciil>riniientobioqumico, el carcter cclico del proceso de biosntesis de la urea. En 1933se ve precisado a exiliarse en Inglaterra. donde realiza actividades como profesor e investigador, primero de la Universidad de Cambridge y luego de la de Sheffield. En este pcrodo es cuando plantea sn segnndo gran descubrimiento: el carcter cclico de la ltima etapa de las oxidaciones de los glcidos, pero adems dio a conocer el papel que desenipea el cido ctrico en este proceso. En honor a su descubridor, el ciclo lleva su nombre. Se necesitaron 5 aos de investigaciones, adems de los hallazgos de otros cientficos conteniporneos, para llegar al descubrimiento conipleto del ciclo de los cidos

tricarhoxiicos. Primero Krebs hall que los cidos ctrico, succuico, fumrico y actico eran rpidamente oxidados por algunos tejidos. Luego, Albert Szent-Gyoryidescubri que los anteriores cidos dicarboxlicos aumentaban la utilizacin del oxigeno en forma cataltica, es decir el te,jido consuma mucho ms oxgeno que el este<luiomtricamentenecesario para oxidarlos. Diversos investigadores descubrieron la secuencia desde el cido ctrico Iiasta el cido alfa-cetoglutrico; ya se conocan las transformaciones de este ltimo en succnico. Importante fue el descubrimiento de que el cido malnico inhiba la enzima succnico deshidrogcnasa. Al usarse este inhibidor se acumulaba el sustrato de esta enzima, el cido succnico. cido succnico

+ cido fiim2rico

Enzima: succnico deshidrogenasa Inhihidor: cido iiialnico Pero el conocimiento de que tambin se aciimulaba el cido succnico cuando se aada el cido fumrico -uue era su uroductn- fue lo uue ledio la clave a Kreiwde m e todas estas reacciones se encontraban formando un ciclo (Fig. 38.1).

~~~

~ ~

cido ctrico

cido isoctnco

cido
--A

a cetoglutirico

cido sttcchico
~-~~
~ ~ ~

cido
/ j w fuinBic<i

\ \

Succnicc deshidrgenasa

1
/

Por estos hallazgos, y porsu conbibucin al <IwrroUo cientco,en 19.53le fue concedido a &Os, jnnto con FnLip~nanrri, antiguo colega,el premio Nbel de Medicina y Fisiolngh su

Viin general del ciclo de Krebs

El ciclo de Krebs est localizado en la matriz mitocondrial, puesto qiie la mayor parte de sus eiiziinas se hallan en este compartimiento celular, y se produce, en los mamferos, en todas las clulas con niitocondrias. 1x1 est catalimda por ennnias y la mgula el potencial ene~tico ~ a celiilar. La va se compone de 8 reacciones; de gran significado biolgjco, por los cofactores reducidos qiie se forman,son las 4 reacciona de oxidacin-reduccin.Los cofactom reducidos son sushatosde la cadena respiratoriadondese hnnan los ATP, en dependenciadel potencial de reduccin qiie ellos aporten. E t s reaccionesmencionadas son la 3,J,6 y 8 de la figura .J Oha rea~xin sa %. de i m p u r t a n c i a e s l a 5 , n i l a q ~ ~ e s e f o m a C , T I ' I x , r u a f o a c i n ~ v e l d e ~Esunava 1to. cclica, porque el prducto final de la ltima reaccin, el cido oxaiactico (b),vuelve a ser sustratode la primera reaccin. Esta va globalmentees irreuerjible,aunque algunas dest~s reacciones y una pequea secuencia no lo son -rexciones 5,6,7 y 8. Su alimentador es el acetil-COA que proviene de la degradacinde aminocidos,Ipidos y glcidos. E1 gmpo (a), aceio,bicarbo~uido, oxida por pwgraduales en el ciclo de Krebs;como en cada welta del se ciclose f m . m 2 CO,, se pnede de5r que mi acei-COA sedegradaen cada vtielta del ciclo. lus otrosprodiictosdelavawnlos cofactoresreducidos. Adems, algunos inetabolilos del ciclo de Krehs participan en procesos biosintticos. As vemos, en la figura 38.3, que a partir de los intermediarios se forman aminocidos, bases nitrogenadas y otros compuestos.

(a)

H,-

nO -S-COA

HS-COA H- S

OOH

H ~ - C O O H ;OOH
1

COOH

-0H H1 OOH

(b)

H-+OOH

(c) (1)
H- - OOH H-C-COOH (c)

HO-4-COOH
H

(g)
(11)

(" COOH

FA D

O n ?->-COA H-y -H H I -H OOH

H-+-H
H1

C=<>

6
+ H'
+AD-

-H
OOH

NADH CO.

CO,

NADH

+ H'

HS-COA

a: aceiil-COA: h: dcido oxsliictico; c : icido ctrico: d: dciilo cis-itconiiico: c: cido isoctrico: T: & d o s cctu-gliit2rico: 0: siiccinil-CoA: 11: k i d o \riccinicu; i: &ido Sonirico: j: ci<l iiidlici~. Dcl h ) al j) son los iiieiahulitos iiiter!iicdianos del ciclo. I.ah criiiiiia.; del ciclo w n : 1: citrico \iiil;isa; 2: acoiiitsa: 3: isixiti-ico deihidropcnasa: 4: a-ceto-gliitil-ico dcshidrogen:isa: 5: succinil lioquiiiisa; 6:succnico dcshidi-ogeiiasn; 7: luiiiai-esa; 8: in;ilic-de~Iiidi-i~~cr~i~si~.

Fig. 38.2. Las reaecioiics del cielo dr los icidus tricarboxiliius.

Glucosa
~~~~

Acb cr .

cidos grasos

Aminocidos
+ -

cido oxalactico

Acido ctrico

cido inilico

""i
cido isoctrico

cido fuinirico

cido succnico
K

1 Succiiiil
Grupo hemo

COA

d
glutnco

cido axeto

/ ' \

\
Aminocidos
Fig. 38.3. 1';irtiripaciim <Ir los intermedia rios drl ciclo de Krrhs en los proresas Ihiiisiiit~tiios,

Orgenes y destinas del acei-COA

El acetil-COAderiva de la degradacin de algunos aminocidos y de la oxidacin de los cidos grasos, pero proviene, principalmente, de los glcidos, entre otras cosas por ser stos, por lo general, el tipo de compuesto ms abundante en la dieta. Es un metabolito de encrucijada, porque adems de provenir de diferentes vas, sus destinos son varios. A partir de l se sintetizan cidos grasos, cuerpos cetnicos, colesterol, o puede oxidarse en el ciclo de Krebs. Glcidos

Aminocidos

cidos grasos

/
Coleslerol

\
Cuerpos cetiiicos

Ciclo de

Krehs

CO'

i + H,O

Origen del acei-COA los glcidos de

El acetil-COAes el alin~entador ciclo de Krehs. Aunque el acetil-COApuede del provenir de lipidos, ainiiiocidos y glcidos, esta ltinia es su fuente principal en la mayora de los tejidos. El cido pirvico, producto de la degradacin de los glcidos, se convierte en acetil-COAen la reaccin catalizada por un coniplejo enzinrtico,elde la pirvico deshidrogenasa (captulo 55). cido pinvico + COA+ NAD+--* NADH

+ acctil-COA+ CO: + H'

Esta reaccin es semejante a la descai'hoxilacin oxidativa del cido alfa-ceto-glutrico, que constituye una de las reacciones del ciclo de Krehs. El tioster del acetil-COAes un enlace ricoen energa. locual resulta de importancia en la priniera reaccin del ciclo de Krebs. Pero adems, este metaholito garantiza la actividad del cid0 de los cidos tricarhoxilicos. porque mantiene los niveles de los rnetabolitns del ciclo a concentraciones adecuadas. En la reaccin se liheran -8 kcalmol-'. Su regulacin ser discutida ms adelante,en relacin con la regulacindcl ciclo.

Reacciones del ciclo de Krebs

La transformacin del grupo acetilo en 2 CO, y 8 Iiidrgenos se llevaa caho por cambios graduales, como se vers continuacin.

Primera reaccin: enzima cido ctrico sintasa Esta enzima se localiza en la membrana interna de la mitocondria. Cataliza la condensacin entre el acetil-COAy el cido osaloactico. En el curso de la reaccin se forma un compuesto intermedio, el citril COA,que se hidroli~a rpidamente, fornindose cido ctrico y HS-COA.La energa para la condensacin la aporta la hidrlisis del enlace rico en energa del acetil-COA, componente exergnico de la reaccin, mientras que la formacin del cido ctrico sera el componente endergnico. La energa que se libera se utiliza en la forinacin del enlace y,adenis, se liberan 8 kcalmol-'. Esta reaccin es irreversible.
O H 2 0 + CH,-C -S-COA
4

FH C= o
I

\ /
Citrato sintasa

H 1 HS-COA M-y-COOH ,HO-7-COOH

H-C-COOH I H Oxalaciico
-

CH, i COOH cido oxalactico

Oxalactico

cido ctrico

f-

La cido ctrico sintasa est conipiiesta por 2 siibunidades idnticas,y entre ambas forman los 2 centros activos que la enzima posee (Fig. 38.5). sta manifiesta cambios de conformacin ligados a su niecaiiisnio de reaccin -relacin estrnctura-funcin. La unin del cido oxalactico al centro activo hace que aumente la afinidad entre la enzima y la acetil-COA-disminuye la Km para estesustrato-; la unin del cido oxalactico a la enzima provoca un cambio de conformacin relacionado con la condensacin de ambos sustratos en el compuesto intermedio, el citril CoA,su formacin provoca el segundo cambio dc conformacin, lo cual favorece la Iiidrlisis del citril COA.Este canibio determina la tercera conforniacin,la de la liberacin de los prodnctos (Fig. 38.4). sta es una de las reacciones ms importantes en la regulacin de esta va. La regulacin de esa enzima an no est bien aclarada, aiinque mencionaremos algunos de los aspectos conocidos al tratar acerca de la regulacin del ciclo de Krebs.

cido ctrico C

cido ctrico

Coendina A

Coiiirima A

Segunda reaccin: enzima aconitasa La aconitasa cataliza la isomcrizacin del cido ctrico en cido isoctrico, pues como veremos a continnacin el grupo hidrosilo cambia de posicin. Se forma en el curso de la reaccin, un compuesto intermedio, el cido cis-aconitico. La enzima contiene un comple,jo [4Fe-4Sl; uno de estos Fe se requiere para que se lleve acabo su accin.

H M--+-COOH HO-C-COOH
I

H20

H C-COOH
11

H?O

, ii-e-COOH
Aconitasa C-COOH I H cido cis-acontico

, tl--t-COOH

H-C-C001-I 1 H cido ctrico

' Acmitasa

H-C-COOH
I

HO-C-COOH 1 H cido isocitrico

Es uwa reaccin reversible en la que los 3 coniponentes tricarboxlicos, el cido ctrico,el cis-acontico y el isoctrico, se encuentran en las proporciones de 90,4y 6 %, respectivamente. Conio se observa, predomina el equilibrio hacia el sustrato,el cido ctrico. La propia marcha de las reacciones provoca el consumo del producto,el cido isoctrico, lo que desplaza el equilibrio de la reaccin en el sentido contrario, hacia la foriiiaciii del producto. EsPa conversin del alcoliol tcrckario en secnndxio posibilita la prxima rcacciii de deshidrogenacin. del La enzima reconoce conio diferentes IGS 2 centros a~imthicos sustrato. los c a r h nos 2 y 4, aunque la molcula del cido ctrico es simtrica, de all que el hidroxilo se introduzca en el lado de la niolcula opuesto a la que se uni el acetilo. Ver la energa asociada con esta reaccin en la tabla que aparecer m& adelante en este captulo.

Tereera reaecih. enzima isocirieo deshidmgeuasa

En esta reaccin, el cido isoctrico se descarboxila. La enzima es dependiente del NAD', a diferencia de otra isoctrico deshidrogenasa citoplasnitica, la cual es dependiente del NADP'. Los productos son el CO,, el cido alfa-ceto-glutrico y el NADH, coino se observa a continuacin. staes unade laienzimas reguhdoras importantes del ciclode Krehs. H I H-Y -COOH H-C-COOH
l

NAD-

NADH f

+ H'

YOOH C=O l H-C-H +COZ

1

HO-C-COOH 1 H

Isociirico deshidrogenasa

H-C-H 1 COOH

cido isocirrico

cido a ccto-glutarico

En el curso de la reaccin se forma un compuesto intermediario que no se separa de la enzima, el cido oxalosuccinico. La energa que se libera en esta reaccin es de -5 kcalmol-'.

Cuarta reaccin: enzima alfa-&o-glut8nco deshidmgenasa

La reaccin catalizada por este complejo multienzimtico es la de una descarboxilacin oxidativa de alfa-ceto-cidos. El alta-ceto-glutrico se descarboxila y oxida, y se conserva parte de la energa que se libera al transformarse en la reaccin, en el enlace rico en energia del succinil-COA,y en la coenzima NADH. La reaccin es irreversible, pues se liberan -8,O kcalmol-'.

H-E-H
I

H-C-H
I

H-C-H 1 dc\hidn>gzna\d

COOH
cido u-cetoglutarico

a -ceto-gliitrico-

COOH

En la reaccin intervienen 3 enzimas y 5 cofactores, 3 de ellos unidos como gmpos prosttticos. Primero se produce la descarhoxilacindel cido alfa-ceto-glutrico, catalirada por la enaima deshidrogenasa unida al pirofosfato de tiamina (PPT).Luego la enaima transnccinilasa, unida al cido lipoico oxidado, cataliza la oxidacin y transferencia del resto snccinilo a la COA,y se formael succinil-COA.La tercera enzima, una tlavoproteina, reoxida al lipoico y reduce al NAD' (Fig. 38.5). Este complejo multienzinitico, a diferencia del de la pirvico deshidrogenasa, no tiene regulacin cavalente. La regulacin de la actividad de este complejo desempea un papel secundario en la regulacin del ciclo de Krehs. C02 cido a celo. glutrico

' \
Succiiiil - P P T E ,

PPT-E,

NAD'

E,:a-celo-glutiirico ilcscai-hoxilasn; El: iraiissucciiiilas;i lipoicii: E,: diliidi-olipoico dcsIiidrogen.?sa: PTT: pii-c~fosfato<letiaiiiiiia; lip-(S)l: ricido lipoico oxidado: lip-(SH)?:ciclo lipicii 1-cdiicido.

Quinta reaccin: enzima succinii-COAsintasa

Esta reaccin es tobiinente reveisihle y transfiere la energa del eniace tiokter del su&-CoAal enlam wldiido-fmfatodel<Xl?El tnrerf~sfato puedesertransferidoal iWP por iinani~clenidodif*ifo~~i~ina\a,delespacioiiitenne~iil~~-~ui~~,~~i~eiiitenaiiil~iaunfosfato entre el GTPy el ADP. K\asa la niw m c u ~ del ciclo donde x coiwrva energa al llevarrea n cahounaf<nti)rilacibna~iivcldesusli-ato.t~tn)pirxloclo la iuccinsael cidosurenico. I<I de ikbcinos d a t a w r la diferencia entre el dsalino de la eiier& del enlace iico en energa del acetil-Coi\ con el del succinil-COA.l a priineirrw utilimen lacondeniaiin del aretilocon el cido oxaiacttico,y se fonna el cido ctrico y el re%t~> la cnc& lil>re u e c pierde conio de q calor. En la segunda miccin, la energa del enlace iico cn k t a no se pierde, pues queda conservadaen el Itimoenlacr~wlid~dotinfi,ii~del pii-ellola m~ccinsa <;TE',? reve~ihle. Ver la energa asociada con a t a m i n en la tahla
t

O C -COA
4

GDP

H-6-14

H-C-H 1 COOH
Succinil-COA

+H

NADH

4 +

+
GTP

COO1-I

Succiiiil-COA sinkiha

H-q-H H-6- H 1
COOH
cido succnico

Sexta reaccin: enzima suednim deshidrogenasa

La succnico deshidrogenasa es una flavoprotena, cuyo grupo prosttico es el FAD. Es una protena integral de la membrana interna dela mitocondria. Participa en 2 procesos,en el ciclo de Krebs y en la cadena respiratoria (CR), y cataliza la oxidacin del cido succnico en cido fumrico, mientras que el FAD se reduce a FADH,. La reaccin es reversible.

H-C-H
l

COOH
FAD

COOH
1

FADH,

H-C-H 1 COOH

C-H 11 H-C
1

cido succnico deshidrogenasa

COOH
cido fumrico

cido succnico

S 6 p h reaccin: enzima fumarasa

Una molcula de agua se introduce en el doble enlace y se forma el cido mlico. Esta reaccin es libremente reversible.

COOH H-C

FH

Fumarasa

H-4-OH
H-C-H
1

COOH

C -COOH
cido fumrico

COOH
cido mlico

Octava reaccin: enzima miico deshidrogenasa

Es la ltima reaccin del proceso, y su producto es el cido oxalactico, iniciador del ciclo. Tambin es la ltima reaccin redos que se produce. Constituye una reaccin reversible, y el equilibrio est desplazado hacia la formacin del cido mlico. Sin embargo, la propiamarcha del ciclo, o lo que es lo mismo, el consumo del cido oxalactico hace que esta reaccin se vaya desplazando en el sentido de la formacin del cido oxalactico.

COOH H-+-OH H-C-H

I

NAD7

NADH + H'

COOH
cido mlico

' H-4-H i
Acido mlico deshidrogcnasa

YOOH C=O
1

COOH

cido oxalactico

En la tabla puede verse la energa que se libera de las reacciones del ciclo de Kmhs
Tabla. Energa libre asociada con las reacciones del ciclo de Kreb.5

cido ctrico sintasa Amnitasa cidoisoctrico deshidrogcna~a rido alfa-celo-glutricodcshidmgenasa Succinil-COA sinielasa cidosuccnico desliidrogeiiasa
Fumara

cido ndico desliidrogeim5a

Si realizamos el balance global de todas las reacciones del ciclo del cido ctrico, se ve que en la oxidacin de una molcula de acetil-COA se utilizan 2 molculas de agua,3 NADA un FAD,un GDPms iin fosfato inorgnico, y se producen 2 molculas y de CO,,4cofactores reducidos, una CoASH, 2 protones y un GTP.
GDP + Pi ~NAD' + FAD Acetil-COA+ 2H,O
GTP 3NADH + ZH* + FADH,

Regulacin
Varios tipos de mecanismos regulatorios intervienen eii el control de la velocidad del ciclo de los cidos tricarl>oxfiicos.Estos son disponibilidad de sustrato, inliibiciii por producto e inhibicin feedback por intermediarios del propio ciclo. 'ljnibin est presente la regulacin por efectores alostricos, e intervienen en la regulacin las relaciones NADWNAD', AI'PIADP, acetil-CoAICoA,succinil-CoNCoA. Aun cuando todas las reacciones poseen alguna regulacin, las que fuiidamentalniente determinan la velocidad del ciclo de Krehs son las reaccioues catalizadas por las enzimas isocitrico desliidrogenasa, ctrico sintasa y alfa-ceto-glutrico desliidrogenasa. Estas 3 reacciones funcionan lejos del equilibrio y tienen AG negativos. La actividad de la pirvico desliidrogeiiasa, discutida antcs, desenipea tambin un papel importaiitsimo en la regulacin del ciclo, por cuanto esta enzima es la que aporta el alimentador, la acetil-COA.

Regulacin de la Qcidopuvico deshidrogenasa Estecomple,jo multienzinitico tiene regulacin covalente y alostrica. Un esquema sencillo de sil regulacin se presenta en la figura 38.6.

cido pinvico

cido plalactico

cido

\
cido isoctrico

Fig. 38.7. Esquema de la regulacin del riclo de Krcbs. La aetivaciu fundamental de la enzima elrieo sintasa se debe a los aportes de eida oralacftieo y del aeetii-COA a partir de la pirvieo deshidrogenasa. La isocitrico deshidrogenasa es activada alostGrienmenfe por el ADP c inhihidii por el ATP.

energtico disminuido, los aminocidos pueden incorporarse al ciclo. La otra es la participacin de los propios metabolitos intermediariosde esta va en unaserie de procesos anablicos. Esto ocurre, sobre todo, en el hgado, pues en el corazn o en el msculo la funcin del ciclo es fundamentalmente energtica. En la figura 38.3 pudimos ver algunos de los procesos en los que participan los intermediarios del ciclo de Krebs. Los 2 ceto-cidos, el cido oxalactico y el cido alfa-ceto-glutrico se transforman mediante reacciones de transaminacin en sus aminocidos correspondientes, el cido asprtico y glutmico respectivamente. Estas reacciones se estudiarn en el captulo SS, correspondiente al metabolismo de los aminocidos. El cambio estructureacciones de transaminacin es el cambio del ral que se produce en las n~encionadas grupo cetnico por el amnico. Los aminocidos pueden utilizarse en la sntesis de protenas, pero adems intervienen en la formacin de las bases nitrogenadas tan necesarias en la sntesis de los cidos nncleicos y en la de algunos cofactores. El succinil-COAes un precursor de la sntesis del grupo hemo, importante grupo prosttico que forma parte de la mioglohina, hemoglobina y otras hemopmtenas. Los citocromos son heinoprotena~ forman parte de la cadena transportadora de elecque trones, cuya funcin se aborda en el prximo captulo. Los cidosgrasos de cadena impar rindensuccin-COA, al incorporarse a la va que puede ir a la fornlacin de glucosa por Ia va glnconeogentica (captulo 44). Pero a este proceso contribuyen, fundamentalmente, los alfa-ceto-cidosdel ciclo que provienen de los aminocidos. El cido oxalactico abandona la mitocondria como cido mlico, y se incorpora a la sntesis de glucosa por la va gluconeogentica (captulo 44). El cidoctrico, al acumularse, sale de la mitocondria y en el citoplasma constituye un precursor para los procesos de sntesis de cidos grasos y para la esteroidognesis.

En las reacciones del ciclo, al producirse el catabolismo de la acetil-COA, se regeneran los intermediarios del ciclo de los cidos tricarboxilicos, pero como stos

ademi participan en otros procesos, entonces al ciclo de Krebs le faltaran las cantidades necesariai de sus metabolitos intermediarios. Las cantidades de cido oxalactico disminuidas no se corresponderan con la5 requeridas para su condensaciii con las de acetil-COA,lo que implicara un deficiente funcionamiento de este proceso. Esto puede ocurrir en determinadas circunstancias, pero no sucede normalmente porque existen ciertas reacciones que reponen los metabolitus del ciclo; son las reacciones de anaplerosis, palabra que proviene del griego y que quiere decir rellenar. Las propias transaminaciones ya mencionadas, como son reversibles, pueden aportar intermediarios a este ciclo metablico en determinadas condiciones. Pero la reaccin anaplertica fundamental es la catalizada por la pirvico carboxilasa, enzima localizada en la initocondria.

ATP

ADP + Pi cido oxalactico

Eiizinla-B

*?M
k

coz+

ADP+Pi

cido puvico + CO,

/f

\ u

-C,

A '

(-)

cido oxalactico

d '

Acido pirvico

B: biotina

Fig. 38.8. Etapas de In r~ilrcii,ii la pii-cvico dr

rarhoxilasa.

En e- reaccin, el cido p i ~ v i c se carboxila y se transforinaen cido oxdactico; s o el ATPaporfa la energa necesaria para que ocurra la reaccin. La piruvico carboxilasa es una enzima con 4 subunidades idnticas, cada una de ellas posee un centro activo, al cual se encuentra unido una molcula de biotiiia. El enlace entre el cofactor y la enzima se establece por el carboxilo de la biotina con el psilon amino de una lisina. Ver la estructura y otras particularidades de este grupo prosttico en el captulo 19. La reaccin ocurre en 2 etapas. En la primera etapa,la biotina se carboxila con el aporte energtico del ATP, y se forma la carboxil-biotinil-enzima. En la segunda, el grupo earboxilo, as activado, es transferido al cido pirvico y se forma el cido oxaloactico (Fig. 38.8). Esta reaccin depende del acetil-COA,el cual es un activador alostrico indispensable para que ella pueda llevarse a cabo.

Comprobacin isotpica del flujo de carbono en el ciclo

Si se marcan con istopos los 2 carbonos de la acetil-COA, se aslan y analizan los y diferentes metabolitos intermediarios que se producen, podemos seguir su curso en las diferentes reacciones que ocurren. Se podra marcar primero con carbono 14el carbono del metilo,se aadiraeste acetil-COAmarcado a nn honiogeneizado que contenga ttodas las eiizimas del proceso en cuestin, y que tenga todas las condiciones para que ste se lleves cabo. Transcurrido un tiempo determinado, en el que solamente se ha podido llevar a trminounavuelta, sedetiene el ciclo, bien inhibiendo alguna desns enzimas o desnaturalirndola~. Entonces, al aislar cada uno de los metabolitos intermediarios y caracte~rlos,sepuedesaber esel carhno que ha quedado marcadoen ellos. Dando cul un tiempo algo mayor se puede saber, al aislar los metabolitos de nuevo, cuil es aliora la posicin del carbono que se marc. En otroexperimento podremos marcar el carbono carboxilico,g tambin seguir su curso en la estructura de los intermediarios del ciclo. De esta forma se vera que: en la primera vuelta, ninguno de los CO, que se liberan quedan m'drcados. En la segnnda welta, sin embargo, uno de ellos si lo est,y se corresponde con el que formaba el grupo carbohilo. El carbono que se correspondaconel grupnmetilodel alimentador.% libera en la tercera vuelta en forma de CO, (Fig. 38.9). En la primera reaccin del ciclo de Krebs participa corno sustrato el cido oxalactico, y en la ltima este compuesto reaparece como producto. Aparentemente este cido dicarboxilico no ha cambiado; sin embargo, al hacer este experimento, se Iia visto cmo, aun cuando el niismo compuesto se regenera en una vuelta del ciclo, los tomos de suestructurase van recanibiaiidocon el tiempo.
658

Riiqcimi~~w Mdic.i

-$E:-COOH *:-OH

-i

..-o .-

+ :-c

Pi

: - C del acetilo

Fig. 38.9. Marcaje de los carbonos de la acctil-COA como alimentador del ciclo de Krebs. En la primera vuelta no se elimina ninguno de los carbonos como CO,.

Asimetra del funcionamiento de las enzmas

Lo que cabra preguntarse es por qu ocurre lo descrito en el epgrafeanterior, es decir, por qu no se libera en la primera vuelta del ciclo, como CO,, ninguno de los carbonos de la acetil-COA, la molcula de cido ctrico es simtrica. Aparentemente, si tanto el carbono 2 como el 4 son idnticos. Si se gira 180" esta estmctura, de forma que se intercambien las posiciones de estos carbonos, nos dar la misma molcula. Este compuesto es simtrico. Cabra tambin preguntarse por qu en la reaccin catalizada por la aconitasa, el hidroxilo siempre cambia hacia el lado opuesto al de la condensacin del acetilo, del carbono 3 al carbono 4, y no hacia el otro lado.

,.
i .

t. ~~,.~'(.!\ jt-<
1

H-C'COOH' I i !O-C-COOH 1 H
cido ctico cido isoctnco

En el captulo 15 sealamos la especificidad de reconocimiento de las enzimas, las cuales pueden identificar esteroismerosy confrmeros diferentes. Si bien la representacin de la estructura del cido ctrico concuerda con que ella es una molcula simtrica en el plano del papel, en el centro activo de la aconitasa se reconocen como diferentes las 2 mitades de cido ctrico, y queda en la posicin adecuada el extremo contrario al que se condens el acetilo. Y assucede con el resto de las enzimas del ciclo de Krebs, las cuales unen con especificidadestrica a sus sustratos y los transforman tambin de forma estereoespecfica. Alexander Ogston, en 1948,le dio una explicacin a la estereoespecificidad de las enzimas al sealar que esa propiedad pudiera realizarse si el sustrato se uniera a la enzima por 3 puntos especficos (Fig. 38.10).

.Cf-12COOH

COOH

Vig. 38.10. Esterreesperifiridad de uni6n de las cneiniac ion sus siirtratos. 1.0s 3 puntos de unin s las enzimas rstereoespeciiiras.

Resumen
La mayor parte de las enzimas del cielo del cido ctrico estn localizadas en la matriz mitoeondriai. En este proceso se lleva a cabo la ltima parte de la oxidacin de los gleidos, Ipidos y aminocidos. Es un proceso cclico e irreversible, que mediante sus 8 reacciones va transformando, gradualmente, sus metabolitns intermediarios,de manera que por cada aceii-COAse forman 2 CO,, 4 cofactores reducidos y un GTP. El destino de estos cofactores es la cadena respiratoria, con la que se relacionan ntimamente, tanto desde el punto de vista funcional como en cuanto a su localizacn mitocondriai. Entre estos 2 procesos se transforman, aproximadamente, las dos terceras partes de la energa contenida en los alimentos, en los enlaces ricos en energa del ATP. De las 8 reacciones del ciclo, 4 son de oxidacin-reduccin, y en otra de ellas se produce direftamente un GTP -equivalente a un ATP- por fosforilacin a nivel de sush9to. Los principios de la mxima economa y eficiencia se manifiestan en este proceso mediante los mecanismos reguiatorios. Ya sea por mecanismo de disponibilidad de sustratos o por aioesterismo; si el nivel energtico celular se encuentra el elevado -aumentosdel ATP, NADH y acei-COA-, pmceso del Cico se inhibe. Las enzmas@adoras ms importantes son la pinvico deshidrogenasa-que no pertenece al propio ciclo-, la ctrico sintasa, la isocitrico deshidrogenasa y la alfa-ceto-glutricodesbidrogenasa: la primera, por ser su producto el alimentador del ciclo; la segunda, por ser la que regula la reaccin de condeusacin; y la tercera y la cuarta, reguladas ambas por control alostrico. Adems del papel del cicio de Krebs en los procesos energticos, tambihn lo tiene, indirectamente, en procesos anabcos del hgado, pues provee de precursores a la sntesis de la glucosa, a la de cidos p o s y colesterol, a la de las bases nitrogenadas de los nucietidos, a la del grupo bemo y de los aminoicdos. Esto ocasiona el consumo de metabolitos intermediarios, pero existen mcaones que los reponen -las reacciones de anaplerosis-; la de mayor importancia es la reaccin catalizada por la pinvico carboxasa.

Ejercicios
1. Localice en un esquema de la iiiitoroiidria los procesos qiic eii ella se inciieiitrdii. 2. En un esquema, seale cnles son los proresos 1111~ origen a 121 acetil-COA. daii 3. Cul es la importancia de la eiiziiiia pir\ i r i ~ dis1iidiogrii;is;i cii relacin ron el ciclo de Krcbs y cmo sregiila esta eiiziiii;~:' 4. Cite el nombre d e la enzima o las ciiziiiias dcl ciclo de 111siridos tricarl>oxilicos que se relaciona con las pn~posicioiies sipiieiitcs: a) enzimas que llevan a cal>rc;icciones de dcsliidro~eii~ici~n. b) enzimas que llevan a cabo reacciones de desca~-l~(~\ilacii)~~. c) enzimas marcapaso. d) enzimas que se sitan en la matriz. e) enzimas que sesitan en la iiieinhi-aiia interna. f~ enzimas que intervienen eii una fosforilaiiii a nivel de siisti11111. 5. Cite las enzimas que son reversil>les.J las que no lo son. 6. LE^ qu reacciones i~~tervieiicii flavopn~tciias eii ciiiles el NAU'? las ! 7. Cmo se regula el ciclo de Krebs? 8. Explique el significado d r anaplerosis cii relacin con el ciclo de Krebs.

La cadena respiratoria constituyela ltima etapa de la oxidacin de los principales nutrientes. Es la etapa en la que se conserva, en forma de ATP, la mayor parte de la energacontenida en aqullos y donde el oxgeno -actuandocomo aceptor final de los electronesaportados por los sustratos de la cadena respiratoria- se transforma en agua. Para comprender mejor este proceso podemos separarlo en 2: el proceso exergnico del transporte electrnicodesde los sustratos hasta el oxgeno, y el proceso endergnico de sntesis del ATPacoplado a este transporte. Dicho acoplaniiento energtico ocurre, como ya conocemos, en la membrana interna de la mitocondria. En este captulo vamos a estudiar el primer proceso. La cadena transportadora de electrones est formada por determinados componentes que intervienen en una serie de reaccionesde oxidacin-reduccin, y se produce deformasecuencial. Los electrones aportados por los sustratos de este proceso van pasando de transportador en transportador hasta llegar al oxgeno, mediante un proceso paulatino con liberacin de energa,lo que posibilita la conservacin de una parte importante de sta, la cual es utilizada en el proceso que se ver posteriormente, denominado fosforilacin oxidativa. En la gran mayora de los casos, el sustrato de este proceso es el cofactor reducido NADH, formado en el ciclo de Krehs, el que va a ser oxidado en esta cadena de transporte electrnico. Una vez oxidado, el NAD* podr seguir participando en el ciclo del cido ctrico y en otros procesos. Algunos de los componentes de la cadena del transporte electrnico aceptan y transfieren hidrgenos, otros, slo electrones. En algunas de estas reacciones se libera gran cantidad de energa,en otras muy poca. La cantidad de energa quese libera en una reaccin redox puedecalcularse. El orden en el que se transportan los electrones por los componentes de la cadena siempre es el mismo y depende de las caractersticas de cada uno de ellos. Esto ser tratado en el presente captulo.

Reacciones de oxidacin y reduccin

Unsistema redox est formado por 2 compuestos capacesde reaccionar entre s y llevar a cabo una reaccin de oxidacin-reduccin:

Uno de ellos, el X-, se oxida al perder electrones y cedrselos al Y. Por esto, al primer compuesto se le denomina agente reductor. El otro se reduce al ganar electrones y tomarlos del primero, razn por la cual se le denomina agente oxidante Y. Otros ejeniplos de reacciones redox se pueden ver a continuacin:

En una reaccin de oxidacibii-rcduccibnse denomina par redox a la pareja formada por una sustancia en su estado oxidado, y esa misma sustancia en su estado reducido. Por ejemplo, para el hierro sera el I:e" y el Fe"; y para el cobre, Cu2*/Cu'. En las ltinias reacciones niostradas se ol)serva como el hierro cede electrones al cobre, y el compuesto AH, le cede hidrbgeno al compuesto 1%. biologa la reduccin se acomEn paa, frecuentemente, de captura de hidrbgeno o cesin de oxgeno, y la oxidacin, de cesin de hidrgeno o captura de oxgeno. En las reacciones planteadas con anterioridad se ha establecido que X cede sus electrones a Y, as como el hierro se los cede al cobre. Ahora bien, en el caso de 2 sustancias desconocidas capaces de oxidarse y reducirse, se tiene la forma de saber cul ceder o captiir electrones a ~ mayor facilidad. Esto puede llegar a determinarse n si se conoce el potencial de reduccin de rada par redox. El potencial de reduccin expresa la capacidad de un compuesto de oxidarse (o reducirse), y se debe a caractersticas propias de su estructura Esta capacidad de ceder o captar electrones se cuantifica con un voltmetro (en volts). El voltmetro mide la fuerza electromotriz que se genera entre 2 semipilas. En una deellas se coloca el par redox al que se le quiere medir su potencial de reduccin, y la otra semipila estar formada por un electrodo de referencia, el electrodo normal de hidrgeno. Este ltimo consta de un electrodo de platino sumergido en una solucin de una concentracin molal en protones, equilibradacon gas de hidrgeno (H,) a una presin de una atmsfera.^ todo a 25 "C. Laseminila formada o<ir lasustancia one se ouiem medir. se compone de &electrodo inerte s u m e ' ~ d en una 'solucin formada por el par redox'de o potencial de reduccin desconocidoa una conwnhcin molal -el compuesto oxidado a uno molalmselmiffnocompuestoensucstadoreducidoa lamismaconcenacin. Esta semipiia tambindebeenconharsea25 "C. Los electrodos deambassemipilas van conectadosa un volnieho, y entre las soluciones colocamos un puente salino para que se establezca la continuidad elctrica entre amhai. En cuanto se loma sta. en el anarato se determina de inmediatosi la sustancia quexmide tieneunacapacidadmayoromenordeceder electrones que el elecTrodo de referencia. Si tiene una mayor capacidad de cesin de electrones, stos fluyenporelel~oha~alasemipiladereferencia,d vollhehomedirlafuenadechomobiz quese generaentre ellns y s le asipa k negatividad.Mientras mayor y msnegativosea al e a vaiorque indica el n~Itiinetro,inayorsei-isu potencial de reduccin. Si porelcontrario Im electrones fluyen del clectrtdo de referencia hacia el forniado por el par cuyo potencial de reduccin se desconoce, &te ser positivo. En la figura 39.1 ohiervainos cmose inideel potencial de reduccin estndar ( E ) del par redox Fe'VFe". Anihai soluciones se encuentran a 25 "C, y tantolas concentraciones de protones en la semipila estndar, como las de la sal del ion frrico y la del fermso seencuentran a uno niolal. Asse hallan los diferentes potencialesde reduccin con los cuales se construye la tahla de los potenciales de reduccin estndar. Los pares redox con mayor capacidad de reduccibn -con los potenciales nis negativos- se hallan en la parte superior dela tahla, y eti la inferior, los potenciales de reduccin nis positivos, queson los de menor capacidad de ceder electrones. Entre ambos extremos, y con un potencial de 0,00, dado arhitrariuiiiente. se llialle el del electrodo de referencia. Como en biologa la niayora de las reacciones celulares se llevan a cabo a un pH cercano a 7,y la concentracin en protonesdel electrodo patrn de hidrgenoes talque su pH=O, se ha confeccionado otra tabla, la de los potenciales de reduccin biolgicos. En ella los valores se han hallado con un electrodo patrn, de referencia, cuya concentracin en protones alcanza un pH=7. Para establecer una diferenciacin entre los valores de ambas tablas se aade una comilla a las siglas del valor del potencial de reduccin biolgico (E"). se mide el potencial delelectmdo nomial biolgico (apH=7) en relacin Si mnel potencial del electrodo normal (apH=O)arrojaun valor de-0,421 V(tahla39.1).

664

Rr<cqtrimicriWditv~

atm

SO. Fe= I inolal

[Ht] = l molal

Fig. 39.1. Cuantifieaein del potencial estndar de reduccin de un par redox. En el voltmetro (VI se mide 1s fuerza electromotriz que se genera entre el par redox de la semipila A y el electrodo estndar de hidrgeno que se encuentra en la semipila B. Todo cl sistema se encuentra a 25 "C.

lsbla 39.1. Potenciales de reduccin estandar de algunos pares redox con importancia biolgica

Pares redox

E0'(V) Determinados a pH =7

N" e-

cido succnicolcido alfa-ceto-glutrico cido actticolcido pinvico 2 H*lH,

cido alfa-ceto-glutrico/cidoisoctnco
NAD'INADH cido lipoico (-S-S-)/cido lipoico 2 (-SH) [Fe-S], (FeIII)/[Fe-SI, (Fell) cido 1J difosfoglicricol3fosfogliceraldehdo cido pinvico/cidolctico FADIEADH, (cofactorsin la protena) cido oxalacticolridomlico Acido fumrico/cido succuico [Fe-S],,(Fel1I)lIFe-S],, (FelI) Citocromo b(Fell1)lcitocromo b(Fel1) Coenzima Qlcoenzima QH2 Citocromoa (FeIII)/citocromo a (Feii) Citocromo c (FeIII)/citocromo c (FeIl) Cu,i'/Cu,'+ [Fe-S],,,(FeiiI)/ [Fe-S],,,(FeII) Cu,'*/Cu"'+ Citocromo a, (FeiiI)/cit~romo (Feii) a,

% 0,/02
Nota: Los subndices 1.11. 111 en las protenas Fc-S indican el romplqjo respiratorio al cual pertcneeen

En los organismos vivos, y en determinadas condiciones experimentales, la temperatura es diferente de 25 "C, y las concentraciones de los componentes del sistema redox tampoco se encuentran a uno molal. E1 cambio de estos parmetros hace que el potencial de reduccin sea diferente al hallado en las condiciones estndar, pero puede calcularse mediante la frmula sixuiente:

E= E"'+ 2.303 RT log laeente oxidantel NF [agente reductor]

Relacin del potencial estndar con 1s enev'a libre

Cuando 2 pares redox que poseen diferentes potenciales de reduccin reaccionan espontneamente, siempre se produce una variacin de energa lihre; la cuanta de esta liberacin depende de la diferencia entre los potenciales de reduccin de ambos. Esta relacin queda establecida en condiciones estndar en la frmula siguiente:

Donde n es el nmero de electrones que se traspasan; la constante de Faraday, F=23 062 cal niol-' volt-'; AE"'= (E0'oxidante)-(E"' reductor) y AG" es la diferencia de energa libre entrelos reaccionantes y los productos. Como ejemplo pudiramos calcular ahora la energa que se liberara al reaccionar el NADH con el O,. Segn la tabla 39.1, el potencial de rednccin estndar del NAD'INADH es d -0,32 V y el del OJO2- es de +0,812 V. La reaccin entre ellos produce un intercambio de 2 electrones, por lo tanto se calculara de la formasiguiente: kcalmol-' AG'" = (2)(23 062)[0,812-(-0,32)1=-52,4

Destino de los cofactores reducidos, producidos en el catabolismo

Al describir el catabolismo, vimos cmo en la degradacin total de los diferentes compuestos stos eran transforlmdos en CO, y H,O,seliberaba unaciertacantidad de calor, y el resto de la energa se conservaba'biei en forma de ATP-fosforilaciones a nivel de snstrato-, o bien en la rednccin de cofactores cuyo destino era la cadena respiratoria donde se forniarian el resto de los ATP-fosforilaciones oxidativas. Se toma como ejemplo el caso de la glncosa. Su combustin total a CO, y H,O libera 6% kcalmot'. En su oxidacin biolgica parte de esta energa se va a conservar, y parte de ella se va a perder como calor. Al oxidarse la glucosa se producen 4 ATPpor fosforilacionesal nivel de snstrato,y 10NADH y 2 FADH, quedarn lugar al restode los ATPen la cadena respiratoria. Se tratar de laestequiometra deeste procesoen el captulo correspondiente a la fosforilacin oxidativa. Existen otras flavoprotenas, adems de la succnico deshidrogenasa del ciclo de Krebs, que aportan electrones a la cadena respiratoria. En la degradacin de los aminocidos, de los cido grasos y compuestos como el glicerol-fosfato participan flavoprotenas cuya flavina reducida tambin aporta los electrones al proceso mencionado. Lo mismo ocurre con el NADH. Aunque los formados en el ciclo de Krebs aportan una gran parte de los electrones, otros procesos catablicos mencionados como la oxidacin de los aminocidos y cidos grasos tambin contribuyen al aporte del NADH. En el cuadro se pueden ver ejemplos de algunas de estas reacciones de deshidrogenacin.

Cuadro. Enzimas que participan en reacciones de deshidrogenacin

Deshidrogenasas Glutmicn deshidrogenasa Acil COAdeshidrogenasa Hidmxiacil COAdeshidrogenasa L aminocido deshidmgenasa Glicerol fasfatodesbidrogenasa utoplasmtica Glicerol fosfatodesbidrogenasa mitocondnal

Sustrato cidoglutmico Acil COA Hidmxiacil COA Laminocidas Glicerol fosfato Glicerol fosfato

Producto cido alfa-ceto-glutnco Alfa-heta-enoac-COA Beta-cetoacil-COA Cetocidos Fasfodihidroxiacetona Fosfodiidroxiacetona

Cofactor NAD' F D A N AD* NAD' NAD' F D A

Componentes de la cadena transportadora de electrones

En la membrana interna de la mitocondria se encuentran diferentes transoortadores de electrones, algunos de los cuales tambin transportan protones. La gran mayora pertenece a la cadena transportadora de electrones. Para su estudio se pueden dividir en 2 grupos: las protenas complejas, que son: las flavoprotenas, las hemoprotenas o citocromos, las ferro-sulfo-protenas y las cupro-protenas; y un cofactor no unido a protena, la nbiquinona o coenzima Q. Estos componentes no se encuentran aislados en la membrana, se asocian formando complejos funcionales. Pero antes de entrar en el estudio de los complejos, se describirn primero los componentes por separado.

Flavoprotenas
Son 2: la NADH deshidrogenasa y la succnico deshidrogenasa. La primera tiene como gmpo prosttico al FMN y la segunda, al FAD. Ambasflavina~ unen a laennma se de forma covalente. La segunda enzima no es otra que la enzima que cataliza la sexta reaccin del ciclo de Krebs. Por medio de ella se ha visto la integracin biolgica que existe entre estos 2 procesos -el ciclo de los cido tricarboxilicos por un lado, y la cadena transportadora de electrones, por otro. En la figura 39.2 se observa la forma oxidada y reducida del gmpofnncional de los cofactores deflavina y,adems,las del NAD. Comose ve en la figura,las flavinas transportan 2 hidrgenos,y loscofactoresde nicotinamida, un hidruro -un hidrgenoms un electrn. Lasflavinas puedenceder,enun primer paso, un hidrgeno, formndose un compuestointermedio en forma de radical. Para mayores detalles de las estructuras completas del FAD y del NAD', el lector debe remitirse al captulo 19. La reaccin de ladeshidrogenacin del cido succnico aparece en el captulo anterior.

R Oxidado

.-

2 '

R Reducido

. .

Reducido

Fig. 39.2. Estructura del grupo funcional de los eofactures piridnirus y flavnicos. a) N A D y NADP oxidados y reducidos. Ii) FAD y FMN oxidadas y reducidos.

Las hemoprotenas conocidas hasta el presente, que se encuentran en la membrana interna de la mitocondria y que pertenecen a la cadena transportadora de electrones, bjm,5 , son 7: los citocromos a, a,, bSm, h, c y c,. Esta forma de denominar a los citocromos por letras se debe a lacaracterstica que presenta cada unode absorber determinadas longitudes deonda en el espectro visibleen las bandas alfa, beta y gamma (tabla39.2).
lhbla 39.2. Algunas caractersticas de los citocromo.s

Citocromos

Peso molecular

E"'

Bandas de absorcin (h)

Todos los citocmmosson protenas integralesdememhrana,exceptoelcitocmmoc. Este es el citocromo ms conocido, pues por sus propiedades fue fcil de aislar. Resulta soluble en solventesacuososy es una protena perifrica de membrana: se sita en el lado externo de la membrana interna. ~ u - ~ emo&dar e pequeo (13 O& D), y su cadena so s proteiica tiene 104 residuos de aminocidos. Se ha podido estudiar la evolucin biolgica de esta protena, y se ha visto que se conservan invariantes 26 residuos en todas las especies. Todos contienen un grupo hemo y una protena. Existen 2 tipos de hemo, uno formado por la protoporfirina U unida a hierro, ste ( es comn para todos los citocromos b y c; y otro, el hemo A, que lo contienen los citocromos a. Difieren solamente en las cadenas laterales del anillo, como puede observarse en la figura 39.3. En la figura 39.3(a) puede verse que el hemo tiene como sustituyentes,en los anillos pirrlicos, a 4metilos, 2 vinilos y 2 cidos propinicos. En la figura393(b) tenemosal hemo A con una cadenaisoprenoidequesnstituye al vinilo de la posicin 2, y un acetaldehdo en lugar del metilo de la 8.

CH,

Hz : CH

Fig. 39.3. Grupo prasttica de los citocromos. a) Estructura del hemo que forma parte de los citocromos b y e. b) Hemo A, forma parte de los ritoeranios a y a,.

Todos tienen en comn la forma en que transportan los electrones. El hierro centraldel anillo hemo de los citocromos transporta un solo elechh, pasando de su f m a h i e m @ I J (fnicaoF~)-oxdada-asufonna hieno(II) ( -ef die~nen supmolenilar,quedependedelapmtena alacualse hallan asociados y quees diferentepara todos La pmpia protena y el e n t o r n e modimlascuacteriszKa~ decadacitoemm:supotencialdemlu~n,l~puwbilidadesde inhibicinde cada uno y su solubilidad, entre otras.

a)

\ A \ /

/ \ / \

No se conocemucho acerca de este kwpo de transportadom electrnicos. Tienen pgos moleniMdiferentes,sediferencian tamhin en I c s tipos decentros ferro-sulfurado,(Fe-S) queposeen. El cumpuesto por2 tomm de FEy 2 tumos de S [ZFe-2S],y el [4Fe4S]son losms k e n t e s . Un q u e m a de la 6tnichird de 2 dc *tos m n t m se o f m en la figura39.4. EUos se encuenhanunidosa raidu<r;decisten'adelaprotena. En la mayoriade los complejos,estas prote~intervienen~umo trmportadom finalsdeelechones~~eencuenhan pmentesen los complejos 1, ii y ill. El transporte de electroncr se efecta en uno de los hierros de &os
~ ~

Fe

S de la cistena

Fig. 39.4. E\triietiira de los centros Fe-S ni 12 Ic-2 SI. 1h1 14 Fe-? S . I

IV, Intervienen en el transporte de electrones del a~mplejo pues el ncleo de cohre cambia su estado de oxidacin de Cu"a Co' al ocurrir el transporte de electrones de esecomplejo. Hay uno asociado al cit a y otro al cit a,,.

Es el nico componente no protenico de la cadena transportadora de electrones. Presenta un anillo de quinol o quinal, de acuerdo con su estado de oxidacin (Fig. 39.5). Como puede verse en esa misma figilra, unida al anillo se encuenb la cadena isoprenoide, que caracteriza a las diferentes ubiquinonas existentes. La de mayor distribucin en la naturaleza es la de 10isoprenos, por lo que se le conoce con la abreviatura de Q,,. Este compuesto transporta 2 hidrgenos, pero en sus reacciones puede captarlos o cederlos uno a uno y, de &e modo,se configura un compuestointermedio en forma de radical. Esta caractersticaposibilita el h;insportedeelectronesentrelosprimeroscofactoresque h;uisportan 2 protones y 2 electrones, y los citocromos que portan un solo electrn. La CoQ capta los hidrgenos que provienen de las flavoproteina~ tanto de los complejos 1y Il, como los de otras flavoprotenas.

Fig. 39.5. Ubiquinana a CoQ y sus estados redor. al La n representa el nmero de subunidades de isapreno; la del humano es de 10, y por eso se la denomina Q,,. b) Forma axidada. e) Forma scmirreducida a radical. d) Forma reducida.

Complejos de la cadena respiratoria

Si aislamoslamembrana interna de la mitocondna (captulo 37)y luego la tratamos con detergentes suaves o por ultrasonido, se va a fraccionar en grandes complejos lipoproteicos. Los lpidos participantes en stos son los propioslipidosdela membrana que quedan unidos a las protenas. Estas, en su mayona,son insolubles en agua, pero s muy afinescon compuestos apolares. Cinco grandes complejos fnncionalespueden aislarse, relacionadoscon lacadena respiratoria, 4 deellos transportan electrones,el qniuto es el responsable de la sntesisde ATP: es el complejo de la ATPsiniasa. En este captulo se vern los complejos del transporte electrnico, y se tratar el quinto en el prximo captulo. Algunas delas propiedades de los4 primeros complejosmencionadosse alteran tambin cuandoellos se encuentran aislados. Estos son:

1.1:NADH CoQ rednctasa. 2.11: Succnico CoQ reductasa. 3. iik CoQH, citocromoc reduciasa. 4. N: Citocromo c oxidasa.

En la figura 39.6 se representa el tamao relativo de estos complejosy el nmero de las protenas que los componen. El peso molecular de todos ellos vara entre 1 y 8 por 105dalton.

Fig. 39.6. Complejos de la cadena rcspirataria. El tamao de los crculos se relaciona con el peso molerular dc cada complejo. Debajo se encuentra el nmero de protehas diferentes que forman a cada una.

De las aproximadamente60 protenas diferentes que forman parte de los complejos, slo 6 de ellas estn codificadasen el ADN mitocondria1,el resto seencueutracodif~cado en el genornanuclear. Formando partedeestoscomplejosseencnenranla~flavoprotenas, citocromos, protenasFe-S y cnpropmtenas.En la tabla 393se resumen algunascaracte risicas estmcturales delos complejos del transporte electrnico y sus funciones. En general, la funcin de estos complejos es el transporte electrnico con la formacin final de H,O y de un gradiente electroqumico de protones. La energa contenida en este gradiente se utiliza por la ATPsintasa en la fosforilacinoxidativa. En un esquema muy simplificadose muestran estas funciones(Fig. 39.7).

CofH2: cofactores reducidos; Cof: cofactores oxidados

Fig. 39.7. Esquema de la funcin global de la cadena respiratoria. Las letras c y m representan los lados de la membrana interna de la mitocandria, que miran al citosol a hacia la mati-i~, respeetivamente.El paso dc los electrones a travs de los transportadores, desde los Cofreducidos hasta la oxidacin del oxipeno y la formacin de agua, genera un gradiente de protones. ste produce una fuerza protn motriz que se emplea en la fnrmaein del ATP, con la consiguiente disipacin del gradiente.

Cof Hz

-_i--:lj--li_-Cof
112

0,

H,O

ADP

ATP

n b ~ 393. Caractersticas estructuralesy funcionales de los complejos respiratorios a

Complejos respiratorios

II

Nmerode pmte>as

25

Cofxtor

FMN

FAD

Cobre

Fonnagrddiente de protones

2-tenoilhiflomacetato

AntimicinaAy BAL

Complejo 1
Es el ms grande y contiene, a su vez, 3 subfracciones. Una es insoluble en agua, la Uamada HP,ala que quedan asociadoslosfosfolpidosque forman parte de este complejo 1. Ninguna de sus protenas es cataltica. Las otras 2 subfracciones, la FP y la IP, son solubles en agua. La FP es la que contiene la flavoprotenacataltica. Las 3subfracciones contienen las diferentes protenas Fe-S. La funcin del complejo les ladeoxidar al NADH y reducir la CoQ. El orden en el quese van reduciendo los compuestos esel siguiente: NADH
-f

FMNH,

--f

2Fe (11)

+CoQH,

Un esquema simplificado de las reacciones de este complejo lo podemos observar en la figura 39.8, donde vemos que todos los centros Fe-S se representan en uno solo. El NADH reacciona con la protena cataltica, la flavoprotena,quedando reducido el FMNH, y aqulla oxidada. Los electrones pasan de este compuesto a las y de ferro~nlfo~rotenas. stas a la CoQ. 2 H'

F M W Flavoprojena

22~exr:.
Fe-S 2Fez+ 2 H+

NADH

f
H+

Fig. 39.8. Esqiirliiii <li. 1;t funrien del coniplqii, 1. l ' o < l i los centros Fc-S F ~~ e reprcwiii.iti ~ ~ ~ itino.o EI NADH i i
se oiid;i. 1;) ( iiO se reduce y Iiay una trasliic;iiiii de protones aio-

El transporte de electrones a lo largo de los componentes de este complejo va acompaado de la traslocacin de 4 protones a travs de la membrana interna, formndose un gradiente electroqumico. Se ha demostrado expenmenialmente que en este paso de los protones se requiere la oxidacin de los centros Fe-S y la reduccin de la CoQ. Por ello es que al inhibirse el paso de electrones hacia esta ltima, con sustancia5 tales como la rotenona o los barbitricos -que impiden la rednccih de la CoQ por este complejo-, tambin se deja de formar el gradiente electroqumico. La estructura de estos inhibidores puede ser observada en la figura 39.9.

Fig. 39.9. Estructura de alguiios inhihidom del transporte de electrones. a) Antimicina A -bloquea la reoxidacin del compleja 111. b) Rotenona -infiibe a la NADH desliidrogeriasa. e) Ainital 4nhihe la reduccin de la CoQ. d) Cianuro y e ) Monxido dc carbono impiden la reduccin y oxidacin del citocroino a, res)>citivamrnte.

Todas estas funciones se mantienen mientras nose fracciona el complejo,pero se pierden o alteran si se aislan los componentes o se separandelamembrana.

Complejo II El complejo 11 est formado por 4 protenas de pesos molecnlares de 70 000, 27 000,15 500 y 13500 D. La subunidad con actividad cataltica est constituida por las 2 primeras protenas mencionadas. La mayor contiene un FAD unido covalentemente a la protena y un centro [4Fe-4Sl. La que le sigue en tamao contiene un centro [2Fe-ZS]. Las 2 subunidades menores forman el citocromo b,,. Es importante sealar que la informacin gentica de ste la aporta el ADN nuclear, mientras quela delos otros citocromos h,contenidos en el complejo II1,se encuentra en el ADN mitocondrial. Estecomplejo cataliza la sexta reaccindel ciclo de Krebs. Estecomplejo oxida al cido succnico transformndolo en cido fumrico. La flavina de la mencionada enzima queda reducida, y es posible que los electrones pasen al citocromo b,,, y a las protenas Fe-S. El orden en el cual se transportan los electrones a travs de los centros Fe-S y del citocromo b an no se conoce con exactitud. Luego de pasar por todos los , componentes del complejo, finalmentela CoQ resulta reducida. cido succnico 672 fktyrrinnacfl bk%hi

---+ FADH,

.
2 ~'* e ,

CoQH,

A pesar de ser la actividad de este complejo semejante a la del complejo 1, no trasloca protones y, por lo tanto, no contribnye a formar el gradiente electroqumico (Fig. 39.10).
Fig. 39.10. Esquema de la funcin del complejo 11. Sc representa ranio a un solo centro al citacromo b,,,, y n los centros Fe-S par deseonoeersc su orden dentro de este complejo. El cido sueenieo se oxida y In CoQ se reduce, y aunque pareec q u e pudiera haberla, no hay traslocacin de protones en este complejo.

cido furnrico cido succinico

2 H'

Este complejo es inhibidopor el 2-tenoiltrifluoroacetona.Al igual que el 1, si sele extraen algunos de sus componentes protenicos o lipdicos, o se le aisla de la membrana, su funcin se altera.

Complejo ill
Es un dmero y atraviesa lamembrana interna. En general lo componen2 tipos de citocromos b (b,,, y bj,), un citocromo c, y una protena con centro Fe-S. Los 2 citocromos b se asocian con una sola protena. Esta protena posee 9 sectores en hlice que atraviesan la membrana el mismo nmero de veces. Los 2 grupos hemo estn unidos a 4 histidinas de los sectorestransmembranales i y V de esta protena (Fig. 39.11). I El hemo del citocromo c, se une por residuos de cistena a su protena. La protena de este ltimo tiene 2 subunidades, una mayor unida al hemo y otra menor. Su polipptido menor posee un alto contenido en residuos de cido glutmico y parece que se requiere para la interaccin con el citocromo c. A su vez, el sitio que capta o cede e-del citocromo c est bordeado por residuos de lisina. Estos sitios se encuentran del lado del espacio intermembranas, a diferencia del sitio que recibe los electrones de los complejos 1y 11, que se encuentra del lado de la matriz. La protena Fe-S tambin se halla hacia el lado del citosol. El complejo completo es el que tiene mxima actividad. Si se extrae de la membrana con tritn X-100, que es un detergente, se pierde la protena Fe-S y el complejo pierde actividad. La funcin de este complejo es oxidar a la CoQ y reducir al citocromoc. Esta actividad se acopla al transportede2 protones a travsde la membrana El mecanismo propuesto por MtcheUpara tratar de explicar el bombeo de protones por este complejo es el del ciclo Q. Ya existen muchos datos qnese conocen y queconfirman este mecanismo propuesto por MtcheU. Deforma abreviada podemos decir que los2electrones que aporta la CoQH, al complejo siguen 2 caminos. Uno de ellos toma la va de centros redox con potenciales de reduccin altos -la protena Fe-S con +0,030 V y el citocromo c,, con +0,23 V- y el otro sigue la va de los citocromos b (-0,030 y +0,030 V).

Fig. 39.11. Unin de los hemo b al eonipiejo 111. Cada Iiemo se encuentra unido a 2 residuos de histidinas. Los nmeros reprcsentan la posicin de las histidinas en la cadena de protena. L a histidinas 82 y 96 sc cneiientran en el sector transmemhranal 11, y las otras, en el V.

/
. , cit, b ,

$COQH~+ \

cit c,t-+

cit c

cit b,,

El electrn de la primera n'a es el que llega a reducir al citocromo c. Esta va tiene inhibidores especficos como son el mixotiazol y el BAL (British AntiLewkite), diferentes a los inhibidores de la otra va -por ejemplo, la antimicina A. La CoQH, aporta un electrn a la primera n a -la que t e d n a en la reduccin del citocromoc-; los protones se eliminan hacia el ladocitoslico de lamembrana y ellaquedaen su fonnadesemiquhona;

el segundo electrn pasa a las citocromos h. La CoQ asolUdada es de nuevo reducida por el electrn que pas por los citocromos b, y por otro proveniente de Ilisflavoprotenias,y capta los protones del ladode lamatriz (Fig. 39.12).

Q'-'/

iIivopioknas reducidas (complejos 1 11)

t-

/2,

Flavoprotenas oxidadas

QH,

Fe '+

Q'Citosol
Fig. 39.12. Esqiicma del transporte electrnico en el ciclo Q, eonipleja 111. Ei coniplejo I el 11 le ceden uii elertr6ri a la coenima Q en fornia de mdieal, y eoii 2 protones dc la matriz ella se reduce. La CuQ H, libre en la membrana puede pasar al lado citosliro de la niernhranii. 1.a CoQH, le cede un electrn a la protena Fe-S, libera 2 protones, y queda de nuevo romo radical. El cltrtrn pasa de la proteina Fe-S al citoeromo c,, y de ste al citocromo c. La coenzima Q radical cede su electrn al citacromo b,,, ) ella se oxida, y traspasa la membrana hacia el lado dc la matriz. El citoeromo b,,, le pasa el electrn al b,,,. Este ltiiiio citocromo semirredtiec 8 la CoQ. que queda de nucro coino radical lista para reeonienzar el ciclo.

Complejo N
Posee 8 polipptidos diferentes en cantidades equimolecnlares y 3 polipptidos en proporciones variables, por lo que a veces se considera que los 3 ltimos son impurezas. La informacin gentica de los 3 mayores la aporta el ADN mitocondrial. Es tambin un dmero que atraiiesa la membrana. Cada dmero se compone de las 8 protenas. La forma tridimensionaldelmonmemse asemeja a una Y; la base se extiende hacia el citosol y los 2 brazos hacia la matriz. Los monmeros contactan en la hase. Todas sus proteinas atraviesan la membrana, excepto la V, VI y VII. Los grupos prostticos de estas protenas lo forman 2 hemo A y un ion de cobre asociado con cada hemo. La distribucin de los componentes de este complejo se puede ver en la figura 39.13.

c: lado citosol de la membrana: m: lado de la matriz

Fig. 39.13. Disposiein espacial dc los camponentcs. a) Del dmero. Ii) De uno de los monmeros que se ve por el frente y por el dorso. Las proteinas V. VI y VI1 son las nicas que no atraviesan la membrana.

La funcin de este complejo es la de oxidar al citocromo c y reducir al oxgeno. Un esquema de su funcin global se puede ver en la figura 39.14.

~2

Fc'+x
cit a-Cu

cit a,-Cu

;krFx

02

O*

2 Fe3+

2 Fe2'

",O

c: lado citosol de la membrana; m: lado de la matriz

Fig. 39.14. Esquema del transporte electrnico a travs del complejo IV. a) Representacibn de la forma elsiea. b) Se propone la hiptesis de este transporte, en el que los anillos heno se encuentran en lados diferentes de la membrana. Los electrones son cedidos por el citocromo c al eitocronio que est relacionado can cl Cu,, ste sc los pasa al citocromo a,, que a su vez est relacionado con el CU,~, ste y es el que reducc al oxgeno.

El hemo quese encuentra del lado de la matriz es el que reduce al oxgeno. Para reducir una molcula de O, se requieren 4e- que provienen, consecutivamente, de 4 citocromos c reducidos. Al O, no pueden afiadrseles los electrones de uno en uno, pues producira un radical termodinmicamente desfavorable (O;). Lo que ocurre es que el O, se une al mismo tiempo al cobre, (Cu,,) y al citocromo a,, formndose un compuesto binucleado, y de esta forma se le pueden transferir al oxgeno 2 electrones a la vez. Los 2 electrones provienen de los centros Cu, y citocromo a, que se encuentran del lado citoslico de la membrana interna y que los adquirieron de reacciones sucesivas con el citocromo c (Fig. 39.15). Acoplado al transporte electrnico, este complejo tambin transloca 4 protones a travs de la membrana, pero su mecanismo molecnlar no se conoce. Ms adelante se propone una hiptesis que lo explica.

Secuencia del transporte electrnico a lo largo de los complejos

De los 5 complejos presentes en la membrana interna de la mitocondria, 4 de ellos, como hemos vistoen los epgrafes anteriores, son los queintervienen en el transporte de electrones desde el NADH y el cido succinico hasta el oxgeno. Los electrones son transportados por los componentes redox de los complejos I,II, 111 y IV, siempre siguiendo una misma secuencia. En los epgrafes anteriores hemos visto lo que se sabe acerca de la secuencia del transporte electrnico a travs de los componentes de cada complejo. Un resumen del transporte de electrones desde los cofactores reducidos hasta el oxgeno se muestra en la figura 39.16. En la figura 39.16 vemos, adems, que el punto central de acopio de electroneses la nbiquinona. Se puede ahora entender la ventaja biolgica que tieneel hecho de que este cofactor sea hidrofbico y no est unido a una protena; ambas caractersticas le confierenuna movilidad extrema en la membrana. De este modo puede interactuar con diferentes flavoprotenas, oxidando a Mtas y reducindose ella a ubiquinol o ubiqninal.

')

citT+C X

Complejo I -cuB binucleado reducido Fe. 3 -Cu,

A
Fe,,;

...O=O. ..Cu,

Fig. 39.15. Reduccin del oxgeno par el complejo IV. a) El citocromo a y el cobre A del lado citus6lieo de la membrana interna reciben los electrones del eitoiromo c. Aqullos se las pasan al citotrnniu a, y al cobre B. b) En las reartionff 1 y 1 21, el complejo cit;Cu, reducido le cede 2 electrones, una a la vez, al complejo cita -Cu,,; 3) el oxgeno se une al codplcjo reducido; 4) se redistribuyen los electrones y se forma un toinpusto peraxi estable; 5 ) y 6 ) con otro electrn y un protn d e nuevo hay redistrihuiin d e los electrones y se f o r m a n Fe'*=OZ y H,O-Cu"; 7) y 8) el cuarto electrn c m otro protn d a cita3(Fe")-OH- y Cu,,'*-OH.; se captan 2 protanes ms. danda agua, y sc cierra el ciclo.

Complejo Fea,- CUB biiiucleado

Compiiesto peroxi estable Fea,-O-O

I
1
Cus cit c,

8oxidado 3

Compuesto ferril '\\~e,>= O Cu,

Fe.,, -0 , cu, / OH

La flavoprotena ms importante que interacciona con la CoQ es la del complejo1, la NADH-CoQ oxidorreductasa, que a su vez recibe los electrones del NADH. Como esta cwnzimaslo establece una uiteraccin momentnea con la enzinia en el momento de la catlisis, el NADH reduce a la flavina del complejo 1, y una vez oxidado el NAD', puede reducirse de nuevo unindose a un nmero elevado de enzimas que lo utilizan como coenzima. Ejemplo de esto lo tenemos en las 3 deshidrogenasas del ciclo de Krehs y en otras que participan en el catabolismo de cidos grasos y aminocidos. Ejemplos de las otras flavoprotenas que interactan reduciendo a la CoQ son: la del complejo 1 y otras 1 mencionadas en el cuadro. Una vez reducida la CoQJos electrones pasan al complejo i I y de ste al complejo IV por intermedio del citocromo c (Fig. 39.16). 676

RNq~dmiccrMHia

cido succinico

I
NADH + 1 -4CoQ + 111
-*

cit c -+ IV

+11201

f
acil CoA glicerol-P Muchos trabajas Iian aportado datos en cuanto al orden del transporte deelectrones. como son el estudio de los potenciales de reduccin biolgicos de los diferentes pares redox que intervienen, los experimentos de reconstitucin,el uso de inhibidores y otros. En general, se ha visto que el transporte de electrones se efecta desde los pares redox con potenciales de reduccin ms negativos hasta los pares ms positivos. Este es el fundamento termodinmico del ordenaniiento de los componentes de la cadena transportadora de electrones. As, el par NAD+NADHque tiene el potencial de reduccin ms negativo (-0,32 V) es el donador de electrones a la cadena. El primer transportador que los recibe es la flavoprotena NADH deshidrogenasa, cuyo grupo prosttico es el FMN. Este cofactor tiene el potencial de reduccin ms negativo de todos los transportadores de electrones de la cadena; y uno de los ltimos elementos qiie los recibe es el grupo Iienio del citocromo a,, cuyo potencial es el ms positivo (0,29 V). Finalmente, pasan al oxgeno, cuyo potencial de reduccin es ms positivo (0,812 V) que el del citocronio a, (tahla39.1). Se encuentra todava en disctisin el orden que ocupan algunos de los centros Fe-S. Es bueno recordar que estos coniponentes del transportc electrnico, estn inniersos en los componentes lipdicos de la inemhrana, y que al tratar de aislarlos se aprecia un cambio en su potencial de reduccin. A veces, los potenciales de reduccin que se observan en las tablas se han obtenido sobre la base del gnipo prosttico, aislado de la protena. Tanto el entorno de la memhrana,como su unin con la protena,cambian el potencial de los grupos prostticos. Otro factor que altera el potencial es la relacin existente entre la concentracin del coniponente reducido y la del oxidado. J,os potenciales de la tabla son los estndares tomados con concentraciones uno niolal de ambos componentes -oxidado y reducido- del par. Cuando amhos elenientos del par no estn a estas concentraciones, el potencial de reduccin cambia conio ya vimos. Otra evidencia que Iia apoyado el ordenamiento propuesto de los traiisportadores, es la reconstitucin de la cadena de transportadores a partir de los coniplejos aislados. Se conoce qiie la reunin del complejo 1 con el 111 es factible y qne los electrones pasan del primero al segundo, sobre todo cuando al sistema artificial formado por ellos 2 se le aade CoQ. De la inisnia manera puede reconstituirseel transporte de electrones entre el altuplejo 11y el 111. Al reunirse los complejo I l l y IV aislados, el 111 le cede electrones al IV en presencia del citocronio c. Se 1x1visto que otras secuencias del transporte no ocurren de forma tan activa conio la expiiesta. El mismo orden se obtiene si se usan inhibidores de los diferentes componentes con el fin de tener datos de su ordenaniiento. Se puede saher si los traiisportadores se encuentran oxidados o reducidos por los cambios de ahsorcWn de luz que presentan. Casi todos ellos tienen diferente absorbancia a una determinada longitud de onda hi cuando estn reducidos 11oxidados (Fig. 39.17).
Fig. 39.16. Esquema <Id orden dc los complcjos en cl tratispoi.tc de electrones. 1.a CoQ iiropia los clcrti.oiirs de difereiitcs h ~ n t e s .

Fig. 39.17. Cambios de absorbancia de alaunos transportadores de la cadena respiratoria. Se observa cmo cambian su absorbanciit con les cambios de oxidacin y rcducei6n.

--

cit c reducido

- cit c oxidado

Si suponemos que el transporte de electrones se est efectuando normalmente, digamos de a a e:

y se aade un inhibidor que impide el transporte entre el componente c y el d:

ocurre quelos transportadores quese encuentran antes del punto de la inhibicin, -el a, el h y el c- quedarn en su estado reducido al no poder ceder los electrones a los transportadores a los que normalmente se los entregan. Con esto se demuestra tambin que los electrones no pueden ser cedidos a cualquier transportador, por ejemplo del c directamente al e. Los transportadores que se encuentran en puntos posteriores a la inhibicin, -el d y el e- quedarn en sus estados oxidados, ya que no recibieron nuevos electrones luego de ceder los suyos a los componentes siguientes. Conocemos que el complejo 1puede ser inhibido por la rotenona: el 1 ,por la 2- thenoiltrifiuoroacetona; 1 el 111, por la antimicina A; y el IV, por el cianuro o el monxidode carbono (Fig. 39.9). La utilizacin de estos inhibidores, uno a nno, con la determinacin del a t a d o de oxidacin o reduccin de los componentes de los complejos anteriores y posteriores al punto de inhibicin, ha brindado resultados que apoyan el ordenamiento ya sealado. Por ejemplo, si comprobamos el estado redox de los transportadores luego de la inhihicincon cianuro,se observa que todoslos transportadores quedan reducidos. En resumen, todas las evidencias aportadas por los 3 tipos de experimentos anteriores apoyan el ordenamiento que se seal antes.

,,

.,

a
c

a
a, . a,

---Fig. 39.18. Representacin de la hiptesis del transporte de pratones par el compleja IV. En negro se representa un grupo que cambia su pK a' sufrir duecin.

7 H'

a,
f)

a,

d)

e)

= :o2 ,

c: lado citosol de la membrana; m: lado de la matriz; a y a,:citocromos a y a,; cit c: citocromo c.

Aspectos generales de la regulacin de la velocidad del transporte

de electrones
A lo largo de este captulo hemos visto todos los factores implicados en el transporte electrnico, p sus funciones. Si se recapitulan y recuerdan los diferentes aspectos involucrados, se pueden relacionar cules factores pueden alterar o regular la velocidad de ese transnorte. Se han descrito diferentes inhibidores del transporte electrnico a travs de los complejos I,II,III y IV. Su uso altera la velocidadde ese proceso, detenindo10,pero ninguno de estos compuestos es el responsable de la regulacin fisiolgica. Entre los factores fuiolgicos que pueden afectar el transporte electrnicose citan la concentracin de los cofactores reducidos, queson los que aportan los hidrgenos a la cadena transportadora de electrones; la aceleran o la deprimen en dependencia de su concentracin. La aceleran si aumenta su concentracin, pues de este modo el aporte de hidrgenos ser abundante, y la deprimen si se encuentran en su forma oxjdada, ya que entonces es pobre el aporte de hidrgenos al proceso. El aporte de los cofactores reducidos depender del potencial energtico celular, que es uno de los factores importantes que regulan el ciclo de Krebs. Otro factor que se debe tener en cuenta es el oxgeno, puesto que de este conipuesto depende que los transportadores puedan ceder los electrones transportados por ellos o no. En el caso de faltarles el aceptar fmal (el oxgeno), la secuencia total de la cadena quedara reprimida, pues una reaccin depende de la siguiente para que todo el proceso se efecte. Este estado puede presentarse en diferentes situaciones de hipoxia o anoxia. Muy importante es la traslocacin de los protones acoplada al transporte de electrones. La traslocacin de protones tieneun umbral,p como ambos procesos seencuentran acoplados, independientemente de su mecanismo, si seinhibiera de alguna forma la traslocacin de los protones tambin se inhibira el transporte de electrones, y si el transporte de electrones no ocurriera, no se formara el gradiente de protones. Supongamos que un transportador de bidrgenos se encuentra reducido, y va a ceder sus electrones al signientc transportador, que slo capta electrones, y va a liberar los

protones al medio. Sin embargo,las concentracionesde protones en el medio son tan elevadas que le impiden liberar sus protones; esto impide que la reaccin se lleve a efecto. Sucedera parecido a la siguiente reaccin:
AH,+2X 4
'A + ~ x - + H '

(La reaccin a pH=8 se favorecera,a pH=2 no.) El gradiente protnico entre ambos lados de la membrana interna -con tina mayor concentracin de ellos del lado del citosol- tiene un lmite; mientras este gradientese est disipando, el transporte de electronespuede efectuarse,pero si el gradiente no se disipa, se inhibe el transporte de electrones. En la figura 39.12 se observa cmo un gradiente elevadode protones podraimpedir la liberacin de protones por la CoQ,lo que repercutira tambin sobre el traspaso de electronesal citocromob. Supongamos el caso contrario. Existen drogas que impiden que sefonne el gradiente; tal es el caso del 24-dinitrofenolque permeabilim lamembranaa los protones. Al noencontrargradiente alguno, el transporte electrnico se acelera. De lo anterior podemos inferir que, descontando las drogas forneas, el propio gradiente,las concentracionesde los cofactores y el oxgeno pueden regular el proceso del transporte electrnico.

Resumen
La cadena respiratoria est formada por 2 procesos: el transporte de elnes, que se Lleva a cabo en la cadena transportadora de electrones -proceso exergnico que genera un gradiente de protones-, y el mecanismo de la fosforiiaan oxidativa -proceso endergnico acoplado al anterior. Enlaeadena~oradeeleetrmies,stos~detransportadorentransportador, en reacciones de oxidacin-reduccina las d e s se asocia una determinada cantidad de energa. sta puede caleularse si se conocen los potenciales de reduccin de los eomponentes que transportan los electrones. En una reaccin de e oxidacin-reduccin,el componente cuyo potencial de reduccin s a menor le ceder sus elecmnes al otro; y la cantidad de energa asociada a esa reaccin ser mayor e mientras mayor s a la diferencia entre los potenciales de reduccin de ambos La energa puede liberarse como calor, pera parte de ella se conserva al formarse un gradiente de pmtones que es utilizado en la fosforacin oxidativa Entre los componentes de la cadena transportadora de electrones encontramos flavopmtenas, protenas Fe-S, hemopmtenas Oos citmomos) y la c&a Q. Estos componentes se encuentran en la membrana interna de la mitoeondria muy asociados a los fosfoipidos de la membrana, y forman 4 complejos mayores que se asocian frecuentemente entre s. Emste una secuencia en el transporte de los electrones por estos complejos y a I travs de los propios componentes de cada uno de ellos. Los complejos 1y I -que son los que contienen las fiavopmteias- le ceden sus electrones a la ubiquinona, que no forma parte de ninguno de los complejos. Esta ltima recibe electrones tambin de otrasiavopmtenasque pertenecen a pmcem de oxidacin de diferentes catabolitm, y le entrega los electronesal complejo JiL ste, a su vez, reduce al citocromo e, que al igual que la ubiquinona no est asociado a los complejos, y por ltimo, pasan los . electrones por el complejo N Es funcin de ste formar agua al reducir al oxgeno. ,I Adems del transporte de electrones,los complejos iD y N formanun gradiente de pmtones a h v s de la membrana inierna No se conoce el mecanismo de formacin del gradientede pmtones. Algunas hiptesisplantean que la funcin de los transportadores es veetorial, es decir, que los propios transportadoresque portan pmtones a d e h de electrones, seranlos que formaran el gradienteal tomar pmtoues del lado interno de lamembrana d e lamatriz- cuando ellos se reducen, y los eliminaranhacia

el espacio intermembranoso al oxidarse. Otras hiptesis pianiean que el gradienie lo forman protehas especiales que c a m b ' i d e conformacin en dependencia del esado de oxidacin de los cofaetom asociados a ellas, puesto que vara el pK de ciertos grupos cidos De este modo, y al igual que en la hiptesis anterior, los protones se , asociaran a estos grupos de un lado de la membrana y se dswanan del otro lado. La regulacin del transporte de electrones depende de varios factores: del aporte de electrones, de la presencia de oxgeno, que es el aceptar inal, y de la propia intensidad del gradiente de protones que as impedira o favorecera su propia formacin.

Ejercicios
1. Puede el par redox formado por cido oxalacticolcidomlico reducir al que est

constituidopor cido actico/acetaldehido si se forman las semipilas correspondientes con ellos. Explique. 2. ;Puede el citocromo c oxidado, oxidar a la CoQ reducida? .Se necesitaran condiciones especiales? Explique. 3. Podra el cido mlico reducir directanienteal citocromo c? 4. Qub energase asocia a la reaccin entre los pares redox de la pregunta l? 5. Quenergase libera ose requiereen la reaccin de reduccin del citocromoc por el citocromo c,:' 6. Expliqnela relacin que usted cree que exista entre la estructura de la coenzima Q y su funcin? 7. Se afectara la funciGn del transporte electrnico si ste se desarrollara en un sistema de enzimas solubles en un niedio acuoso? Explique. 8. Si empleramos la antimicina A, en un experimento en el que tuvirauiosfuncionando la cadena transportadora de electrones, qu pudiramos decir acerca del orden de sus trausportadores. Explique. Y. ;Pueden los estados de isqueinia de un tejido afectar IU cadena transportadora de electrones? Explique.

La fosforilacin oxidativa es la sntesis de ATP acoplada al transporte de electrones.. v se lleva a cabo en la membrana interna de la mitocondria. El transuorte de " electrones por los complejos de la cadena respiratoria culmina: con la produccin de agua, con la formacin de un gradiente de protones a travs de la membrana interna de la mitocondria y con la sntesis de ATP. ste se forma a partir del ADP y fosfato inorgnico (Pi), al utilizarse la energa contenida en ese gradiente de protones. En el transporte electrnico intervienen los 4 complejos que sedescribieron en el captulo anterior; el quinto complejo, tambin presente en la membrana interna de la mitocondria, el de la ATPsintasa, es el responsable de la fosforilacin oxidativa. En este captulo se describir la estructura y funcin de la ATP sintasa, y su mecanismo de accin. Tambin se tratar de la produccin de ATPque se obtiene de la oxidacin completa de la glucosa, y por ltimo de la regulacin de la respiracin celular.

Teora quimioosmtica
En 1961, Peter Mitchell postula su teora quimioosmtica de la fosforilacin oxidativa. Este investigador plante que el transporte electrnico a lo largo de la cadena resuiratoria formaba un eradiente electrooumico entre ambos lados de la membrana interna, al ser bombeados los protones a travs de la membrana interna de la mitocondria, desde la matriz mitocondrial hasta el exterior. Esta concentracin desigual de protones, generada entre ambos lados de una membrana impermeable a ellos, unido al potencial de esa membrana, resulta en una fuerza protn-motriz. Esta fuerza sera la utilizada en la sntesis del ATP, y al llevarse a cabo dicha formacin se disipara el gradiente. La llamada entonces ATPasa reversible mitocondrial sera la encargada de llevar a cabo este proceso. ! Muchos de los aspectos planteados por Mitchellya se han demostrado, otros quedan an sin resolver. Se conocen actualmente ciertas caractersticas de la membrana y de los transportadores que se encuentran en ella; tambin se conoce acerca de la composicin del complejo enzimtico que interviene en el proceso de la fosforilacin oxidativa. Aunque se sabe que el proceso que acopla el transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa, es el gradiente de protones, y que stesedisipa cuando se forma ATP, no se tiene an una explicacin completa de su mecanismo molecular.

Localizacin de los sitios fosforilantes

Uua vez conocidos los 4 coniplcjos dc la cadena respiratoria, se quiso conocer cules eran los sitios donde ocurra la fosforilacin oxidativa y la rxplicacin del nmero de ATPformados de acuerdo con el domador de electrouesa la cadena respiratoria. Varios mltodos fueron einpleados para lonilizarlos. Se utilizaron inliibidores, se realiz el clculo de la energa que se liberaba al ser transportados los electrones en cada uno de los complejos, se aislaron e incorporaron cada uno de ellos a vesculas lipdicas, y se incubaron dichas vesculas con sus donantes y aceptores de electrones particulares. Con todosestos procedimientos todo pareca indicar que eran 3 los sitios donde se lleva a cabo la fosforilacin oxidativa. Se describir, como ejemplo, unade las formas con las cuales se lograron datos que reafirmaron la localizacin de los sitios de fosforilacin oxidativa. Uno de los mtodos que corroboran que eran 3 sitios donde ocurra la fosforilacinoxidativa, era el del clculo de la energa libre en relacin con la diferencia de potencial de reduccin involucrado en cada unode estos 3complejos. Aplicando la frmula utilizada en elcaptulo anterior:

donde AE representa la diferenciadel potencial de reduccin entre los 2 componentes redox -inicialesy final- que participan en cada complejo dela cadena transportadora de electrones. Como podemos ver en la figura 40.4,se puede calcular la energa libre asociada a cada unode estos complejos. Sise requieren al menos 73k d para la sntesis de un molde ATP,vemos como esto se cumple slo en los complejos 1,111y IV.

Acontinuacin se describir la estructura y composicin del complejo V ATP sintetasa, cuya funcin es la de lafosforilacin oxidativa. Luego se tratar acerca de la cuantificacin, localizacin y mecanismo de la fosforilacin oxidativa.

Complejo V ATP sintasa

Situada en la membrana interna de la mitocondria, se han asociado a este comple.jo V 2 funciones,amhas debidas a l a actividad reversible de la enzima: 1.La sntesis de ATP, acoplada a la energa que hrinda el gradiente de protones, y que se formaduranteel transportede electrones. 2. La hidrlisis de ATP, al acoplarse a la traslocacin de protones de la matriz al citosol, con el paso de los cationes como el K', Na*, Ca". Este captulo trata solamente de la primera.

Estnidura del complejo V: la ATP sintasa

La descripcin quese brinda a continuacin es la del compkjo V mitocondriai,& difiere algo del de procariotes y de algunas otros organismos unicelulares inferiores. En fotografas realizadas en el niicroscopio electrnico, este complejo aparece como pequeitas esferas o hotones que se proyectan por el lado interno de la membrana interna mitocondrial, hacia el lado de la matriz. h a s fueron Ilamadas en un principio las partculas elementalcs. Kvalmente ellas representan slo una parte de la ATPsintasa. El complejo V lo forman 3 porciones: la cabeza, la hase y el cuello (Figs. 40.1 y 40.2). La caheza, actnalmeute conocida como suhunidad F , , se corresponde con las proyecciones antes mencionadas. El dimetro de las esferas es de 8,s-Y nm. En ellas se localiza la actividad de sntesis de ATP. Estn unidas por unos tallos de 5 x 3 iiin, el cuello, a la memhrana, donde se encuentra la tercera p o r c i h que sc corresponde con la hase. Esta iiltima es la suhunidad F,, de 6 x 1 2 nm, tambifn conocida como el canal de protones, por donde kstos pasan al disiparse el gradiente durante el mecanismo de forniacin dcl ATP.

9 nm

4
I

inm
6 iim

La F, contiene5 clases de protenas: dfa, beta,gamma, delta y psilon. La relacin mediante la quese unen es de alfa,heta,gamma,delta,psilon,. 3 subunidades alfa Las se relacionan estrechamente entre si; tambin tienen una relacin estrecha con las beta y se alternan. Las garnma estn en contacto tanto con las alfa como con las beta, pues su segmento C terminal seinsina en el canal central qnedejan lasalfa y la? beta, y por el lado contrario se une al cuello. La OSCP (del cuello), ver en el prximo epgrafe, se relaciona tanto con las partculas aifa, como con las heta. Otros detalles de estas proteinas pueden verse en la tabla.
%bis.

Peso molecular y funcin de las protenas de la partcula 17, Peso molecnlar Funcin Relacin

Partcula

12 iiin

50-52

Centroactivo UnelaF, con la F,,

Se le unen ADP y ATP

Gamma

31-32

Cuando las F, son desprendidas de las membranas, por mtodos experimentales, la membrana interna se vuelve permeahle a los protones, al parecer por la apertura de los canales formados por los proteolipidos en la F,,. Este canal se sella si se reunen la F,,con la F,.

El tallo o cuello, ausente del complejo V en procariotes y cloroplastos, pero presenteen el complejodelas mitocondrias,estformado por 2 proteinas: la F,, que es indispensable para la unin de la F, con la F,,,y la llamada OSCP -01igumicinsensible conferring protein, es decir, proteina que le confiere a este complejo V la sensibilidad a !a o!igomirina, Sin enihargo,!a o!igomicina no se ?inea sta,sino a una proteina de la base.

SubunidadF, o base
La base del complejo V, o subunidad F,,,unida a la membrana interna, contiene numerosas protenas hidrofbicas, proteolpidos, y es la traslocadora de protones o canal de protones. La forman 4 protenas, una de ellas, la proteina de unin para la DCCD (diciclohexilcarhodiimida), est repetida 6 veces y se organiza alrededor de la base del cuello en forma de cu'as de un pastel, pero en el centro deja un canal que secontina con el del cuello y donde se encuentran los residuos del aminocido,cido glutmico.

Cociente Pi/O
La reaccin de formacin de ATPes la siguiente:

Tambin se utilizaron inhibidores para localizar los sitiosfosforilantes. Utilizando al NADH como donador de electrones, si se inhibe la citocromo oxidasa con C N y se aporta suficiente citncromo c oxidado, se ohtiene un Pi/O = 2. En este caso se ha impedido, con el inhibidor, que se puedan transportar electrones por el complejo IV. Asise compmh quese formaba un A'I'Pmenos, y se crrydemostrar qiie en el complejo IV ocurre un acoplaniiento entre el transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa. Utilizando otros inhibidores se corrobor el acoplamiento de la fosforilacin con el transporte electrnico en los otros comple,jos ya mencionados. Con experimentos y datos senie.jantes se localiz el segundo sitio entre la CoQ y elcitocromo c, y el prinlero entre el NADH y la CoQ. Estos resultados mostraron que los sitios Usforilantes sc correspondan con los complejos 1,111p lV. Algunos investigadores dudaron en cuanto a si se forniaba Al'Pdirectaiiiente en cada uno de estos complejos, o si se iitilizaba la energa del gradiente total, formado por los 3 coniple,jos,en la forinacin de los 3 ATP. Segun datos obtenidos ms recientemente, la fosforilacin oxidutiva no est localizada ensitios especficos en cadauno de los complejos mencionados, sino que entre los 3 complejos se genera la fuerza protn motriz que hace posible la sntesis de ATP.

Economa y eficiencia
EIIel captulo 38del ciclo de Krebs Iiabaiiios visto que eii l se formaliaii 3 NADII. un FADH, y uii GTP. Como por cada NADH oxidado en la cadena reqiir~toriase fonnan ~ ~ 2 3 A T P la fosforilacin oxidativa, y porcada FADH, se forman 15, el total de ATP f0rniados apartirde ladegradacin de un m d de acetil-~oAes 10 molde ATP. Pero de en la formacin de &tos nose consume toda la energa qiie est contenida en un mol de acetil-COA.Una parte de esa energa se pierde como calor. Se ha calculado experimentalmente que la energa que se libera por niol de ATP Iiidrolizado es de 7 3 kcal, y la misma cuanta se enipleara en su formacin, pero como en la niitocondria la relacin [ATP]I[ADPI[Pil es alta, es posible que se rrquieran haita 12 kcal.mol- en su sntesis. La oxidaciii de un NADH en la cadena transportadora de elechonesnos brinda -52,6 k d n ~ o lConio por cada NADH sefoniian 2 3 ATP,se conxr. varan 18,75 kcal.inol. La eficiencia en la conservaein dela energa ser del 35,6 %.

Teora que explica la fosforacin oxidativa

La teora postulada por PeterMitchell como ya se niencion6,esla ms aceptada enlaactualidad debido alos mltiplesdatos obtenidos a su favor. Este investigador seal determinadas premisas que deban estar presentes y cnmplirse, para que se llevara a cabo la fosforilacin oxidativasegn su hiptesis. Estas premisas son las siguientes:
l. Alser transportados loselectrones por los complejos dela cadena respiratoria, se creaun gradiente de protones. 2. La membrana interna dela mitocondria es impermeable a los protones, puesto que de lo contrario no se forma el gradiente. 3. Los transportadores de electrones o complejos estn organizados en la membrana de forma vectorialde modo quelos protones son extrados de la matriz hacia el espacio intermembranoso y asse genera un gradiente de ellos. 4. La ATPasatamlnn estsituada de forma vectorial enla membrana y libera el ATP sintetizado por ella hacia lamatriz, y se pone en contactoeon los protones por el espacio intermembranoso.

La energa que se deriva de este gradiente protnico es la utilizada por el complejo de la ATPsintasapara formar el ATPen lamatrizinitocondrial.

Evidencias que apoyan la teora quimioosmtica

De los estudios realizados acerca de la respiracin celular se han ohtenido las conclusiones siguientes:

1.Con el transporte de electrones efectivamentese genera un gradiente de protones a travs de la meiiil>ranainterna de la mitocondria. Se ha medido el pH en aiiilios lados lados de ella y se ha obtenido una diferencia en el valor del pH entreanil~os de la membranas de 1,4 unidades. 2. Si se aplica un gradiente de pA entre ambos ladosde la membrana interna de la initocoiidria, aun sin existir transporte deelectroucs,se forma ATP. Por e,jeiiiplo.si se incorpora el complejo V a vesculas lipdicas que se encuentran suspendidas en un baoa un pH aproxiniadamente neutro. y de forma brusca se le cambia el pH del medio donde se hallan suspendidas las partculas, sc crea un gradiente ino~iiciitneo entre ambos lados de la membrana, lo que provoca la sntesis de AI'P. 3. Con las enzimas solubles no se forma ,Vil', slo ocnrre esto en compartiiiientos cerrados o vesculas, lo que nos confirma la necesidad de qne se foruie el gradiente y qnela membrana sea impermeable a los protones. 4. Lssuitanciasque timsportan protonesa trav&de la membrana, di.~ipan &~acIiente a el y desacoplanlas oxidadones de la fosforilacin. A estas sustancias se las denomina desacopladores. S. La cadena transportadora de electrones y la AI'P sintasa estn orientadas vectorialnieiite en la nienibrana iuterna mitoeondrial. Ms adelante se describir cnio puede conocerse la localizacibn vectorial de una inacromolcnla en una membrma

Asimetra de la membrana interna mitocondrial

Segn la teora qnimioosmtica son varios los procesos involucrados en la cadena respiratoria que deben cumplir con la caracterstica de ser vectoriales. En primer Ingar, tenemos al sistema involncrado en el bombeo de protones, cuyos mecauismos propuestos se describieron en el captulo 39. En segundo lugar, tenemos al sistema de la ATP sintasa o complejo V, en el que se realiza lasntesis del ATP, pero siempre hacia la matriz. Existen tcnicas de investigaciii que pueden demostrar la existencia o no de protenas que se encuentran orientadas de forma especfica en las membranas. Con procediniientos de laboratorio se pneden formar vescnlas a partir de la membrana interna dela mitocondria qnea veces contengan ensu cara externa la misma cara que en la mitocondria intacta, pero que otras vecessea sil cara interna habitual la que est hacia el exterior (Fig. 40.5). Cuando se usa la tcnica de lasonicacin -fragmentacin delasmembranascon ultrasonido-se forman vescnlas a partir delasmembranas rotas que contienen las partculas F, hacia el exterior. Esto hace que sean muy tiles para experimentos en los que se quiere tener lacara de la matriz de la membrana interna aseqnible a sustratos, inhibidores o marcadores. Si a estas mismas vescnlas se les somete a una agitacin mecnica, se pierden estas partculas, con lo cual se pierde la actividad de fosforilacin oxidativa, pero no la del transporte electrnico. Si se renen las vesculas con las partculas recuperan la actividad perdida. Debcinos recordar que esta membrana es impermeable a iones, y mucho ms a por molculas mayores como el ATP, ADP, otros cofactores y ~wotenas, mencionar

Fig. 10.5. Ol>tcnci<inde vesieulas de la itieiiiIhmna interna niitocondrial. a) I'oi. iigitacin iiierinica. b) I'or sonicacin.

algunas. Los investigadores han usado ambos tipos de vesculas con el fin de unir un dcterniinadocompucsto a las protenas que presenten alguna porcin de ella^ expuestaa la supericieexterna de la rrscula pala marcarla. Si Iiicgodeniarcadas,seextraeu las protenas y se purifican,se puede conocer su loialiaaciii en esa membrana. Por ejeniplo, una protena X se marca con un reactivo utilizandoainbm tipos devesnilas, esto sugiere que es uiia protena trausmembranal. Si slo se niarca con el reactivo cuandose utiliza una sola de las vesculas,esto sugierequedicha protena est expuesta U la snperficie y que est localizada en la cara que presentaha la vescula al exterior (Fig. 40.6).

Fig. 40.6. Marcaje de lar proteinas de las membranas. Si una vescula rnemhranosa cerrada contiene pruteinas, y se quiere conocer si Gstas son transmnnbrsnalcs o no, se uti. liza un marcador protenico impermeable a la vericula. Lucgn de marcadas, las ieseulas se lavan para eliminar el marcador lihrc y lar protenas sc purWran. 1% quc qucd~n marcadas scrn las que presentaban nlgn rea de su superlicic en contacto con la superiieic cxterna de In vesruta.

Se han usado varios tipos de marcadores, entre ellos encontramos a los antieuerpos a protenas especficas. Una condicin que deben cumplir los reactivos marcadores empleados es queno pueden atravesar la membrana, y asslo pueden iraccionar con la cara cxterna; estacondicin lacumplen los anticuerpos.Si sta queda niarcada con los anticuerpos especficos que fueron utilizados, por uno de sus lados solamente, querr decir quees una protena que est expuesta a esa superficie y queseencuentra en la cara de la membrana en la cual se adicion el anticuerpo. De tale. investigaciones se ha demostrado que todos los complejos en los que se conserva la energa,atraviesan hmembrana, presentando una porcin de ellos a amhos lados de esta ltima.

Mecanismo de la fosforacin oxidativa

Una vezdescritoloconocido acerca dela estructura del coniplejo V ATPsiutasa, y de las evidencias ohtenidas del estudio de este proceso, pudiramos intentar describir, a grandes rasgos,cmo ocurm este proceso. Consideremos entonces que inmersw en la membrana interna de la mitocondria se Iiallan los coinple,jos que integran la cadena respiratoria (Fig. 40.7). El transporte electrnico se est llevando a rabo en los complejos del 1 al IV, y a la vez est ocurriendo el bonibeo de protones de la matriz hacia el espacio intermeinbrauoso. Adems dc tener cantidades suficientes desustratos ouidables que aporten los electrones a la cadena respiratoria y O,, tambin estarn presentes eiilamatnz,concentracioncs adecuadas de AUPy Pi qn6culran el centroactivo dela ATPsintasa. Dehido al transporte de protoncs se crea la l'uerra protn niotriz necesaria, y cuando el gradiente electroqumico alcanm uiia fuerza p r o t h motriz de 0,ZZ V, el flujo de protones abre el canal del complcji) V y se introduce en l. Esto produce la encrgizaciii de este complejo. El flu,jo de 3H4,a travs de ste, disipara el gradiente y uno dc los H'sera el responsable de liberar al ATP formado en el centro activo.

Cofactores reducidos

Procesos catablicos Ciclo de Krebs

H'

1, 1 1 y IV: trcs de los coniplejos de la cadena transpoitadora de electrones: V : ATP 1 sintetasa: T, : traslocador ATP-ADP; T1: transportlidor de foihto.

Relacin entre la fuerza protn motriz y la sntesis reversible de ATP

Laenerga que genera el gradientede protones liasido cuantificada por la Iormiila conocida:

La AP, en este caso, es la diferencia de potencial entre ambos lados de la membrana generada por el gradiente electroqumico, tambin llamada fuerza protn motriz; la componen 2 tipos de fuerzas que se generan a travs de la membrana: una fuerza derivada del gradiente elctrico (Av) y la otra derivada del gradiente qumico de protones (ApH). Fuena protn motriz = A y - Z (ApH) 1 1ApH,diferencia de pH entre ambos lados dela membrana, llega a alcanzar 1,4 5 de unidadcs, y el A~,difcrencia potencial cntre ambos lados de la membrana, llega a ser dc 0,14 V. La Z de la frniula constituye una constante y es de 0,06 V a 37 "C. Efechiaiidola frmula Iiallaremos un valor de fuena protn motriz dc 0J2V para 1mol de protones, lo que aplicado a la priniera lrmnla da una energa libre equivalente a -5,16 kca .mal.'. Comoporcadamol de ATPformadose translocan3 molesde protones, se produce suficiente energa para la produccin de nn ATP.

Algunas caractersticas del centro activo

La modificacin covalente de la F, con inhibidores anlogos al ATP, indican que la subunidad beta es la eataltica, aunque existen datos que parecen sealar que el centro activo se encuentra formado por ambas subunidades, la alfa y la beta. Como grupos catalticos parecen intervenir 2 tirosinas, una arginina, una lisina y un carbodo.

Mecanismo ntimo de la catlisis del complejo V

En primer lugar, el nucletido debe estar unido al ion de magnesio (Mg") para poderse fijar al sitio cataltico. La fijacin de cada uno de los 3 nucletidos en cada

+H

H'

+H

H*
+H

H+

-, Pi + + +++
;4-.

P'

,...,, .i;~
~

v
'

~~~

+++

l,.iC,

,,,, ,,

Icaet,ircs iiiiplic;idl,s la t<,rf'orileci6norid;iiirz. En el con>plc,jo \: a partir dcl I'i y r l r l i D P . se fOma cl I'P.

una de las 3 subunidades, se lleva acahocon una cooperatividad positiva. La tijacibn del sustrato en una de las subunidades favorece la unin en laseguuda, y la unibn en la tercera es an nis fcil.

interaccionei de las subunidadesdurante el mecanismo de sntesis del ATP Las 3 subunidades beta tienen interacciones cooperativas. Las 3 se encuentran en estadosconformacionales y hincionales distintos y sealterna un estado con el otro, de forma cclica. La sntesis del ATPpuededividirse en3 etapas.En la primerasefijarau al centro activo el Pi y el ADP-Mg". En esta etapa la unibn delos sustratos a la enzimaes dbil y puede realizarse un intercambio de ellos con otros del medio. La segunda etapa implica la sntesis del ATP, y en a t a etapa. tambin reversible, tanto sustratos como productos etn fuertemente unidos a la enzima y ninguno de ellai puede intercambiarie con otros del medio. El paso de los protones a travs del canal impulsalalihenicibn del A'I'P. En la tercera etapa, ya formado el ATP, vuelve a ser dbil la unin con la enzima, y se puede intercambiar cou ATPdel medio. Estas mismas etapas, en sentido inverso, ocurriran en la hidrlisis del ATP, con lo que se energizarian las membranas y se podra utilizar esta energa en cl transporte de iones (Ca", por ejemplo). Los investigadores hansugerido la existencia de3 conformaciones diferentes en las cahezasdeeste coniplejo. Estas 3conformaciones se alternaran regularmente durante la actividad de la sintetasa. En cada subunidad beta se alternanan las siguientesconfnrniaciones: la L, la T y la O. ATP

La unin de ADP y Pi en una subunidad L provocara la unin fuerte y sntesis de ATPa la segunda subunidad T, mientras que en la tercera, O, se promovera la liberacibn del ATP. Ahora,en la O transformada en L,sefjarian lassustratos, en la L transformada en T sesinteiizara ATP, mienhay queen la T transformada en O se liberara ATP. El paso de los protones por el interior de la ATPsintasa provoca la liberacin del ATP al promover el cambio de T en O.

Control de la respiracin celular

La respiracibn celular es regdada,fundamentalmente,por el potencial energtico celular, niveles de ATP, ADP y AMP, annque contribuyen todos los factores que se requieren en los diferentes procesos que forman parte de ella. El ~hjodelos~rotones~del ckoplasmtico a la matriz energiza este complejo, lado y se produce la liberacin del A'l'Pen lasubunidad correspondiente. La unin del ADP, sobre todo, pero tambin la del fosfato, activan la A~Psintasa abriendo el canal para que se prodnzca el paso de los protones. Forman parte de la respiracibn celular, el ciclo de Kmbs y la cadena respiratoria, y en sta se encuentran acoplados los procesos de la cadena transportadora de electrones y la fosfonlacin oxidativa. Enipecemos por esta ltima.

Regulacin de la ATP sintasa En el ao de 1962se descubri una protena que inhiba la ATPasa mitocondrial. Posteriormentese vio que tambin inhiba la reaccin directa del comple,jo V, la sntesisdel ATP. Se oherv que esta protehainhibidorase une a las snbunidades b e b de la F, cuando se encuentra presente el ATP-Mg", lo que provoca la inhibicin de la enzima tanto en su reaccin hidroltica como biosinttica. La desinbibicin se logra por la fuerza protn motriz, y en presencia de ADP y Pi. La regulacin de la ATP sintasa mitocondrial por esta protena inhibidora se relaciona ntimamente con la Iionieostasiscelulardel Caz*.La recaptura de Ca" por lai mitocondrias utiliza la fuerza protn motriz, y como la fuerza impulsara de la fosforilaeinoxidativa es tambin la fuerza protn niotriz, anibas pueden, en determinadas circunstancias, conipetir por ella. Sin enihaigo. con Mn" presente, puedc ser recapturado el Ca" sin inhibirse la sntesis de ATP. Se haeeneeesario estudiar ni& profund;~inente inhibicin para llegar a tener esta mayores conociniientos acerca de su funcin fisiolgica.

De esta forma se une o no el ADP a esta partcula. En resumen, la ATPsintasa se inhibe al unirsele la protena iiiliihidora, lo que ocurre en presencia de Ca", un pobre gradiente protnico y un potencial energtico alto. En cambio, se desinhibe cuando el potencial energtico es ba,jo, y se eleva la fuerza protn motriz. Esia ultima depende del transporte de electrones. La ATP sintasa tamhin se encuentra regulada por las concentraciones mitocondriales de ATP y ADP. Estos nucletidos no pueden atravesar la membrana interna mitocondrial, sin embargo el ATPdebe salir al citoplasma y ser utilizado en diferenlrs pmclsos. en tanto que el ADPy el Pi dekii entrar, pues a partir de ellos sc fonna el ATP. El paio de estos compuestos depende de sus transportadores (captulo37).

Aspedos generales de la regulacin de la respiracin celular

A lo largo de este captulo y el anterior se Iian visto los factores implicados en la regulacin de la respiracin celular. stos se encuentran esquematizados en la figura 40.8. Entre los factores fisiolgicosque pueden afectar el transporte electrnico, podemos citar la concentracin de los cofxtores reducidos. Estos compuestos que transportan hidrgenos a la c-ndena transportadora deelectrones pueden acelerar o deprimir su funcionamiento en dependencia de sus concentraciones. Otro factor que se debe tener en cuenta es el xigeno. puesto que este conipuesto es el aceptar final de los electrones. Tambin es mny importante la intensidad del gradiente quese forma eu el proceso de la traslocacin de los protones. Independientemente de la forma en que se produzca el mecanismo ntimo de la fosforilacin oxidativa y el bombeode los protones, como ambos procesos se encuentran acoplados, al inhibirse de alguna forma uno de ellos, el otro tambin queda inhibido. Por ltimo, el ciclo de Krebs es uno de los factores fundamentales que regulan la respiracin celular, puesto que desu funcin depende, en gran medida,el aporte de los cofactoresreducidos. El ciclo de los cidos tricarbomlicos requiere del sustrato oxidable, el acetil-COA,que proviene del catabolismo de glcidos,del de los aminocidos,~ de

los lipidos, y de la anaplerosis que provee la restitucin de los rnetabolitos intermediano rios. Pero tambin requiere los cofactures oxidados y que sus enzin~as seatcuentren inhihidas. No dehernos olvidar el potencial energtico celul:ir, la relacin entre las concentracioues (le ATP y las de ADP, fundamentalniente. Para que ocurra la Fosforilacin oxidativa se requiere la presencia de ADPen la matriz initocondrial, y que las concentraciones dc ATP no estn altas. Esto depende de las necesidades energticas celulares. El intercambio entre estos 2 nucletidos selleva a cabo por el traslocador de ATP-ADP, que depende a su vez del gradiente de protones, y esto casi cierra un ciclo, porlo que se puede decir que las oxidaciones celulares se autorregulan (Fig. 40.8). Sostrato~ oxidahle~ Acetil - COA

transporte

Fosforilacin oxidativa

Procesos celulaes que consumen ATP Factoi-es que inl~ihen procesos los

Fig. 40.8. Heplaeibn de la rcspiraciiin relular.

Factores que activan los procesos

Desacopladores e inhibidores de la fosforilaci6n

Desacopladores
El 2,4 dinitrofenol (a) yotros compuestos, al disolverse en la nieinhrana y pasar a travs de ella, transportan protones, captndolos en el exterior y liberndolos en el interior, y corno consecneneia se disipa el gradiente. Es por ello que desacoplan el transporte electrnicode la fosforilaeinoxidativa: no se pmduce ATPpor la carencia

del gradiente protnico necesario, pero a su vez, el transporte de electrones se ve grandemente favorecidoal podcrse traslocar mayor cantidad de protones; de esta formase consume mc oxgeno. Al disiparse el gradiente,se pierde el potencial energlico contenido en l, y la cnerga selihera en forma decalor. Por esto eldesacoplamiento es un mecanisnio biolbgico que gciiera calor. De hecho, el tejido adiposo oscuro es muy rico en niitocondrias, y se encuentra especializado en este proceso dc la tennognesis. Otros desacopladores son el dicoun~irol y la A-carbunuanumfenilhidnzona (c). (h)

Muchos han sido los inhibidores de la fosforilacinoxidativa que se han empleado para iiivesiigar este proceso. Estos conipuestos interfieren en la sntesis del ATPpor el complejo V initocondrial sin intervenir en el Lransporte electrnico. Sin emhargo, este ultimo proceso se ve afectado cuando se usan inhibidores de la fosforilacin, ya que ambos procesos se encuentran acoplados. La aurovertina D es un inhibidor de la fosforilacinoxidativa y es fluorescente. Su fluorescenciase incrementa al unirse a la ATPsintasa, sobre todo en presencia de ADP, pero en presencia dc ATP esta fluortscencid se elimina. Este inhibidor se une a los 3 sitios de unin de las F,, al nivel de las subunidades beta, pero con desigual afinidad para cada sitio. La efrapeptina es otro inhibidor de este proceso y acta inipidiendo la unin del fosfato. Compite con el fosfatoy el ADPdurantela sntesis de ATP. La oligoinicina interfiereal unirse a una de las protenas de la base de la ATPsinlasa.

Resumen
La fosforilaan oxidativa e~la sintesis del ATF'amplada al transporte de elnes, y se Ueva a cabo en la membrana interna de la miiomndria En el transporte de , el&nes parcipan 4 cnmplejm, pero slo 3d e d o s , el 1el III y el N, intervienen en la fosforilacin oxidativa Al ser transprtadm lm electrones a lo largo de estos mmplejm, y por un meranismo an no bien aclarado, se produce un bombeo de prntones de la matriz a travs de la membrana interna, haaa el espacio intermembranow. Esto produce un gradiente eleetroqunim entre ambos lados de la membrana interna que cuaudo alcama una hiena prnin motriz de O p V, y por memismos todava poco

conocdos, vuelven a fiuirlos pmtones a travs del complejo V 6 ATPsintasa, lo que la eney se s i n t e h ATP. La ATF'sintasa se subdivide para su estudio en 3 partes: cabeza o partcula F,, que se proyecta hacia la matriz mitocondrial, el tallo o porcin intermedia o cueLlo, que une a la F, a la base o partcula F, sta se sita en la membrana interna y es transmembranal. La cabeza contiene S protenas diferentes y se subdivide, a su vez, en 3 subunidades.En cada una de estas subunidadesse s i o t e h ATF'defomm alternada v consecutiva. al i r cambiando la conformacin de ellas. Este oroceso de fosforilacin oxidativa depende del paso de los pmtones a travs de la ATF'sintasa, lo que disipa el gradiente; tambin depende de la unin de las molculas de ADP y Pi a los centros activos. El paso de los protones ocurre a lo largo del canal que recorre tallo, cuello y cabeza y, como yn se mencion, cuando el gradiente electmqumiico llega a un cierto nivel. La energa que estaba contenida en los cofactoresreducidos es muy bien aprovechada en la sitesis de ATF'. La regulacin de la sntesis del ATF'est muy relacionnda con la regulacin del transporte electrnico y con el ciclo de Krebs. El ATF', al unirse a una pmteina inhibidora asociada al complejo V, lo inhibe, pero tamhin se debe recordar que el ATF' a su vez inhiba el cielo de Krebs, lo que pmvoca menor produccin de cofactores reducidos. Esia falta de s u s t r a h enlentece la cadena transportadora y disminuye la f o m a n del gradiente protnico. La desinhibian de todo el sistema se logra con la presencia de mayores roncentraciones de ADP y Pi, al ser el ATF' consumido por el organismo. La presencia de ADP activa enzimas del ciclo de Krebs siempre que exista el alimentador correspondiente (el acet-COA)y sucienies meiabolitos intermediarios -sobre todo 4cido oxalactico. Esta activacin del cielo aumenta la produccin de cofactores reducidos, lo que activa el transporte de electronesy aumenta el gradiente protnico que, a su vez, se est disipando a travs del canal de la ATPsintetasa, ya que ste se encuentra abierto debido a que los centros activos se hallan ocupados por ADP y Pi, lo que ha provocado el desplazamiento de la protena del centro activo.

Ejercicios
1. Haga un esquema que justifique la sntesis total de ATPque se obtendra de la oxidacin de un m01 de acetil-COA. 2. Relacione todas las protenas que iiitervendriaiien la produccin del prinier mol de ATPdel prol>leo~a anterior. 3. Si incorporramos a un liposoma el coiiiple,jo 111y el V, ,qu otros factorcs se tendran que adicionar para quese llevara a cabo la sntesis de ATP? 4. Cmo podra demostrarse, tcbricainente, con el uso de ioliibidoresquc el complejo 1 es un sitio en el cual se libera suficiente energa para que se produzca la fosforilacinoxidativa? Mencione los iiihibidores que se emplearan. 5. :,Podra ocurrir la sntesis de ATPcn ausencia de la E,? Explique su mpuesta. 6. Haga un csqucina que relacione el ciclo de Krclx con el transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa. Basndose en este esquciiia, explique la regulacin de la respiracin celular: a) Ciiando la relacin cofactorcs reducidoslcofactoresoxidados es alta. b) Cuando la relacin ADPl ATPes alta. c) Cuando disminuye el PO, debido a una isqiiemia.

El trmino inetabolisnio se origina del griego metiibolt!, que significa cambio. Fue utilizado por primera vezen el tratado acerca de la teoria celular de TbeodurScu~ann en 1839,pero su uso no se generaliz hasta ser retomado por AlicliaelFo.ster,en 1x78, en su texto de fisiologa, y unos aos despus por Ruell H. Cliittenden, en sus publicaciones cientficas. Hoy, niuchos autores definen el metabolismo conio el conjunto de todas las reacciones enzimticas del organisnio, si bien algunos consideran que deben incluirse en el concepto ciertas transforniaciones de naturaleza fisicoquniica,tales coino los mecanismos de transporte de snstancjas. Para consultar otros aspectos relacionados con el trmino metal~olismo sus very tientes anabolismo y catabolismo el lector debe acudir al captulo 21. Por su parte, el concepto metabolismo intermediario se encuentra todava en evolucin. Algunos autores an lo utilizan como sinninio de nietabolismo, pero la mayora suele asociarlo con el de metabolismo energtico, sobre todo con aquellos procesos relacionados con la produccin de energia inetablicaniente til. En este texto entenderemos como nietabolisnio intern~ediario aquellos procesos metablicos vinculadoscon la incorporacin, intercoiiversin,degradacin y excrecin desustancias biolgicas de ba,jo peso niolecular. Se refiem fundamentalmente al metabolismo de los inonosacridos, aminocidos,cidos grasos y compuestos relacionados. Se excluyen de la concepcin de nietabolismo intermediariolosprocesos relacionados con lasntesisdemacromolculas -con la excepcin del glucgeno. Hoy casinadie considera los procesos de la gentia molecular como parte integrantedel nietau~~nio intermedio. Ntese que con esta definicin los procesos de la respiracin celular (seccin VII) deben ser considerados como integrantes del metabolisn~o intermediario, si bien su inters particular justifica su estudio por separado.

Funciones del metabolismo intermediario

Al metabolismo intermediario le corresponden las funciones siguientes: 1.Obtencin de energa metablica. 2. Suministro de precursores para la sntesis de macromolcnlas y otras sustancias necesarias al organismo. 3. Interconvenin de estas biomolculas. 4. Eliminacin de sustancias de desecho.

La primera funcin se relaciona, fundamentalmente, con la produccin de ATP, lo cual se consigue mediante el catabolismo de diferentes sustancias. La gluclisis y la p oxidacin de cidos grasos son ejeniplos destacados de procesos vinculados con esta funcin. Los compuestos que parlicipaii en el metabolismo intermediario son la fuente inmediata para la sntesis de niacromolculas. tales como las protenas y los cidns nucleicos, y tanibiii son utilizados en la produccin de cofactores y otras sustancias que cumplen importantes funciones biolgicas, tal es el caso de la sntesis de grupos hemo y de creatina,entre otros. Los procesos del metabolismo intermediario permiten, en gran medida, la conversin de unos precursores en otros, lo que resulta extremadamente importante para satisfacer las necesidades cambiantes del funcionaiiiieiitocelular. Ejemplo de ello es la glucoiieognesis, proceso mediante el cual la clula puede obtener glucosa a partir de otros compuestos tales como los aminocidos. Por ltimo, el metabolismo interniediario incluye procesos metablicos que posibilitan la eliniinaciii de siistancias que constituyen productos finales de la actividad celular, y que incluso en determinadas circunstancias pueden resultar potencialmente txicas. Tal es el caso del amonaco, el cual es transformado, parasu elin~inacin del organismo, mediante el proceso de la ureognesis.

Caractersticasdel metabolismo intermediario

Una caracterstica notable de los procesos que conforman el metabolismo intermediario es su universalidad. Ellos estn presentes en la mayora de las clulas del organismo, y ms an, se producen en forma muy similar en los diferentes seres vivos, lo cual, destacamos. es una prueba palpable de la unidad del mundo biolgico. Las reacciones del metabolismo intermediario estn, por lo comn,organizadas en vas y ciclos nietablicos; ejemplo de ello son la P oxidacin de los cidos grasos y el ciclo de sntesis de iirea, entre otros. En todos estos casos se expresa, de forma notable, el principio de los camhios graduales. El principio de multiplicidad de utilizacin se manifiesta en el hecho de que muchos de los compuestos que participan en el metabolismo intermediario pueden ser transformados por ms de una va metablica. Muchos de los procesosdel metabolismo intermediario pueden cambiar su direccin de funcionamiento de acuerdo con las necesidades del organismo; esto es expresin del principio de reciprocidad de las transforinaciones. A su vez, el principio del acoplamiento se manifiesta como transkrencia de sustancia y energa entre diferentes reacciones nietahlicas que pueden corresponder a un misino proceso metablico, o bien interconectar diferentes procesos entre si, lo que a su vez es expresin del principio de interrelacin. Esta ltima caracterstica determina que se establezcan estrechos vnculos entre diferentes procesos y contribuye, de modo notable, al funcionamiento de todos ellos de forma coordinada y armnica. El metabolismo intermediario est sujeto a delicados mecanismos de regulacin que posibilitan ajustar su funcionamiento tanto en el aspecto cualitativo como en el cuantitativo, esto es, se regula tanto la sustancia que se produce como la intensidad con la cual ello ocurre, evitando gastos innecesarios a la clula. Asse expresan los principios de mxima econonia y mxima eficiencia. Estas regularidades del metabolisnio intermediario permiten emprender su estudio sobre bases unificadoras, lo cual facilita extraordinariamente su comprensin y asimilacin. A continuacin consideraremos un elemento necesario para la comprensin del inetabolismo intermediario en su con,junto: el poojmetablico.

Pool metablico
El trmino ingls poolno ha encontrado an una traduccin adecuada al espaol. Por ello preferimos utilirar esta palabra en su idionia original. Para tratar de asimilar el concepto poolnietablico, o siinpleinente pon, tomemos una sustancia cualquiera, que en este caso ser el an~inocido asprtico. En nuestro organismo, el cido asprtico, en su forma lihre, se localiza en los fluidos biolgicos conio el plasma, la linfa, etctera, y tambin en el interior de las clnlas. Dentro de stas, el asprtico se encuentra en diferentes compartiinentos, tales como la niatriz initocondrial y el citoplasma soluble. Si consideramos el conjunto de todas las molculas de cido asprtico con independencia de su localizacin,podemos referirnos al poolde asprtico del organismo. Igualmente podramos referirnos al poolde ATP, o incluso englobar varias sustancias relacionadas estructural y funcionalmente, y tratar entonces, por ejemplo, del poolde aminocidos (Fig. 41.1). En ocasiones resulta conveniente referirse a la fraccin de nn poolinetablico qne se encuentra localizada en un compartiinento deteriniiiado. As se emplean trniinos de tales coino podiiitracelnlar de nucle6tidos o~>ooliiitrainitocondrial NADH. Es importante destacar, a modo de ejemplo, que los nucletidos contenidos en cualquier clula del organismo se consideran parte integrante del poolintracelular de estas sustancia$,aun cuando entre ellos existan barreras fisicas, tales conio las membranas celulares (Fig. 41.2).

Mol6culas de la iiiisiiia especie

Fig. 41.1. Torlas las niolrular de lo misma cspeeic que se encuentran en nuestro organismo pueden considerarse integrantes del pool comn dc esa especie moleeular, independientemente de su localizacin en un momento dado.

I'ig. 11.2. Todas las niolri~lasde una siistanria que se localizan dentro de las clulas pertenecen al pool iiitracelular de dicha sustancia, aenqiic los rompartimicntos intracelulares se Iiallen separados en las clulas iiidi~idualcspor sus carrcspondicntcs nienibranas plimntiras.

La ventaja inetodolgica del trmino radica en que todas las molculas pertenecientes a un mismopoolpneden participar en los mismos procesos nietahlicos y estar sometidas a los mismos mecanisnios de regulacin. El concepto pool no es slo una cmoda abstraccin, sino que tiene una base objetiva debido a la estrecha coordinacin existente en el funcionamiento de todas las clulas del rgano u organisnio. El hioqumico puede estudiar el estado y comportamiento del poolde un compuesto determinado en los hepatocitos de un fragmento de hgado, por ejemplo, y de niodo general puede extrapolar sus conclusiones a todos los hepatocitos del hgado, pnes lo conin es que, en un momento metablico dado, todas e s t a clulas presenten un panorama metablico comn (Fig. 41.3). El lector perfilaresta concepcin en la medidaen que profundiceen sus estudios sobre el metabolismo. De cuanto queda dichu debe entenderse que un pool metahlico no ser nunca esttico, sino que se caracterizar por un equilihrio dinmico, expresin del principio

Fig. 41.3. El I>anoraima iiietahlico estudiado en un grupo de clulas de un 6rgmo refleja, dc modo general, cl estado iiietahlico de todas las clitlas del inisnio tipo que forman parte de dielio i-gmo. Esto permite deducir su estado funcional a partir del estudio de un fragmento o grupo dc cliilss.

Entrada

metab61ico-

'dida

Kg.

dl.4

El pool nietbtilico cunstituyc iin concepto dinniico. E1 coinjunto de molculas que l'orman parte de un pool drterininsilo sc renueva contiiiiianiente nicdinnte loa procesos ~ U aportan y wstraeii siisiiniias C
de dirlio pool.

del recambio continuo, de niodo que existirn procesos que aportarn molculas al P o l y procesos que las sustraern de ste (Fig. 41.4). Las sustancias que participan en el metabolismo intermediario pueden ser coiisideradas como pertenecientes a un poolcomn. A continuacin se consideran los procesos quc aportan sustancias hacia el metabolismo intermediario y las sustraen desde l.

Incorporacin de sustancias al metabolismo intermediario

La incorporacin de sustancias al metabolismo intermediario se realiza a partir de fuentes endgenas y exgenas (Fig. 41.5).

Fuentes endgeiias ( macromolculas )

Fuentes endgenas Las fuentes endgenas que aportan siistancias al metabolismo intermediario. son, por una parte, los propios constituyentes del organisn~o.As, el catabolismo de las macromolcnlas conduce al incremento de las concentraciones de sus precursores constituyentes, que de inmediato quedan incorporados al metabolisino interniediario de stos. La degradacin de protenas propias rinde aminocidos que se incorporan al pooide estos coinpuestos; algo similar ocurre en el caso de los cidos iiiicleicos y de los polisacridos. Por otra parte, existe una sntesis endgena de los precursores constituyentes de las macromolculas. Debe considerarse aqu tambin el desensamblaje de las membranas biolgicas como fuente de conipuestos, sobre todo lipdicos, al metabolismo intermediario. En cierto sentido, las macromolculas pueden ser consideradas como reservorios de precursores que poteiicialniente pueden incorporarse al nietabolisino intermediario. Desde luego, en condiciones de equilibrio metablico, las macromolculas son sintetizadas y degradadas con similar intensidad, pero este equilibrio dinmico puede alterarse en determinadas circunstanciai. Las clulas poseen el aparato enzimtico requerido para la degradacin de diferentes macromolculas. iviuclias de estas enzimas tienen localizacin lisosomal. Los aportes endgenos de sustancias al metabolismo interinediario pueden resultar vitales para la supervivencia del organismo en condiciones tales como el ay uno. en el que el aporte exgeno es nulo o muy limitado (capitulo 61). Lgicamente, las fuentes endgenas no pueden satisfacer las necesidades del metabolismo intermediario por tiempo indefinido,o sea de no reponerse terminan por agotarse.

Sntesis endgena

Pool nietablico

4
Fuentes exgenas ( alimentos )
Fig. 41.5. El ingreso de sustancias al pool del nietabulismo interiiiediario puede ocurrir s parlir de fuentcs cnddgenas y de fiientes c\grnas.

Alimentos

Trituracin Dispysiy Solubilizacioii

Fuentes exgenas La fuente exgena que aporta sustancias al metabolismo intermediario, es fundamentalmente el suministro de alimentos al organismo. Con una dieta balanceada, los alimentos que consumimos contienen todas las sustancias requeridas por el metabl~lismo intermediario,o bien son precursores de stas. I?Isuministro de sustancias al organismo llega a61 mediantela absorcin intestinal. Si bien los alientos contienen algunos compuestosque pueden ser absorbidose incorp0rddoS como tales, ni otms asas, como el de l5inacmmolculasy algunos pidar, se precia a su dqadacin previa a sustanciasm v sencillas p a n que se produza su absoirin. De modo que los alimentos que ingerimos son sometidos a un proceso de digestin que posibilita su incorporacin al organismo por medio de la absorcin intestinal. En el proceso digestivo de nuestro organismo se pueden distinguir 2 aspectos, uno tundamentalmente mecnico y otro enzimtico (Fig. 41.6). Los aspectos mecnicos del proceso digestivo se relacionan con la trituracin, dispersin, solubilizacih y traslado de los alimentos ingeridos. Su estudio compete a la fisiologa.

Precursores de macromol6colas Otras sustancias de bajo peso inolecular Fig. 11.6. Durante
In digestin dc los alimentos se produccn eventos iiiceliicos y enriinitieos. Los prime10 ticncii un carirter prrparato's rio para la ocurrencia de la scrih

cnziniAtica.

Los aspectos enzimticos se refieren a la degradacin hidroltica, catalizada por enzimas, de los diferentes constituyentes de los alimentos, especialmente las macromolculas y algunos lpidos. En realidad, los aspectos mecnicos en buena medida son eventos preparatorios para la accin enzimtica, dado que la trituracin, dispersin y soluhilizacin de los alimentos facilitan la accin enzimtica ulterior. La accin de las enzimas digestivas convierte a las sustancias complejas, conteuidas en los alimentos, en sustancias de bajo peso molecular que son absorbidas por el intestino delgado ingresando de esta forma a nuestro organismo. Las sustancias que no son absorbidas salen al exterior con las heces fecales. Las enziinas que participan en la digestin de las sustancias contenidas en los alimentos son segregadas hacia la luz del tubo digestivo por glndulas o clulas especializadas, localizadas, fundamentalmente, en la boca,el estmago y el iiitestino delgado. Muchas de estas enzimas se segregan en forma de precursores inactivos denominados genricamente zimgenos o tambin proenzimas, que se activan por protelisis parcial y otros mecanismos, una vez que han alcanzado el espacio lumiiial. Las particularidades de la digestin de las diferentes sustancias contenidas en los alimentos, y de las enzimas que participan en estos procesos, se considerar11eii los captulos 42,47 y 54. Una vez absorbidas las sustancias, como resultado de la digestin de los alinientos, stas son distribuidas hacia todas las clulas del organismo (Fig. 41.7). Circulacin general

Resto del organismo

Hgado Sistema linftico Circulacin portal Intestino

Fix. 11.7. Al producirse la Iiidrlisis digestiva de los alinientui, los productosohtenidosson ahsorliidos y posteriormente ilistriliuidos por el sistema circulatork>a todas las clul del er~aiiismo. a

La mayor parte de las sustancias Iiidrosolubles ingresan por va sangunea al sistema portal y alcanzan el hgado, y de ah pasan a la circulacin general. El hgado no es slo un rgano de trnsito en este proceso, sino que acta como una verdadera estacin reguladora en el suministro de sustancias al resto de las clulas del organismo. Las sustancias de carcter Iiidrofbico (Ipidos)son absorbidas e ingresan al sistema linftico para alcanzar la circulacin general a travs del conducto torcico. En su transporte y distribucin desempean un papel muy importante las lipoprotenas plasmticas (capitulo 48). El resultado final deestos procesos es el suministro, a todas las clulas del organismo, de las principales sustancias que iiigresaii al metabolismo intermediario.

Salida de sustancias del metabolismo intermediario

Los diferentes compuestos que participan en el iuetabolismo intermediario pue. den ser utilizados en diversos procesos nietablicos o ser excretados.

, ,

Utilizacin

Excrecin
Fig. 31.8. 1.2 salida dc wstaiirias del puol del nietal~olirniointeriiicdi;irio se produce porqiie ellas s r m utilizadas -can fines energticos o p16sticm- u ~ ~ o r q isoii errretiid;is. ir

Fig. 41.9. Existe un estado d e equilibrio dinmico entre los precursores dc macromolculas que son sustrados del pool del metabolismo intermediario para la sintesis de macromolculas y el proceso inverso de degradacin d c inaeromolculas que suministra precursores al pool.

La utilizacin de estos compuestos puede ser la sntesis de macroniolculas u otras sustancias necesarias a la clula, o tambin la degradacin con fines energticos (Fig. 41.8). En realidad, las 2 posibilidades estn muy relacionadas; as, en la sntesis de n~acromolculas, metabolismo intcrmediario aporta los precursores necesarios y el tambin la energa que dicha sntesis requiere. En el wso delas snstanciasprecursoras,que paran a fonnar parte deniacroinolculas o de otros compuestos iiecesarios,susalidadcl inetaholismo interniediario debe cunsidcrarse transitoria, dado que en algn nioniento ulterior retornain a dicho nietabolisnio a1 ser degradadas estas inacroiiiolculai en virtud del recambio continuo a que estn sonietidas (Eig 41.9). En el caso de la degradacin con fines energticos, la sitiiacin suele ser diferente, ya que, demodo general, los productos obtenidos son postcriormeiite eliminados del organismo. Ciertos productos del metabolismo intermediario son excretados y salen al exterior por diferentes vas. Algunas de las sustancias que se excretan son verdaderos callejones sin salida del nielabolisino y no tienen posibilidades de ser reincorporadas a ste; tal es el caso deba urea v dela creatinina. Otras. en cambio. tienen la ~osibilidad metablica de ser reincorporadas, pero sueleii excretarse porque su produccin supera las posibilidades o necesidades de asiniilacin. Ejeniplo de ellas son el CO, y el NH,. Desde el punto de vista cuantitativo, los principales prodnctos finales dil metabolismo intermediario son CO,, H,O y NH, en forma de urea. El primero es un gas y se elimina con el aire espirado a travs de los pulmones. El H,O producida por la actividad metablica se incorpora al equilibrio hdrico general del organismo. El NH, se elimina como tal por la orina, pero la mayor parte es convertido en urea que sale al exterior por la misma va. En cierta% circunstancias, fisiolgicaso no, pueden excretarse otras sustancias del metabolismo intermediario, lo cual puede resultar til para valorar el estado funcional del organismo, e incluso, para el diagnstico de algunas enfermedades. Tal es el caso de la excrecin de cido lctico por el sudor durante el ejercicio muscular intenso, y delaexcrecin urinaria de glucosa en la diabetes n~ellitus. En el estado de eqnilibrio dinmico que caracteriza a un individuo adulto normal, existe un balance entre el ingreso de sustancias al pooldel metabolismo intermediario y la salida de dichas sustancias, de modo que, dentro de ciertos lmites, las concentraciones delos diferentes compuestos queson transformados en s u procesos se mantienen relativamente constantes.

Unidad funcional del metabolismo intermediario

Dehido al principio de interrelacin, los diferentes procesos que forman parte del metabolismo intermediario no son independientes entre s, sino que se hallan estrechamente vinculados, de modo tal que las modificaciones que se producen en cualquiera de ellos pueden, a su vez, inducir niodificaciones en los restantes. Una de las principales razones para que esto ocurra es que muchas de estas vas metablicas suelen presentar puntos de conflnencia, caracterizados por metaholitos que participan en ms de un proceso. Esta particularidad ser abordada en detalle en los captulos 61 y 62, pero es preciso que se tenga presente al estudiar cualquier proceso particular.

Resumen
El metabolismo intermediario es el coqjunto de procesos metablicos relacionados con la transformacin de sustancias de bajo peso molenilar, principalmente

los precursores de macmmolculas. Sus funciones son la obtencin de energ'a metablica, el suministrode precursores parala sntes'i de diferentes biomolnilas, la interconversin de estos precursores y la eliminacin de sustancias de desecho. Una regularidad notable del metabolismo intermediario es el cumplimiento de los principios de la bioqumica. Al pool del metabolismo intermediario ingresan sustancias provenientes de fuentes endgenas producto de la degradacin de componentes propios del organismo y de la sntesis de ellos, y tambin mediante los alimentos que representan la fuente exgena. La digestin de estas sustancias es un requisito necesario para que se produzca la incorporacin a parr de esta fuente. Esta digestin es fundamentalmente un proceso hidm1tico de carcter enzimtico que tiene lugar en el tubo digestivo. Los productos de la digestin son absorbidos en el intestino delgado, desde donde alcanzan al resto del organismo. La salida de sustancias del pool del metabolismo intermediario se produce bien por su uolizaan con h e s plsticos o energticos, o bien por su excrecin. En condiciones normaies existe un equibrio entre los ingresos y egresos de sustancias del metabolismo intermediario, por lo cual sus concentracionesse mantienen dentro de ciertos h i t e s . Los diferentes procesos del metabolismo intermediario estn estrechamente vincuiados, lo que les confiere unidad funcional.

Ejercicios
1. Qu se entiende por metabolismo intermediario y cules son sus funciones? 2. ;Cules principios de la bioqumica se verifican en los procesos del metabolismo intermediano? 3. iCul es el significado de los trminos siguientes: a) Pool de amonaco del organismo. b) Pool intracelular de colesterol. c) Pwlintramitocondrialdeacetil-COA? 4. Cmo se produce la incorporacin de sustancias al pool del metabolismo intermediario a partir de fuentes exgenas? 5. :,Por qu las macromolculaspueden ser consideradascomo fuentes de sustancias para el metabolismo intermediario? 6. Cules son los principales productos finales del metabolismo intermediario y por qu vas son eliminados del organismo? 7. Teniendo en cuenta los procesos que aportan compuestos al nietabolismo intermediario y los sustraen de l ,cmopodra explicarseque una persona: a) Aumente de pesocorporal. b) Adelgace.

Resumen de la seccin

En esta seccin hemos visto cmo est organizado el metabolismo celular: en procesos catablicos y anablicos. En los primeros, exergnicos, se degradan tanto los compuestos provenientes del exterior, como los propios de las clulas; y en los anablicos, eodergnicos, se sintetizan todos aquellos compuestos que se requieren. Procesos anablicos y catablicos estn relacionados mediante las vas o nietabolitos de encrucijada, y la regulacin de la actividad de unos y otros se manifiesta en los principios de mxima economa y mxima eficiencia. La degradacin de las macromolculas ocurre mediante reacciones de Iiidrlisis, particulares para cadauna de ellas, y en las quese obtienen sus unidades estructurales, pero rpidamente stas se convierten en los mismos metabolitos, de modo qnc el catabolismosigue entonces una vid central y nica en la quelian confluido los productos de glcidos, protenas y grasas. Esta va comn se corresponde con la respiracin celular, est localizada eii la initocondria y terniiiiaen ladegradacin total Iiasta CO, y H,Odel acetil-CoA,fiindamental metabolito comn proveniente de la degradaci&i de-las macroniolculas. En este proceso calablico, que incluye la respiracin celular conio etapa final, los conipuestos gradualmente se van transforniando mediante diferentes reacciones a las que se asocian diversos cambios de energa, pero es en las reacciones de oxidacin-reduccin donde se produce un cambio energttico importante entre sustratos y productos, que depende de la diferencia del potencial de reduccin entre los pares redox que intervengan en la reaccin. La energa Liberada no se pierde, la mayor parte se va traspasando de unos compuestos a otros, Iiasta conservarse en los cnlaccs ricos en energa de ese compuesto ubicuo que es el ATP. La respiracin celular comprende el ciclo de los cidos tricarboxlicos y la cadena respiratoria. El primero de estos 2 procesos, el ciclo de los cidos tricarboxlicos o ciclo de Krebs, en el que la mayor parte de sus reacciones tiene lugar en la matriz mitocondrial, transforma mediante 8 reacciones al acetil-COA en 2 molculas de anlidrido carbnico, y a partir de las reacciones del propio ciclo se fornia un enlace rico en energa, que en una reaccin posterior queda formando parte del ATP. Aparte de este compuesto, la energa contenida en el acetil-COAse almacena en los 4 cofactores reducidos que se forman -3 NADH y un E'ADH,. Una de las reacciones redox de este ciclo es comn a la cadena respiratoria, nos referimos a la de lasucciiicodesliidrogenasa, el propio complejo 11. Inri procesos queconiprenden la cadena respiratoria, es decir el transporte electrnico y la fosforilacin oxidativa, ocurren en las crestas mitocondriales. Los coniponentes

de ambos procesos se agrupan en 5 complejos, en 4 de ellos se realiza el transporte electrnico y en el quinto, la sntesis de A'SP. Los componentes principales de los 2 primeros son flavoprotenas. y del 111 y IV son los citocromos. Los coniplejos I y 11 constitnyeu los aceptores principales de electrones de la cadena transportadora de electrones. hstos pasan a la CoQ, y de aqu al coiiiple.jo 111. A partir de ste, luego de pasar por el citocronio c, llegan al complejo IV, la citocronio ouidasa, en la que finalmente se realira la reaccin de red~iccin nxgeiio, aceptor final de los electrones, del y se forma agua. ' M a s estas reacciones que tienen lugar en estns 4 coinplc,josson de tipo redou. y conioel traspaso de los electronesocurre de los transportadores de menor potencial de reduccin a los de mayor potencial, la energa se libera. Gran parte de esta energa, y demostrando nna vez irs la eficiencia y econonia de estos procesos, es utilizada en el hombeo de protones desde la matriz inilocondrkal hacia el lado externo, ctoplasmtico, de la membranainterna mitocondrial y en contra de un gradiente de concentracin, lo que da como reiiiltado un gradiente electroqumico de protones que genera una fuerza protn niotriz. El mecanismo del hombeo de protoncs no es conocido, pero s est plenamente demostrada su formacin. Esta fiierza generadsa por el gradiente se disipa cuando los protones retornan a la matriz a travs del canal existente y que atraviesa el complejo V. El paso de estos protones posibilita la condensacin del enlace energtico entre el ADPy el Pi presentes en el complejo V y que as se forme el ATP. Existen diferentes compuestos inhibidores tanto del transporte electrnico, como de la fosforilacin oxidativa. Se han empleado para dilucidar estos mecanismos, pero adems son potentes venenos para los organismos aerohios, pues anihos procesos, transporte electrnico y fosforilacin oxidativa, se encuentran ntimamente acoplados y la inhibicin de uno tambin ocasiona la inhibicin del otro. Otro tipo de compuestos, los desacopladores, impiden que la energa liberada sea utilizada en la formacin de ATP. Sin embargo, ninguno de los anteriores regulan fisiolgicamente la respiracin celular. En el ciclo de Krebs, la regulacin se efecta en determinadas reacciones catalizadas por las enzinias ctrico sintasa e isoctrico deshidrogenasa. La primera es regulada por la disponibilidad de sustrato, y la segunda, por el nivel energtico celular. Al nivel de la cadena transportadora de electrones rige tambin, como mecanismo regulador fundamental, el de la disponibilidad de sustrato -los cofactores reducidos-. pero tambin el gradiente electroqumico que ella genera, pues si no es disipado se inhibe el transporte de electrones. La disipacin depende del funcionamiento de la ATPsintetasa. Finalmente, esta ltima es regulada por el potencial energttico celular, que a su vez depende del consumo energtico de la clula. En todos estos procesos, el Ca" acta de regulador, activndolos. De esta furnia, nos podemos percatar del acoplaniiento existente entre los procesos de la respiracin celular: el del ciclode Krebscon el transporte electrnico. el de ste con la fosforilacin oxidativa, y el de esta iltinia con el metabolismo celular. El nietabolisnio intern~ediario el conjunto de procesos metablicos relaciouaes dos con la transforniacin de sustancias de bajo peso niolecular, principalmente los precursores de macromolculas. Lai funciones de dicho nietabolismo son la obtencin de energa metablica, el suniinistro de precursores para la sntesis de diferentes biomolculas, la interconversin de estos precursores g la eliminacin de sustancias de desecho. En condiciones normales existe un equilibrio entre los ingresos y egresos de sustancias del metabolismo intermediario. por lo cual sus concentraciones se mantienen dentro deciertos lmites. Los diferentes procesos del metabolismo intermediario estn estrecliamente vinciilados, lo cual les confiere unidad funcional.

Los glcidos ocupan un lugar muy importante en la dieta humana, ya que son los nutrientes n ~ abundantes y, por tanto, los que aporkan mayor cantidad de energa. s Los glcidos ingeridos en la dieta, principalmente digo y polisacridos, son convertidos en sus molculas precursoras por medio del proceso digestivo y, con posterioridad, absorbidos por el intestino y transportados a los distintos tejidos del organismo por niedio de la sangre. Este captulo ser dedicado al tema de la digestin y absorcin de los glcidos; adems se estudiar la incorporacin celular y la reaccin de fosforilacin inicial dc los monosacridos.

Principales glcidos de la dieta humana

Aunque las costumhres dietticas del hombre varan extraordinariarnentc de reales, en la mayora acuerdo con sus hhitos, tradiciones g posibilidades adquisiti~as de los pases son los alimentos ricos en glcidos los componentes mayoritarios de las dietas, en lo cual influye,sin dudas, su ahuiidancia en la naturaleza, lo que los hace ms asequibles. En este sentido, los esquimales constituyen una excepcin, pues en su dieta los glcidos son minoritarios. Los compuestos glucdicos ms abundantes de la dieta humana son de 2 tipos principales: polisacridos y disacridos. Entre los primeros se encuentran el almidn -el ms importante-, el glucgeno y la celulosa; la sacarosa y la lactosa so11 los fundamentales disacridos, y la lactosa es especialmente relevante en la dieta de nios lictantes. I.as estructuras quimicasdel glucgeno y de la amilopectina del almidn son muy parecidas (captulo 10); en los 2 casos, el monosacrido constituyente es la glucosa y sus enlaces son del mismo tipo: n 1-4 en las cadenas lineales y n 1-6 en los puntos de ramificacin. Sin emhargo, la celulosa presenta uniones de tipo glicmdicas entre sus residuos de glucosa. La sacarosa est formada por una molcula de glucosa y una de fmctosa; la lactosa posee una galactosa y una glucosa, y la maltosa, 2 glucosas. Para revisar la estructura de los disacridos debe verse el capitulo 10. La ingestin de monosacridos libres es poco significativa en el ser humano.

Digestin de los glcidos de la dieta

La digestin de los glcidos de la dieta ocurre en distintos sitios del tractus digestivo (Fig. 42.1). sta comienza en la boca por la accin de la aniilasa salival, la cual acta sobre el alinidii y sobre el glucgeno. Por el corto tiempo de coiitacto con sus siistl'atos, la acrin de la aiuilasa salival es muy liniitada. Las degradxiones del se aliiiidu ?. dcl glucgm~ prodiiceii niayoritarianieiite en el intestino delgado (porcin diiodeiio) por la acciii de la arnilasa pancretica.

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I'ig. 42.1. 1,oc;iliirariii <Ir lar ciiiiiiia< digesti!as que degrad;iii ;i los glciilos. IGi la figiira se piiedc liserrar la loritliznci6ii y el 4ti0 de accin dc ambas aniila$ns ! dc 1 sdisar;ii.id;isas, La accWii d e la ; atiiilasa d i \ i i l sobre rl aliiiidii cc muy liinikwh pur el ~ s i a s u tieinpo de contacto de la eiiziiiin con rl siistrafo: I ~ e f i&Kl ninikisiia mis h iniportante cs la <Ir la aiuilasa pmcreiticn, la cii;il acta al nircl intestinal. Las dibersas enzinias disacarirlasas realizan su fiiticiti taiiibin al nircl intestinal.

La especificidad de accin de las 2 ainilasas es la misma, es decir, las 2 escinden hidrolticameiite los eiilaces a 1-4 glicosdicos,por lo que sus sustratos y productos son los mismos (Fig. 42%. Los enlaces glicosdicos u 1-6, presentes en los puntos de ramificaciones del almidn y del glucgeno, no son susceptibles a la accin de dichas amilasas, y por ello, durante el proceso digestivo, quedan segnientos de polisacridos que no resultan digeridos por tales enzimas y a los cuales se les conoce como dextrinas lmites. De manera que los productos de la degradacin de los polisacridos de la dieta soii, fundamentalmente, inaltosa, maltotriosa y dextrinas lmites. La degradacin ulterior de la maltotriosa, la maltosa y las dextrinas limites se llevar a cabo por otras enzimas presentes en el borde en cepillo (microvellosidades) de la mucosa intestinal-duodeno, yeyuiio y parte del ileiim. Estas uligosacaridasas actan eii la interfase entre el luineii y la clula de la mucosa; contienen una porcin hidrofbica iiiniersa dentro de la iiiembrana plasmtica, pero la mayor parte de la enzima, incluyendo su sitio activo, se encuentra orientada hacia la luz intestinal. Las oligosacaridasas nis importantes en el ser humano son:
1. La maltasa, que presentaaccin hidroltica sobreenlaces glucosdicos u1-4, por lo queal actuar sobre lamaltosa rinde como producto molculas de glucosalibre. 2. El complejo sacarasa-isomaltasa, que consiste en 2 cadenas peptdicas y cada una de ellas posee una actividad enzimtica especfica: sacarsica -hidrlisis de enlaces u 1-P 2 de la sacarosa- e isomaltsica -hidrlisis de enlaces glicosdicos a 1-6. La accin conjunta de las enzima~ maltasa y el complejo sacarasa-isomaltasa degrada completamente a las dextrinas lmites producidas en la digestin de la amilopectina y el glucgeno hasta glucosa libre (Fig. 42.3). a 3. La l a c h a , disacaridasa con accin P galactosidsica, digiere oligosacridos de composicin mixta (heterogalactosidasa). Su sustrato principal es la lactosa, a la cual convierte en glucosa y galactosa.

Fig. 42.2. Prodiirtos brmados por I ;irn iin de las amilasas. L w amilasas escinden hidrolitiramentc los enlaces a 1-4 y iio poseen acii6ii si,hre los u 1-6, los pn>durtos que si uhtiriien son maltosa, iiiiltmkxa y dextrinas lniitcs.

La actividad lactsica intestinal es elevada al iiacer y comienza a disminuir alrededor de los 2 aos y hasta los 5, edad en que tiende a quedar la actividad residual del adulto, qtie es relativaniente h j a . Pueden presentarse excepciones en este comportamiento, por una parte existen no pocos casos de europeos adultos con actividad alta de lactasa, y por el contrario, en asiticos y atiicanos se constatan. con bastante fkecuencia, actividades muy bajas de lactasa en la adultm. laacu~~iulaci~idesussustr~tos, Cualquier defivZoen iinadc&a di%caridawspn~voca ya que la abs~rciii [>rmlt~ce.~locuandoistos degradadoshastasusn~onuwc;irise Iiaii sido dos constituyentes. 1.a acumiilacin de los disacridw en el intestino provoca una diarrea de ~rsnitica,a<leiii;is, debido a la degradacih de diclios azcares por las I~actcrias la flora inlatinal,sc producen coinpuestos de 2 y 3 tomos de carbono, lo que a&Tavala actividad osintica y a la vez se liberan grandes cantidades de Coi. La intolerancia a los glucidos

,
Fig.423.Accin ninc~rtadadclmdiwca~~lrnas md&a y ia Lwnialtaia del mmplejo sacarrm-isomaltara. La aeeiii surcsiva de la nialtasa expone el eiilac e o 1-6a la accin dela isomaltssa, 10 que liennitc . hiddsis; de ~iucm \o pilcdc interveziir la maltasa y coadyuvar a la conrmin completa de Vas dexfrinm linits a glunaa.

OH

Miiltra

OH

OH

se debe, generalmente, al dficit de aly n a s de las disacaridasas intestinales,ya que la a anulasa est presente en cantidades que sobrepasan los requerimientos. Las deficiencias de disacaridasas ms frecuentes en el ser humano pueden ser provocadas por daos de la mucosa intestinal de causas variadas, principalmente txicas, infecciosasy parasitarias, en este caso se encuentran afectadas todas estas enzimas; tambin pueden ser provocadas por la deficiencia de alguna disacaridasa especfica, entoncesse presentara nicaniente una intolerancia al disacrido sustrato de la enzima deficiente. La intoleraiicia a la lactosa, provocada por dficit de lactasa, es la deficiencia disacaridsica que ms frecuentemente afecta a los seres humanos. Este dficit se considera de carctcr hereditario v en l se altera ms la cantidad de enzima aue se fornia que su actividad, la cual no parece modificarse. La eliminacin de la lactosa de la dieta evita los sntomas de la enfermedad. Se ha reportado, adeins, actividad disminuida de sacarasa, como una condicibn autosmica recesiva; en este caso se constata la falta de las 2 actividades del complejo, es decir, actividad de sacarasa y de isomaltasa. En el ser hiuiiano no existen enzinias digestivas con accin P glucosdica, por lo que la celulosa no puede ser degradada. Sin enibargo, este compuesto, constituyente de la fibra vegetal. tiene otras acciones importantes en el proceso digestivo: aumenta el peristaltismo iiitestiiial, evita la constipacin, y su ingesta tiene importancia en la prevencin de las Iieniorroides y del cncer de colon. Algunas acciones de estos tipos de glcidos sern tratadas con niayardetalle en el capitulo 72 de la seccin de nutricin.

Absorcin intestinal de los monosacridos

La glucosa y la galactosa son incorporadas a trais delamembraiiaiiitestinal por el mismo transportador, y se establece una competencia entre ellas por su unin a ste. El iiiecanismo es de transporte activo asociado con un simporte de sodio. El transportador posee sitios de unin para el ion sodio y para el monosacrido. Este nionosacrido debe cumplir ciertas caractersticas estructurales en relacin con el nmero de toniosde carbono y con la disposicin espacial delos OH para que resulte reconocido por el transportador. Estas caractersticas se muestran seguidamente:

La glucosa y la galactosa cumplen tales condiciones, como puede apreciarse de sus estructuras cclicas.

Cuando la concentracin de glucosa o galactosa es elevada en la luz intestinal -despuCs de unacomida-, el sistema transportas favor delgradienteSin embargo,cuando ntacoiicenti;icin hafa, el sistemarealUael hailrpoi-teen contra del gmdienteporti;uisporte activo. La fuerza que impulsa este transporte activo ese1acoplecon la ATPasa dependiente de Na' y K'de la membrana basa1 de hclula epitelial,la cual homhea iones Na+fuera de la clula, nianteniendo un gradiente de dicho ion mayor concentracin fuera de la clula. De esta manera, cuando el Na+se mueve hacia dentro de la clula, lo que hace a favor del gradiente, se transporta simultneamenteuno de los monosacridos-contra su gradiente(Fig42.4). El transportador de glucosa-gaiactosaes una protena integral de la membrana que seliga y transporta 2 iones Na' por cada molcula del azcar. Transportador serosal
Lumen

Iig. 42.4. Representacin esquemtica del transportador de glucosa. En el esquema puede apreciarse la existencia de un sitio de unin para la glucosa (o galaclosa) y 2 para los ion= de Na' en la protena transportadora. El transporte activo de este ion arrastra tambin al mannsaerido hacia el interior de las clulas epiteliales del intestino: ello es posible par la participacin de la bomha ATPasa depcndienie s de N' y K+.

~ a + ' Sitio de

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1
OH

Difusin

Clulas epiteliales del intestino

Como se conoce,las protenas transportadoras pueden ser afectadas en su actividad por la presencia de ciertas sustancias. La ouaba'na (estrofantina G )es un glicsido con accinfarmacolgica cardiotnica. Estecompuestoes un podeminhibidor de la ATPasa dependiente deNa+-K+ provoca un incremento en la concentracin intracelular de Na'. y En estas condiciones, el gradiente de iones Na' se disipa y, por tanto, el transporte del monosacrido se detiene.

&
OHCHZ Ouabana

La fiuctosa y la nianosa son absorbidas, aparenteniente, por difusin facilitada,y las pentosas, por difusin siniple. Aunque no se conoce muy bien todava, el mecanismo ntimo de la interrelaciii entreelsistenia de transportedelos monosadridos y las di sacar id asa^ en el intestino,se ha constatadoen s e m huinanm queel transporte de un inonosacridoque forma partede

un disacrido,ocum tan rpidocomoel delmonosacridobre,~ incluso ms rpido que ste, lo que parece indicar una relacin, al menos espacial, entre ambos sistemas. Una vez dentro del epitelio, la glucosa tiene varios destinos, pero por lo general es transportada directamente hacia la sangre (superficie serosal) por un mecanismo de transporte facilitado. Este mecanismo es muy eficiente, lo que garantiza que la glucosa no se acumule dentro de la clula del enitelio intestinal. Como puede inferirse de la coniposicin de los principales glcidos de la dieta, el producto mayoritario de la digestin de stos es la glucosa, y en menor proporcin, la galactosa, fructosa y otros moiiosacridos. El proceso completo de digestin y absorcin de los glcidos es extraordinariamente rpido, de manera tal que las sustancias glucdicas de la dieta Iian sido absorbidas cuando el material ingerido llega a la porcin inferior del yeyuno. Una vez en la sangre, los distintos moiiosacridos alcanzan los tejidos. La incorporacin de los nioiiosacridos al interior de los diversos tejidos se efecta por un mecanismo de transporte facilitado, que difiere segn el tejido. seencuentran en la niayonade los tejidos, aunque la ni& estudiada hasidola delentrocito; una elico~rotenade 55 kD, con 4 dominios, que forman 12 cilindros de hlice a. liidr&bi&s,incluidos dentro de la membrana, &e contornean zonas Iiidroflicas, por donde pasa la glucosa (Fig.42.5). La GLUT2 predomina en las clulas P del pncreas -como se sabe, estas clulas secretan insulina en dependencia de la concentracin de ducosa-. aunaue estos trausuortadores tambin existen en el hipado. La GLUT4 se encuentra enel msculo y en el tejidoadiposo, quedepeuden dela insuna para incorporar la glucosa. Se sabe que las GLUT4 se localizan en vesculas membranosas intracelulares y que cii ausencia de insulina no son accesibles a las molculas de glucosa del lquido &tracelular; pero en presencia de insulina, se activa la exocitosis, 16que provoca que estas vesculas se fundan con la membrana plasmtica y los GLUT4 sean entonces accesibles a las molculas de ducosa sanmiieav nor ello resultenincornoradas al teiido. La GLUT 5,localizadaen el keslino,fukona acoplada con el simporte de Na* -glu&i, en la absorcin deglucosadesde el intestino.

cooYig. 42.5. Esquema de los transportadores dc glucosa en miirniferas; estos transportadores paseen 12 segmentos transmembranales en a hlice.

Fosforilacin inicial de los monosacridos

Al incorporarse dentro de las clulas, la primera reaccin que experimentan los monosacridos es su conversin en un derivado fosforilado por la formacin de un

enlace ster fosfricoen uno de los gmpos OH del azcar. El donador del grupo fosfato es un nucletido (NTP),generalmente ATP. Las fosfotransferasasson las enzimas que catalizan la fosforilacin de los monosacridos, y requieren iones Mg" u otros cationes divalentes. Existen varias fosfotransferaiascon especificidaddistinta para el sustrato y para el tipo de enlace que forman. Ms adelante, en esta seccin,sern estudiadas distintas hfotranferasai; en este captulo dedicaremas la atencin a la enzima principal que cataliza la fosforilacin de la glucosa: la hexoquinasa. La hexoquinasa es una fosfotransferasa que cataliza la reaccin de fosforilacin de varias hexosas: glucosa, manosa galactosa y fructosa, principalmente, aunque tambin puede fosforilar ciertaspentosas. Esta enzima forma el enlace &ter fosfato en posicin 6 del azcar. La reaccin requiere ATP y tambin participan iones Mg":
ATP ADP

Hexoquinasas

O *

OH Glucosa
Existen 4 formas isoenzimticas de la hexoquinasa: I,II, 111y IV. En el cerebro predomina el tipo 1; en el msculo esqueltico, el tipo 11; en el tejido adiposo son abundantes los tipos 1y 11; en tanto queen el hgado,laforma isoenzimatica principal es la N, ms conocida como glucoquinasa,aunque en este tejido estn presentes todas lasfomas. Las hexoquinasas se encuentran en todos los tejidos, y aunque su especificidad incluye vanas hexosas, como se seal anteriormente, su accin ms importante es la fmforilacin de la glucosapara formarglucosa-6-fosfato-glucosa-6-(P).La hexoqoina$a -con excepcin de la tipo IV- resulta inhihida por altas concentraciones de su producto, es decir, glucosa-6-(P). La forma isoenzimtica W,quenicamentepmlomina en el tejido heptico,pmnta una mayor especificidadpara la glucosa y no tiene accin ~ i ~ c a t i v a s o h r e otrosmonosacridos;esta enzima posee, sin embargo, menor afinidad por la glucosa -Km=W mM, lo cual equivale a 360 mg1100mL-, por lo que slo presenta accin marcada cuando los niveles de glucosa sangunea son elevados, a diferencia de la hexoquinasa tipo 1, predominante en el tejido cerebral, que por contar con una Km muy baja para la glucosa -Km = 0,01 mM, equivalente a 0,18 mg/lOOmL- su accin es marcada aun a muy bajos niveles sanguneos de glucosa. La glucoquinasa es inducida por la hormona insulina, que activa la transcripcin del gen que la codifica; no resulta inhibida por altas concentraciones de glucosa-6-(P). La glucoquinasa es inhibida por la fructosa-6-(P), y activada por la fructosa-l-(P); estos efectos dependen de una protena inhibitoria que la inhihe por su unin a la enzima; de manera que la fructosa-6-(P)promueve la unin de la protena inhibitoria a la glucoquinasa, en tanto que la fructosa-l-(P) inhibe dicha unin. En la figura 42.6 se pueden apreciar las diferencias en el comportamiento de la velocidad de la reaccin para la hexoquinasa 1y la IV (glucoquinasa), al cambiar la concentracin de su sustrato.
Fig. 42.6. Cornparaein de las velocidades de las reacciones rataliradas por las enimas Iiexuquinssas 1 y IV. En la figura puede apreciarse que la velocidad de reaccin dc la hexoquinasn tipo IV (gluiaquinasa), a bajas cancenlraciancs de glueo~a,r.s relativamente baja coni. parada con la de la hrxoquinasa tipo 1; ella sc debe a los diferentes valores de Km para la glucosa que prescnmn ambas enrimas.

Hexoquinasa tipo 1

Velocidad relativa
(%)

,.

Hexoquinasi tipo IV (gluroquinasa)

5 10 Concentracin de glucosa (mM)

Es importante sealar que la glucosa o cualqiiier otro nio~iosacrido, una vez fosforilados,no puedenialir de la cblula,ya que no son recoirridos por su traiisporlacloi; de manera que la nica briiia que tienen los moiiosaciiclos de pasarclel t<jiclna la sangre es perdiendo el grupofosfato. 1511 Iigado,eii el riii y eii el intestiiio existe uiiaeiiziiiia el ((uecataliza la reaccin de separaci61 Iiidroltica del griipo fbsl'ato (;iccii~ foshtiisica) de la glucosa-6-(Pi,Ia enzima glucosa 6 fosfatasa:

Debido a la presencia de esta eiizinia, la glucosa-6- (P)Iieptica puede coiiwrtirsc en glucosa lihre y pasar al torrente saiiguiieo, coiidicibn que iio puede darse en el nisculoo en otros tejidos que carecen de diclin eiiziii~a. Los inonosaciiridos fosforilados son iiietablicanieiite m i s activos, poseen un para la niayora potencial energtico ois elevado y constituyen los susti'atos ol~ligados de las enzirnas de las diferentes vas metablicas en las (pie aqutllos participan.

Destinos metablicos de la glucosa-6-fosfato

tina vez fosforilada la glucosa, deviene sustrato de vai-iadas eiiziiiias y puede incorporarse a diferentes rutas metal>blicasen dependencia de las condiciones de la clula y del organismo. La glucosa-64P) constituye un rnetal>olitode encruci,jada. pues tiene diversos orgenes y destinos conio puede apreciarse en el esqueina de la figura 42.7.

La glucosa.6-(P) es precursora de la sntesis del glucgeno (glucognesis).as como de olros polisacridos,oligosacridos y diversos disacridos;por otra parte, la rlegradacibn del glucgeno o glucogenlisis origina glucosa-6-(P).Este metabolito puede taiiihin incorporarse al ciclo de las pentosas o degradarse hasta pirvico, y liberar energa til mediante el proceso de gluclisis. En el hgado, la glucosa-6-(P) puede convertirse en glucosa libre debido a la presencia en dicho tejido de la enzima glucosa-6-fosfatasa. glucosa-6-(P)es un compuesto central en el nietaholisiiiode La los glcidos.

Resumen
Los glcidos son los nutrientes m& abundantes de la mayora de las dietas humanas y pueden ser oligo o polisacridos. Entre los primeros se incluyen la sacarosa y la lactosa, y entre los ltimos el almidn, el glucgeno y la celulosa. La digestin del almidn y del gluc6geno se lleva a cabo en la boca y en el intestino con la intervencin de la amilasa saliva1 y, principalmente, de la pancretica; la degradacin de los productos formados por la accin am&ica maltosa, maltotnosa y dextrinas Inites-, as como de la ladosa y la sacarosa, se efecta por la accin de las disacaridasas intestinales -maltasa, lactasa y el complejo sacarasa-isomaltasa-; como productos nales de la accin conjunta de todas ellas se obtiene: glucosa, gaiactosa y fmctosa. La falta de alguna de estas enzimas puede ocasionar la intolerancia a algn tipo de glcido. La celulosa, polisacrido constituyente de la fibra vegetal, no puede ser degradada por el ser humano, por lo que no es utilizada como nntriente; sin embargo, posee algunas acciones digestivas importantes. La glucosa es el producto principal de la degradacin de los glcidos de la dieta. Este monosacridose absorbe por un mecanismo de transporte activo secundario asociado con el cotransporte de sodio. La entrada de @osa al msculo y adipoeito requiere de insulina; sin embargo, N el cerebro ni el hepatocito tienen este requerimiento. Las fosfotransferasas son las enzimas que fosforilan a los monosacridos. La bexoquinasa cataliza la fosforacin de la glucosa y otras hexosas, y existe en 4 formas isoenzimhticas diferentes, las cuales presentan afinidad y especicidad distintas ante la glucosa. Los derivados fosforilados son ms activos metabiicamente y constituyen mejores sustratos de las enzimas de las diversas rutas en las que ellos participan. El gmpo fosfato se tran&ere desde una molcula de ATP. Los derivados fosforilados de los monosacridos quedan atrapados intracelularmente. La glucosa-6-(l>)es un compuesto central en el metabosmo de los glcidos. Dicha molcula constituye el precursor del glucgeno y otms poiisacridos, as como de diversos oligosacridos; la glucosa-6-(l>) puede seguir otros desnos, tales como su oxidacin en la va glucoitica o el ciclo de las pentosas, entre otras alternativas metablicas.

Ejercicios
1.Haga una lista delos glcidos nis abundantes de la dieta humana. Especifique en cada caso si es oligosacrido o polisacrido, y seale los monosacridos constituyentes. 2. Haga una lista de las distintas enzimas digestivas de los glcidos, y especifique localizacin p tipo de enlace que hidrolizan. 3. Qu enzinias participan en la digestin de la lactosa? ;Cules son sus productos finales?

4. Represente esquemticamente la degradacin del almidn hasta sus productos finales. Indique en cada paso la enzima iiivolucrada. 5. Explique la absorcin de la glucosa desde la luz intestinal hacia la sangre. 6.iCul es la accin de las fosfotransferasas? Diga su importancia metablica. 7. Mencione los distintos tipos isoenzimticosde la Iiexoquinasa. Indique las formas predominantes en el cerebro, msculo esqueltico y tejido heptico. 8. Establezca una comparacin entre la Iiexoquinasa tipo 1y la tipo N (glucoquinasa) en cuanto a especificidad de sustrato, valor de Km para la glucosa, inhibicin por producto final y dependencia de la insulina. 9. Qu reaccin cataliza la glucosa-6-fosfata~a? ,Quimportancia tiene su presencia en el hgado? 10. Realice un esquema donde se evidencie el papel central de la glucosa-6-(P)en el metabolismo de los glcidos. Seale en cada caso el nombre del proceso o de la enzima relacionados con cada destino.

Los aniiiialcs se aliiiieiitaii de foriiia cliscoiitinua y disponen de la energa que requieren a partir de aqulla que conservan alinaceiiada en foriiia de sustancias dc reserva. ti11 Iioinlirc normal, de 70 kg de peso, tiene una reserva energtica de iiis de 135 000 kcal en foriiia de inolculas diversas. Las niolculas que fiiiigeii coiiio aliiiaceiiadoras de energa cii el ser Iiuinaiio son de naturalcm qumica variada: lpklos (triacilglicerolcs)y polisaciiriclos; las protenas, especialiiientelas protenas muscularcs, aunque no tienen fuiiciii especfica de reserva energtica, de hecho aliiiacenaii cierta cantidad de energa que puedeser utilizada por el Iionibre en cleterii~i~iadas coiidick~iie~. El conipiiesto gliicdico que cmnplc la fiiiiciii de almac611(le energa en los animales es el glucgeiio, que es capaz de conservar alrededoi- de 600 kcal, aun despus rlel a y n o d e una noche. Esta niolcula tiene la capacidad dcser npidaniciitc movilizada aiile rcqueriiiiieiitos energtticos del orgaiiisino. Eii el presente captulo se tratar todo lo relacionado con la foriiiacibii y degracl~cibn este l~olisacrido, har especial Iiiricapi en los rtiecanismos que de yse regiilan ambos procesos.

Importancia biolgica del almacenamiento en forma de glucgeno

El alniacenamiento de energa en forma de molculas de glucgeno implica una serie de ventajas para el organismo. As, las grandes inolculas de este polisacrido no difunden, y la presin osnitica que ella5 ejercen es mucho menor que la que provocaran igual nmero de niolculas de su monosacarido constituyente si estuvieran libres; por e,jemplo, para tener una cantidad de glucosa similar a la que a~iiliene glucgeno el heptico, la glucosa debera poseer una conceiitraciii aproxiiiiada de 100 inM, lo que provocara un rl~ockosintico; embargo, el peso molecular proniedio del glucgeiio sin es de alrededor de 10' D y su coiiccntraciii heptica es de apniximadamente0,01 pM, lo que no crea cambios osmticos apreciables. Por "ti-aparte,la estructura tan ramificada de estc polisacrido coiitril)uyeasti mayor eiiipaquetamiento y, por ende, a que se almacene in;ryi~rcaiitidad energa en un menor cle voliuiien. Adems, poratecnil>siquetmientola molinila deglucgenoapoi-ta nuinemws extremos no reductores, los cuales coiistitnyen el sitio de accin de las piiiicipales enzuiias iiivolocradas en su iiietaliolisnio; lo cual explica, en graii medida, la fcil disponiliilidad de a t a reserva c~iiiiido organkmo la precisa. Cabe seialar qne una limitante qiiese debe el tener en cuenta en este tipo de alniacenainiento es qiie cada gramo de glucgeiio seco retiene 2 g de agua debido a so graii afinidad por esta molcula.

Se recordar que el ghicgeno hstico se encuentra en cantidades apreciables en el hgado y msculo, en forma de partculas citoplasmticas(inclusiones):lai denominados grnulos de glucgeno, en cuy a parte exterior se hallan las enzinias que participan en la sntesis y degradacin de este polisacrido, ello contribuye a la rapidez y eficiencia de dichos procesos. En los lisosomas se encuentra glucgeno, el cual entra al lisosoma por el mecanismo de recanibio normal de los componentes intracelulares, en este raso de los grnulos de glucgeno. Se conoce que la falta de una enzima lisosomal -aglucosidasa o malta- cida-,con accin degradativa sobre dicho polisacrido, provoca una enfermedad dealmacenamiento;estoser tratado posteriormente. Todas estas caractersticas hacen del glucgeno una molcula idnea para el ahnacenamieoto de una cantidad apreciable de energa, de la que el organismo pueda disponer con rapidez por un tiempo relativamente corto: perodos interaliiuentarios, ayuno nocturno y,en general, ayunode 18a24 h, en dependencia dela actividad fsica del individuo. El glucgeno heptico -no asel muscular- participa en el mantenimiento delosniveles deglicemia; este aspecto ser abordado ms adelante con mc amplitud. E1 disponer de fuentes de reserva energtica constituy una ventajadeterminante para la supervivencia en la evolucin de las especies. El almacenamiento en forma de glucgenu tiene varias \,entajas para el organismo cuando se le compara con otras sustancias de reserva energtica. El glucgeno puede ser rpidamente movizado, y su degradacin puede rendir energa aun en ausencia de oxgeno; contribuye al mantenimiento de la glicemia y de esta forma aporta glucosa a aquellos tejidos que dependen especficamente de este combustible.

Eficiencia del almacenamiento energtico en forma de glucgeno

El proceso mediante el cual se sintetiza glucgenose denomina glucogenognesis o simplemente glucognesis,en tanto que al proceso degradativo se le conoce como glucogenlisis. Ambos procesos resultan diferentes y en ellos participan enzimas distintas; su regulacin est coordinada de tal manera que, cuando en cualquier tejido se favorece uno de ellos, el otro estar deprimido. En condiciones de ingestin de glcidos en exceso se favorecer la glucognesis. Del glucgeno ms almacenado podr i disponer el organismo cuando las condiciones lo requieran. Para el almacenamiento de glucgeno se consumen 2 ATPpor cada glucosa. Sin embargo, en el proceso inverso, la degradacin de cada glucosa procedente de la gliicogenlisis aporta 32 ATPen su oxidacin hasta CO, y H,O, lo cual significa una enorme eficacia. Debe tenerse en cuenta que alrededor del Y O %de los residuos de glucosa son separados por ruptura fosforoltica, que da como producto glucosa ya fosforilada, y slo el 10 % de stos son escindidos hidrolticamente, todo lo cual implica un ahorro energtico importante.

La sntesis de glucgeno ocurre en el citoplasma de todas las clulas animales, pero sta es especialniente relevante en el hgado y msculos, como fuera antes sealado. Para la sntesis de las macromolculas existen varios requerimientos, que son diferentes segn el tipode macromolculade que se trate, pero algunos son comunes para todas ellas,como son: 1.Las molculas precursoras se aaden una a una, es decir, el proceso ocurre gradnalmente. 2. Los precursores deben estar en forma activada. 3. Frecuentemente, la sntesis est acoplada a la hidrlisis de pirofosfato. 4. Se requiere un molde. 5. Se precisa una molcula cebadora o primer.

En la glucognesisson vlidos todos estos requerimientos con la nica excepcin del molde, ya que conlo se sabe, es una macroniolcnla montona, con muy poco carcter informacional. Como todo proceso biosinttico, requiere energa, la que es aportada mediante la formacin de un intermediario, el precursor activo, es decir, el uridn difosfato-glucosa (UDP-glucosa), que es la molcula donadora de residuos glucosilos. El procesose lleva a cabo por la adicin secuencial de molculas de glucosa. Este proceso puede dividirse por etapas anlogas a las consideradas en la sntcsis <le otras macroinolculas: preiniciacin, iniciacin, alargamiento y terminacin.

Formacin del precursor activo, uridn difosfato-glucosa: etapa de preiniciacin En esta etapa se forma la glucosa activada, es decir, el UDP-glucosa. La glucosa-6-(P)se convierte en glucosa-1-(P)por la accin cataltica de la enzima fosfoglucomutasa; esta reaccin es reversible:

En esta reaccin se forma glucosa-1,6-bisfosfatocomo iiiteriiiediario. La enzima posee un residno OH de serina capaz de fosforilarse; este grupo fosfato puede ser tranferido a la glucosa-1-(P) o a la glucosa-6-(P), en dependencia del sentido en que ocurra la i-eaccih IFig. 43.1).

CH,-O-

CH,- O -

CH, OH

Glucosa - 6 - fosfato

Glucosa 1 - 6 bisfosfato

Glucosa 1 - fosfato

Tig. 43.1. Rirticipaciii dc la gliicosa-l,6Iiisfosfato en la reaccin d e la , fwrfogliicuiiiiil~sa.1a eiiziiiin losfogluconiutasa poscc iin residuo de scrina que se fosforila y puede entregar el grupo fosfato . la l glucosa-1-(P) o a la glucosii-6-(l') en ilepcndeiicia del sentido de la reaccin; el dcrivado l,6- bisfosfalo de glurosn rcsiilta un intermediario en esta reaccin.

El grupo fosforilo de la niutasa puede perderse lentamente por hidrlisis y para fosforilarla de nuevo se requiere la transferencia de un gmpo fosfatode la glucosa-1,6bisfosfato, la cual a su vez es formada a partir de la glucosa 1-(P)y ATPpor la accin cataltica de la enzima fosfoglucoquinasa.

Glucosa- l -fosfat

Glucosa-1, 6-bisfosfato

La reaccin que aparece posteriormente reviste una gran inipo12ancia,ya que por medio de ella se forma el iiiterinediai-io de alto contenido energtico, donador de residuos glucosilos y que caracteriza esta priniera etapa; consiste en la Forniacin de UDP-glucosa a partir de uridn trifwfato ( W P )y glucosa-1-(P)por la accin cataltica de la enzima U1'P glucosa iiridil transferasa o UDP glucosa piroti~sforilasa (F'ig. 43.2).

La reaccin, de forma abreviada. puede representarse de la manera siguiente:

UTP + glucosa- 1 -(P)

- - UDP-glucosa + - ,

(P)-(P)

El pirofosfato formado en esta reaccin es Iiidrolizado por la accin de pirofinfatasas, se forman as2 molculas de ortofosfato (PO,H,) y la energa liberada ~HI.I)I.PCC el proceso de sntesis. Como puede apreciarse se coiisuiiie 1UTP -equivalente energticamente a 1ATP- en la formacin de cada niolcola de UDP-gliia>sa.

Inicio de la shtesii: etapa de iniciacin Como fuera sealado, para la sntesis de glucgeno no se requiere IIII niolde, pero s se precisa una inolccula cebadora o primer: En efecto, cn el proceso de formacin de la cadena (leglncgeno intervienen varias emimas. pero la ms importante de ellas es la conocida como glucgeno sintasa, la cual no puede unir 2 residuos de glucosa a partir de U>P-glucosa;esta rnrinia slo puede alargar una cadena prcesistentc <le gliicano de tipo v 1- 4. La protena glucogenina funciona como el priniei. eii la sntcsis de glucgeno. La glocogenina se glocosila por la accin de la enzima glocosil transferasa, que cataliza la transferencia de residuos de glucosa de la IIDIJ-glucosa;la glucosa se uneal grupo OH del residuo de la tirosina 194. Esta reaccin procede hasta que se ha foriiiado una cadena con alrededor de 7 residuos de glucosa. Es entonces que la glucgeiio sintasa coinicn~a accidii, niieiitras an la cadena polisac5rida su est en crecimiento unida a la glucogenina. Esta protena se separa slo despus que el grnulo de glucgeno ha alcanzado determinado tamao (F'ig.43.3).

Alargamiento d e la cadena d e glucgeno Es la etapa fnndaniental de todo el proceso. Dado qne por lo general cxiste tina lnolicula de glucgeno preexistente, la sntesis de este polisac;irido frecnente~nente no requiere que se lleve a cabo la etapa precedente de iniciacin. ICii la etapa de alargamiento de la cadena de glncgeno participan 2 enziinas diferentes: la glocgcno sintasa ya mencionada, y la enziina raniificaiitc. Esta iiltiiiia esistc en exceso en las clulas y no constituye paso liniitante; la gliicgeno sintasa es la eiiziiii;~ niarcapaso, reguladora principal de la glncognesis. 1.a glucgeno sintasa cataliza la adicin de residnos de glucosa provenientes de la UDP-glncosa, aliirgando la c;idena preexistente unida a la glucogenina y forinando enlaces del tipo a 1-4. por tanto es la respwisal~le de la formacin de las cadenas lineales (Fig. 43.4).

Por ia accin de la glucgeno sintasa la niol4cula de glucgeno crece en uii residno de glncosa por el extremo no reclnctor, aportado por la UDP-glucosa: Glucgeiio + UDP-glucosa
residuos de glucosa)
(ti

+.

Clucgeno n
-&

+ UDP

I i-esiduos

c i i glucosa)

LI UDP asiforniailo puede de nnevoconvertirse en U'TP por la accin cataltica de las eiiziiiias nnclesiclo difosfoquinasa:

s 1.2 gincgeno sintasa de niscnlo esqueltiar c iin t e t r h e r o , formado por 4 wdcnas idlnticas de peso inolernlar de 85 000 D cada una. a Otra eiizinia, ia eiiziiiia raniificante -amilo a 1-4,u 1-6 traiisgliicosil;isa-, es V qne participa eii la t'orinaciii de enlaces u 1-6 oi los pnntos de raniificacin. Esta enzinia traiisfieie mi segmento de 6 a 7 nnidacles de gliicosa del extremo terminal de una cadena qne posea al nienos 11 residuosdeglucosa, Iiacia el grupo OH delcarbono nmero 6 de otro residuo de gincosa de la inisina rama o de otra, y el cual debe distar al menos 4 resid~ios glncosa de otro punto de ramificacin. Sobre esta cadena, miida al nuevo de punto de ramificacin, pnede ahora actuar la glucgeno sintasa, alargando de nuevo la cadena deglucgcno (Fig. 43.3). La repeticibii deestoseventos llevar a la formacin de la molcula de glucgeiio de alto peso rnolecnlar.

~ ~ c i ~ . a i l ~ ~iiiiiti-i.iili.dIiii~~~i~~~ 11ic.piliiilm~ci6na l l i i ~ ~ i ~ a ~ ~), hui1

725

Terminacin
No existe un liniite preciso para la terminaciii de la sntesis de la iiioli.ciila de gliicgeiin: se sabe que, en la medida en que sc a c i i i i ~ ~glucgeno, la cantidad de ~la glucgeiio sintasa a disiiiiiiiiye j. prevalece su forma 11, por lo que la sntesis cesa. Los efectos del propio glucgeno y los de otros inctabolitos sol~re sntesis del glucgeno la sern aiializados al tratar la regulacin.

La glucogenlisis consiste en la dcgradaciii <le1 glucgcno por escisin fosforoltica secuencial, y da como producto fundamental glucosa 1-(P). la cual rpidaniente se transforma en glucosa-6-(P). La glucgeno fosforilasa es la enzima principal de este proceso y cataliza la siguiente reaccin: Glucgeno + Pi residuos de gliicos~)
(ti

7 -f -

Giucgeno c Glucosal-(P) ( n - l residuos de fliicus;i!

Esta enzinia emplea un ortofosfato en la ruptura de cada cnlace a 1-4 glicosdico de la cadena del polisacridn y puede actuar porcada uiiode los iii~lti~lese~tremos no reductores. lo uiie. en eraii niedida., ewlica la rai~idez la mo~iliaciii ninlculas dc de . . de glucosa a partir del gliic6geno en los perodos interiiliineiitarios, en el ayuno o en cualquier otra coiidicih nietal~lica la cual el organismo precise de una fuente de en energa endgena (Fig. 43.61. La glucgeno fosforilasa es un diiiern li~riiiado unidades idbnticas de 842 por residuos de aminocidos y 97 kD de peso molecular cada una, y es la enzinia que regula este proceso. La fosforilasacoritiene Idominios: un dominio N terminal (residuos del 1al 484) y el C terminal (del 485 al 842). En el primer dominio se incluye el sitio de modificacin covalente, el alostrico y el de unin a la inoltcula de glucgeno, que contiene el sitio
u

CH,OH l
1 OH HO 1

l a @ o o
'O-R
1 OH

CH,OH

CH,OH

Ct1,OII
l

HO

HO

HO

HO Glucosa - I fosfato

HO

HO

O-K

de almacenaniiento de glucgeno. El sitio catalitico se localiza en el centro de la subunidad. pero requiere su unin al cloniinio (' tr.riiiiiial de la otra sobuniclacl. La existencia del sitio de almacenamiento clel gltici>geiio iiicreniruta la eliciencia catalitica de esta enzima, ya que perniitc la fosfiiril;icibii de varios residuos de glucosas eii la ~. misma n~olculadc glucgeno, sin tener qiie a(.ociarsey disociarse el con$ejo enziniasustrato. El cofactor de estaeiiziina es el fostatode piridoxal (captulo 191. que se une de furnia covaleiite a la enzima por u11 grupo t a n ~ i n o una lisiiia. de Esta reaccin es reversible in vitro, en tanto que in iivuocurre en el sentido de la deqadxin del glucgeno, farorecida por la concciitracin clc ortofosfi~to, uiuy superior a la de glucosa-l-(P). La gliicgeno fosforilasa no actiia sohre los enlaces c 1-6 presentes en los puntos ! de ramificaciones del polisaciirido, por lo ciial iio es capaz dc provocar la degraclacin completa de ste: su accin se detiene 4 residuos de glucosa antes de alcanzar u11 punto de ramificacin. Para que proceda la degradaciii del glucgeno es preciso la accin de otra enziina. La enzima desratiiificante -u 1-4 transglicosilasa, u 1-6 glucosidasa- es uno multifuncional y posee 2 centros acti~os: cataliza la transferencia de un segmento de glucano de 3 rcsidiios glicosilos -de la rama en la cual quedan 4 residuos de glucosa para alcanzar el p~nito raniificacin- Iiacia un extremo OH de posicin J de de la molciila -accin de rxl-J-olucaiiotransfcrasa-: esta manera la elucosa unida i ~ o r de enlace u 1-6 se hace vulnerable a la accin i gluiosidsica del otro centro activo y r ste es esciiidido hidrdticaineiite, producinclose glucosa lilirc (Fig. 13.7).De esta forma puede volver a actuar la gliicgeno fosforilasa hasta llegar de nuevo a 4 residuos antes de otro punto de raiiiiticaciii, ocasin eii que se requerira igiialinerite el concurso de la enzinia desramificante.

~~~

~~

De nianera que es la accin concerti~<la aiiilms enziinas: la gli~cgcno de fosforilasa y la desrdniificante. la que produce la degra(lacin coiiipleta del gliicgen~~. Coiiio ~irodoctos principales se ol)tieneii glucusa-l -(P)!glucosa lilwe en iiiia proporcin de 12:l (Fig.43.X). La gliicosa-I-iP), producto principal de la gIiicogeiilisis, se conrierte en glucosa-6-iP) por la accin de la enzinia fosf'~~gli~ci~iiiutasa, conio f11ei.d ! la cual. a sefialado. cataliza tina reaccii,ii re\ersil~le:

Ida escisin fi>sforolticadel gluc6gciio es reiita,josa para el ~ ~ r g n i s i i i i ~ el desde punto de rista encrgi.tic0, !a que sil producto final es niayoritariaiiie~ite glric~)sa !a iosfbrilatl;~ por lo tanto. no requiere fosforilaci611.lo que significa aliorro (le :i'I'I' -principio de la ni;isiiiia econonia- y. por otra parte. no difunde fiiera de i;i ci.liil;i. puesto quqIa?a ello necesitara la scpa~.aciii :riq>o fosfato. del

!.

Diferencias metabifcas entre el glucgeno heptico y e& muscujar

La calmcidad de aliiiace~iai!iici$li~ difiere e!! ;iiiil>osfqjido!;. El hgado puedc alniacenar glocgeno Iiasta el 10 (r de su peso seco el niiiscolo slo piicde Iiaceik? la hasta el 16 2 56. Sin enil~argo, gran iiiasa nioscu!ar del orga~!ismode:eiriii?:a quc la cantidad total de gliicgeii niusciilai. s t a iii:,or i p c la conlciiicla e!; cl iii?a:::li~. La presencia de la eiiiinia gliicosa-6-fosfa!asa e11el hgado !su a~iseilcia ei !ii:isiiilo, cii : del condicion;iii una diferencia nietab6iica iriipoi.t;iiite cii cuanto a :1 sigiililcacii,~~ giucbgeiio en los 2 icjidos. Coiiio se ircoid:ii.;i. esta ciizinia catalim la sq>aracliiii Iiidrolitica del f'osl'atode la glncosa-6-(P)y libera glucns;~ libre s e g h la r e a w i h :

'

El rin y el intestino taiiil)ii.ii poseen diclia eiiziiiia. Se sabe que los nionosacirido!i fosf'orilados no piieden salir dc. las c6luias, por 111 (pie en el iiisculo la giiicosa-6-(P), formada por la degradaci61i del gliici,geno, no pasa a la sangre y es utilizada por el propio tejido muscular. en taiiici cliie la glucosa-64') procedente del glucgeiio Iieptico, puede con\ertirse eii gliicusa l i l ~ r por la accin de la glucosa-6-fosfatasa y e salir a la sangre; sta es la causa de qiie el glucgeno Iieptico contribuya a niantener la gliceniia y el inoscular no.

El gliicgeiio iiinscular es, por t;iiito, fuente de A T P p a w 111s requeriiiiiciitos 1i111scul:ir.11110s I I I ~ S C I I ~ Orojos S ellergticos de esle te,jido durante I contracci~i -c(~~iiocorazii-. tejidos mil? vasculiirizados con p x i i ciintidad de iiiiogloliiiia ! el mlly oxigenados. la glncosa proveda por la dcgradaciii del glncgeno es preferentemente iiietaliolizada Iiasta <:O, m i s H,0. coii un iiiayor reiidiniieiito energtico, lo ciial permite iiiia actividad fisica prolongada. Eii las Iiliras I>laiic;i, nienos uasculariza(las y oxigenadas. la glucosa se degrada iirayoritariaiiic~iteIiasta cido lctico, con un rendimiento energtico iiiuclio iiieiior; en este caso la actividad musciilar debc ser rpida, de corta duraciii. En los seres liuiiianos, la mayora de los insculos esqiiel&ticosson mezclas de filiras I>lanc;isy rojas, por lo que se favorece tanto la actividad fisica de corta <Iur;~ciii como la iiiaiitenida.

Regulacin del metabolismo del glucgeno

Las vas iiietahi,lic;is de sntesis! de:rad;iciii del glucbgeiio son difereiitcs. elio es tina veiitqja importante en la rcgulaciii de aniiios procesos coiiio se evidciiciai-5 posteriormente. Las enriiiias claves su11la glucgeiio fosforilasa en la glucogeiilisis 1 la glucgeno sintasa en la glucogiiesis. :\mbas eiiziiiias preseiilaii complejos , mecanismos de regulacin que incluyen inotliilacin covaleiite c!i cascadas enziinticas que respoiitleii a lilieraciii Iioriiional y regiilacibii de tipo aios1Crlr;i: estos inecaiiisnios estn muy relacionador y rer;porideri a condiciones iiirlal~6licas especficas de la clula del orgaiiisnio en su coiijiiiito. La veloci<lad de aii?l>~is di. procesos esti cmtrolada alostricamente por las coiicci?iracio~ies los ekctores ATP, gliicosa-6-(Pl y Ahll? En el iiifisculo, la ~liicdgeiio ii~si:)rili:snci :ic!iude pwel AMP e inliil~ida el ATP y la glucosa-6-(F),en tanto que la gii~ageno por shitasa cs activada po:'lagl~ic~~~"-I'-(Y). c ~ En este caso NC cunip1e el principio de la I~ioqniiiica i rclacibii coi1 procesos opuestos. y que consisteen qiie cnanclo uiio de ellos es15 activado el otro cstii dqiriiiiido. En efecto, las enziiiias clases de la siiteiis y tIegi.adacii,ii del ~lacgeiio respoiiclen a uiiaiiiisniaseial (lefi~rii;a~oiitraria. L'i.iiiierariieiitcse1i.al.ii. porseparado cada iiiiodc los diferentes mecanismos regnletorios para cada en~iiiiii coii posterioi.iri;i:l sc y aria1izar;in los procesos de forma in1cgr;il.

Regulacin de la glucgeno fosforiiasa I,a gliicgeiio fosforilasa posee iriecaiiisnios de regulaeiii coKileute y ali~sti.rir;i, y la iiiodolaciri covalcnte I'orrna parte de nna cascarla eiiriiiitica coii gmri poder amplificador. Regulacin covdente. l i i enziiiia glucgeiio I'osforilasa iiiuscoiar exisle eii 2 formas: la forma a (activa)y la forma 11 (imctim). Estas fornias soii iiitercoiivertil~les enzimticaniente. I,a forma b es ni, dimero que prmnita 1111residuo de serina en cada snliii:ii(lad qiir puede hsforilarse: el grupo 01-1 del residuo de la seriiia 1J de ambas siibuiiidades puede ser fosforilado por la accin cataltiai de la eiiziiiiii gluc6gciio hsfi~rilasa qiiiiiasa. formiiidnse un enlace covalente de tipo tstei- li~sfiito,.~ estri iiiniieia secnvicrteei? (le la forma activa a. La furnia a ~iiiedc nuevo tmiisf'orinarsc en la 11, por la scparacim de hidroltica de los grupos fosfatos. reacciii catalirmda por las l'osfops~~teiias fos1';itas;is. La glucgeiio fosforilasa Iieptica tiene taiiihin regiilaciii por iiiodulaci<iii covalciite y sta es, en esencia. similar a la del te,jido~iiiisculni: La iiitcrcoiiversi~ii entre ambas l i ~ r n i sera, por taiilu, de la 1iiaiici.a que ajtarecc a en la fignra 43.1).

ATP
\

ADP

Gluc:.eiio fosfoi-ilasa quinasa

Es importante aclarar que la enzima fosforilasa quinasa. responsable de la catlisis de la fosforilacin de la glucgeno fosforilasa, est tambin regulada por modulacin ala covalente y existe en 2 fornias: fsforilacla,,?cti\a,quecorresl>onde forma a, y lano fosforilada, inactiva. fornia b. El paso de una a otra fonna es igualmeiitecatalizado por enzimas quinasas y fosfatasas. La fosforilasa quinasa es un complejo enzinitico conipuesto por 4 molculas de cada uno de los 4 tipos distintos de subonidades que la confornian ( a , P. y y 61, uJ,/i,y,8,,y tiene un peso inolecular de 1,3niillones de D..~EIcentro activo se encuentra : en en la subunidad y: las otras participan en la regulacibn. Las subunidades o y p puedeii hsforilaise y deli~liodchenestarlo para que lacnzunaseaaciva. Lasubunidad 6 es tambin importante en la activacin de la enzinia; esta subunidad 6 es conocida coino calmoduliiia. La calmodulina es uiia proteina modulada por iones Ca". Esta protena puede estar libre o, conio en este casol formando parte de complejos cnziniticos, y funciona como un receptor de Ca"; al unirse a stos cambia su conformacin y laenzima se toriia activa (Fig. 43.10). Debe resaltarse que esta activacin funciona tanto para la fornia a conio para la b de la fosforilasa quinasa. As, para que esta enzima est eii su fornia de mxima activacin, requiere su fosforilacih y la iniin de Cal's la subunidad delta. La fosforilasa quinasa se activa por la accin fosforilante de la protena quinasa dependiente de adenosn moiiofosfato cclico IAMPc), y por la dependiente de GMPc. as como por la quinasa activada por Cal*y fosfolpidos.Ms adelante nos referiremos a las distintas quinasas que participan en el n~etaholisnio glucgeno: ahora sblo del nos detendremos en la quinasa dependiente de AMPc. La proteina quinasa dependiente dc AMPc es la principal responsable de la activacin por fosforilacin de la fosforilasa quinasa; esta enzima tambin cataliza la fosforilacin de la gliicgeno ~intasa, como se ver ms adelante; sin embargo, no r\ capaz de actuar en fornia directa sobre la glucgeno fosforilasa. La Estriictiiraliiiente consta de 2 siihunidades catalticas y 2 reg~iiiladoras. ewima en formadetetrniemes inactiva. El AMPcse une a las 2 subunidades reguladorus c m to cual stas se separan de las catuliticas, las que a SII vez se tornan activas. En rl esquema de la figura 43.1 1 se muestraeste mecanismo de activacin. I,a actividad de las enzimas que presentan mod~ilaciii covalente del iiietabolisnii~ del glucgeno dependc de las acciones de las quinasas y de las fosfoprotems fosfatasas. Estas ltimas enzinias son las que eliniinan Iiidrolticamente el grupo fosfato <Irla glucgeno fosforilasa y de otras enzinias involiicradas en el inctiibolismo dcl glncgeno. Son varias las enzinias fosfatasas que participan en el control del inetabolisiiio del gliicgeno. Las fosfoproteiias fosfatasas se dividen en 4 grupin fundamentales: l . 2A, 28 y ZC. Las de tipo 1 desfosforilan la unidad beta de la fosforilasa quinasa y resiiltan afectadas por el inllibidor-1: las de tipo 2 desfosforiiail la iiniclad alfa deestaeiizinia y no se afectan pordiclio inhibidor. La 2B dependc de i i ~ w

Eiiziiria inactiva

Pis. 4.3.111. . k l i ~ w i h 12, ~ ~ l m ~ ~!c l u dc la siil>iirii<lii<l delta d e la f)>sloi.il;iri$ giiimis~i.;il 1.a ~plvtciniir:iltiioiliiliiia. $11 iiciii-\c a I M i u i w Va2-. expci-iinciita i i i i a ti.aii\coiili,i.iilariiiii > w ;trti\;i. 1)) La si~l~imidiid delta dc I;i fmforilasa quiiiaca rrsulta taiill>iii ac1ir;tdii pt,r i o w s p~ s m ~ i l a r 11% c ~ ~ l ~ i ~ ~ ~ ~ l u l a

.I

Ca" y es estininlada por la calniodulina y la 2C depende de iones Mg". Las de tipo A no requieren cationes diwlentes. El paso de la forma a a la b, de las enziinas inuolucradas en la glucogen6lisis. se puede resumir de la manera en que aparece en la figura 43.12. La fosfoprotem fosfatasa-l est forniiida por varias sul)unida<les,al nienos 2 coi1 actividad cataltica. qne se asocian con un niniero diferente de siil~unidades re~wlatorias para forniar el c~~niple,jo. proteiia fijadoia del glocgcno -del iiig1i.s. g l ~ c o g r n La a b i n d i n g p ~ ~ o l eo~ ~ i siiliuiiidad G. se nne al glucgeiio~ una siibuiiida<lc, coii acciii fosfatsica. Esta iiniiii liacc a la fosfatasa 10 wces nis activa s o l m la gliicgeno sintasa y la glncigcii~~ li)sfi)rilasa.La fosforilacin (le la sul)nnidad G por la protena quinasa dependirnte dc A%IPc,separa la unidad c. lo que la viielve muclio nienos activa y seiisil)le a la acci6ii del ii1liil)idor-l. La sol>uiiidadc se une a la protena inliiliidor-2 ?. se inacti\ :t. I,a fosfi)protenafnsfatasa-l. en el niuscolo, s6lo es activa cuando est unida al glocdgeno iiiediaiite la proteiia fi,jadora del glucgeiio, G. La ; actividad de la protena fosfatasa-l y su afinidad por la sobunidad ( . dependen de su

-.

Mcfl.;n~lnolliwm ii~iniil.~nnnc~dl;i~~u~~~ y ,MI irie,g1uill:;i1~~i6uo

731

Suhunidades c;irnliticas
activas

Complejo AMl'c - hiibiiiiidad i-egul;idora

I'ip. J3.12. Resunien de los iiiecanisini,~rlc activacin e i n a r t i r a c i h de la gliiWgeno h s k r i l a s a .

fosforilaciiien 2 sitios difereiites. La fosforilaciiidcl sitio 1por una protena quinasa activada por la insiilina, provoca la activacin de la fosfoproteiia hsratasii-1; iiiieiitras que la fosforilacin del sitio 2 por la protena quinasa dependiente de AMPc, provoca la liberacin de la subunidad c al citoplasiiia, donde no puede desfosforilar a las enzimas involucradas cn el metabolismo del glncgeno (Fig. 43.13).

~ r < i t e qiiinasa ii~ estiinulada por

Fwiitc: Vrwll O. y \clt .lC.: Iliocliciiiistry. Segiiiida edicin, Jubii Milry aiid 14:.

witr.

Iiir., 1995,

43.13. r t i r n i i h c iixictiiariiiii <Ir la rosfOprotciii8 fmsfatasa. La lohhlii-oteiiia folacava c rcquierc, pare accin. sii uiii6ii n la protena G -1iro1eina fijadora del gliiciigcriri. h a proldiia quiiiara estiniiilatln por la iiisuliiia la h s f ~ r i l acii el sitio l . lo gitc pro\or;i 1st ucti\aein de I! ; foshtasa. Una protena qiiiiinsa dependiente dc I P c la fwstbrila eii rl <ili., 2. > condiciona la scpcarariiiii de la suhimidad r Iti iiiactivaciiin de I;i fi,sfatasa.

Por otra parte, cii el citosol, la fosfoprotena fosfatasa-1 resulta inhihida por su uiiin al inliibidor de la fnsfiqxoteiia fosfatasa-l (iiihibidor-1). La regulacin de la actividad del iiiliihidor-I depende de AMPc y de Ca". Si aumenta la concentraciii del iiiicletido cclico se activa la protena quinasa, p fosfinilay activa al inhihidor-l. Si laconcentracin deiones de calciose eleva, se activa la proteiiafosfatasa 2B quc desfosforila e inactiva a dicho inhibidor. Cabe sealar que a t a fosfatasa no resulta iiiliibida por el inliibidor-1-hsfi~tasa (Fig. 43.14).

Fig. 43.14. Rcsiiiiien rlc l a activacin e inactinirin del inliiliidor -1 de

Puede apreciarse cmo el AMPc provoca, al inisnio tiempo, la activacin de la foshrilasa quinasa y la inhibicin dela fosfoprotena fosfatasa. Repuiacin alastrica. El AMP favorece el paso de la fosforilasa b a su forma nis relajada (R), actiua,en tanto que el ATPy la gl11cosa-6-(P)favorecen el paso a la forma tensa (T),inactiva. El ATPcompite con el AMPpor su unin a la fosforilasay as impide su activacin. La fornia T de la fosforilasa es la que expriinenta regulacin por modulacin covalentc, y puede, al fosforilarse, por la accin de la Sosforilasa quinasa, convertirse en la hsforilasa a, la nis activa (Fig. 43.15).

AMP

La fosforilasaa tiende a adoptar su fornia alostrica activa R,a menos que exista una elevada concentracin de glucosa, niolcula que actia como efectoi. negativo. En la figura 43.16se mnestra u11 esquema siniplificadode este efecto.

La coordinaciii entre amlios tipos de regulacin, el alostiico )- el covalente,

proporciona un eficiente mecanismo capaz de responder con rapidez a cambios relativamente pequeos del entorno (Fig. 43.1 7).

Glucosa 6 (P)
Fuente: Vuelt 1). y Voell .IC.: Iliorlieiiiistry. Seguiidii ediciii, JoIiii Wilq mil sons, Inr., 1995.
Fig. 43.17. Esqiieina que resume la regulacin por niedularin covalentc ) alostrica de la glucgcno fosfoi-ilasa.

]*MP

ATP

\\

AipP

i /

Ck~geilo toskxiiasa quiiliisa Protena fosfalase

Pi

d '

H,O

Glucgeno foshrilas b

La actividad de la fosfoprotena fosfatasa-1 del hgado es, en cierto modo, controlada por su unin a la fosforilasaa. Las 2 formas, T y R, de la fosforilasa se unen a la fosfoprotena fosfatasa-1,pero nicaniente en el estado T el grupo fosfato unido a la serina 14, es accesible para la hidrlisis, y se convierte en fosforilasa h. Por lo tanto, cuando la fosforilasaa est en sil forma activa R,ella elimina la fosfoprotenafosfatasa1de la circulacin. Cascada enzimtica de la giudgeno fosforilasa. La glucgeno fosforilasa, al igual que la glucgeno sintasa, forman parte de cascadas enzimticas. Como se conoce, esto produce un efecto amplificador de una seal. La seal puede ser provocada por una hormona u otra sustancia, conio sucede con la llegada a la clula de una hormona que provoque la activacin de la adenil ciclasa y, por ende, se eleve la concentracin del AMPc intracelular, lo cual activara la protena quinasa dependiente de .AMPc, y sta actuara a su vez activando, por fosforilacin,a la glucgeno fosforilasa quinasa, la que por ultimo transformara la forma T de la glncgeno fosforilasa h. inactiva, en la forma a,activa; ello permitirala inmediata y rpida degradacin del glucgeno. En la fiyra43.18 puede apreciarse un esquema de esta cascada enzimtica.

I
1
ciclasa

Adrenalina

l
ciciasa activa

Protena quiiiasa (inactiva)

Protena [activa)
[.'c. J1.18. Cascada ciiziiiiHtira dc la gliiciigeiio fosl'ui-ilasa. La gliiri,eno kosfurilasa participa de iiiia cascada enzimtira que proviira la aiiiplifir;iciiin de la cefial Iwriiioiinl. Liis Iirirrnoiias adremliiiii o gliiciigbn coiidicioniin la ncliweii>de la adcnilaterielasa,sta iiitci.ricne en la f ' o r m a e i h d e AhlPc a partir de ATP; el AMPc activa la proteinn quinasa: esta Itiiii.~.asii v r r . a c t h a a la glurbgeno f<isftirilasa quinasa, l a cual conrierte a la gliic6geiio fosliwilasa b en 1st fornisi activa n.

Regulacin de la giucgeno sintasa Esta enzima posee tanihitii mecanismos de regulacin alstrico y coralente, y este ultimo forina parte dc una cascada eniimtica que provoca una amplificacin de

la seal. Estndiarenios, separadamente, cada uno de estos n~ecanis~iios posterioy con ridad los aiializarenios de con,junio. Regulacincovalente. La glucgenosiiitasa es niodulada covalenteniente y existe en 2 formas: b,fnsfatada, inactiva, tanil)in Ilaiiiadafornia I>,y la furnia a, no )sftad;i. que es la activa o forma 1. La protena qninasa depen<lientede Abll'c, anteriornientc explicada, es una de las quinasas que cataliza su fosforilacini, en tanto que la fusfoproteina fosfatasa-1 participa e11su desf)sf0rilacin. Cada snhunidad de la glncbgeno sintasa de nisculo csqiieltiw pucde ser fosforilada cn al nienos 9 residuos difrreiites de serina. Se conocen 8 protenas <(uinas;is distintas, capaces de fosforilar a la glncge~io sintasa en nno o ms sitios especiticos. En este aspecto se distiiigue dc la gluc6geno fosforilasa, la cual se fosfi~rilapor uii nico sitio en cada subunidad y por la accifiii de una nicii enzinia. Existen varias quinasas, adems de la pl-otena quinaw dependiente de AMPc -protena quinasa A-, que pneden actii;ir fosforilm~io la glncgeno sintasa; la a propia fosforilasa quinasa, es capaz de inactivarla por fosforilacin de un residuo de serina; la protena <luinaiadepeiidientedecalcioycalniodulina -protenaquinasa U-.as conlo la proteiia quinasa dependiente de calcio y fosfolpidos -protena quinasa C pueden tanil)iii fosforilar a la glncgeiio sintasa; la protena quinasa drpendienle de G41Pc no tiene acciii inarcada sobre la sintasa, aunqne como se vio anteriormeiiic activa ;I la fosfi)rilasa quinasa. Se Iian descrito otras (luinasas capaces de inaclivai-a la gluci,geno sintasa por fosforilacin. coino la gluc6geno sintasa qninasa 3, p las casena% quinasas 1 y 11, las cnales no dependen de AMPc ni le Ca".
,

fnsfatsica se activa por fosforilacin en el sitio 1 por la protena quinasa dependiente dc insiilina iFig. 13.10).Si la sul)unidad c se niir a la protena iiiliil)idor-2 se inactiva. 1,as fosfatasas desenipeaii un papel finidaiiiciital en la regnlacin de nanierosos procesos 1. cada da son nis los inecaiiisinos en que aparecen iiivolucradas. El esquema de la figura 43.19 resume el niecanisnio (le niodulacibn co\-alentede la glucbgenosintasa. Ntese queen esta enzima se produce 1111 efecto contrario alde lagluci,gciiofosfoiilasa, ya que la fosforilaciii inactiva la enzinia en tanto qne so desfosforilacibn la activa. Reguladn alostrica. La glucgeno sintasa presenta tauibibii regulacin alostrica. La glucosa-64P) acta como efcctor positiio sobrc la forma h. activ&idola,de aliel

AMPc

nombre D dado a esta fornia de la e~uiiiia por dependiente de glucosa-6-(P) diferencia -D a de la fonna a, identificada coinofornia 1-independiente de tal metabolito-.Esta accin de la glucosa-6-(P) resnlta contrarrestada por el AMP, el ADP, la fasfocreatina Y otros metabolitos. El glucgeno ejerce uiia accin inliihitoria sobre su propia sntesis. Se sahe que en la medida en que se acuniula glucgeno, la cantidad dc glncgeno sintasa a decrece, aunque el mecanismo por el c w l ello ocnrre no esti claro; se plantean 2 po,sibilidades: 1. E1 gliicgeno torna a la gliicgeno sintasa iiie,jormstrato para las qninasas. 2. El glucgeno inliibe la desfosforilacin de esta enzima. Por uno u otro mecanismo, lo cierto es que si se acoiiiula glucgeno prewlcce la furnia 1 de la glucgeno sintasa. 1 En ciertas condiciones se Iia demostrado la iiiovilizaci~ii glocgeiio sin gran (le conversin de la glucgeno fos%rilasa h en a; nias bien parece un efecto dchido a la disminucin de la conceiiti~aciiiii A1'Py de glucosa-WP) y al aumento de AhlP. Une de pruelia de este niecanisiiio se Iie ohtenido por el estudio del metabolismo del glncgeno en una cepa de ratones que presentan deficiencia de la enzinia fosforilasa quiiiasa. por ello la glucgcno fosforilasa b de oisculo no l ~ ~ i e d e scoiiwrtida en a. Sin einb;irp>, er estos animales degradan el glucgeno muscular durante el ejercicio intenso. con io que deninestran el papel regnlatorio de los inetaholitos efeciows. Cascada enzimtica dela glucgeno sintasa. 1,a glucgeno sintasa, al ignai (pie la glucgeno fosforilasa, h r i n a parle de una cavcada eiizinilica. En el caso dela glucgrnn sintasa, la inisina seiial pmvoca 1111 efecto totalniei.fe opuesto, esto es, la inactivaciii de la enzinia, tiiinhiil por fosfiiril;iciri. como pnedc constatarse en la tigora 43.20.1<1iiicreii~ent la conccntracin de A\llJr acti! a i? la de protena quinasa, la cual tosforilaria directaniente a la ~ i i i c ~ g esintasa y, por iaiilo, ni~ la pasara asu b r n i a 1> inactira

,S ,

7
AMP cclico (AMPc)

ri.

'4TP

Protena quinasa (inactiva)

Protcnr quinasa (activa)

En la figura 43.21 se ninestra un resumen de amlias cascadas,lo que permite una visin integral de los efectos provocados por los incrementos de conceiitracin de AMPc y de otros efectores. Debe notarse cmo tal condicin produce lafosforilacin de las 2 enzinias regiila<lorasclaves del metabolisino dcl glncbgeno, lo que conduce a la activacin de la glucgeno fosforilasa y a la inactivacin de la glucgeno sintasa; ello significa que en tal situacin se favoreceria la glocogeiilisis, en tanto lile la glncogenogtnesis estara deprimida. Un efecto contrario se obtendra si decrece la concentracin del nncletido cclico o si se provoca la activacin de las fosfatasas; en tal caso se favorecera la giucognesis sobre la glucogenlisis por activacin de la glucgeno sintasa e inactivacin de la glucgeno fosforilasa.

Regulacin hormonal

Las principales hormonas qne actan solm el metabolismo del glucgeno liepitico y muscular son la adrenalina, el glucagn y la insulina. La priniera, desde el punto de vistaestructiiral.constitiiyc ni derivado aminoacdico y es secretada por la m6dnla snprurrenal. Las otras 2 son secretadas por el piiicreas: el glncagn. IIII poliptptido sintetirado por las ctlulas o: y la insulinza, de naturaleza protciiica. y secretada por las c6lnlas P. La seal metahlica que induce la liheracibii dc glncagii por el pncre;is es la Iiipogliceniia. 1.a adrenalina es liberada principalmente por estmulos iierviwos aiite sitiraciones de intensa tensin eniocioiial (stress-).El glncagn acta eii el liigado, en tanto que la accin fiin<laiiientiil la adrenaliiia es en el niuscnlo, auiique se sabe que de

presentar un efecto menor en el hgado. La unin de estas hormonas con sus receptores, en los te,jidos diana, provoca la activacin de la enzima adenil ciclasa, la que cataliza la sntesis de AMPc a partir de ATPiFig. 43.22). El increnientode las concentraciones de AMPc producir la activacin de la eiiziina principal de la degradacin del glucgeiio -la glocgeno fosforilasa-y la inactivacin de la enzima clavedesu sntsis -la gliicgenosintasa-,todolo cual favorecer la degradacin del glucgeno en tanto que la glucognesis resultar deprimida. El aumento de la glucogenlisisheptica permitir incrementar los niveles de glucosa sangunea, con lo a cual se responde a la hipoglicemia. La activacin de la glucogenlisis muscular, como > se conoce,no aportar glucosa a lasangre,pero proveer a este tejido de glucosa adicional como fiiente de energa para el ejercicio intenso.

Fig. 43.22. Acti\acin dc la atleiiilato riilasn por la adrenalina el gIiieiig6n.

Estas l i ~ r i i i ~ i i a s i.eioiioci<las son por los reecptorcs espccifiws prercntes en las clulas diana. Lus c a n ~ h i o sconfwiii;~cienaleswpei-imentados por Cstm $11 formar el cornplc,jo Iioriiioiia-reeclitui. reriiltan trasiiiiti<lor a la pi-utcina G 5 ! Csta pro)ara la activacin de 13 adenilato ciclasa. 1.acrizinia artiva cataliza la forniaci6ii dr .A>IPc a vailir de ATP.

La accin de la adrenalina en el ni~culo puede reforzarre por canibios en la concentracin de iones Ca". El impulso nervioso provoca la despolarizacin de la ineinl>raiia-causada por liberacin de acetil colina-, lo que a su \e/. produce la liberacin de iones calcio del retculo sarcolsiiiico. Ello nroduce., oor una i~arte. la contraccin muscular y, por otra, la activacin de la fosforilasa quinasa. El auincnto de glucosa en la sangre (Iiipergliceiiiia) ser la seal para la liberacin de insulinaa lasangre por el pncreas. Esta Iiorinoiia posee receptores en el msculo y en el hgado, entre otros tejidos. La insulina provoca la activacin de las t0sfoproteiias fosfatasas-1 y de la fosfodiesierasa -enzinia que degrada al AhlPc-, entre otros mecanismos prohables, lo que conduce a la inactivacin de la glucbgeno fosforilasa y a la activacin de lagliicgeno sintasa. En esta condicin se activara la glucognesis y se deprimira la glucogenlisis y, de este modo, el organisnio responde a la hipergliceniia, farorecientlo la extraccin de glucosa de la sangre.

Enfermedades por almacenamiento de glucgeno

Se conocen ms de 12 enfernicdades distintas por alinacenainiento de glucgeno 0 gliicogcnosis. La mayora de ellas afectan al Iigado, pero puecleii presentarse taiiiliibii en el msculo y en el corazn. La causa del almacenamientoexcesivo de este polisacrido se debe a errores congnitos que afectan alguna enziina requerida en su sntesis o en su Las tramiten con carcter de~~adacibn. glucogenosissoii e~ifemiedadesIierediti~ni~.qucse autosniico recesirro,con excepcin de la tipo IXb, que es recesiva ligada al sexo. Laenfermedad por alniacenaiiiie~itodegliic~eiioi~i~romii 1oenfel-niedad esla tilio de von Gierke. Es causada por el cleficitde glucosa-6-fostatasatanto en el Iigado cuino en el ~iiiieintestino.Estaenfermedad se trasmilede formaautosiiiicarecesiva. Las manifestaciones clnicas incluyen Iiipoglicemia. acideinia Ictica, Iiiperlipeniia, Iiipcroriceiiiia y gota,? aumento de tamao del Iigado, entre otras. La Iiipogliceiiiia es fcilmente cxplirada dehido a la falta de la enzima, pues la

gliicosa-6-(P) ahandoiia el tejido heptico y no piirde niantener los nivelec; de gcemia. no Los aiinientos de la coiice~ilraci~ii este nietaholito en el hepatocito inhiben la de compuesto conio precursor de la sntsis de glucosa. La nio~~ilizacibn Ipidos aiinienta de debido a la Iiipogliceniia mantenida. -por ellose presenta la Iiiperlipemia. Por otra parte. v . . se constata un aumento de la degradacibn de purinai, lo que condiice a la hiperiiriremia y a la gota. El aoniento dela cantidad deglncgeno alniacenado en el hgado provoca un extraordinario incremento del voliiinen del rgano (Iiepatoniegalia). La glucogenosis tipo 11-enfermedad de Pompe- se debe a la carencia de Is crwima lisosomal 121-4elucosidasa o iniiltasa cida. En esta enferniedad se almacena eluceeno .> en pcticaniente todos los tejidos. Los lisosonias captaii los griiiiilos de glucgeno. y tamhitn se acuinula este polisacrido extralisosoiiialine~~te. niarcada cai-rlioniegali;i La que suele estar presente en estos casos provoca la muerte 21 edades tciiipraiias. Lii 1;i glucogenosisdetipo IU-enfermedad de Coii-, la eniima qiie falta es la desrainific;~iite. El cuadro clnicose oarece al de la enferniedad de von Gierhc. ainioiie nnicho niai l e ~ e .
U U

Cuadro. Algunas caractersticas de eiifern~edadesporalmce~~i~~i~iento de glnc&eno

Tipo

Enzima deficiente <;lurosa-(i-fosfatas21

rganos afectados Ilgado rin

Caractersticas dcl glocbgeiio

Cano<Lid ailnlenb~k~
y

hlanifestacioncs clnicas Hel~toiiiegalia. hipo~liceiiii;igfi~ve,cetosis. iiipeniriceinia, Iiipixlipernia Cardioinqdia,iiiuet.ie por ~>mcardionepiraion<i antes de los 7 aiios

'

Iliifeniidad de ron Gierke

II
de Enkrm~lad Punipe

deestriirtiira ii<ii.iii;~i

u 1-4giiirusidasa lisosomal l o d o los rganos

Inclenienlo iiiasi\<i !(Ir estritctiir;~ iiorni;il

Fosfiifruct<i<~uiii~~~i Msciilu

(iuitidad aumentada Y de esti~ictura ~ioriiial

lgualal tipo lV

Fosl'urilasaquiiiasa

Hgado

Hepatomegalia dkrrcta. Iiipiigliceinianidenida

Resumen
El glucgeno es una forma eficiente de almacenamiento energtico, principalmente en hgado y msculo. Las molculas de glucosa pueden ser movilizadas de forma rpida en condiciones de requerimiento de energa endgena, y contribuir al mantenimiento de la glicemia. La glucognesis requiere 2 enzimas: la glucgeno sintasa y la ramificante, y de UDP-glum, que es la molcula donadora de grupos glucosilos. En la glucogenlicis participan igualmente 2 ennmas: la glucgeno fosforilasa y la desramificante. El producto principal de la degradacin del glucgeno es la glucosa-l-(e), la cual se convierte en glncosa-6-(P). Esta ltima p u d e desfosforilarse cn el hgado por la accin de la glucosa-6-fosfa-a presente en este tejido. La glucosa libre as formada en el hgado puede pasar a L sangre y coadyuvar al mantenimiento de la a glicemia. En el misculo no existe dicha enzima, y la glucosa es utilizada como fuente de energa durante el ejercicio intenso. Los mecanismos de regnlacin de los procesos de sntesis y degradacin del glucgeno son complejos, e incluyen regulacin por modulacin covalente y alostrica de las enzhas principales de su sntesis (glucgeno sintasa) y de su degradacin (glocgeno fosforilasa), las cuales forman parte de cascadas enzimtim, desencadenadas por hormonas que actan por mediacin del AMPc, y dan como resultado un marcado efecto amplificador. La forma fosforilada de la gludgeno fosforilasa es la activa y la no fosforilada es inactiva, en tanto que para la enzima glucgeno sintasa resulta lo opuesto. La glucosa-6-(P) y el ATP favorecen el paso a la forma T, inaciiva, de la gluegeno fosforilasa b, mientras que el AMPfavorece su paso a la forma I?, ms activa Por otra parte, la glueosa-6-(P) es un efector positivo de la glucgeno sintasa b, en tanto que este metabolito no tiene efecto sobrila forma a dedichi enzima; el glucgeno inbibe su propia sntesis. La glucosa facilita el paso a la forma T (inactiva) de la glucgeno fosforilasa a. Por todo ello, la glucosa-6-(P)y e* iWfavorecm la sntesis del glucgeno, mientras que el AMP y el propio glncgeuo la inbiben. Estos efectores poseen una accin opuesta sobre la glucogenlisis. El glucagn y la adrenalina favorecen la glucogenlisis, al propiciar el paso a las formas fosfatadas de la glucgeno fosforilasa (forma a) y la glucgeno sintasa (forma b), lo que provoca la activacin de la primera y la inactivacin de la segunda. La insulina ejerce un efecto contrario, ya que conduce a la desfosforilacin de ambas enzima. Las glucogenosis son enfermedades hereditarias que se caracterizan por el almacenamiento de glucgeno en uno o ms rganos y que se deben al dficit de alguna de las enzimas involncradas directa o indirectamente en su metabolismo. ~a ms frecuente es la tipo 1 o enfermedad de von Gierke.

Ejercicios
1. Establezca una coniparacibii entre los procesos de glucogiicsisy gliicogeiilisis eii cuanto a localizacin, consideraciones energticas, etapas y enzinias partiiipantes. 2. Expliqoc por qu el glucbgcno nitiscular no contrihuye sensihlcnieiite iil iiiaiitriiimiento de la gliceniia, exponga el destino del producto de la glucogei16lisise11 este te,jido. 3. Ibndameiite. desde el punto de vista niolecular, la capacidad de niovilizaci61i rpida de glucosa a partir de gli~cbgeno tanto mi Iiigado conio en niusculo. 4. Mencione las veiit@isdel almacenamiento de energa en forina de glocbgciit). 5. El ayuno es una seal para la librrscibn de la Iiorniooa glucagn. Realice 1111 esquenia que ponga de manifiesto el efecto de diclia Iioriiinna eri el nietabolisiiio del gliicpeno heptico.

6. Explique la influencia de la glucosa libre, la glucosa-6-(P) y el glncgeno en el metabolisino dc este ultinio compuesto. 7. Explique el papel de los iones Ca" en el metabolismo del glucgeno. Exponga el mecanismo probable de este efecto. 8. Haga un esquenia quc resuma la regulacin covalente y alostrica de la glucgeno fosforilasa. 9. Represente esqueniticamente la cascada enirntica en la que participa la glucRgeno sintasa. 10. Siiponga para el caso de la cascada de la eiiziiiia glucgeno fosforilasa, que el iiuniero de recanibio es el mismo para cada paso de la cascada y que es igual a 10, es decir, que porcada AMPc se activan 10 protenas quinasss y assucesivamente; asnnia que como respuesta n la acci611de la adrenalina, se sintetizaron 5 molculas de 4Ml'c. Cantas niol6culas [le gliicgeno fosforilasa b pasarn a la fornia a? 11. Fundainente, desde cl punto de vista inolecular, el cuadro clnico que se constata en la eiiferiiic~lad von Gierke. de

En condiciones normales, los glcidos constituyen la principal fuente de energia en los animales. Como se vio en el captulo 42, el producto principal de la digestin de los glcidos de la dieta humana es la glucosa y, en menor medida, otros monosacridos. En la mayora de las clulas, la va principal de degradacin de la glucosa es la glucoltica,aunque en algunos tqjidos resulta importante la va de oxidacin directa o ciclo de las pentosas. Por medio de la gluclisis, la glucosa es degradada hasta CO, y H,O en condiciones aerohias, niientras que en condiciones anaerobias, en dependen& del tipo de organismo, se degrada hasta etanol (fermentacin alcohlica)en levaduras y en otros microorganismos; a cido lctico (fermentacin lactica), en organismos superiores; y butrico, actico u otro producto final, en otros organismos. Los combustibles principales para el proceso de gluclisis son los inonosacridos, principalmente la glucosa, y en menor medida otras hexosas como la fructosa, la galactosa y la manosa. La va glucoltica es, como tal, irreversible. Sin embargo, muchas de las reacciones pueden revertirse y de hecho en la sntesis de glucosa, a partir de ciertos precursores no glucosdicos (gluconeognesis),intervienen una gran cantidad de ellas, y aqullas que son irreversiblesseobvian por reacciones diferentes en las que participan enzimas distintas. Dichas reacciones constituyen rodeos metablicos. La intensidad de la gluclisis o de la gluconeognesisdepende de las condiciones metablicas del organismo y responde a eficientes mecanisn~os regulacin. de En este captulo se tratar acerca de las principales vas de degradacin de la glucosa, es decir, gluclisis y ciclo de las pentosas; adems, se incluye el estudio de la incorporacin de otras hexosas a la va glucoltica, as como la gluconeognesis.

Antecedentes histricos de la gluclisis

Los trabajos sobre la fermentacin fueron la base del estudio acerca del metabolismo y la enzimologa, y la va glucoltica result la primera ruta metablica dilucidada. Buchner,en el ao de 1897, demostr queen un extracto libredeclulas, obtenido etanol, lo que confirniaba que a partir de levaduras, se produca la fermentacin Iia~ta se llevaba a cabo la va completa. En 1905, A. Harden-v W.J. Youngconstataron la necesidad de la presencia de fosfato para que pudieran producirse estos procesos y se

descubre la fr~ictosa-1,6-hisfosfato. despus Warbiirgdemostr la necesidad de Algo algunos factores no liroteicos para la actividad delas eiizinias -NAD, ADPy ATP. Por otra parte, C. Irmbden describi la escisin de la fructosa-1,6 bisfosfato en 2 molculas de 3 tomos de carbono tambin fosfatadas. 0110 Meyerhofestudi la energtica de la gluclisis y demostr que el msculo converta el glucgeno en cido lctico; l compar dicha trausforinacin catablica de la glucosa proveniente del glucgeno con la fermentacin alcohlica. I.ouir Pasterirestudi la ferinentacin en distintos organismos y describi diversos tipos de fermentaciones adems de la alcolilica, y sobre la base de ello clasific los organismos en aerobios y anaerobios. EII el ao 1861, este investigador desculiri que en presencia de oxgeno molecular disminuye la utilizacin de la glucosa, fenmeno coiifiriiiado ulteriormente por Warburgy Meyerliofy que se conoce como efecto Pasteur. Este fenmeno se explica como un mecanismo que garaiitiza la economia de las clulas, pues en presencia de oxgeno las clulas facultativas satisfacen sus iieeesidades energticas con menor cantidad de glucosa, ya que el rendiiniento energ4tico es muy superior al de la degradacin anaerohia de este inetabolito. Adenis de los investigadores niencionados, otros tambin aportaron datos importantes para el conocimiento de las diferentes reacciones de la va: C.17 Cori, G.:.T. (uriy J.Par~ia~,entre otros, y ya desde 1940se esclarecieron las etapas fundamentales de esta importante va inetahlica, aunque continuamente se aportan nuevos detalles y aspectos sobre sta. Por los aportes esenciales de alguuos de estos investigadores en el esclareciuiiento de esta ruta metahlica, a sta se le conoce tambin como va de Embden-MeyerhofParoas, o tambin va de Meyerhof:

La gluclisis es el proceso mediante el cual la glucosa se degrada hasta pirvico. Es un proceso catablico que aporta energa al organismo, y se lleva a cabo en el citoplasma soluble de la mayora de los tejidos. Es una va universal presente en la mayora de los organismos, auiiquc posee peculiaridades que los diferencian entre ellos como se explicar ms adelante. La gliiclisisocurre en 2 etapas: 1. Desde glucosa hasta las 2 triosas fosfatadas. 2. Desde 3 fosfogliceraldehdo o gliceraldehdo 3 fosfato hasta cido pirvico. A partir del pirvico, los procesos ulteriores dependen de ciertas coridiciones metablicas. En condiciones aerobias, el pirvico se convierte en acetil-COAy ste se incorpora a los procesos de la rrspiracin celular; los productos finales son CO, y H,O, con liberacin de gran cantidad de energa. En condiciones anaerobias el producto final en los organismos superiores es el cido lctico, y el rendimiento energtico resulta mucho menor. Eii la gloclisis participan 11 enziiiias, las cuales se encuentran libres eii el -en citoplasma solul~le algunas clulas ciertas eiizimas puederi estar asociadas con la membrana plasmtica, miofihdas onitocondrias. Todos los metabolitosuitenneuiaiiui estn fosforilados. Ello es importante, ya que al pH fisiolgico(aproximadamente 7) los grupos fosfatos se encuentran ionizadosy ello impide la salida de los monosacridos fosforilados de la c6lula por difusin siniple.

Etapas de la gluclisis
Primera etapa: de glucosa a Las 2 triosas fosfatadas Como se expres anteriorniente transcurre desde la glucosa hasta las 2 triosas fosfatadas. La primera reaccini. es dccii; la fosforilacin de la glucosa fue estudiada en el captulo 42. En dicha reaccin. catalizada por alguiia de las 4 isoenzimas con actividad hexoqoinsica, se consiune tina niolcula de .Kl'Py se fornia la glucosa-6-(1').

La reacciii que aparece en esta Figura tiene un A"' = - 1kcal.nio1'. Formacin de fmctosa-6-(P). La glucosa-6-(P) as formada se transforma en fructosa-64') por la accin de la enzima gliicosa fosfato isoinerasa segiiii la siguiente reaccin:

Esta reaccin es reversible y tiene un AG"' (le + 0.1 kcal.inolV. Fodndefrudosa-l,&bisfosfato. La fiuctosa-6-(P)es el sustrato de lasiguienle reaccin catalirada por la principal euzima reguladora del proceso completo: la fosfofructoquinasa. Esta enzinia convierte a la fructosa-6.0') enfmctosa-1,6-bisfosfato:

(P)-O-H,C

CH,OH

(P)-O-H,C

CH;O-(P)

ATP

4DP

Esta reaccin es irreversible y tiene un AG" de -3,40kcal.niol-l. La fosfofi-i1ctocii1i11'asaco1istit11vc ~.liic6lisis.es . la nrincinal enziina remiladora de la . una protena oligonirira coi1 peso niolecular380 000 11,y presenta regiilacin dostrica; el ATPy el citrato son efectores nezativos de laeuziina,los valores <leDHhaios taiiihiii
&~

de la fosfofructoquinasa Estos efectores, tanto los positivos como los negativos, son indicadores del eskido nietablico dc la clula en u11nioinento dado, as:
l . El YI'P, el AI\IP' el Pi se relacionan con el estado energtico de la ctl11l;i. 2. El pH. con el medio celular.

3. El citrato se relaciona con la disponibilidad de sustratos, como cidos grasos y cuerpos cetnicos. 4. La fructosa-2,6-bisfosfato,con la concentracin sangunea de glucosa, mediante la relacin insulina-glucagn.

Estemetabolito (fructusa-2,6-bisfasfato), se forma a partir de la fnictosa-6-(P)por la accin de una enzima multifuncional que posee 2 sitios activos: uno con actividad quinsica (fosfofmctoquinasa 2) y que cataliza su formacin, y el otro con actividad fnsfaisica (diFosfofmctofosfatasa responsablede la separacindel p p o fnsfatounido 2) al carbono 2 deeste metabolito, y por tanto provoca la reconversin de la fnictosa-2,6bisfosfatoen fructosa-6-(P) (Fig. 44.1). El glucagn, al favorecer la fosforilacin de esta

a)

OH
Fructosa- 2,6- bisfosfato

Fig. 44.1. La fruclosa-2.6-bisfos[ato, madulador positivo de la fosfofmctoquinara. a) Estructuradeesle nietabolito. b) Reacciones de formaeijn y degradacin de la fructosa-2,6- bisfosfato; la enziniii niullifuncianal presenta actividad de quinasa ifosfofruetoquinasa 2 ) y de fnsfatasa bisfosfofructo fosfatasa 21.

Fosfofructoquinasa 2

Obtend6n de las 2 iosas foshtadaa La formacin de las 2 triosas fosfatadas se produce por la escisin de la fructosa-1,6-bisfosfatomediante la accin de la enzima fructosa bisfosfatoaldolasa; esta reaccin es reversible y su AG" es de + 5,73 kcalmol-l.

( P ) - O - H ~ C ~ ~ ~ (P) - O ~

<

Fosfato de dihidroxiacetona

OH

H / C=O
CH-OH
l

Las triosas fosfatadas pueden interconvertirse mediante la reaccin catalizada por para csta accin el AG"'es +1,83 kcal.mokL: la enzimafosFotriosaiso~nerasa;

En el equilibrio, el fosfato de dihidroxiacetona constituye el 90% de los componentes. En la niedida en que el gliceraldehdo-3- fosfato se transforma en las reacciones subsiguientes, el fosfato de dihidroxiacetona se ir convirtiendo en aqnl, debido al desplazainiento del equilibrio producido por la sustraccin del producto. Por el coutrario, si la va glucoltica se encuentra deprimida. se favorece la formacin de fosfato de dihidroxiacctona, la cual puede ir hacia la formacin de L u glicero fosfato (glicerol-3-fosfato),un precursor de la sntesis de triacilgliceroles (Fig. 44.2).

CHO
H- C- OH
l
I

CH,OH

N AD+

CH,OH OH-C-H
I l

2
7

&=O
l

2 ,
7

CHr0-@
3 fosfogliceraldelido

CH70-

CI-ITO-

Fosfodihidi-oxiacctona

) Glicei-ol-3-fosfnto( L - a - ~licerofosfnto

6
Pirvico
Fig. 44.2. Formacin de gliccroi-3-fosfatu. Cuando la glueblisis est dcprimlda, se favorece la forniaciii de fosfadihidrariacetona. la cual se cowierte, por Iiidrogenacin, en glicerol-3fosfato, precursor de la lipognesis.

1 1

Segunda etapa: de 3 fosfogliceraldehdo a dcido p i ~ v i c o En esta etapa se fornia cido pirvico a partir del gliceraldehdo-3-fosfato.En la primera reaccin ocurre una oxidacin. Formacin de k i d o 1,3 bisfosfnglic6rico. El gliceraldehdo-3-fosfato se convierte en cido 1,3 bisfosfoglicrico, ya que el grupo aldehdo se oxida a cido carboxlico, seguidanlente se forma un anhdrido mixto con el cido fosfrico. La enzima 3 fosfogliceraldehdo deshidrogenasa es un tetrniero de 140 000 D, formado por subunidades idnticas, cada una contiene un centro activo. Las etapas de esta reaccin se muestran de manera simplificada en la figura 44.3. La enzima se une al cofactor NAD' y el sustrato lo hace por un grnpo SH de la protena enzimtica. Los hidrgenos son sustrados del intermediario forniado, y se produce

un acilo activo que se mantiene unido a la enzima, y el cofactor se coovierte en su ft~rnia reducida; seguidamente, una niolcula de NAD' desplaza al NADH; 21 continuacifn es captado un fosfato inorgnico, y se obtiene el cido l , 3 bisfosfoglicrici~.

Fig. 4 . . Mcranisriio dr acriiiii d c I;i rrizi13 rna 3 (imfogliciraldchido desl,idro. geiiasa. La rriainisi posrr un griipo SI1 al cual se une cl grupti aldchnlo del subtrato; l reaiciii procede por. a dcsliidr~igrnarincon partiril>;ic i h del NAD'qiw capta 10s bidr6geniis y se rediice. L entrada de a tina iniilrula dc NAIY desplaza al cofartor i-rducidli; en esas coiidciones sc incorpora un g r u p o rosfato inorgnico ) se foriiia rl anhidrido misto earlmuiliro-fosfato de alto eoiitcnido eiicrgtico.

La reaccin global sera:

Gliccralclclido-3-fosf~~to

cido l . 3 bisfosfo$icrico

El cido 1J hisfosfoglictrico presenta un enlace anbdrido mixto carboxilfosfrico, rico en energa, la cual se aprovecha en la reaccin subsiguiente, en la sntesis de una molcula de ATP. la El AGU de la reaccin global es de + 1,s kcalmol~'; reaccin es reversible, y depende de las concentraciones relativas de rcaccionantes y productos. El NADH deher reoxidarse de fornia que la enzinia disponga del NAD' que requiere para su accin oxidativa. Si se acumula el cofactor reducido, la reaccin se favorece en el sentido contrario. En condiciones aerobias, la oxidaciii del NADH permitir la brmacin de ATP, no asen condiciones anaerobias, en que la reoxidacin transcurre si11 aporte energtico como se vera mas adelante. Formacin de cido 3 fosfogiicrico. La enzima fosfogliceroquinasa cataliza la siguiente reaccin en la cual se forma cido 3 fosfoglicrico y ATPpor fosforilacin

al nivel de sustrato. 1Sn ella ocurre una transferencia del grupo fosfato desde el acil-fosfato (aiihdrido mixto) hacia el ADP, como se muestra a continuacin:

CH-OH + ADP I CH70- (P) cido 1 , 3 bisfosfoglicrico

CH-OH
I

+
(P)

ATP

CHrO-

cido 3 fosfoglicrico

El cambio de energa libre de esta reaccin (AGU') de -4,50 kcal.mol-l. La es n v e r Es conveniente maccin es reversible, por supuesto para su i sealar que en esta miccin se demosh, por vez primera, el fenmeno de la fosforacin alnivel de sustrato. Conversin de 3 fosfoglic6rico en 2 fosfoglidrico. Una isomerasa, la fosfogliceromutasa, acta en la reaccin y cataliza la conversin del cido 3 fosfoglicrico en 2 fosfoglicrico; el AG"' de esta reaccin es de + 1,06 kcal.mol-' y es reversible.
0

o
&-OCH,OH cido 2 fosfoglicnco (P)

C-OH CH-OH 1 - 1 CH2-O- (P) cido 3 fosfoglicrico

I

En esta reaccin participa el cido 2,3 bisfosfoglicrico como intermediario, de manera similar a como lo hace la glucosa- 1,6-bisfosfato en la conversin de glucosa-1-(P) en glucosa-6-(P) por la accin cataltica de la fosfoglucomutasa (Fig. 44.4).

o\\

C-OH
l
d

o*

C-OH
l
1
2

H-C-OH H-C-OI H cido-3foshglicrico

H-C-OtI-C-OI

C-OH I H-C-OH-C-OH I H
1

o\\

cido-2.3hislosloglici-ico

cido-2fnsfoglicrico

Fig. 44.4. E l rido Z,3 bisfosfoglicrico coniu interniediaria en .1 rencrin de la fosloglicen,iiiutaca. En la iigura se muestra, csquemticanicnte, la participacin dc un residuo OH de la protena enzimtiei en la captacin de un grupo fosfato, el cual puede ceder a l &ido 3 fosfoglicriea o a1 2 fosfoglicrico rii dependencia del scnfida de la rcaecin.

Formacin de fosfoenolpir~ico. cido 2 fosfoglicrico se convierte en El fosfoenolpirvico por extraccin de una molcula de agua; sta se produce por la accin cataltica de la enolasa. La eliminacin de agua provoca una oxidacin relativa del carbono nmero 2 con respecto al nmero 3. El grupo fosfato queda as unido por un enlace de alto contenido energtico. La enolasa tiene un PM de

alrededor de 85 000 D y requiere iones divalente de Mg2+ Mn" para ejercer su accin; el AG0 de esta reaccin es de +0,44 kcal.mol-l.
0

C-OH

<-OH

COOH

cido loslocnolpiriivico (PEP)

cido pii-\ ico

', Protena qiiiiiasa ----+ 1

,
5

',

li

FosFopiotciia

fn~fatadaes inactiva v la no fosfatada,la forma activa. El glucagn y la adrenalina, la mediante el AMPc, provocan la activacin de la pmteia quinasaquefosforila e inactiva a la pirvico quinasa; la insulina, mediante la fosfoprotena fosfatasa, ejerce una accin conhaiia En la figura 44.6 se presenta un resumen de la va glucolitica, desde la glucosa hasta el cido pirvico.

Glucosa

Glucosa- 6 - fosfato

Fructosa- 6 - fosfato

Fructosa- 1.6 - bisfosfato

i;

Fosfato de dihidroxiacetona

Gliceraldehdo - 3 - fosfato

cido 1.3 - bisfosfoglicrico

cido - 3 - fosfoglicrico

cido 2 - fosfo&(.rico

cido fosfoeiiolpirvico
,
,

,,

cido p i ~ v i c o

Fiz. 44.6. Seciicncia de rriieci<iiiea<Ir la va pluiollica. En w j u se seialan los 1'1' que se ~ociriirne~ise foi-innii en In va: en vci-de, el iiunihrc de las cnriiiias prtieipantes y cn azul, el cofaetur reducido formado en la segunda etapa

<,

Destinos metablieos del hado pinvico

El cido pirvico formado en el proceso de la gluclisis puede seguir destinos diferentes de acuerdo con las condiciones de aerobiosis o anaerobiosis de la clula. En condiciones anaerobias se convierte en cido Ictico segn la reaccin siguiente. Esta reaccin tiene un valor de AG" de -6,Okcal.moV.
COOH
I I

COOH HO-C-H+NAD'
l l

C = O +NADH.H+

CH,

cido pirvico

CH3 cido lctico

La enzima que cataliza esta reaccin es la Ictico deshidrogenasa (LDH), y existe en S formas isoenziiiiticas. Ellas fueron estudiadas en la seccin de Biocatalizadores; slo insistiremos en que la diferencia de sus afinidades (Km distintas) por el pirvico o el Ictico, influye de forma determinante en los productos finales principales de la va glucoltica, en los distintos tejidos. El cido Ictico formado en esta reaccin a partir del pirvico puede difundir hacia el exterior de la clula. Como se ver ms adelante, el Ictico puede ser utilizado por el hgado en la resntesis de glucosa. Sin embargo, en el tejido muscular este metabolito no es utilizado y pasa a la sangre. Como puede apreciarse, en esta reaccin se reoxida el NADH, lo que permite que la reaccin de la enzima 3 fosfogliceraldehdo deshidrogenasa contine an en condiciones anaerobias. En condiciones aerobias, el pirvico se convierte en acetil-COA (acetilo activo), el cual es posteriormente degradado en el proceso de la respiracin celular hasta CO, y 1-1,O. La oxidacin del piruico hasta acetil-COAes catalizada por . . el cornpl~jo multienzinintico denominiado pirwico deshidrogenasa, de localizacin peso niolecular de alrededor de 70OO00Oy una estructura niitocondrial. Tiene I I I ~ de icosaedro como se puede apreciar en la foto de niicroscopia electrnica (Fig. 44.7).

Fuente: Stryer l..: Uiocheinistry. Ciiarta cdir i h W.H. Freeiiim rY <'o., 1995. Fig. 44.7. blirrofotografii ~lcetrnieadel complejo de la piriivicn dcsliidrogcr>as.i. Kn la figura sc niucstra la rnicrofutografa electrnica del complejo iiiullienzimPtieo de la pirvico dwhidrogcnasa de E. coli.

Este complejo est constituido por 5 enzinias de las cuales 3 participan directamente en la oxidacin del pirvico y 2 son enzimas reguladorasdel prapiocomplejo. Adems, el complejo est asociado a 5 cofactores; de ellos 3 se encuentran

firmemente unidos a cada una de las enzimas y los otros 2 slo lo hacen en el momento de la reaccin. Las enzimas y los cofactores son:

1. E,: p i ~ n c deshidrogenasa unida a pirofosfato de tiamina (PlT). o 2. E,: dihidrolipoil transacetilasa unida a cido lipoico. 3. E,: dihidrolipoil deshidrogenasa unida a flavn adenn dinucletido (FAD).

Las enzimas reguladoras son una quinasa y una fosfatasa responsables del paso del complejo de su forma no fosfatada a la fosfatada y viceversa. Los otros cofactores que participan en la reaccin son la coenzima A (COA) y el nicotinamn adenn dinucletido (NAD). Las transformaciones ocurren por etapas (Fig. 44.8). En la primera etapa el pirvico unido al anillo tiazlico del PPT, experimenta una descarboxilacin; se forma entonces el hidroxiderivado (hidroxiacetilo) y se libera CO,. El hidroxiderivado se mantiene ligado al anillo tiazlico. En la segunda etapa este grupo se oxida por deshidrogenacin, y se forma el grupo acetilo, el cual es transferido a un tomo de azufre del cido lipoico unido a la enzima E, del complejo (dihidrolipoiltransacetilasa) ala vez que este cofactor pasa a su forma reducida.

F! FADH,

\ FAD

Fig. 44.8. Etapas de la rcacrin eatalizada por el eoiiipleja de la pirvico desbidrogcnasa. lin la figura sc representan csquetiiticamentc las etapas principales de la reaccin; la enzima 1 catalira In desrarburilacibn del sustrato, la cual est unida al cofaetar PPT;seguidamente aquel es transferida al cido lipoica y resulta a la vez oxidada par la accin calaitica de la enrima 2; el acetilo as formado es transferido a una molcula de coeniima A y se forma el aectil-COA. Los hidrbpcnos son captados primero por el FAD -reaccin calalizada por la enzima 3- y finalmente transferidos al NAD* con la ronsccuentc reduccin de este ltima eofactnr.

En la etapa siguiente el grupo acetilo es transferido a la coenzima A, y se forma acetil-COA.En el prximo paso el dihidrolipoil se reoxida por accin de la enzima E, (dihidrolipoil deshidrogenasa),~ grupo prosttico, el FAD, se reduce. El FADH, as su formado es ulteriormentereoxidado aexpensasdelNAW que se convierte en NADH.H La reaccin global de oxidacin del pirvico por el complejo de la pirvico deshidrogenasa, que tiene un A G 0 de 8,O kcalmol-', sera:

cido pinvico + NAD'

+ COA ----+

Acetil-COA + NADH.H'

+ CO,

Esta reaccin es, por tanto, irreversible. La regulacinde este comple,joes de 2 tipos, por modulacin covalente: la pirvico deshidrogenasa es fosforilada por la enzima quinasa -una de las 2 enzimas reguladoras del complejo- y en esta forma se inactiva; en tanto que su forma no fosfatada, la cual se forma por accin de la otra enzima reguladora M fosfatasa),es activa; el sustrato de estas 2 enzima reguladoras es a la primera enzima del complejo, pero la modificacinde su actividad repercute sobre la totaiidad del complejo, ya que el producto de esta primera reaccin se requiere para el funcionamiento del resto de las enzimas. La pinvicodeshidrogeiiasa tambin resulta reguladapor mecanismos alostricm. Cuando se acumula ATP,elcomplejose deprime,por el contrario si la concentracin de ADPes la que est elevada, el comple,iose torna muy activo. Tambin se activa cuando existen altas concentraciones de-iones Ca" 0 aab;ndante pirvico. Este complejo multienzimticotambin es regulado por sus productos tinales. El aceal-COAinhibea la transacetilasa, y el NADH, a la deshidrogenasa; la inhibicin se revierte por la COAy el NAD',respectivamente. Por otra parte, elNADH y la aceal-COAactivan a la quinasa en tanto que el Caz+y el Mg2+la inhihen. La desfosforacin de la primera enzima del complejo,y por tantosu activacin,se producen poractivaciudel& proteinofosfatasas favorecidas por la insulina. Las concentracionesde Caz's M$+ elevadastambin activan - ala fdatasa.En la figura 44.9 aparece un resumen de la regulacin de este complejo. Pi~vico deshidrogena~a (activa) Pirvico deshidrogenasa fosfatasa
Fig. 44.9. Modulacin covalenlr d e l a pirvieo dcsliidrngenasa. L a forma no fosfatada de la enriina es la activa; el NADH favorece el paso a Informa inactiva: el Ca" y otro5 iones divalentes ejercen un cfcilo
opuesto.

1 deshidrogenasa quinasa

El acetil-COAformado por este complejo contina su degradacin en el ciclo de Krebs o puede seguir otro de sus posibles destinos, en dependencia de las condiciones metablicas de la clula en cada momento. Como ha podido apreciarse a partir del estudio de la va glucoltica, existen 2 alternativa5 nietahlicas: la gluclisis anaerohia (fermentacin) y la aerobia. Las etapas iniciales hasta cido pirvico son idnticas en ambos casos; sin embargo, las diferencias que existen en dichas alternativas a partir de aquel metabolito tienen una importante repercusin energtica. Para comprender adecuadamente esta diferencia annlizaremos varios aspectos: 1.Destinos del NADH formado en la reaccin oxidativa de lasegunda etapa de la gluclisis. 2. Destino del cido pirvico y productos finales obtenidos.

-0s

del dinucie6tico de adenina y nicotinamida reducido formado en la reaccin oxidava de la segunda etapa de la giuclisis

El NADH formado deber ser reoxidado como requisito para que la gluclisis proceda. En la gluclisis anaerobia el cido pirvico se convierte en cido lctico por la reaccin catalizada por la LDH y en la cual participa dicho cofactor como agente y reductor,entrega sus cquivaientes de rec~iiccin pasa asa su forma oxicIa<iaw.D'). En este caso la reosi(lacibn del NADH no ticne iniplicaciones energbiicas. En condiciones aerobias e1 NADH reducido, forniado eii la reaccin oxidativa de la s e y n d a etapa. ser reosidado en el proceso de la cadena respiratoria, por lo cual si tendri iniplicaciones energticas. La iiieiiiln'aiia interna iiiitocoiidrlal resulta ai impernieal~le U!\D13. por ello es iieceiario n ~ i a l i ~las condiciones en las cuales al ocurre el 1>ai11de los cqnir.r,lciiles de retlocci61i de diciii! cofactor al interior de esta meii111r;uia. I.a:; 1 as iiiedlaiite la^ cidr:. cllu sc ii;ice posil~lc wrias. l:or r a z o ? ~ ? 'wi ::e! alcance de este texto nos rekrirciiios ii las 2 ms conocida<. de Cuando el tr;iip;iso (le los eqiii~alentci reduccini sc prodiicc a p w h dcl glicerol-3-(P),al proceso se le suele deiioiiiiiiar "l;iiiza(ler;i del glicerofosf;il~i".Corno fuera ya tratado en cl rapiulo 37, en este caso se forniin hicaineiite 1.5 inlculas de de Al'Pa partir de 10s eqiiivalentes de reduccih del NADH. El otro ii~ccanisiiio transportede NADH, al que se har referencia aqu,se reladona con la "laniadcra del cido mlico-cido aspirtico" cnptulo 37),(le mayor iniportancia en os mamferos y mediante el cual, a partir del NADH, pueden formarse 2,sATP.

Productos finales formados a partir del cido pirivico

Consideraciones energticas de la gluclisis

La gluclisis es una va metabblica central y aunque cumple varias funciones la fundamental es la de proporcionar energa, parte de la cual se conserva en forma de molculas de ATP. Como fuera sealado anteriormente, el rendimiento energtico es diferente segun la gluclisis proceda en condiciones aerobias o anaerohias. En el cuadro analizaremos ambas situaciones. Es importante que se recnerde que por cada molcula de glucosa se obtienen 2 triosas fosfatadas, las cuales son interconvertibles; ello explica que a partir de la segunda etapa de la gluclisis los clculos, para el balance energtico, se dupliquen. El anlisis del balance energtico en condiciones aerobias y anaerobias pone claramente de manifiesto la diferencia en relacin con la eficiencia a favor de los procesos aerobios. Este balance se ha realizado asumiendo el paso de losequivalentes de rednccin del NADH mediante la "lanzadera mlico-asprtico"; si el paso ocurre a travs de la "lanzadera del glicerofosfato" se formaran 30 ATP. La energa que se libera por la coml>ustinde la glucosa hasta CO, y H,O es de 686 kcal. inol'. En la glucblisis aerobia se conserva11 233.6 kcal (31 s 7.3 h.cal) en forma de ATP; ello significa una eficiencia de alrededor del 34,05 56.

Cuadro. Balance energtico de la gluclisis

~

~-

Reaccin
-

Formacin de niolculas de ATP Condiciones anaerobias Condiciones aerobias

Formacin deglucwo-6.p) (reaccindela hexoquinasa) Formacin de F1,6 bis P (enzima fosfofmctoquinasa) Formacin de 1 3bisfosfoglicrico. Reaccin dela enzima fmfo. gllceraklehdodshidmgenasa Fonnaun de 1NADH Formacin de 3 f~~foglicrico. Reaccin dela enzima fasfogrrmquinasa Formacin de phvato. Reaccin de la enzima phvato quhma Formacin de acel-CuA. Reaccindela phvato deshidmgenasa. Formacin de 1NADH Degradacin de la acel-COAen el ciclo de Krebs
Total

- IATP - 1ATP

- IATP

- IATP
+ 5 ATP

+ 2ATP

+ ZATP

+ 2ATP

+ 2ATP

2 ATP

3ZATP

incorporaci6n de otras hexosas a la va glucoitica

La degradacin de polisacridos y oligosacridos, tanto exgenos cunio endgenos, rinde como productos otros monosacridos adems de la glucosa. Sin embargo,estos azcares despus de algunas transformaciones iniciale se incorporan a la va glucoltica y completan su degradacin a travs de dicha ruta metablica. A continuacin se revisarn las reacciones que permiten la incorporacin de otros monosacridos coino la galactosa, la manosa y la fructosa a la va glucoltica. Las reacciones por medio de las cuales la galactosa seincorpora a la va glucoltica se conocen como va de Leloir, y de manera resuniida se muestran en la figura 14.10. Como puede apreciarse una quinasa especifica,la gaiactoquiiiasa, fosfora a la galactosa en posicin 1formando galactosa-1-(P) con consumo de 1ATP. Seguidamente esta ltima reacciona con la UDP-glucosa y se forma glucosa-1-(P) y UDP-galactosa; la enzima que cataliza dicha reaccin es la UDP-galactosa uridil transferrisa. La galactoss unida al UDP se convierte en UDP-glucosa por accin de una epimcraia. La glucosa-l(P)formada a partir de la gaiactosa puede ahora incorporarse a la va glucoltica. Como se ver ms adelante, la falta de laenzima galactosa uridil transferasa provoca una enfermedad molecular, la galactosemia. La fructosa es un monosacrido abundante por ser producto de la degradacin de la sacarosa. La fructosa, como se vio en ocasin del estudio de las hexoquinasas (captulo 421,es sustrato de dichas enzimas, por lo tanto puede ser as fosforilada y

CH2-OVa glucoltica
,.

OH Fmctosa-1- fosfato
Aldolasa O+ C-H I H-e-OH CH,OH Gliceraldehdo

Fosfodihidroxiacetona

Fig. 44.11. Incarporaein de la fruitosa a la va glucolitira. En la figura se puede observar la secuencia de reacciones Por medio de las cuales la fructosa se incorpora a la via glueolitira.

CH,-O-

3 fosfogliceraldehdo

1. Deglucosa a glucosa-6-(P). 2. De fmctosa-6-(P) a fnictosa-1,6-bisfosfato. 3. De fosfoenolpirvico a pirvico.

Primer rodeo metablicn

En este primer rodeo se forma el cidofosfoenolpi~vico partir del cido pinvico u a otro sustrato que se convierta en algn metabolito intermediario del ciclo de Krebs. En primer lugar se forma cido oxalactico por la accin de la enzima pinivico carboxilasa que, como se recordar, es la enzima anaplertica ms importante del ciclo de Krebs; seguidamente este oxalactico se convierte en cido mlico por accin de la enzima mlico deshidrogenasa mitocondrial; el cido mlico abandona la rnitocondria y en el citoplasma es convertido de nuevo en cido oxalactico, el que a continuacin, por arrin delaenzimafosfoenolpinivico carboxiquininasa (PEPcarhoxiquinasrt),.wconvierte enel cido fosfoenolpi~vico, que requiere del consumo de GTP; una v &formado este lo e metabolitocontinan las reacciones de la gluconeognesis por la inversin de las reacciones de la va glucoltica. Tambin es posible la conversin intramitocondrial del oxalactico en cido asprtico (por transaininacin), y su p a o en esta forma al citoplasma, donde puede de nuevo convertirse en oxalactico y de ste en fosfoenolpirvico, por la accin delaPEPcarboxiquinasa. LaPEPcarhoxiquinasa est presente tantoen las nutocondrias como en el citosol por lo que tambin se ha considerado la forniacin intramitocondrial de este metabulito. En la figura 44.12se resumen las reacciones principales involucradas en este primer rodeo metablico. cido p i ~ v i c o

ATp

cido oxalactico

1/

cido asprtico

NADHH+ (3'

Mitocondria

cido mlico

+
1

Citosol

NAD+ NADH.H+ cido mlico fcido oxalactico (4)

cido asprtico

(31

cido fosfoenolpi~vico Enzimas:

(1): pinivico carboxilasa; (2): mlico deshidrogenasa mitocondnal; (3): transaminasa;

(4): mlico deshidrogenasa citoplasmtica; (5): PEP carboxiquinasa.

Fig. 44.12. Resumen de las reacciones del primer rodeo mctahliea de la gluconeognesis

Es necesario destacar que la primera reaccin, es decir, la conversin de pirvico en oxalactico es el paso de regulacin fundamental de este rodeo, y la enzima resulta estimulada por altas concentraciones de acetil-COA.

En el proceso de la gluconeognesis, una vez formado el fosfoenolpirvico, las reacciones procede11 por la siinplc inversin de la va glucoltica hasta que se alcance otro paso irreversible, esto es, hasta la forniacin de fructosa 1,6 bisfosfato. En esta etapa participa otra enzima diferente a la de la gliiclisis y por ello constituye otro rodeo metablico.

Segundo rodw metablico La enzima que cataliza el segundo rodeo iiietal>licode la gluconeognesises la fnictosa-1,6-bisfosfatofosfatasa o hisftfofructfosfatasa1. El producto fornladoes 1 fmctma-6-(P); la enzima requiere iones Mg" y es reguladaalostricamente; es activada por el citrato y el ATP, e inhibida por el AMPy por la fiuctwa-2,6- bisfosfato.

OH Fmctosa-l,6- bisfosfato
La p oxidacin de los cidos grasos aporta la energa que se requiere para este proceso y, adems,al incrementar la concentracin de acetil-COA,activa la pirvicn carboxilasa, tambin es un activador alostrico de la acetil-COAcarboxilasa y aumenta la sntesis decitrato,el cual es un efector negativo de la fosfofructoquinasa-1,por lo que decrece la concentracin de la fructosa-1,6-bisfosfato,la que, a su vez, es un efector positivo de la pirvico quinasa; por tal motivo, disminuye el paso de fosfoenolpi~vico p i ~ v i c oy aumenta la efectividad de las acciones coordinadas de a , la pirvico carboxilasa y de la fosfoenolpirvico carhoxiquinasa para la formacin de cido fosfoenolpi~vico (PEP). El incremento del ATPy ladisminucin del AMPfavorecen la gluconeognesis, quiuasa, y se activa la fructosaya queseinhibela fosfofructoquinasa-1 y la p i ~ v i c o 1,6-bisfosfatasa. Por otra parte, el glucagn favorece la activacin de la efector fosfof~ctofosfatasa-2 por ende, la conversin de la fructosa-2,6-hisfosfato, y, alostrico negativodelafosfofmctofosfatasa-1, en fructosa-6-(P),con lo queseactiva este proceso. A partir de la formacin de la fructosa-6-(P),las reacciones pueden de nuevo invertirse hasta la formacin de glucosa-6-(P). De manera que la gluconeognesis produce la formacin del &ter 6 fosfato de la glucosa. Como es ya conocido, la presencia en el hgado de la enzima glucosa 6 fosfatasa permite la escisin del enlace ster fosfato con liberacin de fosfato inorgnico y la formacin de glucosa, la cual pasa a la sangre y contribuye al mantenimiento de la glicemia. Recordemos que la gluconeognesises un proceso esencialmente heptico.

OH
Glucosa

En la f i g u r a 44.13 s e resuineii las reacciones de l a gluconeognesis.

Fructo\a-6- losfato

3 fnsfnpliceraldehdo

Fosfodihidroxiacetona

..

cido 1,3 bisfosfoglicrico

cido 3 fosfoglicrico

cido 2 fosfoglicrico
A
i

11
l

cido fosfoenolpirvico (PEP)

a
,
Acido mlico ~ t
I

cido lctico

cido pirvica

L alanina

Fig. 44.13. Regulacin de la gluellsis y la ghconeognesis. En la figura se presenta, de forma resumida, la secuencia de reacciones de las vas glueoltiea y de la glueaneognesis; en sta se indican los moduladores de las distintas enzimas reguladoras de la va.

Como puede observarseen la figura 44.13, los sitios de regulacin de la gluclisis y la gluconeognesis son esencialmente los mismos, coinciden con los pasos irreversibles y, por ende, estn catalizados por enzimas diferentes en cada uno de dichos procesos. Ello contribuye a la eficiencia del control, ya que como puede apreciarse existe una respuesta contraria ante el mismo estmulo. Asuu alto contenido energtico de la clula -alta coucentracin de ATP- inhibe la fosfofrnctoquinasa-1en tanto que estimula la disfosfofructofosfalasa-l. Pero, adems, la concentracin elevada de ATPinhibe a la pirvico quinasa y al complejo multienzimtico de la pirvico deshidrogenasa. Todo ello da lugar a que la va glucoltica resulte deprimida, mientras que se estimula la gluconeognesis. Algo similar ocurre cuando se acumula citratoo cofactores reducidos (NADH);sin embargo, un bajo nivclenergetico -alta concentracin de ADP- propiciana,por un efecto contrario, la activacin de la gluclisis y la inactivacin de la gluconeognesis. De maneraquem~prmevsresultan1ppuia<iospor2factores~Uame11talesqueoncterizan la situacin de la clula enun momentodado: el nivel energtico -nivelesde ADPy ATPy la disponibilidad de ciertos nietaholitos que constituyen sustratos oxidables en el proceso de respiracin celular -acetil-&A, citrato y NADH, principalmente- o son intermediariosdeamhasv h -gluiosa-6-(P),fnictosa-1,6-bisfosfatooestn relacionados con stas (alanina) y por ello resultan indicadores de las condiciones metahlicas celulares. En la figura 44.13 aparecen indicados los distintos efectores positivos y negativos que actan en los diferentes pasos de esta regulacin. La accin de ciertas hormonas influye tambin de manera importante en la regulacin de ambas vas. El glucagn activa la fosfofructofosfatasa-2-fructosa3,6bisfosfatofosfatasa- por lo cual se favorece la separacin del grupo fosfatode dicho metabolito y su reconversin a fructosa-6-(P). De esta manera disminuye la concentracin de un modulador positivo muy importante de la enzima fosfofructoquiuasa-1y de un modulador negativo de la bisfosfofructofosfatasa-1, por ello la y intensidad de la va glucoltica decrece y se activa la gluconeognesis.Adems dicha hormona favorece el paso de la enzima pirvico quinasa, as como de la pirvico deshidrogenasa a sus formas fosfatadas (inactivas), lo cual constituye un factor fundamental en el efecto del glucagn sobre la va glucoltica en el hgado. La insulina provoca un efecto contrario al glucagn. La insulina, en el tejido adiposo y en el msculo, es necesaria para que se incorpore la glucosa a dichos tejidos. En el hgado esta hormona se requiere para la induccin de la enzima glucoquinasa. El papel de la insulina en la regulacin de los niveles de la fructosaZ,6-bisfosfatono est claro, aunquesesabe que se opone a la accin del glucagn. Se supone que la unin de la insulina a su receptor pueda promover la formacin de alguna sustancia que funcione como un segundomensajeroy que pueda influir en la induccin de la pirvico quinasa, en la actividad de la AMPc fosfodiesterasa y en la protena quinasa dependiente de AMPc. Algo ms se ha avanzado en relacin con su accin activadora de ciertas fosfoprotenas fosfatasas, como fuera estudiado en el captulo 43.

Interaccin del metabolismo de la glucosa entre tejidos diferentes

La va glucoltica y de la gluconeognesistienen algunas caractersticas que van a diferir de un tejido a otro. Un aspecto importante de estas diferencias que se pueden encontrar entre distintos tejidos viene dado por el tipo isoeniimtico de hexoquinasa presente en cada uno. Como es sabido la forma isoenzimtica de hexoquinasa, encontrada en la mayora de los tejidos, tiene una baja Km para la glucosa -alrededor de0,l mM-,valor mucho ms bajo que la concentracin sangunea de este metaholito en sangre -del orden de 5 n1M- y, adems, dicha enzima resulta fuertementeinhibida por el producto de su reaccin, ei decir, la glucosa-6-(P);ello es importante en la mayora de los tejidos, ya que el papel inhibidor del producto de la reaccin previene la formacin en exceso de la forma fosforiladadel monosacrido.

762

En el hgado, s n embargo,como se sabe,est presente, de una manera predominante, i jaformaisoenzllnticaquedifieremayormenteentretoda7 por sus propiedadescinticas, la glucoquinasa. Como fuera ya tratado en el captulo 42, esta enzima slo fosforila a la glucosa, tiene una Km alta para dicho monosacrido (10 mM) y no resulta inhibida por la glucosa-6-(P). Todo ello explica la capacidad del hgado para utilizar la glucosa cuando &a se encuentra a unos niveles elevados en la sangre, actuando como un "tampn" de glucosa, a la cual fosforila en grandes cantidades,con lo que pennite su almacenamiento en forma de glucgeno. Asel hgado slo utiliza la glucosa cuando sta se encuentra en concentracioneselevadasen la sangrr.Por otra parte, el bajo valor de Km de la hexoquinasa predominante en el cerebro favorece que este tejido sea capaz de incorporar y utilizar dicho metabolito,an cuando ste se encuentreen muy bajas concentracionessanguneas. En el hgado debe tenerse en cuenta la reaccin opuesta a la antes discutida, es decir, la catalizada por la enzima glucosa-6-fosfatasi,la cual tiene tambin una Km relativamente baja Es importante recordar que la glucoquinasaconstituyeuna enzima inducida por la hormona insulina. El sujeto diabtico tendr, por tanto, afectada la funcin heptica del metabolismo de la glucosa. Enelmsculoenejercicioestalatieneespeciai relevancia y pde,engranmedida,de f o m anaembia, por el dficit relativo de oxgeno del msculo en tal condicin. Por eUo se fom,como producto nal,cidoIctico; este metabolito no tienedestino ulterior en dicho tejido,ycomoescapazdeahavmlamemhma,alaye hgado.En& IomotejidopuedewnverorSeen~dopirvi~~poracSndelae~Icticodshi~na~a y porgluconeognesiswnve~englucosa,lacualanivezpod~denuevopasaralasangrr y U~almsnilo,wnloquesecem'auncido.A &ciclo,mostradodefomreSumidaen la figura 44.14,se le wnocemn el nombredecido de Con.

Fig. 44.14. Cielo de Cori. El lctico, formado por la glueogenliaia y gluc6lisic muscular, es transportado por la sangre hasta el hgado y en este tejido puede transformarse en glucosa, la cual nucvamcnte puede llegar al tejido muscular conformando asi el ciclo de Cori.

En la figura 44.15 puede apreciarse un ciclo similar al anterior con la diferencia de que el metabolito que se forma en el msculo es predominantemente el aminocido alanina, el ciial se produce en cantidades apreciables en este tejido durante el ayuno. A este ciclo se le conoce como ciclo de Cahill.

(Glucii%
(;~LIc~I~:I

cido pinivico

ungiiinc;i

~;l~lc,mcl,.

d ~luclisis&
,

.6ilc\i, .

Ai,iiiiii;~ %ng~~~i?;t

. Acido pirvico
.~ ~~

Fig. 44.15. Cirlu de Cahill. Las protcirias en PI tejido niiisciilar, en dcterininadas cendirioiirs, sc degradan a siis aniinocidos constituycntcs; stos puedeii. por transaminaciti con el cido pirvico proveniente de la $uelisis, formar alanina, la eiial resulta trawportadaporlasangre hasta el higado. En el higado, la nlanina puede convertirse cn glucosa por el proceso de glueoneognesis, la cual puede alcanzar el tejido muscular y eonformar asi el ciclo de Cahill.

Cielo de las pentosas

Conocida tamhin como va de oxidacin directa de la glucosa y va del fosfogluconato, reviste especial importancia en algunos tejidos, como los eritrocitos, el tejido adiposo, el cristalino y otros. La energa que se libera en el proceso no se conserva en forma de ATP,sino de equivalentes de reduccin en forma de NADPH. Esta vaconsta de2etapas: la oxidativa -deglucosa-6-(P) a rihulosa-S-(Pj-y la no oxidativa -de rihulosa-5-(Pja fructosa-6-(P)nuk gliceraldehdo-3-(P). La fructosa-6-(P)se puede convertir en glucosa-6-(P),y de esta manera se conforma un ciclo. La segunda etapase caracteriza por una serie de reacciones de interconversin de monosacridos. En la primera etapa las reacciones proceden de lasiguientemanera: la glucosa-6-(P) es convertida en 6 fosfo delta gluconolactona por accin de la enzima glucosa-6-(P) deshidrogenasa. En la reaccin, una niolcula de NADP se convierte en NADPH.H+. En el paso siguiente, esta lactona experimenta una hidrlisis por la accin cataltica de una lactonasa y se produce cido 6 fosfoglucnico. Una descarhoxilacin con la participacin de la enzima 6 fosfogluconato deshidrogenasa rinde rihulosa 5-(P) y se forma otra molcula de NADPH.H+(Fig. 44.16).

-C-o H-C-OH HO-C-H H-C-OH

1 I

H-C-OH
1

H O - CI- H H-C-OH

H-C-OH
l

HO-C-H

H-C-OH I H-C

l O

C.

. L .
H-C-OH
cido 6- foifogliici>nico

H-C- OH l HO-y-H

6 fosfogluconolactona

CH,OH
I
Fig. 34.16. Reacciones de la etapa oxidativa del ciclo de las penlasas. a) La gliicosa-(>-(t>) se convierte en 6 fosfogluconalactona. b ) La 6 fosfogluconolaetona se Iranshrma en rido 6 fasfoglucnirn. r ) Se liirniii ribulesa-Sosfato a partir del cido 6 fosfopiuci>nieu. esta En etapa se forma11 2 NADPH.

/,
H-c - OH
H-C
I

H-C-OH
l

Hl L O H
CH,-O-@

C=O

- OH

8
cido 6 fosfoglucriico
C)

Ribulosr1-5-i~sf,itc

En la segunda etapa el proceso es como sigue: la fosfopentosa isomerasa interconvierte las 2 pentosas: 5 fosforibulosa y ribosa 5 fosfato.

CHzOH

c=o
CHOH
l

.
o Il

CHOH l

C-H

CHOH

5 fosforibulosa

Ribos 5 fosfato

Las reacciones subsiguientes del ciclo se caracterizan por la interconversin de monosacridos de nmero de tomos de carbono distintos. En esta etapa son fundamentales 2 tipos de enzimas que catalizan la transferencia de unidades bi y tricarbonadas: la transcetolasa y la transaldolasa; la primera transfiere fragmentos bicarbonados y la segunda tricarbonados tal como se muestra en la figura 44.17.

Fig. 44.17. Unidades carhonodas transferi-

Unidad bicarbonada transferida por la transcetolasa

Unidad tricarbonada transferida por la uansaldolasa

das por la transaldolasa y la transcetolasa.En la figura se muestran las unidades hicarhonadas y tricarbonadas transferidas por la transcetolasa y la transaldolasa, respectivamente.

En la figura 44.18 se presentan las reacciones de la segunda etapa del ciclo de las pentosas. Como puede apreciarse, en esta etapa se produce la interconversin d e monosacridos con distinto n m e r o d e tomos d e carbono; estas transformaciones se basan en las acciones de las euzimas transaldolasas y transcetolasas antes mencionadas. La figura 44.19 resume el ciclo de las pentosas, y muestra su vnculo con la va glucoltica y con otros procesos importantes. La reaccin catalizada por la enzima glucosa-6-(P) deshidrogenasa es la principal reguladora de la va y depende principalmente de los niveles de NADP'. Adems, el NADPH compite con el N A D P + ~ la unin a la enzima, ascomo el O~ ATP lo hace con la glucosa-64'). Todo ello permite que la velocidad del ciclo de las pentosas est acoplada a la utilizacin del NADPH en los diferentes procesos en los cuales ste participa. La importancia de este ciclo descansa, principalmente, en la formacin de equivalentes de reduccin en forma de NADPH, los que sern utilizados en la sntesis reductora de diversos tipos de Ipidos, y en la obtencin de ribosa-5-(P), sustancia precursora en la sntesis de nucletidos y, por ende, de los cidos nucleicos y ciertos cofactores. Resulta tambin de importancia la iuterconversiu entre monosacridos de distinto nmero d e tomos de carbono.

1 OH-C-H

H-C-OH
1

+
o- @
Gliceraidehdo -3-fosfato

CH-

Xilulosa-5-fosfam Sedoheptulosa -7-fosfato

H-C-OH H-C-OH H-C-OH

CH,l I l

+
o- @

Sedohepiulosa-7-fosfato

b)

HO-C-H H-C-OH CH,- O - @?

Xilulosa-5-fosfato
C)

Fig. 44.18. Reacciones de la dapa no oxidativa del cielo de las pentosas. a) Reaccin de la transcetalasa que cataliza la transferencia de unidades de 2 toinos de carbono. b ) Reaccin catalizada por la transaldolasa, transferencia de una unidad triearbonada. r) La transceialasa catalira la transferencia de una unidad biearbonada y a partir dc monosacridos de 5C y 4C se forman olros de 3C Y 6C.

Alteraciones del metabolismo de la glucosa

Hay evidencias de diversasenfermedadespor alteraciones en el metahoiiimo de la glucosa. A manera de ejemplos citaremos algunas y se darn mayores elementosde una de ellas: la galactosemia. Existendiversasenfemedadespor dficit de enzimas de la va glucoitica, del ciclo de las pentosas, as como de enzimas necesarias para la incorporacin de ciertos monosacridos a la va glucoltica. La deficiencia de hexoquinasa trae aparejada la disminucin en los niveles de 2,3 DPG,el cual es unefectornegativodela hemoglobina, y al existir concentraciones bajas de dicho metabolito, la hemoglobina manifiesta una alta anidad por el oxgeno. Unefecto contrariosecomata en la enfermedadcausadapor dficitde pinvico quinasa, dondela hemoglobina p m n t a baja afinidad para el oxgeno.

766

Rkrpiialoi

--

6 fosfogluconolacton

6 fosfoglucnico

\ .

Sntesis de nucletidos Sedoheptulosa-7-fosfato

Entrosa-4-fosfato

Fie. 44.19. Resumen del ciclo de las oentosas. En la figura se muestra, de forma resumida. la
de la ribosad-fosfato y de los NADPH, respectivamente.

La deficiencia de glucosa-6-(P) deshidrogenasa-dficit de G6PD-, enfermedad con una relativa alta incidencia en nuestro pas, es tratada en el capinlo 63. Entre las enfermedades que afectan la incorporacin de otras hexosas a la va glucoltica se encuentran la intolerancia a la fructosa y la galactosemia. En el primer caso, la enzima afectada es la aldolasa especfica de la fmctosa-l-(P),y los sujetos que la padecen no son capaces de utilizar la fructosa. La enfermedad se mejora por la eliminacin de alimentos que contengan dicho monosacrido. La galactosemia clsica es causada por el dficit de la enzima galactosa-l-(P) nridil transferasa (F'ig. 44.20). Entre las manifestaciones clnicas de esta enfermedad se encuentranlas cataratas, que pueden dar lugar a ceguera, tambin se observa retraso mental, hepatomegalia y snbctero. La catarata parece producirse por la formacin excesiva de galactitol, el cual se forma segn la reaccin que se muestra en la figura 44.20. El acmulo en el hgado degalactosa-l-(P)inhibe competitivamentea la enzima fosfoglucomutasa, lo que deprime severamente la glucogenlisis, y se acumula glucgeno, esto explica la hepatomegalia y, en general, el dao heptico. La galactosa-l-(P) es daina para el sistema nervioso central. Estos pacientes mejoran su cuadrosise les elimina dela dietalos alimentos quecontengan galactosa, la cual, obviamente, no son capaces de utilizar. El azcar de la leche (la lactosa) est compuesta por glucosa y galactosa, de ah que a estos nios debe suspendrsele la leche materna y proceder a instituirle una alimentacinsobre la base de preparados

!ibres de galactosa. El tratamiento correcto en el niomento oportuno protege a estos pacientes de la catarata y dc los daos mentales marcados.

Galactosa-1- @ uridil transferasa

l/

h
Aldolasa reductasa

HO

D galactosa

I1/NADp""+
N ADP*

CH,OH H-C-OH
I I

HO-C-H
Fig. 44.20. Formacin de galaciitol. El dficit de la enzima galactara-1-(P) uridil transferara condiciona el acuiiiulo de palactasa g la formacin de su pradueta de reduccin, el galaitilol.

HO-C-H H-C-OH CH,OH

Galactitol
I
I

Resumen
En condiciones normales, los glados mastituyen la prindpal hente de energa en los animales. En la mayorfa de las c&~las,la glnc6UsLs es la va fundamental de degradacin de la glucosa, annque en algunos tejidos resulta importante tambin el cielo de las pentosas. Por medio de la gluc6UsLs la glucosa se dqmda hasta CO, ms y0 en condiciones aembias y rinde 32ATP,y en mndicioues anaembias el producto Baal en los animalea ea dcido Icm, y el rendimiento energtim reanita mucho menor: 2 ATP. LaF trabajos sobre la fermentacinRieron la base del estudio acerca del metabomo y la enzimologa, y la via glnmitica result6la mimera ruta metablies en la cuai quedaran eselareddas las &pas fundamental& La gluc6llsis p d e en 2 etapas: desde glucosa a 2 triasss fdatadas y desde 3 fosfogiieeraldehdo basta dcido pirvico. En condidones aerobias, el dado pidvim se mnvierte en d - C O A , el cuai se incorpora a los procesos de la respirad6n celuiar y rinde una gran cantidad de energls, en tanto que en condidonea anaemblas el plnvim se transiorma en dddo icm mn un rendimiento energtim mucho menor. El NADA formado en la etsna oxidatiw debed ser reoiddado para que la aembias deber ser reoxidado en la cadena transportadora de eleetrows de la mitocmndria. La membrana interna de la mltofondria resulta impermeable al NADE Los equiwlentesde reduedn pueden penetrar al W o r de l mibamkh a

a trava de distintos sistemas transportadores. Son ejemplos de las 'lanzaderas" del NADH, la del fosfato de dihidmfiacetona-geerofosfatoy la del dcido mlicogcido aspsrtico; la Ima es la ms importante en los mamferos. La fructosa, la manosa y la galactosa experimentantransformaciones que las convierten en alguno de los metabolitos intermediarios de la mta glucotiea y pueden, por tanto, continuar en esta va su degradacin. La glnconeog6nesis es el proceso mediante el cual se forma glucosa a partir de compuestos no gluadicas. P r d e por L inversin de la mayora de las reacciones a de la gluc6lisis. En los pasos irreversibles, este proceso ocurre mediante reacciones catalizadas por enzimas diferentes que constituyen rodeos metablieos. Los sitios de regulacin de la gluclisis y la gluconeog6nesi.sson las reacciones irreversibles y constituyen rodeos metablim, por ello coinciden con los pasos catalizados por enzimas diferentes. EUo contribuye a la eficiencia del proceso, ya que se produce una respuesta contraria ante un mismo estnulo. Ambos procesos d t a n regulados por el nivel energ6tico de la dida y por la concentraci6n de ciertos metabolitos indicadores de la situacin metablica ceiular. En la regulaci6n intervienen mecanismos aiostricos y de modulacin mvaiente dependiente de hormonas. El giucagn -en el hfgado- deprime la gluclisis y estimula la glumneogueais, en tanto que la insuna ejerce un efeeto contrado. LaseoPmsspriaeipaiesdelareguladnsmIshexo~uinasayptu~df~ lafosedhrdoquinass-1y la ~ o s f ~ c t o f o s f a t a s a -la piruwto qldlwa, la piruvato 1, carboxasa y la PEP carbdquinasa Altos niveles de ATP inhiben la gluelisis y a d i w o la giuconeogneais, en tanto que aitaa concentraciones de AMP provocan on resultado opoesto por actuar estos wmpaestos como electorespositivos o negativos de enamaS marcapaso de ambas vas. Eristen espedfiddade8 en diferentestejidos en reiadn con el metabolismo de la giueosa. La existencia de la giucoquinssa permite ai hgado almacenar g l u ~ esta se enmentra elevada en sangre.La aita eflnien forma de glaogeno -do dad por la gloeasa de la hexcqoinasa cerebral permite que este tejido incorpore a la giueasa y la fdorlle, aun cuando esta se halle en muy baJas concentradones sanguneas. E n h el mscuio en ejerddo y el bgado se establece una reladn que conforma el delo de Cork el iaciato formado en el mseolo pasa ai hgado a trava de la sangre y en ste se convierte en giueoss, la cual de nuevo puede alcanzar el tejido muscular. El cielo de las pentosas constituye una v a de oBdaci6n diresiade la glucosa Consta de 2 etapas. En la etapa oxidativa se forma ribulosad-p) y 2 NADPH, los que son nolizados en la sntesis reductora de Llpidos. En la segunda etapa, la ribulosa-5-p) se convierte en ribosad-p), la cual es un precursor en la sntesis de nueletidos, dcidos nueleicos y ciertos cofactores; adem4s en esta etapa se producen una serie de reacciones que permiten la interconversin de monosauidos de diferente nmero de dtomos de carbono. El dficit de aignnas e m b m de las diferentes vas metablicas de loa ghcidm, origina disontas enfermedades. Una de ellas,la @a&wn@ es pmvocada por dficit en la enzima galaetosa 1-p) uriuridil transferasa, lo que impide la utizadn de dicho monosseSrida El cuadro rliim presenta einnsiS,cataratas y trastornos mentales, debido ai acmulo de galaetosa-1-0') y galactitoi. La eliminadn de la galaetosa de la dieta mejora e inrhiso evita muchos de los &tomas de la enfermedad.

Ejercidos
1. Mencione las enzimas reguladoras de las vas glucolticas y de la gluconeognesis, y especifique los efectores positivos y negativos en cada caso. 2. Compare el rendimiento energtico de la glucosa en condiciones aerobias y anaerubii

3.Fundamenteporqusisefwman23ATPporeadaNADHy l,SporeadaFADH,,el
rendimiento energtico de una molcula de glucosa, en condiciones aerobias si los NADH se incorporan a la mitocondria mediante la "lanzadera del glicemfosfato", es de 30 ATP. 4. Establezca una comparacin en relacin con la importanciadelas distintasvas del metabolismo de los glcidos estudiadas hasta ahora -glucognesis, glucogenlisis, gluclisis, gluconeognesis y ciclo de las pentosas- entre diferentes tejidos. 5. Haga un esquema donde se ponga de manifiestolas interrelacionesque se establecen entre la gluclisis y el ciclo de las pentosas. 6. iQu monosacrido-glucosa, galactosa, manosa o fructosa- tiene mayor rendimiento energticoal degradarse?Fundamente su respuesta. 7. En condiciones de ayuno se produce la secrecin de glucagn por el pncreas. Cules efectos se producen en la va glucoltica en el hgado en tales condiciones? 8. En condiciones de alto nivel energtico y elevada concentracin de citrato se favorece la glnconeogncsis. Explique este efecto detallando la participacin de cada enzima reyladora de la va. 9. Explique el papel de la fructosa 2,6 biifosfatoen la gluclisis. Haga un esquemade la formacin y degradacin de dicho metabolito. 10. Analice las especificidades hsticas en relacin con la va glucoltica entre el hgado, cerebro y msculo esqueltico. 11. Si se aade glucosa marcada isotpiedmente con 14Cen el tomo de carbono nmero 6 a un preparado que contiene todas las enzimas y cofactores de la etapa oxidativa del ciclo de las pentosas, jen cul o cules compuestosdeber aparecer el marcaje radiactivo? Fundamentesu respuesta mediante un esquema

La energa solar es, en ltimainstancia,directa o in<rectamente, fuente primaria la de energa de todos los seres vivos. Los organismos fotosintticos captan la energa luminosa y la emplean en la sntesis de distintos compuestos orgnicos, principalmente glcidos, y de esta manera transforman la energa solar en qumica. Los organismos hetertrofos no presentan fotosntesis y por ello requieren degradar molculas complejas que constituyen su fuente de energa. Dichas molculas le son provedas por las plantas y otros organismos fotosintticos. De hecho se dice que cada molcula de oxgeno respirada por el ser humano y cada tomo de carbono existenteen su organismo,pas, alguna vez,por un cloroplasto. Los entes biolgicos donde ocurre la fotosntesis son muy variados, pueden ser procariontes, como las cianobacterias y las bacterias sulfurosas verdes o prpuras; eucariontes inferiores, como las algas y las euglenas; o superiores, como las plantas. En este captulo estudiaremos el proceso fotosinttico precisando sus etapas, las reacciones y localizacin de stas, as como su significacin biolgica.

Concepto e importancia de la fotosntesis

La fotosntesis es el proceso mediante el cual la energa solar (fotones),captada por molculas de clorofila, se transforma en energa qumica -molculas de distintos tipos de glcidos- y se libera O, al medio. Este proceso tiene una enorme relevancia biolgica, ya que los compuestos glucdicos as sintetizados constituyen la fuente carbonada y energtica fundamental de los organismos hetertrofos aerohios, los cuales los degradan hasta CO, y HiO en la respiracin celular, lo que va acompaado de la Liberacin de energa. na parte desta se conserva en forma de ATP quees utilizado para cubrir las demandas energticas del individuo. El CO, y el H,O formados se utilizan de nuevo por los organismos fotosintticos; se cierra asel ciclo del carbono y el oxgeno en la naturaleza (Fig. 45.1). Las plantas y otros organismos fotosintticos convierten, cada ao, aproximadamente 10" toneladas de carbono provenientes del CO, en compuestos orgnicos. La importancia del cuidado y mantenimiento de las fuentes fotosintticases fundamental para la sobrevivencia humana y en general para preservar la vida en la Tierra.

i
Glucosa
Fig. 45.1. Ciclo del carbono y el oxgeno en la naturaleza.

i
O?

Clorofila y otros pigmentos fotosintticos

Exceptuando ciertas bacterias, el resto de los organismos fotosintticosconocidos deben su capacidad fotosinttica a las clorofilas. Todas las clulas fotosintticas contienen uno o ms pigmentos conocidos como clorofilas. La clorofila es el principal pigmento absorbente de la luz en la mayora de las plantas verdes, lo cual ha quedado perfectamente demostrado por mediciones del espectro de accin fotoqumica en la fotosntesis. No todas las clulas fotosintticas son verdes, pueden ser, adems, pardas, rojas o prpuras, segn la especie. La variedad de colores se debe a la presencia de otros pigmentns conocidos como pigmentos accesorios, entre los qnese encuentran los carotenoides y las ficobilinas (Fig. 45.2). Las plantas superiores poseen 2 tipos de clorofila, a y b. Las clorofilas son complejos que presentan un ncleoparecidoa las porfirinas del hemo y los citocromos

C H CH, = CH

Ficobilina
l

Fig. 45.2. Pignientos iiceesorios. En la fi. guraserepresenta laestructilra del carotcno Y dc la fieohiliiia.

coordinados con un tomo de Mg" y unidos a una cadena hidrfoha de fitol que orienta a la clorofila dentro de la membrana tilacoide. En las clorofilas el anillo IV es reducido y existe un anillo V que no es pirrlico, sino de ciclopentanona. R es un radical -CH, en la clorofila a y un grupo -CHO en la b; en la bacteriofila el anillo 11 tambin se halla reducido. Este ncleo derivado porfirnico de 5 anillos caractersticos delas clorofilas se le llama feoporfirina. Las clorofilas a y b contienen el alcohol fitol; las bacterioclorofilas a y b tiene fitol o geranilgeraniol en dependencia de la especie hacteriana. Los organismos fotosintticos contienen cantidades pequeas de feofitinaso bacteriofitinas, molculas similares a las clorofilas correspondientes, pero en las que 2 tomos de hidrgeno mmplazan al M$+. Las fmfitinas y las hacteriofitinasdesempeanun papel importante como transportadores de hidrgenos en la fotosntesis (Fig. 45.3.)

$H,
CH,COOR Feotitina a

Fig. 45.3. Estructuras de las clorofilasy la feotitina a

Las clulas fotosiutticas productoras de oxgeno, como las plantas superiores, contienen 2 tipos declorofilas de las cualesunasiempreesla a y la otra vara segn el organismo. As, el otro tipo de clorofilaen las plantas verdes es b; en las algas pardas, diatomeas y dinoflagelados es c. Las clulas procariontes no contienen clorofila a, sino I>acterioclorofila b. Lasclorofas absorben la luz visible, y la energa absorbida a y puede desl~~calizarsedifundirse a travs de toda la estructura. La reduccin del anillo IV en las clorofilasa 6 b provocaun efecto iiiiporiante en el espectrode ahsorcin de 1;i niolciila. I,u clorofila a presenta una batida de al>sorcininterna a los 676 nni y la 11, a lo!; 6-12 x n : las h;ictcrioclwnfilas a . h en 770 iirii, por tanto estas inolculas ! ahsorlien la lnz roja! la infmrroja cercana.

Membrana iiiteriia
I'ocnlr: Stryw L.:
cih.

Meinbiona externa

liiochmistr?.<:iiarl:i c d Frceiiiiiii

\\',I-l.

('w. lW5.

Espacio iilacoideo

Los pignientos fotociiitticos seencuentran en las nienibranas de los tilacoides. dondc tambin se localiza la niaqninaria eiizimtica de las reacciones Iiuiiinosas, as conlo los transportadoresde electrones y la A'Psintetasa. Las enziinas de las reacciones en oscura? se hallancnelestroma. I,osclori>pla~tosexistcn cantidad? tamao variable, en dependenciadel tipo de organisino, so11mviles y se dividen; como las mitocondnas, contienen ADN y ribosonias, y sintetizan parte de sus protenas. En los tilacoides se encuentran los fotosistemas y el centro de reaccin dnnde ocurre la conversin de la energa luminosa en qumica. En cada uno de estos sistemas se hallan los pignientos fotosinttticos -clorofilas y carotenos- asociados cou protenas y con transportadores de electrones. Amhos sistemas actiian acoplados y transfieren electrones del agua al NAUI". Las c.liilas prorarionles fotosintticascarecen de cloroplastos,? luscroinatforus de 1;is t'eaccionr': fotosintticas se localizan en la inembrana celular, la qne presenta iiiragiuaciones sunilares a las crestas de la inenibrana interna de las rnitocondriales.

Unidad fotosinttica. Centros de reacci6n

Las plantas presentan 2 fotosistemas asociados distintos, 1y 11. los cuales poseen los centros de reaccin y los donadores y aceptores de electrones. El fotosistema 1, que absorbe la luz a700 nm (P,,,,),sistema de onda larga, asociado con la clorofila a y que no es responsable del desprendimiento de O,; y el 11, que absorbe a 680 nm (P,,,), de onda corta relacionado con el desprendimiento de O,. La letra Pderiva de pigmento. El fotosistema asociado con la bacterioclorofila absorbe a 870 nm, por ello se le conoce como P,,,. Todas las clulas fotosintticas que desprenden O, poseen ambos sistemas, en tanto que las bacterias fotosintticas que no desprenden oxgeno tienen un nico fotosistema similar al 1de las plantas (Fig. 45.5). Fotosistema 1

NADP'

\
Fig. 45.5. Fotosistemas 1 y 11. En la figura se muestra esquemticamente la eonexin en serie de los 2 fatosistema~ de las plantas verdes, el 1 y el 11. Pucdc ronstatane la presencia de los transportadores de electrones. El P,, no participa en la liberacin de O1como s B hace el P. , ,

NADPH

Luz

Cuando la luz interacta con la clorofila, sta absorbe un fotn y se excita un electrn que pasa de un orbital de menor nivel energtico a otro de mayor nivel energtico. El electrnse muevede un orbital ocupado a uno no ocupado y de mayor energa; para que ello suceda la diferencia de energa entre ambosorbitales debe ser i- a l a laenergiadelfotn (hv) y, adems, los 2 orbitales deben tener distinta disposicin a espacial y estar adecuadamente orientados con respecto al campo elctrico oscilante de la luz. Una molcula excitada puede alcanzar de nuevo su estado inicial por: emitir un fotn -fenmeno de fluorescencia-, transferir la energa a otra molcula vecina -transferencia de energa de resonancia- o por transferir un electrn a una molcula vecina aceptara. La absorcin de un fotn incrementa la energa de una molcula en un electrn volt, E (E = hv)', lo que provoca que el potencial redox de una molcula excitada se torne ms negativo comparado con su potencial redox cuando no est excitada. La clorofila a no excitada, por ejemplo, tiene iin potencial deoxidacin de + 0 3 V y de - 1,2 V ciiando estexcitada, por loquese ha convertido en un agentecon mayor poder reductor. Para tener una idea de la intensidad de este cambio, es necesario recordar que el par NADVNADH posee un potencial redox de 032 V. La molcnlaexcitadapuede transferir un electrn a otra molcula aceptoracontigua. La clorofila es as oxidada y reduce a otra molcula. La fotooxidacin de P,,,, P,,", P,,, P genera radicales catinicos - P +, ,,,,. P,d,,, en los que la carga positiva y los electronesno pareados se deslocalizan por entre los sistemas de anillos conjugadosde la molcula de clorofila. Se ha comprobado que en el radical P,,,', los electrones estn deslocalizados en 2 molculas de bacterioclorofila a, que forman un par que interacta estrechaniente. Se supone qiie los P,,,,.' y los P,#,' tambin formen dnieros.

La energa del fot6n se expresa frecuentemente en clcctrones volt ( eV ): 1 eV es igual a la energa requerida para mover un de,ctrn contra una diferencia de potencial de 1 V y es igual a 23 060 kcal.moli (96 480 k ~ . m o 1. l

,,,

Centm de rescei6n. La mayora de las molculas de clorofila de los cloroplastos o tambin de las bacterioclorofilas no son fotoqnmicamente activas,slo lo son las que se encuentran asociadas con nrotenas formando Ins complejos llamados centros ~.. d r reaccibn. Estacentros puswn, adi-msdela clorofila reacti\a, un aceptor inicialde cuales laran wg,' si' > 'un rlt~tronrs,uc~pt~~res wundarim?. donodnresdeelectn~iiei,los trate de bacterias o fotosistemas 1 U de los cloroplastos. HarnutiMichel, J o h a n n k n h o f e r y o t m lograron obtener,enfomacristalina, los centros de reaccin del Rhodonseudomonac viridi~ el ao 1984, y de hecho en ,~ coitituyi>Ia primera estructura crisulina dealki re,wliicibn i ~ b t r n i d ~una protena de de integr~l nienilirana. El w i t n >dc reaccin de la H. biridiscontiene una subunidad citocrmica con 4 hemos del tipo c. El centro de reaccin de la bacteria prpura contiene 3 polipptidos,4 molculas de bacterioclorofilas,2 bacteriofwfitinas, 2 quinonas y un tomodehierro no hemnico. La bacterioclorofila v la bacteriofeofitina. el tnmn de hierro y las quinonas estn

~~

~~

~~

~~~

~~

citoplasmtico de la membrana, aunque posee tambin un segmento en hlice a transmembranal. Dos de las 4 bacterioclorofilas estn empaquetadas juntas, y se ha podido establecer que c este dimero precisamente, el que libera los electrones cuando s el centro de reaccin resulta excitado por la luz. Aunque la estructura de los centros de reaccin delas plantas no se conoce an en todos sus detalles, el centro de reaccin del fotosistema IIse asemejaaldela bacteria prpura en varios aspectos. Los 2 principales polipptidos son semejantes, contienen tambin un hierro no hem'nico, 2 molculas de plastoquinona -parecida a la ubiquinona de la cadena transportadora de electrones de la mitocondria-, una o ms molculas de feofitina a y varias de clorofila a, ademsdelas 2 que estn probablemente asociadas con el P,,,. El centro del fotosistema 1 es mayor y ms complejo, tiene 2 polipptidos principales de gran tamao con 60 molciilas de clorofila a, 2 quinonas y un centro hierro-azufre, y al menos o-as 7 sobunidades polipeptidicas menores; en l se encuentra tambin un dmero de clorofila a asociado con el P.. . 71111 Es necesario aclarar que las clorofilasquenoformanpartedel centro de reaccin y no son fotosintticamente activas cumplen, sin embargo, importantes funciones la como "antenas moleculares"; as, ellas captan y tra~niiten energa por resonancia de moltci~la amolciila hasta que es atrapada por el centro de reaccin (Fig. 45.6).
1

L. .

, /

, '

Molculas de clorofila que actan como "antenas nioleculares"

Fig. 45.6. Centro de rraceWn. Las molciilas dc clot'ofila fotosintticumeiite Se netiv~s ~ncueiitraiien CI centro de rcaceWn asociadas con protcm. Estos irnlros poseen, adems, uri Sgceptor inicial de electrones, aceptores seeuiidarios y donadores dc electrones. Las elorofilas que no son fotosintticamcnte activas funcionan como antenas moleeulrrcs captando y einitiendo la energa par rcsunanria hacia el centra de reaccin.

Molculas de caroteno

Centro de reaccin

o o

776

%s *i

kBiLbfirvi

Los complejos de clorofila de los centros de reaccin que resultan oxidados han de ser reducidos nuevamente antes de que puedan volver a reaccionar; de igual modo, los aceptores de electronesque los reciben de la clomfa y, por ende, resultan reducidos, debern ser reoxidados. Todo parece indicar que ambos fotosistemas se encuentran conectados en serie (Fig. 45.7); la excitacin del P,,, del fotosistema 1genera un reductor fuerte que transfiere electrones al NADP' por medio de otros transportadores intermediarios. La excitacin del P,,, (fotosistema 11) genera un oxidante fuerte que oxida el agua hasta O, La forma reducida del sistema IItransere electronesa una cadenade transportadores que interconecta los 2 fotosistemas.

Reductor fuerte

Oxidante dbil

Reductor dbil

Oxidante fuerte

Fig. 45.7. Acoplamiento de los fotosistcmas 1 y 11. Conexin en serie de los fotosistemas 1 y 11 dc las plantas. La excitacin de P,,, del falosistema 1 genera un reductor fuerte qiie reduce el NADP' y forma N A D P H W , en tanto que la excitacin del P, del fotosistema ,, 11 forma un axidantefuerte,el cual oxida el agua hasta Or La forma reducida del fotosistema 11 transfiere electrones a una cadena transportadora que interconecta h>s 2 futosistcmas.

La cadena transportadora de electrones qiie interconecta los 2 sistemas, incluye varios tipos de quiiioiias -la CoQ y plastoquinonas Q, y Q,;, una protena que contiene y cobre, la plastocianina (P,.),flavoproteiias -FP, ferrecloxina-NADPoxidorreductasa-. citocroiiios. la ffrrrdouina (FD). protenas ferni-si!lfurosas (Fe-S)y manganeso; en el fotosistema II se han encontrado complejsde 4 tomos Mn unidos al centro de reaccin y relacionados con la liberacin del 0 , como se ver ms adelante. Las estructuras de algunos de estos transportadores se muestran en la figura 45.8. El reductor formado en el fotosistenia 11aporta electrones a lacadena transportadora que conecta los 2 fotosistemas.Este esquema, conocido como esquenia Z, es diferentedel transporte electrnico bacterial, cclico (Fig. 45.91, ya que tste es lineal (Fig. 45.10). El aceptar de un electrn del P,, es una molcula de feofitina a. Los segundos y terceros son plastoquinonas; cuando la segunda quinona est completamente reducida capta protones del lado del estroiiia y los traspasa hacia el limen tilacoide. La cadena de transportadores entre los 2 fotosistemas incluye al complejo citocromo b,f y a la plastocianina, una protena que contiene cobre. El citocromo b,f, como el con~plejo bc, mitocondrial, contiene citocromos de 2 tipos de hemos, uno tipo b (citocromo b,) y uno tipo e (citocromo f), y adems una protena hierro-azufre. Los electrones se inneven de la plastoquinona reducida al citocromo f, la plastoquinona probablemente forma un ciclo Q, similar al de la coenzima Q en las mitocondrias. El complejo b,f dona los electrones a la plastocianina, la cual a su vez los transfiere a P,,,,,,',en el centro de reaccin 1. La cadena transportadora se contina despus de la clorofila a, con una quinona (filoqninona),luego una protena Fe-S, seguidamente la ferredoxina, y por ltimo una flavoprotena -la ferredoxina NADP oxidorreductasa- que convierte el NADP oxidado en reducido. El fotosistema I1,el coniplejo citocromo I>,fy el fotosistema Ifuncionan en serie y mueven electrones desde el H,O hasta el NADP+,a la vez que crean un gradiente de protones (Ht) a travs de la membrana tilacoide; este gradiente dirige la sntesis de ATP al activar a la ATPsintetasa. El gradiente de pmtones que se forma en los clomplastos,

o
Plastoquinoria

'

Met 92

Ion cobre coordinado en la plastocianina

Fig. 45.8. Estructura de algunos transportadores de elertroiies. Eii In tgura se rcpresentnn las cstnicturasde la plastaquinuna y la plastocianina.

Fig . 45.9. Transporte electrnico fotosinttieo y fosforilacii>n fotosinttica. En a figura puede apreciarse la interrelacin entre los 2 fotosistemas eelieos, como ocurre en las bacterias, y el traspaso de electrones entre ellos a travs de las difercntcs transportadores. El transporte de electrones fotosinttico provoca la traslocacin de pratones, formndose el gradiente de H* de forma similar a lo que oeurre en la cadena respiratoria. Este

tilacoide

3H

NADP + Ht NAPDH

Fotosistema 1

e -

Fotosistema 11 Cit b, f Lumen tilacoide

y Pi por la accin eataltiea de la enzima ATPsintebsa asociada con la membrana tilacoide.

2H'

es principalmente un gradiente de pH (ApH), que puede llegar a ser de 3 unidades durante una iluminacin potente, y se diferencia del mitocondrial, yaque este ltimo es principalmente electroqumico. Lafigura45.10 muestra la interrelacin entre los 2fotosistemas. En dicha figura puedeapreciarse cmo el transporte de electronesprovoca la traslocacin de iones H :

Ferredoxina (Fd

Luz solar

2H20

~d - NADP+ Reductasa

l
Complejo citocromo b, f

l Fotosistema 1

ATP Sintetasa

electrones entre ellos a travs de los diferentes transportadores -plastoquinnnas, plastacianinas y ferredoxinas, entre otros- y la reduccin final del NADP con la formacin de NADPH. El transporte de electrones fotosinttico provoca la traslocacin de protanes, formandosr el gradiente de H+que impulsa la sntesis de ATP a partir de ADP y Pi por la accin cataltira de la enzima ATP sintetasa localizada en la membrana tilacoide.

y por ello, la formacin del gradiente protnico, similar a lo que sucede en la fosforilacin oxidativa; este gradiente protnico dirige la sntesis de ATPa partir de ADPy Pi, por la accin cataltica de la ATPsintetasa, enzima asociada con la membrana tilacoide. I,a sntesis de ATPen este proceso se conoce como fosforilacin fotosinttica o fotofosforilacin, y al moviiiiiento de electrones a travs de las niolculas transportadoras se le reconoce como transporte electrnico fotosinttico. Es neces;ii.io resallar que eii la fotosntesis los electiwws fluyen de fnriiia inversa a como lo hacen en la c;ideiia respiratoria, esto es, van desde cl H,O Iiesta el SI\DP+ y lo coii~ierieii NADl'H.H', por lo qiie traiiscurre en el senti(1oI ~ I espo~itiicn: e% en I ello posible por la eiicrga solar captada. I .a fotlisis del agua p n ~ w c la liheraciii de oxgeno riioleciilar. Esto ociirre en a ,ii . !! cl;ipa\. en 1;is qiic irltei-i ierle i i l l colii~li~io : ,S !li.otciilicrl que coiltieiic lnaii~ni1cco. l.:\ :>~k\;ici,n 2 I ~ I I I I ~ L I de Sa,qi;~ de I~ pini f o r n u i IIII:I de t~xgci~o nioiecular. ~wq~ckrc - tle:.raiiics. 1;s iiiiiis(i.i.cn~ia u11 cle~trn : de <Iestleci i q i i i f imsta el ?: \L)i" prrci% 2 , , d o s f ' ~ ~ t o q t ~ h i qui. i! ,,u \ V L t.equicrv~i : a 10 roti~w\ : ws. dc ; al~s~trhiilt)~ 1;:)~ m!Ikt~L~\ oe l,:<!po i ' l ~ ~ l l l ; ~ ~ l ~ l . La iiiaiiei.;i cii qinc el O, es iiherado ha sido cii gr;iit parte aclarada por ci aridlisi~ <!e P wiucid;rd c.un que los cluroplast~a a a(1aptadus a la oscuritlatl pn)duceii el O,. ciiaiido son expuestos a iloiiiii~nci~~iies intensas j b r e ~ c ~ f l ~ i . s l iel)inndelo de foriiiacii>iide s e ; O. o niii,~ c:ir;iclerstico: en los 2 priiiieros fl;i,slie.sii~~ lihcra pfiicticaiiieiitc (>,,su se lilki-acin es inxinia en el tercer h51iy decae de n u e ~ 1i;isia alcaiirar el esfado h k a l o iiiici;il. Estc p a t r h se repite de forina que se obtienen picos rada 4 flaslies. Esta periodicidad uiigicie (pie existe un ciclo qiie iiicloye 5 etapas (Fig. 45.1 1).La traiisicih del estado S,,al S, -segn la describieron Pierrc Jolict ! liessel Kok- coiisiste eii reacciones redox depe~idientes la enerfi apwtatla por un fotn; la regeiieraciii del de estado S, al S,)implica la lihei.aciii del O,. Cuatro protenas, iiiiidas a 4 iones XIii. ,junto con 2 3 iones Ca" y 4 5 ioiies C I f&niiii un coiiiplejo catalticaineiite ;ictivo. el coiiipl~jo lihera~lor oxgeno -en iiigGs, o.x~gcri de <w~liiiig coriiple.~. OEC- qrie se une ;I 1 iiii~li.ciilas agua, lo que facilita Iii lil1enici6ii del oxgeni~ de iii~~lecular. Estos estadou iii\~~liicraii rombinaciones<I~fereiitcs<Ie i~lrics (1111 \ I i i ' 11' i.i i i S,.S , los Vii S , -cl,illpk.,~lls ti{)<>de ~Ill,O,,- e 1 S 3 y S, - cl~lllplc,jos tipo 311>'0,,. < ~ >fjgu!x del 1 del I l~l , . 45.1 I s c ;>,.escrita esqirei~i;~ la tr;iiisici~iii 105 cstatlnh S,,al S,. la 2~rgcrierncii,ii 1111 (le dc (Id ?.t:!d<> ,S; ~ \ , ~ <,l?llaX ~ > ~ de 0.. i ~ ~ ~il>eZKi(h

,.

'

'

Reacciones de la fotosintesis
La cc.ii;icih general de la (I~fosiitesis suele expresar de 1;i iiiaiieni siguiente: se

sta es realmente laecuacin especfica de fotosntesis cii las plantas; fue t:iiiihin la primera eciiacin fotosinttica conocida. Eu este caso el agua funciona coiiio donador de hidrgeiios para la reduccin del CO, liberando oxgeno nioleciilaii Esta eciiacin puede escribirse de fornia general:
Lul solar

c . +

v
illKO
t
1 O. 1

ICtI, O),,

Es bueno aclarar que todos los organismos fotosintticos,excepto las bacterias, utilizan el agua como donador de hidrgenos o electrones y, por ello, desprenden oxgeno. Sin emhargo, la mayor parte de las bacterias fotosintticas son anaerobias estrictas y en vez de agua utilizan otros donadores de hidrgeno; un ejemplo lo encontramos en las bacterias sulfurosas verdes. en este caso la reaccin sera: Luz solar
j

Como puede apreciarse, estas bacterias no liberan oxgeno molecular. Algunos organismos pueden emplear otros compueslos donadores de hidrgeno. De esta forma se puede escribir una ecuacin en una variante an ms general que se aplique a cualquier organkmo fotosinttico:

Luz solar

donde H,D = donador de hidrgeno; en el caso del agua, D = O y en el del sulfuro de hidrgeno, D = S. Las reacciones de la fotosntesisocurren en 2 fases: 1.Fase luminosa. Consiste en la captacin de la energa solar por los pigmentos que absorben la luz y la convierten en energa qumica del ATP y de ciertos agentes reductores como el NADPH, al mismo tiempo que se libera oxgeno:

H,O

+ NADP* +

Pi

ADP

% O2

+ NADPH.H+ +

AV

Como puede apreciarse, en esta reaccin ocurre la fotlisis del agua.

2. Fase oscura: El NADPH y el ATPse emplean como fuentesenergticasy de equivalentes de reduccin en la fijacin del CO, y la sntesis de glucosa:

CO,

NADPH.H'

ATP

, ' - Glucosa + NADP' + ADP +

Pi

Fijacin del CO, y sntesis de glcidos. Cielo de Caivin

Fijacindel CO,. El COZes fijado en los organismos fotosintticos al formarse las molculas de cido fosfoglicrico por la accin de la enzima ribulosa-1,sbisfosfato carboxilasa; sta es una de las enzima.?ms abundantes en la naturaleza, su sustrato es la ribulosa-1,s-bisfosfato. La reaccin que ella cataliza es la siguiente:

CH,O@
C=O l H-C-OH l H-C-OH 1 CH,O@ Ribulosa 1,5 bisfosfato
I

c-oII C-OH

CH,O@ I

CH,O@

c; ?

Ho-;I(3~
I H-C-OH l CH,O@ 2 carboxi-3 cetoarabinitol bisfosfato

coi
I H-C-OH I WO@ 2 molculas de cido 3 fosfoglicnco

l H-C-OH 1

~ ~ ~ 0 8
Enolato

El cido 3 fosfogcrico as formado puede posteriormenteconvertirse en glucosa64P) por las reacciones de la gluconeognesis. La glucosa se forma a partir de CO, por el ciclo de Calvin. Ciclo de Calvin. Calvin explic la va mediante la cual se puede formar glucosa a partir de CO,. En el ciclo de Calvin se consume una molcula de ribulosa1,s-bisfosfatopor cada CO, que se incorpora al ciclo; pero ella es regenerada en cada vuelta de ste. En la figura 45.12 se muestran, de forma simplificada, las reacciones de esteciclo. Si se cuentan 6 vueltas al ciclo de Calvin, se puede plantear la reaccin global de la manera siguiente: 6 "bulosa-1,5-bisfosfato

6C0,

18 ATP

+
+

12 HzO

+
+

12 NADPH.H+

6 ribulosa-1,s-bisfosfato

glucosa-6-(P)

17 Pi

18 ADP

12 NADP'

Como la ribulosa-13-bisfosfato se encuentra a ambos lados de laecuacin puede eliminarsey quedara:

6 CO,

18 A V

12 H,O

12 NADPH.H'--+

glucosa-6-(P)

17 Pi

18 ADP

12 NADP'

El precursor inicial en la sntesis de glucosa es el cido 3 fosfoglicrico (GAP); ste, mediante las reacciones del ciclo de Calvin, se convierte en fructosa-6-(P). La fnictosa- 6-(P), por accin de la fosfoglucoisomerasa,es convertida en glucosa-6-(P)y esta ltima, por la fosfoglucomutasa en glucosa-1-(P) (captulo 44). La glucosa-l4P) as formada es la molcula precursora de los glucidos vegetales ms importantes: el almidn, la celulosa y la sacarosa.

cido 3 fosfoelicrico

Ribulosa 1,5 bisfosfato ADP Fosfodihidroxiacetona

k, 1,3bisfosfoglicrico Acido
( 2 inolculas)

U N ~ :( J :
- fosfogliceraldehdo 3 a

(4)

P1

\
Ribulosa 5
\ \ f sOf

( 2 molculas)

Fructosa 1,6 bisfosfato (6) Fructosa 6 fosfato

Ribosa 5 fosfato

3 fosfogliceraldehdo

Enziinas: (1): ribiilosa -1, 5- hisfosfato carboxilasa; (2): fosfogliceroquinasa ( requiere 2 ATP );(3): fosfo gliceroaldehdu deshidrogenasa ( requiere NADPH ); (4): fosfotiiosa isoinerasa; (5): aldolasa; (6): fructosa -1.6- bisfosfatasa (hisfosfofructofosfatasa); (7): transcetolasa; () aldolasa; 8: (Y): sedoheptulosa 1,7 bisfosfatasa; (102: transcetolasa; (1 1): isonierasa; (12): ribulosa 5 fosfato quinasa ( requiere ATP ).
Fig. 45.12. Reacciones del ciclo de Calvin. En la figura se representa la secuencia de reacciones del to ciclo de Calviii. La ribiilosa-1,5-l>isfosfa~ se eunvicrte en 2 molculas d e cido 3 fosfogiic6riro al carbovilarse por la accin catalitica de la enzima ribiilosa-1,s-bisfosfatu carboxilasa, enrima reguiadora dc la va. Por medio de la glueoneognesis se obtiene fruetosa-&(E'), la cual, por la accin catalitica de la transecB,lasa, reacciona con una molecula de 3 fosfogliccraldchido y da como productos una tetrosa y una pentosa, la cual sc transforiiia oor accin de una isonierasa en ribulosa 5 fosfato v oor una auinasa en ribuiusa-

la accin de una isomerasa.

Regulacin de las reacciones oscuras

La etapa que resulta limitante en las reacciones oscuras de la fotosntesis es la fijacin de CO,, la cual ocurre en la reaccin catalirada por la enzima ribulosa-1 Jhisfosfato carboxilasa; en ella se forman como productos 2 molculas de cido 3 fosfoglicrico. Esta enzima es unade las ms abundantes en la Tierra y, tal vez, unade

las ms importantes, pues de ella depende, en gran medida, la vida en nuestro planeta. La ribulosa bisfosfato carboxilasa de las plantas y de la mayora de los organismos fotosintticosconsiste en 7 subunidades polipeptidicas largas (L) y S pequeas (S). La subunidad L posee 477 residuos de aminocidos y contiene el centro activo, las unidades S constan de 123residuos de aminocidos y se desconoce su funcin. resulta estimulada La ribulosa bisfosfatocarboxasa es ~guladaalostri~2UImIte; por la elevacin del pHdel medio, por iones M$' y por NADPH. El COZ, adems de ser el sustrato, activa a esta enzima al unirse covalentemente a un grupo E amino de un residuo de lisina formando un carbamato. Esta unin requiere iones M e , los que a su vez forman parte del sitio de unin de la segunda molcula de CO, que acta como sustrato. Esta enzima cataliza, por el mismo centro activo, una reaccin de oxigenacin en la que el O, reemplaza al CO,, por lo que la reaccin de oxigenacin compite con la de carboxilacin. Los productos de la reaccin de oxigenacin son el cido 3 fosfoglicrico y el cido 2 fosfogliclico,elque ulteriormente se oxida por el oxgeno, y da CO, ms H,O ms Pi ,en reacciones que involucran a enzimas del citosol, de las mitocondrias, de los peroxisomas y de otros organitos subcelulares.

l H-C-OH

co;

Ribulosa 1,5 bisfosfato

Y
cido 2 fosfogliclico

Este proceso, denominado fotorrespiracin, no est acoplado a la fosforilacin oxidativa, y todo indica que constituye un escape iniportante de CO, en el metabolismo del cloroplasto. En algunas plantas, un tercio del CO, que se f?ja resulta de nuevo liberado por este proceso de fotorrespiracin. La competicin entre el O, y el CO, por la enzima depende de sus concentraciones relativas. La Km de la enzima activa para el CO, es de 20 pm y para el O, de 200 pm. En los cloroplastos iluminados, sin embargo, la concentracin de O, se incrementa como resultado de la oxidacin fotosinttica del H,O y en esa9 condiciones el O, se convierte en un potente competidor. Otras 2 enzimas del ciclo de Calvin tambin intervienen en su reeulacin. ellas son la bkfosfofmctofosfatasay la sedoheptulosa disfosfatasa,ambas se activan tambin Por aumento del pH, por los iones magnesio y el NADPH. En esta regulacin participan, adems, la tiorredoxina y la ferredoxina-tiorredoxina reductasa. Esta regulacin se Produce por el paso de ambas enzimas de su forma oxidada a la reducida, lo cual se Consigue por la mptura de un puente disulfuro. La tiorredoxina reducida activa a la ya di~f~sfofnictofosfatasa la sedoheptulosa fosfatasa -del ciclo de Calvin- e inhibe a la fosfOfmctoqninasa-enzima marcapaso de la gluclisis. La ferredoxina-tiorredoxina

reductasa es la responsablede mantener a la tiorredoxina en el estado reducido y ello depende del nivel de ilumioacio. De esta manera, en las plantas, la luz estimula el ciclo de Calvin y desactiva la gluclisis, y lo contrario ocurre en la oscuridad. Por ello se cuestionala denominacintradicional de "reaccionesoscuras" a las transformaciones del ciclo de Calvin. Algunas especies de plantas -maz, caa de azcar y otras plantas tropicales-, han desarrolladouna va que favorece la reaccin de carboxacin sobre la de oxigenacin, catalidas por la ribulosa-1,Sbisfosfato carboxasa,al incrementar la concentracin de CO,. Este ciclo se conoce como C, y constitnye unavaaccesoria para transportilr CO, hacia el interior de sus clulasfotosintticas. Comoseobservaen la figura45.13, en las clulas del mesfilo se asimila CO, por la carboxilacin del cido fosfwnolpirvico,y se origina un compuesto de 4 tomos de carbono, el cido mlico; en las clulas de la vaina, por descarboxilacin, se genera el cido pirvico. El CO, formado se incorpora al ciclo de Calvin. Como puede apreciarse, esta va tiende a concenhxCO,. Aire
l

',,"

del cido mlico cido pvico

p + j ~ p * NADPH I cido miico cido p i ~ v i c o

Fig. 45.13. Ciclo del C, en plantas tropicales. Las plantas tropicales tienen esta va que les permite transportar CO, hacia el interior de sus clulas fotosintticas.

Clula
de la vaina

vascular

Glucosa

Resumen
La fotosntesis es dVecta o indirectamente la foente primaria de energa en
todos los seres vivos. En este proceso,la elomiiia capta la energa solar y la trans-

forma en energa qumiea. Todas las clulas fotosiniticas contienen elomla o baeterioeloma. Las plantas superiores poseen 2 t i p de elombw a y b. Las clulas eueariontes fotosinteticas presentan un organelo citoplasmtieo, el domplasto, donde ocurre la fotosntesis. Los pigmentos fotosintticos y las enzimas de las reacciones l u m i 0 0 ~ ~ ~ se ubican en las membranas olacoides, en tanto que las de las readones oscuras se loeazao en el estroma. Lasplantasposeen2fotosistemasdisontos,elIyelUElI@~aFoeiadoconla elomiiia a no interviene en la Liberaa6n de oxgeno, y el 1 ( d relaaonado 1 P est con el desprendimiento de dicho gas. Las molculas de elomiiia asociadas con pmteinas y que se encuentran formando el Llamado centro de reacci6n, son las fotoqnmicamente activas; el resto nneiona como "antenas moleeulares", pues captan y trasmiten la energa hasta el centro de reaccin.
784

-m

Las reacciones de la fotoBintesis ocurren en 2 fases: la fase luminosa, que con&e en la captacjudela energa solar y su conversin en ATPy sustanriasredudoras como el NADPH, a la vez que se libera oxgeno; y la fase oscura en la que se fUa el CO, para la formacin de glucosa, y se emplean los equivalentes de reduccin del NADPH y la energa del ATPformados en la etapa luminos&
El CO, se fija por la accin de la enzima ribniosa-13-bisfosfato carbodasa -enzima alost6riamente reguiada- que convierte a la ribulosa-1,s-bistosfato en dado fosfopiicrieo. Por glumneog6nesisse forma glucosa--v), y a partir de sta, sacarosa, almidn, celulosa y otros glcidos. El ciclo de Calvin es la va metablica en la que se forma glucoss a partir de CO, y ribulosa-l,5-bisfoBratoatoy en la que esta I h a se regenera. La enzima ribniosa-13-bisfosfato carboxilasa es la reguladora principal de la va, est estimulada por iones M$, por el NADPH y por la elevacin del pH del medio. EL O, compitepor el sitio adivo de la enzima con el CO,, y forma los cidos3fosfogdrico y 2 fosfogeeo; este Imo, por accin del oxgeno, se degrada hasta CO, m& %O en un pn>eeso conocido como fotorresphcia La accin oxigenasa de la ribniosa-13-bisfosfato carboxasa d o es cnantitativamente importante ante iluminacin intensa por el aumento de la concentracin del oxgeno m o l ~ en , estas condiciones se provoca un esrape de COZAlgunss plantas tropicales poseen una va que concentra CO, en el interior de las elulas, la va C,.

Ejercicios
1.Represente en un esquema el ciclo del carbono y el oxgeno en la naturaleza. 2. Por qu se dice que la fotosntesis es la fuente primaria de energa en todos los seres vivos? 3. Describa las caractersticas estructuralesde las clorofilas. 4. Qu es el centro de reaccin? S. Describalos 2 fotosistemas presentes en las plantas. 6. Explique las 2 fases de las reacciones fotosintticas. 7. ;En qu consiste la fijacin de CO,? 8. Realice un esquema del ciclo de Calvin. 9. .Cmo se regula la fase de las reacciones oscuras? 10. Qu es la va C,? 11.Establezca una comparacin entre los procesos de transporte electrnico de la cadena respiratoria y de la fotosntesis en relacin con los sistemastransportadores y tambin en relacin con el sentido del flujo electrnico. 12. Compare la fosforilacin oxidativa con la fotosinttica.

La sntesis de oligo y polisacridos es muy seme,janteen los distintos seres vivos, pues a pesar de las particularidades presentes se constata como reglala existencia de mecanismos esencialmente similares. A partir de la glucosa-6-0') o de otros monosacridos fosforiladosse formarn los oligosacridos y polisacridos de reserva correspondientes, en dependencia del tipo de clula y del organismo del que se trate. Tambin se formarn, utilizando estos mismos precursores, los diversos glicoconjugados; dichos compuestos estn constituidos por el mismo o por distintos monosacridos, los cuales pueden ser simples o derivados. Los glicoconjugados presentan, adems, como componentes protenas o lpidos. En cualquier caso, los monosacridos precursores deben estar en su forma activa, que es la manera en quese transfieren los residuos de monosacridosdurante lasntesis de los polmeros, como fuera ya tratado en el captulo 43 en ocasin del estudio de la sntesis de glucgeno. La formacin de ciertos monosacridos derivados se produce tambin a partir de sus sustratos activados. Abordaremos en el presente captulo el estudio de la sntesisde ciertos monosacridos derivados, de algunos oligo y polisacridos y, especialmente, la biosntesis de los compuestos glicoconjugados.

Activacin de los monosacridos

La activacin de los monosacridos no es ms que la formacin de los derivados monosacrido-fosfonucletido azcar-nucletido como tambin se les llama. Dichos o derivados se forman segn la siguiente reaccin:

NTP

+ monosacrido- l-(P)

NDP-rnonosacrido c (P)-O-(P)

La hidrlisis del pirofosfato por las pirofosfatasasfavorece la reaccin en el sentido de lafomacin del azcar-nucletidofosfato; en la figura 46.1 se muestra esta reaccin para el caso del UTP y la glucosa-l-(P). Aiinque generalmente es el UDP el portador de residuos glucosilos, tambin en ocasiones cumplen esta funcin el ADP, el CDPy el GDP.

Despus de formado el azcar-NDP, el monosacrido as activado puede experimentar una serie de transformaciones: oxidacin, reduccin y epimerizacin, entre otras, mediante las cuales se obtienen diversos monosacridos derivados o se produce la interconversin de azcares. Tambin pudiera ocurrir la transferencia a molculas aceptoras; stas pueden ser otro monosacrido o un polhero. En el primer caso se formar un disacrido y en el segundo, otro tipo de oligosacrido o un

n HO-P-O-P-O-P-O
o II
1 I

o 11
1

8-8
Piofosfato

Fig. 46.1. Formacin de UDP-glucosa.

Formaci6n de monosacridos derivados

Entre los monosacridos derivados se encuentran los azcares cidos y los amino azcares. Un azcar cido de especial relevancia es el cido glucurnico, tanto por encontrarse formando parte de numerosos glicoconjugados como por desempear un papel fundamental en los procesos de destoxificacindel organismo. Lasntesis del cido glucurnico se produce en 2etapas:

1.El carbono nmero 6 (C,) se oxida de hidroxilo a aldehdo. 2. Oxidacin de aldehdo a carboxilo del mismo carbono.
La reaccin global se presenta en la figura 46.2. La enzima que cataliza esta transformacines la UDP-glucosa deshidrogenasa.

UDP - Glucosa

O =c\ N
O-P-O-P-OH

/CH +

NADH.H+

UDP-cido glucurnico

Fig. 46.2. Formacin del cido glucurnico.

La formacin de amino azcares ocurre por transamidacin. A manera de ejemplo veamos la sntesis de la glucosamina:

coo(P)-O-H,C CH,OH

COO~

OOH yOdH r"'

l CH2 l
CH,

H , N c -H ~

- O -(P)

l I CH* 1
CH2

01-1 Fmctosa-6-fosfato

El sustrato es la f~ctOSa-6-(P), enzima transamidasa transfiere el grupo amino la desde la glutamina hasta la fructosa fosfato y se forma asla glncosamina-6-(P)y el cido gluimico. La glucosamina-6-(P)puede entonces ser acetilada y dar lugar a un derivado de tipo N-acetil, en este caso la N-acetil glucosamina. CH, -O-(P)

Esta ltima pudiera, por epimerizacin,convertirse en N-aceN galactosamina o N-aceN manosamina como se muestra seguidamente:

CONH,

Glutamina

NH2 Glucosamina-6-fosfato

COO-

cido glutmico

CH,C-SCoA Acetil-COA

4 '

CoASH

N-aceiil glucosamina

CH,OH

Otro azcar derivado de importancia, que se forma tambin a partir de la UDP-N-aceol-glucosamina,es el cido N-aceal neuramnico, cuya frmula qumica se muestra a continuacin y el cual es un precursor en la sntesis de varios glicoconjugados.

CH,
I

H-C-OH

OH
cido N- acetil neuramnico ( cido siiico )

Sntesis de disacridas
Muchos son los disacridos que se encuentran en la naturaleza. Nosotros abordaremos el estudiode la sntesis de la lactosa debido a su especial importancia en los mamferos.

Sntesis de laetosa
En la glndula mamaria de mamferos se sintetiza el disacrido lactosa, azcar presente en la leche. Los sustratos son la UDP-galactosa y la glucosa (Fig. 46.3). El sistema enzimtico de la lactosa sintasa est constituido por 2 protenas: la protena A, con accin cataltica de glicosiltransferasa; y la protena B, la cual no presenta actividad cataltica, pero acta como reguladora al disminuir la Km de la protena A hacia la D-glucosa, la que, sin esta modificacin, resulta muy elevada. A L protena B se le ha conocido tambin con el nombre de a lactoalbmina. La a reaccin que ocurre es la siguiente:

UDP - galactosa

7 n HO OH

Glucosa

Lactosa

Fk. 46.3. Sntesis de laetoss.

Por la importancia biolgica que presentan muchos de estos wmpuestos,bataremos aqu algunos aspectos fundamentales de su metabolismo.

La formacin de los enlaces glicosdicos en estos glicoconjugadosse produce por la accin de las enzimas glicosiltransferasas, las que tambin utilizan como sustrato los monosacrido-fosfonucletidos, frecuentemente el UDP-azcar, como fuera esiudiado anteriormente,aunque tambin pueden ser otros como el GDP-monosacndo y el CMP-monosacrido. De cualquier modo la reaccin general sena: NDP-monosacrido

Molcula aceptora U Mooosacrido, - O - monosacrido, + NMP (oligosacrido)

La transferencia del azcar desde el donador hasta el aceptor se produce por el extremo no reductor. Las glicosiltransferasasson altamenteespecficas,en cuanto al substrato donador de residuos glicosilos, para la molcula aceptora y para el tipo de enlace que se forma. La sntesis de este tipo de compuesto ocurre en todas las clulas, aunque el tipo de glicoconjugadoformado depende del organismo y del tejido. La regulacin de la sntesis de este tipo de compuesto parece depender, al menos en parte, de la disponibilidad de las enzimas en el sitio de la sntesis. Todas estas enzimas estn unidas a las membranas del retculo endoplsmico mgoso o so o al aparato de Golgi. Se conocen cerca de 80 enlaces glicosdicos diferentes presentes en los glicoconjugados de los animales superiores. Ello explica la posibilidad de carcter infonnacionaldeestasmolculasy la funcin en el reconocimientocelular de diferentes posacridos de las membranas plasmticas.

Los enlaces glicosdicos fundamentales que unen los oligo o polisacridos a las protenas son de 3 tipos: O-glicosdicos unidos a serina o treonina, O-glicosdicos unidos a hidroxisina y N-glicosdico unidos al N amdicodel aminocidoasparagina. En la figura 46.4 puede apreciarse la estructura qumica de algunos de estos tipos de enlaces.

Fie. 46.4. Estructura de los enlaces O-elicosidico y N-elieosdica. En la fieura puede apreciarse la serina mediante un enlace O-elicosdico. b) N-seetilelueosarnina unida a un residuo de asparagina mediante un enlace N-glueosidico.

La sntesis de estos compuestos comienza por la glicosidacin de un residuo de aminocido de la protena mediante reacciones de transferencia de galactosa, glucosa o xilosa. Los distintos residuos elicosdicosse adicionan sucesivamente v se oroduce la elongacin de la cadena del oligosacrido segn una secuencia ordenada de reacciones en de~endencia la especifcidad de las glicosiltransferasaspresentes. En de algunos casos, l& unidades monoiacridas se incorporan a la cadena e formacin a travs de ciertos intermediariosde natnraleza lipdica.
u .

Biosintesis de oligcaaeridos w n enlace O-gliddiw

Los pasos en lasntesis deeste tipo de compuestospueden comprenderseutizando como modelo la sntesis de la mucina submaxilar. Como paso inicial, la N-acetilgalactosamina es transferida a un residuo de s e h a o trronina de la pmtena, y se forma un enlace O-giicosdico. La enzima esuna N-acetgalactosaminidiltransferasa A continuacin una ealactosiltransferasa aade un residuo de galactosa donado vor UDP-galactosa,seguidamente se incorporan residuos de cido silico, fucosa y de nuevo accin cataticade enzima sia~transferasas,fum6iitransfera~-ace&~alactosamlli~ sas y N-acelgalactosaminidiltransferasa, respectivamente. La secuencia de reacciones puede aprkarse en lafignra46.5. Polipptido

PUDP - NAcGal buDP NAcGal - R pUDP - Gal &UDP Gal - NAcGal - R

I/

- Sia

Fuc - Gal

GDP \ N A ~ G ~R S' a //UDP - NAcGal

9 .

Sia: cido siiico; Gal: galactosa; Fuc: fucosa; NAcGal: N. acetil galactosamina.

Fig. 46.5. Biosintesis de oligosaeridos con enlace O-glitosidini. En la tigura se representan las secuencias de reacciones que tienen lugar en la sntesis de la murina de la g l b dula submaxilar de cerdo. Al polipptido se adicionan, aueesivsmente, residuos de galactosa, cido silico, fucosa y Nacetilgalactoramina por la accin de 5 enzimas glicosillransferasas diferentes.

La sntesis de estos compuestos es algo ms compleja que la de los derivados unidos por enlace O-glicosdicos a las protenas y, como mgla, procede en 4 etapas:
1. Iniciacin y elongacin. En esta etapa participaun intermediariopdico. 2. Transferenciadel ogasacrido formado a l p aceptora a r 3. Procesamiento ulterior de la glicoprotena con eliminacin de ciertos residuos glicosilos. 4. Completamientode la cadena oligosacrida por la adicin de restos glicosilos.

Los Lnidos aue narticinan como intermediarios en este Droceso son los dolicoles. los cuales constituyen alcoholes isoprenoides insatnrados de cadena larga -16 a 21 unidades isoprenoides. Estoscompuestospueden estar Iibm o unidos a g n i p fosfatos (doticolfosfato). La estructnra es la siguiente:

. .

CH, H[CH>-

c = CH-CH]

CH3 -CY-&H18-20

CH~-CH~O-@

Dolicol fosfato

Todos losintemediarios dedoticol fosfatoestn unidos a lamembranadel retinilo endoplsmicopor el lado citoplasmtico. No se conoce la f o m a en que se produce el p s hacia la cara luminal de =(OS deriwdos. an En la orirnera elnna se tranfieren. seruencialmente. distintos residuos diaisikm al doliml f k a t o @ig. 45.6 a). ~n un inicio una transferasa forma el ~-acetilgIu&amndilfosforildolicoly seguidamentese incorpora otro residuo de N-acetilglncosaminay 5 residuos de manosa con la participacin de las transferasas especficas correspondientes. Las molculas donadoras de los 5 residuos de manosa son

O- N-acetil glucosamina; 8 - manosa; 8Glucosa; E@!-

dolicol

Fie. 46.6. Sntesis de olieosaeridos con enlace N.dicaadieo. Las etapas diferentes en la biosintesis

la leyenda de la figura y en el texto.

GDP-manosa; sin embargo, el resto de los residuos de manosa, ascomo los de glucosa no utilizan comodonador a monosacndo-fosfonucletidos, sinoamolculas de manosil o glucosildolicolfosfato. En la segunda etapa, una protena oligosacaridiltransferasa transfiere el oligosacridodesde el donador lipdico (oligosacaridildolicoIfosfato)hasta la protena aceptara. Este segmento oligosacridose une, por enlace N-glicosdico, a un N amdico de un radical de asparagina. Este residuo de asparagina debe formar parte de una secuencia especfica: AsN-X-TrelSer, donde X puede ser cualquier otro aminocido. Parece que existen otros requisitos adicionales para que se produzca la glicosidacin de los residuos de asparagina, dado que slo un bajo porcentaje de las molculas de dicho aminucido, que cumplen tales condiciones, estn realmente glicosidadas. En la figura 46.6 se resumen las reacciones de estas 2 etaoas. En la tercera etapa se eliminan algunos residuos de manosa y glucosa del extremo no reductor por la accin de a glucosidasas y a manosidasas, hasta la formacin del . intermediario 1 La continuacindel procesamientorequiere de la adicin de un residuo de N-acetilglncosamina por la transferasa especfica, y se forma el intermediario 11. Finalmente se forma el intermediario 111. ltimo oroducto de esta etaoa.,. la accin oor de otra a manosidasa especifica que le elimina 2 residuos de manosa (Fig. 46.6 b). b) Cara citoplasmtica

RER

REL

Aparato de Golgi

O -N- acetilglucosamina;O -manosa;O -fueosa;

4 -glucosa; Dol:

-galactosa;

6 -cido silico;

dolicol; RER: retculo eodoplasmtico ~ g o s oREL: retculo ; endoplasmtico liso.

Fig. 46.6. b) Procesamiento y completamientode la sntesis de oligosacridos con enlace N-gcasdico. En la figura puede apreciarse una representacin esquemtica del procesamientofinal de las oli~osseridoscan-enlace N-elie&dieo. El olie&drido es transferido a la cadena

reticulo endopmm&ieo rugoso, en el liso o en el aparato de Golgi.

Eahaiartaetspasempletalafomiacindeh~prOtemapwhadirin~~cgivade miduos de N-adlglugalactosa, fuma y cido sico por la accin de las , ~~eFperiFrm;tasqueempkan~doiiadorer:delpndelos~ fmfonucleodar El orden exado en que deben actuar estas enzjmas no e t claramente s ~lecido;~~,sesabequealgun;sdebenaetuaran~queohai

Muchos de los pasos en la sntesis de estos compuestos resultan esencialmente similaresa los de la sntesis de las glicoprotenas.As, las cadenas de polisacridos son formadas por la accin secuencial de una serie de glicosiltransferasas,las cuales son especficas, catalizan la transferencia de restos glicosilos a un aceptor apropiado, y utilizan tambin como sustrato donador un monosacrido fosfonncletido; el aceptor puede ser el extremo no reductor de otro azcar o algn resto aminoacdico de un polipptido. Trataremos la sntesisdel condroitnsulfatocomomodelo, ya que es una de las ms conocidas. El primer paso consiste en la formacin del ncleo de protena La cadena de polisacrido se comienza aformar, antes de terminarse lasntesisde la protena,por la , acCinsucgi~ade6~~~daeren~PiimerosefomhFegintetrasaeanda por accin esr>ecfica la gcasilimnsfemswy, posteriormente,m pomerizacin de la por la accin concertada de 2 enzimas: la N-acetil galactosaminotransferasa y la ~ucurowsilhanaerasa . s emhm, acnando de manera altenia, forman k s nnidades Fsa disacndasrepetidas, caractersticasde este mmpnesto (Fig. 46.7).

Protena - ser q p P r o t e n a - ser -xU UDP-Gal UDP - xil

P;; ~! -~ r: e F ; t u ~ p

Gal

Protena - ser - xil- Gal- Gal

Protena - ser - xil- Gai - Gai - Aglucu - NAcGal

- ( Protena - ser - xil- Gal- Gal - Aglucu j

UDP - NAcGal

Protena - ser - xil- Gal- Gal- Aglucu - NAcGal - Aglucu

k"A"ucu
k
l
I/"

UDP

PAP Protena - ser - xil- Gal- Gal - Aglucu - NAcGal - Aglucu 1 SO,

Protena - ser - xil- Gal- Gal- Aglucu -

1. P

(UDP - NAcGal, UDP - Aglucu, PAPS)n

(UDP , PAP)n

Fig. 46.7. Sntesis del mndroitn sulfato. En la figura se muestran la secuencia de reacciones V e conducen a la formacin del eondroin sulfato.

A continuacin se produce la sulfatacin de los carbonos 4 6 de los residuos de N-acetiigalactosamina. El donador de gnipos sulfatoses e13 ' -fosfoadenosinad ' fosfomifato Todo parece indicar que la sntesis de los proteoglicanos depende, fundamentalmente, del tipo de enzimas glicosiltransferasas que poseen las clulas especficas, ascomo de la presencia de las molculas donadoras. Se ha planteado la participacinde los monosacridos fosfonucletidosen la regulacin de estos procesos biosintticos. Se sabe que el UDP-N-aceiglucosaminainhibe a La enzima f~ct0Sa-W'): glutamina transaminidasa, la cual cataliza la sntesis de derivados aminados de aldohexosas.El UDP-N-acetilglucosamina,a su vez, se encuentra en equilibrio con el UDP-N-acetilgalactosamina. Como se ve, la regulacin de glicoprotenas y proteoglicanos parece que procede por un mecanismo similar. En el caso de la sntesis de los protmglicanos,existen mecanismos especficos: la UDP->Ulosainhibe a la enzima UDP-glucosa deshidrogenasa, la cual cataliza la formacin de UDP-cido glucurnico. Dado que es precisamente la xilosa el primer monosacrido que se incorpora a la sntesis de una gran parte de los proteoglicanos, al disminuir la sntesis del ncleo proteico de estos compuestos, se acumulara UDP-xilosa y ello provocara la disminucin de la sntesis de uno de los precursores, el UDP-cido glucurnico. Las glicoprotenasy los protmglicanos son degradadospor la accin de proteasas y glicosidasas, adems de otras enzimas como desacetilasas y arilsulfatasas, entre otras. Estas enzimas son principalmentebidrolasas kosomales. Existe un gmpo de enfermedades genticas, conocidascon el nombre genricode mucopolisacaridosis, causadaspor el dficit de una o ms de las enzimas que se requieren para la degradacin de estos glicoconjugados. Esta enfermedad se caracteriza por la acumulacin y excrecin excesiva de oligosacridos. Aunque el cuadro clnico vara en dependencia de la enzima que est en dficit, se constatan algunos sntomas semejantes a las glucogenosis,y adems pueden presentarse alteraciones seas y retardo mental. En el cuadro se muestra un resumen de las enzima deficitarias y los productos acumulados en algunos tipos de mucopolisacaridosis.

@m.

Enfermedad
&ter

Enzima deficitaria Idumnatosulfafasa

Produdo acumulado Dermafnsulfsto suifato

y he@

Dermatnd a t a y he@ dato

Mamteauw-Iamy

N-aet galadosamina
sulfatara

Resumen
A partir de la glucosa-6-(P) se pueden formar otros monosacbridos, monosac4ridos derivados, oligo y polisac4ridos. Los susratos donadores son NDP-monosaeridos. Aunque generalmente es el UDP el portador de residuos glueosilos, en ocasiones tambin nunplen esta fnncin el ADP, el CDP y el GDP. Entre los derivados de monosaeridos ms importantes se ennientran los azcares bcidos, los amino azcares y el bcido N-aceol neuraminico (bcido si8co). El dcido glunir6nico se forma por la oxidacin del carbono 6 de la glucosa; la enzima e la UDP glnmsa deshidrogenasa. La formacin de aminoazcares -e s por imnsamidacin. Los derivados aminados pueden experimentar, eventualmente, aeetilaciones y de esta forma originar N-aceol derivados. La formacin de disacatidos, ogo y polisacatidos se pmduce por la aecin de una serie de g l i d t r a n s f e p ~ s que d t a n espeeicas para la molnila donadora, ~s para la aceptora y para el tipo de enlace que se forma. La gran variedad de enlaees explica la posibidad del d e t e r informacional presente en varios polisacatidos de membrana La pinduia rnamaria sintetiza lactosa a partir de UDP-galactosa y D-glneosa itm por la acdn del s s e a e d t i c o de la ladosa sintasa La sntesisde los gcoeonjugados procede en el r e d o endoplgsmim rugoso o Liso y en el aparato de Golgi, por la acdn de una serie de glioosiltransferasas tambin altamente especificas,y que de igual modo utizan como sustrato donador a derivados azcar-nucletidos, aunque en algnnos casos el monosacatido se une a ciertos lpidos intermediarios, dolieoles, y el derivado formado puede fnncionar como sustrato donador de residuos glimsilos. Los enlaces que se forman entre la porcin glucdica y las protenas son fnndao treonina; O-glie081'dico, mentalmente de 3 tipos: O - g l i d d h , unido a se* unido a hidroiolisina; y N-gliddico, unido a asparagina. El orden en el que se incorporan los restos gtieosilos es especifico, y estos pmcems estan regulados por la disponibilidad de las eLIZDW transferasas y de los sustratosdonadora El dicit de algunas de las enzmias que participan en la degradad611 de los giicoa~njugados puede provocar una enfermedad: la mncopolisacandosis. En ese easo se acnmnlan y se exretan, en grandes cantidades, oligosacridos d i v e m y en dependencia de las enzimas afectadas o la enzima afectada se presentan diferentes manifestaciones chicas.

Eecco jriis
1. Formule la reaccin de formacin de los glicosil-fosfonucletidos. 2. Formule la reaccin de oxidacin del C, de la galactosa. Considere que transcurra de forma similar a la estudiada en el caso de la sntesis del cido glucnrnico. 3. Enuncielos pasos que proceden en el proceso de formacin de aminoazcares y de N-acetilderivados. 4. Describa las caractersticasgenerales del sistema enzimtieode la lactosa sintasa y mencione sus sustratos. 5. Formule la reaccin que catalizan las enzimas glicosiltransferasas.Mencione su localizacin celular. 6. Compare los procesos de biosntesis de los oligosacridos unidos por enlaces O-glicosdicosy por enlaces N-glicosdicos a las protenas. 7.Descnbalasetapasfundamentalesen el proceso de bioSite& delos proieoglieanos. 8. Exponga las vas degradativasprincipales de las glicoprotenas y los pmtwglicanos. 9. Qu son las mucopolisacaridosis?Diga sus causas y consecuencias.

Resumen de la seccin

Los glcidos constituyen la principal fuenteenergticadel ser humano debido a su mayor disponibilidad,por ser los compuestosms abundantesen la natnraleza. Los glcidos fundamentalesde la dieta humana son: el almidn, la sacarosa y la lactosa; esta ltima resulta especialmente importante en los lactantes. Dichos glcidos han de ser degradados en el aparato digestivo previa absorcin y utilizacin por los diferentestejidos. La amilasa salival,y sobretodo la pancretica,degradan el almidn y el glucgeno hasta maltosa, maltotriosa y dextrina lmites, y estos compuestos completan su degradacin hasta su conversin total en glucosa por la accin de las disacaridasasintestinales: maltasa y el complejosacarasa-iwmaltasa; este ltimoes el responsable de la degradacin de la sacarosa; la lacha, tambin diicaridasa intestinal, degrada a la lactosa. Como resultado de la accin de todas las enzimas digestivas de los glcidos se obtienen como productos finales, principalmente, glucosa y, en menor medida, galactosa y fmctosa. La absorcin de la glucosa y la galactosa desde la luz intestinal hacia las clulas epiteliales del intestino se produce, con simporte de iones Na', por un mecanismo de transporte activo secundario,y de estas clulas a la sangre,por transporte facitado. La glucosa requiere insulina para su interiorizacin en el tejido muscular y en el adiposo, no as en el cerebral y el heptico. La primera reaccin que experimentan los monosacridos al entrar en las clulas es su fosforilacin,reaccin catalizada por las fosfotransferasas La glucosa-6-(P)se origina por la accin de alguna de las formas isoenzimticas de la hexoquinasa, y este compuesto constituye un metabolito de encrucijada de las diferentes vas metablicas de la glucosa. La glucognesis, sntesis del glucgeno, tiene como precursor a la glucosa-1-(P) que se forma a partir de la glucosa-6-(P). El donador de residuos glicosilos en la sntesis de este polisacridoes el UDP-glucosa. La iniciacin de la sntesis requiere de la protena glucogenina, la cual se glucosila y se forma una cadena oligosacrida, unida a dicha protena, y essobre esteprimerglucoprotena-(glucosa)n que comienza Suaccin la glucgeno sintasa, en el proceso dealargamientode la cadena de glucgeno. La sntesis del glucgeno requiere la accin concertada de las enzimas glucgeno sintasa y ramificante. La glucgeno sintasa es la enzima reguladora principal de la Sintesis de este poli.jacridoy posee regulacin por modulacin covalente; la forma no fosfatada(a, o 1) es la activa; la insulina favorece el paso a esta forma activa. La forma b (0 D) de esta enzima, que es la inactiva, resulta regulada alostricamente, la glucosa-6-(P) acta como modulador positivo y el AMP como negativo; la concentracin elevada de glucgeno provoca la inhibicin de su propia sntesis.

La glucogenlisis es el proceso mediante el cual el glucgeno se degrada principalmente a glucosa-1-(P)y, en menor medida, a glucosa. Las enzimas glucgeno fosforilasay desramificanteactantambin deforma concertada. El hecho de que el enlace glicosdico a 1-4 del glucgeno sea escindido fosforolticamente, constituye un considerable ahorro energtico, ya que se obvia el gasto de ATPnecesariopara la fosforilacin inicial de este monosacrido. La enzima glucgeno fosforilasa es la principal reguladora de la glucogenlisis. Presenta tambin modicacincovalentey laformafosfatada(a) esla activa Elglncagn -en el hgado- y la adrenalina -en el msculo, principalmente- favorecen el paso a dicha forma activa. El ATP y la glucosa-6-(P)son efectores negativos, y el AMPacta como activador alostricode la fosforilasab. Tanto la glucgeno sintasa como la fosforilasa forman parte de cascadas enzimticas,las cuales amplan considerablementela seal hormonal; los efectos provocados por las reacciones que conforman estas cascadas resultanopuestos para ambas enzimas y, por tanto, la activacin de una se acompaa de la inactivacin de la otra. El glucgeno heptico contribuye al mantenimiento de la glicemia debido a la presencia en dicho tejido de la enzima glucosa-6-fosfatasa,no asel muscular, donde dicho polisacrido constituye una reserva energtica til para este tejido durante el ejercicio. Las glucogenosis o enfermedades por almacenamiento de glucgeno se presentan por el dficit de diversasenzimas involucradasen el metabolismo de este polisacrido. El cuadro chico depender de la enzima deficitaria,pero el sndromese acompaa de aumento del volumen heptico en la mayora de los casos, debido a la acumulacin de glucgeno. La gludlisis es la va principal dedegradacin de la glucosa y tiene carcter universal. En dependencia de las condiciones de aerobiosiso anaerobiosis celular, sta rinde COZ y0 o cido Iclico, respectivamente. En el primer caso se forman 32 ATPy en el ms segundo, slo 2. La enzima reguladora principal de la va es la fosfofmctoquinasa,la que presenta regulacin alostrica; es activada por la fructosa 2,6-bisfosfato y por el AMP, y se inhibe por el ATPy por concentracioneselevadas de citrato. La gluconeognesis es el proceso mediante el cual se forma glucosa a partir de compuestos no glucdicos. Ocurre en el hgado, por la reversin de la mayora de las reacciones de la gluclisis y por la existencia en dicho tejido de enzimas que catalizan reacciones que conforman rodeos metablicos, que obvian los pasos irreversibles de aquella va. El acetil-COAestimula la enzima pinvico carboxha-enzimadelprher rodeo metablico- y por ello la concentracin elevada de tal metabolito favorece la gluconeognesis. Tambin favorecen este proceso altos niveles de citrato y de ATP, moduladores positivos de la disfosfofructofosfatasa 1, enzima del segundo rodeo metablico. Por eso, en dependencia de las condiciones metablieas de la clula, estar jerarquizada en ella la gluclisis o la gluconeognesis. Alto nivel energtico y pltora de ciertos metabotos como el cido ctrico y el acetil-COAfavorecen esta i h a ma, en tanto que un bajo nivel energtico favorecer la gluclisis. El ciclo de las pentosas constituye una va de oxidacin directa de la glucosa, de especial relevancia en ciertos tejidos. Esta va consta de 2 fases: unaoxidativa y una no oxidativa; en dependencia de los requerimientos metablicos estar jerarqnizada una n otra fase del ciclo. As cuando se requiere ms NADPH que ribosa-5-(P),est favorecida la fase oxidativa y se pueden obtener 12 NADPH porcada glucosa mmpleSin tamente oxidada hasta COZ. embargo, cuando lo que se requiere es principalmente ribosad-(P), es la rama no oxidativa del ciclo lafavorecida,e incluso puedellegame a formar este metabolito a partir de fmctosa--(P)y de 3 fosfogceraldehdo provenientes de la va glucoltica sin que se forme NADPH. La fotosntesises directa o indirectamente la fuente primaria de energa en todos los seres vivos. En este proceso, las molculas de clorofila captan la energa solar y la

transforman en energa qumica. Las reacciones de la fotosntesis ocurren en 2 fases: fase luminosa, que consiste en la captacin de la energa solar y su conversin en ATP y sustancias reductoras como el NADPH, a la vez que se libera oxgeno; y la fase oscura, en la que se fija el CO, para la formacin de glucosa empleando los equivalentes de reduccin del NADPH y la energa del ATPformados en la fase luminosa. La fijacin del CO, se lleva a cabo por la primera enzima del ciclo de Calvin -la ribulosa1,s-bisfosfatocarboxilasa-; en este ciclo ocurre la formacin de la glucosa en los organismosfotosintticos. A partir de glucosa-6-(P) se pueden formar otros monosacridos, ciertos monosacridos derivados, oligo y polisacridos. Los sustratos donadores son monosacridos fosfonucletidos, generalmente un azcar-UDP. La formacin de disacridos,de oligo y polisacridos se produce por la accin de una serie de enzimas glicosiltransferasasque resultan especficaspara la molcula donadora, para la aceptora y para el tipo de enlace que se forma. La sntesis de glicoconjngadosprocede en el retculo endoplasmtico rugoso o liso y en el aparato de Gol& por la accin sucesiva y ordenada de una serie de enzimas glicosiltransferasasaltamente especficasque emplean tambin como sustrato donador a derivados azcar-nucletidos,aunque en algunos casos el monosacrido se une a ciertos Ipidos intermediarios,los dolicoles. El dficit de algunas de las enzimas que participan en la degradacin de los glicoconjngadospuede provocar una enfermedad conocida como mucopolisaearidosis. En este caso se acumulan y se excretan cantidades apreciables de distintos oligosacridos;las manifestacionesclnicasque se presenten dependern de la enzima o las enzimas afectadas. El metabolismo de los glcidos ocupa un lugar central dentro de las diversas reas metablicas,y numerosas rutas se interrelacionan con las distintas vas del metabolismo glucdico. As la n'a glucoltica aporta fosfodihidroxiacetona y acetil-COA para la sntesis de ciertos Ipidos. Tambin se pueden formar algunos aminocidos a partir de tomos de carbono provenientes de los glcidos, bien directamente-cido pirvico a alanina por reacciones de transaminacin-, o bien por la formacin de metabolitos intermediarios del ciclo de Krebs a partir de glucosa y otros monosacridos, y la conversin ulterior de tales metabolitosen ciertos aminocidos. La formacin de glucosa a partir de compuestos no glucdicos, por la glnconeognesis, pone de manifiesto la interrelacin inversa. Efectivamente, algunos aminocidos y la fraccin glicerol de las grasas son precursores de este proceso. Es bueno sealar,sin embargo, que en los animales superiores no es posible la formacin de glucosa a partir de cidos grasos, con la excepcin de la fraccin propionil COA, que se produce por la degradacin de los cidos grasos de cadena impar de tomos de carbonoo ramificados. La jerarquizacin de algunas de las vas metablicas de los glcidos, en dependencia de las condiciones metablicas de las clulas y del organismo y los numerosos vnculos e interrelaciones que se establecen entre los diferentes tejidos en diversas situaciones, son aspectos esenciales en el control y mantenimiento del equilibrio metablico y en el funcionamientointegral y armnico del individuo, como podr constatarse con mayor profundidad en la seccin dedicada a la integracin y regulacin del metabolismo.

Introduccin a la seccin

- 1hombre ingiere diariamente cantidades variables de lipidos. Sin embargo,

slo pequeas cantidades de vitaminas liposolubles y algunas de cidos grasos esenciales son imprescindibles en la dieta. Todos los dems Ipidos pueden ser sintetizados en el organismo segun sus necesidades y en dependencia de las condiciones nutricionales, pues ste contiene la dotacin enzimtica necesaria. La heterogeneidad de los lpidos se manifiesta tambin en la gran diversidad de vas metablicas en las que participan, en las cuales existen eficientes mecanismos de regulacin que permiten la adaptacin a los cambios del medio. Esta seccin est estructurada en 7 captulos. El 47 se dedica a las transformaciones digestivas que experimentan los Ipidos provenientes de la dieta, y que permiten que sus componentes sean absorbidos por la mucosa intestinal y puedan ser utilizados por los diferentes tejidos. El transporte de los lpidos a travs de los lquidos corporales, unidos a la albmina o formando parte de lipoprotenas complejas,ascomo las interrelaciones y transformaciones de estas ltimas, ser tratado en el siguientecaptulo. A partir del captulo 49 se inicia el estudio del metabolismo de cada tipo de Ipido en particular. Se comienza con el metabolismo de los triacilgliceroles,compuestos de gran importancia biolgica como reserva energtica de nuestro organismo. En primer lugar se abordarn los procesos relacionados con su sntesis, conocidos en su conjunto como lipognesis, y a continuacin se describir, en el captulo 50, dedicado a la liplisis, la degradacin de los triacilgliceroles y de sus componentes. El estudio detallado de estos

J5

Tornado dc Biuchernistry. Lubcrl Stryer. Cuarta cdicin, 1995

2 procesos, as como su regulacin coordinada es de gran importancia prctica, pues permitir comprender ulteriormente, los mecanismos de adaptacin del organismo a diferentes situaciones fisiolgicascomo son el ayuno o el ejercicio fisico,~ situacioa nes patolgicas como la diabetes mellitns y los estados de malnutricin proteicocalrica, entre otros. El metabolismo de los cuerpos cetnicos, ntimamente relacionado con la liplisis, se estudia a continuacin de sta, en el captulo 51. Se enfatiza en la especializacin del tejido heptico para su sntesis y en su utilizacin por los tejidos extrahepticos en condiciones normales. Se analizan, asimismo, las causas y consecuenciasdel incremento exagerado de su sntesis, lo cual provoca el estado de cetoacidosis. En el captulo 52 se presenta el metabolismo de los fosftidos de glicerina y de los esfingolpidos, y se muestran, entre otros aspectos relevantes, las mltiples interrelaciones que se establecen con las reas metablicas de los glcidos y de los aminocidos. Finalmente se termina la seccin con el captulo 53, dedicado al metabolismo de los esteroides, en el cual se aborda la biosntesis del colesterol, haciendo nfasis en los orgenes de su precursor, el acetil-COA, regulacin del proceso, as como sus destila nos metablicos y las relaciones interorgnicas que se establecen a travs de las lipoprotenas que lo transportan. Se describe, adems, el papel del colesterol en el proceso de aterosclerosisy se analizan algunas alteracionesmetablicas relacionadas con este proceso.

2. Hidrlisis enzimtica de los triacilgliceroles que forman parte de las micelas para dar origen a cidos grasos libres, glicerol y monoacilgliceroles. 3. Paso de las micelas desdela luz del intestino delgado Iiasta las paredes celulares de los enterocitos,con las cuales interactan. 4. Entrada de los cidos grasos, glicerol y monoacilgliceroles en la clula intestinal, donde vuelveii a formar triacilgliceroles, excepto una parte del glicerol que pasa a la sangre. 5. Interacciu de los triacilglicerolesy otros Ipidos con protena$ especficaspara dar lugar a estructuras complejas, ricas en este tipo de pido, que reciben el nombre de quilomicrones. 6. Expulsin, por exocitusis, de los quilomicrones desde la clula hacia la linfa.

Luz intestinal

Enterocito

Linfa

Fosfolpidos Apolipoprotenas cido biliar + lipasa + colipasa

+ AGL(R larga) A' G T

MAG

7
Capilares
AGL (R corta) AGL (R cona) Glicerol

de AGL

+Glicerol

i .

TAG: triacilglicerol; AGL: cido graso libre; MAG: monoacilglicerol; Q: yuiloinicrn; R: cadena carbonada
Fip. 47.1. IIslluema gcncral de los procesos de digestin, absorcin y transporte de los triacilglicerolcs en el intestino.

Sobre los triacilgliceroles se produce, al nivel del estmago del hombre,la accin cataltica de la lipasa gstrica estable en el medio cido. Exista la duda sobre si esta enzima detectada en el estmago era realmente de origen gstrico o pancretico, y que su presencia en el estmago se debiera a un reflejo a travs del piloro. Sin embargo, ciertas caracterkticas de esa enzima demuestran su existencia individual. Por ejemplo, se ha comprobado que tiene un rango de pH ptimo con valores bajos (entre 3 y 61, presenta su actividad cataltica sobre triacilgliceroles que contienen cidos grasos tanto de cadena corta, como mediana o larga, estos ltimos generalmente insaturados. Adems, su accin se produce sobre el enlace ster de la posicin 3, por lo que rinde como productos, cidos grasos libres y 1-2 diacilglicerol.

o
H,c-o-4-R,
+

o
Hc-o-c-R,
Lipasa H20 gsirica

ll

O ll R C-O-CH

l
l

l 1l HIC-O-C-R3

O 1l tR?-C-O-CH

o
RiC-CM

lI

(Insaturado)

La lipasa gstrica tiene importancia particular durante el periodo neonatal, cuando la lipasa pancretica puede tener actividad escasa y es necesaria la digestin de la grasa lctea. La grasa de la leche contiene cidos grasa9 de cadena corta y mediana, por lo general esterificados en la posicin 3. Por lo tanto, dicha grasa parece ser un buen sustrato para a t a enzima. La accin de la lipasa g5trica tiene una funcin importante no slo en los lactantes. La hidrlisis inicial de los triacilgliceroles en el estmago reviste cierta importancia tambin en el adulto, pues da lugar a productos ms hidrosoluhles y anfipticos que tienen la propiedad de interactuar doblemente: por su cabeza hidrofnica, con las molcula9 de agua, y por sus colas hidrofbicas, que interactan entre s, disminuyendo la tensin superficial en la interfase lpido-agua, contribuyen as a estabilizar las emulsiones ms fcilmente digeribles al nivel intestinal. Las sustancias que poseen esta propiedad se denominan tensioactivas. Los cidos biliares constituyen otro tipo de sustancias con accin "detergente", de gran importancia en la digestin de los Ipidos en el intestino delgado.

Funcin de los 6cidos biliares en La digestin y absorcin de los Lpidos

Los cidos biliares son Ipidos esteroideos (captulo 13) sintetizados por el hgado y segregados con la bilis en el duodeno. A valores del pH intestinal -por encima del pK del grupo carboxilo correspondiente-, estos cidos se encuentran como aniones formando sales (salesbiliares), estructura que incrementa el carcter anfiptico de tales compuestos y en consecuencia sus propiedades tensioactivas o "detergentes". En la prctica es frecuente emplear los tnninos cidos biliares y sales biliares indistintamente. Por lo general, stos se incorporan a la bilis como conjugados de compuestos como la glicina, formando el cido glicoclico en este caso (captulo 13). En las condiciones apuntadas, las sales biliares forman micelas. Estas micelas son partculas coloidales de dimetro inferior a las gotas emulsionadas de Ipidos, y en ellas las sales biliares estn en equilibriocon sus propias molcula9 libres en la dispersin. Es comn llamar concentracin micelar crtica a la menor concentracin de estos Ipidos, capaz de constituir una micela estable, que puede llegar a ser slo de 4 molculai. Las micelas de sales Mares se originan segn los mismos principios fisicoqumicos mencionados para el caso de otros Ipidos: su cabeza fuertemente hidrofnica, constituida por los grupos OH y carboxilato, es atrada por los dipolos del agua formando puentes de hidrgeno, mientras que sus residnos apolares -anillos condensados del ciclo pentanoperhidrofenantreno- interaccionau entre s alejndose de la fase acuosa. Las micelas portan cargas elctricas de igual signo, lo cual, por repulsin electrosttica, impide su coalescencia en partculas de mayor tamao. A las micelas de sales biliares pueden unrseles otros Ipidos menos solubles en agua, como triacilgliceroles, monoacilgliceroles, steres de colesterol y otros; se constituyen as micelas mixtas, en las cuales las sales biliares ocupan su periferia en contacto con el entorno acuoso, mientras qne los dems Ipidos quedan protegidos en el interiordelaestructura micelar. La funcin de las sales biliares en la digestin de los Ipidos es, por una parte, favorecer la formacin de micelas que aumenten su grado de dispersin y, por otra, activar la lipasa. La eficiencia del procesode digestin estar favorecido, por lo tanto, cuando exista una adecuada concentracin de sales biliares. Si en ausencia de estos compuestos la absorcin de los Ipidos no llega a cesar totalmente, la eficiencia del fenmeno disminuir. En este caso, la mayor o menor velocidad de absorcin depender del grado de hidrosolubilidad del Ipido. En el caso del colesterol y las vitaminas A g K, por ser tan poco solubles en agua, las secreciones biliares resultan absolutamente indispensables para su absorcin. En el intestino delgado es donde se lleva a cabo fundamentalmente la digestin de 10s triacilgliceroles, por actuar allla principal enzima digestiva de estos Ipidos: la

Fase polar

Micela

lipasa pancretica o esteapsina. Esta enzima se segrega por el pncreas exocrino como zimgeno (esteapsingeno)y es activada en la luz intestinal por las sales biliares, la colipasa e,indirectamente,por el Caz+. El rango de pH ptimo de la lipasa pancretica se encuentra entre 6 3 y 8,s.Es ms especficaen el caso de enlaces steres en la posicin 1del glicerol, al parecer por elmayor carcter nncleofilico de esas plazas; su actividad tambin es mayor sobre sustratos portadoresde cidos grasos insaturadosy de cadena superiora los 1 tomos de carbono. 0 De forma simar a como lo hacen ohas enzimas lipotiticas,la lipasa pancreicaacha en la interfaselpido-agua de las gotas de emulsin,y los productos tambin son cidos grasos libres y 2-monoacgliceroles. Las sales biares tienen la doble funcin de activarlalipasa y esiabizarla emulsin, con lo cual la accin de la enzima es ms efectiva. La presencia en la leche materna humana de una lipasa que se adiva por sales biares es un factor que asegura la digestin de esa leche cuando se pone en contacto con las sales biliares en el duodeno, aun cuando hayadficit de lipasa pancretica como ocurre en los recin nacidos prematuros. La colipasa es una pequea protenade 1 kD,segregada tambin por el p n c m en 2 forma de procolipasa, que por accin de la tripsina se transforma en colipasa activa al liberar un decapptido en el extremo N-terminal desu cadena polipeptdica. La colipasa se sita tambin en la interfase Ipido-agua, interacciona con la lipasa y provoca un aumento de la actividad de esta enzima. Por otra parte, el Caz+ necesario para la actividad de la fosfolipasa A,, la que es hidroliza el enlace &ter de la posicin 2 del fosfolpidocuyos productos Oisofosftidos), por su accin "detergente", c&ribnyen a la accin de lalipia. Los monoacilgliceroles contienen el cido graso unido por un enlace &ter en el carbono 2 que no puede ser hidrolizado normalmente por las tipasas. Su separacin enlace &ter primario. Este requiere de la isomerizacin a la forma de 1-monoacilglicerol proceso es relativamente lento, por lo que menos de125 % de los iacilglicemlesingeridos es degradado en forma completa a glicerol y cidos grasos.

Fig. 47.2. Accin cataltica de las fosfalipasas sobre los fosftidos de glicerina. Ntese las enlaces steres cuya hidrlisis eatalizan estas enzima%

En cuanto a los fosftidos de glicerina, su digestin es catalizada por fosfolipasas especficas, segregadaspor el pncreascomoproenzimas de las fosfolipasasdelosfosftidos de glicerina, de las que se conocen diversos tipos: A,, A,, B, C y D, especficaspara uno de los enlaces steres, segn se muestra en la figura 47.2. La tipo A, acta en la posicin 2 del fosftidode glicerina, y deja libres un cido graso, generalmenteinsatnrado,y 2-lisofosftido.

H,C-O-C-R,

lI
II

RTC-O-CH

11

I
I

O Fosfolipasa I1 H,?-O-C-R, A2 O HO-CH + H20

O 11 R-C-OH

La fosfolipasa B o lisofosfolipasa puede actuar sobre el 2-lisofosftido, y ello favorecela liberacin del cido graso en la posicin 1y el derivado glicerofosforilode la base presente, el cual asu vez puede ser degradado en glicerol-3-fosfatoy una base por accin de una fosfatasaespecfica.

H,y-O-C-R, HO-CH H,C-O-P-Base I o-

H,C-O-P-Base
I

0-

O
ll

+ H20

Fosfolipasa B

H2C-OH I HO-CH

o ll

R-C-OH

Los glicerofosforilbasepueden ser tambin productos de la accin simultnea de las fosfolipasasA, y A, sobre el fosftido correspondiente. por &in de la fosfatidasa C se obtiene 13-diacilgliceroly fosforilbase.

HC-O-C-R,

9
Fosfolipasa O H>C-O-C-R CT C - O1 1- C H I + H,O d R +
-

RIC-O-CH

II

'
l

H-O-P

Base

H,C-OH

O-P-Ol 0-

'

Base

0El primero es, a su vez, sustrato de la lipasa pancretica, y el fosforilbase es hidrolizado por fosfatasasespecficas de la mucosa intestinal. Ntese tambin que la accin combinada de las fosfatidasasA,, A,, B y C puede dar origen a cidos grasos, glicerol libre y fosforil base, si tienen como sustrato los fosftidos de glicerina. Similarmente a como ocurre con otras proenzimas pancreticas, la profosfolipasa A, es convertida,por la tripsina,en fasfolipasaA,,la cual requiere Ca" parasu actividad nomial

El colesterol en la dieta, como ya sabemos, puede presentarselibre y esterificado con cidos grasos.En su forma libre se absorbe como tal, no assus steres,que requieren para su digestin la accin cataltica de una hidrolasa especfica (colesterolesterasa), presente en el jugo pancretico, cuyos productos, colesterol y cidos grasos, pueden ser absorbidos.

Absorcin de las lpidas

Debido a que las micelas son solubles en agua, permiten que los productos de la digestin sean transportados, a travs del medio acuoso en la luz intestinal, hasta el borde en cepillo de las clulas de la mucosa, donde son absorbidos al interior del epiteliointestinal. La absorcin delos Ipidos por las clulas epiteliales del intestino delgado puede ser explicada sobrela base de la difusin de estas sustancias a travs de la membrana plasmtica de dichas clulas. El proceso es prcticamente completo en el caso de los cidos grasos y monoacilgliceroles, y mucho ms bajo para otros Lpidos. Por ejemplo, slo entre el 30 y el 40 % del colesterol de la dieta es absorbido.

Loscidos grasas insaturados -lquidosa temperatura ambiente-son rpidamente absorbidos, no as los saturados que lo hacen de forma ms lenta y requieren incluso unirse a otros Lpidos de menor punto de fusin para poder absorberse.

Una vez en el interior de la clula entrica, los monoacilgliceroles son hidrolizados para producir glicerol y cidos grasos, por una lipasa diferente a la lipasa pancretica, mientras que los 2-monoacilgliceroles pueden ser convertidos de nuevo en triacilgliceroles. Por otra parte, el destino de los cidos grasos absorbidos depende de la longitud de su cadena hidrocarbonada: los medianamente largos +ntre 6 y 10 tomos de carbono-, por ser ms solubles en agua, pasan a la circulacin portal sin sufrir modificacin alguna, al igual que el glicerol, y alcanzan el hgado directamente. En cambio,los de cadena mayor -12 o ms tomos de carbono- necesitan unirse en el citoplasma a una protena hidrosoluble (protena Z), desde donde son transportados al retculo endoplsmico, en el que son activados -convertidos en acil CoA- para resintetizar triacilgliceroles. El glicerol requerido para este ltimo proceso es aportado principalmente por los 2-monoacilgliceroles absorbidos, y en menor proporcin, por el catabolismo de la glucosa mediante la formacin del L-a-glicerofosfato (glicerol activado). Los triacilgliceroles resintetizados forman estructuras globulares a las cuales se les unen pequeas cantidades de steres del colesterol, fosfolpidos y colesterol libre. stos, junto a protenas especficas llamadas apoprotenas, constituyen los quilomicrones, los que migran a travs del aparato de Golgi hasta la membrana plasmtica y se liberan en el espacio intercelular. Los quilomicrones -del griego chylos,jugo lechoso- aparecen en los vasos linfticos intestinales y en el conducto torcico despus de las comidas ricas en grasas. En efecto, en 1891, Munkcomprob en un paciente que presentaba una fstula linftica, que ms del S0 % de los triacilgliceroles ingeridos eran recobrados en la secrecin de dicha fstula. En estado de ayuno, la linfa de una persona nonnal es limpia y transparente, y se torna lechosa despus de las comidas. A travs del conducto torcico, los quilomicrones alcanzan la circulacin general en el ngulo yugulosubclavio, para pasar por la circulacin pulmonar y despus por te,jidos como el muscular, adiposo y otros, antes de llegar al hgado. Los aspectos particulares de su transporte y su metabolismo se abordan en el captulo 48.

La absorcin de los esteroides vara muchosegn el tipo de compuesto de que se trate. As, en condiciones fisiolgicas normales, el colesterol libre, proveniente de la digestin junto con la mayor parte del colesterol que llega al intestino con la bilis, es absorbido a travs del borde en cepillo de la mucosa intestinal.

Fd4iidos de glicerina
Los fosftidos de glicerina procedentes de la dieta o de la secrecin biliar son hidrolizados por las fosfolipasassegn se explic antes y sus productos son absorbidos tambin mediante las micelas,fundamentalmentecomo cidos grasos y sofosfolpidos. Las sales biliares pasan al leon, donde sn absorbidas casi en su totalidad, alcanzan la va portal hasta el hgado y de nuevo son vertidas al duodeno por las vias biliares -circulacin enteroheptica. Los Lipidos no absorbidos alcanzan el intestino gmeso, y aquuna pequefia porcin es metabolizada por bacterias; sin embargo,la mayor partede ellos seexcreta con las heces fecales,lo que constituye la llamada grasa fecal. Normalmente se absorbe m5 del 98 % de los Ipidos de la dieta, y un adulto excreta por las heces unos 5 gde cidos grasos libres procedentes de sta, y tambin de procesos endgenos -secrecionesbiliares e intestinales- y de la sntesis por bacterias de la flora intestinal. El incremento excesivo de triacilgliceroles en las heces se denomina esteatorrea, lo cual puede ser causado por alguna alteracin en los mecanismos de digestin y absorcin de los Ipidos debido, por ejemplo, a deficiencias enzimticas congnitas o adquiridas, o a disminucin en la ~ecrecin desales biliares, entre otras causas.

Resumen
Las tiacilgceroles son los Ipidos ms abundantes en la dieta humana. La acentuada hidrofobicidad de estos compuestos incide sobre sus procesos de digestin y absorcin, y para que se Lleven a cabo requieren mecanismosfkicoqumiws que favorezcan su emulsitcacin y formacin de micelas, lo que contribuye a incrementar extraordinariamente la interfase Ipido-agua y a favorecer la accin de enzimas hidroItieas. Son varias las enzimas digestivas de los Ipidos. En el caso de los riacilgliceroles, tales procesos se inician al nivel gstrico, donde acta una tipasa estable en medio cido. Pero es en el intestino delgado donde ocurre fundamentalmente la degradacin de stos por la accin cataltica de la iipasa p a n d t i c a . Las iipasas, actuando sobre los triacilgliceroles, dan como productos, principalmente, cidos grasos libres, glicerol y 2-monoacilgliceroles. Una hidrolasa inespeeca -esterasa iipdica de origen pancretico- c a m a , tambin al nivel del intestino delgado, la hidrlisi de los steres del colesterol y otros steres. La digestin de los fosfolpidos se lleva a cabo en el intestino delgado por accin de fosfoiipasas o fosfatidasas, de las cuales se conocen diversos tipos. iirs Las sales Vlae y algunos productos de la degradacin de los lpidos tienen propiedades tensoactivas que favorecen la estabizacin de las emulsiones en el intestino delgado y, por lo tanto, hacen ms eficiente la digestin y la absorcin de los lpidos. Los cidos grasos de cadena larga y los monoacilgliceroles son absorbidos por las clulas epiteliales del intestino delgado y en el interior de stas vuelven a sintetizarse triacilgiiceroles, los cuales se unen a protenas especficas (apoprotenas) formndose los quilomicrones que pasan a la cireuiacin Linftica. l ~ ~ n Los cidos grasos de cadena corta y el glicerol a l ~ ~ lel hgado directamente a travs de la circulacin portal. Las heces fecales suelen contener pequeas cantidades de lpidos, en especial triacilgliceroles que no han sido absorbidos, cuyo incremento, por diversas causas, da origen a la esteatorrea.

Ejercicios
l. Mencione los principales Ipidos de la dieta y de stos diga cules son los ms abundantes. 2. Enumere las etapas generales de la digestin y absorcin de los triacilgliceroles. 3. Establezca una comparacin entre la lipasa gstrica y la pancretica teniendo en cuenta: la especificidad y las caractersticas cinticas de cada una, as como los productos de su accin. 4. Cite los tipos de fosfolipasas (fosfatidasas)que intervienen en la digestin de los fosftidos de glicerina, indique su accin cataltica especfica y mencione los productos a que dan origen. 5. Jusique la importancia de la emulsificacin y formacinde micelas en los procesos de digestin y absorcin de los Ipidos. 6. Explique los mecanismos de absorcin de los Ipidos de la dieta. 7 Analice las consecuencias de una obstruccio crnica de las vas biliares en la . digestin y absorcin de los Ipidos. 8. Diga qu son quilomicrones, cmo se originan y cul es su funcin en la absorcin de los lpidos. 9. Un paciente presenta una fstula que comunica el sistema de drenaje linftico del intestino con las vas urinarias. Cmo ser el aspecto de la orina en ayunas y despus de una dieta Nca en grasas? Fundamentesu respuesta.

Algunos Ipidos constituyen componentesestructuralesde las membranascelulares, las cuales estn en constante renovacin, otros se almacenan y se movilizan segn las condicionesmetablicas del organismo y otros cumplen diversas funciones biolgicas en distintos sitios, de modo que no es difcil comprender la importancia de su transporte de unos tejidos a otros, ya sea a partir de su absorcin intestinal o desde rganos como el hgado, donde se sintetizan activamente. La cantidad y tipo de lpidos que se transportan varan en dependencia de diversos factores metablicos y, en especial, de las caractersticasde la dieta. La caracterizacin de los Ipidos del plasma humano muestra la presencia de los siguientes tipos: triacilgliceroles, fosfolpidos, colesterol libre y esterificado, adems de pequeas cantidadesde cidos graos de cadena larga no esterificados. La concentracin normal de cadauno se muestra en la tahla 48.1.

mbla 481 Lpidos del plasn~a humano

Lpido
Triacupiiceml Colesterol t t l oa

mm0l.L-' Promedio Rango

1.6 5,2 1,4 3.1 04 0.9-2 2,843 0,7-2,7 1,X-5,s 0,2-0,6

mg.dL.' Promedio Rango

78 200 145 175 10.3 35-150 150-250 136-152 145-200 5,2-133

Colestemlesteflcado Fosfolpidostotales (fosftidos deglicerina y esfingnmielinas) cidos grasos no esterificados

La insolubilidad de los Ipidos en solventes polares como el agua es una caractersticacomn a todos eUos en mayor o menor grado, por lo cual su transporte a b v s de los Iquidos corporales y en particular del plasma constituira un serio Problema biolgico si no se asociar* entre s y con protenas, de tal forma que puedan hteractuar con el medio acuoso.

MeeaniSmos de transporte
Determinados tipos de protenas constituyen los componentes adicionales que sirven como vehculo para el transporte de los Ipidos en la sangre. Entre ellos se produce una asociacin mediante interaccionesdbiles. Existen 2 formas de transporte de los Ipidos en el plasma, el complejo albmina-cidas grasos no estericadasy las lipopmtenas. EstasImassonestrucbiras complejas que transportan distintos agregados de Ipidos.

lkasporte por medio de le albmina plasmadiea

Los cidos grasos libres o no esterificados se liberan en el plasma y pasan a la circulacin general. Estos proceden principalmente de la degradacinintracelularde los triacilgliceroles del tejido adiposo en determinadas condicionescomo el ayuno y el ejercicio muscular entre otros, segn se estudiar en el captulo 50 (Fig. 48.1). Hgado y otros tejidos

Adipocito

Sangre

Fig. 48.1. Transporte de los cidas grasos libres por la albmina plasmtica. Los cidos grasos procedentes de los adipocitos se unen a 1 slbrnis na en sitios especficos y son transportados hasta otros tejidos. Obsrvese que la mayora de los sitios permanecen libres.

Albmina En la medida en que aumenta la concentracin intracelular de cidos grasos libres, stos se difunden a travs de la membrana plasmtica de los adipocitosy de las clulas endoteliales al plasma. All se unen a la albmina, la cual constituye la protena plasmtica ms abundante. sta tiene un peso molecular de 66 200 D. En su superficie se han descrito 10 sitios de unin de afinidad variable para los cidos grasos, sin embargo, como promedio se unen solamente 2 por molcula de albmina. Las concentraciones del complejo albmina-cidos grasos vara entre 0,2 y 0,6 mEq.L-' de plasma en los perodos interalimentarios. Inmediatamente despus de las comidas, los valores descienden hasta cerca de 0,l mEq.L-', sin embargo durante el ayuno pueden aumentar hasta alrededor de 0,s mEq.L" y en la diabetes mellitus descompensada la cifra puede elevarse hasta 2 mEq.L-' o valores an mayores. En su composicin se encuentran los cidos grasos de cadena larga, que habitualmente se encuentran en el tejido adiposo, es decir, cido palmtico, esterico, oleico, palmitoleico, linoleico y pequeas cantidades de otros tipos. La cantidad de cidos grasos que se separan de la albmina y penetran en 10s diferentes tejidos depende de su concentracin relativa en el plasma y en las clulas de cada tejido en particular. La entrada se produce a travs de un mecanismo de simporte acoplado al transporte de Na'.

Como se mostr en la tabla 48.1, en el plasma se transportan, adems de los cidos grasos unidos a la albmina, cantidades apreciables de otros Ipidos como son los triacilgliceroles, los fosfolpidos y el colesterol, cada uno en diferentes proporciones. stos forman parte detas lipoprotenas plaimticas, las cuales pueden definirse como estructuras supramacromolecnlares formadas por la agregacin de diferentes tipos de Ipidos con protenas globulares especficas llamadas apoprotenas.

Apoprotena

Apoprotena integral

Estnicura general de las LipoproteOas

Aunque existen variaciones estructurales considerables entre los diferentes tipos delipoproteinas, hay una regularidad en la disposicin de sus componentes que puede ilustrarse en una lipoprotena utilizada como modelo general (Fig. 48.2). h e nos muestra que en el ncleo central de la partcula niicelar se agrupan los Ipidos no anfipticos-triacilgliceroles steres del colesterol- y alrededor de este ncleo se y encuentran las apoprotenas y los Ipidos anfipticos -fosfolpidos y colesterol libreorientados con las porciones polares hacia el exterior en monocapas que estn en contacto con el medio acuoso donde se hallan. La organizacin estructural de las lipoprotenas se mantiene por interacciones dbiles entre sus componentes, lo cual facilita los intercambios moleculares que se producen durante sus transformaciones metablicas intravasculares.

Ncleo apolar

TAG: triacilgliceroles; EC: sterer de colesterol.

Fig. 18.2. Estruetiira generalir;ad;r dc una lipuproteina plasmtica (corte transversal). Obsrvese la disposirin de las porciones polares de los eomponcntes hacia el ertcrior, cn contacto can el medio acuoso, ) en el ncleo, los cunipoiientcs no anfiptitor.

C l d a e i o de las LipopmteOas pla~nti~&<3

Las lipoprotenas plasmticas constituyen un grupo diverso de estructuras con una proporcin variada de Ipidos y protenas que les confieren propiedades y funciones de transporte especficas a cada una de ellas. Para su clasificacin se han utilizado tcnicas de separacin y caracterizacin basadas en sus propiedades fsicas, entre stas, la ultracentrifugacin con el mtodo de flotacin y la electroforesis de lipoprotenas. Las caractersticas generales de estas tcnicas fueron descritas en el captulo 9. La variantede ultracentrifugacin utilizada aqu tiene su fundamento en la baja densidad de estas partculas en relacin con el resto de las protenas plasmticas, debidoal contenido lipdico de las lipoprotenas, por lo cual stas flotan en el lquido a determinadas velocidades de centrifngacin. El procedimiento puede realizarse utilizando como disolvente una solucin de NaCl con unadensidadde 1,063g.mL-' a 26"C, y permite clasificar a las lipoprotenas segn su coeficiente de tlotacin en unidades Svedverg (S en 5 tipos principales, en orden creciente de densidad: 1. Quilomicrones (Q). 2. Lipoprotenasde muy haja densidad -VLDL,del ingls very low densiQlipoprotein. 3. Lipoprotenas de densidad intermedia -IDL, iMermediate density lipoprotein. 4. Lipoprotenas de haja densidad -LDL, Ion density lipoprotein. 5. Lipoprotenas de alta densidad -HDL, Iiigh density lipoprotein.

a,

c .-

Protenas plasdticas
,

+
.

Las HDL presentan 3subfracciones-HL,, HL, y HD1,- que se diferencian entre s por su composicin estructural y algunos aspecto~fnncionales. Por otra parte, se clasifican de acuerdo con su movilidad electrofortica en ~oproteas beta y prebeta,de forma semejante a como se hace con las globulinas alfa, Plasmticas. Los quilomicrones no muestran apenas migracin electrofortica y Pemdnecen en el origen (Fig. 48.3).

Fiz. 48.3. Scparntin dc lipoprol~iiias plasmticas por elcrlroforesis en gel de agarosa. Se ohserva la relariii de sii movilidad elrcti.ofw rtiea con la de algunas glubulinas iilasmiticas (u,,u, y fll.

En la tabla 48.2 se muestra la clasicacin de las lipoprotenas segn los 2 criterios mencionados, ascomo una caracterizacin parcial de cada una.
lsb~n 483. Clasificacin y caracterizacin de las lipopmtenas humanas

VLDL Intestino Intesnoe hgado

IDL
VLDL

LDL

HDL
Hgado e intestino 0-9
5-6 d

VLDL
2-12

\Pida media

1h

23-33 d

Componentes (% peso seco): Protenas Total de ipidos

% del total de ipidos:

1-2 98-99

21

33

79

67

Triacilgliceroles Colesterol Fosfotpidos cidos grasas libres Apoproteinas presentes Criterioel~fortico

88

4 8 A-1, A-I1,B-48, C-1,C-11 y C-III N migra o

56 23

20
1

B-100, C-1, C-11, C-111y E

hbeta

29 43 27 1 B-100, C-1, C-11, C-111y E Entre beta y pre-heta

13 58 28

16

40 44 A-1, A-11, C-1, c-n, C-111, D y E

1 B-100 Beta

Se ha descrito un tipo adicional de lipoprotena en el plasma humano, cuya concentracinaumentada se asocia con un mayor riesgo de aterosclerosis. Se trata de la lipoprotena (a), una variante de la LDL, en la cual la protena principal apo B-100 est asociada con otra conocida como apo (a) que se describir ms adelante. Apopmtemas Como yaseseal,lasprotehasqueformanpartedelaslipoprotenas reciben el nombre de apolipoprotenas o apoprotenas. Al menos 7 tipos de stas se encuentran distribuidas entre las diferentes lipoprotenas plasmticas del hombre y todas estn constituidaspor una sola unidad globular, excepto la apo A-11 que es un dmero. Todas se caracterizan por tener un elevado contenido a helicoidal, el cual se incrementa y estabilua cuando stas se incorporan a la estructura de las lipoprotenas. Por otra parte, cada lipoprotena tiene una composicin caracterstica en apoprotenasque les confieren propiedades y funciones especficas,de forma tal que le permiten una buenainteraccin con las molculas de agua del medio,lo que favorece su solubilidad. Adems, las uniones dbiles que se establecen entre los Ipidos y las apoprotenas facilitan el intercambio de estas ltimas entre diferentes tipos de lipoprotenas en el curso de su metabolismo. Las funciones de las apoprotenas son variadas. Algunas contribuyen a la solubilidad de los lpidos que forman parte de las lipoprotenas, otras modifican la actividad de enzimas esuecficas durante el intercambio de Iuidos entre las poprotenas o de stas con los tejidos. Finalmente, determinadas apoprotenas sirven de seales de reconocimientomolecular (ligandos)de las lipoprotenas con los receptores celulares. Las apoprotenas se designan con letras maysculas: A,B, C, etc. Existen varios subtipos: A-1, C-1,B-48 y otras.

E n la tabla 48.3 se resumen las principales caractersticas y propiedades de las principales apoprotenas.
w l a M. Propiedades de algunas apoprotenas

AP

Peso molecular (D)

Caractersticas

Funcin Activadora de la LCAT. Ligandopara el receptor de HDL

inhibela LCAT. Activa la Lipa heptica de lipopmtena
Es esencial en la formacin de los Q y las VLDL en el intestino

Protena principaldelas HDL, contiene 245 aminocidos A-II Protena ghucturai de las HDL. Formadapor2cadenas polipeptidicasidnticas Se encuentrasolamenlos Q
y en sus remanentes

Protena principalde las LDL. Formadaporuna sola cadena polipeptdica de 4 536 aminocidos -lamayorcadena polipepidicamnocida
C-1

Ligando para el receptor de LDL

Contiene57 aminocidos Contiene 85 aminoddcs Esunagcopmtena. Contiene79 aminoacidos Ismhin mnocida como pmtenatransporiadora desteres de colesterol Se asocia con la HDL y la ACAT

Activadora de la LCAT Activadora dela l i p a de lipopmtena

W e la lipasa h delipopmtena. Activa la ACAT

c-n

Es una protena ricaen aiginina.

Se encuentra en las VLDL y los Q

Ligando pararrceptor de remanentes de Q y VLDL

La apo (a) descrita como componente de la lipoprotena (a), contiene 4 259 residuos de aminocidos, organizados en segmentos repetidos que son homlogos del plasmingeno, una protena plasmtica que en su forma activa tiene accin fibrinoltica. La funcin normal de la apo (a) en seres humanos no se conoce, aunque se ha planteado su posible participacin en la cicatrizacin de las lesiones vasculares.

Metafmliam de las Lipopmteias

Las Lipoprotenas tienen la funcin de transportar diferentes tipos de Ipidos entre las clulas de diversos tejidos. Los mecanismos por los que esto ocurre son complejos

e incluyen fenmenos que van desde su sntesis hasta su captacin total o de parte de sus componentes por los tejidos. Por lo tanto incluyen, por una parte, procesos que tienen lugar en el interior de las clulas y, adems, un grupo de transformaciones propias de las lipoprotenas que ocurren en lasangre. En estos procesos intervienen enzimas y receptores especficos cuyas caractersticas sern tratadas al abordar el metabolismo de cada una de las lipoprotenas. Las tipoprotenas plasmticas son sintetizadas, fundamentalmente, en el intestino o en el hgado, o al menos uno de sus componentes se origina en uno de estos tejidos. Aunque no se conocen todos los detalles del proceso de sntesis, ensamblaje y secrecin de todas las lipoprotenas, se ha logrado una comprensin aceptable de estos procesos. Esto permite utilizar determinados modelos para su explicacin generalizada. El retculo endoplasmtico rugoso y liso y el aparato de Golgi tienen, cada uno, una participacin especfica en la sntesis y modificaciones de las protenas o de los Ipidos (captulo 21). Se ha demostrado, as mismo, la participacin del sistema de endomemhranas en los procesos de ensamblaje y secrecin de las lipoprotenas al plasma. Esto se ilustra ms adelante con el modelo de formacin y secrecin de los quilomicrones. A continuacin se describen brevemente las transformaciones metablicas de cada una de las lipoprotenas plasmticas. Metabolismo delos quilnmicrones. Los quilomicrones son lipoprotenas ricas en triacilgliceroles que se sintetizan en el intestino y transportan, fundamentalmente, los triacilgliceroles y steres de colesterol obtenidos de la dieta hasta otros tejidos del organismo. Los quilomicronesson, en general, las lipoprotenas de mayor tamao, aun cuando tienen un dimetro muy variable. Los ms grandes se sintetizan durante la etapa de absorcin de los Ipidos de la dieta, mientras que las partculas ms pequeas y ms densas, con caractersticas similares a las VLDL, pasan a la linfa durante los perodos interalimentarios, y sus Ipidos derivan, principalmente, de la sntesis intestinal y de las secrecionesbiliares. Los quilomicrones recin sintetizados contienen alrededor del 1 al 2 % de apoprotenas (tabla 48.2), pero su composicin se modifica durante el metabolismo de estas partculas. En la figura 48.4 se ilustra la formacin y secrecin de los quilomicrones. Las apoprotenas se sintetizan en los rihnsomas del retculo endoplasmtico mgoso y son incorporadas a la lipoprotena en el retculo endoplasmtico liso, que es el principal sitio de sntesis de los triacilgliceroles. La lipoprotena transita despus por el aparato de Golgi, donde se le adicionan residuos de glcidos y es finalmente liberada por fusin de las vacuolas secretorias con la membrana plasmtiea (exocitosis). Los quilomicrones pasan a los espacios entre las clulas intestinales y de ah al sistema linftico (quilferos) donde forman el quilo. Luego son vertidos a la circulacin sangunea por medio del conducto torcico. Se ha demostrado que en el intestino del ser humano se sintetizan adems de la apo B-48, las apo A-1, A-11 y muy pequeas cantidades de apo C. Los quilomicrones recin secretados no contienen apo E ni prcticamente apo C. Estas apoprotenas, que son necesarias para su metabolismo, junto con cantidades adicionales de fosfolpidos son adquiridos por transferencia desde las HDL, una vez que los quilomicrones entran en la circulacin. En la figura 48.5 se muestran las transformaciones sucesivas que sufren los quilomicrones. La depuracin de los quilomicrones de la sangre es relativamente rpida, en el hombre dura menos de 1h y en animales pequeos es del orden de algunos minutos. Se ha demostrado experimentalmente que alrededor del YO % de los cidos grasas de los triacilgliceroles son captados por el tejido adiposo, el corazn, el msculo esqueltico y la glndula mamaria en lactancia, entre otros. En estos tejidos los quilomicrones se adhieren a las clulas endoteliales donde se encuentra la lipasa de lipoprotena fijada por cadenas de peptidoglicanos de hcparn sulfato. Esta enzima cataliza la hidrlisis gradual de los triacilgliceroles tanto de los quilomicrones como de las VLDL, hasta que stos son transformados casi en su totalidad en cidos graios y glicerol 0%. 48.6).

-,

,~~. ,

, .

.
i

p&cul&de pre-lipoprotena

.~--Membrana plasmtica del enterocito

\~

Vaso linftico

RER: retculo endoplasmtico rugoso; E L : retculo endoplasmtico liso; 1: sntesis de las apoprotenas (Apo) en el RER; 2: resntesis de los triacilgliceroles, formacin de fosftidos de glicerina y pequeas cantidades de colesterol y steres de colesterol en el REL, y ensamblaje de estos lpidos con las Apo en el REL; 3: modificaciones (glicosilaciones) de las Apo y formacin del quilomicrn en el aparato de Golgi; 4:formacin de la vescula secretora; 5: secrecin del quilomicrn hacia los vasos linfticos.

Fig. 48.4. Esquema general de la sntesis, ensamblaje y secrecin de los quilomicranes en 10s enterocitas.

TAG de la dieta

Quilomicrn naciente

Remanente de quilomicrn A: Apo A; B-48: Apo B- 48; C: Apo C; E: Apo E; TAG: triacilglicerol; c: colesterol y steres de colesterol; fosfolpido; LLP: lipasa de lipoprotena.

para Apo E

n:

% 48.5. Metabolismo de los quilomicrones. Durante el transporte de los TAG desde el intestino
hacia diversas tejidos se produce, adems, una amplia interrelacin de los Q o sus remanentes con las HDL y con el tejida heptico.

Vaso caoilar ( lumen)

\

Tejidos ( cardaco, adiposo, etc.)

1

Fig. 48.6. Accin de la LLP sobre las TAG de los O. Se muestra el . . papel activador de la apo CII. Se liberan, como productos, AGL y glicerol.

Clulas endoteliales

LLP: lipasa de lipoprotena; TAG: triaci1gliceroles;Q: quilomicrones; AGL: cidos grasos libres

Muy pequeas cantidades de cidos grasos liberados continan en la circulacin unidos a la albmina. La mayor parte entra en las clulas del tejido dpnde se Liberaron y siguen vas meablicas en correspondencia con sus caractersticas especficas; por ejemplo, en el tejido adiposo van a la sntesis de triacilglicerolesde reserva, peroen el msculo, se incorporan fundamentalmente a la bea oxidacin,con lo cual le aportan energa a ste. La lipasa de lipoprotena es una glicoprotena cuya sntesis y liberacin en el tejido adiposo resulta estimulada por la insulina. Esta enzima es Liberada de su enlace con el heparn sulfato por accin de la heparina. Tanto los fosfolpidoscomo la apo C-11se necesitan como cofactores para la actividad de esta enzima. La apo C-iI contiene un sitio especficode unin a los fosfolpidos de la lipoprotena y otro sitio de unin a la enzima, dondeejerce su funcin activadora. La lipasa de lipoprotena que se encuentra en el msculo cardaco tiene una caracterstica cintica especial. Su Km para el triacilglicerol es 10 veces ms baja que la del tejido adiposo, adems, su sntesis es inducida por el glucagn y no por la insnlina. Esto constituye un mecanismo de proteccin del corazn en situaciones como el ayuno, pues as se garantiza la captacin de cidos grasos por este rgano vital con preferencia al tejido adiposo, aun con concentracionesbajas de lipoprotenas ncarj en triacilgliceroles. Despus de la accin de la lipasa de tipoprotena,los quilomicrones han disminuido de manera ostensible su tamao y su contenido de triacilglicerolesy, por lo tanto, Se han enriquecido proporcionalmente en steres de colesterol, pues, adems, en su interaccin conlas HDL,ellas le aportan cantidades adicionalesde estos ltimos Por medio de la protena transferidora de steres de colesterol (PTEC), considerada por

algunos como la apo D. La apo C-U es de nuevo transferida a la HDL, pero se retiene la apo E. La lipoprotena resultante recibe el nombre de remanente de quilomicrn y tiene un dimetro de alrededor del 50 % del quilomicrn que le dio origen. Estos remanentes son captados por el hgado mediante receptores especficosde apo E. All los triacilgliceroles residuales, los steres de colesterol y los fosfolpidos son hidrolizados y metabolizados. Meabolismo de las IlpopmieLnasde muy baja densidad y de las lipopmteinas de densidad intermedis. Las VLDL constituyen,junto con los quilomicrones, un tipo de lipopmtena rica en triacilgcemlescuya composicin y caractersticasestructnrales se mostraron en la tabla 48.2. Sin embargo, las VLDL se forman en el hgado, por un proceso similar al que describimos en la sntesis de los qnilomicrones en el intestino. stos transportan triacilglicerolesendgenos desde el hgado hacia otros tejidos. Se considera que slo menos del 10 % de estos triacilgliceroles puede ser de origen intestinal, procedente de los tipidos de la dieta. El metabolismo de las VLDL se ilustra en la figura 48.7. VLDL Naciente VLDL
@

8.100

B-100

Glicerol

A: Apo A; B-100: B- 100;C: Apo C; E: Apo E; TAG: biacilglicerol; c: colesterol y steres de colesterol; Apo
F k fosfolpido; LLP: lipasa de lipoprotena.

Fig. 48.7. Destino metahlico de las VLDL y formacin de las LDL. Obsrvese la semejanza en la accin de las LLP sobre los TAG de las VLDL en relacin con Su accin sobre los Q, descrita en la figura precedente.

De forma semejante a lo que ocurre con los quilomicrones, las VLDL recin sintetizadasinterachan conlas HDL,delas cuales reciben apo C-U,apoE y fosfolpidos adicionales, necesarios para sus transformaciones ulteriores. La vida media de esta lipoprotena es entre 2 y 4 h en individuos normales. Los triacilgliceroles son hidrolizados en la superficieendotelial de los tejidos adiposo y muscular entre otros, por accin de la lipasa de lipoprotena, cuyas caractersticasya fueron descritas. Los cidos grasos que se obtienen como producto son utilizadob por esos tejidos. Cuando existe un dficit congnito de la lipasa de lipoprotena, la degradacin de las VLDL y de los qnilomicrones se enlentece ostensiblemente, y el suero toma un aspecto opaco que puede Llegar a ser lactescente.

Despus de la accin de la lipasa de lipoprotena, las VLDL, ya con una menor cantidad de triacilgliceroles,se convierten en partculasmenores. stas intercambian de nuevo componentes con las HDL, de forma semejante a como lo hicieron los quilomicronc~, se transforman en remanentes de VLDL IL, cuya concenh-acinen y sangre 6 prcticamente no detwtahle, pues son tramfomadas deinmediato. Una parte de stas es captada por el hgado mediante receptores de apo E (8.100, E) y de esta forma se metahulizan sus componentes. Se ha demostrado que cierta proporcin de las VLDL en las ratas contiene apo B-48 en lugar de apo 1%-100. los experimentos realizados con estos animales se ha En comprohado que la mayora de las VI.DI, que contienen apo 8-48 en lugar de apo H-100 son ascaptadas y degradadas en el hgado. Sin emhargo,en el homhm una porcin considerahledeesar remanentes(iDL)son atacados por una lipasa heptica de lipoprotenas (LHLP) que se encuentra en el endotelio capilar de ese te.jido y como consecuencia sus triacilgliceroles resultan degrd&ados,con 10 cual las Il>Lse transfi>rmanen LDI,. Esta lipasa tambinse activa por la heparina, pero tiene algunas propiedades diferentes a la del tejido adiposo y otros te.jid~~sextrahepticos; e.jemplo, noes activada por la apo C-11 y tieneuna por actividad considerable de fosfolipasa. Metabosmo de Las lipopmtenas de baja densidad. Las LDL constituyen, segn se mostr en la tahla 48.2, un tipo de lipoprotena rica en colesterol, que tiene la importante funcin de llevar este lpido hacia diversos tejidos. Ellas transportan normalmente alrededor del 75 % del colesterol de la sangre y contienen un solo tipo de apoprotena, la apo 8.100. La principal va de formacin dc las LDL es a partir de las IDL, que tienen su origen en las VLDL segn se descrihi6 en el acpite anterior (Fig. 48.7),sin embargo existen evidencias experimentales de que determinadas cantidades de LDL son producidas directamente en el hgado. El tiempo promedio de extraccin de las LDL del plasma, calculado mediante marcaje de su apo B, es de alrededor de 2 das. Diariamente cerca del 45 % de esta lipoprotena es captada por el hgado y por los te,jidosextrahepticos, priqiipalmente por las glndula5suprarrenales, las glndulas sexuales y el tejido adiposo, entre otros. Despus de su formacin, a partir de las IDL (Fig. 48.7), las LDL son captadas por diferentes mecanismos: 1. Mediante un receptor de LDL (8-100, E) de elevada afinidad. 2. Por receptores de baja afinidad. 3. Por un mecanismo no mediado por receptor, tambin llamado va de "depuracin", presente por ejemplo en los macrfagos. Estos mecanismos de captacin del colesterol, as como la regulacin y sus destinos metahlicos sern tratados en el captulo 53. Si bien el colesterol de las LDL cumple una importante funcin para las clulas de nuestro organismo, cuando su concentracin aumenta por encima de los valores normales constituye un riesgo aterosclertico. Diversos estudios epidemiolgicos han mostrado que existe una correlacin positiva, en particular, entre la frecuencia de aterosclerosis coronaria y la concentracin plasmiica de LDL. Metabolismo de Las iipopmteias de alta densidad. Las HDL constituyen el otro tipo principal de lipoprotenas ricas en colesterol. Son sintetizadas y segregadas tanto por el hgado como por el intestino en forma de partculas discoidales denominadas HDL nacientes, las cuales estn compuestas por una bicapa de fosfolpidosy colesterol no esterificado. Las de origen heptico tienen unidas molculas de apo A-1, apo C, apo D y apo E. Sin embargo, las segregadas por el intestino no contienen inicialmente apo C ni apo E,sino que al parecer son transferidas desde el hgado alas HDL intestinales cuando stas se incorporan a la circulacin. Las HDL son, segn se describi antes,

'

reservorios de apo C y E, las que se intercambian con los quilomicrones y las VLDL durante el metabolismo de stas. Las HDL nacientes, discoidales, se transforman en partculas esfricas (maduras) mediante la acumulacin de steres de colesterol (apolares)que son incorporadosa la regin central (hidrofbicas)de la partcula una vez esterificados. El colesterol libre proviene del intercambio de las HDL con otras lipoprotenasy de la captacin directa de los tejidos. La esterificacin del colesterol est catalizada por la lecitina-colesterol aciltransferasa (LCAT).Esta enzimaes una glicopmtehaqueseencuentraen el plasma del ser humano,formando parte de un complejo con la HDL. Es activada por la apo A-1 y la apo C-1e inhibida por la apo A-11. Su funcin es, en primer lugar,de hidrolizar el enlace ster de la posicin 2 de una lecitina y despus transferir al cido graso hasta la posicin 3 del colesterol, lo cual da como productos una lisolecitina y un ster de colesterol.

H,C-O-C- R, HO-CH
I

o ll
O
11

H,E-O-P-O0I

colina

+ O Il

R-C-O

Se ha sealadoque existe una especificidaden el tipo de cido graso que transfiere la LCAT, debe ser poliinsaturado. Este hecho pudiera relacionarse con el efecto beneficiosode ciertos aceites de la dieta que contienen cidos grasas poliinsaturados, con lo cual se garantiza su presencia en las lecitinas de las HDL y, por lo tanto, se facilita su accin depuradora del exceso de colesterol de los tejidos. Cuando el colesterol de las HDL se esterifica, ste se convierte en una molcula ms hidrfoba que pasa a la regin central de la partcula, por lo cual disminuye la cantidad de colesterol de la capa lipdica perifrica. De esta forma se mantiene un gradiente de concentracinentre el colesterol libre de la superficie de las HDL y la concentracin en las otras lipoprotenas o en los tejidos, lo que facilita que las HDL continen captando el colesterol de aqullos. Las HDL as tramformadas,ricasen ste=$ de colestem1,se hacen menos densas y constituyen las HDL,, las cuales, por una parte transfierenlos steres de colesterol a las VLDL,a las LDLy, en menor proporcin, a los quilomicmnes, mediante un mecanismo que en el plasma humano se produce conla participacindela YEC. De esta forma una Partedelcolestemlestericadopor IaLCATalcanzaelhgado porlavadelos remanentes deVLDL ode quilomicroneso a travs de las LDL. Otra partede los &res de colesterol es incorporada al hgado mediante la captacin directa de las HDL, por un mecanismo de endocitosic.,que no se sabe con precisin si est mediado por un receptor de apo A-1 o por un mecanismo de captacinselectivade los steres decolesterol sin endocitasis,enel que Participa un receptor superficial especfico (SR-BI). Adems, la lipasa heptica de b0pruteh (LHLP)hidmlizafosfolpidosdelasuperficiede las HDL, y libera colesteml, Wees captado as por el hgado. Estas transformaciones conducen a la formacin de las mL3, pequeas y ms densas. Las transformaciones metablicas de las HDL se ms muestran en la fignra48.8.

LLP: lipasa de lipoprotena; LHLP: lipasa heptica de lipoprotena; LCAT: lecitina-colesterol aciltransferasa; c: colesterol; EC: ster de colesterol: A: Apo A-1; fosfolpido.

n :

Fig. 48.8. Metabolismo de las HDL. La figura ilustra el papel de 3 importantes enzimas: LLP, LHLP y LCAT en las transformaciones metablicas de las HDL, as como las inteironversiones HDL, - HDL, en el transporte de retorno del colesterol al hgado.

Estos mecanismos que garantizan la captacin del exceso de colesterol de los tejidos y su entrega al hgado, desde donde puede excretarse en forma de cidos biliares conjugados y como esteroles neutros, constituyen el transporte o flujo de retorno del colesterol, en el cual las HDL tienen el papel central. Esta funcin de depuracindel exceso de colesterol permite comprender la relacin inversa que se ha encontrado entre la concentracin de colesterol en las HDL y la frecuencia de aterosclerosis -principalmente de las arterias coronarias- en diversas poblaciones estudiadas. Es significativo que las mujeres premenopusicas,las cuales presentan valores normales deHDL mayores que en los hombres,muestran en general unamenor frecuencia de infartos del miocardio que stos.

En el metabolismo de las lipoprotenas pueden presentarse diversas alteraciones, cualitativas o cuantitativas, conocidas en general como dislipoproteinemias. Las cualitativas se caracterizan por alteraciones estructurales o de la composicin de las lipoprotenas y en las de tipo cuantitativopuede existir una disminucin o un aumento de su concentracin que rebase los lmites normales. stas son denominadas hipolipoproteinemiaso biperpoproteinemias respectivamente. , -generale& Consideradasen su conjunto, las hiperlipopmteinemias constituyen los trastornos ms frecuentesde las poprotehas plasmticas, los cuales a menudo guardan relacin con un aumento del riesgo aterosclertico (captulo53)y en ocasiones estn asociadas con otras manifestaciones clnicas como hepatomegalia, pancreatitis, depsitos xantomatosos y otros.

Teniendoen cuenta que existen unas lipoprotenas ricas en triacilgliceml y otras en colesterol, el aumento de alguna de estas fracciones lipdicas principales en el plasma se corresponder con el aumento de las tipoprotenas correspondientes. Las hiperlipoproteinemiaspueden tener su origen en alteracionesgenticas o ser unaconsecuencia metabtica de determinadasenfermedadescomo la diabetes mellitus y otras. Para tener una visin integral del paciente con hiperlipoproteinemia y poder hacer un diagnstico preciso y aplicar un tratamiento adecuado, se debe tener un criterio declasificacin bien establecido. CLasiEieaei6n. Las hiperlipoproteinemias pueden clasificarseteniendo en cuenta diferentes criterios, por ejemplo, segn su origen y por el tipo de lipopmtena con la que guarde relacin. Clasificacin segn su origen. Pueden clasificarseen primarias o familiares, y en secundarias. Hiperlipoproteinemias primarias o familiares. Estas enfermedades se caracterizan por tener su origen en una alteracin gentica, de lo cnal se pueden derivar algunas de las alteraciones siguientes:

1 Dficits enzimticos, por ejemplo de lipasa de lipoprotena o de LCAT. . 2. Dficit de apoprotenas,por ejemplo de apo C-H. 3. Defecto de receptores de lipoprotenas, por ejemplo de receptores de LDL.
Las manifestacionesde estas alteraciones dependen de la afectacin que cada tipo de deficiencia provoque en el metabolismo de las lipoprotenas. Algunas formas primarias se presentan con una frecuencia relativamentealta en la poblacin y a menudo estn asociadas con un alto riesgo ateroguico. Hiperiipoproteinemiassecundarias. Estas hiperlipoproteinemiascomprenden un gmpo de trastornos de los Ipidos que se encuentran asociados con algunas enfermedades o trastornos metablicos de base como son la diabetes mellitns, la obesidad, el hipotiroidismo, algunas enfermedades hepticas y renales, entre otras. Adems, pueden se inducidas por un consumo elevado de glcidos o de grasas en la dieta, por ingestin excesiva de alcohol y por la accin de ciertos medicamentos. Es importantesetialar que estas formassecundarias,muy k u e n t e s en la poblacin, son muchas veces reversible con un tratamiento adecuadode la enfermedad primaria o por un cambio en el estilo de vida del paciente. Clasificacin segn el tipo o los tipos de lipoprotenas con los cuales guarde relacin (el~sificacin Fredrickson). Segn este criterio, las hiperlipoproteinemias de se clasifican en5 tipos (1 alV), cuyas caractersticasfundamentalesse muestran en el cuadro. Para clasificaruna hipertipopmteinemia se requiere la determinacin cuantitativa delasLDL y de las VLDL en el suero del pacientedespus de 12 h de ayuno, para lo cnal se pueden utilizar diferentes procedimientos. En el laboratorio clnico habitualmente se usan tcnicas colorimtricas. La determinacin de la presencia de quilomicronemia se hace mediante el examen visual del suero despus de haber permanecido en un tubo deensayo,a4"C durante 12 h (prneba del fro). Esta pmeba es positiva si aparece una capa cremosa, constituida por los quilomicrones flotando en la supercie. Esta clasificacinse puede hacer mediante procedimientosan ms sencillos con un alto grado de exactitud, sin tener que hacer las determinacionesde 1 cuando no existan las condiciones para ello. Para lograrlo se cuantifican las Concentracionesde colesterol total y de~tria~il~liceroles suero y se hace la pnieba en el de los quilomicrones. Este procedimientose basa en el conocimiento del tipo de Ipido principal que transporta &dauna de las tipoprotenas. Estesistemadeclasicacin desarrolladopor F r e d r i h n y otros hasdo aceptado internacionalmentey es utilizado en diversos laboratorios clnicos como un criterio oPeralivofundamental para el diagnstico de lashiperlipoproteinemias,quecontnbuye aorientar el tratamiento. La clasificacin permite, adems, un manejo clnico prctico

del paciente, al mismo tiempo que aporta elementos para la comprensin de los trastornos f~iopatolgicos se presenten. que

Cuadro. ClasificaciB de las hiperlipoproteinemias

Tipo Nombre genrico y lipoprotena aumentada Hiperlipemiaexgena (quilomicrnnes) Defecto Caractersticas

Deficiencia de lipasa de tipoprotenaodeapo C-U

Depuracin lenta de quomicrnnesy VLD: Valores bajos de LDL y HDL. No aumenia el riesgo aterosclertico. Se presenta en las d'iglobulinemiasy en el Inpupuseritematoso Velocidad reducida de depuracin de las LDL. Valores elevados de LDL conducen aateroselemsis y cornnariopata Aumentael riesgo deatemclemk, puede presentame en el sidrome nefrtico,hipotiroidismo y dicglobulinemia Aparece banda elfftrnfodcaP ancha (B VLDL). Ocasiona hipercolsterolemia, xantomas y aterosclerosi.en las arteriascnrnnaiiii.;

Hipercolcsternlemia familiar (LDL)

Dficit de receptoresde LDL o receptores defectuosos Aumento en la sntesis de las VLDL Deficientedepuracinde remanentes por el hgado debido a que slo presenta la isoforma E>de la apo E que no reaca0na con el receptor deapo E Sobreproduccin de VLDL a menudorelacionada con intolerancia a laglucosae hipeiuisulinismo Causa desconocida que conduceaelevacin de VLDL y Q

Hiperlipemiacombinada (LDLy VLDL) Hiperlipemiabeta amplia (P VLDL)

Hipertriacilglicem lemiaendgena(VLDL)

Las LDL y HDL tienden aser subnorma1es.Este patrn se relaciona por lo comn con coronanopatia, diabetes mellihis tipo U, obesidad,alcoholismo y administracin de progestgeom
Se pmenta hipertriacgcernlemia e hipermlesterolemia, LDL y HDL bajas. Riesgoelevadodecornnariopatiaen algunmpacientes

Desde luego, en dependencia de las caractersticas particulares de cada paciente se puede completar el estudio de su biperlipoproteinemia con distintas investigaciones bioqumicas, geneticofamiliares u otras. Hasta ahora nos hemos referido a los aspectos positivos de la clasificacin de Fredrickson. Sin embargo, su valor informativo est limitado por el hecho de que el patrn lipoprotenico de un paciente es inconstante en muchos casos, pues est influenciado por diversos factores como son el tipo de dieta, la ingestin de alcohol o de determinados medicamentos, y el nivel de ejercicios fsicos, entre otros. Esto puede conducir a un cambio en la clasificacin, aunque estos cambios requieren de un tiempo relativamente prolongado para producirse. Otro aspecto que debemos sealar es que esta clasificacin no tiene en cuenta la concentracin de las HDL, la cual constituye un parmetro bioqunico indiscutible como indicador de proteccin aterosclertica. Por ltimo se debe enfatizar que la clasifcacin, cualquiera que sta sea, de un determinado trastorno de las lipoprotenas, si bien tiene un valor informativo Y

orientador para decidir el tratamiento, no debe ser tomada como la conclusin del proceso diagnstico, sino como el paso inicial para consideracionesulteriores y como base para otros tipos de investigaciones complementariasque se requieran segn las caractersticas individuales de cada paciente. 'iintamiento del paaente con biperlipopmteimemia El tratamiento de estos pacientes puede ser de una complejidad variable, en dependencia,en primer lugar, de la naturaleza primaria o secundaria de la hiperlipoproteinemiay, en segundo lugar, del tipo especf~co que se trate. No obstante, siempre se deben tener en cuenta diferentes de aspectos como: las indicaciones dietticas y medicamentosas, el apoyo psicolgico, las orientaciones sobre el estilo de vida y el nivel de actividad fsica conveniente, todo esto ajustado a las caractersticasparticulares de la enfermedad y del paciente.

Resumen
Las Bados grasas se transportan por medio de la albmina y, por otra parte, los triacilgliceroles, los fs@pidos y el colesterol -lo. hacen mediante las li66iO@hS.E.stasconstituyen agregadosmo~eculares complejoiGlubl~en agua - d e i d o a que se o r p n h m de -era que en el ncleo c e n s d e la ra$teulase p p a n los Ipidos no anpticos y en la superficielos anpticos, conjuntamente con las protenas (apopmtenas). Las diversos tipos de lipoprotenaa plasmeticas secaracterizanpor la naturaleza y proporcin de la f d n lipdica y por sus apopmtenas. Se clasifican, de acuerdo con el coecientede flotaan, en quilomimes, VLDL, IDL, LDL y HDL. Las orinciuales teiidos donde sei>&uwla sntesis de liw~mteinas el son intestino; el b&& L& q ~ o m i c m n se f& k o & en el inte&o:las VLDL, en el hgado y ambos tejidos partiapan en la sntesis de las HDL. Las IDL y las LDI, se feo- por la intemnversin plasmtica de las VLDL. Cuando los q ~ a m i c r o n e -ricos en triacilglicridos exbgenos- se incorporan s a la sangre, sus triaciigcem1es son bidrolizados por la accin de la lipasa de lipopmteina y se produce l transferencia de algunos componentesde la soperfioe a de &m a las HDL, con lo que se forman los quilomierones remanentes, los cuales son captados por receptores hepticos. Las VLDL -ricas en trieeglicemles endbgenos- recibn sintetizadas tambibn inte-bian, iniciaimente, algunos componentes mn las HDL y sufren la accin de la lipasa de lipopmtena, lo que da como resuiado su traostormad6n en IDL y despus en LDL. Las LDL mnstuyen las principales lipoprotehiastrsnsportadoras de colesteml en n u ~ ~ r g a n i s mSon . ! ~ degradadas, tanto en el higado como en los tejidos &, -cs i o t por 2 mecanismos en los queintervienen receptores y uno indepen&tos. La intemnversiu e i n t e d n de las diferentes lipoproteioas e d i permiten el recidaje del colesteml del organismo. El coI&rol libre, procedente de las VLDL y de los qdomicmnes, a$ como el exoeso de mlesterol Ubre de los tejidos extraheptticos son captados por las HDL y esterXcados por la accin de la enzima LCAT que se encuentra unida a esta lipopmtena. esterificado puede ser transferido al %do Con posterioridad, el a~lesterd directamentepor las HDL ricas en esta forma del colesterol (EDL,) o mediante su hmderencia previa a los remanentes de VLDL, de qdomicmnes o a las LDL. Las con&ttracioues elevadas de colesteml plasmatico contenido en las VLDL, IDL y LDL se asodan con un mayor riesgo a t e d e r 6 t i c o , y los valores altos de HDL se mn un riesgo menor. Las hiperlipoproteinemias constituyen la forma mts frecuente de dislipoproteinemias, y estn reiaaonadas con frecuenaa con la a t e d e d . Existen distintas clasificaciones, entre eas la establecida por M e E M n , la cual tiene grau utlidad para hacer el diagn6sm y orientar el tratamiento ademado

M & b

i u k m d h i o y su regukia

827

del padente. Segn esta elasiliradn, las hipertipopmteioemias se dividen en 5 tipos @-V. acuerdo con las clases de li&m~e6i&&Cada de puede

por otras enfermedades Sistemicas. En &onm

L.

se asOeian mbas causas.

tic

1 Explique por qu los lipidas no pueden ser transportados libres en la sangre. . 2. Describa las caractersticas generales de la estructura de las tipoprotenas. 3. Se cumple la relacin estructura-funcin en las lipoprotenas? Fundamente su respuesta. 4. Compare los diferentes criterios para clasificar las lipoprotenas. S. Describa el mecanismo de sntesis de las HDL y analice las consecuencias clnicas que tendra un dficit en su formacin. 6. Explique laimportanciade las apopmtenas en eImetaboLismo de laslipoprotenas. 7. Compare las funciones de las LDL y las HDL en el transporte del colesterol. S. Compare las VLDL y los quilomicrones teniendo en cuenta sus caractersticas estructuralesy metabticas. 9. Analice la repercusin metablica que tendra el dficit de insulina del paciente diabtico en el metabolismo de las lipoprotenas. 10. Analice las consecuencias metablicas que se derivan de un dficit de la enzima LCATasociada con las HDL.

La lipognesis es un proceso metablico complejo mediante el cual se sintetizan los triacilglicerolespor medio de varias etapas. Este proceso se favorece en condiciones fmiolgicas cuando el aporte de nutrientes rebasa las necesidades energticas. Aunque por lo general el organismohumano recibe una cantidad relativamente grande de cidos grasos contenidos en los triacilglicerolesexgenos provenientes de la dieta, una cantidad no despreciable de estos ltimos son sintetizados completamente en nuestras tejidos, por lo cual la lipognesis tiene una gran importancia para el hombre.

Funciones biolgicas de los triaeiipiiceroles

Los triacilgliceroles depositados en el tejido adiposo constituyen una forma eficiente de reserva de energa utilizable en los periodos interalimentarios, durante el ejercicio y otras situaciones especficas. Sirven, adems, como aislante trmico en el tejido celular subcutneo, mientras que pueden sostener en su lugar y proteger de los haumatismos externos a diversos rganos. Un hombre con un estado nutricional normal y 70 kg de peso tiene alrededor del 20 % de ste en forma de triacilgliceroles almacenados en su tejido adiposo, lo cual puede representar una reserva energtica suficientepara alrededor de 8 a lOsemanas, con una actividad fisica ligera. La estructura de los triacilgliceroles es ptima para esta funcin de almacenamiento energtico, debido, en primer lugar, al carcter hidrofbico de esas molculas, lo que permite que se acumulen en forma compacta y anhidra al nivel de todo el tejido adiposo, cuya distribucin en el organismo es extensa. En segundo lugar, porque sus principales constituyentes, los cidos grasos, son estructuras con un estado de reduccin relativamente elevado, por lo cual su rendimiento energtico por unidad de masa es alto. Otra ventaja es la especializacin del tejido adiposo para esa funcin, que se caracteriza, entre otros aspectos, por presentar las enzimas claves que participan en la regulacin de la sntesis y la degradacin de los triacilglicerolessegn las condiciones metablicas. Este tejido tiene, adems, la capacidad casi ilimitada de almacenar grandes cantidades de estas molculas de reserva (captulo 67).

La lipognesis puede ocumr a partir de fuentes pdica y no lipdica. La primera la constituyen,en primer lugar, los cidos g m provenientes de los Ipidos de la dieta que alcanzan el tejidoadiposocomo wmponentesde los triacilglicerolesde los quomicrones y,adems, las VLDLque los transportan desde el hgado donde fueron sintetizadoscon anterioridad. Poroa parte,elgcerol exgenoprovenienteptincipahentedeladigeslin de los triacilgliceroles no puede ser utilizado por el tejido adiposo por carecer de la enzima adecuada, pero s por el hgado donde est presente la gliceroquinasa que lo transformaen gceml-3-(P) y donde tambin existe una wmiderableactividad pognica Aquel glicerol puedecontribuira la formacindelos triacgliceroles que forman parte de las VLDL (captuios 48 y 67). Como fuente no Lipdica, los glcidosprovenientesde la dieta constituyenel principal origen, seguidos de algunos aminocidos que en condiciones nutncionales especiales pueden alcanzar proporciones importantes. Ambos tipos de compuestos pueden incorporarsea lalipognesismediantesu transformacin pmvia en aceol-COA en el c-aso y de los glcidos pueden hacerlo, adems, a travs del gcerol fosfato proveniente de la dihidr&acetona fosfato, segn veremos ms adelante. Los cidosgliLFOS activa& en fonna de ac COAy el glicerol-3-(i') son los inmediatosde los triacilgliceroles. En la figura 49.1 se muestra el esquema general de la Lipognesis. En los simiientesac~itessedescriben D ~ X S O S biwumicosmediantelos d e s los se formanestos precursores y los propios triacilgliceroles,ascomo los mecanismos que regulan la intensidad de este proceso en diferentes condicionesmetablicas.

Aminocidos

Fosfodihidroxi-

Glicerol

cidos grasos

Glicerol 3 - f&fato

Fig. 49.1. Esquema general de la lipognesis.

Triacilgliceroles

Biosntesis de los 4cidos gmw

La biosntesis delos cidos graso5 es el proceso deformacin del cido palmtico a partir del acetil-COA, ocurre en el citosol y est catalizadopor un sistema edmtico que complejo. Si bien desde 1907,Rapierpostul que los cidos grasas eran producidos por condensacin de unidades activadas de 2 carbonos, no fue hasta la dcada de los 50 en que se dilucid el mecanismo por el cual el acetil-COA converta en cidos grasos. se

La biosntesis debe diferenciarse bien de otros procesos complementarios que se estudiarn ms adelante como la elongacin y la desaturacin de los cidos grasos, los que tienen otra loealmcin y enzima especficas. De ah que algunos autores utilicen el trmino biasitesiscitoplasmtieapara mayor precisin. El sistema enzimiim para la biosntesis est presente en muchos tejidos, por ejemplo el hgado, rin, encfalo, tejido adiposo, glndula mamaria y pulmn, aunque de forma variable segn la especie animal de que se trate. Sin embargo, en la mayona de los animales donde se ha estudiado, se produce en mayor cuanta en el citosol de las clulas adiposas, hepticas y de la glndula mamaria activa. Adems del acetii-CoA,que es su snstratoinmediato,se requieren otros compuestos que incluyen NADPH, biotina, cido pantotnicoy ATP,ascomo el HC0;como fuente de CO,. Excepto la biona, el cido pantotnim y lauiacinapara sintezarlas cantidades suficientsde NADPH que provienen necesariamentede la dieta, los otras componentes citados tienen su origen en las propias vas metablicas del organismo.

El acetil-COA que se utiliza en la biosntesis de cidos grasos se forma fundamentalmente a partir de la descarboxilacin oxidativa del cido pirvico, que proviene del catabolismo de los glcidos y algunos aminocidos. Este acetil-COA formado en la mitocondria, cuya membrana interna es impermeable a este compuesto, requiere mecanismos que permitan el transporte del grupo acetilo hacia el citosol. Aunque han sido descritos 2 mecanismos, el ms importante cuantitativamente es el que utiliza al cido ctrico como mediador. El acetil-COA reacciona en la matriz mitocondrial con el cido oxalactico ti8:mando cido ctrico por la accin de la citrato sintasa. sta constituye la primera reaccin del ciclo de Krebs (captulo 38). A esto le sigue el paso del cido ctrico a travs de la membrana mitocondrial interna hacia el exterior, mediante un sistema especfico de transporte, hasta alcanzar el citosol. Una vez en este compartimento, por accin de la ATP-citrato liasa y en presencia de la coenzima A y el ATP, se forman de nuevo el acetil-COAy el cido oxalactico. As queda disponible el acetil-COApara iniciar el proceso de biosntesis del cido palmtico.

CH, COOH l HO-C-COOH I CH,-COOH cido ctrico

+ ATP + CoASH

9 'OoH C1
CH2-COOH

+ H,C-C-S-COA

ADP + Pi

cido oxalactico

El cido oxalacticoque se obtiene en la reaccin de la citrato liasa puede formar cido mlico mediante la mlico deshidrogenasa del citosol en una reaccin que WnsumeNADH.

C-COOH
I

NADH.H'

HO- CH- COOH I CH,-COOH

NAD'

cido oxalactico

cido mlico

Este cido mlico es transferido de nuevo hacia la matriz mitocondrial, y se intercambiacon el cido ctrico mediante un mismo transportador,despus ste puede regenerar cido oxalacticoen la mitocondria. Alternativamente,el cidomlico puede ser transformado por la enzima mlica en cido p i ~ v i c y CO,. En esta reaccin se obtiene, adems, NADPH. El cido p i ~ v i c o o puedeentrar en la mitocondria y ser transformado en acetil-COA cido oxalacw. oen

HO-CH-COOH

I CH,- COOH
cido miico

+ NAD+

COOH I O=C + CO, I CH,

NADPH.H+

cido pirvico

En la figura 49.2 se muestra un esquema general de los mecanismos descritos.

Mitocoodna cido

Fig. 49.2. Suministro de aeetil-COA y NADPH para la sntesis de cidos graos en el citosol. El cido ctrico proveniente de la mitocondria aporta el acetil-COA,y el oxalaetieo se transforma en mliro que se reincorpora a la rnitoeondria o se desearboxila, y aporta NADPH para la lipognesis.

Etapas del pmeeso

Existen 2 etapas fundamentales en la biosntesis citoplasmtica de los cidos
grasas:

1.La conversin de acetil-COAen malonil COA,caalizada por la enzima acetil-COA carboxilasa. 2. La formacin del cido palmtico a partir del malonil COApor accin dela enzima cido graso sintetasa.

Esta reaccin irreversible que constituyela etapa Limitante de la biosntesisde 10s cidos grasos y est bajo el control de mecanismos de regulacin bien conocidos, es catalizada por la acetil-COAcarboxilasa. De forma global, en esta reaccin podemos plantear que el acetil-COAreacciona con el CO, para formar malon CoA,eon gasto de energa. Esta molcula, proveniente de otras reacciones de descarboxilaciones

biolgicas de los propios tejidos del organismo, como la de la enzima mlica, es aportada directamenteen forma de HCO;.

Acetil- COA

Malonil- COA

Pero al igual que el resto de las carbodaciones biolgicas conocidas,por ejemplo, la carboxilacin del pirvieo, requiere un cofactor que transfiera el HCO;, la biotina, que acta como una coenzima Ligada a la enzima. Adems, requiere ATPcomo fuente de energa. Este gasto energticoinicial tiene una funcin esencial en el curso ulterior del proceso en su conjunto. Esta reaccin, que conduce a la formacinde malonil COA,transcurre en 2 pasos. Primero se forma un complejo carboxibiotin enzima, con la participacin del ATP, y posteriormente este complejo transfiere el grupo carboxilo al carbono 2 del grupo acetilo del acetil-COApara formar el malonil COA.
II

H,C-C-S-COA Acetil COA

Enzima - biotina -

m
+ +
Enzima - biotina

' '

-CH2C-S-COA

II

Enzima - biotina

ATP

La enzima acel-COAcarbonlasaes una enzima muitifunaonaly wmo otrasenzimas wn estas caractersocas,poseeuna altaeficienciacataltica. En las cluiaseucariticas,la enzima inactiva est constiinida por 2 subunidades idnticas, cada una de las cuales es una cadena polipeptidica que tiene 3funcioneso dominios caialcos: biona carboxasa, protena portadora de wboxibiotina y h;uiscarboxilasa, ascomo un sitioalostrico. Sin embargo, este estado protomrico es inactivo. Para su activacin esnecesuia la polimerizacinde un nmero variabledelos protmems. Es el propio cido ctrico quien realizaesta importantefuncin moduladora adicional,pues funciona como un activador alostrico, y favorecede este modo la polimerizacin, mientras que el palmitil COAy ohos ac COAde cadena larga ejercen una accin contraria que conduce ala inactivacin.

cido

Esta reaccin constituye pues, un sitio relevante de regulacin del proceso. La enzima es regulable, adems, por mecanismos covalentes y genticos, como veremos ms adelante.

Foimaun del dudo palmtieo

La formacin del cido palmtico constituye lasegunda etapa de la biosntesis de cidos grasos en la cual 1molcula de acetil-COAy 7 de malnnil COA,formadas segn las reacciones que acabamos de describir, se condensan en reacciones sucesivas,en las que se liberan 7 grupos carboxilos en forma de CO, y se utilizan los hidrgenos aportados por el NADPH; como producto final est un cido graso saturado de 16 carbonos, el cido palmtico. Este es un proceso de gran complejidad funcional, y la enzima que cataliza este conjunto de reacciones, la cido graso sintetasa, es as mismo compleja, estructural y funcionalmente. En las bacterias, plantas y otras formas inferiores de vida, se trata de un sistema multienzimtico; sinembargo,en las aves y los mamferos es una enzimamulofuncional. Su eshvchva es mucho ms cnmpleja que la de la acet-COAcarbodasa Nos referirrmos en lo adelante a esta forma por ser la que se presenta en el hombre. La cido graso sintetasa es la mayor enzima multifnncional conocida y est constituida por 2 subunidadesidnticas,cada una formada por una cadena polipepidica Su peso molecular es de 500 kD y posee 7 centros activos o sitios catalticos generados por el plegamiento de sectores contiguos de la cadena polipeptdica, los cuales corresponden, segn el orden en que actan, a las actividades enzimticas siguientes (Fig. 49.3):

1.Acetil transacilasa. 2. Malonil transacilasa. 3.3-cetoacil-PTA sintetasa (enzima condensante). 4.3-cetoacil-PTA reductasa. 5.3-hidroxiacil-PTAdeshidratasa. 6. Enoil-PTAreductasa. 7. Palmitil tioesterasa.
Posee, adems, un componente no enzimtico, conocido como protena transportadora de acilo (PTA), que es esencial para que la cido graso sintetasa pueda realizar su funcin. Dominio 11 Dominio 111

Fie. 49.3. Estructura de la cido erasa sintetasa. Es una enzima multifuncianal can 3 dominios que contienen 7 actividades enaimiitieas y la

AT : acetil transacilasa; MT: nialonil transacilasa; EC: enzima condensante;CR: 3 cetoacil PTA reductasa; HD: deshidratasa; ER: enoil reductasa; PTA: protena transportadora de acilo; TE: tioesterasa; Cis: cistena; SH: sulfidrilo. Este componente no enzimtico presenta como elemento funcional esencial, a la 4 fosfopantetena, unida covalentemente al hidroxilo de uno de sus residuos de serina. Estegrupo prosttico de la PTAcontiene en su estructura al cido pantotnico y, Por tanto, de forma semejante a la coenzima A, posee en su extremo un grupo snlfidrilo, al

que se le puede unir por un enlace tioster, el cido graso en crecimiento. De manera que la PTA funciona como un "brazo mvil'' que fija al sustrato durante su transformacin en la medida en que pasa secuencialmentepor cada uno de los centros activos de la enzima. En la cido graso sintetasa existe otro gmpo sulfidrilo imprescindible para su funcionamiento. stese encuentra en un residuo de cistena de la 3cetoacil-PTAsintetasa. En el modelo que se ha elaborado a partir de los estudios realizados, la enzima tiene 3 dominios unidos entre s por sectores polipeptdicos. En el dominio 1se encuentran las actividadesdelaacetiitransacilasa,la malonil transacilasa y parte de la actividad 1 de la enzima condensante. El dominio 1 contiene las actividadesde la 3-cetoacil-PTA reductasa, la deshidratasa y la enoil reductasa. Se relaciona, por lo tanto, con las mciones de mluccin dependientesdel NADPH. La PTAseencuentra en este mismo dominio,entre las actividadesde reduccin y el dominio III,donde se Libera finalmente el cido palmtico por la actividad de la tioesterasa que all se encuentra. Se ha demostrado,asimismo,queel centro activode la enzima condensante depende de 2 grnpos suldriios en yuxtaposicin, que pertenecen a subunidades diferentes,y que la dimiacin dela enzima nativa en sus 2 monmeros provoca la prdida dela actividad catatica delaenzima condensante. A partir de todo estose ha propuestoun modelo que explica el requerimientode las 2 subunidadespara la accin caialtica Wig. 49.4). Divisin funcional Entrada de sustratos: Acetil COA Malonil COA

Reduccin

Liberacin del cido

Liberacin del cido palmtico

u
Entrada de sustratos

portadora de acilo; TE: tioesterasa: CIS: cistena;SH: sulfidrilo

Fig. 49.4. La cido graso sintetasa en su forma funcional. La forma activa es un dimera de los monmeros de palipptidos idnticos, en disposicin "cabeza-cola". El -SH de la 4-fosfapantetena de un monmc-ro est muy cerca del -SH del residuo de cisleina de la cetoacil sintetasa del otro manmero. El complejo funcional contiene la ''cabeza" de un monmero y la ''cola" del otro.

Los 2 monmeros se encuentran en una configuracin "cabeza-cola", de manera que se enfrenta el dominio 1 con el dominio 11y 111del otro, se determina as una divisin en 2 centrosfuncionales,los cuales pueden catalizar la secuencia de reacciones de la sntesis del cido palmtico de forma independiente, con una elevada eficiencia. El proceso biosinttico completo consta de 7 ciclos de reacciones y en cada uno de ellos se adicionar un fragmento bicarbonado aportado por el malonil COA.El receptor inicial es el grupo acetilo, y en los ciclos sucesivosel receptor ser un grupo aco con un nmero par de carbonos cada vez mayor.

M P b ls o htennediauio y su regukicin e a oi m

835

En IU primera reaccin, aliz izada por la enzima acctil trdncacilasa, una molcula rebddora de acetil-COAse transfiere al grupo sulniidricu de la cistein~ la enzima de condensante de uno de los monmeros.

o
ll

Il
+
CoASH

CHFC-S-ENZ(c0ndensante)

A continuacin la enzima malonil transacilasa combina al malonil COA con el gmpo sulfidrilo de la 4-fosfopantetena de la PTA del otro monmero.

o
'

-CH2-C-S-

II

COA + PTA- SH

II HOOC-CH2-C-S-PTA ,
2

COA-SH

La figura 49.5 resume las reacciones anteriores de una forma esquemtica. La enzima tiene, al final de estas 2 primeras reacciones, un grupo acetilo unido a la enzima condensante,y un gmpo malonilo, a la protena transportadora de acilo.

CHrC- SCo

8 Acetil COA
-00C-CH1
II

Acetil transacilasa

C- S-Co
Malonil transacilasa

O Malonil COA
Fig. 49.5. Entrada del aeetil-COA el malanil y COAal complejo de la cido graso sintetasa. Como resultado de estas 2 primeras reacciones, se han unido, finalmente, un grupo acetil a 1 enzima condensante y un grupo s malonilo a la FTA.

PAN: 4 - fosfopantetena;PTA: protena transportadora de acilo; 1 y 2: monmeros del complejo enzimtico. En la siguiente reaccin, el gmpo acetilo ataca al grupo metileno del residuo malonilo, para formar el 3-cetoacil-PTA,y liberar CO,, en lo que constituyela primera reaccin de condensacin de este proceso, catalizada por la 3-cetoacil-PTAsintetasa. Esta reaccin tiene un especial significado biolgico.

Con ella se libera el grupo sulfidrilo de la cistena de la enzima condensante, ocupado hasta ese momento por el grupo acetilo. Por otra parte, la descarboxilacin permite que la reaccin prosiga hasta el nal y facita termodinmicamente el pmceso de biosntesis en so conjunto, pues contribuyea la disminucin de la energa libre del sistema por ser una reaccin fuertemente exergnica. Obsrvese que la molcula de CO, tiberada en esta etapa, es la que fue incorporada en la reaccin de formacin del malonil COA.sta es precisamente la significacin biolgica de esa carboxilacin ATP-dependiente que analizamoscon anterioridad. Las transformaciones ulteriores se presentan en la figura 49.6.

H,C-C-CH,-C-

II

O NADP NADP+

4
a

01
3 - cetoacil- PTA 3 - cetoacil- PTA reductasa

3 - hidroxiacil- PTA 3 - hidroxiacil- PTA deshidratasa

2 - 3 enoil- PTA Enoil- PTA reductasa
Fig. 49.6. Reacciones de la biosntesis de los cidos grasos, ulteriores a la reaccin de la enzima condensante. Coma producto de estas transformaciones, donde participan sucesivamente una reductasa, una deshidratasa y de nuevo una reductasa, se forma el primer acil-PTA saturado de 4 carbonos. Obsrvese el consuma de 2 molteulas de NADPH.

PAN: 4-fosfopantetena; FTA: protena transportadora de acilo; 1y 2: monmeros de la enzima funcional activa.

Despus de la condensacin se produce la primera reaccin de reduccin, en la cual el 3-cetoacil-PTAesreducido, al nivel del grnpocarbonilo, a 3-hidroxiacil-PTA, por accin de la 3-cetoacil-PTA reductasa, que utiliza al NADPH como fuente de equivalentes redoctores. A continuacin ocurre una reaccin de deshidratacin catalizada por la3-hidmfiacil-PTAdeshidratasa,cuyo producto es el 2-3 enoil-lTA,el que posteriormente es reducido por la enoil-PTA reductasa, utilizando de nuevo al NADPH como fuente de hidrgenos. En esta reaccin se forma el primer acil-PTA saturado de 4 carbonos (butirilo). Durante todas las reacciones descritas, el grupo acilo en pmceso de tran~formacin se ha mantenido unidoa la PTA; al formarse el bntiril-PTA, ste se transf~err sulfidrilo al de cistena de la 3-cetoacil-PTAsintetasapor la accin de la acetil transacilasa. De esta formaestnpreparadas lascondicionespara la adicin de un nuevo grupo bicarhonado, aportado por el maloni1 COAal cido graso en crecimiento. Nuevamente se repite el ciclo de reacciones de condensacin, reduccin, deshidrataciny segunda reduccin paradarorigen alacil-lTAde6carbonosy assucesivamentehastafonnarelpalmiol-Pl'A quemediante la tioesterasa es liberado como cido palmtico (Fig. 49.7). Aunque el cido palmtico es por lo general el producto final de las reacciones catalizadas por la cido graso sintetasa en los tejidos adiposo y heptico, existen otros cidos grasas especficos,por ejemp10,con cadena menor de 16carbonosoramificados, que se forman en determinadostejidos como las glndulas mamarias o las glndulas sebceas respectivamente,por accin de ese mismo complejo enzimtico.

: :1
Fig. 49.7. Esquema global que muestra la formacin completa del cida palmtico por la sintetasa de eidas grasos. Las unidades bicarbonadas san aportadas sucesivamente par el mslonil COA.La tioesterasa se activa una vez que la cadena alcanza 16 carbonos.

Los primeros son residuos de acilo C,, C,, C,,, que se liberan por la hidrlisis "prematura" especfica del enlace tioster, que une al cido graso con la PTA, accin catalizada por tiosterasas solubles, controladas hormonalmente, las cuales aparecen despus en los ipidos de la leche. Mientras que en los cidos grasas ramificados la caracterstica esencial del proceso consiste en la sustiiucin del malonil COApor el metil malonil COAcomo precursor de la sntesis.

0 DI ' /I\
t

-Reduccin - Condensacin Deshidratacin

H,C-CHT C H , CC H i (CH,),r C - PTA

CH,

7 ciclos (cH;),,- COOH

+ PTA-SH

PAN: 4 fosfopanteteha; PTA: protena transportadora de acilo; 1 y 2: manmeros de la enzima multifuncional activa.

Balance general de la biosntesis de los bddw grasas

La ecuacin global para la sntesis del cido palmtico a partir del acetil-COA el y malonil COA muestra a continuacin: se

Acetil-COA+ 7 malonil COA+ 14 NADPH + 14 H'

- , palmtico + 7 CO, + 14 NADP' + 8 COA+ 6 H,O - cido

Teniendoen cuentaquecadamaloni1CoAseformaapartirdeunacetil-CoAyun CO, acopladoala transformacin deun ATPen ADPy Pi, la ecuacin global quedar as:

8 acetil-COA+ 7 ATP + 14 NADPH + 14 H* d cido palmtico + 14 NADP'

+ 8 COA+ 6 H,O + 7 ADP + 7 Pi

Fuentes de niminamn adenn dinucletidof d a t a d o reduado El NADPH interviene como cofactor en las 2 reacciones de reduccin de la biosntesis de cidos grasas. El ciclo de las pentosas (captulo 44) y la reaccin de la enzima mlica (Fig. 49.21, ambas localizadas en el citosol, constituyen las 2 fuentes fundamentales,con lo cual se garantiza un elevado cociente molar de NADPH/NADP en el citosol y, por lo tanto, el potencial reductor necesario para este proceso. La utilizacin de una u otra fuente depende del tipo de clula en que se desarrolle el proceso de biosntesis. Es significativo que los tejidos que poseen un ciclo de las peutosas muy activo son tambin especializadosen la lipognesis, es decir, hgado, tejido adiposo y glndula mamaria en lactacin.

Algunos autores reportan que en las clulas hepticas el NADPH.H+es aportado, fundamentalmente, por las reacciones oxidativas del ciclo de las pentosas, mientras que en el tejido adiposo se forma, en esencia, en la reaccin catalizada por la enzima mlica. Los orgenes del NADPH que hemos descrito evidencian un vnculo ms entre el metabolismo de los glcidos y los lpidos.

Destino del cido paimtico libre despus de la biosntesis

El cidopalmticolibre debeser activados pahit COAantesde poder incorporarse a cualquiera de sus destinos metablicos, ya sea alargamiento, desaturacin, o su esterificacin con el colesterol o con el glicerol activado. Esta ltima constituye la vid para la formacin de triacilgliceroles del tejido adiposo. Acilglicemles Esteres de colesterol ATP + COA cido palniitico Acil COA AMP + PPi P4mitil &A Esteriticacion

/c..

.,

/ \
Alargamieiito y desaturacin

l
Acil COA Esta activacin est catalizada por la acil COA sintetasa y consiste en la incorporacin de la COAacoplada a la hidrlisis del ATP, hasta AMP y PPi. Este pirofosfato es hidrolizado a continuacin por una pirofosfatasa; se liheran 2 Pi y la energa suficiente para favorecer termodinmicamente la reaccin directa.

Alargamiento de la cadena de cidos graso5

Aunque en los mamferos este proceso de alargamiento de los cidos grasas puede ocurrir en el retculo endoplasinticooen la mitocondria,es indudable que el primero constituye la localizacin principal. En ste, la secuencia de reacciones es similar a la catalizada por la cido graso sintetasa y utiliza preferentemente cido palmtico como sustrato, aunque las investigaciones han mostrado que tambin pueden actuar como molculas iniciadoras la serie de cidos grasos saturados de C,,,en adelante al igual que cidos grasos insaturados (Fig. 49.8). En la mayora de los tejidos, sin embargo, este proceso se utiliza fundamentalmente en la conversin del cido palmtico en esterico. Por otra parte, el alargamiento del estearil COAen el encfalo aumenta con rapidez durante la mielinizacin, proporcionando de este n~odo cidos grasos con 22 y 24 tomos de carbonos que estn presentes en los esfingolpidos. La secuencia de reacciones en el alargamiento al nivel del retculo endoplasmtico (alargamiento microsomal) ocurre de forma semejante a la biosntesis citoplasmticade cidos grasas; la fuente de fragmentos bicarbonadoi es el malonil COA,y los hidrgenos son aportados por el NADPH, sin embargo, los compuestos intermediarios en lugar de estar unidos a una protena transportadoradeacilos,son activadosy t~anSportados la por

coenzima A, y el sistema cataltico lo constituyen 4 enzimas unidas al retculo endoplasmtico,denominadaspor aigunos autores sistema microsomalde alargamiento o elongasa,en lugar del conocido complejode la cido graso sintetasa citoplasmtica. El alargamientomitocondrial, proceso parecido ala inversin de la beta oxidacin de cidos grasos (captuloSO), excepto en una de sus enzimas, ocurre en la matriz de este organelo. Este proceso probablemente es importante en la formacin de cidos grasos que son incorporados a los Ipidos de la mitocondria, y se diferencia del microsomal, adems, en que el acetil-COA la fuente carbonada para la sntesis, y es actan como agentes reductores tanto el NADPH como el NADH.

RpCH2-

$-S -CoA +

HOOC-

,'

--S-COA
O

Acil COA(n) 3 - cetoacil COA sintetasa R-CH,-C-"

Malonil COA

3 - cetoacil COA reductasa

'-S-COA 0 3 - cetoacil COA NADPH.H'

NADP+

Deshidratasa

\
-

Fig. 49.8. Sistema microsomal para el alargamiento de los cidos grasos. Los fragmentas bicarbanadas son apartados par el malonil COA, y la fuente de equivalentes de reduccin es el NADPH. Obsrvese, sin embargo, que el cida graso en crecimiento est unido a la COA, en lugar de la PTA, coma ocurra en la biosntesis de cidos grasos.

R-CH,-CH=?H 2 - 3 enoil COA reductasa

(:-S-COA 2 - 3 enoil COA NADPH.H+

NADP+

Sntesis de cidos grasos insaturados

La capacidad de los tejidos animales para obtener por s mismqs los cidos grasos insaturadosnecesarios para su estructura y sus funciones, es limitada en comparacin con los vegetales. Sin embargo, estos cidos grasos son muy necesarios, por ejemplo, el contenido de cidos grasos insaturados en los fosfolpidos de las membranas es importante en la conservacin de su fluidez. Por otra parte, una proporcin alta de cidos grasos poliinsatnradoslcidos grasos saturados ( P S ) en la alimentacin es un factor importante en la reduccin del colesterol plasmtico por medios dietticos y, por tanto, en la prevencin de las enfermedades coronarias. An ms, algunos de ellos, de tipo poliinsaturados, que no pueden ser sintetizados en nuestro organismo -cidos grasos esencialesdeben ser ingeridos necesariamente en la dieta y son precursores de los eicosa-

noides, un grupo de compuestos con una elevada actividad biolgica, constituido por las prostaglandinas, los tromboxanos y los leucotrienos. No obstante las Limitaciones sehaladas en los animales superiores, en stos se forman completamente algunos tipos de cidos grasos insaturados o se completa su estmctura a partir de los que seingieren en la dieta A continuacin nos referimosa esos procesos. La localizacin celular de la desaturacin de los cidos grasos es el retculo endoplasmtico. En varios tejidos, incluyendo el hgado, se forman cidos grasos monoinsahiradosa parir de sus homlogossaturados. Por ejemplo,los cidos palmtico y estericoson los precursores de los cidos palmitoleico y oleico respectivamente,los cuales poseen un solo doble enlace en configuracin cis entre los carbonos 9 y 10 (captulo 13).

Palmitoleil COA

Estearil COA

Oleil COA

Ambos procesos son catalizados por un sistema enzimtico A9 desaturasa que pertenece a las oxidasas de funcin mixta, puesto que se oxidan simultneamente 2 sustratos, el cido graso y el NADPH o el NADH, que aportan los equivalentes de reduccin. Son necesarios, adems, el citocromo b, y el oxgeno molecnlar. Un tomo de oxgeno se incorpora inicialmenteal sustrato (hidroxilacin),mientras que el otro es reducido durante la formacin de una molcula de agua en la propia reaccin. En la figura 49.9 se describe la va de formacin del oleil COAcon la participacin del cofactor NADPH como donante de electrones. Algunos cidos grasos poliinsaturados pueden formarse a partir de los monoinsaturadospor la accin combinada de los sistemas enzimticos de desaturasa y elongasa. En los animales, los dobles enlaces adicionalesintroducidos en los cidos grasos monoinsahirados estn siempm separadospor un gmpo meoleno y, de manera spec6ca, entre el doble enlace preexistente y el grupo carboxilo. Sin embargo, en las plantas puede tambin ser introducido entre el primer doble enlace formado y el carbono omega (m) o metilo terminal. Los animales tienen la desaturasa A' y, por lo tanto, pueden sintetizar la serie polnsaturada A9 o serie del cido oleico mediante la combinacin del alargamiento y la desaturacin. Serie w-9 cido oleico

Estearil COA+ Enzima Acil transferasa oA- SH Estearil- enzima

I

Hidroxiesteanl - enzima Deshidratasa Oleil -enzima Acil transferasa CoASH

. '1

1: desaturasa; 2: elongasa

Fig. 49.9. Sistema de la desaturasa microsomal- AY. La reaccin de la hidrorilasa, donde participa el citacromo b,, el O, y el NADPH, es clave en la localizacin de la desaturacin que se produce. En este caso, es especifico del tipo A'.

Sin embargo, no pueden sintetizar el cido liuoleieo (18:2cis- A'.") del tipo omega-6 ni el a-linolnico (18:3cistipo omega-3, puesto que no tienen las desaturasas requeridas.

cido linoleico (<u-6) a) CH,-CH1CH2CHTCH-ICH= CHXH, 14 13 12 11 18 17 16 15 cido linolnico (0-3)

C H CH-CHFCHr 10 9 8 7

CH2CHr 6 5

CHcCHr 4 3

CH, 2

COOH 1

stos son 2 cidos grasos esenciales que deben, por lo tanto, ser ingeridos en la dieta porque a partir de ellos se puede efectuar la sntesis de los dems miembros de la serie omega-6 y omega-3 de los cidos grasos poliinsaturados, por un mecanismo semejante al que describimos, pero con desaturasas diferentes. Por ejemplo, entre los derivados de la serie omega-6 se encuentra uno de mucha significacin biolgica, el precursor de los eicosanoides (captulo 13)(Fig. cido araquidnico (20:4cis As~n~""'), 49.10).

9 8 Linoleil COA(A " - octadecadienoil - COA) o + h!\lIl'!~i.H

-

12

11 C-S-COA
8

12

..;,o+':I P \I
C-S-COA

18

y linoleil - COA(A "" I 2 - octadecatrienoil - COA) Sistema microsmico de alargamiento (elongasa) 14 ~ a l o n i l V H

0 Dihomo - y - linoleil - COA( A
-

o
)

11

X I I . 14

0 C-S-COA - eicosatrienoil - COA) o 11

c..

Fig. 49.10. Conversin del cido linidcito en araquidnico. Se puede observar la especificidad A" y As de las desaturasas y la accin eornliinada desnturasa-eloiicasa-dcsaturasilcn In forniaiin dcl sraquidnico.

Araquidonil - COA(A

5 . 8 1,. Ill

- eicosatetraneoil - COA)

El requerimiento nutnciond de cido araquidnico puede, por lo tanto, sustituim por cido linolnico en la dieta. En la figura 49.11 se describe una panormica general de los procesos de alargamiento y desaturacibn de los cidos grasos, desde el cido palmtico hasta el araquidnico, y la formacin de los eicosanoides.

cido palmtico (C )

esatu tu racin
\,

Alargamiento cido esterico (8 1) ' Alargamiento \Desaturacin

Acido palmitoleico

KI6 A')

'k

cidos grasos saturados Dieta

L oleico Acido
. ,,

I
(Ci nA~'"'")

(c1d9) i Esta transformacin + ocurre slo en tos vegetales . ' , , , (C,sA9''2)

\ ,

,$

Acido gamma lino

J
0 1d

/
.

Alargamiento
i.,~.,.

Fig. 49.11. Esquema general de los praeesos de alargamientoy desaturacin de las cidas grasos y sus limitaciones en el ser humano. En el hombre se puede formar el cido oleiea y otras miembros de su serie. Sin embargo, no puede sintetizar el linaleieo ni el linolnico. Obsrvese su obtencin de la dieta. El araquidniea puede obtenerse directamente de sta o formarse a partir del linolnico ingerido. Las eicosanoides tienen su origen en varios tipos de cidos grasos paliinsaturados.

Bioslntesis de los triaciigiicemles

Los triacilgliceroles constituyen, como ya se ha expresado, los Ipidos ms abundantes de la dieta del hombre y su principal reservaenergticaen el tejido adiposo. Pueden ser sintetizadosen su totalidad en el organismo a partir de otros compuestos, principalmente de los glcidos. Su sntesis puede ocurrir en casi todos los tejidos, aunque su intensidad es mayor en el tejido adiposo y en el hgado. El tejido adiposo est especializado, por una parte, en la sntesisy ahacenamiento de estos compuestos, en condiciones anablicasfavorables y tiene, adems, la capacidad para su hidrlisis en condiciones en que el organismo requiera energa. Existen los sistemas enzimticosnecesarios para que pueda cumplirse esa funcin biolgica. Acabamos de estudiar los aspectos relacionados con la hiosntesis de los cidos grasos y los procesos complementariosde alargamientoy desaturacin. Estos procesos constituyen, en su conjunto, la fuente endgena de los diversos cidos grasos que pueden incorporarse a la sntesis de los triacilgliceroles junto a los provenientes de la dieta (exgenns).

Activacin de los premmom

Los precursores inmediatos para la ltima etapa de la lipognesis son el glicerol-3-(P) y los cidos grasos activados. El glicerol-3-(P) puede sintetizarse Por 2 vas diferentes: la primera, por accin de la glicerofosfato deshidrogenasa,

mediante la reduccin de la fosfodihidroxiacetona formada en la gluclisis. Esta va es ms importante en el tejido adiposo.

CH2-O-@

I Glicerofosfato CH,-O-@ deshidrogenasa

I.asegundaes a partir del glicerol, mediante la reaccin catalilada por la rnfima gliteroquinaia,cuya localizacin r s t i liniitada caii exclusivamente al hi~ado, rin e intestino. y20H CH,OH I HO-CH + ATP H+CH l Gliceroquinasa I CH,OH CHrO-@

+ ADP

La activacin de los cidos grasos consiste en su transformacin en tiosteres de la coenzima A mediante un tipo de reaccin catalizada por las enzimas acil COAsintetasas (tioqninasas), que utiliza ATP. Han sido descritas varias acil COAsintetasas, especficaspara cidos grasos de diferente longitud. Esta reaccin ocurre en 2 etapas. Se forma como intermediario el acil AMP. Est favorecida termodinmicamente por la hidrlisis del pirofosfato, catalizada por una pirofosfatasa como en otras reacciones de este tipo que han sido descritas. En esta reaccin de activacin se gastan, por tanto, 2 enlaces ricos en energa.

Eapas de la sntesis
La formacin de los triacilglicerolesa partir de sus precursores directosocurre en 2etapas. En la primera, que es lamisma paralasntesisde triacglicerolesy de fosftidos de glicerol, se combinan 2 molculas de acil COAcon el glicerol-3-(P) para formar el cido fosfatdico o 1-2 diacil glicerol-fosfato(captulo 52), intermediario comn de estas 2 vas. Esto se lleva a cabo en 2 reacciones, catalizadas por las enzimas glicerol-3-(P)acil transferasa y luego por la kofosfatidato acil transferasa
11 CH,OH R,-C-SCOA CoASH C H c O-C-R, I W C H HO-CH Glicerol 3 - P CHTO-@ CHrO-@ aciltransferasa lisofosfatdico

1,

* .

o ll

o
R-C-SCoA
II

COASH

o Il
O

Lisofosfatdico aciltransferasa

~~8-O-CH I
C-O-

CHc0-C-R, I

Glicerol - 3 - fosfato

cido fosfatdico En la segundaetapa,el cidofosfatidicoes transformado, por lafasfatidicofosfatasa, en 1-2diacilgliceml y, finalmente, una nueva molcula de acil COAse esterifica con el diacilglicerol para formar un triacilglicerol, reaccin catalizada por la diacilglicerol acil transfema.

II O CH>-O-C-R, lI I R2- C-O-CH I

O
-

I CH2-0-C-R, 1

Il RiC-SCoA

CoASH O

CH~O-@ cido fosfatdico

Fosfatdico fosfatasa

II CHO-C-R, I

I CHrOH 1 - 2 diacilglicerol

Acil transferasa

I Il CH70-C-R, Triacilglicerol

En la mucosa intestinal existe una va directa a partir del monoacil glicerol, provenientede la digestin parcial delos triacilgliceroles de la dieta, mediante la cual ste es convertido en 1-2 diacilglicerol por una monoacilglicerol acil transferasa especfica del intestino. La mayor parte de lasenzimas que participan en la formacin de triacilgliceroles se encuentran en el retculo endoplasmtico, pero algunas, como la glicerol-3-(P)acil transferasa, se hallan tambin en lai mitocondrias.

Regulacin de la Lipognesis
Si tenemos en cuenta la funcin esencial de los triacilgliceroles como reserva energtica, es lgico suponer, y as ocurre, que existen mecanismos precisos de regulacin del proceso que les da origen, la lipognesis, de manera tal que es posible incrementar o disminuir su almacenamiento segn sea la cantidad y la calidad delos alimentos ingeridos y el estado fisiolgico de los individuos. Una dieta rica en alimentos grasos (triacilgliceroles), cuyos cidos grasos son transportados directamente al tejido adiposo por los quilomicrones, contribuye a la formacin y depsito de triacilgliceroles en ese tejido. En estas condiciones,los niveles elevados de insulina favorecen la accin de la lipasa de lipoproteina (captulo 48). En general, un exceso de fuentes carbonadas y un potencial energtico elevado son los factores fundamentales que favorecen la acumulacin de triacilgliceroles. De manera que la intensidad de sntesis es elevada tambin en el individuo bien nutrido cuya dieta contiene abundantes glcidos y an ms si est en reposo. Un aspecto de inters nntricional prctico para el qnehacer mdico es que la lipognesis es todava mayor cuando se ingiere sacarosa en lugar de fuentes exclusivas de glucosa como los almidones. Esto es debido a que la fructosa evade el sitio de control de la fosfofructoquinasa en la gluclisis (captulo 44) y sus carbonos inundan la va lipognica, lo cual es un elemento adicional que puede condicionar la obesidad si no se controla debidamente por el propio individuo. Por otra parte, situacionescomo el ayuno, el ejercicio fsico y algunos estados patolgicos como la diabetes mellitus descompensada deprimen la lipogne~is. Aunque el proceso en su conjunto es complejo y tiene diversas etapas, el mecanismo de regulacin se produce fundamentalmente al inicio, en la biosntesis de cidos grasos, con lo cual aumenta laeficiencia y la economa del sistema. En el control de su hiosntesis tiene un papel relevante, adems de la disponibilidad de sustratos, la modificacin alostrica y covalente de diversas enzimas, lo que permite una adaptacin rpida a los cambios metablicos, mientras que la induccin y la represin, tambin presentes, lo hacen a ms largo plazo. Como hemos analizado, la fuente carbonada fundamental para la sntesis de estos compuestos son los glcidos y los Ipidos de la dieta, aun cuando los aminocidos pueden aportar carbonos en condiciones muy especiales. Los glcidos de la dieta, promotores de la secrecin de insulina, se acumulan en un inicio en forma de glucgeno, segn ya estudiamos, y el exceso de glucosa se transforma esencialmente en triacilgliceroles en el hgado y en el tejido adiposo. La glnclisis,estimulada por la insulina, constituye la va central que permite, por una parte, formar el glicerol-3-(P) a partir de la fosfodihidroxiacetona, y, finalmente, el acetil-COAa partir del cido pinvico. Cuando el acetil-COAse incorpora al ciclo de Krebs en una situacin de altas concentraciones de ATP, duranteel reposo,se forma cido ctrico, el cual se acumula en la mitocondria debido a la inhibicin alostrica que ejercen el ATP y el NADH sobre la isoctrico deshidrogenasa. En estas condiciones se favorece la salida de este compuesto al citosol, donde cumple la funcin de ser fuente de acetil-COApara la reaccin de la acetil-COAcarboxilasa y constituir, adems, el principal activador alostrico de esta enzima que, al polimerizarla, la activa y es el sitio ms importante de regulacin de sntesis de cidos grasas.

Metabolismo i

m y su regulricah

845

Por otra parte, el acil COA es un inhibidor alostrico de esta enzima (retroalimentacin negativa). As,si el acil COAse acumula debido a que nose esterif~ca con suficiente rapidez o por aumento de la liplisis o del flujo de cidos grasos hacia ese tejido, se reducir de forma inmediata la sntesis de cidos grasos. El acil COA puede inhibir tambin al transportador mitofondrial de tricarboxilatos, impidiendo de ese modo la salidade citrato de las mitocondrias al citosol; tiene una accin inhibitoria, adems, sobre la formacin del acetil-COAa partir del cido pirico, puesto que bloquea al tnmportadorde h t e m b i o ATPlADPdelamembranamitocondrialintema, lo que conduce a un incremento excesivo en las proporciones ATPIADP y NADHI NAD'en las mitocondrias, inhibiendo la pinvico deshidrogenasa (Fig. 49.12). Citosol Glucosa

+
Mitocondria Pirvico 4 Acetil - COA Oxalactico

cido ~inivico

L /

cido ct,.ico

- J,E'T'] (
cido ctrico Acetil COA
1

insulina

cido oxalactico

Tirosina

Fig. 49.12. Panorama general de la regulari6n de la lipognesis. En este esquema se representan solamente los aspectos ms generales de los mecanismos implicados. Estos comprenden: regulacin alostriea(O), tovalenle(A) y gentica(0).

Acil COA

Malonil Coa ,
I : sintetasa
A

'"1

,B

O -NADPH e - ~ a ~ i n i t i ~ COA m--1nsulina

cidplmtico +: estirnulacin o induccin; - :inhibicin o represin.

La regulacin covalente de la acetil-COAcarboxilasa se produce por la vade la fosforilacin-desfosforilacin. insulina promueve la activacin de esta enzima al La llevarla a su forma no fosfatada, lo cual favorece su forma polimrica. Esta desfosforilaciu es catalizada por la protena fosfatasa-1,la que es activada a su vez mediante su fosforilacin, en un sitio especfico, por accin de una protena quinasa dependiente de la insnlina. En el captulo 43 se describi este tipo de mecanismo en la regulacin del metabolismo del glucgeno. Adems, la insulina, por su capacidad de estimular la fosfodiesterasa, disminuye los niveles de AMPc, con lo cual se impide la activacin de la protena quiuasa y la fosforilacinde la lipasa, por lo tanto se mantiene inhibida la liplisis y disminuye la concentracin de acil COA,que es un inhibidor de la lipognesis como ya sealamos.

La inactivacinse produce por fosforilacin de la acetil-COAcarboxasa mediada por hormonas comoel glucagn, la adrenalina y otras, que estimulan a una protena quinasa por incremento de la concentracin de AMPc. Se sabe tambin que la acetil-COA carboxilasa es inducida al nivel gentico por la propia insuiiia y por la tiroxina,y se hademostrado quela presencia de cidos grasos poliinsaturados en la dieta disminuye la concentracin celular de esta enzima. Otro sitio de regulacin es la reaccin de la sintetasa de cidos grasos, donde participan los mecanismos alostrico y gentico. Segn el primero, el NADPH acta como activador que favorece la asociacin de las unidades del complejo enzimtico, mientras que el NADP y el palmitil COAtienen un efecto contrario. Por otra parte, la insulina induce la sntesis de esta enzima cuando predominan las condiciones de buena nutricin. Las hormonas tiroideas y glucocorticoides potencian este efecto inductivo. Sin embargo, el glucagn, con una reconocida accin antagnica en relacin con la insulina, reprime su sntesis en condiciones fisiolgicas que favorecen la hipoglicemia. Finalmente, la concentracinde esta enzima disminuye tambin por la presencia de cidos grasos poliinsaturados en la dieta.

Resumen
La lipoghnesises el wqjunto de procesos metabliws que wnducen a laformaci6n de triadgiiceroles, cuyos precursores inmediatos son loa cidos grasos acvados y el glicerol-3-(P). Ambos pueden incorporarse a partir de los Ipidos de la dieta, sin embargo su origen principal es mediante su sntesis a travs de la fuente carbonada que p r o p d o n a n principalmente los gledos, en los tejidos adiposo y hepdtiw. El grupo acetilo, transportado al citosol por el cido ctrico desde la mitowndria, wastituye el precursor para la bidutesis de los cidos grasas en cuyas reacciones participan 2 enzimas: la acel-COAcarboxlasa y la cido graso sintetasa Mediante esta va seforma el cido pabttiw, en cuyas iransfonuaciones participan, adems, wmo wfactores, los siguientes: NADPH, ATP, MI?, biona, 4cido paniotniw y HCO;. El NADPH es aportado principalmente por el ciclo de las pentasas y por la m M 6 n de la enzima m8ea El sistema de la acetii-COAcarboxiha wnvierte la acei-COA en malonil COA, mientras que la bado graso sintetasa, una enzims multifunaonal w n 7 aevidades cataltieas diferentes, cataliza la formaci6n del cido pabttiw partiendo de una molcula de ace-COAy 7 de malonil COA,mediante reaeeiones sucesivas de wndeuaaci6n, reduM6n, deshidratacin y una nueva reducei6n que ocurre durante 7 cielos, y al fuial la adividad tiaesterasa separa al cido pabttiw libre del campiejo enzimtiw. El dcido palmtiw puede alargarse y dessahirarse por medio de procesos que ocurren en el retculo endoplasm6tico bajo la aeei6n de euzimas espeecas que aporten una mayor variedad de dcidos graso5 a las clulas. Sin embargo, los dados Wneiales, una variedad de cidos grauw p o b u r a d o s , no pueden ser sintetIzadc8 y deben ser ingeridos eon la dieta, pues tienen funciones biol6gicas muy ~mportantes. Por h l h o , los Msciigceroles se forman por la estericaci6nde los a d COA w u el m-3-0 un nroeeso oue tiene wmo intermediarioal 4cido fosfstidiw. en La ~ p o g h e s b es-reguiada fundamentalmente al nivel de la bioshtesis de los ! U Los puntos principales de repuiaa6u son la acel-COAcarboxasa ~ W . S Y la &do graso sintetasa de fuentes carbonadas y un potencial energhtico La eBisteneia de un exekvado wnsituyen los principales factores que favorecen el proceso, en p h e r

lugar, porque aumentan los niveles de dcido eltn'co mitocondrial, el cualpuede en esas condiciones, pasar al citosol donde constiiuye la fuente directa de aceiil-COA para la acei-COAcarbodasa y su eieetor alostrico positivo. Esta enzima tambin es regulada por modificacin covalente. Segn este mecanismo, la insulina favoreee la desPosforilaci6ny, por lo tanto, su activacin, mientras que el glueagn y la adrenalina tienen el d d contrario. eo La dddo graso sintetasa es regulada alostricamente.Tiene como aetivador al NADPH, por otraparte,el NADP y el palmiiil CoA son sus inhibidom La iosulina induce la sntesis de ambas enzimas, con lo cualgarantiza, a largo plazo, la sntesis de triadglicero1es en condiciones de buena nutn'cin.

Ejercicios
1. Constituyen los triacilglicerolesestructuras idneas para almacenar energa qumica en nuestro organismo? Argumente su respuesta. 2. A un animal de experimentacin se le suministra glucosa marcada radiactivamente con C". Al cabode cierto tiempose detecta la presencia dedicho carbono marcado en la estructura de molculas de cido esterico que se encuentran en el :ejido heptico. Cmo usted explica este resultado experimental? Elabore un esquema para argumentar su explicacin. 3. Explique mediante un esquema las diferentes reacciones catalizadas por la enzima cido graso sintetasa que conducen a la sntesis del cido palmtico. 4. Justifique, desde el punto de vista molecular, las diferentesposibilidades metablicas del cido palmtico. 5. Pueden sintetizarse en el organismo todos los componentes de la triolena? Justifique su respuesta. 6. Se le suministra glucosa marcada radiactivamente con C" a un animal deexperimentacin y al cabo de varios das se detecta la presencia de radiactividad en los carbonos correspondientes al glicerol de los triacilgliceroles almacenados en el tejido adiposo. Describa una secuencia de eventos metablicos que permitan explicar este resultado experimental. 7. Explique bioqumicamente cmo se modifica la lipoguesis en el tejido adiposo cuando existen altas concentraciones de ATPdespus de una dieta rica en glcidos. 8. Justifique la importancia del cido ctrico en la integracin del metabolismo de glcidos y Ipidos. 9. Explique cmo se modifica la sntesis de triacilgliceroles en el tejido adiposo si se produce una mutacin que afecta la unin del cido ctrico con la acetil-COA carboxilasa. 10. Explique cmo se modifica la sntesis de triacilgliceroles en condiciones de ayuno prolongado.

Como vimos en el captulo precedente, en condiciones metabliw y nutricionales que favorecen los procesos de biosntesis de los triacilgliceroles, stos se almacenan en grandes cantidades en el citosol de las clulas adiuosas. donde se mantienen como --- - - - ~ reserva energtica y son capaces de aportar energa mediante la liplisis cuando las condiciones metablicas del organismo as lo requieran. La liplisis consiste en la degradacin gradual de los triacilgliceroles en sus componentes: glicerol y cidos grasas, y estos ltimos hasta CO, y H,O.

Caractersticas generales del proceso

La liplisis constituye un fenmenometablico complejo de gran importancia

para nuestroorganismo. Basta tener en cuenta,para comprenderlo, que muchos tejidos como el hgado, el msculo esqueltico y el cardaco utilizan cidos grasos como fuente preferencial para obtener su energa, y el propio tejido adiposo puede, en
determinadas condicionesmetabliw, obtenerla a partir de stos. Incluso el cerebro, en situaciones especiales como el ayuno prolongado, puede utilizar los cuerpos cetnicos procedentes de la degradacin de los cidos grasos como fuente de energa. En el tejido adiposo pardo, presente en cantidades variables, aunque habitnalmente poco abundantes, en los seres humanos, la energa liberada de la liplisis no aporta ATP, sino que se libera principalmente como calor, debido a un proceso de desacoplamiento energtico entre la cadena transportadora de electrones y la fosforilacin oxidativa, mediante un mecanismo en el que participa la termogenina, una protena que acta como va de conducccin de protones a travs de la membrana mitocondrial interna. Ms adelante se tratarn esos mecanismos metablicoscon ms detalles. Otro aspecto de inters lo constituyen las mltiples relaciones interorgnicasque se establecen como consecuenciade la liplisis en condiciones fisiolgicasnormales como el ayuno o alteradas como la diabetes mellitus, por citar 2 ejemplos tpicos que sern estudiadosen los captulos 61 y 62. Enel aspecto cuantitativodel rendimientoenergtico, la importancia de la liplisis reside en que la oxidacin total de 1g de triacilgliceroleslibera 9 kcal, lo cual difiere uue de 10s glcidos y de las ~rotenas. auortan solamente 4 kcak1. En la figura 50.1 .ir presenta el esquema general de la liplisis, en el cual puede a P m i a que los lriacilgliceroles son inicialmente hidroli~adm sus wmponentes, ~ en

.. .

como habamos expresado antes. El glicerol no puede ser utilizado en el propio adipocito,debidoalacuencia dela enzima especfica (siicerol quinasa) que lo convierte en glicerol-3-(P).El glicerol difunde y alcanza la sangre, donde es transportado hasta diversos tejidos y captado principalmente por el hgado, en el que constituye un precursor de la gluconeognesis.

Tejido adiposo Tiiacilgl~ceroles Glicerol

m
Glicrroi
cido? gasos

{(N~H.H++!
Glicerol Fig. 50.1. Esquema general de la liplisis. Se observan 2 etapas. Primero, la hidrlisis de los triaeilglieeroles y despus las transformacionesde Im cidos grasos (R oxidacin) y del glicerol. En el proceso participan los teiidos adiuaso. heutico. muscular y otros.

j - fosfato

FADH2

Acetil - COA

Fosfodihidroxiacetona Va glucoltica

Cadena respiratoria
8 t

Los cidos grasos pueden ser utilizados en alguna proporcin por las propias clulas adiposas, pero pasan fundamentalmente a la sangre. Los de cadena larga se asocian con la albmina nlasmtica v as son transnortados a los diversos teiidos " donde son utilizados, principalmente en laobtencin de energa,acordecon la situacin metablicapredominante. Ya en las clulas se unen a la protena fijadora de cidos grasoso protena Z, por lo cual en realidad nunca estn Libres, de modo que sera ms correcto el trmino de cidos grasos no esterificados (AGNE) y no el de cidos grasos Libres, para referirnosa estas molculas. Los de cadena corta son ms solubles en agua y pueden existir como cidos no ionizados o como aniones, en forma libre y asser transportadospor la sangre y dentro de las clulas. Como expresbamosal inicio, los productos de la hidrlisis de los triacilgliceroles continan su transformacin catablica ulterior en procesos que pasan por su conversinen acet-COA, cual se incorpora al ciclode Krebs donde es completamente el oxidado, mientras que los cofactores reducidos (NADH y FADH,) liberados en dicho proceso se incorporan a La cadena respiratoria con la consiguiente produccin de ATP, lo que coustituye el fundamento del elevado rendimiento energtico de la liplisis. En este captulo abordaremos detalladamentecada una de las etapas que forman parte de la Liplisis, as como la regulacin del proceso en su conjunto.

Degradacin de los iriadglieeroles almacenados

La primera etapa, que constitnye la separacin de los cidos grasos y el glicerol, se produce mediante la hidrlisis enzimtica de los enlaces steres por accin cataltica de las Lipasas (Fig. 50.2). Deelias existen 3 tipos: la hiatilglicerol Lipasa, la diacilglicerol lipasa y la monoacilglicerol lipasa, cada una de las cuales acta sobre su sustrato correspondiente. La primera se conoce tambin como lipasa hormonosensible,puesto que es regulada hormonalmente por un mecanismo dependiente del AMPc y otro

independiente de ste, segn estudiaremosms adelante en este captulo. Su producto final es un cido graso y diacilglicerol. Las otras 2 lipasas completan rpidamente la hidrlisis, y se obtiene como productos finales de todo el proceso, glicerol y cidos
grasos.

,YHrO-C-K. R,-C-O-CH 2I C H r O-C-R,

i l

Lipasas

3H,O

CHr OH I HO-CH I C H c OH

R,-C-OH

+ K,-A-OH

R T C-OH

Fig. 50.2. Reacciones de la primera etapa de 1 liplisis. Los enlaces steres que unen las Bcidos grasas s al elicerol en las riosieiones 1. 2 y 3 son hidrolizados por 3 tipos de lipasas, especificas para los triaeilgliecroles, los diaeilglieeroles a las rnonoacilglieeroles.El producto final es glicerol y icidos grasos.

Destino del glicerol

El glicerol liberado por accin de las lipasas viaja por la sangre, y es captado por el hgado y otros tejidos como el rin, el tejido adiposo pardo y las glndulasmamarias en lactancia, aunque el hgado es el principal sitio donde es metabolizado. AUpodra degradarse mediante la gluclisis, sin embargo, debido a la especializacin de este rgano, la gluconeognesis constituye la va fundamental de incorporacin de este compuesto. La glucosa as formadapuede pasar ala sangre e incorporarsea la gluclisis en otros tejidos como el cerebro, msculo, etc. Como paso inicial para su utilizacin, el glicerol es fosforilado por la accin de la glicerol quinasa y da como producto el glicerol-3-(P).

Glicerol

ATP

Glicerol 3 - 2 )

.4DP

El glicerol-3-(P) es deshidrogenado posteriormente por la glicerofosfato deshidrogenasa, y de esta forma se obtiene la fosfodihidroxiacetona, compuesto intermediario de la gluclisis. Este metabolito constituye un sitio de interrelacin de esta va con la lipognesis (captulo 49) y con la liplisis. Glicerol 3-@

NAD'

Fosfodihidroxiacetona

NAD!l !!

oxidacin de los 4cidos grasas

La oxidacin de L s cidos grasos consiste en su degradacin gradual mediante o B oxidacionesrepetidas de los carbonos cercanos a sus extremos -a, y omega-, donde se liberan, en general, unidades carbonadas -de 1 2 carbonos, segn el tipo de oxidacin- y cofactores reducidos. Esto ocurre como continuacin lgica del proceso de lipsis, en condiciones de requerimientoenergtico aumentado. La degradacin oxidativa de los cidos grasos es totalmente diferentea la inversin de la biosntesis en cuanto a su iocaiizacin celular, las enzimas, los cofactores y otros asPwtos, lo cual se podr constatar de forma comparativa durante el estudio de este PrWeso. La oxidacin de los cidos grasos separada de la biosntesis tiene una "portante significacin biolgica, pues permite que cada proceso pueda regularse de forma individual, segn las condiciones metablicas existentes.

Metabdisw> intenncdiario y SU regul~cidn

ssl

Los cidos grasos que se incorporan a la va de oxidacin pueden tener su origen no slo en la liplisis, sino que tambin pueden provenir de la hidrlisis de los triacilglicerolesh;rnsportados por las lipoprotenasplasmticas sintetizadasen el hgado o provenientes de la digestin de los Ipidos de la dieta (captulo 48). Aunque existen, como se seal con anterioridad, diferentes vas de oxidacin de los cidos grasos, el mecanismo por el que se degrada la mayora de estos compuestos consiste en la oxidacin sucesiva al nivel de su carbono B, seguida de la escisin gradual de fragmentos de 2 carbonos en forma de acetil-COA,por lo cual a este proceso se le llama B oxidacin de los cidos grasos. Existen, segn sealamos, formas alternativas como son los mecanismos de cr y omega oxidacin que abordaremos ms adelante. A continuacin analizaremos en detalle la 1%oxidacin de los cidos grasos saturados de cadena par como modelo tpico de lo que ocurre con mayor frecuencia en nuestro organismo,y despus nos referiremosa losaspectos particulares dela Doxidacin de los cidos grasos insaturados y saturados de cadena impar.

p oxidacin de los 4cidos gmos saturados de cadena par

En 1948, E. Kenedy y Alberf Lel~ningerdemostraron que la B oxidacin de los cidos grasos ocurre exclusivamente en la matriz mitocondrial, lo cual es no hecho importante por la relacin funcional directa de este proceso con el ciclo de Krebs y la cadena transportadora de electrones, ubicados tambin en ese organelo. El descubrimiento del mecanismo de la B oxidacin tiene sus primeros antecedentes en observaciones de antes del siglo xix. Desde entonces se sospechaba que los cidos grasos eran degradados en la clula por la sustraccin de fragmentos de 2 carbonos. Sin embargo, no fue hasta 1904 en que el bioqumico alemn Franz Knoop observ en sus clsicos experimentos en conejos, que si se les administraba un cido graso de un nmero par de carbonos, marcado con un grupo fenilo en el metilo terminal (carbono omega), se produca la excrecin de cido fenilactico en la orina, independientemente de la longitud de la cadena, mientras que si se marcaba de la misma forma un cido graso de cadena impar, entonces se excretaba cido benzoico (Fig. 50.3).

Compuestos administrados a los animales

Productos excretados en la orina

~H~&CH~CH~-CH~CH$~H~COOH cido fenilactico

cidos &rasoscon un nmero par de carbonos

Fig. 50.3. Experimentos de Knoop en conejos con cidos grasas marcadas en el metila terminal. Obsrvese (en roja) las caractersticas estructurales diferentes de los productos excretados a partir de loa cidos con un nmero par o impar de carbonos.

Como consecuencia de estos resultados, Knwp dedujo que los cidos grasos se degradaban por eliminacin oxidativa de fragmentossucesivosde 2 tomos de carbono a partir del extremo carboxlico; esto es, por B oxidacin.

De forma semejante a lo que ocurre con los glcidos o con otros compuestos, los cidos grasos necesitan activarsecon anterioridad para incorporarse a cualesquiera de las vas metablicas en que participan. Precisamente, la primera etapa de la oxidacin de un cido graso es su activacin, la cual consiste en la formacin de un enlace tioster muy reactivo entre el grupo carboxilode un cido graso y el gmposulfidrilo de la coenzima A. El cido graso reacciona con la coenzima A en presencia de ATP, el que aporta la a energa paral forniacindel enlace ti&r mediantesu bansfoman en AMP y pkofosfato. Las acil COAsintetasas son las enzimas que participan en la catlisis (Fig. 50.4).

R-C-OH

II

+ ATP + CnASH

.
Acil- COA sintetasa

RpC",SpCo,\ O I

AMP

PPi

Fig. 50.4. Reaccin de activacin de un eido graso. Obsrvese que la fonnaein del enlace tioster con la COA requiere del aporte de energa (ATP).

La transformacin ocurre en 2 etapas, en la primera se forma un intermediario unido a la enzima. Se trata de un anhdrido mixto del cido graso y el gnipo fosfato del AMP, un acil adenilato; se libera el pirofosfato al medio.

o
R-C,

o
+
ATP

Il

R-C-AMP

ll

P-~i

El acil adenatoformadoreacciona a continuacin con la COAy da como productos el acil COAy AMP libre.

o
R-C-AMP

II

o
+
HS C O A

R-C-S-Co.4

II

AMP

El pirofosfato formado en la reaccin de activacin es hidrolizado y convertido en 2 fosfatosinorgnicos por la accin de una pirofosfatasa, con lo cual se consume Otro enlace rico en energa. La reaccin de la pirofosfatasa asegura que la activacin llegue a su trmino (captulo 49).

P-~i

H,O

Pirofosfatasa

2Pi

El efecto neto del proceso es la utilizacin de 2 enlaces ricos en energa para activar una molcula de cido graso; sta es la nica etapa de la degradacin completa de un cido graso dondese requiereenerga a partir del ATP. h a c i l COA sintetasaseencnenhafundamentalmenteen el retido endoplasmtico Y en la membrana mitocondrial externa, y slo de forma muy limitada, para cidos grasas de cadena corta, en el interior de la mitocondria. De manera que el proceso es eminentementeextramitwondnal.

Han sido descritas varias acil COAsintetasas,especficas para cidos grasos de diferente longitud de cadena. As, la acetil-COAsintetasa acta sobre cidos de 2 y 3 carbonos; la octanoil COA sintetasa, sobre cidos grasos de 4 a 12 carbonos, la dodecanoil sintetasalo hace con cidos grasos de 10 a 18carbonos. Una vez activados los cidos grasos en forma de acil COA,se incrementa la wctividad de los gruposacilo. Sin embargo,el hechode queestaacvaunseproduzca principalmente en el exterior de la mitocondria constituye un obstculopara su libre difusin hacia la matriz mitocondrial, donde se produce el proceso de oxidacin, pues la membrana mitocondrial interna es impermeable a la coenzimaA y sus derivados. Por lo tanto,se requiere un mecanismo de transporte especfico.

Los gmpos acilo son transportados por el mecanismo de carnitina, llamado as debido a que el acilo se transporta unido a este wmpuesto. La carnitina 4-hidroxi-ytrimeo1-amonio-butirato-est ampliamente distribuida,y es abundanteen el msculo, aunque se sintetiza en el hgado y en el rin, a partir de la lisina y la metionina.

Acil COA

Carnitina

C=O l R Acil carnitina En el proceso de transporte intervienen 2 enzimas,laeaniitinapalmii m e r a s a 1y U, y una protena transportadora, la d t i n a a w l d t i n a translocasa (Fig. 505).

EIM

MMI

Fig. 50.5. Transporte de los grupos aeilo

por el mecanismo de la m i t i n a . 1 Las transferasss 1 y 1 (en rojo) calalizan la unin y la separacin respectivamente del grupo a d o a la carnitina, y la translwssa (en azul) permite el paso de la acil earnitina hacia la matriz mitocondnal a travs de la MMI.

mitocondrial

MME: membrana mitocondrial externa; EIM: espacio intermembranoso; MMI:

membrana mitocondrial interna.

Primeramente,lacamnapalmiol transferasa1,quese ennienhaenelladoexterno de la membrana mitoeondrial interna,cataliza la transferencia del grupo a d o desde su unin con el a m hde la COAbasta el hidroxo de la eamiiina para formaracilcamiiina. A continuacin la carnitina acilcarnitina translocasa acta como un transwrtador de intercambio de camitina, de manera que la acilcarnitina se transporta hacia la matriz mitocondnal acoplada con la salida de carnitina. Luego, la acilcamitina reacciona con la COA,por accin de la carnitina palmitil transferasa U, la cual se encuentra unida al interior de la membrana interna. En la matriz mitocondnal se libera la camitina y se regenera acil COA. Este sistemade transporte funciona en la transferenciade a 3 COAcon cadenas de 12 a 18 carbonos. Al parecer, los cidos grasos de cadena ms corta pueden pasar directamente al interior de la mitocondna, sin unirse a la carnitina, y activarse con postenondad en la matriz por la acil COAsintetasa mitwondrial.

En este proceso, los acil COA son oxidados mediante ciclos repetitivos de reacciones que provocan la liberacin secuencia1 de fragmentos de 2 carbonos, en forma de acetil-COA, donde cada ciclo consisteen una dshidrogenacin dependiente del FAD, una hidratacin, otra deshidrogenacin dependientedel NAD+y por ltimo una tiolisis, hasta que el acil COAqueda transformado totalmente en unidades de acetil-COA,los cuales, en condiciones de requerimiento energtico elevado, como ocurre en las situacionesen que se estimula la liplisis, se incorporan al ciclo de Krebs, y aqu sern completamenteoxidados (Fig. 50.6).

Remocin sucesiva de unidades de 2C

8 CH,-C-S-COA Acetil - COA

/ cido rndp
cido fumrico cido succuco

cido isoctrico
Fig. 50.6. Esquema global de la R oxidacin del cida palmitieo y destino del acetil-COA que se obtiene como producto.0bsrvese la separacin de unidades de 2 carbonos (acetil-COA). Se forman 8 unida. des de este metabolito que san oxidadas en el ciclo de Krebs hastaco,.

La primera reaccin de oxidacin consiste en la eliminacin de 2 tomos de hidrgeno, uno del carbono a y otro del R,cataiizada por la acil COAdeshidrogenasa, con lo cual se forma el A'-trans-enoil COA.Esta enzima es una flavoprotena cuyo grupo prosttico es el FAD que capta los 2 hidrgenos. R-CH,-CH,II CfirC-S-COA

FD A-

H o I II R-CH2- C=C- C-S-COA I H

FADH,

El FADH, le entrega los hidrgenos a la cadena transportadora de electrones a travs dela coenzimaQ, lacual los recibe mediante un paso intermediodonde participa otra flavoprotena -flavo-protena transferidora de electrones- que contiene un 3 complejo FeS. Como resultado se producen, por fosforilacin oxidativa, 1 ATPpor cada FADH, incorporado (Hg. 50.7). cido soccnico

Glicerol - 3 - P

m. flavoprotena; FiE flavoprotena transportadora de electrones; FeS: complejo hierro-azufre.

Fig. 50.7. Destino del FADH, proveniente de la primera m e i n de oxidacin de la R oxidacin. Los hidrgenos son captados por la CoQ, por intermedio de la FTE,y despus los electrones son llevados por la cadena transportadora de electrones desde la CoQ hasta el O,. Este 3 proceso proporciona energa suficiente para la sntesis de 1 molculas de ATP.

En la siguientereaccin de la B oxidacin se produce la hidratacin estempeufica del dobleenlacedelos carbonos 2 y 3del A'-trans-enoil CoA,catalizada por laenoil COA hidratasa, y se ohtienecomo producto L(+) 3hidroxiac COA.

R-CH2-C=C-M-COA l H

: :

ti$

OHH 0 l I II R-CH2C-C-C-5-COA

La reaccin que conlina, catazada por la L(+) 3 hidroxiac COAdeshidrogenasa, constituve la semnda deshidrogenacin de la B oxidacin. en la cual se forma el 3-cetoaeCOA y se forma NADH,:~ que e tambi'n reoxidado& la cadena respiratoria s con la formacin de 2 5 ATP.

Finalmente, la 3-cetoacil COAes fragmentada en la posicin 2-3por una tiolasa -1a3-cetoacilCOAtiolasa- mediantela que se produce la ruphira, por la incorporacin del grupo SH de la COA(tiolisis)al nivel del carbono 3,10 cual da lugar a un acil COA con 2 carbonos menos que el inicial y a una molcula de acetil-COA,cuyo destino metablieo, en esas condiciones, es el ciclo de Krebs donde se logra su oxidacin completa.

El acil COAformado en la reaccin de tiolisis vuelve a entrar a la va oxidativa, pero sin tener que activarsede nuevo, pues ya el grupo acilo est unido a la COA,por lo cual ya no se consume ms ATPen la continuacin de la P oxidaan. De esta forma, mediante la repeticin de este ciclo, un cido graso puede ser degradado completamente en unidades de acetil-COA. En la figura 50.8 se muestra el esquema global de la secuencia de reacciones de la B oxidacin de los cidos grasos y su relacin con la respiracin celular.

R- C H 2CHi CI!,4

-6
0
',

C -S- COA

Acil - COA

Hcii COAdeshidicgeaasi

R- C H k=cc - S -COA ~

Enoil - COA

R-CH2 C-

: i .

C -S- COA

I J

3 cetoacii - COA

coAw
R-CH,- $-S-

",asa

"

O
Acil - COAcon 2 carbonos menos

COA + CH,-U-S-COA ' O Acetil - COA

Fig. 50.8. Esquema general de la secuencia de reacciones de la R oxidacin. Ocurren 4 reacciones sucesivas: deshidrogenacin, hidrataein, deshidrogenacin y tilisis. En estas reaccionessefoman un FADH,, un NADH y un seetil-COAen cada mella, las cuales se incorporan a la respiracin celular.

2C0,

CR:Cadena respiratoria.

L.

A continuacinanalizaremos el balance de sustancia y enew'a que se produce al degradarse completamente un cido graso saturadode cadena larga muy abundante en los triacilgliceroles del tejido adiposo, el cido palmtico (C 16), el cual tomaremos como modelo. En la degradacin completa del palmitil COAse liberan, en total, 8 acetil-COA -unidades de 2 C- para lo cual son necesarias 7 vueltas de transformaciones, puesto que en la ltima se liberan 2 acetil-COA En cada una de estas vueltas se forma un F m y un NADIt Por lo tanto, podemos escribirlaecuaan completa de la conveiun del palmitil COAen 8 molculas de acetil-COA:

Palmitil COA+ 7 COA+ 7 FAD + 7 NAD'

+ 7 H,O

8 acetil-COA 7 FADH, + 7 NADH.H* +

A partir de aqu podemos hacer las consideracionessobre el balance energtico del proceso. Segn vimos anteriormente, cada FADH, proporciona equivalentes de dnccin a la cadena respiratoria,sucientespara la formacin de 1 2 ATP, y el NADH aporta 2 5 ATP, o sea 4 ATPpor cada vuelta y, por lo tanto, 28 en las 7 vueltas. Si consideramos, adems, que cada acetil-COAque entra en el ciclo de Krebs produce finalmente 10 ATP (captulos 38 y 40), las 8 unidades aportarn 80 ATP adicionales, lo cual hace un total de 108 ATP. Sin embargo, tenemos que descontar los 2 ATPconsumidos en el proceso de activacin inicial, por lo que el balance neto es de 106 ATP producidos en la oxidacin completa del cido palmtico.

Muenda energtica
La eficienciaenergtica de la B oxidacin del cido palmtico se puede calcular teniendo en cuenta la enerea til -la utilizada nara formar ATPa nartir de ADPv Piproducida durante la oxidacin completa del cido graso en este proceso, segn acabamos de ver, y por otra parte la energa total de su oxidacin basta CO, y H,O determinada por calorimea. Considerando la energa libre esindar de bidrlisis del ATPcomo 7 3 kcal.mo1-', durante la formacin de 106 ATP da como resultado 773,8 kcal.mo1-' y la energa calculada por calorimetra es de 2 340 kcal.mo1-'. Por lo que la eficiencia energtica del proceso sera 773,812340.100 = 33,07 %. Como puede apreciarse, es un valor semejante al de la eficiencia de la gluclisis en condiciones aerobias.

oxidaan de los bddm

de cadena impar

Los cidos grasos de cadena impar son sintetizados principalmenteen el tejido adiposo y en las glndulas mamarias de los rumiantes. Los tejidos y productos derivados de estos animales constituyen una fuente importante de estos cidos grasos -principalmentede tipo C,, y C,,- en la alimentacin del ser humano. De ahla importancia de conocer esta variante de la B oxidacin que permite obtener energa a nartir de ellos. La B oxidacin de los cidos grasos con un nmero impar de carbonos ocurre de forma semejante al proceso con los cidos grasos saturados de cadena par, basta la y penltima vuelta. En la Itima,sin embargo, se libera un acetil-COA un propionil COA.Este ltimo es convertidometablicamente en succinil COA,un constituyente del ciclo de Krebs. De aqu que el residuo propionilo de un cido graso de cadena impar sea la nica parte de un cido graso que pueda ser gluconeognico (Fig. 50.9). 858

-m

Propionil COA Pmpionil COAcarboxilasa

p,oo"i
H-C-CH,
1

C--S-COA
11

D - metil maloni1 COA

CY-COA

o 41

II

L - metil malonil COA

It
I

Mc;il malonil COA iiiucasa

CH, l

7%
Fig. 50.9. Destino metablico del propionil COA.El propionil COA se transforma en succinil COA,el cual es un metabolito del ciclo de Krebs.

CY-COA 11 Succinil COA o Glucosa 4

!

Estos cidos grasos, que tienen su origen en la dieta o a partir de la sntesis en nuestro organismo, se oxidan por un proceso tambin semejante a la B oxidacin de los i eidosgrasas saturados de cadena par, y algunasenzimas son, incluso,las mismas. S embargo,sepresentan 2 problemas particulares. En primer lugar, los doblesenlacesde los cidos grasos no saturados que se encuentran en la naturaleza tienen confguracin cis, mientras que los intermediariosAl-insaturadosdelos acil COAde la B oxidacin Presentan configuracintrans, segn vimos anteriormente. Por otra parte, en generai durante la eliminacin sucesivade unidades bicarbonadas en la B oxidacin de los cidos grasos insaturados, se generan en un momento detenninado derivados acil COAA'-insaturados en lugar de A'-insaturados que funcionan como intermediariosnormales de la B oxidacin. Estos problemas tienen su solucin metablica gracias a la presencia de 2 tipos de enzima auxiliares: una kmerasa y una reductasa. Utilizaremos como ejemplo para mostrar el proceso, y en particular la accin e s ~ ~ u idea c cada unade estas euzimas, al cido linoleico(C,,A93'). Este cido graso Pobaturado comienza a ser degradadopor el proceso normal de la B oxidacin que hemos estudiado, durante 3 ciclos oxidativos, lo cual da como resultado un "temediario de 12 carbonos que presenta dobles enlaces 3-4 y 6-7, ambos en

configuracin cis. Sin embargo, la cis- A'-enoil COAno es sustrato de la acil COA deshidrogenasa e interfiere con la formacin del doble enlace entre los carbonos 2 y 3. Aqu acta entonces la A'& (o trans) A' enoil COAisomerasa, la que cambia la posicin y la configuracin del doble enlace cis A' a trans AVFig. 50.10).

A3 - cis - enoil COA

A - cis < o t r a s ) - A - tiani ' ' snoil Co.4 isomerasa

Fig. 50.10. Reaccin de la enoil COA isomerasa. En esta reaccin se forma un derivado Az-lrans enoil COA, que es el sustrato de la acil COA deshidrogenasa.

A2 - irans - enoil COA Este acil COAcontina su oxidacin a travs de las reacciones habituales de este proceso y al liberarse otro acetil-COA,se transforma en un enoil COAde 10 carbonos con un doble enlace cis entre los carbonos 4 y 5. Entonces la acil COA deshidmgenasa introduce otro dobleenlace (A2-trans), lo cual se forma un A2-transcon A4-cisdienoil COA. sta es convertida en A3-transenoil COApor una enzima que depende de NADP, la A2-transd4-cis dienoil COAreductasa. La A3-cis-->A2-trans enoil COAisomerasa tambin acta sobre el doble enlace A'-trans para producir A2-trans enoil COA,el conocidointermediario de la B oxidacin, el que contina su degradacin completa basta convertirse en unidades de acetil-COA(Fig. 50.11).

F,$&q
Acil- COA deshidrogenasa Y H CH,-(CH,),

A4 - cis - enoil - COA

c =c -c =C-

H i

C-S COA 4 3 1 2 1 A2 - trans - cis H dienoil- COA A- - @ans- A cis - dieiioil COA ' rediicasa

o
CH,-(CH,)~

C =C4

CH,1 3 2

C-S 1

II

COA

I H
Fig. 50.11. Accin combinada de las enzimas: deshidrogenasas, reduetasa e isomeen la R oxidacin de un eido graso poliinsaturado. La accin de la A' - eis ----> A' - cis trans enail COA isomerasa es esencial para que el proeeso conline. Obsrvese que los eafactom que participan son el NADP y el FAD.

A3 - trans - enoil- COA

A' - cis ( o trans) - A' trans enoil- COAisomerasa

H
CH3-(CH&

C =C- C-S-COA 3 12 1

II

5 acetil- COA

p &idacin (4 vueltas)

A2 - trans - enoil- COA

Como puede observarse al comparar ambos procesos, la B oxidacin de los cidos

g r w insanradosrindemenosenerga en forma de ATPque sus bomlogos sahuados,

puesto que al presentar en su estmctura dobles enlaces entre algunos de sus carbonos pueden aportar menor cantidad de hidrgenosa la cadena transportadora de electrones.

B oxidari6n de los cidos graso5 en los peroxisomaw

En esta ocasin se trata de una variante de la B oxidacin de los cidos grasos de cadena muy larga, por ejemplo Cmy C,,, que ocurre en los peroxisomas y conduce a la formacin de acil COAde cadena ms corta, aceal-COAy H,O,. Una vez que estos cidos grasos resultan degradados hasta alcanzar 8 carbonos, son eliminadosde los peroxisomasen formade octanoii caniitina y terminan de oxidarse en las mitocondrias, y aunque el acetil-COA puede seguir este destino metablico, otra funcin importante lo constituye su participacin en la biosntsis de colesterol, cidos biliares, cidos p mpara los fosfofpidos;otros compuestos. ~ s tproceso es inducido e por dietas ricas en Lpidos y por medicamentos hipocolesterolmicoscomo el clofibrate.
Oims pos de oBdaa6n de los cidos graws:

1
I

Aunque la B oxidacin es la forma cuantitativamente ms importante de oxidacin de los cidos grasos, existen otras formas que revisten importancia para nuestro organismo. Estas son la alfa y la omega oxidacin, cuyos nombres sealan el tipo de carbono de los cidos grasos donde ocurre primariamentela oxidacin.

La alfa oxidacin ha sido detectada principalmente en el tejido enceflico, al nivel del reticulo endoplsmicoy en las mitocondrias. Es un proceso que no requiere de la coenzima A ni conduce a la generacin de fosfatosde alta energa. El mecanismo consiste en un evento inicial de bidroxilacin al nivel del carbono a, donde participan oxidasas de funcin mixta y se requieren oxgeno molecular, NADPH y citocromos especficos. Los hidroxicidos formados son convertidos con posterioridad en sus correspondientes alfa-retorido> y wmetidos a una dcsc.arbosilarinosidatiw, con lo cual v reduce en un carbono la longitud del cido e
1
graso.

La alfa oxidacin se produce con frecuencia en cidos grasos de cadena larga y conduce a la formacin de compuestos como el cido a hidroxilignocrico, que es un constituyente importante de los Ipidos cerebrales, los cuales son utilizados en la sntesis de esfingolpidos.Sin embargo, todo esto tambin ocurre en cidos grasos ramificados(metilados),de cadenas ms cortas.

La omega oxidacin de los cidos grasos se desarrolla en el reticulo endoplsmico de diversos tejidos del organismo, por accin de enzimas hidroxilasas con la participacin del citocromo P-450. La hdroxilacin se produce generalmenteal nivel del carbonoomega,es decir,el carbono metico qnese encuentra en el exhwnoopuesto al rarhouilo. aunque puede ocurrir en elrarbono adyacente al grupo &tilo. Segun el mtwnismo habitual, el grupo -CH, r i eon3ertidi) en el radical -CH,OH, el cual esoxidado teguidamente a -CO011, sc tGma as un rido dirarbt~uiiro. Hidroxilasa ----+HO -CHr O,. NADPH

H3C-(CHJ-COOH

(CHJ- COOH

-+ HOOC - (CH,),- COOH

El cidodicarboxlicoes generalmentedegradadopor elmeeanirmode R oxidacin a partir de uno de sus extremos hasta formarsecido subrico(C,) o cido adpico (C,), los cuales se excretan por la orina.

Como se ha analizado en los captulos precedentes, el control metablico se refiere a la regulacin del flujo de metabolitos en respuesta a los requerimientos energticos y al estado diettico. Es conocido, por ejemplo, que la variacin de requerimientos energticos entre el reposo o el ejercicio vigoroso puede ser tanto como 100 veces. El glucgeno y los triacilgliceroles constituyen la principal fuente de energa para los procesos que la requieren. Ambos son sintetizados con mayor intensidad, durante los perodos de reposo y plenitud nutricional, en los tejidos correspondientes a partir de los cuales son movilizados cuando se requiere energa. En el captulo precedente estudiamos el proceso de lipognesis y la variacin de su intensidad en diferentes condiciones metablicas. Pues bien, existe una estrecha relacin entre los mecanismos de regulacin de la lipognesis y los de la liplisis. En condiciones de requerimiento energtico elevado, como ocurre en el ayuno o en el ejercicio fsico, predomina la liplisis sobre la lipognesis, mientras que sucede lo contrario durante el reposo,conunadietaadecuada. En la liplisis, el sitio principal de regulacin metablica lo constituye la reaccin de la Lipasa intracelnlar hormonosensible o triacglicerol lipasa. Diversashormonas como la adrenalina,la noradrenana, el glucagn,la hormona del crecimiento,las hormonas a y R estimulantesdelos melanocitosy la hormona estimulante del tiroides, entre otras, estimulan la liplisis en el tejido adiposo, con lo cual promueven la liberacin de cidos grasos, su elevacin en el plasma y la activacin de la R oxidacin en otros tejidos como el hgado y el msculo. Otras hormonas como los glucocorticoides y las hormonas tiroideas, aunque no tienen por s mismas una accin estimulante notable de la liplisis, actan como facilitadoras o permisivas con respecto a otros factores endocnnos lipolticos (Fig. 50.12). La intensidad de respuesta lipoltica a estas hormonas es variable en diferentes especies, y segn algunos autores, el tejido adiposo del ser humano es poco sensible a la mayor parte de ellas, excepto a las catecolaminas. El glucagn, laadrenalinay otras delas hormonas sealadas,que tienen su receptor enlamembranaplasmtica, actan por medio de la adenilato ciclasa, que es la enzima que convierte el ATPen AMPc (capiulo 60). El AMPc, mediante la estimulacin de la protena quinasa dependiente de este nucletido, convierte la triacilglicerol lipasa inactiva en su forma fosforilada activa. Teniendo en cuenta el papel del AMPc en este mecanismo, es fcil comprender que los factores que lo destmyano lo incrementen, tendrn un efecto sobrela liplisis. Por ejemplo, el AMPc es degradado a 5 ' AMP por la fosfodiesterasa.Esta enzima es estimulada por la insulina, con lo cual sta muestra una actividad antilipoltica. Sin embargo, la cafena y la teolina inhiben la enzima. La presencia de la primera de estas 2 sustanciasen el caf podra explicar la elevacin de cidos grasos en el plasma que se produce tras su ingestin. La actividad anolipoltica de la insulina es, sin embargo,ms compleja Por ejemplo, tanto ella como el cido nicotnico y la prostaglandina E, inhiben la actividad de la adenilato ciclasa. Por otra parte, es conocida la activacin de las protenas fosfatasas por la insulina. En la liplisis se estimula la lipasa fosfatasa,con lo que la triacilglicerol lipasa se inactiva por desfosforilacin. Como puede observarse, estos efectos de la insulina en la liplisis son contrarios a los que produce en la Iipognesis, la cual es estimulada por esta hormona. Los mecanismos por los que actan las otras hormonas que hemos citado son diversos. Por ejemplo, los glucocorticoidesfavorecen la liplisis por induccin de la

Adrenaiina Noradrenaiina

ACTH TSH G1ucagn

Insulina, PG-E, ,*'cido nicotnico Insulina lipasa (inactiva)

crecimiento " Metilxantinas ejemplo: cafena

M e

. .. ...

>,

, ;

--A

Protena j quinasa / dependiente l e AMPc d Tnacilglicerol

l~osfodiesterasa AGL + diacilglicerol

> .-,-

_.-

b
Diacilglicerol lipasa

/-

,e _'

~lucocortic~des

h
I
Monoacilglicerol
~inasa

AGL + monoacilglicerol AGL + Glicerol

AGL: cido graso libre; PG-E,: prostaglandina E, ; O estimulacin; O disminucin de la actividad o de la concentracin de la enzima.
Fig. 50.12. Mecanismos que intervienen en la regulacin de la triacilglicerol lipasa (lipasa hormonasensible). Este es el pasa principal de la regulacin de la liplisis. Intervienen divehormonas, directamente sobre la lipasa o mediante la aden ciclasa.

sntesisde la triacilglicerollipasa. La accin lipoltica de la ACTH puede explicarse, en parte, por su efecto estimulante en la secrecin de los glucocorticoides. Por otro lado, el sistema nervioso simptico, a travs de la liberacin de noradrenalina en el tejido adiposo, tiene una funcin importante en la movilizacin de cidos grasos, puesto que ejerce una accin tnica permanente y sta aumenta en condicionesen las que se produzca aumento de la actividad simptica, como en el ejercicio fsico y el estrs, entre otras. As, la liplisis elevada en relacin con algunos de los factores mencionadosse puede reducir sustancialmenteen condiciones experimentales,por la desnervacin del tejido adiposo u otras tcnicas que implican la disminucin de la actividad de la noradrenalina. Es preciso recordar tambin que en general estas hormonas estimulantes de la fiplisis tienen un efecto opuesto en la lipognesis. Ejemplo de esto es la accin del glucagn y la adrenalina, cuyas acciones sobre este proceso fueron analizadas en el aphilo 49. Todo ello permite una regulacin coordinada y ajustada a las condiciones metablicas predominantes. Finalmente, otro sitio importante de regulacin de la liplisis en el hgado lo constituye la B oxidacin de los cidos grasos. Esta regulacin se produce fundamentalmentepor 2 mecanismos. EIprimero es de tiPo alostricoy est relacionado con el control de la entrada de los grupos acilo de cadena larga a la mitocondria a travs de la membrana mitoeondnal interna, mediante el sistema de transporte de acii

carnitina (captnlo 49). La enzima camitina palmitil transferasa 1, que cataliza la formacinde la ac carnitina, es inhibida alostricamentepor la malon COA.Cuando estemetabolitointermediariodela biasntesis de cidas gasosaumenta enel citoplasma, constituye una seal de abundancia en fuentes carbonadas v enersa. Efectivamente. se ha comprobado que la actividad de la carnitina palmitil transferasa 1es escasa durante el estadode nutricin adecuado cuando la B oxidacin de los cidos grasas se encuentra deprimida, mientras que est incrementada durante el ayuno, lo que se relaciona con un aumento de la B oxidacin (Fig. 50.13).

AGL Sangre
1

VLDL
Hgado Acilgliceroles

~ c i iCOA oxidacin

Aceti - COA Cetognesis Cuerpos cetnicos

COZ + H,O

AGL: cidos grasos libres.

Fig. 50.13. Regulae!& de la entrada de los gnipos acilo a la mitoeondria. Obsrvese en la figura que la accin de la insulina(+) condiciona un aumento del malonil COA,con lo cual disminuye el pssa de grupos acilo para la R oxidacin en el interior de la mitoeondria. Un efecto contrario tiene el glueagn mediante un mecanismo de regulacin covalente (-) y Im AGL, por el mecanismo de regulacin alostrica(-).

El otro mecanismo est relacionadocon la disponibilidad de cofactores oxidados (NAD' y FAD) que se requieren como aceptores de hidrgenos en las reacciones de deshidrogenacin de la B oxidacin.

'I1.astomos de la 0 oxidadn de los dcidos grasos relacionados con la funci6n transportadora de la d b i n a

Teniendo en cuenta que el transporte de los cidos grasos hacia la matriz mitocondrial, en el cual la carnitina desempea un papel esencial, es un paso clave para que pueda producirse la B oxidacin en tejidos como el hgado y el msculo, pueden deducirse diversas consecuencias metablicas y clnicas en determinadas situacionesen las que exista una deficiencia de la propia carnitina o de las enzimas que participan en el transporte de la acil carnitina. La deficiencia de carnitina puede deberse a un dficitnutricional vinculado con aportes insuficientes de los precursores de la biosntesis: la lisina y la metionina (aminocidos esenciales). Los trastornos enzimticos pueden ser debidos a la deficienciade carnitina palmitil transferasa 1que afecte slo al hgado y conduzca a

una disminucin de la B oxidacin y de la cetognesis con hipoglicemia. Por otra parte, la deficiencia de la enzima carnitina palmitil transferasa 11afecta demanera primaria almsculoesqueltico,y pmducedebidadmuscular y mioglobinuria,aunque en su formams grave puede afectar tambin al hgado.

Resumen
La liplisis es un coqjuoto de procesos metab6Lim mediante los cuales se obtiene gran cantidad de energa como producto de la degradaci6n completa de los triacilgliceroles hasta CO, y H,O. Este proceso comienza con la hidr6iisis de los triacilgliceroles en las dnlas adiposas por medio de la acci6n de las Lipasas intraeelulares.La primera que acta es reguladshormonalmente (onnonosensible) y consuye el principal sitio de control de la iiplisia Luego actan otms tipos de Lipasa que dan como resultado la liberaci6n de glicerol y dcidos grasos. El giiceml no puede ser uolizsdo en el tejido adiposo pero s en el hgado, donde puede converiiraeen fosfodihidroxiscetona e incorporarse a la gluc6Lisis o a la gluwneognesis. Los dados grasos, por su parte, son transportados, unidos a la albmina, por la sangre hasta diversos tejidos como el hgado, el msculo eaqueltiw y cardaco, y otms tejidos en los que son uolizsdos principalmentecomo fuente energ6tica a partir de su oxidacin en condiciones Molgicas que favorezcan la liplisis como es el ejercicio Bisiw, el ayuno y el e & , o en condiciones patol6gicas s& como la diabetes mellitus desoompensada, entre otras. El principal meesnismo oxidativo de los dcidos grasos es el de la B oxidacin, mediante el cual eaoS se convierten totahnente en unidades de aeelil-COA, el cual pasa al d d o de Krebs, lo que justifica una parte importante del aporte energ6tico del pmeeso. AdemBs,en cada vuelta del pmoeso seproducen un NADE y un FADR,, que equivalen a 4 ATP cuando se incorporan a la cadena respiratoria. La oxidari6n de dcidos grasoa de un nmero impar de carbonosproduce aeetilCOA, m4s una molcuia de pmpionil COA, que es gluconeognica, mientras que en los inssuados se requieren 2 tipos de enzimas adicionales: una isomerasa y una reduciasa. En la 6 oxidacin w r o ~ m ase deeradan dados sainrados de cadena i COA, que luego es ransferido a las mitofondrias muy larga, pera410 basta &oil para su oxidaci6n completa Otras 2 formas partienlares de degradacin de los 4cidos grasoa son la alfa y la omega oxidaci6n. La regulaci6n de la lip6Lisis se produce, en primer lugar, al nivel de la primera hidr6Lisis de los triacilgliceroles en el tejido adiposo, catalizada por una Lipasa intraeelular bormonosensible. controlada esencidmente w r un m h o de modicad6n covalente. Las h&nonas adrenalina y glucagin, entre otras, favorecen la fosforiiaein de la enzima y de esta manera activan la Liplisis, mientras que la iasulina resliza la fnnein opuesta. Obo sitiode regolacin es la B oxidarin de los dcidos grawra En este mecanisarz m0 se controla el paso de los grnpos aeiio hacia la m t i mitofondrial mediante la inhibicin alostrica de la enzima carnina palmitii W e r a s a 1 por el maionil COA; d o se evita que en condiciones en las que se estn sintetizando 4cidos con @asos, pasen a degradarse a la miiowndria. La dispomiilidad de cofactores Oxidados constituye otro factor regulador de la oxidaci6n de los beidos g m s m

1 Explique por qu podemos afirmar que la B oxidacin no constituye la inversin . de la va de biosntesis de los cidos grasos. 2. Describa mediante un esquema cmose degrada totalmente hasta CO, y H,O el cido estdrico.

3. Calcule el rendimiento energtico neto de la oxidacin total de 1m01 de cido lurico (C,,). 4. Explique por qu en la oxidacin peroxisomal de los cidos grasos nose produce
ATi?

5. Calcule el rendimiento energtico neto de la oxidacin total de 1 molde triolena. 6. Explique cmo se evidencia en la regulacin de la fl oxidacin, el principio de
mxima eficienciay mxima economa. 7. JustiRquemolecnlarmente cmo se m d i c a l a velocidad de los procesos lipolticos en una persona despus que ingiere nna dieta abundante en glcidos. 8. Explique bioqumicamente cmo afecta el estado de ayuno la velocidad de los procesos lipolticos. 9. Justifique al nivel molecular, el efecto del ejercicio ikico aerobio como partede la prevencin y tratamiento de la obesidad. 10. Explique cmo se modifican la liplisis y la lipognesis en un paciente diabtico descompensado. 11. Elabore m esquema general que muestrela regulacin hormonal coordinada de la lipognesis y la liplisis segn se modifiquen las condiciones metablicas.

En el hgado de muchos vertebrados, incluyendo el organismo del ser humano, existen enzimas que tienen la capacidad, aun en condicionesfisiolgiw normales, de condensar una parte del acetil-COAproveniente de la p oxidacin delos cidos grasos y convertirlos en 2 cidos carboxiicos relativamente fuertes,de 4 carbonos: el cido acetilacticoy el cido p hidroxibutrico.Estos 2 cidos y la acetona que se forma por descarhoxilacin del acetilactico, reciben en su conjunto el nombre de cuerpos cetnicos.

COOH

cido acetil actico

cido p - hidroxibutrico

Acetona

Estos compuestos pasan a la sangre y son utilizados por diversos tejidos extrahepticos. Su concentracin normal en sangre est por debajo de 0 2 mmo1.L-' (cetonemia normal), pero sta puede aumentar considerablementeen determinadas condiciones metablicas del organismo, debido al aumento exagerado de su sntesis. En esas situaciones pueden llegar a ser una fuente energtica apreciable para algunos tejidos que normalmente slo los utilizan en pequeas cantidades. Tal es el faso del ayunoprolongado, donde constituyen un mecanismo de adaptacin fisiolgica que contribuyea la supervivencia del individuo. Tambin en situacionespatolgicas como ladiabetes mellitus se produce un gran aumentodesu concentracin.El aumento exageradoen la formacin de cuerpos cetnicos y la Limitada capacidad de los tejidos extrahepticos para utilizarlos, conduce a un cuadro clnico humoral conocido como cetosis cuya gravedad puede llegar hasta la muerte del individuo.

La biosntesisde los cuerpos cetnicos es un proceso que ocurre en el hgado. Las enzimas que intervienen en l se localizan en la matriz mitocondrial, donde tambin se

produce la P oxidacin de los cidos grasas. La cetognesis se inicia a partir del acetilCOAliberado de la P oxidacin, por lo que ambas vas se encuentran relacionadas funcionalmente. En la primera reaccin de la cetognesis, catalizada por la enzima B ceto-tiolasa, se condensan 2 molculas de acetil-COAy forman una de aceto acetil-COAmediante la inversin del ltimo paso de la fi oxidacin. O 2CH) C-S-COA Acetil- COA CoASH CoASH O O C-S-COA

11

A CHiC-CH,v

Il

II

Aceto acetil- COA

La prxima etapa es la formacin del cido acetil actico. Esto puede ocurrir por desacilacin directa del aceto acetil-COA,sin embargo, se ha comprobado que el mecanismo principal por el cual esto sucede es ms complejo y se inicia con la condensacin de una molcula de aceto acetil-COAy una de acetil-COA,reaccin cataJizada por IaenzimaShidroxi-3-mei glutar COAsintetasa (HMG COAsintetasa), que dalugar a la formacinde 3-hidroxi-3-meolglutaril COA(HMG COA).El carcter cetog~copredominante tejido heptico est dado por la presencia de esta enzima del en altas concentraciones dentro de la mitocondria.

o
C H j C-CH,-

11

o
C-.'-COA

o
CH , C--SCoA

11

II

CoASH CH, HMG COA

Aceto acetil -COA

El producto de la reaccin de la HMG COAsintetasa es el snstrato de la enzima 3-hidroxi-3-metil glutaril COAliasa, la cual produce el cido acetil actico libre y acetil-COAen una reaccin prcticamenteirreversible.

o o
Ho-tOH cH2-LcH2

F-

C H , CSCoA s-coA

II

o
C H c C-CH2-

11

o
C - OH

Il

CH, HMG COA

cido acetil actico

El acet-COApuede ser utilizado y parte del cido acetil actico es convertido, en el propio tejido heptico, en cido B hidroxibntrico por la accin de una enzima de la membrana mitocondrialintenia,la ~hidmxibuticodeshi~enasa, reaccin reversible que utiza como coenzima al NADH.

o
CH, C-CH,-

11

o
C- OH NADKH* NAD'

II

H C H , C-CHOH

l
I

o
C- OH

Il

Acido acetil actico

cido p hidroxibutnco

La proporcin relativa de cido B hidroxibutrico en el hgado es utilizada como ndice del estado de reduccin del NAD'en las mitocondrias:

Finalmente, el cido acetil actico puede ser descarboxilado espontneamente, con lo cual se forma la acetona.

cido acetil actico

Acetona

El tejido heptico no contiene todas las enzimas que permiten utilizar los cuerpos cetnicos como sustratos, lo cual determina un flujo neto de cuerpos cetnicos desde el hgado hacia los tejidos extrahepticos, donde podrn utilizarse como sustratos para la respiracin celular mediante su reconversin en acetil-COA. Este proceso enzimtico, conocido como cetlisis, tambin se produce en la mitocondria y mediante l los cuerpos cetnicos son convertidos en acetil-COAy, por lo tanto, en alimentadores del ciclo de Krehs. Sin embargo, esto slo ocurre en los tejidos extrahepticos y con diferente intensidad en cada uno. Por ejemplo, el msculo cardaco y la corteza renal utilizan preferentemente los cuerpos cetnicos a la glucosa, en condiciones normales, mientras que durante las primeras etapas del ayuno, la utilizacin de los cuerpos cetnicos constituye una fuente energtica importante en diferentes tejidos, en especial en el msculo esqueltico. Sin embargo, slo en ayunos ms prolongados -ms d e 3 das-,es queson utilizados por el sistema nervioso central como sustrato fundamental,por un mecaniFmode adaptacinante la carencia de glucosa. En el proceso de cetlisis, el cido betahidroxihutrico requiere inicialmente su transformacin en cido acetil actico y a partir de ah siguen una va comn. La B hidroxibutrico deshidrogenasa cataliza, en los tejidos extrahepticos, la reaccin inversa a la descrita en la cetognesis, al encontrarse aumentada en ellos la relacin NAD'INADH, por lo cual elcido D hidroxibutrico que penetra en las clulas es convertido en cido acetil actico. H C H , C-CH,-

o
C- OH
NAD'

II

o
C H c C-CH,NADH.H*

11

o
C- OH

II

OH
cido B hidroxibutnco

cido acetil actico

El cido aceol actico ese1sustratodelaenzimasucUnilCOAtransferasa (tioforasa), la cual cataliza la transferencia de la coenzima A del succinil COAal acetilactico, formndose aceto acetil-COAy cido succnico. La tioforasa est presente en muchos tejidos, pero ausente en los hepatocitos. Succinil - COA Acido succoico CHi

O C H 3C-CH,-

II

o
II

C- OH

O C-CH,-

11

o
C- SCo4

11

Acido acetil acitico

Aceto acetil - COA

MetaboLismo intennediano y su ngulaci6n

869

A partir delamolculade aceto acei-COAformada,seproducen 2 de acei-COA, por la accin de la enzima tiolasa, las cuales pueden incorporarse al ciclo de Krebs, lo que jusf~ca aporte energtico elevado. su

k
Aceto acetil -COA CoASH Acetil - COA

Por ltimo, las pequeas cantidadesde acetona producidas por la descarboxann del cido acetil actico que no son eliminadas con la respiracin, pueden ser metabolizadas por vas que conducen a su conversin en 13-propanodiol-1-fosfato, metabolito intermedio que se transforma en los cidos actico y frmico y, en menor medida, en los cidos lctico y pirvico, todos los cuales pueden ser utilizados por las clulas (Fig. 51.1).

H,C-C-CH3

II

Acetona

propanodiol - 1 - fosfato

H,C-COOH cido actico

+ HCOOH
cido frmico

OH

H,C-C-COOH, l

Acido lctico

Fig. 51.1. Destina rnefablico de la acetona. Se producen diversos compuestos que pueden ser utilizados en el organismo.

H,C-C-COOH,

11

Acido p i ~ v i c o

Como es conocido. el acetil-COAes un metabolito de encruciiada aue ouede " formarse en las mitocondrias a partir de los glcidos, los amiuocidos y los cidos grasos. Puede seguir diferentes vas metablicas,por ejemplo, incorporarse al ciclo de Krebs y oxidarse totalmente, o ser el precursor de la sntesisde ciertos Ipidos o formar cuerpos cetnicos. Su destino depende de las condiciones metablicas y de las caractersticas enzimticas del tejido donde tiene luear el oroceso. Para que el aceol-COA pueda incorporarse al ciclo de Krebs debe estar garantizado el suministrode oxalactico. Una parte importante deestecompuestose forma a partir del pirvico proveniente de la gluclisis. Cuando las concentraciones de acetil-COAsobrepasen las del oxalactico disponible,el exceso se transformar en cuerpos cetnicos.

. .

- .

Reguiacin del metabolismo de los cuerpos cetnicos

Tanto las enzimas de la sntesiscomolas de la degradacin de los cuerpos cetnicos se encuentran localizadas en las mitocondrias, pero en diferentes tejidos segn vimos.

Adems, ambos procesos ocurren con gran intensidad en las mismas condiciones metablicasdel organismo, durante la lipk intensa. Sin embargo, la especializacin celular de los diferentes tejidos evita que debido a estas caractersticasse establezca un ciclo ftil. Efectivamente, la relacin que se crea entre el hgado y los tejidos extrahepaticos por medio de los cuerpos cetnicos,sintetizados en el primero, constituye una forma de transporte de unidades de 2 carbonos (acetilo) desde el hgado hasta los tejidos donde son utilizados (Fig. 51.2). Sangre Acil - COA Pulmones 4 Tejidos extraheuticos

*Cuerpos' cetnicos
/

'
C

O x a Cicloa o l Rin Krebs

Q
Ciclo NADH FADH, CR+

co2
ATP

2 CO, CR: cadena resoiratona

Fig. 51.2. Esquema general de la relacin cetognesis-cetlisis en el arganism". Se muestra el transporte dc los cuerpos cetniros desde el hgado, donde son sintetizados a partir del acetil-COA,hasta disersus tejidos extrahepticos, en los que son reconvertidos en aeetilCOA,y sus carbonos son anidados en la respiracin celular.

El tejido adiposo desempea un papel importante en el metabolismodelos cuerpos cetnicos, ya que constituye el sitio de almacenamientode los cidos grasos en forma de triacilgliceroles,los cuales, al ser liberados por accin de la lipasa, pasan a la sangre y son captados por el hgado, donde puede ocurrir la P oxidacin, proceso con el que est ntimamente vinculada la cetognesis. De hecho, ambos procesos se localizan en el mismo compartimiento celular, y el producto de uno (acetil-COA)constituye el sustrato del otro. El estado nutricional y las condiciones fisiolgicasdel organismo, por medio de su infiuencia sobre la secrecin de diferentes hormonas, determina la disponibilidad de cidos grasos para la p oxidacin, y con ello, la intensidad de la cetognesis. Todos estas aspectos constitnyen las premisas para comprender la regulacin de la sntesisde los cuerpos cetnicos. La actividad cetognica del hgado est regulada mediante 3 pasos crticos. El primero, en el tejido adiposo, pues para la formacin de los cuerpos cetnicos es necesaria la liberacin, a la circulacin, de cidos grasos por accin de la lipasa hormonosensible presente en este tejido, lo cual depende de diversas hormonas, pero en gran medidade la proporcin insulina/glucagn(captulo50). Segn estemecanismo, los propios cuerpos cetnicos tienen una funcin de regulacin, pues estimulan directamentela secrecin de insulma por el pncreas. Es bueno recordar que el hgado tiene la capacidad de extraer el 30 % o ms de los cidos grasos no esterificadosque pasan a travs de l, tanto si el animal est alimentadocomosi est en ayunas. El segundo paso lo constituye la propia regulacin de la oxidacin, que ya fue analizada en el captulo precedente, as como la velocidad de esterificacin de los cidas grasos. Este ltimo como factor anticetonmico que depende, en esencia, de la disponibilidad en el hgado de precursores que suministren glicerol-3-(P). b a n d o predomina la B oxidacin sobre la esterificacin se favorece la cetognesis. Por ltimo, el acetil-COAformado principalmente en la oxidacin de los cidos grasas en el hgado, puede ser oxidado en el ciclo de Krebs o seguir la va cetognica.

Se ha observado que en la medida en que se eleva la concentracin de cidos grasas en el plasma, aumenta proporcionalmente su conversin en cuerpos ceinicos en relacin con los que son oxidados en el ciclo de Krebs, de manera que una gran parte de la energa potencial contenida en un inicio en los cidos grasos no llega a ser transformada en ATPen el hgado y utilizada en sus funciones metablicas, sino que es portada por los cuerpos cetnicos hasta otrostejidos donde constituyen una fuente de energa a partir del proceso de cetlisis.

Desbalance entre la eetop6nesis y la cet6iisis

El desbalance entre la cetognesis y la cetlisis se produce cuando la sntesis heptica de cuerpos cetnicos es mayor que la capacidad de los tejidos extrahepticos para utilizarlos. El aumento de la sntesis de los cuerpos cetnicos est relacionado con la capacidad disminuida del ciclo de Krebs para asimilar todo el aceol-COAquese forma en determinadascondiciones metablicas. Tericamente, la disminucin relativa de la actividad del ciclo de Krebs en esas condiciones puede deberse a una cada en la concentracin de cido oxalactico drntn)dc I;LS inilocoiidrias,It) c u ~puede ucurrir romo cons~viirncia un incrcniento l dc cn la relacin N:\I>ll&AD'. Krehs h~ waerido uiir. uursio uue el oualacctico a encuentra tambin en la va de la gluconeognesis, en condiciones en que esa va se ve favoreciday el cido pirvico proveniente de la glnclisis est disminuido, se produce una cada en la concentracin del oxalactico en la mitocondria, lo cual permite explicar la cetoacidosis que tiene lugar en determinadas situaciones. En aa condicionesse produce unacetosis,quese caracteriza por un aumento delos ts cuerpos cetnicosen la sangre (hipercetonemia)y so excrecinpor la orina (cetonuria).Se elimina, adems, la acetona por la respiracin (alientocetnico). Este estado patolgico se caracteriza, adems, por un desequilibriocido-bsico (cetoacidosismetahlica), cuya intensidad y gravedad pueden ser variables segn la causa y otros factores que lo modifiquen. Las 3 causas ms k u e n t e s de este deshalanceson: una dieta ricaen grasa y deficienteen glcidos, el ayuno prolongado y la diabetes meliitus descompensada. A continuacin anazaremos, como modelos metahlicos, las 2 itimas.

..

C e W del ayuno Como sealamos anteriormente,para analizarla regulacin y el balance de estos procesos se debevalorar cmase comportala relacin entrela concentracin deinsuna y de glucagn. En la medida en que se va estableciendo la situacin de ayuno en el organismo, disminuye la disponibilidad de glucosa, por lo que aumentan los niveles de glucagn y disminuyen los de insulina. Se estimula entonces laliplisis (captulo SO), de tal forma que aumentan progresivamente las concentracionesde cidos grasas en la sangre. Estos entran al hgado, donde se estimula la B oxidacin de los cidos grasos, con lo cual se incrementa de maneraconsiderablela concentracinde acetilCOA.En estas condicionesde ayuno, sin aporte de glucosa, una vez que se agotan las reservas de glncgeno heptico, la glnclisisdisminuye de forma crtica y no se forma el cido p i ~ v i c o necesario que constituye la fuente principal de oxalactico para la anaplerosis del ciclo de Krebs. El acetil-COAen exceso se condensa y aumenta l a intensidad de sntesis de cuerpos cetnicos (Fig. 51.3). Los cidos p o s y los cuerpos cetnicos pueden ser utilizados comocombustibles en el tejido muscular. La utilizacin mayor de unos u otros depende, en gran medida, de sus concentraciones relativas. Aunque en el ayuno prolongado los niveles plasmticos de cuerpos cetnicos son superiores a los de cidos grasos, estos ltimos se encuentran en mayor concentracin en el interior delas clulas musculares que en el plasma. De manera que en este tejido, la degradacin de los cuerposcetnicoscomo fuente de energa no constituye, aun en estas condiciones,un requerimiento esencial, aunque su utilizacin se incrementa. Una situacin diferentese produce en el cerebro,ya que ste no puede utilizar los cidos grasos como combustibledirecto, pues si bien tiene las enzimas necesarias, la

Glucosa Gluclisis j

cidos grasos

w;

OxalacticoCiclo

a'.''

1 . Hipercetonemia 2 . Cetontuia 3 . Aliento cetnico

O : procesos activados; 0: procesos disminuidos.

Fig. 51.3. Aumento de la sntesis de los euerpos cetnicos durante el ayuna. Se sealan las 3 manifestaciones que caracterizan la eetosis producida en condiciones de ayuna.

limitacin est en su entrada a esas clulas. En estas condiciones, las concentraciones plasmticas de los cuerpos cetnicos llegan a ser superiores a los de glucosa, pues existe bipoglicemia (menor de 35 mM) e hipercetonemia (hasta 8 mM). Los estudios realizados sobre el metabolismo enceflico durante la inanicin, indican que una alta proporcin de los cuerpos cetnicos formados en el hgado se utiliza como combustible por el sistema nervioso central. En estas clulas se produce una induccin delas enzimas cetolticas. De modo que la cetosis del ayunoconstituye un mecanismo de adaptacin metablica del organismo que garantiza al cerebro una fuente energtica abundante cuando las concentraciones de glucosa plasmtica son insuficientesaun con la estimulacin de la gluconeognesis. Por otra parte, podramos afirmar que es una va que economiza protenas hsticas, puesto que en esta siinacin metablica, la glucosa se forma en el hgado principalmente a expensas de los aminocidos glucognicos provenientes de la degradacin de esas protenas y su destino fundamentales el cerebro. De manera quela utilizacin de las cuerpos cetnicos por este tejido como fuente de energa permite disminuir las demandas de glucosa y con ello se hace ms lento el catabolismo proteico. Por otra parte, debido al carcter cido de 2 de los cuerpos cetnicos, el pH sanguneo puede disminuir sensiblemente y producir una acidosis metablica (cetoacidosis),acompaada de prdida de Na' y aumento de la diuresis. Sin embargo, las concentracionesmximasde cuerpos cetnicos en lasangre, durante el ayuno, no rebasan los 8 mmo1.L-', lo cual trae consigo una situacin de gravedad menor que en la cetoacidosis del diabtico. Esto se explica, en primer lugar, por el propio efecto regulatorio de los cuerpos cetnicos sobre los niveles sanguneos de las hormonas pancreticas durante el ayuno. Recordemos que L elevacin de stos produce la a d libednde llisulin~acUalinhibelasw:min e u . Demanera que disminuye la intensidad de la liplisis y, por tanto, de la cetognesis.En segundo, el incremento gradual en la utilizacin de los cuerpos cetnicos por el cerebro en condiciones de ayuno prolongado limita el aumento de su concentracin en la sangre.

Cetoaddosis diabtica Unacaractersticacomn en los pacientes con diabetes meitus es labipergcemia; esto es consecuencia de una disminucin en la utilizacin de la glucosa por los tejidos Y un aumento en su produccin; lo ltimo es debido a la activacin de la gluconeognesis y la glucogenlisis en el hgado. Las manifestaciones de esta enfermedad endocrinometahlica estn relacionadas con una disminucin de la actividad insulnica sobre diversos tejidos. La diabetes mellitus suele acompaarse, adems, de un aumento en la concentracin de glucagn. La cetoacidosises una complicacin aguda que se presenta principalmente en la s diabetes tipol. El tejido adiposo e muy sensibles esta hormona, por lo quesu deficiencia

desencadena una serie de efectos metablicos entre los que se encuentra la activacin de la liplisis en dicho tejido. En ese incremento influye, adems, el aumento de las hormonas lipolticas, tales como el glucagn o la hormona del crecimiento. Esto hace que aumente la llegada de cidos grasos no esterificados al hgado en cantidades que pueden duplicar las que se encuentran en personas normales durante el ayuno, los cuales, una vez dentro de las clulas, se convierten en sus formas activas (ac COA), cuyas concentraciones aumentan. Adems se produce una disminucin de la tipognesis debido a las moditicacioneshormonales que mencionamosy al propio aumento de la concentracin de acil COAintracelular. Estos factores deprimen la actindad de la acetil-COAcarboxilasa, con lo que se produce una disminucin del malonil COA.Este metaholito es un inhibidor de la caniitinapalmitiltransferasa 1, por lo que su disminucin favorece la actividad de esta enzima, que participa en la entrada de los cidos grasos al interior dela mitocondria para su oxidacin. El acetil-COA formadoen la oxidacin de los cidos grasos se acumula debido a la poca actividad del ciclo de Krebs, lo cual favorece que se derive hacia la sntesis de cido aceiil actico, a partir del cual se forman, por las reacciones ya conocidas, el cido p hidroxibutricoy la acetona (Fig. 51.4).

Glucosa
iJiu~

adiposo

: ,

hcido pirvico

Fig. 51.4. Formacin aumentada de cuerpos eetnicas en la diabetes mellitur descompensada. En el esquema se puede apreciar la disrninucin de la gluclisis y el incremento de la liplisis. El aeetil-COA formado por la P oxidacin de los cidas grasos se deriva hacia la formacin de cuerpos eetnieos debida a la baja concentracin del cido oxalactieo causada por la disminucin de su principal fue". te, el cido pirviea, metabolito de la gluelisis.

Estos 3 cuerpos cetnicos llegan a alcanzar valores muy elevados en la sangre de individuosean diabetestipo 1dpseompensada @asta35mmo1.L-'). Este mayor aumento de la cetonemia en la cetoacidosis del diabtico y, por tanto, mayor gravedad que duranteunasituacin de ayuno prolongado, es debido a 2 razones fundamentales: en primerlugar, el aumento de los cnerposcet~cos el diabtico no produce incremento en en la liberacin de insulina, por lo cual no se inhibe la secrecin de glucagn por ese mecanismo, de manera que se mantienen plenamente activadas la liplisis y la cetognesis. Por otra parte, teniendo en cuenta que el cerebro no requiere insulina para la entrada y el metabolismo de la glucosa, en las condicionesde hiperglicemia del diabtico descompensado, este tejido contina utilizando glucosa como fuente de energa, por lo que no es necesaria, ni se produce, la adaptacin metablica que conduzca a la utilizacin de los cuerpos cetnicos, como ocurre en el ayuno y, por lo tanto, tiene lugar un aumento incontrolado de la concentracin de los cuerpos cetnicos en la La disminucin del pH sanguneoy el aumentodel CO, a partir del cidoc a ~ b ~ c o , producen un estmulo del centro respiratorio, lo que provoca un tipo de respiracin
sangre.

caractersticaenestos pacientes. Por otraparte,la hiperglicemiaconducealaglucosuria cuando se rebasa el umbral renal, la que provoca unadiuresisosmtica. De manera que la deshidratacin y la acidosis metablica producen en su conjunto un desequilibrio bidroelectroltico que provoca graves trastornos del metabolismo y de la funcin cerebral,que en situaciones extremas pueden Llevar al coma y a la muerte.

Los cuerpos cet6nieos wmprenden 3tipos de wmpue&w el 4cido acetil &tiw, el dcido 3 bidroxibuiriw y la acetona, los cuales se fo! en las mitowndriaF
de los hepatofiios a partir del acetil-COAproveniente de la 0 oxidacin de los se dddos grasos. Et proceso es wnoddo wmo cetognesis. Las enzima8 que participan son la 0 cetotiolasa, la HMG COAsintetasa y la HMG COALiasa El primer cnerpo cet6niw formado es el dcido acetil actico, a partir del cual se forman los dos restantes. El tejido bepdtiw no wntiene todas la enzimas necesarias para poder degradar los cnerpos cet6nim, de manera que &tos difunden a la sangre y alcanzan diferentesejidos extrabep6tieos en los cuales se produce midegradacin (cet6W) ha& acetil-COA,que es utilizado wmo fuente de energla en la respiracin celular. E1 msenlo cardaw los utiliza w n preferencia a la gluawa, incluso durante el reposo; el msculo esqueltiw, durante el ejercicio sim; mientras que el cerebro solamente los degrada en determinadascondiciones de adaptacin metab6lica wmo el ayuno prolongado. La regulacin de la cetognesis depende, en primer lugar, del grado de movilizaein de los dcidos g r m desde el tejido adiposo; en segundo lugar, de la regulacin de su transporte ba& el interior de la mitowndria y, en tercer lugar, de la distribucin del acetil-COA entre la va cetoghca y el ciclo de Krebs, segn la disponibidad de oxaiactiw. En determinadas wndiaoues meiab6licas puede p r o d u h un aumento exagerado de la fonnaci6n de cuerpca cet6nieos que rebasa la capacidad de los tejidos exirahepdtieos para degradarlos, lo que da lugar al estado de c e W , el cual puede tener dilerenti cailsasy niveles de gravedad. Dos modelos meiablims diferentespueden servir para ejemplicarlo: el ayuno prolongado y la diabetes mellitus descompensada. En el primer caso, la ausencia de ingeson de alimentos wnstituye el origen. Esto wnduce a una disminucinde la gluc6W y, por lo tanto, se produce un dicit en la formacin del oxalaetiw a partir del pirnw. Debido a esto tiene lugar una disminucin de la adividad del ciclo de Krebs. De manera que la acumulacin del acetil-COAproveniente de la 0 oxiaein de los 4cidos gamfavorece su wndensaci6n dentro de la mitowndria y, por ende, aumenta la cetognesis. En la diabetes meitus, la causa es un dficit en la adividad iasulilca, lo cual tambin wnduce a una incapacidad de utilizacin de la glucm por el hepatoeito y a un incremento de la 0 oxidacin en este tejido, que wndiaona el aumento de la cetopnesis. El estado de c e W es m&s grave en la diabetes mellitus que en el estado de aYnno, debido, en& otras wsas, a que en este ltimo se produce la adaptacin del cerebro a utilizar los cuecenicoa: en la situacin de bipogcemia que existe, 10 que no ocnrre en la diabetes mellitus.

1. Describa el proceso de la cetognesis. 2. Explique la relacin funcional de la cetognesis. 3. Describa el proceso de la cetlisis.

oxidacin de los cidos grasos con la

4. Analice cmo se encuentra la actividad cetognica en un individuo normal despus de una dieta balanceada. 5. Explique por qu la cetognesis y la cetlisis pueden ocurrir en las mismas condiciones metablieas sin que esto constituya una falta de eficiencia del organismo. 6. Explique en qu consiste la especializacincelular en el metabolismo de los cuerpos cetnicos. 7. Considera usted que lacetognesis es un proceso beneficiosoo perjudicial para el organismo? 8. Explique por qu en la diabetes meitus descompensada la hipercetonemia alcanzavalores mucho mayores que en el ayuno prolongado. 9. Explique el riesgo que corren los pacientes obesos al intentar utilizar dietas ricas en grasa y exentas de glcidospara disminuir de peso. 10. Podr sobrevivir a un ayuno prolongado un individuo con un dficit congnito de carnitina palmitil transferasa 1en el hgado? Fundamentesu respuesta.

En estecaptulose hatanlas difemn- vas que conducen a lasnteis de lar principales componentes lipdicm de las membranas (captulo 20), as como su catabolismo. El hecho de que no se conozcan alteraciones congnitas del metabolismo que decten significativamente la produccin de estos tipos de lpidos, pone en evidencia su extraordinaria importancia para el mantenimiento de la vida. Presumiblemente este tipo de falla es incompatible con la supervivencia del organismo, lo que resulta muy comprensible si se tiene en cuenta la trascendenciafuncionalde la membrana celular. See>piondrnlas~tis~degtosmp~estosgue~enbsel~eucaiiOtrs

B o 9 n e i de los glieemfosftidos iitss

El cido fosfatdico es un intermediario central igual que en la sntesis de los triacgliceroles. En los encariontes hay 3 vas para la sntesis del cido fosfatdico: una ruta principal -igual que en E. coli-, en la cual el 3-glicerolfosfato,por accin de las enzimas 3-fosfoglicerolaciltransferasa y 1-acilglicerol-3-fosfato aciltransferasa, incorpora 2 acilos sucesivamente (captulo 49); otra ruta alternativa, a partir de la fosfodiidroxiacetona, que por la accin de la fosfodihidroxiacetonaaciltransferasa se convierte en 1-acilfosfodihidroxiacetona.sta se reduce a 1-acilglicerol-34P) mediante la enzima 1-acilfosfodihidroxiacetona reductasa. CH,OH

c=o
C W O- (P)

I I

Acil - COA

CoASH

Fosfodihidroxiacetooa aciltransferasa

, &=o 1

CH? O-C-R, II

CH- O-(P)

Fosfodihidroxiacetona

1 - acilfosfodihidroxiacetona

I c=o I

CH,

O-C-R, II

NADPH'+ H+

CH2- )@ O '-

CHrO-C-R, I Il t H-C-OH O 1 - acilfosfodihidroxiacetona I reductasa CH,- O-(P)

NADP'

1 - acilfosfodihidroxiacetona

I - acilglicerol - 3 - fosfato

La tercera mta es por fosforiiacindel diacilglicerol. CH,- ODiacilglicerol quinasa

CH,- O - C-R,
Il

CH, O- C-R,

O Diacilglicerol

i:

cido fosfatidico

Estos fosftidos,que son los ms importantescuantitativamenteen los eucariontes, se derivan del diacilglicerol. ste se deriva del cido fosfatdico, al que recin hemos hecho referencia, por accin de la fosfatidatofosfatasa.

;,

<
, .

,~

,
Fosfatasa del cido fosfatdico

, .

:
.
.

:
t .

. .
.

PO,H,

cido fosfatdico

Diacilglicerol

cido fosf6rico

Primero es necesario transportar la colina al interior de la clula. Una vez all es convertida en fosfocolina por accin de la enzima colina quinasa que se encuentra en T:moonctdtaseaa el citosoL Lafosfocolina,enun paso catalizado por la C P f f c a i i r n f r s , reacciona entonces con el CTP: P -COLINA + CTP CDP - COLINA + PP

La CDP-colina reacciona de inmediato con el diacilglicerol, reaccin catalizada por la enzima CDP:colina lJ-diacilglicerol fosfocolina transferasa. Esta enzima se ha localizado en el retcnlo endoplasmtico(RE).
- colina

+ diacilglicerol

Fosfatidilcolina + En una reaccin similar a la de la fosforilacin de la colina se produce la fosfoetanolamina. La etanolamina quinasa se halla en el citosol, all tambin existe una CTP:fosfoetanolamina citidiltransferasa, que da lugar a CDP-etanolamina. Igualmente, el paso siguiente es la reaccin de la etanolamina activada con el

diacilgiicerol, catalizadopor la CDP-etanolamina: 12-diacglicerolfosfoetanolamina transferasa, localizada tambin en el RE.

(

rW - etanolamina + diacilglicerol

Fosfatidil - etanolamina + CMP Parece que la quinasa es la misma, pero las otras 2 son enzimas distintas. En microorganismascomo las levadufasy las pseudomonas, y en el hgado de los mamferos, existe una va para la formacin directa de fosfocolina a partir de fosfoetmolamina.Los metiios son adicionadasen 3 reacciones consecutivas,catalizadas por la misma enzima, la fosfwtanolamina-N-meamera (PM = 20 000). Es importante precisar que esta metilacin de la fosfoetanolamina, junto con la degradacin subsecuente de la fosfocolina, es el nico mecanismo conocido por el cual el hgado produce colina:

H,O
Fosfatasa

Naturalmente, nola produce en las cantidadessuficientes, dado quelas mltiples metilaciones requieren a su vez del aminocido esencial metionina, y el destino fundamental de la fosfocolinaes la produccin del fosftido, y no ser fuente significativa de la colina libre. sta se necesita para la formacin de otros compuestos, como el neurotransmisoracetilcolina,por citar un caso. El pulmn produce una especie de fosfatidilcolina: dipalmitilfosfatidilcolina,en la que los cidos palmticos estn en las posiciones 1 y 2 del glicerol. Esta especie de fosfatidilcolina,que contrasta con la mayora que tiene el cido grasoen la posicin 2 insaturado, es el principal componente (aproximadamente50-60 %)del surfactante Pulmonar. La mayora de estos agentes surfactantes son de naturaleza lipdica, con menos del 20 % de protena, y disminuyen la tensin superficial en los alveolos Pulmonares, de modo que no colapsen cuando se expela el aire. En este caso la fosfatidilcolina se produce por la va del CDP-colina. El cido graso en posicin 2 se hidroliza por la fosfolipasaA, y la liso-fosfatidilcolinase reacila Palmitil- COA.Esto es un buen ejemplo de la modulacin de la composicin en 4~idos r a . 0 de los fosfolpidos. La secrecin deficiente del surfactante pulmonar en g ~ recin nacidos constituye la causa principal del sndrome de distrs respiratorio por tambin ocurren en otros membrana hialina. as reacciones de desacilacin-acilacin

tejidos y proveen una ruta de importancia para la introduccin de cidos grasas poliinsaturados en la posicin 2 de los fosfolpidos.

Ls fosfatidilserinaes el resultado,en las c l de f e , de a accin de una enzima de intercambio bsico hallada en el RE. El sustrato puede ser fosfatidiletanolaminau otro fosfolpido:
caz+
:xiIII:~

Fosfatidil - etanolamina +

Fosfatidil -

.,~CII.I+

etanolamina

La fosfatidilserina puede ser descarboxilada a fosfatidiletanolamina en la mitoeondria por la fosfatidilserinadescarboxilasa. Por consiguiente,bien puede ocnmr un ciclo cuyo efecto neto sea convertir serina en etanolamina, y ste parece ser un mecanismo importantepara la biosntesis de etanolamina en las clulas eucariotas. No se conoce ninguna enzima capaz de la descarboxilacin directa de serina libre en etanolamina. En cuanto a la sntesis de fosfatidilinositol y fosfatidilglicerol,aqu tambin el CDP-diacilgliceroles intermediario en los mamferos y las levaduras. El inositol se sintetiza a partir de la D-glucosa-6-(P). La CDP-diacilgliceril inositolfosfatidil transferasa cataliza la reaccin siguiente:
CDP

diacilglicerol + inositol

Fosfatidil - inositol + CMP

La sntesis del fosfatidilgliceroltienelugar en las mitocondrias y el RE,mediante las reacciones siguientes:

(1)

CDP-diacilglicerol+ glicerol-3-(P)

3-fosfatidil-1-glicenl-3(P) + CMP

(1)g1icerofosfato:fosfatidiltransferas; (2) fosfatidilglicerolfosfatasa.

y En las mitocondfias, el CDP-diacilglicerol se condensa con fosfatidi~~licerol produce cardiolipina, necesaria para el sistema transportador de fosfato y, adems, como sustancia que activa la citocromo oxidasa. En las clulas de mamferos, la cardiolipinase halla, primordialmente, en las mitoeondrias. El nombre tiene relacin con haber sido descubierta por primera vez en el corazn, tejido muy abundante en mitoeondrias.

I II O=P-O-P-O-Ribosa 1 o I
CH2

OH

Citosina

OH O=P-O-CH,

OH -C-CH,OH l H

b
I

7H2

C H , O - C-R, CDP - diacilglicerol

Il

CH2- O K R 1

Fosfatidilglicerol

CH2- O- C-R,

o
Cardiolipina

11

CH2-0-

KR, o

En trminos generales, e1 5 % de los Ipidos en las membranas corresponden a fosfatidilinositol,tambin presente en mucha menor concentracin -alrededor de 25 veces menos de la concentracin de aqul- aparece fosfatidilinositol-4-(P)y fosfatidilinositol-43-bisfosfato. Se saba desde hace tiempo que el recambio de los inositolpidos es mucho ms rpido que el de otros fosfolpidos despus de aadir a la clula ciertas hormonas o neurotransmisores. Si embargo, la razn de este rpido recambio era ignorada Ahora sabemos que el fosfatidilinositol-43-bisfosfato degrada a inositol-l,43-trisfosfato se Y diacilglicerol por la fosfolipasa c. Ambos productos participan en sistemas de regulacin metablica (captulo 61).

Regulad611 la sntesis de los glicerofocpfBtidos de

La regulacin de la sntesis de los glicerolpidos en el hgado favorece a los Upidos esirucinralessobre los de reserva energtica. La abundancia de glcidos en la dieta provoca un aumento de la insulina que estimula la formacin de malonil-COA,activador de la sntesis e inhibidor de la degradacin de cidos grasos. Esto trae como consecuencia que exista acil-COA disponible, tanto para la sntesis de cido fosfatdico, como para la acilacin de diacilgiicero~.

La velocidad de sntesis de fosfatidilcolina se regula por la actividad de la CTP:fosfocolina citidil transferasa. Ella es un tetrmero cuyas subunidadestienen, cada una, pesos moleculares de 45 000, y se recupera del citosol y RE en los homogenizados. La del citosol es inactiva, su translocacin al RE resulta en su activacin. Dos mecanismos regulan la translocacin de la enzima. Se cree que la protena quinasa dependiente de AMPc fosfora la enzima y causasu desprendimiento de la membrana, proceso que puede revertirse por una fosfatasa. Adems, los cidos grasos promueven la unin de la enzima al RE -a pesar del grupo fosfato-,mienhas que la desaparicin de los cidos grasos libera la enzima al citosol. Este novedoso mecanismo para el control de la actividad enzimtica permite al hgado modular la sntesis de los fosftidos de colina en forma rpida y reversible. Tambin la conversin de cido fosfatdico en diacilglicerol est regulada. La actividad de la fosfatasadel cido fosfatdico aumenta y disminuye,con la velocidad de la sntesis de triacilglicerol, en un nmero diverso de situaciones metablicas. Igual que la anterior, parece ser activa cuando est asociada con membranas, e inactiva, si se encuentra libre, y un aumento en el suministrode cidos grasos provoca la unin de la s citoslica al RE, donde la fosfatasa e activada. El proceso se revierte si eliminamos los cidos grasos. Sin embargo, a diferencia de lo que ocurre con el suministro de citidiitransferasa,la cantidad de cido fosfatidicofosfaiasa es controlada por regulacin de la velocidad de la sntesis de la enzima. Es un caso de accin hormonal por glucocorticoides. No est claro cmo se regula el flujo de diacilglicerol a fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina o triacilglicerol. Parece ser, al menos en el hgado, que los requerimientos para la sntesis de componentes esenciales de las membranas, fosfatidicolinay fosfatidiletanolamina,se logran antes de que una apreciable cantidad de Lpidos de merva energtica (triacilglicerol)sea producida. Como era de suponer,la regulacin de la sntesis de estos Ipidos est ntimamente relacionada con el mantenimiento, proliferacin y funcin de la membrana plasmtica y las membranas celulares internas, como las del RE y el Golgi.

Ubicadn nalde los gcerofasfitidosen las membranas

Las reacciones finales en la sntesis de los fosftidos de colina, etanolamina, serina e inositol ocurren en la snperikie citoplasmtica del RE. Recientemente se ha evidenciadoquelas membranasdel Golgi tambin contienen enzimas de la biosntesis de los fosfolpidos. Los fosftidos de glicerol y cardiolipinase sintetizany permanecen cierto tiempo en la mitocondria. Existen 2 aspectos complicados en este campo. Por un lado consideremos que la sntesis de estos fosfoipidostiene lugar en la cara citoplasmtica del RE, y sin embargo, ellos se hallan a ambos lados de la bicapa. Cmo alcanzan el lado interno de sta? Por otraparte,tienen que existir mecanismos mediante los cuales en la clula se produzcan la seleccin y el transporte de los fosfolpidos, desde el sitio de sntesis hacia otras membranas de la clula. En cuanto a la primera cnestin se cuenta con indicios para imaginar un medio probable. Experimentos recientes con membranas del RE sugieren que la fosfatidetanolaminarecin sintetjzada,se incorpora inicialmenteslo a la hoja interna, y en la externa aparececerca de 1 1veces ms rpido de lo que podna esperarse,sobrela 0 base del mecanismo de Bipflop para los fosfoipidosen los modelas de membrana (captulo 21). Esto Ileva plantear la posibidad de que la rotacin hansvem de Ipidos a travcde la bicapa podra ser c a t a d a por una o ms protenas en las membranas biol@cas. De hecho,una evidencia reciente mnestrd queel lip-flopdeIosfodoLpidosenlas membranas biolgicas requierr ATP, y probablemente se involucran una o ms enzimas. De existir tales protenas,entonces sus actividadespueden tener un papel en el establecimientode la distribucin asimtrica de los ipida~ entre las 2 monocapas.

En respuesta a losegundo, una posibidad esque losfosfolpidosseantransportados dentro de la clula como parte de membranas. Desde este punto de vista, vesculas membranosascon protehas especficas de membranasedesprenden del RE,semueven a travs del citoplasma y se fusionan eventualmentecon la membrana de un organelo en particular. Las protenas especficas en la superficie de la vescula pueden dirigir sta hacia un organelo determinado o permitir la fusin despus de una colisin. Hay otro mecanismo posible para la transferencia intracelularde los Lpidos. ste lo proveen las protenas intercambiadorasde fosfolpidos, halladas en el citosol de las dlulas eucariotas. Estas protenas caalizan el intercambio de molculas de fosfolpidos entre2 membranas. Por ejemplo,una molcula defosfatidilconaen el RE intercambia con una molcula defosfatidilcolina unida a la protena de intercambio. La protena se mueve hacia una mitocondria, donde ocurre otro intercambio (Fig. 52.1). As una molcula de fosfatidilcoluiapuede ser movida desde el RE hasta la mitocondria. Algunas protenas de intercambio que han sido aisladas, no muestran especifiudad por el grupo polar, mientras que otras son especficas en alto grado.
--

Kericulo endoplasmtico

vPC*IJ
1- R E -

+ Proteha - PC RE-PC + Protena - E 2 - Protena-E + Mitocondria- P m P r o t e n a - P C + Mitocondria- E 1 + 2 - RE-= + Mitocondria- P C F RE-PC + Mitocondria- E
PC:fosfatidilcolina;RE: retculo endoplasmtico
La protena intercambiadora de fosfatidilcolina de hgado de res ha sido purificada. Est presente en cantidades muy pequeas en la clula, tiene un peso molecular de 28 000 y es altamente especfica para la fosfatidilcolina. Parece que existe un sitio de unin hidrofbico no covalente para fosfatidilcolina por cada molcula de protena. En ese sitio la secuencia de aminocidos es:

Mitocondna

Fig. 52.1. Transferencia intracelular de fosfolpidos. Se representa esquemticamente el intercambio de fashtidileolina entre 2 organelos citoplasmticos mediante una pmtena transporiadora.

Dado que la mayora de los fosfolpidosse sintetizan en el RE, se requiere un mecanismo para la transferencia de ellos hacia otras partes de la clula, tales como el ncleo o la membrana plasmtica. Las protenas intercambiadoras son buenas ae. quela membrana crezca,se necesitauna -didatas para esta t r a Sembargo,~ara h;uisferencia neta de lpidos, y esto ha sido dificilde demostrar con estas protenas. Al menos, las protenas podran funcionar en la renovacin de los fosfolpidosen varias mabranas, por intercambio, dado que los fosfolpidosen las clulas eucariotas no se

rerambii

Degradacin de los giieerofddtidos

Las enzimas que degradan a los fosfolpidosse llaman fosfolipasas. Se clasifican de acuerdo con el enlace que rompen: Fosfolipasa A!
l

II CH3(CH,)54C-SpC0A Pahnitil -

Lasfosfolipasassehallan en todo tipo declda eucariota y en varias localizaciones subcelulm. Algunas muestran especif~cidad el grupo polar dela cabeza, otras no. por Las ms estudiadashan sido ladel pncreas y la del veneno de serpiente,por ser buenas fuentes. La pancretica funciona como monmero, mientras que la del veneno deserpiente lo hacecomo dmero. La primera se formacomo zimgeno y es activada por la tripsina mediante la hidrlisisde un pentapptido desn extremo amino terminal. Es una enzima estable que resiste concentraciones8M de urea. La regulacin de la actividad de las fosfolipasas se estudia mucho ahora por haberse descubiertola protena lipocortinade peso molecular 37 000, un inhibidorde la fosfolipasa A,. La sntesis de lipocortina es inducida por los glucocorticoides. La pocortina parece que inhibe porquesecuestrael sustratode la enzima. El significado fisiolgico de ella actualmente es desconocido.

Biosntesisde los esfingoipidos

Los esfmgotipidosson los principales componentesde la cubierta de mielina, una estnicturamembranosamultaminarqueprotege y asla las fibras nerviosas. Tambin son componentesde las Lipoprotenas. Inclusolosencariontessimples, como la levadura, contienen efingolpidos, pero los procariontes no. La esfingosinay la esfuiganinason las principales bases de larga cadena presentes en los esfingolpidos.La biosntesis de la esfinganina se realiza en el RE, por condensacin de sus 2 precursores: el palmit-COAy la serina. El proceso es catalizado por la enzima 3-cetoesnganinasintasa, en un primer paso, y en una reaccin siguiente por la enzima 3-cetoesfinganinareductasa (Fig. 52.2). La sintasa contiene fosfato de piridoxal como cofactor esencial. Una vez que la base de largacadena est formada, reacciona rpidamente con acil COApara formar ceramida Aunque la esfingosina es el esqueleto ms abnndante,el origen del doble enlace A-4-trans ha sido un enigma por muchos aos. Ahora se sabe que, en clulas de ratn cultivadas, el doble enlace se introduce despus que la esfinganina ha sido N-acilada (Fig. 52.3). La esngomielinase sintetiza por la transferencia de un anillo de (P)-colina desde unafasfatiddinahastalaceramida.Laenzimaestunidaalamembranay selodiza tanto en el Golgi como en la membrana plasmtica (Fig. 52.4).

H-C-YIJ

3-cetoesfinganina

Fig. 52.2. Biosntesis de Ia esfinganina.

a)

Esfinganina + C H , (CH,),c C S-COA Palmitil - COA Acil - COA Acil - COA transferasa CoASH YH,OH H- C

o ll

4
l

H-d-OH I
H-C-H 1 H-C-H CH,

iH C=O
I

(yH2)iz
b)

(yH2)i4 CH3 Ceramida (esfinganina)

CH,OH H- C l H-C-OH H-C-H 1 H-C-H

I
I

YH
C=O
I

CH20H

FAI)

FADH,

H-C l ,H-7-OH H-C II H-C 1 (yU2

NH l
C=O (yH2114 CH3
I
Fig. 52.3. a) Biosintesis de ceramida (esfingahina). Transferencia del grupo acik a la esfinganina que forma eeramida (esfinganina). b) Deshidragenscin de la esfinganina para dar eeramida (esfingosina).

( ) CH3

N - acii esfingosina reductasa

(12)12 CH3 Ceramida (esfuiganina)

CH, Ceramida (esfingosina)

Fosfatidil colina Esfingomielina

Fig. 52.4. Biasntesis de esfingomielina.

La sntesis de los glicoe~fingol~idos muchas similitudes con la sntesis de tiene %ico~rotehas. biosntesis de algunos de los glicoesfingolpidosse muestra en la La figura 523.

UDP - glucosa

1
Fig. 52.5. Vas de sintesis de algunos glieoesfingolpidas.

Epimerasa

Esfingosina El principio que gobierna la sntesis de estos Ipidos es que el glcido se aade al Ipido aceptor por transferencia de un nucletido azcar, tal como ocurre con el UDP-glucosa en la biosntesis de glucgeno (captulo 43). Estas enzimas se denominan genricamente glicosiltransferasas y se piensa que son especficas para cada reaccin. La mayora se l d z a en el lado luminal del Golgi. El nucleotidil-azcarse transfiere a travs de la membrana dentro de la luz del Gol@por un transportador localizado en la membranade ese organelo. Lasimpleunindeunazmalaceiamida&lugaralafomacindeuncerebmsido. Generalmente,el anicar es la galactosa. La enzima epimerasa de UDP-Gal se sirve de UDP-Glu como sustrato y su producto es UDP-Gal, que al reaccionar con la ceramida 'bera UDP y deja constituido el cerebrsido. Estos compuestos se hallan en grandes concentracionesen la cubierta mienica de los nerviau Los sulftidos se forman a partir delos cerehrsidoscuando stos mccionan con el 3 ' -fosfoaden&-5 ' -fc6fosulfato(PAPS).Se comprendeque &ltimoes la forma adiva del sulfato, que permite la incorporaande SO$ al cerebrsido. Los ganglisidosse generan por adicionessucesivasde diferentes monmeridos y derivadosde stos, uno por vez. En la figura 52.6 se presenta un esquema que ilustra este P .Todava hay mucho que aprender acerca de las enzimas de la bimhtesis y de su regulacin en los esfugolpidos.
UDP Glu UP D Glu-ceramida UDP-Gal UDP Gal-Glu-ceramida UDP-GalNAc Ceramida Gal-ceramida PAP 30, Gal - ceramida CMP-NeuAc CMP NeuAc-?al-Glu-ceramida

G -P

Fig. 52.6. Rutas biosintticas de los ganglisidos.

UDP GaNAc-Gai-Gal-Glu-ceramida

Est claro que la funan de los gli&ngopidos en lssmembranasesesbuctural. La galactosilceramida llega al 15 % de los Ipidos de la membrana de mielina. Los glicolpidos siempre aparecen orientados simtricamenteen la bicapa de la membrana plasmtica hacia la cara exterior de la dlula Es lo mismo que pasa con las glicoprotenas. Ahora es que se empiezan a entender algunas funcionesno estnicturales, por ejemplo, las clulas que se estn cultivandoen presencia de factoresde crecimiento pmtenicos, se inhiben cuando se aaden los ganglisidos GM, o GM,. Parece que los ganglisidos inhiben una quinasa de protenas del receptor que responde a las fadom de crecimiento. Adems, cuando las clnias estn siendommformadas por virus hunorgenos, la nueva clula tumoral tiene un contenidomuy reducido de GM, en algunos tipos de tumores y un menor contenido de GM, en otros. Posiblemente la cantidad reducida de ganglisidos est relacionada con el crecimientoanormal del tumor. Aparte de estas funciones reguladoras,parece que pueden hacer de meptores. Por ejemplo, el GM, puede hacer de receptor para la toxina del clera. Algunos

glieoesfingolpidostambinson antgenos de gnipossangunwsy otrosseinvolucranen las funciones de reconocimientoclula-clula Por W o , la relativa alta concenhcin de ganglisidos en las neuronassugiereuna funcin para estos Lpidos en la transmisin nerviosa, pero cul funcin es sta, no sesabe.

El catabolismo de estos compuestos, que asegura su recambioal tiempo que evita su

acumulacin poreontrarrrszar el pmceso eonh;iriode la SiteYs, tiene lugar por accin de

enzimas lisosomalesespecf~eas. La diversidadque eneonhamosen esta clase de Ipidos,sobre todo en los ganglisidos, hace Woso exponer de forma paronilar una va catablica determinada. Basie decir que las enzima5 que adan sobre sus diversosenlaces no pueden hacerlo en cualquier orden, sino que con frecuencia es indispensablela liberacin de un compuesto por unaenzima previa, para que la siguiente puda ~windirel enlace que le curnsponde. La esringomielinasa hidrolim la unin entre I crramida ). la fnsforilcolina i Fig. J 52.7). Despus la ceramidasa descomponea la ceramida en esngosina y su cido graso mnstihiyente.

OH-P-O-CH,CH,NIcH,),
m-.

Esfiogomielinasa

(P) - colina
Ceramida

Esfingomielina La degradacin de la esfmgosina comienza con su fosforilacin por la enzima da esfinsanina-1-(P). staes escindidapor la esfmganinafosfato tasa, que forma palmitaldehdo y (P)-etanolamina. El aldehdo puede ser reducido al alcohol de 16C n oxidado a palmtico. La (P)-etanolamina se incorpora al pool de este mmpuestooala va principal, donde es convertida en fosfatidiletanolamina(Fig. 52.8).

Fig. 52.7. Catabalismo de la esfingamielina.

d n g d n a quinasa,

"I H O H- C-NH2

ATP

ADP

Esfinganina-1- (P)

H-6-H I
H-C-H
Aldehdo pahtico (P)-etanolamina
i

Fig. 52.8. Degradacin de la esfingosina.

La glueocerebmsidasa,galaetocerebmsidasay suifatidasaliberan, respectivamente, glucosa, galactosa y sulfato de la ceramida. Otras muchas acciones enzimticasson necesarias parda degradacin de los esfingolpidoscomplejas. En el cuadro se resumen las principales enzimas que intervienen.
Cundm Enzimas que ejercen su accin en la degradacin de los esiingolpidos y

enlaces sobre los que actan Eozima Sitio de accin enzimtica Cer + (P)-colina
Ac + esfingosiua

Cer + Glu

Cer + Gal Cer-Gai+ 040,

Cer-Glu + Gal

Cer-Glu-GalNc+ Gal Cer-Glu-Gal-GaUVac-Gal+ Fucwa

Ladeciencia de cualquiera de estas enzima trae consigo una acumulacinanormal de alguno de estos esfingolpidos,y ello suele acarrear un dao importante, en primer trmino,alsistema nervioso. En el capiulo76 se abordan estas esfingolipidosis dentro de las enfermedades moleculares.

Resumen
La bioshtesis de los fosfoaciigliceroles se produce por reaccin de nn diaaigeerol con la base en su forma activa, es decir, unida a un nud&ido difosfatado. El diaeilgliceml resulta de la a d 6 u de una fosfatasa especfica sobre el dcido foslatidim, el cnal puede originarse de 3 formas diferentes. Finalmente, la fdatidmna resulta de una reaccin entre CDP-cona y el diacQIiceru1, donde se pmduce adems CMP. La read6n tiene lugar en el RE, de forma similar se origina la fosloeianolamina. En el puim611, los fdtidos d e s m p h n un papel vital como agentessdaciautes que evitan que el parnquima p u l m o w miapse. Una especie de fosfaidmiina, el dipalmiiiosfatid colina que se sinte7.a all, constitnye ms de la mitad del surfaciante pnlmonar. La fosfatidiiaerina se genera por intercambio con otro fosfoipido. En los casos del fosfatidinositol y el fosfatidilglicerol, la sustancia activada es el diadgceml unido al CDP. En reacciones de transferencia se aade el inositol y el glicerol. %to los derivados polifosfatados del fosfatidinositol, como el diacilglicerol, son compuestos que participan en mecanismos de reguiaci6n metablica. La repuiacin de La'sintesis de los fosfdidos de giieeml jenuqniza la uozsci6n de los dcidos grasos disponiblesmu preferencia a la sintesLs de grasas neutras. La CTP: fdoeolina ciidil i r a d e m a y la f d t a s a del cido foshldim son

repoiadorasEstas~sonactivmd~alamdrs~~~delREydejmd separadasde~Loscidosgrasospropieisniauni6nde~~mnlasmeinbranag La fosbtaw dd cido l d d i m tambin esCB Bujeta a regola0611 induepor rin enzimebiea

No et eselareeido cmo se establece la ubicacin nalde los giiee~~fosfdidos s4 en las disoatas membranas celulares. El traspaso desde la cara atoplasmetica, donde se sinteOza0, hacia la luminal de la membrana del RE consume ATP y pareoe implicar meraniSrnos enzi~dtieos. translocacin hacia otras membranas se La logra, presumiblemente, mediante la migracin de vw'eulas membranosss del RE, las cnaies eventualmente se hiionan con la membrana del organelo destinatario. Por otra parte, se han puricado proteinas capaces de intercambiar fosfdtidos entre una membrana y otra, pero como se trata de un intercambio no est4 claro si ellas parlicipan en el flujo neto de estos lipidos. Las enzimas que degradan a los fosfolipidos se Llamas fosfolipasas y se designan con letras segn el enlace que hidrolizan. La dn~osina, esqueleto m&s abundante en los esfngopidos, se forma a el parr de pelmio1 COA y-serina En realidad se sintetiza primero esfinganina, la cnal se convierte en esfingosina cnando ya tiene el radical aco incorporado, mediante la f o r m a d n del doble enlace A4trans. La esfmgomielina se sintetiza por transferencia de (P)-colina desde un foafatidilcona hasta la ceramida. tss La s n e i de loa glieoesngolipidosconsiste en la adicin del monaBae8iido a parr del UDP-aziicar.Un cerebrsido resulta de la adicin a la d d a de g i u m se o gaiaetosa La sulPataci6n por el agente PAPS origina los snlfdtidos. Los gangli6sidosson la consecuencia de sucesivas adiciones de azcares y sus derivados. Ahora se sabe que los glieoesngopidos no 8610 cumplen una funcin estrnctursl en las membkinas. Determinados gangli6sidos influyen en la respuesta de reoeptores a los factores de crecimiento celular.En ciertos inmores se halla disminuida la mneentraci6n de uno u otro gangli6sid0, lo que sugiere una asociacin entre el ereeimiento inmoral y el bajo nivel celular del gangIi6sido. Por Itimo, pueden hacer funciones de receptores, de antfgenos de grnpos sangnneos y, presmn'blemente, ejercenuna funan especial, todava desconocida, en las neuronas El catabolismo de los gIicwSengolipidosseUeva a cabo por enzimas Lisosomales. Los errores congnitos en alguna de estas enzimas son, en su mayoria, poco fre<pentes, pero diversos.

1.Cules son las3 vas posibles de formacin del cido fosfatdico? 2. Qu metabolito derivado del cido fosfatdico interviene en la sntesis de los fosftidosde glicerina y cmo se deriva? 3. Seale el papel que desempean los nucletidos de citosina en la sntesis de los fosfolpidos. 4. Qu es el surfactantepnlmonar y cul es su naturaleza qumica? 5. Mencione 2 enzimas ane participen en la regulacin de la sntesis de los fosftidos Y explique en un caso cmo opera esa regulacin. 6. Si la sntesis de los glicerofosftidos tiene lugar en la membrana del retculo endoplsmico, ;cmo explica usted que ellos formen parte de otras membranas eelulrn? 7. Haga una tabla con las diferentes fosfolipasasy el enlace sobre el que actan. 8. Describa el origen biosinttico de la esfingosina. 9. Dnde y cmo se sintetizan las esfingomielinas? lo.Explique brevemente cmo se conforma un ganglisido. 1 . Relacione 3 funciones en que estn implicados los ganglisidos. 1 12. %-nte,mediante un esquema,la degradacin completa de una esfingomielina.

Es muy conocido,aun en las esferas no mdicas, que las altas concentraciones de colesterol en sangre se relacionan con el desarrollo de enfermedades como la aterosderosis. Este compuesto es importante en la formacin de las membranas biolgicas y como precursor del resto de los Ipidos esteroides; el S % de su sntesis ocurre en el O tejido heptico. El colesterol se encuentra abundantemente distribuido en todas las clulas del organismo,en especial en las del tejido nervioso. Los 27 carbonos de estecompuesto derivan desu nico precursor: el cido actico, por lo que no se requiere ingerirlo en la dieta El colesterol y sus steres, prcticamente insolubles en agua, son transportados formandoparte de las lipopmtenas plasmticas desde el hgado, donde son s i n t e b dos, o desde el intestino, donde son absorbidos, hasta los tejidos en los que han de ser almacenados o utilizados. La mta del colesterol en sangre y su endocitosis por medio del receptor en los tejidos diana,fue dilucidada por MichaelS. Bmwn y Joseph L. Goldstein, por lo que recibieron el premio Nbel en 1985. En estecaptulose tratar la va de sntesisdel colestero1,su regulacin,el proceso de SU redistribucin en el organismo, sus destinos y su relacin con el desarrollo de la ateroselemis.

CH, OOH
cido actico
C\

x:, A:\ L

btaextraordinaria mta biosinttica extramitocondrid,una de las ms complejas que se conocen, fue descrita principalmente por Konrad Bloch, F d o r Lynen, J o h ~ j j de ConifOrth y ~ e o r ~ e s ~ o finalesa los aos 50. En experimentos iniciales se aliment a un grupo de animales con cido actico marfado con "C en el carbono carboxlico y a otro grupo con cido actico marcado en el carbono meMico (Fig. 53.1). El patrn de marcaje a partir de los 2 grupos de -ales demostr que todos los carbonos del colesterol provienen del cido actico. La biosntesis del colesterol requiere un compuesto simple, el acetil-COA,un Potencial reductorsuministradopor el NADPH y energa metablica til en forma de A R adema% r e q u i e m

Colesterol
Fuente: Lehninger A,: Principes de Biochimie. Flammarion Medicine Sciencies, 1985 Fig. 53.1. Origen de los earbonps del eolesterol. Aparecen en azul las earbonos que proceden del carbono metiieo del cido acetieo y en rojo los que proceden del carbono carboxiliea.

El origen principal del acetil-COAes la descarboxilacin oxidativa del pirvico, producto final de la va glucoltica, reaccin que ocurre en la membrana interna mitocondrial. La disponibilidad de acetil-COA el citoplasma depende de que exista en un potencial energticoelevado intramitocondrialmenteque provoca el aumento de las concentraciones de cido ctrico y, por ende, su salida desde la mitocondria. La enzima citrato-liasa garantizala produccinde acet-CoAapartir del cido ctrico y, adems, garantiza el NADPH requerido en este proceso a travs de la accin de la enzima mlica (captulo 49). El NADPH puede tambin provenir de la va de oxidacin del ciclo de las pentosas (captulo44).

Etapas del proceso

En la sntesis del colesterol se pueden distinguir 5 etapas:

l. Conversin del acetil-COAen cido mevalnico. 2. Conversin del cido mevalnico en unidades de isopreno activadas. 3. Condensacin de unidades de isopreno activadas, con formacin de escualeno. 4. Conversin de escualeno en lanosterol. 5. Conversinde lanosterol en colesterol.

Eiapa L Conversin delafetil-Cd e ddomednieo n

La acetoacetil-COA tiolasa, enzima citoslica, cataza la condensacinreversible de 2 molculas de acetil-COAcon formacin de acetoacetil-COA.

Acetil - COA

Acetoacetil - COA

La energa requerida la brinda la ruptura del enlace tioster de la aceol-COA.La condensacin de una tercera molcula de acetil-COAconduce a la formacin de P-hidroximetilglntaril-COA(HMG-COA),reaccin reversible catalizada por la HMGCoA sintssa

Acetoacetil COA

p - hidroxi - p - metil glutxi1 COA

La conversin de HMG-COAen cido mevalnico es el paso limitante. Esta reduccin irreversible que requiere 2 molculas de NADPH est c a t a d a por la HMG-COA

reductasa, protena integral de lamembrana del retculo endoplasmticoLiso, ste es el principal punto de regulacin de esta va.

p - hidroxi - P - metil glutaril COA

cido mevalnico

En resumen: se condensan 3molculas de aeeol-COAque forman un intennediariode 6carbonos. el cido mevainico.

Laenzima mevainicoqninasa c a t a h el traspaso de un grupo fosfato del A v a l cido mevainico formndose el 5-fosfornevalnico.

ATP

CH3 HOOC-CH2 C-CH2CH20H

l

i' t

CH3

HOOC-CH2 C-CHr CH2-O-P-01

1/
l

cido rnevalnico

cido 5 - fosfomevalnico

&te es sustrato de la enzima fosfomevalnico quinasa que lo fosforila; el ATPes el donante del fosfato, con formacin de cido 5-pirofosfornevalnico.

cido 5 - fosfomevalnico

cido 5 - pirofosfomevalnico

La enzima pirofosfomevalnico quinasa, utilizando el ATP como donante del fosfato,cataliza la formacin del 3-fosfo-5-pirofosfomeval6nico.

CH HOOC-CHI

- 1

C-CHCH;

O-PQ-P-O-

II

II

OH

l I o- o-

ATu
CH3 I HOOC-CH?-C-CH,-CHF
-

o
O-P*-P-0-

II

o
11 I

l o- o-

cido 5 - pirofosfomevalnico

cido 3 - fosfo - 5 - pirofosfomevalnico

Este compuesto,que es lbil, resulta descarboxilado y desfosforadomediante la accin de L enzima pirofosfomevalnico descarboxilasa, que lo transforma en el a primer isopreno activado, el 3-isopentenil pirofosfato.

cido 3 - fosfo - 5 - pirofosfomevalnico

3 - isopentenil pirofosfato

Este compuesto es isomerizado a 3,3-dimetilalil pirofosfato, por la enzima isopentenil pirofosfato isomerasa, reaccin que es reversible. Estos 2 ismeros son sustanciasclaves en la sntesis de los isoprenos.

I 11 11 CH, C-CH,-CHy O- P-O-P-0l I

O
1

CH,

CH3

CH3 C CH-CH,-O-P-O-P-O-

o
II
l

O
0-

0-

o-

Il l

3 - isopentenil pirofosfato

3,3 - dimetilalil pirofosfato

Como se aprecia, en esta etapa el cido mevalnico resulta fosforilado en 3 ocasiones, formndoseun compuesto Ibil que es descarboxiladoy libera un gnipo fosfato, mediante lo cual se produce isopentenil pirofosfato, que en parte resulta isomerizado a dimetilalil pirofosfato.

Etapa 3 CondePFBddn de unidades de hpreoo nctiy~das, formaeido . con de escoale00

El isopentenil pirofosfato y el dimetilalil pirofosfato experimentan una condensacin cabeza-cola, catalizada por la enzima prenil transferasa, formndose el geranil pirofosfato (C,,); la cabeza esel extremo al queest unido el pirofosfato.

3,3 - dimetilalil pirofosfato

3 - isopentenil pirofosfato

Geranil pirofosfato

Este ltimo y otra molcula de isopentenil pirofosfato son sustratos de la enzima prenil transferasa que cataliza la condensacin cabeza-cola formndose farnesil pirofosfato (C,,).

o
I

o
3 - isopentenil pirofosfato
I

O - P-O-P-o-

Geranil pirofosfato

Famesil pirofosfato

F e n t e , 2 molculas de farnesilpimfosfato sonsustrato de la enzima escnaleno sintasa, que catazasu condensacin cabeza-cabezacon formacin de escualeno (CM), se liberan 2 molculas de pirofwfato. Los nombres comunes de estos terpenos provienendelasfuentes en que originalmente se aislaron. El geranio1 tiene el aroma de los geIWIias, el famesol proviene de las flores del rbol Farnesia acacia y el escualeno fue aislado primeramente riel hgado de tiburn (gnero Squalus).

Famesil pirofosfato

2 PPi

0-

oEscualeno

Famesil pirofosfato

En esta etapa se condensan 6 unidades de isopreno, cada unacon 5 carbonos, para dar origen al escualeno.

A continuacin existe una transformacin de un terpeno en esteroide. La enzima escualeno monooxigenasa adiciona un tomo de oxgeno del O, al extremo de la cadena de escualeno formandoun epxido. Adems requiere NADPH para reducir el otro tomo de oxgeno del O, a H,O.

Escualeno

Escualeno-2-3-epxido El epxido de escualeno es sumamente reactivo y en las clulas animales es ciclizado a lanosterol. La enzima escualeno-epxido-lanosterol ciclasa convierte un terpeno, de estructura lineal, en esteroide, ya que el lanosterol posee el ncleo que caracteriza a todos los Ipidos esteroides: elciclopeutanoperhidrofeuantreno.

(en animales)

Lanosterol De este modo,la ciclizacin del escualenoforma los 4 anillos del ncleo esteroide.

Etapa 5. Convd6n de lanostemi ea desterol

La conversinde lanosterol en colesterol tiene lugar en las membranas del retculo endoplasmtico e implica cambios en el ncleo esteroideo y en la cadena lateral, parece ser que por 2 rutas, puesto que tanto el 7 deshidrwolesterolcomoel desmosted se convierten en colesterol con altos rendimientos. Se produce la separacin de 3 grupos metilos: 2 del tomo de C, y uno del C,,, adems la saturacin del doble enlace de la cadena lateral, y la migracin del doble enlace desde la posicin 8,9 hasta la 5,6 del anillo B. Algunas de estas reacciones tienen lugar en diferente orden, pero la oxidacin de los grupos metilo ocurre en un orden fijo (Fig. 53.2).

NADPH Lanosterol
14- desmetil- lanosterol

O,, NADPH
HO Zimosterol

HO Colesterol

NADPH Desmosterol (24-deshidrocolesterol)

HO

7,24- colestadienol

Fig. 53.2. Conversin de lanosterol en colesterol. Se produce la separacin de 3 grupos metilicos, una del tomo del C,, y 2 del C, ; la migracin del doble enlace desde la posicin 8,9 hasta la 5,6 y la saturacin del doble enlace de la cadena lateral.

Es probable que los intermediariosdesde el escualeno al colesterol estn adheridos a una protena transportadora de escualenoy esteroles. sta se une a los esteroles y otros Ipidos insolubles, permitindoles reaccionar en la fase acuosa de la clula. Adems, parece probable que sea en la forma colesterol-protenatransportadora de esteroles que el colesterol es convertidoen hormonas esteroideas y cidos biliares, y es as como participa en la formacin de membranas y lipoprotenas. La sntesis de colesterol consume 18ATP.

Reguiaci6n de la sntesis del colesterol

La regulacin de la biosntesis del colesterol ocurre por mecanismos diferentes en los tejidos heptico y extrahepticos.

En el hgado, el control de fa sntesis del colesterol lo ejerce la enzima HMG-COA rrduclasa. Las hormonas insulina y glncagn controlan su actividad a travs del mecanismo de modulacin covalente (Fis. 53.3). La insulina orooicia ane oredomine la forma . " dgf~sforilada,ms activa,! porende,el incrementoen la\intesis decolesterol. Por cI m n m o , el glucagn desencadena una serie de fosforilaciune~ traen. finalmentr, que que esta enzima predomine en forma fosforiladay, por lo tanto, en su forma menos aCava9 disminuyendo la sntesis. La HMG-COAreductasa es una enzima alostrica cuyos efectores negativos se Supone que sean intermediariosde la va de sntesis del colesterol, a partir del cido mevd6nic0, derivados del colesterol u otros, an no identificados (Fig. 53.4).

. . . .

. y

--

HMG-Col\

-3

Acido nievnlnico

Fig. 53.3. Regulacin de la sntesis del colesterol por la HMG-COA reduetasa. Le insulina activa a las protenas fasfatasas, con lo que predomina la HMG-COAreduetasa en su f a m a dsfosforilada, que es la activa. El glueagn, a travs del AMPe provoca la inactivacin de la HMG-COA reductasa, ya que favorece la fasforilscin de esta enzima y, adems, activa al inhibidor de las proleinas fosfa-

tasss

Las hormonas tiroideasy los glucocorticoides inducen la sntesisde la HMG-COA reductasa, y las altas concentraciones intracelulares de colesterol la reprimen.

Contrnl de la sintesls de mlesterol en los tejidos extrahep6tim

El receptor de LDL es una glicoprotena que fia a la apo B-100, por su extremo N-terminal,y est situadoen una invaginaun dela membrana plasmtica, denominada cavidad revestida, que se encuentra recubierta en su lado citoslico por una red formada por la protena c l a m a En lamedida en que los receptores son ocupados por las LDL,ms crece la red de clatrina hasta que la cavidad revestida forma una gemacin y se desprende de la membrana hacia el interior de la clula, como vescula endoctica revestida (Fig. 53.5). sta pierde la clatrina, mediante un proceso catalizadopor enzimas dependientes de

ATP, formndosela vescula endoctica no revestida o endosoma, cuyo pH disminuye, por la actividad de ATPasas tipo V, que se encuentranen su membrana y transportan H+ hacia el interior del endosoma. Este ambiente cido facilita la disociacin entre el receptor y la LDL. El receptor es reciclado, vuelve a la membrana plasmtica. El endosoma, ya sin el receptor, se une a los Lisosomas primarios. Los diferentes componentes de las LDL son sustrato de las enzimas lisosomales, por lo cual se libera al citosol, entre otros productos, colesterol libre. cido rneval6nico-El colesterol libre es utilizado como componente estmctural de las membranas celulares y en la sntesis de los diferentes Ipidos esteroides, segn la especializacin del tejido (Fig. 53.6). E1colesterol Iibre activa a la enzima acil-COA:colesterol acil transferasa (ACAT), que cataliza la transferencia de un cido graso desde la coenzima A hasta el grupo hidroxo del colesterol con formacin de un enlace ster, lo que permite que se almacene como ster de colesterol,principalmentecomo oleato de colesterol.

Colesterol , ' , (intracelular) steres de colesterol LDL-iolesterol (extracelular)

Fig. 53.4. Control de la HMG-COA reductasa heptica. La insulina y el glueagn laactivan e inhiben respectivamente por el mecanismo de modulacin eovalente. El control alastrico lo ejerce X, que representa rnetabolitm intermediarios, sin identificar, que se producen a partir del cido mevalniea, del colesterol u otros. El colesteral activa a la acil COA:colesterol acil transferasa (ACAT).

Colesterol

Oleato de colesterol A su vez el colesterol inhibe a la HMG-COAreductasa y a la transcripcin de los gens Para receptores de LDL. de lipoproteinas de alta deasidad

-e r8

En los tejidos que no sintetizan esteroides, las HDL entran a la clula por un meraniSrno semejante al de las LDL, con la diferencia de que e1 receptor parece ser speeifico para apn A. En los tejidos que sintetizanesteroides, hgado, ovario, testculo y suprarrenal, el TeoeptOI es el SR-B1. A este receptor desembarcaden>se unen las HDL, producindose la entrada selectiva de steres de colesterol (Fig. 53.7). Posteriormente las HDL, que han disminuido su volumen por la pkdida de de colesterol,se separan del receptor. Los mecanismos de membrana que permiten esta entrada estn por dilucidar.

ster de colesterol

Fig. 53.5. Control de la sntesis de colesterol en tejidos extrahepticos. La LDL se une a su receptor, sihiado en la cavidad revestida, es endocitada, pierde la clatrina y se funde con los lisosamas. Las enzimas lisosomales degradan los componentes de la LDL, y se libera al mediointracelular, entreotrosproductos, el eolesteml.

Finalmente, para que el colesterol s a excretado del cuerpo, debe entrar albgado e y pasar a la bilis como colesterol o como sales biliares.

Factorea que idbyen en el equilibrio hstim del eolesterol

En lo tejidos, los procesos que aparecen posteriormente gobiernan el equilibrio del colesterol en las clulas: 1.Tienden a incrementar su concentracin intracelular: a) Captacin por los receptores de lipoprotena~ contienen colesterol, por que ejemplo, de LDL. b) Captacin de lipoprotenasque contienen colesterol por una va que no utiliza receptores; el hgado est excluido. C)Captacin de colesterol Libre, a partir de tipoprotenas ricas en colesterol, para la membrana celular; el hgado est excluido. d) Sntesis de colesterol. e) Captacin de steres de colesterol desde las HDL. f) Hidrlisis de steres de colesterol mediante la enzima colesterol esterasa. 2. Tienden a reducir su concentracin intracelular: a) Esterificacin del colesterol por ACAT (acil-COA:colesterol acil transferasa). h) Utilizacin del colesterol para la sntesis de otros esteroides como hormonas 0 cidos biliares en el hgado. c) Efusin del colesterol de la membrana a las lipoprotenas pobres en colesterol, en parcular a las HDL,o a las HDLnacientes,promovida por LCAT (l~itn: colesterol acil transferasa); el hgado est excluido.

Testculos
-

Andrpenoc

lj
i

/
-

varios

Glndulas suprarrenales

Piel

Pre- vitamina D,

Fig. 53.6. Destinos del colesterol. El colesteral es utilizado coma componente estructural de las membranas celulares y cn la sntmis de los diferentes lipidos esteroides.

v Membranas celulares

HDL

HDL

Sangre
A

steres de colesterol

Fig. 53.7. Formas en que las clulas abtienen colesterol de las HDL. a) Los tejidos q u e no sintetizan otros lipidos csteroides reconocen, probablemente. a las HDL mediante el receptor de ripo A y la endocitan. b) Los teiidos que sintetizan otros lpidos esleroides, como el hgado, las ovarios, las testculos y las glndulas suprarrenales, poseen el receptor SR-BI. 1.a HDL se une a l, y por un mecanismo de membrana an desconocido, loa steres de colesteral pasan al interior celular.

Destinas del colesterol

Una alternativacomn a todas las clulas es su incorporacin a la estructurade las membranas Como el colesterol es el precursor del resto de los Ipidos esteroides, su destinova a depender de la especializacin celular. As, en el tejido heptico da lugar al colesterol a biliar, a los cidos hiliares y a los steres de colesterol. ~ n l corteza de las glndulas suprarrenales,a las hormonas glucocortkoides,mineralofortkoidesy andrgenos. En las gnadas masculinas, a los andrgenos; en las femeninas y en la placenta, a las progestinas y estrgenos. En la piel, a la pre-vitamina D, que, nalmente,dar lugar a la hormona calcitriol en el rin.

Los cidos biliares y sus steres son relativamentehidrofilicos y se requieren en la digestin de los Ipidos. La primera reaccin de esta va est catalizada por la 7 alfa-hidroxilasa,enzima microsmica que introduce un gmpo a-OH en la posicin 7 del colesterol y lo convierte en 7 a-hidroxicolesterol.sta es la reaccin limitante de la velocidad de la va y requiere O,, NADPH y citocromo P,,adems de vitamina C. La enzima es inhibida ,, alaestricamente por las sales hiliares y activada por el colesterol exgeuo. Tambin es una enzima sujeta a modulacin covalente; su forma fosforilada es la activa. El control de la velocidad de la va por disponibilidad de sustrato lo ejerce la HMG-COA ductasa

- . .

Colesterol

Citocromo P,,, Vitamina C

7a-hidroxicolesterol

Los cidos flico y quenodesoxiclicose diferencian en que el primero tiene un grupo a-OH extra en la posicin 12. Sin contar esta diferencia, las 2 vas comprenden reacciones de hidroxilacin semejantes y el acortamiento de la cadena lateral (Fig. 53.8). Estos cidos hiliares tienen el ncleo esteroideo totalmente saturado y poseen gmpos a-OH en las posiciones 3 y 7. Una enzima activadora microsomal Una segunda enzima heptica los convierte en colil-COAy quenodesoxicolil-COA. cataliza su conjugacin con glicina o con taurina formando los cidos glicoclico, glicoquenodesoxiclico, tauroclico y tauroquenodesoxiclico,que son los cidos biliares primarios. La proporcin entre los conjugados de glicina y los de taurina es de 3:l. Como la bilis contiene cantidades importantes de sodio y potasio, y su pH es alcano, estn en realidad en forma de sales biliares. Una proporcin de los cidos biliares que llegan al intestinopueden ser transformados en cidos hiliares secundarios: cido desoxiclico, del cido clico; y cido litoclico, del cido quenodesoxiclico. Los cidos biliares primarios y secundariosson absorbidos,del 98 al 99 %,casi exclusivamente en el leon, a travs de la circulacin enteroheptica; slo una pequea cantidad, cerca de 500 mgtda es eliminada por las heces fecales.

2 COA-SH

2 COA-SH

HO' 7-a-hidroxicolesterol Propionil- COA F'ropionilC O A

HO'

Glicina

+
Quenodesoxicolil - COA Glicina COA-SH

HO'

COA-SH

cido tauroclico

cido glicoquenodesoxiclico

cido glicociico

cido tauroquenodesoxiclico

m538 de las cidos biliares. El 7-E-hidroxieolesteroles el precursor comn a los cidos Sntesis
b'iares primanas.

Colesterol (C,,) Pregnenolona (C:,)

S n e i de hormonas estemides tss

Las sntesis de las hormonas esteroidestienen en comn la conversin de colesterol en pregnenolona, para ello se requiere el corte de la cadena lateral que se proyecta desde C-17 del aniUoD del colesterol e implica laoxidacin de loscarbonosadyacen-, Gestgenos (C?,) tes. . ..,\,._ La unin de la ACTH y de la LH a su respectivo receptor propicia el incremento del AMPc, evento involucrado en el proceso de prdida de la cadena lateral del dr ... Andrbgenos colesterol. Cilucoconicoides , Todas las reacciones de hidroxilaciny oxigenacin en la hiosntesis de esteroides, (CW) (cd estn catalizadas por una oxidasa de funcin mixta que ualizaNADPH, O, y citocromo 'v EsLr6genos P,,mitocondrial. En la figura 53.9 se presenta, de f a m a genera1,la va de sntesis de C , las hormonas esteroides.
7

Mineraloconicoides (Cd
Fig. 53.9. Sntesis de las hormonas esteraides. La pregnenolona es el precursor comn en la sntesis de las diferentes hormonas esteroides.

S n e i de l hormona EalciMol tss a

La va desntesis de la hormona calcitriol tiene3 etapasfundamentaies(Fig. 53.10).
stasson:

1. Conversin de colesterol en pre-vitamina D,, en la capa de Malpighi, en la epidermis. 2. Formacin de 25 -hidroxicolecalciferolo vitamina D,, en el hgado. 3. Formacin de 1 5 -dihidroxicolecalciferol calcitriol, en el rin. 3 . o Los detalles de la sntesis, el mecanismo de accin y sus efectos metablicos se abordan en el captulo 60.

Colesterol y aterosclemis
Colesterol (C27)
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Pre- vitamina Di
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25- hidroxicolecalciferol o vitaniina D,

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La aterosclerosis se caracteriza por depsitos de grasa y engrosamiento de la tnica ntima con rotura de la media, en las arterias mayores y media. Es una combinacin variable de cambios en la ntima, que incluye acumulacin foca1de molculas -ipidos complejos, protenas y carbohidratos-, sangre con todos sus constituyentes y proliferacin celular, acompaada por formacin de tejido fibroso,calcificacin Y cambios asociados en la media con deuosicin simificativa de Inidos en la pared arteria1,Io que reduce la elasticidad delas arterias y contribuye a la oclusin. Es una afeccin multifactorial, que tiene como factoresde riesgo la edad, el sexo, la hipertensin arterial, la hiperlipidemia, el tabaquismo, la diabetes, la obesidad,el sedentarismoy los rasgos de la En el estudio de la aterosclerosis se analizar orimero el comnonente celular Y despus los factores moleculares.

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1,75- dihidroxicolecalciferolo calcitriol

Fig. 53.10. Sntesis de la hormona calcitriol. En la capa de Malpighi, en la epidermis, se forma la pre-vitamina D,. t pasa por la sangre al hgasa da y en el retculo endaplasmtico, es convertida en vitamina D,. Posteriormente, en las mitocondrias del tbulo eontorneado proximal renal, es convertida en I harmos na calcitriol.

Uno de los primeros eventos en la gnesis de la aterosclerosis es la adhesin de monocitos circulantes a la superficieintacta de las clulas endoteliales. Esto va precedido de la expresin de molculas de adhesin a la clula v a s d a r (VCAM, del ingls, vascular cell adhesion rnolecule) en determinadas partes del sistema circulatorio,como consecuencia de la induccin,por colesterol y otros IpidW del gen de VCAM. Las fuerzas de cizallamiento se producen por el paso de 10s elementos formes de la sangre, principalmente el eritrocito, a travs de los vasos Cuando ocurren fuerzas de cizallamiento anormalessobre lasuperficie de las clulas

endotelides, como suele suceder en la bifurcacin de las arterias coronarias,pueden inducir los genes cuyos productos contribuyen al desarrollo de la aterosclerosis. La clula endotelid funciona como un sensor, su superficie es capaz de detectar las alteraciones en el flujo sanguneo y trasmitir estas alteraciones al ncleo (Fig. 53.11).

Factores de crecimiento

Citokinas

Elemento de \ respuesta a fuerzas de cizallamiento Citokinas

-i .

Factores de crecimiento

VCAM: molkulas de adhesin a la clula vascular

El monwitopenetra hasta la itima, donde es transformadoen macrfago,el cual fagocitaIpidos modificados (Fig. 53.12). Dentro de los lisosomas secundarios de los maerfagosseformancapas hilaminares queimpidenel intercambiohacia el centro; el colesterol queda iucomunicado y se cristaliza. Una vez formados los cristales de wlesterol,estnictura muy estable, desaparece la capa trilaminar,pero el macrfagoya seha transformadoirreversiblementeen clula espumosa, uno de los constituyentes ~rfmarios l placa de grasa. Mientras tanto, clulas del msculo Liso migran desde la de a mlia,sunonnal Localizacin, hasta la ntima, donde se dividen, producen colgeno y Oh?is molculas de la matriz, tambin se cargan de Ipidos, por lo que contribuyen al volumen de la lesin. Determinadosautores plantean la teora mouociond para explicarla proliferacin o de las c6lulasmuscniares lisas, pues en un individuo todas son del mismo tipo, L que sugiere que deriven de una sola clula que fue la que inicialmentemigr. Ismbin estn involucradas las clulas T, que son Linfocitos especializados,activ a d drea>nocerdetenninados antigenos en la superficie de clulas potencialmente ~ pat'%6ni~, propician L destmccin de estas ltimas d activar a los macrfagos. y a

Fig. 53.11. Primeros eventos en la gnesis de la ateroselerosis. El colesterol y otros lpidas sanguneos inducen al gen VCAM de las clulas endoteliales, lo que promueve la sntesis de protenas de adhesin a la clula vascular. Las fuerzas hemodinmicas de cizallamiento inducen la expresin de factores de crecimiento y citokinas, que promueven el desarrolla de la ateroselerosis, modulando la aetividad de las maerfagos y de las clulas musculares lisas.

EntrelosprinciPdes factores moleeuIaresseencuentranlos factoresde crecimienicosanoides, las citokhas y el xido ntrico. factoresde crecimiento son aqullos que atraen a las clulas y promueven la dMs6n wluiar. Loa i~sanoides, estimular la hidrlisis de los steres de colesterol, producen al wleSte~)I libre.
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..........

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Placa de lpidos .............

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Migracin de la clula

VCAM: molculas de adhesin a la clula vascular

Fig. 53.12. Algunos factores moleculares que intervienen en la gnesis de la aterosclerosis. Los factores de crecimiento y las cilokinas producidas por los maerfagas, las clulas T y las clulas endoteliales influyen en la migracin de las clulas del msculo liso, la proliferacin, la sntesis de molculas de la matriz y el secuestro de lpidos.

Las citokinastienen vanos efectosmetablicos,incluyendo la expresin de facto-

res que regulan la formacin del cogulosanguneo.Por su parte,el xido m'trieo acta
dilatando los vasos sanguneos. La migracin de las cPlulm del msculo liso,la pruliferacin, la sntesis de mol6culas de la matriz ?. el secuestro de lipidos, estin influidos por los factores de crd miento y las citokinas producidas por los macrfagos, las clulas T y las clulas endoteliales. Las clulas endoteliales y las plaquetas producen el factor de crecimiento derivado de las plaquetas, que atrae a las clulas musculares lisas hacia la ntima y activan su proliferacin. Los macrfagosliberan citokinas y factores de crecimiento que afectan la distribucin de colesterol en el organismo, y pueden tambin ser importantes en la proliferacin de las clulas del msculo liso. Las citokinas liberadas por los macrfagos estimulan a las clulas endoteliales a expresar el factor de activacin plaquetario, el factor bstico y el inhibidor del activador del plasmingeno. Estas molculas participan en la transformacin de la superficiede la clula endotelial, de forma tal que favorecen la coagulacin sangunea.

906

tlhquwaMIJLor

La clula endotelial, a su vez, activa la liberacin de un nmero de sustancias -como la prostaciclina y el xido ntrico- que impiden la formacin del cogulo sanguneo, previniendo la agregacin plaquetaria, y provocan que las clulas del msculo liso de la arteria se relajen, pero tambin, en respuesta a las fuerzas de cizallamiento,las clulas endoteliales promueven la produccin de citokinasy ciertos factoresde crecimiento,con actividad aterognica.

LIpoprotenns de b d a densidad oxidadas Las LDL oxidadas son reconocidas por el receptor "barrendero" ubicado en los macrfagos, las clulas endoteliales y las clulas del msculo liso. La expresin de este receptor, a diferencia del de las LDL, no est regulado por las concentracionesde colesterol intracelular. Las LDLoxidadas inducen la expresin de factores que pudieran ahaer a los macrfagosal espaciosubendotelial,activan las respuestas intlamatodas einmunolgicas,y pueden alterar la produccin de xido ntrico. Tanto las clulas endoteliales como los macrfagos y las clulas musculares lisas pueden oxidar las LDL, lo que est favorecido por la ansencia de agentes antioxidantes enel espaciosubendotelial. Esto sirve de base a la sugerencia de incluir antioxidantes como parte de la dieta en la prevencin de la aterosclerosis y las enfermedades eardiovasculares,pero no est claro si las vitaminas A y E tienen efecto en la prevencin oen el tratamiento de las enfermedades cardiovasculares.

Adems de la LDL, la lipoprotena (a) es importante en el desarrollo de la atemBclem&. Losmedores no tienen el gen para la lipoprotena (a),ni desarrollan aterosclerosis; por estos motivos se prepararon ratones trasgnicos que albergaban el gen de la apolipoprotena (a) humana y se constat que eran ms proclives al desarrollo de la ate&-&. La lipoprotena (a) se diferencia de una LDL en que presenta apo (a). Esta apoprotena (a) tiene en comn con el plasmingeno su unin a la fibrina (Fig. 53.131, pema diferenciadela plasmina no puede catalizar su ruptura.

Fig. 53.13. Caractersticas estructurales de la apolipoprotena (a). La apo (a) pasee el dominio de proteinasa (P) y 2 dominios de krinples (K), en . comn con el plasmingena, que posee 5. Uno de estos dominios krineles lo tiene repetido entre 10

Apolipoprotena (a) Se ha comprobado que la apo (a) puede competir con el plasmingeno, en su m a l a f i b r i n a , a l o s sitios deenlacesobrelas superficiescelulares y a los activadores plasmingeno. Una sola de estas funciones es causa suficiente para romper el eqmbrio entre la coagulacin y la fibrinlisis. Aunque el efecto de competencia es "V Pequeo, debido a las concentracionesmayores del plasmingeno, basta que se ' Prolongue el tiempo de fibrinlisis para incidir lenta, pero inexorablemente en el de unaenfemedad que como la aterosclerosis demora aos en producirse.

Cuando un vasosanguneoresulta desgarrado, la formacin de cogulos ricos en fibrina detiene temporalmentela salida de sangre, pero la cicatrizacin depende del crecimiento de nuevas clulas, que necesitan colesterol. Al comenzar la fibrinlisis, la degradacin parcial de un cogulo de fihrina expone sitios a los cuales puede unirse apo (a). Esto permitira quela tipoproteia (a) pueda unirse al cogulo sanguneo en el +tadio de cicatrizacin de una lesin y assuministrar colesterol en el lugar y momento oporhuios. Se ha demostrado que algunas molculas de la pared del vaso, incluidas las de la matriz intercelular: elastina, fibronectina, colgeno y glicosaminoglieanos, tienen ms anidad por la lipoprotena (a) que por la LDL. A travs del seguimiento de salud de miles de personas se Ueg a l conclusin de a que el nivel elevado de tipoprotena (a) es uno de los factores de riesgo predominantes en el infarto de miocardio. Una cantidad dada en sangre confiere un riesgo aadido equivalente al que confiere 10 veces esa misma cantidad de LDL.
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Colesterol y enfermedad coronaria

El crecimiento de las placas de ateromas provoca la formacin de cogulos que impiden el flujo sanguneo. Si esto ocurre en una de las arterias coronarias,como son estrechas,pueden quedarocluidasy produarse un infarto demiocardio. Para que esto no ocurra, el plasmingenodebeunirse a lafibrina, seradivado a plasmina y disolver la fibrina. Existe una elevada incidencia de enfermedades coronarias en pacientescon elevados niveles de LDLc y colesterol total. Los niveles bajos de HDLc suelen estar asociados con elevadosniveles de triacilglicridos, obesidad,sedentarismo, tabaquismo o anomalas en el perfil de tolerancia a la glucosa. La disminucin de los niveles de colesterol total y LDLc se obtiene en pacientes que cumplen con la dieta y cambian su estilo de vida segn lo indicado, a veces es necesario adicionar el uso de hipolipemiantes. En general, una disminucin de 100 mg en el colesterol de los alimentos causa una reduccin aproximada de 0,13 mmo1.L-' en el suero. Se ha considerado que una reduccindel 1% enlas cifrasdecolesteml total puede conducir al 2 % de reduccin de riesgo coronario. Una vez controlados los niveles de LDLc,por cada 0,03 mmo1.k' de incrementodeHDLc,seaade una reduccin adicional del 2 a1 3 % del riesgo coronario.

Esolo de vida
El estudio de Framhgham demostr, en el decursar de 5 aos seguidos, que el riesgo de padecer enfermedad comnariaeraentre 3 y S veessuperior, endependencia de la edad y el sexo, en individuos con niveles de colesterol total 2 73 mmo1.L-l. En e el hombre, el colesterol plasmtico total es de aproximadamente 5 2 mmo1.L.' y S eleva con la edad. Alrededor de 1g de colesterol es eliminado del cuerpo por da. En el caso de los pacientes hipercolesterolmicos,la dieta hipolipemiante es el pilar de la terapia, al cual se adiciona el control del peso, la realizacin de actividad fsica regular y la eliminacin del tabaquismo.

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Esta dieta se basa en:

1. Reducir la grasa total a 5 30 % del consumo total de energa.

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2. Reducir las gasas saturadas a 5 10 % del consumo total de energa. Para esto ayuda: evitar la iugetin de mantequilla, leche entera, crema de leche, helados, queso, carne de cerdo, emhutidos y aceite de coco. 3. Incrementar moderadamente el uso de aceites y grasas monoinsaturadas, entre 10 y 15 % del consumo de energa total, y poliinsaturadas,entre 7 y 10 % del total. Paraesto ayuda: utilizar aceite para cocinar, disminuir el consumo de galletas y panetelas. 4. Reducir el consumo de colesterol a 5 300 mg.da-'. para esto ayuda: limitar el consumo de huevos, menos de 3 por semana; vsceras, una vez al mes, y no consumir alimentos con chocolate. 5. Incrementarel consumo de carbohidratoscomplejos y fibra. Para esto ayuda: consumir fmtas y vegetales (excepto aguacate), lentejas, granos secos,arroz, pasta y cereales. 6. Seleccionarfuentes de protena que a la vez sean bajas en grasas saturadas, las protenas deben representar aproximadamenteel 15 % del consumo total de energa. Para esto ayuda: ingerir pescado, pollo o pavo desprovistos de piel, carnero o

gran-,
Adems,parala reduccin del riesgo global, aada a lo anteriormentemencionado: un consumo diario de sodio < 2 400 mg.da-': comer bajo en sal y un consumo diario de alcohol c 30 g: no ingerir ms de 2 tragos diarios.

El desterol es un pido estemide, por lo que posee en mi fstrnctnralas anlos del delopentanoperhidrofenantreno, de origen animal, y sus 27 carbonos denes van del k t o , por tanto, no es imprescindibleingerirlo. Enelorgadwno, la biositesis de este mmpuesto tiene 5etapas fundamentales. En la rimer re la mndensaein de 3 molcnlas de aeeol-COAda origen al dddo ElWVd5ni&-G formaci6n de este dedo es el paso de mmpromiso de la va. En la m &do mevai6nico da lugar a la primera &dad de isopreno activada: el el isopentennpirofoststo. En la tereera etapa, la condemaa6n de varias unidades de h p a o ndipadas dan origen al esnialeno, terpeno de 30 carbonos. La euaria dapa se esraeteriza por la traadonnaci6n de un terpeno, el esnialeno, mediante ddiEsd6ll, en un Upido estemide, el lanosterol. Finalmente, el lanosterol es tranS-

lormdoenmleatemL
L.regolpei6n de la sntesis del mleaterol produce un balance de la sntesis con

mediante tela dieta.

ei hpaao, el control se ejerce a travs de la HMGCoA reducha. Las inwilinsy glueapn mntrolan m actividad mediante el mecanismo de modnlsdae o v a h k la forma desiostodada es la &va. ES una enzima alostrica. aloe hLiMdore8 a m, & sou derivados del deido mevaloico y dei Las hormonas tiroideas y los glummrwides hdueen su Nilesir y las

id,tiReados

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-de

h tejidos exrahep8tieos, el mntrol de m &e m t& es el resultado del mntrol a h t w o l libre intradular qne se origina hindamentalmente como la endoeaosismediada por el receptor de ls LDL. Este mleaterol a otiozadoen la formacin de las membranas celulares.,puede u a la sntesis

* b I t b k k s , mineralomrtjmides o andrgenos, en el eaw> de la corteza de hl i-s e; a la sntesis de estrgenos y progesterona en ef b W d o o de la placenta; y a la sntesis de andrgenos, en el eam de los e ~ piel seforma la pre-vitamna D,, que nalmente dar lugar, en los Ibneqa honn~na ealritriol. El mlesterol libre activa la ACAT, la que cataliza

su esteficad6n y, por tanto, posibilita su almacenamiento., tambin regula la transuipci6n del receptor de LDL, y con ello controla la entrada de ms coleaterol portado0porlas LDL: La redistrbudn del colesteml en el organismo la llevan a cabo las HDL. Penetran por un mecanismo de enddiosis mediado por receptor en los tejidos que no sintetizan eateroides. En los tejidos que sinteoZaa estemides, como el higado, ovarios, test'do y suprarrenales, a travs del receptor SR-Blo desembarcadero, penetran los steres de eolesterol La protena de traasPerende de steres de desierol efecta el traspaso desde las HDLhaeia VLDL, LDL y, en menos propord6n, hacia Q. En el tejido heptico da lugar al colesterol biliar, a los cidos biliarea y a los steres de colesterol, que formando parte de las salesblliares pasan al intestino. Los dcidos birs primarios y senindarios son absorbidos en el 98 o 99 % casi exciuae sivamente en el neon a travs de la eimilaeiu enteroheptica. El resto se elimina por las heces f d e s wmo wprosterol y colestanol. Les coueentraciones plasmtieas altas de wleaterol pueden dar origen a la aterosde& y a las enfermedades corona&% No s61o la hipermlestem1emia es un factor de riesgo, sino tambin el tabaquismo, la hipertensin arterial, el sedentarismo, la obesidad, la diabetes y el alcoholismo. Por ello es importante Po en el nio, desde edades tempranas, un estilo de vida que evite poseer eualquiera de los faetorw de riesgo meneinnados. En el eaw,de los padentes que ya presentan hipermlesterolemia, deben camb i i m esio de vida de forma tal que reduzcan los P co de riesgo coronario, at m por lo tanto deben cumplir con la dieta hipowlesterolemizante, controlar el peso corporal, incrementar la actividad &si- eliminar el tabaquismo y mntrolnr el consumo de alcohol

Ejercidos
1.Explique la relacin que existe entre la ingesta de glcidosy la sntesis heptica de colesterol. 2. Compare la sntesis del colesterol y la sntesis de los cuerpos cetnicos. 3. Explique el mecanismo de endocitosisde las LDL. 4. Explique el papel de los receptores de membrana en el control de la sntesis del colesterol. 5. Explique el papel de las HDL en la redistribucin del colesterol en el organismo. 6. Si durante un tiempo prolongado se le suministra una dieta exenta de vitamina C a cobayos, stos desarrollan aterosclerosis. Proponga un mecanismo para explicar lo ocurrido. 7. Demuestre la importancia biolgica del colesterol. 8. Explique las consecuenciasque traera a una persona el no poseer receptores para LDL 9. Explique las consecuencias que traera a una persona poseer valores disminuidos de HDL y concentracionesnormales del resto de las lipoprotenas. a) Si, adems, no posee ningn otro factor de riesgo. b) Si posee otros factores de riesgo. 10. Explique las consecuencias que traera para una persona no poseer los mecanismos parasintezar apo-Al.

Resumen de la d 6 n

El metabolismo de los Ipidos, estudiadoen esta seccin, pone de relieve la diver;idadfuneionalque cabe esperar de un conjunto relativamente heterogneo de comnica y asociados, de forma limitada, con la funcin de reserva ~uestos,confrecuencia aergtica que poseen los triacilgliceroles. Elearder hidrfobo de estos compuestosles confiere peculiaridades a sus proce#osde digestin y absorcin. A diferencia de glcidos y protenas, en la digestin y ibsorcin de los Ipidos no slo cuentan las enzimas hidrolticas correspondientes, ino que es necesaria la accin de otros agentes que propician la formacin de micelas Jue se dispersan en la fase acuosa, y permiten la accin de las enzimas y la incorporain al organismo de los Ipidos digeridos. Esa misma caractersticapeculiar de su poca solubilidad en agua determina que existan dispositivosespecializadosen el transporte de diferentes tipos de Ipidos. Las poprotenas, su formacin, su dinmica, son elementos importantes que se deben considerar en el metabolismo de los Ipidos. De hecho, serios trastornos que a mediano pikV.0 comprometen la vida del sujeto, pueden sobrevenirpor defectos congnitos en algunos de los elementos que intervienen en el transporte eficaz de los Ipidos plasmtim, ya sea en componentes de las lipoprotenas,en receptores celulares para @Mas de ellas, o en la actividad de enzimas especializadas, como la lipasa de popmtenas. La posibilidad del organismo de formar los Ipidos de reserva energtica es bastante amplia, a parir del excedenteglucdico -lo ms frecuente-y tambin a partir de cadenas carbonadas provenientes de los aminocidos. Existe una limitante en el aparato biosinttico celular que no permite formar cidos grasos poliinsaturadosen los cualesexista algn doble enlace situado en el segmento que comprende los ltimos 7 h m o s de carbono, por eso a tales cidos grasos se les denomina esenciales. Lali~sis,abordada el cautulo 50. nermite anreciar de au forma es amoveen

dlleftamentesuministracofactom reducidos para la cadena respiratoria. Dentro de los derivados que se generan por el metabolismo lipdico, los cuerpos ~t6nifos adquieren relevancia debido a que existen situaciones en las cuales se pierbalanceentrela formacin y la utilizacin de estos metabolitos. El carcter cido *2de euos provnca que su acumulacin en el organismo traiga consigo alteraciones " e q a b r i o cido-bsico. Es menester conocer a fondo el metabolismo de estos 4 -Puestos ysus relacionescon otras reas metablicas para comprendery manejar M a d a m e n t e los desequilibrios que se presentan y configuran la Uamada cetosis.

Las Ipidos constituyentes de las membranasson quizs los de mayor importancia biolgica. Los fosftidos de glicerina y los esfingolpidos tienen, por supuesto, sus vas particulares de formacin y degradacin. Actualmente se estudia con ahnco cmo estas clases de Ipidos se distribuyen en las diferentes estructuras membranosas de la clula, a partir del retculo endoplsmico donde son formados. Por ltimo, se analiza el metabolismo de los esteroides que equivale a decir el metabolismo del colesterol y sus derivados. Este compuesto vital tiene sometida su sntesis a un exquisito y mltiple contro1,sin embargo,su ubicuidad y lo complejo de su dinmico nletabolismohan provocado que se haUe entre los principales elementos de uno de los azotes de la humanidad contempornea: la aterosclerosis. La seccin en su conjunto pone en evidencia, adems, el papel recurrente del acetato activo como sillar estructural en la formacin de la mayor parte de los diversos tipos de Ipidos.

Introduccin a la seccin
uando se analiza la composicin de la materia viva se suele destacar que los elementos carbono, hidrgeno y oxgeno estn presentes en todos los com1 puestos biolgicos, mientras que otros como el nitrgeno, el fsforo y el azufre slo se encuentran en algunos de ellos. Esta seccin se ocupa del metabolismo de los compuestos biolgicos que contienen nitrgeno en su estructura, aunque se limita a los de bajo peso molecular, aqullos que alcanzan hasta unos cientos de daltons. Esta distincin obedece a que los compuestos nitrogenados de elevado peso molecular constitnyen macromolculas tales como las protenas y los cidos nucleicos cuyo metabolismo se estudi en la seccin dedicada a la gentica molecular. Desde luego que en determinados momentos de esta seccin ser necesario referirse a los vnculos que ciertos compuestos nitrogenados de bajo peso molecnlar tienen con las macromolculas. Aunque los compuestosnitrogenados de bajo peso molecular muestran una gran diversidad estmctural y funcional, el estudio de su metabolismo de conjunto en una seccin se justifica por las estrechas relaciones metablicas que se establecen entre ellos. Existe un gran nmero de biomolculas que poseen nitrgeno en su estructnra, tal es el caso de los aminocidos, los nucletidos, las protenas, los cidos nucleicos, algunos Ipidos y glcidos, y muchos otros. La presencia de tomos de nitrgeno en las biomolculas confiere a stas importantes capacidadesrraecionalesy, por lo comn, estos tomos participan de un modo destacado
Tomado de Biochernistry. Lubert Stryer. Cuarta edicin, 1995

en las transformacionesbiolgicas de dichas biomolculas. Esto se fundamenta en las parinilaridades de la distribucin electrnica del nitrgeno en sus dislntascombiiciones, donde suele constituir un importantecentro nucleofiiico. Entre los ejemplosdestacados de la participacin del elemento nitrgeno en algunas de las propiedades y funciones de las biomolculas tenemos el apareamiento de las bases nitrogenadas en los cidos nucleicos, la intervencin del grupo amino de los aminocidosen la formacin de enlaces peptdicos y la presencia del grupo imidazol de la histidina en numerosos centros activos enzimticos,entre otros. Quedaclaroque si el nitrgenono es tan abundante ni tan universal en la materia viva comootms elementos,tiene una gran importancia en la determinacinde las prupiedades delas biomolculas de las cuales forma parte. Como se ver, los animales dependen de las plantas para la obtencin del nitrgeno metablicamente til. El organismodel ser humano no es una excepcin, nosotros no podemos utilizar las formas inorgnicasdel nitrgeno y requerimos un suministro de este elemento en forma de compuestos nitrogenados orgnicos. Por razones que se tratarn oportunamente,el organismodel ser humano necesita obtener estas formas tiles del nitrgeno tanto de organismos animales como vegetales. Con los alimentos ingresan a nuestro organismo una gran variedad de compuestos nitrogenados, sin embargo,son los aminocidos los que aportan la mayor parte del nitrgeno que formar parte de las mltiples biomolculas nitrogenadas en nuestras clulas y tejidos. Es por ello que se considera al nitrgeno aminoacdicocomo la forma tl fundamental de adquisicin de nitrgeno metablicamente i en nuestro organismo. Delo anterior debemos concluir que, de una u otra manera, los aminocidosson los precursores de la mayor parte del resto de los compuestos nitrogenados. Una excepcin muy importante, las vitaminas,son estudiadas en el captulo 73. El ncleo del metabolismo de compuestos nitrogenados de bajo peso molecular, y de esta seccin, es el metabolismo de los aminocidos; por tanto, comenzaremospor el estudio del metabolismo de estos compuestos y luego abordaremos el de otros compuestos nitrogenados; no obstante, podr observarse que las relaciones con el metabolismo delos aminocidos se mantienen en todo momento. En el capitulo 54 se estudia la digestin de las protenas y la absorcin de los aminocidos,mecanismo que en los organismos superioresconstituyela f o p a prcticamente nica de incorporacin de estos compuestos y con ellos del nitrgeno metablicamente til. El siguiente captulo se dedica al metabolismo general de los aminocidos, entendido como tal las reacciones que en buena medida son comunes a todos los compuestos de esta clase o a una mayora de ellos. Algunos productos del metabolismo nitrogenado, fundamentalmenteel amonaco, resultan txicos cuando llegan a acumularse,por lo cual los animales han desarrollado sistemas metablicos encargados de la eliminacin de estas sustancias.El captulo 56 se ocupa de los mecanismos de eliminacin del nitrgeno de nuestro organismo.

en las transformaciones biolgicas de dichas biomolculas. Esto se fundamenta en las particularidades de la distribucin electrnicadel nibgenoen sus distintascombinaciones, dondesuele constituir un importante centro nucleoiico. Entre los ejemplos destacados de la participacin del elemento nitrgeno en algunas de las propiedades y funciones de las biomolculas tenemos el apareamiento de las bases nitrogenadas en los cidos nucleicos, la intervencin del grupo amino de los aminocidos en la formacin de enlaces peptdicos y la presencia del grupo imidazol de la histidina en numerosos centros activos enzimticos, entre otros. Queda claro que si el nitrgeno no es tan abundante ni tan universal en lamateria viva comootroselementos, tiene una gran importancia en la determinacin de las propiedades de las biomolculasde las cuales forma parte. Como se ver, los animales dependen de las plantas para la obtencin del nitrgeno metablicamente til. El organismo del ser humano no es una excepcin, nosotros no podemos utilizar las formas inorgnicas del nitrgeno y requerimos un suministro de este elemento en forma de compuestos nitrogenados orgnicos. Por razones que se tratarn oportunamente, el organismo del ser humano necesita obtener estas formas tiles del nitrgeno tanto de organismos animales como vegetales. Con los alimentos ingresan a nuestro organismo una gran variedad de compuestos nitrogenados,sin embargo,son los aminocidos los que aportan la mayor parte del nitrgeno que formar parte de las mltiples biomolculas nitrogenadas en nuestras c6lulas y tejidos. Es por ello que se considera al nitrgeno aminoacdico como la forma fundamental de adquisicin de nitrgeno metablicamentetil en nuestro organismo. De lo anterior debemos concluir que, de una u otra manera, los aminocidos son los precursores de la mayor parte del resto delos compuestos nitrogenados. Una excepcin muy importante, las vitaminas, son estudiadas en el captulo 73. El ncleo del metabolismode compuestos nitrogenados de bajo pesomolecular, y de esta seccin, es el metabolismo de los aminocidos; por tanto, comenzaremos por el estudio del metabolismo de estos compuestos y luego abordaremos el de otros compuestos nitrogenados; no obstante, podrobservarse que las relaciones con el metabolismo de los aminocidos semantienen en todo momento. En el captulo S4 se estudia la digestin de las protenas y la absorcin de los aminocidos, mecanismoque en los organismos superiores constituyela f o p a prcticamente nica de incorporacin de estos compuestos y con ellos del nitrgeno metablicamente til. El siguiente capitulo se dedica al metabolismo general de los aminocidos, entendido como tal las reacciones que en buena medida son comunes a todos los compuestos de esta clase o a una mayora de ellos. Algunos productos del metabolismo nitrogenado, fundamentalmente el amonaco, resultan txicos cuando llegan a acumularse, por lo cual los animales han desarrollado sistemas metablicos encargados de la eliminacin de estas sustancias. El captulo 56 se ocupa de los mecanismosde eliminacin del nitrgeno de nuestro organismo.

Los capiulos 57 y 58 se dedican al estudio de determinados compuestos nitrogenados de bajo peso molecular con una importancia sobresaliente en el metabolismo, ellos son los nucletidos y las porfirinas. Los compuestos nitrogenados no slo mantienen una estrecha relacin metablica entre s, sino que se relacionan de forma importante con las vas metablicasde glcidos y Ipidos. En muchos casos, estos vnculos se establecen a travs de los aminocidos, pero tambin directamente por medio de otros compuestos nitrogenados. En el caso de los aminocidos es tan notable que, en buena medida, el estudio del metabolismo de estos compuestos consiste en conocer el compuesto intermediario que los conecta a vas principales como la gluclisis y el ciclo de Krebs. En el caso del metabolismode compuestos nitrogenados de bajo peso molecular existe un elevado grado de diferenciacin y especializacin en el organismo, de modo que algunos procesos slo ocurren, o lo hacen preferencialmente, en determinados rganos y tejidos. Es de destacar el hgado, el cual tiene una participacin de primersima lnea en el metabolismo de este tipo de compuestos. Tambin presentan particularidades de gran inters el cerebro, el tejido muscular y el sistema eritropoytico-ltico.

Enla introduccin de esta seccin pudimos conocer que los aminocidosson la forma fundamental de ingreso de nitrgenometablicamente oI a nuestro organismo. La forma natural de este ingreso es la va oral, es decir, por medio de la ingestin de alimentos. Ocurrequelos productos animales y vegetales que nos sirven de alimentocontienen muy pequeas cantidades de aminocidos libres, si bien pueden contener cantidades apreciables de estos compuestos, pero bajo la forma de sus protenas constituyentes. Ennuestroaparatodigesvonose producelaabsorcin delas protenas de los &mentas, al menos en cantidades apreciables. Estas protenas son degradadas por accin de enzima5 proteolticas basta sus aminocidos constituyentes, luego de lo cual stos son absorbidospor la mucosa intestinal. De este proceso trata el presente captulo. Para la mejor comprensin de las vas de adquisicindel nitrgenometablicamente fil,m necesario abordar, en primer lugar, el ciclo del nitrgenoen la naturaleza

Ciclo del nitrgeno en la naturaleza

El nitrgeno e muy abundante en la atmsfera donde se encuentra como nitrgeno s mokcular (N,),formando el 79 % del aire. En los suelos se halla en forma de nitratos, amonaco y otros derivados producto de la disolucin de minerales y de la descomposicin de organismos vivos. Los organismosanimales no son capaces de utilizar estas formas del nitrgeno P~sintetizarsus biomolculas nihogenadas. Estose debea que carecen de los sistemas eazim6tieoscapaces de llevar a cabo las reacciones correspondientes. Las plantas, en cambio, absorben los nitratos y el amonaco del Suelo y Sintetizan, a P * de ellos, los aminocidos y otros compuestos nitrogenados de bajo peso a m o ~ e f t hGeneralmente, la primera molcula orgnica donde es incorporado el . niMgeno de estos orgenes es el cido glutmico, de modo que este aminocido un papel determinante en la conversin del nitrgeno inorgnico en Ditr6genode biomolculas. A partir del glutmico,el nitrgeno puede ser transferidoo "mrp~radoauna gran variedad de compuestosnitrogenados. De 10anterior puede deducirse que los animales dependen de las plantas Para la O b t e n d h del nitrgeno en una forma utilizable, ya que como sealamos, stos no ~eninforporarlasformas inorgnicas de dicho elemento. Entre las plantas, ciertas

especies como las leguminosas (frijoles, etc.) tienen una destacada participacin en la incorporacin del nitrgeno inorgnico al mundo orgnico. Esto se debe a que en sus races se establecen colonias de bacterias capaces de convertir el N, atmosfricoen amonaco y otros compuestos inorgnicos, los cuales sonabsorbidospor la planta y utilizados en la sntesis de biomolculas nitrogenadas. A estas plantas se las denomina fijadoras de nitrgeno. Todas estas transformacionesdel nitrgeno destacan la interdependenciade los seres vivos entre s y de stos con el medio, constituyen un aspecto del flujo de sustancias en el mundo biolgico y reciben el nombre de ciclo del nitrgeno en la naturaleza. Si bien esteciclo es relativamente complejo, sus aspectosms sobresalientes pueden ser resumidos tal y como se representan en la figura 54.1.

NH3 +Aminocidos
Fig. 54.1. Ciclo del nitrgeno en la naturaleza. Las plantas absorben del suelo compuestos nitrogenados inorgnico~ como el amonaco y otros, a partir de estas sustancias dichas plantas sintetizan aminocidos y otros compuestos nitrogenados. Los snimales dependen de las plantas para obtener el nitrgeno metablicamente til, en esencia en forma de aminoridos. Al morir los animales, sus compuestos nitroeenadas son deeradados v " converlidas de nuevo en compuestos inorgnicos.

Aminocidos
I

Co"p~esta~ nitrogenadas
G

Las plantas absorben del suelo los nitratos,el amonaco y otras formas de nitrgeno inorgnico -las fijadoras denitrgenoutilizan tambin el N, atmosfrico-a partir de las cuales sintetizan compuestosorgnicos nitrogenados de bajo peso molecular. Los animales dependen delas plantas -o de otros animales- para obtener el nitrgeno en una forma utilizable desde el punto de vista metablico, fundamentalmente aminocidos, y a partir de estos compuestos se pueden sintetizar casi todas las biomolculas nitrogenadas presentesendichosorganismos.Al morir,tantolosanimales como los vegetales, sufren un proceso de descomposicin mediante el cual sus compuestos nitrogenados son degradados y convertidos en formas inorgnicas como el amonaco. Asse cierra el ciclo.

Protenas de la dieta comn

A diferencia de los glcidos e incluso de los Ipidos, la diversidad de protenas que resultan ingeridas como alimentos, es enorme. Baste pensar que nos sirven de alimentos multiplicidad de protenas diferentes que componen los tejidos de los animales y las plantas. Adems de esta diversidad cualitativa, el contenido de protenas de 10s diferentes alimentos resulta tambin muy variable; es ms elevado en las carnes Y semillas que en los tubrculos y hojas. La composicin cuantitativa y cualitativa de las protenas de los alimentos es un problema prctico de la mayor importancia. Podr comprenderse que si las protenas delos alimentos suministran el nitrgeno metablicamente i al organismo, resultara tl imperioso ingerir determinadas cantidadesde este tipo de nntriente para garantizar la adecuada reposicin de las prdidas de elementos nitrogenados. Las protenas de la dieta constituyen, por tanto, un requerimientonutricional. Los aspectos nutricionales de las protenas son tratados de manera especfica en el captulo 71.

E -

proteoitiras del tubo digestivo

Las protenas que forman parte de los distintosalimentos son atacadas por enzimas pp&nltieas presentes en las secreciones gstnca, pancretica e intestinal. Al ser aqullas hidrolizadas por estas enzimas liberan aminocidos que son absorbidos por la mucosa intestinal y alcanzan de esta forma el torrente circulatorio. Las enzimas que catalizan la hidrlisis de los enlaces peptdicos de las protenas se denominan enzimas proteolticas o proteasas. La reaccin bsica catalizada se ~~pedca en la figura 54.2. Sedistinguen 2gmpos fundamentalesde proteasas: lasproteinasasy las peptidasas

Fig. 54.2. Las enzima5 proteolticas cataliran una reaccin hidralitiea en la cual se produce la ruptura de un enlace peptidico con la incorporacin de los elementos del agua. En el punto de mptura quedan restituidos los grupos amino y rarboxilo que participaban en dicho enlace.

Son enzimas que hidrolizan enlaces peptdicos localizados en el interior de las cadenas polianhoadicas de las protenas. Suelen atacar preferenciahente sustratos dealto pesomoledar, y su accin pmduce fragmentospeptdicos de longitnd variable. Se les ha denominado tambin endopeptidasas.

E C enzmiashidmlizan enlaces peptdicos localizadosen los extremosde las cadenas ss

O

de ellos. Su actividad es mayor al atacar pptidos de bajo peso mblecular, y SU dnproducelaliberaandetnpptidos,dipptidos y aminocidos. Las aminopeptidasas ejereensuafflncercadelextremo amino terminal, mientras quelascarboxipeptidasaslo hacen por elextremocarboxilico. 0t1as reciben su nombre de acuerdo con el tamao del fWwento peptdico sobre el cual tienen mayor accin. A este gmpo se les denomina tambih exopeptida~as. pmteinasasdel aparato digestivoson lapepsina,la trip4naJaquimotripsina y la ela* Las peptidasas estn representadas por distintos tipos de aminopeptidasas, "Odpeptidasas, dipeptidasasy otras.

Esta p~derosa proteinasa es segregada a la luz gstrica en forma de pepsingeno, molhIa Precursora de la pepsina. El ~epsingeno inactivo en la forma en que se segrega por las clulas ppticas. es neneun peso moleeulw de 40 400 D, y su activacin o conversinen pepsina se realiza porp~~sisparcialen presenciadel HCI deljugo gstrico o autocatalticamente.
HCI, Pepsina
Pepsingeno t

pepsina + varios pptidos

La activacin del pepsingeno consiste en la separacin, en forma de pequeos pptidos, de 42 aminocidos de los 362 originales presentes en el zimgeno. Todos ellos son separados del extremo amino terminal. En los pptidos asliberados estn presentes numerosos aminocidos bsicos, y durante la activacin del pepsingeno el punto isoelctrico desciende desde 3,7 a 1,O o menos. La pepsina posee un pH ptimo de 13a 23, por lo cual una adecuada secrecin de HC1es importante para su actividad digestiva. En su sitio activo se localizan 2 residuos de cido asprtico. Losenlaces atacados preferentemente por la pepsina son aqullos en los cualesel grnpo amino es aportado por la fenilalanina, la tirosina o el triptfano, pero tambin acta en forma ms lenta sobre otros residuos.

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La accin de la pepsina provoca la hidrlisis del 10 al 15 % de los enlaces peptdicos de las protenas ingeridas.

El jugo pancretico contiene tripsingeno, que es el precursor de la tripsina. La conversin del tripsingeno en tripsina se produce por laseparacin de un hexapptido del extremo amino terminal. Esta separacin hidroltica es catalizada por una enzima intestinal: la enteroquinasa, actualmente tiende a Ilamrsele enteropeptidasa. Enteroquinasa TripsingenoFTripsina

+ hexapptido

La tripsina tiene un pH ptimo entre 7 y 9,e hidroliza preferentemente aquellos enlacespeptdicos cuyo grupo carboxilo es aportado por la lisina o la arginina.

Tambin el jugo pancretico contiene quimotripsingeno.Este ltimo se convierte en quimotripsina por accin de la tripsina o la propia quimotripsina.

Pepsingeno

HCI, Pepsina

Pepsina + vanos pptidos

Se han aislado 3 especies de quimotripsingeno: pi, delta y alfa, los cuales representan estadios en el proceso de activacin. El quimotripsingeno est formado por unasola cadena polipeptdica, pero la quimotripsina posee 3 cadenas: A, B y C, unidas por 5 puentes disulfuro. El pH ptimo de la quimotripsina es tambin de 7 a Y y su especificidades similar a la de la pepsina, o sea, hidroliza con preferencia enlaces peptdicos formados por aminocidos aromticos e hidrofbicos, pero por el grupo carhoxilo de stos.

La proelastasa del jugo pacretico es convertida en elastasa por accin de la tnnsinaEstaelastasadieestiva no debe confundirsecon una isoenzima de igual nomhre presente en los grnulos de los lencocitos polin~oroiiucleares. La tripsina, la quimotripsina y la elastasa poseen un residuo de serina en su centro activo, por lo que pertenecen al vastsimo grupo de las serinproteasas.
u

PeptiaPsas digestivas Enelintestinodelgadouna g\;uivariedad de peptidasascompleta la accin hidrolti-

ea iniciada por las proteinasas digestivas.

Algunas peptidasas llegan al intestino con el jugo pancretico en forma de zimgenos -procarboxipeptidasas A y B-, y son activadas por la accin de la quimotripsina, otras se localizan en las zonas apicales de las clulas que revisten el intestino-amioopeptidasasy dipe~tidasas. carboxipeptidasaA libera, por hidrlisis, La la mayor parte de los aminocidos del extremo carboxilo, en tanto que la B slo ataca los residuos de lisina y arginina cuando estn en dicha posicin. Algunas de gtas peptidasas reciben denominacionesms precisas cuando es bien conocida su especificidad,tal es el caso de la leucina aminopeptidasa que, aunque es mpazdeberar diferentes aminocidosdel extremo amino, tiene marcada preferencia Por la leucina ubicada en esta posicin. La tabla resume algunos aspectosde inters de l a s e b a s proteolticas digestivas. sa C o m o d t a d o d e todas e t saccionesenzimticasseproducela rupturahidroltica ~ ~ M 0 las , mayora, de los enlaces peptdicos de las protenas componentes de o gran ladieta Wig. 54.3). ~~~eein combinada de las proteasas digestivasluminales sobre las protenas de lm&entospmduce una mezcla constituida por el 30 al 40 % de aminocidos libres Y 60 al 70 % de ~ligopptido~. Elepiteointestinalposee 2 sistemas transportadores de oligopptidos -dipptidos y triN~odos-, a 10scuales incorpora mediante un simporte de sodio (captulo 20). En elht*rde 1 clula se completa la hidrlisis de ebtos pequelios pptidos por accin , *merentes peptidasas. El producto final de la digestin de las protenas, incluyendo todos los procesos, g ( B 7 b w d o esencialmente por una mezcla heterognea de diversos aminocidos y mtahithna~m~omin pequeos oligopptidos. de

MctaboLismo intermediario y su regulrrci6n

921

Tgbla Caractersticas de las principales enzimas proteolticas digestivas

Enzima Pepsina Zimgeno Pepsingeno pH ptimo Especificidad Localizacin Estmago

Duodeno
8,O a 9,O

X-Ala-X -TripX-Fen-X-Tir-X-

Duodeno Duodeno

Quimohipsina

Quimohip singeno

7,4

-X-Y-COOH H,N-X-YH,N-X-Y-COOH

Duodeno Duodeno Duodeno

.-..
.-..

..

u-d-~<~L,-~r,-.-"-. ~ L \ P , ,,

Protenas de la dieta

Digestibilidad de ias protenas

Fundamentalmente, por la natnraleza de las propias protenas de la dieta y las caractersticas de especificidad de las enzimas proteolticas digestivas, en ocasiones, algunos enlaces peptdicos presentes en las protenas no son hidrolizados. Esto conduce a que entre los productos de la digestin permanezcan algunos pptidos que no puedan ser absorbidos y salgan al exterior con las heces fecales. De modo que no todo el nitrgeno aminoacdico que se ingiere con los alimentos resulta absorbido y aprovechado. Este hecho reviste una importancia nutricional considerable, pues se relaciona con el grado de aprovechamiento que el organismo puede hacer de las protenas ingeridas. La coccin de los alimentos, por su efecto desnaturalizante sobre las protenas, incrementa su susceptibilidad al ataque proteoltico, y por tanto, la absorcin de sus aminocidos constituyentes. Resulta de inters, por otro lado, conocer la influencia de la propia naturaleza de la protena en sus posibilidades de ser asimilada. Esta caracterstica se expresa como digestibilidad de las protenas y ser objeto de estudio detallado en el captulo 71.

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. i - _^
-J

Accin de proteinasas (endopeptidasas)

- ,.-~.-.,~
.
p L

Mezcla de pptidos

-- - -. . -~ Mezcla de .- - . -,.~-.aminocidos . .- ~- .. . Pocos oligopptidos

~-- . , -. -. - . . ,. .. . -.
p .
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A

cortos
Fig. 54.3. Sobre las protenas de la dieta actan, inicialmente, las proleinasas que hidrolizan enlaces peptdicos del interior de las cadenas, con lo cual stas resultan fragmentadas en pptidos de longitud variable. Las peptidasas, al actuar sobre estos pptidos, hidrolirnn las enlaces peptdicos restantes y se obtiene una mezcla de aminocidas libres.

Absorcin de aminocidos
Enel intestino, las mezclas de aminocidospmducto de la digestin de las protehas, son absorbidas por las clulas de la mucosa mediante mecanismos de transporte activo

y requieren la presencia de ionessodio m -

Espacio extracelular Membrana plasmtica Espacio intracelular Aminocidos Siinporte de aminocidos "Bomba" de

K*
,_--

&Al resto del organismo

Las clulas del epiteliointestinalposeen, en la porcin luminal de sus membranas, pmteiasque actan como transportadores de aminocidos. Algunas de estas protenas baiLFportadorasintervienen en la absorcin de aminocidosesmicturalmentesimares. Estos sistemastransportadores son: uno para aminocidos neutros, uno (quizs 2) para aminocidos bsicos, uno para aminocidos cidos, y uno para la glicina y los aminocidos cclicos. Los aminocidos absorbidos en el intestino alcanzan todos los rganos de la emnomaatravsdela sangre y la linfa, aunque por las caractersticasdela circulacin portallamayor parte llega en primer lugar al hgado (Fig. 54.4). Parece que una pequea cantidad de oligopptidos puede alcanzar la circulacin portal. Este hecho explicara la administracin exitosa, por va oral, de pequeas hormonas peptdicas, tal como el factor de liberacin de tirotropina: un tripptido. Unaexcepcin notable es el caso de los recin nacidos, en los cuales algunas protenas ingeridas pueden pasar intactas a la circulacin. Este hecho pudiera ser relevante en relacin con la inmunidad pasiva que les conferira la absorcin de inmunoglobulinas A presentes en el calostro. Esta capacidad se pierde alrededor del segundoda despus del parto. Una vez incorporados los aminocidos a las diferentes clulas del organismo, ingresan a sus correspondientes vas metablicas.

Hgado porta

de aminocidos producto de la digestin

Fig. 54.4. La mayor parte de la sangre que retorna del rea intestinal lo hace a travs del sistema portal heptico, por lo cual la mayora de las aminocidos absorbidos en el intestino alcanzan, en primer lugar, el hgado y, ulteriormente, el resto de las clulas del organismo.

Resumen
aminocidos coastituyen la forma fundamental de ingreso de nitr6geno

-mente hi a nuestro organismo, y se obtienen a partir de la digesti6n de pr~tefmw contenidas en los &entos de la dieta
b p m t d m a de la dieta comn son muy variadas, tanto en sus aspeetoS cuancomo d t a t i v o s . Esto es un fuodamento importante de los eshidios e s dadonados con este tiw de comuuestos. - - - ~ ~- - -~ - = En el aparato digestivo 8610 se Lleva a eab'iibsorcin de amino4cidm. Las de la dieta sufren la a ~ hidroUtica de enzimas denominadasproteasas. n r o e r d o con ias caractertstim de su aeein, las proteasas se clasiean en ~ ( ~ d o p e p t i d a s a s ) y peptidasas (exopeptidasas). La m y o r parte de h proteasas digestivas son segregadas en forma inactiva: 0 8 0 ~memhas, cuales se activan en la luz intestinal por mecanismos las ~protedlfslsparcia~

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Las proteinasas del aparato digestivo son: la pepsina, la tripsina y la quimoiripska, mientras que las peptidasas son, iimdamentalmente, distintas tipm de carboxi y aminopeptidasaa La digesbilidad de las protenas e un concepto nutriuonal de importan& y s se relaciona con la susceptibilidad de las distintas protenas de la dieta a la accin hidroltica de las proteasas. La a&6n combinada de las diferentes proteasas digestivas convierte a las protenas de la dieta en mezclas de aminoados que son absorbidos por el epiielio intestinal mediaute mecanismos de transporte aetivo. La mayor parte de los amino6udos absorbidos aleanzao el hgado y de ah el resto de las clulas del organismo, donde son incorporados a las vas metablicas correspondientes.

Ejercicios
1. Qu importancia tienen las protenas de la dieta en la obtencin del nitrgeno metablicamente til por nuestro organismo? 2. Cul es la accin bsica de las enzimas proteolticas? 3. Cul es el principio de clasificacin de las enzimas proteolticasy cuntosgrupos existen? 4. Cules son las principalesenzimas proteolticas del aparato digestivo? 5. Cmo se produce la activacin de las enzimas proteolticas digestivas que son segregadasen forma de zimgenos? 6. Cul es el producto obtenido en el tubo digestivo a partir de la accin de las enzimas proteolticassobre las protenas de la dieta? 7. Cmo son incorporados al organismo los aminocidos producto de la digestin de las protenas? 8. Explique por qu no todo el nitrgeno aminoacdico que es ingerido con los alimentos resulta finalmente incorporado al organismo.

Los aminocidos constituyen la forma fundamental de obtencin de nitrgeno metablicamentetil del organismo. Como es de esperar, su metabolismo tiene una importancia central dentro de todo el metabolismo de compuestos nitrogenados de bajo peso molecular. En este captulo se estudiarn las vas generales del metabolismo de estos compuestos y algunos aspectosparticulares que por su importancia se han incluido. El estudio detallado de todas las vas de sntesis y degradacin de los diferentes aminocidos, por su diversidad y complejidad,rebasa los propsitos de este libro, por lo cual el contenido del captnlo constituye una seleccin de los aspectos que se han ~nsiderado mayor relevancia. de

Losaminocidoslibres en el organismo se encuentran en solucin en los diferentes Lquidos corporales: intracelular, intersticial, plasma, linfa y otros. Si bien las con-

mtraciones de estos compuestos son diferentes en cada uno de los compartimientos ~nuidosconsiderados. existe un continuo intercambio entre stos a travs de las dis&bm,membranas celulares, capilares y otras. conceptop pool (captnlo41) es perfectamente aplicable a los aminocidos para elconjunto de todos los aminocidoslibres presentes en el organismo. La cantidad y concentracin de cada uno de los aminocidos del pool es Woi~~~~amente constante en el sentido de que sus variaciones se producen dentro de bfh O menos estrechos. La constancia del pool de aminocidos refleja un iU6~ esmodeequibrio dinmico entre los procesos que le aportan aminocidos al pwly 19;8 W l e sustraen. 1 t * ~ P ~ C ~ S aportan aminocidos al pwlson: que O S

~&&absoreinintestinal.

&&tesis

q ~ b o s m de protenas bsticas. o de aminocidos.

Del poolsustraen aminocidos: 1.Lasntesis de protenas. 2. La sntesis de otros compuestos nitrogenados. 3. El catabolismo de aminocidos (Fig. 55.1).

A continuacin haremos un comentario de estos procesos relacionados con el pwlde aminocidos.

Catabolismo de protenas

..

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intestinal

Fig. 55.1. Representacin esquemtica del pool de aminocidos y las procesos relacionados con l. El balnnce entre los procesos que aportan aminocidas al pool y sustraen de l, determina que ste permanezca en un estado de equilibrio dinmico. Estos procesos se encuentran interrelaeionadas a travs d d propio pool.

Pool de aminocidos

Sntesis de protenas

Sntesis de compuestos nitrogenados no protenicos

Catabolismo

La absorcin intesnal de los aminohcidosconstituye la fuente principalde ingreso de nitrgeno metablicamente til al organismo. La composicin y cuanta de este aporte oscila con la dieta, por lo general entre 70 y 100 gde aminocidos por da en un adulto normal. Los detalles de este proceso fueron analizados en el captuloprecedente.

Este proceso consiste en la degradacin de las protenas de nuestro propio organismo. Constituye un aspecto del estado de recambio continuo a que se ven sometidas todas nuestras protenas. Las protenas hkticas estn siendo sintetizadas y degradadas de manera continua, y en un individuo en equilibrio metablico la intensidad de estos procesos es aproximadamente igual. El auabolismo y el catabolismo de las protenas pueden sufrir desbalances,con predominio deunon otro, segnlasvariaciona del estadosiolgim,las caractersticas de la dieta y otros factores. Las diferentesprotenas que constituyen nuestro organismo no se recambian con la misma velocidad. La vida media de cada protena considerada individualmente puede ser tan corta como unas horas o tan larga como varias semanas. En el catabolismo de las protenas intracelularesparticipan enzimas proteolticas similares a las proteasas del aparato digestivo. Muchas de ellas se localizan en los tisosomas y han recibidoel nombre genrico de eatepsinas.Son notable por su elevada actividad proteoltica las catepsinas D, H, B y E, entreotras. Este sistema lisosomal parece estar vinculado, fundamentalmente, con la degradacin de protenas de membrana y otras de vida media prolongada.

En el citosol se ha detectado un complejo supramacromolecular de alrededor de 1000 000 D, denominado proteosoma, que provee una va no lisosomal para la degradacin de las protenas intracelulares. Estos complejos presentan una actividad proteoltica de variada especificidad y son capaces de hidrolizar mltiples enlaces peptdic~. ensamblaje de los pmteosomas y, pmbablemente,~~ El actividad hidmltica se acompaan de la hidrlisis de ATP. Parece que la secuencia amino terminal de las protenas intracelulares influye poderosamente en su susceptibilidad a la hidrlisis por los proteosomas. Lasecuencia amino terminal, y quizs otras internas, tambin determinan en la unin de la ubiquitina adichai protenas; la ubiquitina es una pequea protena de 76 aminocidos presente en todos los eucariontes. La uhiqoitinizacin de protenas htracelulares las "marca" para su degradacin proteosomal. Se ha comprobado que la presencia de los aminocidos isoleucina, glutamina, timsha, cido glutmico, pmlina, leucina, fenilalanina,cido asprtico, b i n a y, sobre todo arginina, en o cerca del extremo amino terminal favorece la degradacin de protenas por esta va; mientras que la metionina, glicina, alanina, serina, treonina y valina las protegen. Por eso la remocin de la m e t i o ~ n a otro procesamiento n proteoltico postradnccional de las protenas tienen suma importancia en la determinacin de su vida media. Se ha identificado tambin un sistema que transfiere arginina desde su ARNt correspondiente hasta el extremo amino terminal de algunas protenas; esta a r g b h h c i n las sensibiliza para su ulterior degradacin. Entre las secuencias internas que favorecen la ubiquitinizacin y posterior degradacin proteosomal de protenas, la ms notable es la formada por los aminocidos prolina-ado glutmico-serina-treouina. Launinde laubiqnitina con las protenasse realiza por un enlace covaientede tipo amida (isopeptdico), y requiere enev'a y la participacinde vanas enzimas (Fig. 55.2). El catabolismo de protenas hsticas est sometido a regulacin; ste resulta inhibido por diferentes aminocidos y por la hormona insnlina. El glucagn y los glucocorticoidesaceleran este proceso. Esta posibilidad de regulacin tiene valor adaptativo en situaciones tales como el ayuno, la fiebre y otros. El catabolismo de protenas hsticas aporta alrededor de 140 g de aminocidos diariamente al pwl de estos compuestos en un individuo adulto normal.

E,- SH
;

Sntesis de eminocidm

i -c.- . .

S-E,

Se hatade la formacinde este tipo de compnmtos a partir de sustanciasprecursoras provenientes de las vas metablicas de los glcidos fundamentalmente. Aunque este PIOCeso puede y de hecho aporta aminocidos al pool, tiene limitaciones, ya que, como veremos, nuestro organismo no es capaz de sintetizar todos los aminocidos, sin0 slo algunos de ellos.

Este es un proceso complejo que se estudia en la seccin de Gentica molecular;

Seafllatras~metido adelicados mecanismosde regulacin y junto con el catabolismo de Protenas hsticas participa en el mantenimiento del equilibrio dinmico de las WW~M.S denuesho oreanismo. La sntesis de protenas su\trae mninoiwidoi del pool. !.a que esto% compuestos 10sprecursores de dichas mairomol.culoi. Esta snteiis slo ce prtiduci de un:i manera efieaz si los diferentes aminocidos que componen las protenas se hallan Presentes en el pool en las cantidades apropiadas.

Conjugado ubiquitina-protena (enlace isopeptdico)

Fuente: StryerL.: Biocbernistry. Cuarta edicin, W. H. Freernan & Co., 1995. Fig. 55.2. Unin y activacin de la ubiquitina con las protcinas para su degradacin.

Sntesis de otros e o m p u W nitrogenados

Los aminocidos sirven de precursores para la sintesis de otros compuestos nitrogenados de bajo peso molecular, tales como nucletidos, grupos hemo, etctera. Estas vas biosintticas sustraen aminocidos del pool. Queda claro que si los aminocidos son la forma principal de ingreso de nitrgeno metablicamente til al organismo, stos deben ser utilizados para la sntesis de otros compuestos nitrogenados. La intensidad de estos procesos biosintticos depender de la va particular de quese trate y del estado metablico del organismo.

Catabnlismn de los aminocidos Este proceso representa la va degradativa de dichos compuestos,y se trata de una funwnfundamentalmenteenergtica.Cadadaunos70 gde aminoudossonutilizados con estos fines, lo cual cubre alrededor del 20 % de las necesidades calricas de un adulto normal. Este es un aporte energtico no despreciable, que puede incrementane considerablemente durante el avuno. v tambin de acuerdo con la comuosicin eeneral , ," de la dieta y el estado metablico del organismo. Si bien los productos finales del catabolisnio de los aminocidos son CO,, H,O y MI,, estadegradacin puede tambin producirse en forma incompleta, lo cual permite que las cadenas carbonadas de estos compuestos puedan ser convertidas, al menos parcialmente, en glcidos o Ipidos. El rendimiento energtico de cada aminocido en particular es diferente, lo que era de esperarse dada L diversidad estructural de este tipo de biomolculas. En los a clculos nutricionales se considera como rendimiento energtico de los aminocidos, un valor promedio de 4 kcal.mol-', que es el mismo que se asigna a las protenas de la dieta (captulo 70). Los procesos que aportan aminocidos al pool y los sustraen se encuentran relacionados mediante ste, de modo tal que los cambios en la intensidad de cada uno de ellos pueden tener repercusin en losdems. As,por ejemplo, un aumentode laingestin de protenas suele condicionar un incremento en el catabolismo de los aminocidos.

Reacciones metablicas generales de los aminocidos

Por reacciones metablicas generales de los aminocidos se entienden aqullas que son comunes a muchos de ellos o que constituyen etapas de alta significacin en el metabolismo de algunos de estos compuestos. El conocimiento de estas reacciones generales es de gran inters para la comprensin del metabolismo de los aminocidos en su conjunto.

La desaminacin de los aminocidoses un proceso metablico, en el cual, a partir de un aminocido, se obtiene el alfa cetocido correspondiente y amonaco. Entre las enzimas que desaminan a los aminocidoshay algunas que requieren la participacin de cofactores de xido-reduccin,en cuyo caso la reaccin catalizada se denomina desaminacin oxidativa. La principal enzima que cataliza la desaminacinomdativa de los aminocidoses la deshidrogenasa del L-glutmico que, como su nombre indica, es especfica para el aminocido glutmico. En los mamferos, el cofactorde xido-reduccin de esta enzhIa puede ser el NAD+o el NADP. Se ha planteado que la enzima utiliza NAD* cuando participa en la desaminacin del glutmico, y NADP cuando lo hace catalizando la reaccin inversa -de carcter anablico-; no obstante, los estudioscinticosno parecen

sustentar este criterio, por lo que en la actualidad se considera que ambos cofactores pueden participar indistintamente en la catlisis de la reaccin directa0 inversa.

cido glutmico

cido alfa imino glutrico

cido alfa ceto glutrico

Durante la reaccin, el glutmico es primeramente deshidrogenado,formndose un rnmnnesto intermedio: el cido alfa imino elutrico. nue no es ms que el iminocido -----r --homlogo del cido glutmico. Seguidamente se produce la bidrlisisdel iminocido,y se obtiene cido alfa ceto glutrico y amonaco. El NADH puede ser reoxidado con la participacin de la cadena mitocondrial transportadora de electrones y el consiguiente rendimiento energtico. La deshidrogena. del glutmicose localiza en la matriz mitocandrial.E t compufsta s por6 subunidades idnticas y tiene nn peso molecular de 336 000 D. La actividad de la eozima multa @ada por varim moduladom, es activada por el ADP, el GDPy algunos aminocidos, mieniras que el ATP, el GTP, el NADH y el fosfato de piridoxal, la inhiben. La reaccin catazada por la deshidrogenasadel glutmico es reversible, por lo cual resulta posible la obtencin de cido glutmico a partir de cido alfa ceto glutrico y amonaco. La reaccin considerada en este sentido constituye la reaccin inicial para la incorporacin del nitrgeno inorgnico al mundo orgnico, por las plantas. En los mamferos tiene significado especial en el tejido del cerebro durante determinadas cknmtancias metablica~ sern consideradasposteriormente. que Apesardeque esta enzima es especfica para el cido glutmico, se le considera una enzima central y clave en el metabolismo de los aminocidos, donde cumple funciones generalesde desaminacin. Como veremos, el grnpo amino de otros aminocidos puede ser incorporado a cido glutmico y resultar separado en forma de amonaco por la l aeeincataltieade la deshidrogenasadel glutmico,por locual se airma acertadamente pueestaenzima contribuye a la desaminacin de otros aminocidos. Ver ms adelante ~e*ioismode la transdesaminacin. Existen otras enzimas que catalizan reacciones similares, pero su significado metabfiw es mucho menor. La deshidrogenasa de L-aminocidos -L-aminocidos 0--,queempleaFMN comocofactor,es capazde catatizar la desaminacinoxidativa del~Laminocidos,pero tiene una actividad tan bajaque su accin desaminante en las
~ ~

PrsCk-amente son inexistentes en el organi;&o, con la ocasio&d excepcin de los D-*Ocidos provenientes de la degradacin de paredes bacterianas. Las L y D -&idos oxidasas se localizan en los peroxisomas y generan H,O,.

COOH

I
(33, OH

H,N-C+HN=
11

COOH C

CH,

XH,
cido pi~vico

Tambin en estos casos se obtienen cetocidosy amonaco como productos fmaies. Adems de la deshidmtasade la serina, existene n h a s simam capaces de dgaminar la treonina, la cistena y otros. Todas eUas emplean el fosfato de piridoxal como cofactor.

aminocido, hasta un ceiacido, de modo que se obtienen, como prodctos, el &cido corre~pondientealaminoadomicial elaminO~doco~ndi~1tealcetOadoiniaal y

YOOH

COOH

COOH

I R,

C=O

H,N-C-

i R2

Esdenotarelhechodequeenlarmmnde~Cinnoseobtieneam&brr. Existe todo un grupo de enzimas capaces de catalmr este tipo de reacciones, la denominacin genn&destas es t m m d w a s (aminotransfe&). Las reacciones de hansaminacin son libremente reversibles v su constante de eqdibrio estcercana a la unidad. Prcticamente todos los aminocidos pueden intervenir en reacciones de transaminacin,pero las hansaminasaspudieran agrnparseen 3categonas,pues uno de los 3 cetocidos: pirvico, oxalactico o alfa ceto glutrico, parece ser un participante obligadodelarmccin.U~famiadeh;insaminestara formada porlasque emplean, obligatoriamente. el par pirvicu-alanina. otra por las aue trabaian con el par oxalktico-asp~co~lat&reeraualizana alfa ceto glutrico-glutmico.~a otra elpar pareja de la reaccin sera la corrapondientea cualquierade los dems aminocidos. COOH
l
1

COOH
l

Cetocido

COOH
cido glutmico

CH2 i COOH
cido alfa ceto glutnco

Aminocido

A modo de ejemplos consideremos 2 reacciones de transaminacin: la caalizada por la transaminasa glutmico-pirvico (TGP) y la catalizada por la transaminasa glutmico-fenilpi~vico.

COOH H,N-C-H

COOH

I l

CH, CH, I COOH cido glutmico

"'/

C =o CH3 cido pinvico

H,N-C-H

CH3 Alanina

cido alfa ceto glutrico

COOH H,N-C-H

COOH

CH, COOH cido glutmico

7%

l c=o l

COOH

cido fenil pi~vico

COOH

H,N-C-H

l l

COOH cido alfa ceto glutnco

o'

Fenilalanina

O t r a s transaminasas incluyen la glutmico-oxalactico (TGO), la glutmico-alfa ceto isocaproico y varias ms. La transferencia de grupos amino tiene un amplio significado metablico y ocurre no slo entre aminocidos, sino tambin entre aminas, amidas y derivados de aminocidos. Las transaminasas utilizan como cofactor el fosfato de piridoxal, que acta como transportador del grupo amino entre los sustratos, alternando su estructura entre la forma aldehdica (piridoxal) y la forma aminada (piridoxamina) (captulo 19). El fosfato de piridoxal se une a las transaminasas a travs del amino psilon de un residuo de lisina, y durante la reaccin es transferido al aminocido con formacin de una base de Schiff, a partir de cuyo compuesto se producen las modificaciones qumicas que conducen a la transaminacin.

COOH

COOH
l

Fosfato de piridoxal

\/ ;

H Fosfato de piridoxamina

Las transaminasas actan mediante un mecanismo cataltico de doble desplazamiento (ping-pong), y esto se evidencia en los estudios cinticos. Las transaminasas, como la mayora de las enzimas, son intracelnlares y su actividad en el plasma es muy baja en condiciones normales, sin embargo, cuando ocurre muerte y lisis celular por cualquier causa, su concentracin en el plasma aumenta, detectndose una actividad considerable. Este hecho permite que se emplee la determinacin de la actividad de estas enzimas en plasma para diagnosticar y seguir la evolucin de ciertas afecciones que transcurren con dao celular, especficamente en aquellas enfermedades que afectan rganos ricos en estas enzimas. En ocasiones,el tipo especco de transaminasa elevada sugiere el rgano afectado por su relativa abundancia en l. As, las enfermedades hepticas -hepatitis viral, cirrosis- provocan un aumento notable de la TGP en plasma, mientras que en el infarto del miocardio se produce un incremento ms marcado de la TGO (captulo 79). Las reacciones de transaminacin permiten canalizar los grupos amino de diferentes aminocidos hacia el cido glutmico, actuando como receptor el cido alfa ceto glutrico; el cido glutmico as obtenido puede resultar desaminado

entonces por la deshidrogenasa glutmico, dado que el nico sistema eficiente de separacin del grupo amino de los aminocidos es la reaccin catalizada por la deshidrogenasa del L-glutinico, donde el efecto neto es la separacin del grnpo amino de distintos aminocidos en forma de amonaco. Algunos autores han denominado transdesaminacin al proceso metablico que combina la actividad de diferentes transaininasas con la de la deshidrogenasa del glutmico.

COOH H,N-C-

COOH C=O
\'

I R

"H,

f
\ v

'

, '
/'

CH2 CH, COOH

Tramaminansa

\i

/'

! .?,
\\1

P NADH
1

r;
8

cido alia ceto glutrico

%

\
/'

Deshidrogenasa del L glutmico

, ,

l!

COOH
C=O

COOH
4

:
?

H , N C--H

l 7H2

, /
, ,

/i

,
\,.

H20

NAD+

7%
COOH

cido glutmico

Estacombinacin resulta niuy eficiente para la separacin de los grupos amino delos aminocidos que no poseen otra va metablica activa en este sentido. Se pone de manifiesto as la importancia melablica general de la deshidrogenasa del glutsmico a que hacamos referencia. Las reacciones estudiadas no deben considerarse como exclusivamente catabiicas, ya que stas permiten, por su reversibilidad, incorporar el amonaco Y obtener aminocidos a partir de los cetocidos correspondientes. lista es Precisamente la etapa final en la sntesis de la mayora de los aminocidos. Debe sealarse,sin embargo, que por razones que sern estudiadas con posterioridad, los organismos superiores son incapaces de sintetizar todos los aniinocidos. La i n c o r ~ O r a ~ delnamonaco, cuando se produce, procede por inversin de la i~ Wcci6n catalizada por la deshidrogenasa del L-glutmico.

El metabolismo de los aminocidos muchas veces incluye la separacin de su grupo carboxilo (como CO,). Este tipo de reaccin es catalizada por descarboxilasas especficas que emplean el fosfato de piridoxal conio cofactor.

La descarboxilacin de los aminocidos da lugar a diferentes aminas, entre las

cualesexistenalgunas quetienen granimportanciametablica,tales el caso delahistamllia. derivada de la histidina; y de la tiramina, derivadade latimina
COOH H,N-C-H

l
l

H H2N-C-H

dcH2
N+N-H
Histidina

JH2 NbN-H
Histamina
CO.

COOH H,N-C-H
I

H H,X-C-H

l OH Tirosina

6
1
OH COOH

Tiramina

a parr de los aminocidos que escapan al proeew a h r t i v o i n d a l . Enocasionesse ha denommado~aminas~alarqueseoboenuipordercarl>oubdn&losamm<rwl06

La~pedacMnco~~1laWeren~dem~doomoiipopptidohacia otm amlliocido u oligopptido aceptor. La enzima m s conocida que calazaeste tipo de reaccin es la gamma glutamil ra~~peptidasa, h-ansfierecido gluimico unido por el que carbxogammadesdeelghitatinhacia disontostiposde aminocidosopequeiosppOd06

CH2 l H N-H

COOH 4WC-H

CH CH, CH,
/ \

CH, CH,

/ \

Leucina

Gamma glutamil leucina

El propio glutatin es sintetizado por procesos similares de transpeptidacin, y las bacterias son capaces de sintetizar pptidos mayores, utilizando este tipo de reacciones que obvian el esquema de sntesis donde se emplean cidos nucleicos como patrones. La transferencia por transpeptidacin de cido glutmico, a travs de su carboxilo gamma, hacia diferentes aminocidos est implicada en el transporte de estos compuestos en distintos rganos, y tiene tambin inters en el metabolismo de los derivados del cidoflico. En el primer caso,el glutmicosetrdere a un aminocido localizado en el medio extracelular y posteriormente el gamma glutamil aminocido es transportado al interior de la clula. En el segundo caso se trata de las cadenas laterales de poligamma glutmico que poseen algunos derivados coenzimticos del cido flico (captulo 19). Otras reacciones metablicas de inters, en las cuales intervienen los aminocidos, son las transferencias de fragmentos monocarbonados: metionina, serina, bistidina, glicina y triptfano, y la transimidinacin: arginina.

La biosntesis de aminocidos consiste en la formacin de estos compuestos a partV de precursores de bajo peso molecular no aminoacdicos. El proceso suele incluir en su etapa final la introduccin de un grupo amino en un cetocido homlogo del aminocido que se sintetiza. Las cadenas carbonadas que dan origen a los aminocidos, se forman en procesos metablicos conocidos, tales como la gluclisis y el ciclo del Krebs; as se originan el cido pirvico, que se utiliza en la sntesis de alanina; el oxalactico, que se utiliza en la sntesis de cido asprtico y otros cetocidos que son utilizados como precursores en la sntesis de ciertos aminocidos. En los organismos superiores, la sntesis de aminocidos tiene limitaciones impuestas por la imposibilidad de sintetizar las cadenas carbonadas de los cetocidos Correspondientes a determinados aminocidos, los cuales, por tanto, no pueden ser obtenidos de esta forma. Estas limitaciones para la sntesis de aminocidos muestran algunas diferenciasentre las dkntas especies. Las plantas y muchos microorganismos son capaces de sintetizar todos los aminocidos. Esta situacin ha conducido a la divisin de los aminocidos en no esenciales, cuando el organismo los sintetiza, y en esenciales,cuando el organismo no los sintetiza y se requieresu aporte mediante los alimentos. Se emplean tambin los trminos de aminocidosdispensables e indispensables para significar el mismo hecho. El cuadro 55.1 contiene los diferentes aminocidos agrupados de acuerdo con estaearaeteristica.
Cnadm 55.1.

Aminocidos esenciales y no esenciales en el ser humano No esenciales

Alanina

Esenciales
mn da ii

lsoleuona Leurina Lisina

Meonina Feniaianina
'Ihnba

Fpaigina Acido asprco

cidoglutmico Ciih Glubmb GLirina Prolina Serina Timsina

Tnptho

vana
-a*

solamente durante el crecimiento, no en el adulto.

El conocimiento acerca del carcter esencial de algunos aminocidos es de gran importancia en nutricin y ser retomado en el captulo 71.

Cataboiismo de aminocidos
Ya hemos sealado que la degradacin de los aminocidos cubre normalmente parte de las necesidades energticas del organismo. El aporte de estos compuestos al gasto energtico se incrementa en diversas situaciones como el ayuno, la administracin de glucocorticoides y otras. Resultara ocioso senalar con prolijidad las rutas degradativas de todos y cada uno de los aminocidos, dado que ellas consisten en secuencias de mltiples etapas diferentes para cada uno de los 20 aminocidos comunes. En lugar de ello, se dedicar la atencin a los aspectos generales de este proceso, y al fmal del captulo se estudiarn las vas metablicas de algunos aminocidos que son de inters particular. El catabolismo de los aminocidos suele iniciarse con la separacin del grupo amino por alguua de las reacciones analimdas anteriormente. A partir de este momento, la cadena carbonada residual sufre transformaciones hasta la obtencin de un compuesto relacionado con las rutas metablicas de glcidos y lpidos, a las cualcs queda incorporado. El destino metablico del amonaco, producto de las desaminaciones, ser considerado en el capi'tnlo siguiente. A pesar de la variedad de estructuras de los aminocidos, sus rutas catablicas convergen en unos pocos intermediarios metablicos que son: cido pirvico, acetoacetil-COA, cido alfa ceto glutrico, succinil COA,cido fumrico y cido oxalactico. Los aminocidos que dan como productos cido pirvico y acetoacetilCOApueden ser convertidos en acetil-COApor reacciones conocidas, y alimentar as el ciclo de Krebs; los dems dan como productos compuestos quesou intermediarios de este ciclo al cual ingresan. Los aminocidos que son convertidos en cido pinvico, cido alfa ceto glutrico, succinil COA,cido fumrico y cido oxalactico, se denominan glucognicos porque su metabolismo est relacionado con el de los glcidos, y sus carbonos constituyentes pueden ser convertidos, al menos parcialmente, en glucosa mediante el proceso de la gluconeognesis. Los aminocidos que originan acetoacetil-COAse denominan cetognicos. Ellos pueden dar origen a cuerpos cetnicos y su metabolismo se relaciona con el de los Ipidos. A continuacin se presentan los diferentes aminocidos agrupados segn el tipo de compuesto intermediario que se obtiene en su catabolismo.

4 0

c=o
CH3 cido pirvico

I 'OH

Glicina Alanina Treonina Serina Cistena Cistina

Aceto acetil coenzima A

Feoilalanina Tirosina Leucina Lisina Triptfano

COOH

c=o
l
CH, CH, l COOH cido alfa cero glutnco

Pi-olina Arginina Glutmico Glutainina Histidina

CH, COOH Succinil coenziina A

COOH

Valina IsoIeucina Metionina

C-H
II

I l

H- C
COOH cido furnii-ico COOH

Fenilalanina Tirosina

c=o

y 4
COOH cido oralactico

Ntese que la fenilalanina y la tirosina rinden acetoacetil-COAy cido fumrico,

Por 10Cual se consideran cetognicosy glucognicos a la vez. La treonina, la leucina, la isokUfinay el iriptfanopueden originar acetil-COA directamente.
adelante, en este captulo, cuando consideremos las vas catablicas de pisunrnaminocidosen particular, podrn verse ejemplos de cmo se efectan estas Qnivemiones.

L ~ ~ o c i d o s c o n s t i t u yunnimportantsimo elemento en la sntesis de diversos e -puestos de gran importancia biolgica; son realmente variadas las biomolculas degrsnsi~GdO metablico que derivan su estructura, al menos en parte, de los smiooPeidrno compuesto^ relacionados con stos (cuadro 55.2). de

Cuadro 55.2.

Algunos compuestos biolgico.^ en cu-va sntesis se utilizan aniinocidos Ejemplos Aminocidos participantes en la sntesis

Tipo de compuesto

Hormonas
Bases purnicas

GLicina
<:lutUmina

cido asprtim

poirinas Componentesdepidos

Grupohemo
Colina

NAD y NADP
Cuenzima A

Detergentes biolgicos Compuestosricos en me+

Tatnmccbto

Glicocolato

cido glutmico
Ciiis

Glicina

Sntesis de fosfoereatina
A continuacin estudiaremos la sntesis de fosfocreatina; la sntesis de otros compuestos nitrogenados se considera en diferentes captulos del texto. Lasntesis de fosfwreatina comienza con la transferencia del grupo amidino de la arginina hacia la glicina. La reaccin es catalizada por la enzima arginina glicina

transamidinasa, los productos son el cido guanidn actico (glicociamina), que el proceso, y la ornitina, que sigue sus propias vas metablicas.

COOH H,N-C-H

I I

COOH H2N-C-H

I I I I

CH2

CH2 CH,

CH2

I -

CH2 I N-H

CH2 NH,
Ornitina

Glicina cido guanidn actico

La enzima arginina glicina transamidinasa est sujeta a un mecanismo de regulacin gentica, por medio del cual la creatina reprime la sntesis de la enzima. En la siguiente reaccin, el cido guanidn actico es metilado y se obtiene la creatina. La S-adenosil metionina (metionina activa) acta como donante del grupo metilo.

COOH
N-C-H

S adenosil metionina S adenosil \ homocistena

COOH

Acido guanidn acetico

Creatina

La fosfocreatinase forma por fmforilacin de la creatinaapartir del ATP; acta la enzima creatina quinasa presente en el msculo y otros tejidos. CH, N C=NH N-C=NH COOH

C-H

I 1

NH2 Creatina

H Fosfocreatina

La fosfocreatina constituye una reserva energtica para el msculo, corazn g otms tejidos,los cuales pueden recuperar ATPpor inversin de la reaccin de la creatn quinasa. 1,afosfocreatina tambin resulta convertida, de forma espontnea e irreversible, en creatinina. CH,
N--

COOH

C=NH H
N

I
I

YH
Creatinina

Fosfocreatina

Aspectos del metabolismo individual de los aminocidos

Por metabolismo individual de los aminocidos entendemos todas las vas, tanto anablicas como catablicas, que un aminocido puede seguir, Aun considerando solamente las vas catablicas, muchos aminocidos tienen ms de una alternativa. En ocasiones, en su metabolismo se presentan vas colaterales y "callejones sin salida", y se originan productos que por no tener uso ulterior son eliminadas, habitualmente, por la orina En ciertaicssos, tales productm son numerosos; el triptfano,por ejemplo, puededar lugar a 9 de tales metabolitos colaterales: cidos quinurnico, qninldico, xantnrnieo, B-liidroxiquinldico,quinolnico, picolnico. antranilico, 5-hidroxiantranilico y el ortoaminofenol. Tambin a modode ejemplo,y por tener interesesespeciales, revisaremos algunac de las vas metablicas de los aminocidosfenilalanina y tirmina, pero antes se tratan los errores congnitos del metabolismo de los aminocidos.

E r r s congnitos del metabolismo de los aminocidos roe

Al ser las vas metablicas de los aminocidos procesos extensos g de muchas etapas, en los cuales intervienen gran cantidad de enzimas, es de esperar la existencia de diversos desrdenes metablicos por deficiencia total o parcial de cualquiera de estas enzimas. Un dficit endmtico cualquiera, en una va metablica de un aminocido, origina la acumulacin del sustrato de la enzima deficiente y an de compuestos precedentes

en la va afectada. Los compuestos acumulados son, por supuesto, el aminocido o alguno de sus metabolitos. Aunque muchos errores congnitos del metabolismo de los aminocidos son i ~ m p a t i b l econ la vida y ocasionan la muerte prematura,otms, en cambio, permiten s la supervivencia del sujeto, pero con diversas manifestacionesmorbosas. A la acumulacin del aminocido o sus metabolitos debe considerarse responsable de los daos metablicos e hsticos en estas enfermedades; no obstante, en muchas ocasiones se desconoce el mecanismo de produccin de los signos y sntomas correspondientes. En unos pocos casos, la no obtencin del producto final de la va es el hecho ms nocivo y el productor de la enfermedad. Si bien cada error congnito de esta rea metablica suele dar manifestaciones -ctersticas, Uama la atencin la frecuencia con que estos errores producen dao al sistema nervioso central, originando retardo mental, alteraciones de la conciencia y del tonomuscular,etc. Esto pudiera obedecer a lagran labilidad del sistema nervioso central en el perodo neonatal. En el cuadro 55.3 se resumen algunas caractersticas de un grupo de errores congnitos del metabolismo de los aminocidos. Actualmente se han descrito ms de 100de estas afecciones, aunque algunas tienen una frecuencia de aparicin muy baja.
(hsaios53.Algunos errores congnitosque afectan el metabolismo de los aminocidos

Denominacin

Enzima deficiente

Consecuencias principales

Enfamedaddela orinadejarabe de Arce

Acidu& metumalnica
Enfermedad de

Descarboxkade
aminocidos

Vn~itui, convulsione Acidosis

metabtio pelagra, retardomental

ramicados Metil malonil-COA muta Dioxigenasa de

tnptfano

Mientras esperamos que los avances de la ingeniera gentica permitan corregir 10sgenes defectuososen estas enfermedades,el tratamiento disponibleen la actualidad es sintomtico y diettico. Una dieta exenta del aminocido cuya va se encuentra B f a d a o muy pobre en l, suele aliviar o impedir la aparicin de las manifestaciones W a ,sobre todo si el tratamiento se inicia bien temprano en la vida, antes de que se ~rwh.can daos orgnicos irreversibles. De aqu la gran importancia que tiene el piecoz de estas alteraciones.

A continuacin se trata el metabolismo de los aminocidos fe~lalanina tirosina. y En la figura 55.3 se muestran las posibilidades metablicas que tienen los y aminocidosfenala~na tirosina. Puede natame que son mltiples lasvas que tales aminocidos pueden seguir.

3- Desaminacin

2- Sntesis de melanina

5- Sntesis de
protenas

Fenilalanina ---' Tirosina

1- Va catablica

5- Sntesis de
protenas

4 - Descarboxilacin Rutas independientes de la fenilalanina

6- Sntesis de catecolaminas

7- Sntesis de tiroxina

Fig. 55.3. Representacin esquemtica de las alternativas metablicas de las aminaieidos fenilalanina y tirosina. Aunque muchas de las vias metablicas son comunes a ambos aminoeidos, la fenilalanina pasee sus rutas independientes.

8- Formacin de tiramina

Rutas comunes de la fenilalanina y la tirosina La intensidad de funcionamiento de cada una de estas vas estar en dewndencia de las necesidades metablicas y del tipo de tejido donde se produzcan. Las vas numeradas 3 y 4 resultan vas independientes de la fenilalanina y noson compartidas por la tirosina. El resto de las vas son comunes para ambos aminocidos, y de hecho la fenilalanina ingresa en ellas mediante su conversin inicial en tirosina. Las vas 6 y 7 representan la sntesis de hormonas apartir de estos aminocidos. Estas vas slo se producen en tejidos especializados como el tiroideo y la mdula suprarrenal Desde luego, tanto la fenilala~na como la tirosina intervienen como precursores en la sntesis de protenas del organismo. La. va 2, sntesis de melanina, ocurre en los melanocitos de la piel y en tejidos especializados del ojo. La va degradativa 1es la mta ms importante desde el punto de vista cuantitativo y est presente en varios tejidos,pem sobre todo en elhgado. Es una mta glucogentica y cetogentica a la vez. A continuacin haremos un estudio ms detallado de los procesos 1,2,3 y 4.

l H,N-C-H l

COOH

COOH H,N-C-H

Va catablica de la fenilalanina y la Wa n i

m
Fenilalanina Tirosina

La fenalanina inicia su degradacin mediante su conversin en timina, reaccin catalizada por la enzima fenilalanina hidroxilasa.

La reaccin requiere NADPH, pero ste interviene a travs del compuesto tetrahidrobiopterina, que es un cofactor relacionado con el cido flico.

Fe~iaianina

CH-CH, I OH Tettahidrobiopterina

NADPLi

O Dihidrobiopterina

La reaccin es irreversible, lo cual explica por qu se puede obtener tirosina a oartirde la fenilalanina. w r o no a la inversa. , Tantolamsinaobtenida por hidmxacin de lafenilalanina, wmola que proviene de la dieta o del eatabolismode protenas hsticas, continan su proceso degradativo mediante su transaminacin con el cido alfa ceto glutrico.

HJ-c-H

c=o

OH Tisina

COOH cido alfa ceto glutnco COOH

C=O

H2 -C-H CH2 CH2 COOH Acido glutmico

l l

cido para-hidroxife~lpinvico E h i d o ~hidroxifenii~irvico experimenta una segundahidmxacincatazada por la enzima P-hidroxifeniipinviwoxidasa, la cual contiene cobre y requiere cido

aserbico(vitamina C) parasu nomial funaonamiento.En la mccin se produce, adems, un reordenamiento molecularde los grupos hidroxiloy una descarboxilacin oxidativa.

C=O CH,

CO.

COOH

cido p-hidroxifenilpi~vico

cido 2,5- dihidroxifenilactico (cido ~homogentsico)

~

\~

El cidohomogentinco experimentala apertura del anloaromticopor la accindela ~ h o m o g e n t s i m o f i ~ l a c u a l i . e q u i e ~ i o n e glutalinrednado,ademsde02. sF~y

C-H C-H C=O

I

cido homogentsico

C=O CH* I COOH

cido maleilacetilactico

El maleilacetilactico se isomeriza a fumaroilacetilactico y ste es escindido en cido acetilacticoy cido fumrico.

FOOH C-H
II

.I
CH2 I C=O

cido fumrico

CH2 l COOH
cido maleilacetilactico

COOH
cido fumaroilacetilactico

c=o 1
1

CH2 l COOH
cido acetilactico

Unodeios~puestosonginadosenesta\aelcido phidroxenpnvico,puededar a varios compuestas de %lIejnsin sada". Por m d d n origina el phidmxifenii &fica,aiya nica posibilidad metablicaes rrincoipom ala va principal por oxidacin. La dgcarboxacinoxidativa del phidmxenpirvim da lugar al phidroxenilaclim, eompnestosinfutnmqueseconjugacon la glutamina y seexcretapor la orina COOH COOH

OH
hcido p-bidroxifenil lctico

cido p-hidroxifenilacitico

El ado aceolaciicoobtenido entmnca con el metabolismode los cuerposfetnicos y loslpidos(carcter cetognico). El cidofumricose metaboliza por la vadel ciclo de b b s y se puede convertir, eventualmente, en glucosa (carcter glucognico).Ambos compuestas pueden contribuir a los requerimientosenergticos del organismo. se convierte En la va numerada 2, que conduce a la sntesisde m e , a a

en 3,4-dihidmxifenilslanina(DOPA).

Tirosina

3,4 - dihidroxifenilalanina ( DOPA)

ElcompuestoDOPA,despu&dedarlugaraaipunosintemedi&: dopacmmo; 5,6 dihidroxihdol y 5,6 dihidroxiquinona,se polimeriza y origina el pigmento melanina. ~aforma06ndeoi-ammapordescarboxilacindela~es~dndemuy~ ~ ~ 0 I i a n ccuaniativa Sin embargo, la tira mi^ pawe la capacidad de elevar la presin ia

Tirosina

Las vas independientes de la fenalanina comprenden su descarboxilacin,para formar fenileolamina, y sutransaminacin,paraoriginarfenilpinivicoy susderivados.

Fenilalanina

Feniletilamina

HO-c-H
I

cido alfacecido rrlutmico cido fenil lctico

COOH

Fenitalanina

cido fenilpirvico

cido fenilactico

El cido fenilactieoes conjugadocon la glutaminay excretado por laorina como fenacetilgluamina.

H-C-H

7"""
H-C-H 1 C = O COOH

cido fenilactico

6
8

/ N 7 CHzH y&
oec\NH*
1

H,N-

F O H 7-H

Fenilacetilglutamina

Todas estas vas de la fenilalaninason de poca importancia,pero su significacin en los casos en que existan bloqueos metabcos de las vas principales. Rasten varios errores congnitos enel metabolismo de losaminocidosfenilalanina y W i n a E l ms frecuentee importante desdeel puntode vista mdico es la fenilcetonufia u oligofreniafenilpirviea,que se produce por un dficit de la enzima fenilalanina hidroxilasa. Esta enfermedadseestudiacon mayor detalle en el captulo76. Otros errores congnitos de estas vas metablicas son el albinismo -por deficienfia de tirosinasa-, la alcaptonuria -por deficiencia de la homogentsico oxidasa- y la omsinosis-por ausencia de la transaminasade tirosina.

m aminodcidos constituyen la forma fnndamental de ingreso del nitrgeno met&61ieamente i al organismo, y su m e t a b o h o tiene una importancia eenM & h d e todoel metabolismo de compuestos nitmgenados de w o pew moleeular.
Todos los aminodados del organismo se encuentran formando parte del pool de estos compuestos. Rste pool permanece en un estado de equilibrio dimmico M d d o por los procesos que le aportan y le sustraen amindados. Aportan aminocidos al pool la absorcin inteslinal, el catabolismo de protenas Wa y la sntesis de aminoeidos; mientras que la sntesis de protenas, la cs &tesis de otmB compuestos nitrogenados y el c a t a b o h o sustraen aminoficidos del pod Todos estos procesos se encuentran relacionados a travs del pool, de a modo t lque los cambiosen la intensidad de cada uno de ello8 puede tener repemidn en los d d . Las reacciones metablicas, que son wmunes a iodos los amiaodcidos o a un nmero elevado de ellos, o que representan etapas de elevada Si@caun en el metabolismode estos wmpuestos, constituyenel metabolismogeneral de los amindddos. La desaminacin oxidativa es una reaccin metahlica general de los amhkidosque consisteen la separacin delgrupo amino, en forma de amonaco, qoedando la cadena carbonada en forma del cetodcido homlogo del aminodcido deSSminado. Aunque existen otras enzimas capaces de desaminar a los amindeidos, la de mayor importancia metablica, por su distribucin y actividad, es la deshidrogenasadel glutmico, que cataliza la desaminacinoxidativa del glutmie~ ulihndo N O 6 NADE"como cofador de do-reduccin. An cuando la e&espeelficapara el aminodado glutmico, mediante su combinacincon otras r e a e d ~(transaminadones), ella participa en la separacin del grupo amino de ~t~ la =yora de los aminodudos. Algunos aminodados, como la serina, pueden ser deseminados en reaeciones no oxidativas en las cuales partiapa el fosfato de pirid04ai como wfaetor. Las reacciones de tramaminacin consisten en la transferencia de grupos -; 0 las mBsdifundidas son aqu6as en Las que el grupo amino de un aminodado es h.anSfdd0 a un &tosado, de modo que se forman un nuevo amndcido y un eetodddo. EstaF reacciones son cataiizadas por eminm transaminasas que u t k a n el f&to de piridoxai como wfactor. El aUmento de la concentracin en la sangre de las transarniassss, cuando se ha PMucid0 dao celular en algunos tejidos, ha hecho de su determioaan un V d h o en el diagn6stico y seguimiento evolutivo de algunss enfermeda-

den.

reacciones de transaminacin permiten canalizar los grupos amino de dKmtea amioocidos hacia el dado glutmico, compuesto en el d este grupo Pe * ser separado en forma de amonaco por accin de la deshidmgenasa del

glui4mico. Por ello se arma que esta ima enzima tiene efectos generales en la desaminaci6n de los aminodcidos. Esta accin combinada de diferentes trp y la desbidrogenasadel glnmico, ha sido denominada mecanismo de transdesaminaei6n. Mediante las reacciones de descarboxilaci6n, el grupo carboxiio de los aminodudas es separado en forma de CO,. Las enzimas desearboxiiasas, que catslizan estas reacciones, iambin uizan al f d a t o de plridoxai como cohctor. La descarboxilaci6n de los aminodcidos origina diferentes aminas (aminas bigenas),algunasdelaseualestienengrsnimporteneia,taleseleasodelabistsmiiu.~ laoraminayotras. La biapntesis de aminodcidos consiste en la sntesis de estos compuestos a parr de premmores de bajo peso molecuiar no aminoacdim. Por lo comn, en la sntesis de los aminodados se forman las cadenas carbonadascorrespondientes en procesos metablim, tales como la glnc6lisis y el ciclo de Krebs; habiiuahendas y converte, estas cadenas carbonadas en forma de eetoados son t tidas en los aminocidos correspondientes. Los amindcidos se elasican en no esenciales, niando pueden ser sintetizadospor el organismo, y esenciales, cuando esta sntesis no es wsible. El catabolism> de los aminocidos tiene una funci6n eminentemente energtic y en condiciones normales aporta airededor del U)% de las necesidades ral6ria m,valor que puede incrementame de forma considerable durante el ayuno y en otras situacione3. Aunque pr4ccamente cada aminocido tiene su propia va eatabca de a mloples etapas, l estrategia general de este catabolismo es la separaci6n del grupo amino del aminodeido y la conversin de la cadena carbonada en un metabolito de las vas degradativasde gicidos o ipidos, a las cuales queda de este modo incorporado. Los principales intermediarios catablicos de los aminocidos son: el cido piriivico, la acetoacet-COA,el dcido alfs ceto glut$rico, la sueeinil COA,el dado fumanco y el cido oxaiaeoco. Se dice que los aminocidos son glumgnim o eetognicos, segn sus cadenas carbonadas puedan ser convertidas total o parcialmente en glcidos o Ipidos. Los aminocidos son precursores de numerosos compuestos de gran importancia biolgica. Un ejemplo de ello es la sntesis de fdocreana, compuesto que rwresenta una forma de almacenamiento de enerda en el m ~ o . Las vias metablicas particulares de los diferentes aminocidos son muy variadas.En e l b intervienen numerosas enzimas, y esto trae como consenienda que sean relativamente numerosos los ermres congnitos del metabolismo que encontramos en el metabolismo de los aminoiicidos. Llama la atenci6n que muchas de estas alteraciones produm afectaciones del sistema nervioso central, las cuales se m e s t a n por retardo mental, dteracipnes de la conciencia y otras. Un buen ejemplo de esta multiplicidad de vas metablim lo constituye el metabolismo de los aminoaeidos fenalanina y timsina Estos aminocidos pueden dar origen a compuestos hormonales y pigmentos, participar en la sntesis de protenas o ser degradados con fines energticos. En el metabolismo de estos aminocidos se han deserito varios errores congnitos del metabdismo, de los que el m& s o b d e n t e , por su frefuencia y sus consecuencias, es la feneetonuria u oligofrenia fenilpirvica, resultado de un dficit de la enzima fenilalanina hidroxiiasa.

Ejercicios
1.Exponga el concepto poolde aminocidos. 2. Explique los procesos que aportan aminocidos al pool de estos compuestosY 10s que los sustraen de l.

3. ;Cmo repercutir una disminucin de la absorcin intestinal de aminocidos en el resto de los procesos vinculados con el poolde estos compuestos? 4. Justifique la importancia general que tiene en el metabolismo de los aminocidos la enzima deshidrogenasa del glutmico. 5. ;Por qu la deshidrogenasa del glutmico tiene importancia desde el punto de vista de la obtencin de energa a partir de los aminocidos? 6. Mencione las diferentes reacciones del metabolismo de los aminocidos en las males interviene el cofactorfosfatode piridoxal. 7.Haga un esquema general de una reaccin de transaminacin. a ;De qu forma pueden ser agrupadas las distintas transaminasas y cul es el fundamento de esta agmpacin? 9. ; C d es la importanciaclnica de la determinacin de transaminasasen sangre? 10. ; qu se denomina aminas bigenas y cmo se forman estos compuestos? A 1 .;Cul es el mecanismo general de sntesis de aminocidos y qu limitaciones tiene 1 este procesoen los organismossuperiores? 12. ;Cul es la importancia cuantitativa del catabolismo de los aminocidos en la satisfaccin de las necesidades energticas del organismo en condiciones normales? 13. ;Cules son los principales intermediarios obtenidos en el catabolismo de los aminocidos? 14. ;A qu obedecen las denominaciones de aminocidos glucognicos y cetognicos? 15.Mencione los aminocidos que intervienen en la sntesis de fosfocreatina. 16. ;Cmo justificara la multiplicidad de errores congnitos del metabolismo que afectan el metabolismo de los aminocidos? 17. icules son los mecanismos patognicos bsicos de los errores congnitos del metabolismo de los aminocidos? 1%;Culesson las alternativasmetablicasde los aminocidosfeniiaianina y rosina? 19. ;Cul es el error congnito del metabolismo ms frecuente en el metabolismo de los aminocidos fenilalanina y tirosina, y cul es la enzima deficitaria?Proponga un tratamiento diettico para esta enfermedad.

El metabolismo de los aminocidosy de otros compuestos nitrogenados de bajo peso molecular origina cantidades apreciables de amonaco (NH,). Este compuesto puede ser reincorporado al metabolismo mediante la sntesis de aminocidos no esenciales y ohos procesos, pero como las cantidades de ste que se producen superan lasposibidades de utilizacin por estas vas, una parte considerabledel amonaco se emina del organismo por excrecin urinaria. El amonaco es una sustancia txica cuyo aumento en la sangre y los tejidos puede causar lesiones, especialmente en el tejido nervioso, de ah la importancia de una eliminacin eficaz. Existen 2 mecanismos en el organismo del ser humano para la eliminacin del amonaco: la excrecin renal y la sntesis y excrecin de urea. Enestecaptulose considerarn estos 2 mecanismos,en particular el segundo, que constituye la forma fundamental de eliminacin del amonaco en el ser humano.

Excreei6n renal de amonaeo

El rin es capaz de eliminar amonaco por la orina en forma de sales de amono. En este rgano, el amonacose combina con iones H*formando amonio, quese excreta Combinado con diferentes aniones (Fig. 56.1). Como laexcrecin urinaria de sales de amonio consume H*, estas reacciones estn en dependencia delos mecanismos renales de regulacin del pH sanguneo, lo cual ~ P o a e u Lnite a la$cantidadesde amonaco uue meden ser eliminadaspor esta va. n - . Aunque el amonaco excretado en la orina se produce a partir del que se origina en reacciones metablicas del rin, este proceso puede contribuir a la eliminacin del amonaco que se produce en otros rganos mediante un mecanismo de transporte en el cual interviene el amiuocido glutamina.

HC
Aminocidos - - - NH,& - - ,

X-

N& H :

X-NH:

Excrecin por la orina

Fig. 56.1. Mecanismo renal de excrecin del amoniaco. El amonaco proveniente de las desaminacione se une a protones (H*) formando iones amonio, que san excretadas junto a diferentes aniones.

La glutamina puede ser sintetizada en los tejidos extrarrenales a parr del cido glutmico y el amonaco. La reaccin es catalizada por la enzima glutamina sintetasa.

ATP

ADP + Pi
A

H,N-C-H
1
7H2 CH, COOH cido glutmico

NH,

j j ,
Glutamina sintetasa (tejidos extrarrenales)

H~N-6-H
I
FH2 YH2

Glutamina La glntamina sintetasa,al menos en bacterias, est sujeta a complejos mecanismos regulatorios, tanto alostricos como por modificacin covalente. Esta enzima est formada por 12subunidades idnticas de 50 000 D de neso molecular. Cadasnhunidad ~~- ~ ~ - posee sitiosde unin para 8 inhibidoresalostricos: AMP, triptfano, carbamilfosfato, histidina, CTP, glucosamina-6-fosfato,glicina y alanina. Cada inhibidor produce un decrecimiento parcial de la actividad de la enzima, pero si estn todos presentes dicha actividad se reduce prktkamente a cero. La regulacin covalente se efecta por adenilacin del residuo de rosina de la posicin 397. La adenilacin incrementa la sensibilidad de la enzima a los inhibidores alostricos. La reaccin consume ATP y requiere iones magnesio. La glutamina es captada desde la sangre por el rin, donde es hidrolizada por la enzima glutaminasa.
~~~~ ~~~

CH, I
CH2

. Glutaminasa (rin)

CHz CH,

I 1

+ "H,

I C

';<Hz

C
04

OH

Glutamina

cido glutmico

De esta manera, el amonacoformadoen tejidos extrarrenales puede ser eliminado por el rin en forma de sales de amonio. Aproximadamente e1 60 % de las sales de amonio que aparecen en la orina se originan en el rin por hidrlisis de la glutamina proveniente de tejidos extrarrenales.

Sntesis y excrecin de urea

La sntesis y excrecin de urea es el mecanismo ms eficaz de que dispone el organismo para la eliminacin del amonaco. Su funcionamientono depende de las variaciones en el equilibrio cido-bsico que impone limitaciones al proceso de la excrecin renal del amonaco en forma de sales de amonio.

Losanimales que excretan urea como principal forma de eliminacih del aiiioniaa~ &enomnan ureotlicos. Son ureotlicosel hombre y la mayor F e delosveriebrados terrestres.Muchos peces y otros animales acuticosexcretan el amonacodirectamente asu entorno y se les llama amonotlicos. Los pjaros y reptiles terrestres eliminan el cido rico como compuesto final de excrecin del nitrgeno amoniacal y son &&lados como uricotlicos. Como se comprender,estas variaciones se relacionan con los equipos enzimticos que posee cada organismo, los cuales se han establecido a travs del desarrollo filogentico como un mecanismo de adaptacin a los mespondientes nichos ecolgicos. La sntesis de urea se lleva a cabo en el hgado y desde este rgano alcanza el rin, donde resulta eliminada por medio de la orina. Por esta va un ser humano normal elimina diariamenteentre 25 y 30 g de urea; este compuesto representa el 90 % de las sustancias nitrogenadas urinarias; en contraste, la excrecin de amonio slo constituye e1 3 % del nitrgeno urinario. La urea, a diferencia del amonaco, es un compuesto de muy baja toxicidad. La principal fuente de amonacoparalasntesisde ureaes el nitrgeno de los aminocidos, de ah que su excrecin experimente variaciones en dependencia de la ingestin de protenas del sujeto. Mediante L ureognesis 2 molculas de amonaco y una de COZ convertidas a son en urea; sin embargo, el proceso es mucho ms complejo de lo que pudiera pensarse al mnsiderar esta formulacin global.

COZ

2 NH,

d - r -

--

O=C

/ NH2

2 H20

'NH2
Urea

Los detallesdel proceso cclicode la ureognesis fueron aclarados, en sns aspectos ms generales, por Hans A. Krebs y Kurt Henseleif, en los aos 30, por lo cual a este proceso metablico se le denomina tambin ciclo de Krebs-Henseleit.

Secm?ncade reacciones de la ureognesis

La biosntesis de la urea comienza con la formacin del compuesto carbamil fosfab, reaccin en la cual el NH, se une al CO, consumiendo 2 enlaces ricos en energa del ATP.
2 ATP 2 ADP + Pi

NH, +

co*
Carbamil fosfato sintetasa 1(amonaco)

H,N-C-@ Carbamil fosfato

Laemimacarbamil fosfatosintetaya 1, que participa en la ureognesis, emplea

NH,P m la formacin del carhamil fosfato!tiene lwaliracin mitocondrial. Existe

O h m b a m fosfato sintetasa,~a que u U, a la giutamina como donante del gnipo a ~ h g e n a d y cuya l d i z a c i n es en el citosol. ~ s t enzima interviene en la sntesis o *enu&tidos y ser considerada en el captulo siguiente. La en7hacarbamil osfatosintetasa1 (amonau)) es activada alostricamentepor eldcido N-a~etil~lutmico, compuesto que se forma a partir de acetil-COAY cido

glutmico por accin de la enzima acetilglutmico sintetasa. La sntesis de N-acetilgluimicoes inhibida por la arginina, la que se forma en las etapas finales del ciclo ureognico. De este modo,la argininaejerce un efecto depresor sobre laintensidad de sntesis de urea.
0 cx

o
SCoA CoASH O COOH

LH,-

Acetil - COA

,H-(: 3

, I N-C-H

1 H2N-C-H I
1

COOH

Acetil glutmico sintetasa

'

l
1

CH, CH2 COOH cido N acetilglutmico

CH2 CH, COOH cido glutmico

En la siguiente reaccin del ciclo se produce citnilina a partir del carbamil fosfato y del aminocido orniiina. COOH Carbamil fosfato COOH H,N-C-H Pi H2N-C-H

\
Omitina transcarbamilasa

f
b

cH2
I

I
I

CH2

, "-

c%
NH2
l

l I

NH,
Omitina Laenzimaornitina transcarbamilasaseloealizatambin en la matrizmitocondrial. El resto de las reacciones del ciclo tienen lugar en el citosol, por lo cual la citrulina formada abandona la mitocondria, sin embargo, la elevada eficiencia delciclo de la urea sugiere que la citmlina, al abandonar la mitocondria, no se diluye en el citosol, sino que pasa directamente al sitio activo de la siguiente enzima del prnceso. Este tipo a de canalizacin (captulo 18)parece repetirse en las siguientes reacciones de modo tl que slo la urea, como pmducto final, resulta liberada al citosol. Se trata de un notable ejemplo del principio de mxima eficiencia. La siguiente reaccin comiste en la incorporacindel segundo gmpo nitrogenado alimentador del ciclo. Este gmpo se incorpora a partir del cido asprtico mediante la accin dela enzima arginino succnico sintetasa, que une al asprtico con la citrulioa formada en la reaccin anterioqcon lo que se obtiene el cido arginino succnico.

Aunque toda la molcula de cido asprticn resulta unida en esta reaccin, slo su g a p amino quedar definitivamente incorporado.

COOH I H,N-C-H

1 CH, 1 I I 1

COOH 1 H, -C-H

COOH

1
+

AT<"p:H,N-7-H
Arginino succnico sintetasa

CH2 CH, N-H C=O NHz

Ciulina

CH2 I COOH
cido aspnico

CH, CH, CH2 N-H COOH c -: -c-H I I

I 1

NH; H CH,
COOH
cido arginino succnico

11

Esta reaccin tambin requiere aporte energtico; en este caso se consume el equivalente de 2 enlaces ricos en energa, pues el pirofosfato liberado resulta hidrolizado por pirofosfatasas, lo cual tiene un efecto impulsor sobre la totalidad de la secuencia de reacciones. Se ha postulado que la reaccin transcurre mediante la formacin de un compuesto intermediario: la adenil citmlina. A continuacin, el cido arginino succnicoes escindido por la enzima arginino succinasa -argiNnosuccnicoliasa- dando arginina y cido fumrico.

COOH H2N-C-H

COOH C-H
11

I
I

l CH2 I CH2 1 I
COOH

H-C

COOH cido fumnco COOH H,N-C-H CH2 I CH2 l CH2 N-H C-\H, II NH
Arginina

CH2 N-H

I $ C-N--C-H 1

I
1

l hHI ) CH, I

COOH

&ido arginino succlnico

La formacin de cido fumrico en esta reaccin posibilita el establecimientode '"'meeanismodeaporte mnnuode grupos amino al ciclo, dado que el cidofumnco,

mediante reacciones correspondientes a la secuencia del ciclo de Krebs, puede ser convertido en cido oxalactico, el cual, por transaminacin, origina cido asprtico que puede reingresar en la secuencia ureognica. Este vnculo entre el ciclo de la ureognesisy el ciclo del cido ctrico ha originadqen tonode bromaentre bioqhicos, el trmino ingls de Krebs bicycle, Literalmente la "bicicleta de Krebs". Secuencia del ciclo de Krebs

I
H-C

COOH

C-H
II

H20

COOH
cido fumnco

La siguienteenzima que participa en el proceso es la arginasa, presente slo en el hgado y con una actividad muy elevada. Esta enzima es caracterstica de los animales ureotlieos y estcompuesta por 4 subunidadescon un peso molecular de 120000 D. Ella hidroliza la arginina liberando urea y regenerndose la ornitina, que queda con posibilidad de reiniciar el ciclo.

COOH

H,N-C-H
I
'iH2

<iH2

N-H F;-NH NH Arginina

Para recomenzar las reacciones del ciclo, la ornitina debe pasar del citosol a la matriz mitocondrial, donde puede reaccionar nuevamente con el carbamil fosfato.

.
, .

,Ho-A-H I

cooH

NAD+

f ,

NADH

CH2 l COOH

cido mlico

COOH cido oxalactico

l c=o l CH2 I

cooH

'

H2N-

I C-H I

H,X- C-H R

CH2

COOH cido asprtico

COOH C =o

I l

lOOH

H,N-6-H . l
<iH2

Arginasa

y2 <iH2 NH2

Omitina

Urea

La sntesis de una molcula de nrea consume 4 enlaces ricos en energa, 2 en la del carbamil fosfato y otros 2 en la formacin del cido arginino succnico. Este gasto energtico constituye el costo metablico de la conversin del txico amonaco en urea. En el esquema general de la ureognesis de la figura 56.2 se observa cmo los g,qos amino de todos los aminocidos pueden ingresar en el ciclo y ser convertidos en ~ r e a

NAD+

N ADH

Deshidrogenasa del glutmico Ceto6cidos ceto glutrico

Otras desaminaciones Aminocidos NH, P Aminas

2 ADP+ Pi

Ar inina

Citmlina

l
arginino succnico

fumico

/ A Cetocidos

Fig. 56.2. Resumen de las reacciones del ciclo de la urca. Origen del NH, y vnculo can el ciclo de Krebs.

El principal sistema generador de NH, para la sntesis de carbamil fosfato es la enzima deshidrogenasa del glutmico, la cual, tal como se analiz en el captulo precedente, libera amonaco a partir del glutmico con formacin de cido alfa ceto @t8nW.EsteIOmo compuesto puedeincorporargrupos amino de otros aminocidos mediante las reacciones de transaminacin.lo aue regenera el cido glutmico canali, zaIheStos grupos amino hacia el ciclo de la urea -mecanismode transdesaminacin. khi6nelingrrsodel grupo amino del cido asprtico puede cnmpliresta funcin general, tal como se vio con anterioridad. Las pequeas cantidades de amonaco, formadas por otras reacciones de desaminacin,ingresan al ciclo mediante la formacin de carbamil fosfato. Lo mismo s u d e con el amonaco que se produce por accin de las bacterias sobre el contenido del intestino grueso, el cual alcanza el hgado a travs de la circulacin portal. En el caso de los tejidos extrahepticos, el amonaco que se genera en ellos es transportado hacia el hgado; en ciertos casos, como el del cerebro, el transporte est a Eargo de la glutamina, por medio de un mecanismo similar al que se trat cuando se a l a e x ~ r e e i renal directa del amonaco. Otros tejidos, fundamentalmenteel n ualizan la alanina como principal transportador de grupos amino hacia el hgado. Comoseseal,el control a cono pluodc la actividad ureugnica seefecta por medio de laenzima carhamil fosfato sintetasa 1.I.a regulacih a ms largo plam s r -mediantecanhimen la intemidad de sntesis de las enzimaidel ciclode la urca

. -

Metabolismo intamedlac-io y w regulacin

957

y de la sntesis de la propia carbamil fosfatosintetasa 1. La sntesis de estas ennmas se incrementa cuando se consumen dietas muy ricas en protenas, lo que impone un cataholismo acelerado de aminocidosy mayor produccin de amonaco. Lo mismo ocurre en el ayuno prolongado, donde se utilizan aminocidos provenientes del cataholismo de protenas musculares para obtener energa (captulo 61). Las dietas con bajo contenidode protenas ocasionan una marcada disminucin de la concentracin de las enzimas que participan en la sntesis de urea. El destino final de la urea es su excrecin a travs de la orina, por lo cual este compuesto,una vez sintetizado en el hgado, alcanza el rin por va sangunea.

Alteraciones metablicas del ciclo de la urea

Las enfermedades que ocasionan lesiones hepticas extensas comprometen las fncionesdel hgado,entre ellas la shtesisde urea La principalconsecuencia metahlica de esta situacin es la elevacin a niveles txicos del amonaco, lo cual conduce a alteraciones serias del funcionamiento del sistema nervioso central debido a la alta sensibilidad de este tejido frente al amonaco. El cuadroclnicm que sepmducese denomina encefalopataheptica y ser considerado con mayor detalle en el captulo 75. Se han descritoalgunas enfermedadeshereditariascausadas por la deficiencia de enzimas que participan en la sntesis de urea. Este tipo de errores congnitos del metabolismo son muy poco frecuentes y sus principales manifestaciones son: alteracionesneumlgicas como el retraso mental, estupor,convulsionesy espasticidad, entre otras. Es notoria la intoleranciaa la ingestin de protenas, lo cual suele producir vmitos y el individuo afectado puede caer, incluso, en estado de coma. Comnmente, en la sangre hay aumento de las concentraciones de amonacoy de algunos de los metabotos del ciclo de laurea, en dependenciade la enzima deficiente. En el cuadro seofrece una relacin delos principalesemmcongnitosdel metabolismo de la urea, se indican la enzima deficiente y las principales manifestacionesclnicas.
Coadro.Errores congnitos delmetabolismo en la sntesis de urea

Enzima deficiente
Carbam fosfato
sintema

Denominacin

Cuadro clnico Daos neurolgicos, muerte p m

IFiperam~Remia

opon
Argininosnccnico sintefasa Arginino succirisa

Vmitos,convulsiones, coma

Retardopsim motor, cond~iones Retardomenial,

bastom neuru

Igicos

En el tratamiento de estas enfermedades, adems de las medidas de carcter sintomtico, debe reducirse al mnimo la ingestin de protenas. La utilizacin de una mezcla de cetocidos ha demostrado alguna eficacia en el control de la amonemia. No obstante la baja toxicidad de la urea, en ciertas afecciones renales, su excrecin resulta alterada y se producen grandes elevaciones en su concentracin

en sangre (uremia) y en los tejidos, lo que llega a ocasionar diversos grados de

afectacin orgnica y funcional. Las principales medidas teraputicas en estos casos son la dilisis peridica del plasma para eliminar el exceso de urea, o bien el trasplante renal.

e 6 1 1de o h compuestos nitrogenados

Adems de la urea y de las sales de amonio, la orina contiene gran variedad de nitrogenados de excrecin,si bien su cantidad absoluta es muy reducida en comparacin con la excrecin de urea. Entre estos compuestos nitrogenados merece destacarse el cido rico, que se nri@naen el catabolismo de los nucletidos purnicos (captulo 57); los pigmentos bfiares derivados de la bilirmbina, que a su vez se forma en el catabolismo de los ~ p ohemo (captulo 58);y la creatinina, que proviene del metabolismo muscular de s la fosfocreatina,una forma de reserva energtica en el msculo (captulo66). En condiciones normales, la orina contiene solamente trazas de protenas y de algunos aminocidos. Las cantidades y patrones de excrecin urinaria de compuestos nitrogenados se modican en distintas sitnaciones anormales, por lo cual su estudio puede resultar til en el diagnstico dediferentesenfermedadesy en la evaluacin del estado metablico del organismoaun en individuos sanos.

Resumen
El metabolismo de los amindados y de otros compuestos ntrogenados de bajo peso moleeular produce NIi,, que es una sustancia txica, particularmente para el sisema nervioso central. El organismo dispone de mecanismos para la eliminacin de e t sustancia, y los principales son la e x d 6 n renal de sales de sa amonin y la &tesis de nrea, especiaimente esta ltima El rtn puede eliminar amonaco en forma de sales de amonio. Este procesa fa capaz de eliminar el amonaco originado, no 5610 en el propio rin, sno tambihelque proviene de otros tejidos, para lo que es de trascendental importancia el hwporte de amonaco a travs de la sangre,mediante la sntesise hidrsis de la glotDminaE t mecanismo de eliminacin del amonaco se relaaona con los p m se SOs Kmdes de conlml del equilibrio 4cido-b4sico, por lo cual resulta limitado. En los animales ureo6Li~s. sntesis v e x d 6 n de urea es el m d m o la eficiente para la eliminacin del amonaco. La sntesis de ureri se Ueva a cabo en el hlgado, donde su formaan equivale a la unin de 2 molcuias de NH, y una de COZ,que resultan asi eminadas. La &tesis de u- es un proceso de cariider uelico en el que diferentes f amino4ddos tienen en paapel ~ataticoa v o d e n d o las transformaciones sncesi. V a s que se producen. En su etapa 5 a l se origina la arginina,que al hidrob r a la molnua de urea va fonnada. -El amonaco de cualquier origen se iocorpora al cido a travs de la reaccin hMddedntgis de carbam fasfato; la maai6n de la deshidrogenasa del glutsmico e a l a ~ ~ d pproveedora de este amonaco. Otro grnpo aminose incorpora al cid0 Pl medio del 4dd0 en la &tesis del deido arginllio suerhiim En ambos moeanigmos de t aqegumn le posibilidad de inaupomd6n del0 proveniente de diferentes amino4cidm al cid0 de la urea Las eniemedades hep4tieas que traaseurrencon dao celular extenso, pueden alteraciones de la shtesLF de urea por la dismhnd6n de la capaddad de Esta siiuacin provoca incremento de la concentracinde amonaco en la Y suele producir alteraciones del sistema nervioso central.

.-

"

lhnbin se han descrito enfermedades ocasionadas por defkiendas de las enzimas de la ureog6nesis. En esim errores mng6nitos del meiabolismo son mmunes las alteraciones nenm16giras y la intolerancia a la ingesti6n de protenas. Adems de la urea y Las salea de amonio, por la orina se exeretan,en pequea6 cantidades, algunos otros compuestos nitrogenados como el &cid0rico, los pigmentos blliares y la ereatinina. Normalmente, la orina 8610 contiene trazas de protenas y de algunas aminocidos. El eaiudio de la exereci6n urinaria de oompuestos nitrogemdas resuiia de utilidad en el diagnstim de algunas enfermedades y en la valoracin del &do metPb6lico en individuos sanas.

1. ;Cules son los mecanismos fundamentales de eliminacin del amonaco en el organismo? 2. iExplique por qu la eliminacin de amonaco a travs de la excrecin renal directa es limitada? 3. Enumere los intermediarios del ciclo de la urea. 4. ;Cul es el gasto energtico de L sntesis de urea y en cules etapas se produce a ste? 5. Proponga 2 mecanismos para laincorporacin del nitrgeno del grupo amino del cido glntmico a la sntesisde urea. 6. iCales son las caractersticasgenereles de las enfermedades que se desarrollan con alteraciones de la sntesis de urea? 7. Enumere algunos compuestos nitrogenados de excrecin que se eliminen a travs de la orina.

Dentro del metabolismo de los compuestosnitrogenadosde bajo peso molecular, los nueletidos ocupan un lugar relevante. Estos compuestos tienen variadas e importantes funciones en el organismo, entre las cuales se cuentan su papel como precursores de los cidos nucleicos, su participacin en los mecanismos de la biotransduccin,su intervencin.en funciones reguladorasy otras (captulo8). El s u m i n i . de nudetidoses una condicin indispensablepara l multiplicacin a celular. Comosever, los aminocidos tienen una participacin destacada en la sntesis de estos compuestos, tal y como se plante en relacin con el metabolismo de los compuestos~trogenados general. en El estudio del metabolismo de los nucletidos tiene importancia mdica, pues tanto en su biosutesis como en su degradacin pueden presentarse anomalas que originan alteraciones del estado de salud; las medidas teraputicasque en algunos de estos casos pueden emplearse, tienen so fundamento en el conocimiento de las condicionesnormales del metabolismo de estos compuestos.

Al igual que los aminocidos, los nucletidos libres presentes en los Lquidos ~Wrales,pudenser consideradosformando su paso a travs de las barreras que limitan los diferentes compartimientoslquidos del organismo, Presenta determinadas limitadones. Los nucletidosson incapaces de atravesar las membranasd~lares, mientras que los nudesidos y las bases Ntrogenadas s pueden hacerlo. Como quiera que estos componentes son interconvertibles, es vlida la conc@n de la existencia de un pool de nucletidos. Debido a que, prcticamente, noexisten nucietidos fuera de la clula, se tratara en este caso de un poolen esencia

Aligual que para los aminocidos,la cantidad y concentracin de cada uno de los uudetidos en el pool pude ser considerada como biol@mente constante. que aportan nudetidos ~mnstaociarelativa reieja el'equilibrioe n t los ~ a l ~ o ' J lossustraen de l. l~ Los Procesos que aportan nucletidos al poolsou:
1 La absorcin intestinal. . 2. El catabolismode polinucletidos. 3. La sntesis de nucletidos.

Los siguientes procesos sustraen nucletidos del pool: 1 La sntesis de polinucletidos. . 2. La formacin de compuestos que contienen nucletidos. 3. El caiabolismo de nucletidos. Estos procesos se representan esquemticamente en la figura 57.1. Degradacin de polinucletidos

Fig. 57.1. Procesos que brindan nucletidos al pool de estos compuestos y los sustraen. La absorcin intstinal, el eatabolismo de polinurletidm y la sntesis aportan nucletidos al pool, mientras que la sintesis de polinucletidos, la sintesis de derivados nucleotidicos y el eatabolismo los sustraen.

Absorcin intestinal

. , .

Sntesis de polinucletidos

Sntesis de otros compuestos nucleotdicos

Sntesis de nucletidos

Catabolismo de nucletidos

A continuacin haremos un anlisisgeneral de estos diferentes procesos.

Los polinucletidos presentes en los alimentos que ingerimos son degradados en el intestino delgado por accin de ribonucleasasy desoxirrbonucleasas presentes en las secreciones pancreticas, las cuales los convierten en oligonucletidos. Estos ltimos, a su vez, experimentan la accin de fosfodiesterasas del mismo origen, y se obtiene una mezcla de mononucletidos (Fig. 57.2). Nucleotidasas y fosfatasas inespecficas los descomponen en nuclesidos y fosfato inorgnico(Fig. 57.3).

- , - -

-. ,

Po1inuc:etidos de la dieta

~. . - : -------..S-- ,

1
~

Ribonucleasas Desoximbonucleasas Oligonucletidos

Fig. 57.2. Digestin intestinal de polinucletidos. Las ribonucleasas y desoxirribonucleasaspmcre4-tia convierten a las polinucletidos en oligonucletidos que a su vez son converlidos en mononucletidos por fosfodiesterasas.

. -.

I
-

Fosfodiesterasas

".

. ~- Mononucletidos .

Nucletidos

1m
l

Nucleotidasas Fosfatasas

Catabolismo

Circulacin general

Fig. 57.3. Degradacin intestinal de rnononueletidos. Nucleotidasas y fasfatasas inesoeeifieas convierten a los nucletidos en nuelesidas y liberan el grupo fosfato. El nuelWsido ouede ser adicionalmente Mdrozado rindiendo la base nitrogenada y el rnonasacrida.

Los nuciesidos aueden ser absorbidos como tales por l a mucosa intestinal o sufrir hidzGadieional,liberondolas bawsnihvgenadas y 1 mwr.Sin embar#),laabwn.ih . intestioril de gtos computwrc no constituye un aporte sustancial d pnolde nuilmtidos del oreanismo.va oue muy w s a l ~ i l l ~ m o la circulacin genernl; la m a y n a son cat;ihnlhdw

Sfnt&denaeletidca
En la sntesis de nucletidos se distinguen 2 vas muy relacionadas, pero que tienen .. dfelWlcins importantes en cuanto a la cvnnomia celular. E n In denominada sntesis de now. lac bases nitroeenadac se s i n t e t h a partir de detenninado6prrrursores,eswfialmente aminocidos; mienhas que en ins binadas vas de
h i m p o ~ t e s q u e l a s n t e sde novo, va que med'anteellasse pmducenla mayonade los i nudeodos sintetizados por el u r g a n k t k - ~ recuperacin de hases parece tener menos a im~ortanciaenel de los nucletidos oirimidinicus. caso

Fnnnadn de mmpuestm que mntienen nudetidos Los nucletidos, adems de participar en la sntesis de cidos nucleicos, forman parte de ohos compuestosde gran importanciametablica; tal es el caso de las coenzimas NAD', COAy otros compuestoscon funciones coenzimticas.La formacin de dichos compuestosconstituye un drenaje adicional al pwlde nucletidos.

Una fraccin de los nucletidos del pwles catabolizada continuamente. En este proceso degradativo, las partes constituyentes de los nucletidosson separadas por hidrsis, y las bases nitrogenadas sufren ulteriores transformaciones que sern objeto de estudio en este captulo. El catabolismo de los nucletidos sustrae este tipo de compuestos de su pool, lo cual determina que estas prdidas tengan que ser restituidas por los procesas de sntesis antes mencionados. Los urocesos une aoortan nucletidos al o001 " los sustraen de l se relacionan a v travs de&, por lo que pueden inullse dpro*unente. As,porejemplo,un inrremento en la intensidad de sntesisde los uucletidos induce un incremento en su catabolismo.

Aunque las clulas poseen los procesos metablicos necesarios para la sntesis ntegra de los nucletidos a partir de determinados precunores, tambincuentancon las denominadas vas de recuperacin de bases, que permiten incorporar bases preformadac a los nuclmtidus, cun la cumipuirnte ~ ~ o n o mde sustancia y energa. ia El aspecto fundamental de la sintesis de nucletidns rs la formacin de las corresoondientesbases nihenadas. El orieeu dela ribosafne estudiadoen el cauhilo " 44 y en el presenteconsideraremosla formacin deun derivado activo de este azcar que participa en la biosntesis de nucletidos. La forma activa de la ribosa, que intervienetantoen las reaccionesderecuperacin de bases como en la sntesis de novo de los nucletidos, es el compuesto denominado 5-fosfo ribos-1-pirufosfato,es decir PRPP. El PRPP se forma a parr de la ribosa-5-dato,originada en el ciclo de las pentosas, por accin de la enzima ribosad-fosfato uirofosfoauinasa,en una reaccin donde un &po pirofosfato del A T P ~ S transferido al carboo 1del&onosac"do. La enzima kul'hbibida por el AMP y el GDPen forma no competitiva,y por el ADP y el cido 23-bisfosfogiicrico,que actan como inhibidores competitivos.

OH

pirofosfoquinasa 5-fosfo nbosil- 1- pirofosfato (PRPP)

Ribosa- 5-fosfato

Reaednnes de recuperacin de basas El organismo posee reacciones metablicas que permiten la formacin de nucletidos a partir de bases nitrogenadas libres, especialmente a partir de bases

purnieas.
La llamada recuperacin de bases se produce mediante la reaccin de la correspondiente base nitrugenada con el PRPP, lo cual da lugar a la formacin del nuclesido monofosfatadocorrespondientecon liberacin de pirofosfato.

PRPP

Nuclesido monofosfatado

La recuperacin de bases, especialmente las purnicas, constituye un proceso mucho ms importante desde el punto de vista cuantitativo de lo que se crea con anterioridad. Se estima que la mayor parte de los nucletidos formados en el organismose producen por medio de la recuperacin de bases. Se conocen 2 enzimas fundamentales que participan en la recuperacin de bases puriicas,la adenina fosforribosil transferasa y la hipoxantina-guanina fosfornbosil mnsferasa,que permiten la recuperacin de la adeniua, la primera; y de la hipoxantina y la guanina, la segunda. La reaccin catalizada es similar en ambos casos.

H
Adenina

Adenina fosfombosil transferasa

OH

OH

PRPP

Adenosn monofosfato (AMP)

Guanina, transferasa

PRPP

OH

OH

Guanosn monofosfato (GMP)

iatamsdirrioysii#C@h&O

965

ErzasrraeciOnes~yenunaimportanteposib~deahomdesusZamiaymeiga
para la cluIa, pues permiten utiZar bases nivgenadas provenientes de la dieta o de otras

fumtg,enlugarde~evaracabo~~9n~m~~~&bin~~ble~port mlaciones interorgnim en el metaboLiano de los nudetida', pues el hgado mdka una sntesis de novo muy aclivade bases nitmgenadasque son exportadasy uoli2adaspor otms tejida' por mediodelm m m o n e de ~o~uperaanbases. ~ de Como ventajas adicionales de la recuperacin de bases sobre la sntesis de novo pueden sealarseque requieremuchomenoseminmpara produUrSe, y que, al conhzio de la sntesis de novo, la recuperacin tiene un efecto deuresor sobre la formacin de cido rico al reincorporar las bases nitrogenadas al habolismo. El cido rico, aunque pudiera tener funciones fisiolgicas -ver ms adelante-, es considerado un compuesto de excrecin que en determinadas circunstancias puede tener efectos perniciosos sobre el organismo.

Sintesis de novo de nudetidos pirimidnim

Son 2 los compuestosprecursores bsicos en la biosnesis de las bases nitrogenadas de los nucletidos pirimidnicos: el aminocido asprtico y el carbamil fosfato. A diferencia del carbamil fosfato, que interviene en la sntesis de urea, el que nos ocupa es sintetizado en el citoplasma soluble por una carbamil fosfato sintetasa que utiliza glutamina como fuente de nitrgeno.

coz

2 ATP

ADP Pi
+

H,\-C-@ Carbamil fosfato

sintetasa I (glutamina) l

COOH H2N-C-H

CH,

Glutamina

cido glutmico

El carbamil fosfato y el cido asprtico se condensan en una reaccin catalizada por la enzimaalostrica asprtico carbamil transferasa (asprtico hanscarbdasa), formndose el compuesto denominadocido carbamil asprtico. En este compuestoes posible percatarse de la posicin que ocuparn los diferentes tomos en el anillo pirimidnico.

H H
\ /

O HO,
11

Carbamil fosfato

'Y'

'OH CO

cido carbamil asprtico

cido asprtico

El cierre del anillo se produce por la deshidratacin catalizada por la enzima dihidroorotasa, formndoseel cido dihidro ortico.

HO H-N-H

o=c
\N/
1

i '
cNH
'COOH H

Dihidro orotasa

H cido dihidro ortico

cido cubamil asprtico

El dihidro ortico resulta posteriormente oxidado a cido ortico por la enzima (orticoreductasa),reaccin en la cual interviene deidodihidro ortico deshidr~~enasa el NAD' como aceptor de hidrgenos. La enzima es una flavoprotena que contiene F A D , m y tomos de hierro.

"1

"" 1 '
H

7.
c/H

+ " ' N

N*D;;++
b

'~00~
&ido dihidro ortico

Dihidro ortico deshidrogenasa

H-r

C '' O+ $ I H

C 'COOH

cido ortico

En la siguiente reaccin se incorpora el resto de ribosa. El compuesto que aporta el grupo ribosilo es el 5-fosfo ribosil-1-pirofosfato, cuya formacin a partir de la ribosa 5 fosfatoya fue considerada. La incorporacin de la ribosa -en reaiidad del conjunto fosfombos+ es catalizada por la enzima cido ortico fosfombosil transferasa.

OH OH PRF'P

OH OH Orotidn monofosfato

El orotidn-5'-fosfato resulta as el primer nucletido formado en esta ruta biosinttica. Apartir del omtidn-5'-fosfato seforma el uridn-5'-fosfao (iJMP, cido uridlico) mediante una reaccin de descarboxilacin catalizada por la correspondiente desearboxasa.

CO,

C C

Orotidn -5-fosfato descarboxilasa

\H

Orotidin monofosfato Undn monofosfato

(UMP)

Como se ver ms adelante, el UMP y otros nncletidos monofosfatados pueden elevar su grado de fosforilacinhasta el correspondientetrifosfato. La sntesis de otro importantenncietido, el citidh trifosfato (CTP),se produce precisamente a partir del uridn trifosfato(UTP). En la reaccin de fohnacin de CTP, el UTPincorpora un grnpo amino proveniente de la glutamina. La reaccin requiere energa, que ffi aportada por el ATP. La enzima

que cataliza esta transferencia se denomina citidn trifosfato sintetasa y requiere la presencia de iones Mgu y GTP para su actividad.

sintetasa

Citidn trifosfato

COOH

H,N-C-H

I I CH2 I

COOH

THz C

O"

bH

cido glutmico La sntesis de los nucletidos de timina est asociada con la formacin de desoxinibonucle6tidosy ser considerada ms adelante. En Las bacterias,la etapa fundamentalde regulacin en la &tesis de los nucletidos pirimidiicas componde a la formacin del cido carbamil asproco, catalizada por h asp&ico carbamil transferasa.El esquema de regulacin responde asal principio geXIeralde regulacin de las vas biosintticasen las primeras etapas de stas, lo cual es exprrsi6ndelprinapio de mxima economa. La asprco carbamiltransferasa es una enzima alostrica que resulta inhibida por el CTP, uno de los productos finales de la daEste efectoinhibitoriodel CTP es anulado por el ATP. Adicionalmente,la enzima 1 mbam fosfato sintetasa 1 (glutamina) es inhibida por el UDP y el UTP, lo cual Provee un mecanismo adicional de regulacin; este ltimo parece ser el mecanismo regulatodo fundamentalen el ser humano.

Sf~~tesiS novo de nucietidos purinieos de

L~sconocimientos fundamentalessobrresta va metablica se deben a los trabajos Pioneros de John Buclianan y Robert Grennbergdorante los aos 50. A diferencia de las bases nitrogenadas pirimidnicas,que poseen slo 2 precursometablicos, en la sntesis del anillo p u r ~ c intervienen varios compuestosque o en fo~aSeC~eIIaal aportando los elementos requeridos. Otra diferenciapeculiar van w n m P e c t ~ sntesis de las pirimidinas es que la ribosa fosfatada se incorpora aa desde las primeras e t a ~ abiosinttica~. s La sintesis de las baws purinira5 (einicia ron una rearrin que tienr l u p r entre h e l P R P P ~ flutamina, formnd(meel compue5to5-f,,shrrihi,siI~mina. t m iene Id la

enzimafosforribosil pirofosfetoamido transferasa, y en sta el nih.geno arm'dico de la glutamina es transferido al carbono 1del monosacrido fosfatado, y se libera el pirofosfatoque ocupaba esa plaza.

COOH

H2N-<i-HCH,
I
Glutamina

@-@
Fosfombosil pirofosfato amido transferasa

COOH
I

H,N-$-H
CH,

CiH,
cido glutrnico

Ntese cmo el enlace entre el carbono 1de la ribosa y el nitrgeno amnico adopta en la maeein la configuracin P cuacterstica de los nucletidos.Este nitrgeno ocupar la posicin 9 en la base purnica. Esta reaccin tiene una gran importancia regulatoria sobre la va, tal como considemmos ms adelante. En la siguiente maccin se incorpora el aminocidoglicina, que aporta los carbonos de las posiciones 4 y 5, y el nitrgeno de la posicin 7 del anillo.

5- fosfombosilamina

Fosfombosil glicinamida sintetasa

5.

H Glicina

Seguidamente, un gmpo formilo proveniente del N, N,, metenil tetrahidroflico aporta el carbono de la posicin 8.

,NH?

N, ~ , , ~ ~ t ~ ~ iTetrahidroflico . l t ~ t ~ ~
hidroflico

P~ \ ~ - ~ o*
I
5- fosfombosil glicinamida

'-Fosfombosil glicinamida transferasa

C<
b

'T-H ll
C
I

,C O' NH '-

5- fosfombosil N formil glicinamida

A continuacin, y por segunda vez en la va, se incorpora un grupo nitrogenado proveniente dela glutamina, en esta ocasin dicho aminocido aporta el nitrgeno de la posicin 3. La reaccin requiere ATPe iones Mg".
H cido glutmico Glutamina ADP + Pi

c,/
' O

,c

cH '-

II

I
5- fosfombosil
N formil glicinamida

I
5- fosforribosil N formil glicinamidina

El cierre del anillo pentagonal es catalizado por la enzima fosforribosil amino imidazol sintetasa. lo cual consume una molcula ms de ATP.

c,/

N c 'H

H-N&

o
N-H

II

A T [

1+

ADP Pi H O , ;

H-C-N H,N -C

11
\

ll
N

~~

Fosforribosil iniidazol sintetasa

/C-H

5- fosfombosil N f o m glicinamidina

5- aminii imidazol ribonuclctido

Una carbuxilasa c t l z la incorporacin del carbono de la posicin 6 a parr del aaia CO,. Es llamativo el hecho de que esta reaccin no consume ATP ni requiere la participacin de biotina u otra cwnzima.

H-C-N H,N-C,

II
N l

ll ,C-H

CO,
b

C -C-N

HO'
H'N /C,

11

11
NF - H

Fosforribosil imidazol carboxilasa

5: fosfombosil
5- m i n o imidazol nbonucleiido 5- m i n o imidazol 4- carboxiico

La incorporacin del nitrgeno de la posicin 1 tiene lugar a continuacin, en una secuencia similar a la incorporacin del segundo nitrgeno al ciclo de la urea, que consideramos en el captulo precedente. El gmpo nitrogenado lo aporta el aminocido asprco mediante 2 reacciones consecutivas,en la primera de ellas el asprco se une al cido 5 ' -fosfombosil-5-aminoirnidami-4-0i-boxiiico con consumo de otra molcula de ATP. De inmediato se produce la liberacin de cido fumrico, y el grupo amino del asprticoquedaformandopartedel wmpuesto5 ' -fosfombonl4carboxamida-5-amino imidazol.

9 C-C-N
HO'

COOH

11

11
H-C

CH, -N
/

I 1

C\

CN -

II

11

'

fosfombosil Fosfombosil amino imidazol succnico carboxamida sintetasa S- fosfombosil 4- (N succino carboxamida) 5- amino imidazol

5 - amino imidazol

4- carboxlico

/
COOH H,N-C-H 1 CH2 I COOH cido aspmco

COOH

I COOH
Acido fumrico

5: fosfombosil 4- carboxamida 5- amino imidazol

En estos momentos slo falta la incorporacin del carbono de la posicin 2 del &o purnico, lo cual se logra con el concurso del N,, formil tetrahidroflicoen una reaccin de trarsferencia de grupo.

C-C-N

N,, fomil FH,

H~N/
%N

'--\N'1

II A -

II

CN

C.

'H

Fosfonibosil amino imidaml carboxamida formil uansferasa H

/C\N/ C yC-H
1
5'-fosfomibosil 4- carboxamida 5- fomamino imidazol

5: fosfombosil 4- carboxamida 5- amino imidazol

El cierre del anillo purnico se completa con la prdida de H,O catalizada por la enzima inosinicasa (IMP ciclobidrolasa), con lo que se forma el inosn-5 ' -fosfato (IMP)que viene a ser as el primer nncletido pnrnico formado en la va biosinttica.

9
H-N

? !
-N
/C\

/C\

CN -

"

ll

5- fosfombosil
4- carboxamida

5- fomamino imidazol

Inosn monofosfato (MP)

Como habr podido notarse, los elementos que constituyen el anillo purnico se 0nginan a parr de disontm precursores, tales como la glutamina,la glicina,el asprtico, el CO, y fragmentos mon-rbonados unidos al cido tetrahidmfco. La procedencia delosdistintos tomos del anillo purnico se resume en la figura 57.4. Es de destacar el elevado gastoenergticoque ocurre en esta va, la sntesis del IMP consume 6 enlaces ricmen energa.

cido asprtico +N N,,formil FH,

--+

/C

f"
,

Glicina

\N/

N ''

6 c N, N,,metiln FH,

Fig. 57.4. Procedencia de los distintos tomos que componen el anillo punnico. Los elementos del anillo purnico son aportados por la glutamina, la glirina, cl cido asprtico, el CO, y fragmenlos rnonocarbonados unidos al cido tetrahidroflico.

El IJIP formado. segn se ha detallado, est constituido por la base nitrogenada hiposantina. la cual se halla con mu? poca frecuencia en los polinucletidos. A partir . del IMP se forman los nucletidos de adenina guanina. E1 grupo aniino adicional requerido para convertir el IJlPen A3IP, lo aporta el ! cido asprtico en una secuencia de 1 reacciones que a nos debe resultar familiar.

HOOC-CH-

C H r COOH

rl
H-S
yc\

N-H
GDP+Pi

C-N

c
H

N '
/

::
:
'1

C Adenilato
succinico sintetasa
l

'.

NH?

H-N

"c \C -' ' h

N

/c*N/C\ ,c
!@- Rih i
AMP

s i- ; ~ i b
IMP

i COOH

$3- ! Rih -

COOH CH? CH: COOH

cido fumnco

H~N-c-H
CH,

COOH
h i d o aspnico

Es de notar, sin embargo, que en este caso la energa requerida por la reaccin inicial de condensacin es aportada por el GTP. Las enzimas que catalizan estas 2 reacciones son: adenilo succnico sintetasa adenilo succinasa. en este orden. El G\IPtambin se forma a partir del nIP.En este caso. el grupo amino adicional es cedido por la glutamina, y la incorporacin est precedida por una oxidacin a expensas del SAD'. Debemos Ilaniar la atencin en cuanto a que la sntesis del .ANP requiere GTP, mientras que la del GXIPrequiere . A P . Este hecho provee un mecanismo que permite un halance adecuado en la sntesis de nucletidos purnicos.

IMP

Xantina-5-fosfato

,--oH

COOH

H?S-C-H CH,

H,S-C-H CH2

Glutarnina

cido glutrnico

~a etapa fundamental de la regulacin de la sntesis de los nucletidos purnicos en sus momentos iniciales, como corresponde a una va hiosinttica. La enzimafosforrihosil pimfosfato amido transferasa es inhihida por el AMP, el GMPy el IMP;j<r;2primcms nucletidostamhin inhihen,en forma sinrgica,a la rihosa-5-fmfatu pirofosfoquinasa. De este modo, los nucletidos de adenina y guanina limitan su pues inhihen la va que conduce a la formacin del IMP, su precursor inmediato. Adicionalmente,el AMPlimitasu propiasintesis, pues inhihe a laenzimaadeiiilico succnicu sintetasa, mientras que el GMP tiene un efecto similar al inhibir la inolsinaJ ' -fusfato deshidrogenasa. Como se apunt arriba, la sntesisde AMI' y GMP se encuentran concertadas, pues se requiere GTPpara lasntesis de AMP, y ATPpara la sntesis de GMP Wig. 57.5).

PRPP Glutamina

Nucletidos de adenina y de guanina

1
~,

5- fosfol-iihoiil;imina

Todos estos efectos regulatorios contrihuyen a la economa y eficiencia de la sntesis de nucletidos purnicos.

Canazau6n metablica en la sntesis de nucletidos

Lasmediciones exactas de las concentraciones intracelulares de los nietaholitos Intermediarios en las vas de sntesis de novo de los nucletidos purnicos y pirimidnicos, han puesto de manifiesto que stas son mucho ms bajas que lo que cabraesperar, teniendo en cuenta las mspectivas concentraciones de los pwcursores y de 10s productosfinales. Esta situacin no es compatihle con un sistema hiosiuttico deenzimasaisladas,dondecadaproductode un pasoenzimtico delya difundir hasta contactar con la enzima que cataliza el siguiente paso de la va. se HOY cnnoce que enzima que prticipan en la sntesis de nucletidm presentan un elevado grado de organizacin funcional. As, en la ruta que conduce a Ia sntesis de nucletidos pirimidnicos se ha descubierto la existencia de 2 enzinias multifun~ionales.1.a prinier* posee las actividades de carhaniil i~sfato sintetdsa, al S P s r t i ~ carbarnil transferasa y dihidro on~tasa; complejo se le silele denominar o abreviadamente CAD,segn las iniciales de las actividades c;~I;illic;is presenta. que La segunda enzima multifuncional de la ruta posee las activi(l;i<lcsde cido ortico fosforribosil transferasa y descarhoxilasa de orotidin-5 ' -fi~si'aIo.a esta enzinia bifuncional se le ha denominado UMPsintaya. La enzima que establece el vnculo entre estas 2 enzinias inultifuncionales, la dihidroorti~ de~hidro~enasa,encuentra unida a la cara externa de la memhrana se interna de la mitocondria. De hecho, las evidencias parecen indicar que durante la

sntesis activa de nucletidos de pirimidina, las 2 enzimas multifnncionales descritas produce un fenmeno de canalizacin metablica se asocian con la mitocondria, y se que asegura una elevada eficiencia del proceso y n i i n i z a las prdidas de intermediarios sin otra funcin en el metabolismo (Fig. 57.6). Un fenmeno d e canalizacin similar parece ocurrir en el caso de la sntesis de nucletidos purnicos, en la que existen evidencias, en clulas eucariontes, de la presencia de 3 enzimas multifuncionales.
~

Fig. 57.6. Esquema dc la ubieaeibn de la ~ihidroor~tico deshidrogenasa en ia meiiihrana intcrna dr la mitoeoiidria.

La elevacin del grado de fosforilacin de los nuclesidos monofosfatados se produce por la transferencia de grupos fosfato provenientes del ATP. Las enzimas qne catalizan este tipo de reaccin se denominan nuclesido monofosfato quinasas y son especficaspara cada una de las bases nitrogenadas. ATP
\

ADP

UMP Uridn monofosfato quinasa

UD,

El paso de nuclesido difosfatado a trifosfatado ocurre en forma similar por accin de la nuclesido difosfato quinasa, que puede fosforilar a cualquiera de los noclesidos difosfato; aunque el ATPes el donante habitual del grupo fosfato, cualquier otro nucletido trifosfatado puede sustituirlo. Las enzimas mencionadas en este apartado son activas, tanto sobre los ribonucletidos como sobre los desoxirribonucletidos.

N ,DP

Nuclesido difosfato quinasa

Los desoxirribonncletidos purnicos y pirimidnicos se forman por reduccin del carbono 2 de la ribosa de los Nbonucletidos correspondientes, los cuales deben encontrarse en forma de nnclesidos difosfatados. La enzima responsable del proceso reductor es la nuclesido difosfato reductasa. Los equivalentes de reduccin requeridos por esta reaccin son aportados por el NADPH, pero no de una formadirecta,sino por mediode una protena: la tiorredoxina.

@-@-cH~

dH,,)
0

v f Tiorredoxioa
0

[ TO~T

(SH SH

OH

OH

Nuclesido difosfato reductasa

1 OH

Nuclesido difosfato

~esoxirribonuclesido difosfato

En la reaccin se forma el derivado desoxi correspondiente, y 2 grupos sulfidrilos de la tiorredoxina son oxidados a disulfuro. La tiorredoxina reductasa esla responsable derestituir la forma reducida de la tiorredoxha a expensas del NADPH, por intermedio del FADH,. Se ha descubierto una segunda protena, la glutarredoxina, que utiliza al g[utatin reducido en lugar del FADH,, aunque la fuente original del equivalente de es tambin el NADPH. NADP' NADPH

FADH,

'.2 -.
Tiorredoxina reductasa

FAD

La nuclesido difosfato reductasa es una curiosa enzima formada por 4 subunidades, 2 denominadas B1 y 2 denominadas B2. Posee 2 sitios activos que se constituyen en la zona de contacto entre los protmeros B l y B2; las subunidades B1 aportan un grupo -SH al centro activo, mientras que las B2 aportan un radical tirosilo. Adicionalmente, las subunidades B2 contienen un ion Fe1+indispensable para la accin cataltica. La regulacin de esta enzima es muy interesante. Las subunidades B1 poseen 2 sitios alostricos separados, uno de ellos permite regular la actividad cataltica general de laenzima y puede acomodar al ATP, que laactiva, o al dATP, que lainhibe. El otro sitio modicala especificidad de sustrato de la enzima, en dependencia del efector que se le une. ste es uno de los pocos casos conocidos de regulacin enzimtica por modificacin de laespecificidad. Los distintos efectores capaces de unirse al sitio de control de la especificidad estimulan o inhiben la reduccin de diferentes ribonuclesidos difosfatados de la manera que aparece en el cuadro.
Cbsam Efectores queintervienen en la regulacin de la enzima nuclesido difosfato

reducasa Efector Sustrato cuya reduccin disminuye Sustratocuya reduccin aumenta

CDP y UDP GDP ADP

ATP y dATP dITP dGTP

.-.-. .. . .
CDP y UDP CDP, UDP y GDP

En condiciones que favorecen la actividad anablica -altos niveles de ATP-, la reduccin de ribonuclesidos difosfatados sigue estas etapas:

+dCDP -f dCTP dTTP UDP +dUDP + + 2. dTTP (e): GDP --+ dGDP + dGTP 3 . dGTP (e): ADP dADP -f dATP 4. dATP (a): Se inhiben todas las reducciones.
1. ATP(a, e): CDP

Las letras a y eentre parntesis indican si el efectorse une al sitio de control de la actividad 0 al sitio de control de la especificidad.

El resultado de esta compleja regulacin es que los desoxirribonucletidos son sintetizados en la cuanta necesaria y en las proporciones requeridas para la actividad celular, en particular para la sntesisde ADN.

S n e i de nucietidos de timina tss

La sntesis de nucletidosde timina sloseproduce en forma de desoxiderivados. Como se sahe, estos nucletidos son caractersticos del ADN. El precursor inmediato para la sntesis de nucletidos de timina es el desoxiuridin monofosfato (dUMP), el cual, en los mamferos, puede originarse a partir del dCMP por accin de una desaminasa, o directamente a partir del dUTP. En la reaccin, el dUMP es convertido en desoxi timidn monofosfato(dTMP) por accin de la enzima timidiico sintetasa. El grupo metilo que se requiere es aportado por el N,N,, metiln tetrahidroflico.

H--N

N,N,,, metiln FH,

o=c
'N'

'
C

'c-CH, C -H

Timidlico sintetasa

Desoxi undn difosfato (dUDP)

Desoxi timidin difosfato (dTDP)

Las figuras 57.7 y 57.8 constituyen un resumen general de los procesos de hiosntesis de nucletidos pirimidnicos y purnicos, respectivamente.

Catabolismo de nucletidos
Los nuclesidos monofosfatados, tanto pirimidnicos como purnicos, pueden experimentar la separacin del grupo fosfato por la accin enzirntica de fosfatasas.

NMP Fosfatasa

Nucle6sido

Cnrbamil asprrico
i

LH:O

h d o dihidro ortico -, , NAD'

cido ortico ,/ pRpp

ATP u I 3) Rihosa

r
1

ATP
i
1 '

L.\DP .A?P
+

CDP

UTP
i

Glutniiiina

!.'

,' Giutrnico +
dCDP CTP

.ARN

CDP S.ADPH
y,

\ ADP' 4: ' d CDP

.ATP
I
Fig. 57.7. Esquema general de la sintesis de nurletidos piriniidnicos > sus di. ferentes deri<ados.

Ribosa I

@ f' p Glutamina PRPP

5- fosfombosilamina ATP -.@Glicina

ATP

AMP

ADP + pi 5 PR glicinamida N, N,, metenil FH,

//

5 PR N formif glicinamida Glutamina cido glutmico ADP + P

m$

5 PR N formil glicinamidina
ADP + Pi
5 ' - fosfombosil- 5'-amino i 5 amino imidazol nbonucletido

co*

imidazol- 4 -carboxlico ATP cido asprtico

-,/,-

5' - fosforribosil 4 - carboxamida 5 - amino imidazol N,, formil FH2

cido fumnco
5 ' - fosfombosil

AMP+

ADP+

ATP

4 - carboxamida cido 5 - amino imidazol asp"fico

GTP

dADP

H,O

cido glutmico
Fig. 57.8. Esquema general de la sintesis de nueldtidos purnicos y sus derentes derivados.

ADP+Pi GMP +GDP+

dATP..... ........ .. ..

I/ NADPH

GTP ...........

Los nuclesidos son posteriormente degradados por un proceso fosforoltico ,t&mdo por nucleosidasas.

Nucleosidasas OH Nuclesido OH

Ribosa I fosfato

Las bases nitrogenadas pueden entonces ser recuperadas o seguir sus vas . d w d a t i v a s cnrrespondientes.

CataboliPmo de bases pirimidiicas

La citosina resulta desaminada y convertida en uracilo por accin de una desaminasa

ya
N/c\c-H
O=C 'N' H Citosina

C-H

II

7
Citosina desaminasa NADPH

o II

H- N /C\c-H O=C

C-H H Uracilo

II

'' l N

U uracilo formado por la reaccin anterior o el proveniente del catabolismo de los nucletidos que lo contienen, es reducido a dihidro uracilo por accin de una deshidrngenasaque utiliza NADH como cofactor.
II

NADP+

II

' H-N \C-H

o=C,

Y
H

II , C-H

Dihidro uracilo deshidrogenasa

H-N / C \ C , ~ O=C

\N/
I

c\H/ ~

lrH

Uracilo

Dihidro uracilo

La ruptura del anillo piriniidinico se produce por hidrlisis.

Dihidro uracilo

cido p ureidi~ propinico

Finalmente, el cido P ureido propinico es hidrolizado y se obtienen

P alanina.

%NH, y CO..
HO\!l NH:
". >

o
\

CH2

H1O

H\

1 1

- L
H '

N--CH.-

CHrC 'OH

p ureido propionasa

p aianina +

cido p ureido propinico La degradacin de la timina es esencialnieiite igual. con la fnrniaciii de dihidrotiminapor reduccin y de cido P ureido isobutirico por hidrlisis. Este ltiino rinde los productos finales cido o inetil P aniino propinico. NH, J CO,.
CH, H\

O
1 1

N ' -CH?

CH-C,

OH

cido u iiietil (3 ainiiio propi<iiiico

Catabolismo de bases purniw

Las bases purnicas libres.si no son recuperadas. resiiltaii convertidas en pioduct119 de excrecin. a La adenina es convertida en liipoiantina ). postcriorinrnte. en \antiiia. segti l siguientes reacciones: NHI l
;

O
11

N 4 'c-~
i1

H.0~

(1

1;
C

H1O
t\

*, ,

NH,

H-- N

<;C

1 .

Adcnas

HC

C-N l
('

H.0

()

t.
H
O=('
\
(

-~

i;~iiiiii;i

(.

c
Y

o \ I ~ ~ I \ ~ I

981

Riqirmica Mdica

La guanina es convertida en xantina por desaminacin.

o $1
H-N
/C\(

O
11

H~-N

/C\

l
H
iuanina

C-N
i

II

H H Xantina

Cualquiera que sea el origen de la xaiitina, sta es oxidada por la propia xantina o g d m hasta formar el cido urico.

o II
H1O
H-N

o=c
1

Xantina

cido rico

El cido rico es el producto de la excrecin de las purinas en el hombre y otros vertebrados, y durante mucho tiempo ha sido considerado exclusivamente como un compuesto de desecho del metabolismo. .Algunas investigaciones recientes parecen indicar queel cido riw podria tener una funcin fisiolgica actuando como agente antioxidante. Se ha wiiiprohado su capacidad de reaccionar con los radicales hidroxilo sobre todoen el tejido pulmonar, posee, ademc, un efecto inhibitorio sobre la xantina oxidssa, lo que evita la formacin excesiva de anin superxido y peruido de hidrgeno. Otros animales tienen una va degradativa ms extensa y excretan otros productos finales.

NH,

COOH

NH;

Anhidrido carbnico !amonaco: sxcrcidm por invcrtchradi>.; acutico\

Aspectos de inters mdico en el metabolismo de los nucletidos

En el metabolismo de los nucletidos existen aspectos que tienen un relevante inters mdico. ste est dado, por una parte, por la existencia de enfermedades que se deben a deficiencias enzimticas de estas vas; por otra parte, existen diversos medicamentos cuya accin bsica es producir modificaciones en el metabolismo de los nucletidos.

Enfermedades relacionadas con el metabolismo de los nudedos

La aciduria ortica es una enfermedad hereditaria caracterizada por retardo del crecimiento, anemia megaloblstica y leucopenia. Se encuentra una concentracin anormalmenteelevada de cido ortico en la sangre,el mal se excreta por la orina. Las enzimas ortico fosforribosil transferasa y orotidina 5 ' -fosfato descarboxilasa estn deficientes-recurdeseque ambas forman la enzima multifuncional UMP sintasa-; ello explica la acumulacin de cido ortico y la deficiente sintesis de los nucletidos pirimidnicoscon retraso del crecimientoy de la hematopoyesis.La enfermedadpuede aliviarse con la administracin oral de nridina o citidina. El sndrome de Lesch Nyhan es otra enfermedad de carcter gentico que est asociada alcromosomaX.En ellase observa un profundo retardo mental,espasticidad y una gran agresividad, por la cual los pacientes llegan incluso hasta automutane por mordidas de dedos y labios, y suelen morir en edades tempranas. La enfermedad se acompaa de niveles muy elevados de cido rico en sangre, el que termina por depositarse en las articulaciones y el rin, y produce lesiones fatales. La enzima deficiente es la hipoxantina-guanina fosforribosiltransferasa, que participa en la recuperacin de bases pur~cas. Precisamente al no producirse la recuperacin de bases ocurre la sobreproduccin de cido rico, ya que las bajas concentracionesde nucletidos con accin inhibitoria y una mayor disponibilidad de 5 ' -fosforribosil-1-pirofosfatoestimulan la sntesis de novo, y aumenta asla cantidad de bases purnicas que deben ser catabolizadas. Nada se conoce acerca de la patogenia de los trastornos de la conducta. Tambin se observa una produccin excesiva de cido rico en la gota. El cido rico y sus sales son relativamente insolubles en agua. En la gota, la excesiva concentracin de cido rico en los lquidos corporales conduce a su precipitacin y cristalizacin en los cartlagos y el rin, donde da lugar a los denominados tofos. Actualmente se considera que al menos algunos tipos de gota tienen carcter hereditario y se deben a una falla en el control negativo ejercido por los nucletidos de adenina y guanina sobre la enzima fosforribosilpirofosfatoamido transferasa, lo cual conduce a una sobreproduccin de nucletidos purinicos y con ello a la consiguiente estimulacin del catabolismoy la hiperuricemia. Como el contenido de nucleoprotenasy purinas de la dieta influye en la excrecin de cido rico, los pacientes afectados por la gota deben restringir la ingestin de carnes y otros alimentos que contengan es& sustancias. La deficiencia de adenosina desaminasa, una enzima que convierte la adenosina en inosina, provoca una grave inmunodeficienciapor un inapropiado desarrollode los linfocitos T y B. Los pacientes con esta enfermedad son muy propensos a contraer infecciones, a menos que sean mantenidos en un ambiente estril. Precisamente en pacientes con esta afeccin se han reaiizadoalgunos de los primeros ensayos de teraputica gnica con algn grado de xito.

Drogas con accin sobre el metabolismo de los nucietidos

El alopurinol es un anlogo de la hipoxantina con efectos inhibitorios sobre la xantino oxidasa, y se ha utilizado en el tratamiento de la gota, pues, al provocar una

disminucin en la formacinde cido rico, alivia los sntomas, de los cuales el ms cmel es el dolor en las articulaciones (Fig. 57.9). Existe un conjunto creciente de medicamentos que poseen accin sobre el metabolismode los nucletidos. Las sulfonamidas o sulfas son compuestos con accin rntibacteriana, cuyo efecto principal es impedir la sntesis de purinas limitandocon ello la multiplicacin de los microorganismos. Las sulfonamidasson anlogos estmcturales del cido para amino benzoico, por 10 cual inhiben competitivamente la sntesis del cido flico en las bacterias. Los derivados del cido flico son imprescindibles para la sntesis del anillo purnico.

Fig. 57.9. Estructura del alopurinol. Esta sustancia se ha utilizado en d tratamiento de la gota por su efecto inhibitorio sobre la formacin de cida rieo.

Sulfanilamida (una sulfonamida)

H,N ~

cido para amino benzoico (componente del cido flico)

Otros medicamentos con accin sobre el metabolismo de los nucletidos poseen

accin anticancerosa. Una caracterstica de las clulas cancerosas es su rpido crecimiento y multiplicacin (captulo 80). Esto requiere una gran velocidad de sntesis de ADN y ARN, por lo cual estas clulas son muy sensibles a cualquier limitacin en la sntesis de nucletidos. Diversas sustanciascon efecto inhibitorio sobre la sntesis de nucletidos se usan con algn xito en el tratamiento de ciertas formas de cncer. No obstante, casi todas estas drogas poseen efectosindeseables por la afectacin que producen en las clulas normales del organismo. La azaserina, compuesto de estmctura similar a la glutamina, ejerce una accin anticancerosa por inhibicin de la sntesis de nucletidos. La azaserina inhibe las reacciones de las vas biosintticas de los nucletidos en las cuales interviene la dutamina (Fig. 57.10). La aminopterina y la ametopterina (metotrexato)son anlogas del cido flicoe F , impiden la regeneracindel tetrahidroflico( H) a partir del dihidroflico(FH,). En Wtpfhilose puso de manifiestola importancia de los derivados del cido flico en la sintesis de nucletidos (Fig. 57.11).

Fig. 57.10. Estructura de la azaserina. Este compuesto es un anloga de la glutamina,quese ha utizadoeomo antiranecroso por su efecto inhibitorio sobre la sntesis de nucletidos.

Fig. 57.11. Estructura de la ametopterina. Este compuesto tiene accin antiflica, por lo cual se ha utilizado en el tratamiento del cncer, ya que inhibe lasntesis de nucletidos y con ello la multiplicacin celular.

d h g o d e baies, tanto purniw cons, pirimidinicai,se utilizan en el hatamientodel cncer. Ellos interfieren en la sintesis de lui nuclc6tidos norm4e.r O .

Entre los anlogos de hases empleados como medicamentos se encuentran la 6-mercaptopurina, el 5-Hor uracilo, la 8-azoguanina,el 5-iodo urecilo, el 6-azo uracilo g otros (Fig. 57.12).

Resumen
Por la importancia de las funciones que reazan los nucletidos en el organismo, su metabolismo ocupa un lugar relevante en el de los compuestos nitrogenados de bajo peso molecular. Los nucletidos se encuentran formando un pool cuyas concentraciones y cantidades se mantienen relativamente constantes producto del equilibrio din4mico entre los procesos que aportan nudetidos a dicho pool y los sustraen de l. La absorcin intestinal, el catabolismo de polinucletidos y la sntesis son procesos que aportan nudetidos al pool; mientras que la sintesis de polinudetidos, la formacin de derivados nucleodicos y el catabolismo, los sustraen. Existen 2 vias fundamentales para Uevar a cabo la sntesis de los nudetidos: la sntesis de novo, que implica la formacin de las bases ~trogenadas partir de a ciertos precursores, y la recuperacin de bases, que consiste en la formacin del nucletido a partir de bases preformadas. La recuperacin de bases es m& activa en el caso de las bases purnicas; este proceso constituye un importante ahorro de sustancia y enew'a para la cluia, y tiene una importancia cuantitativa considerable. La recuperacin de bases permite, adems, el establecimiento de relaciones interorganicas entre el hgado que sintetiza y exporta bases, y otros tejidos que las uolizan mediante estas reacciones de recuperacin. La recuperacin de bases tiene como ventaja adicional que disminuye la formacin de dcido rico, compuesto que puede Uegar a tener efectos dainos sobre el organismo. k t o la recuperacin de bases, como la sntesis de novo de los nucletidos, requieren una forma activada de la ribosa, el 5-fosfodbosil-1-pimfosfatoo PRPP, el cual se sintetiza a partir de la ribosad-fosfato. Las reacciones de recuperacin de bases consisten en la unin de las bases nitrugenadas con el PRPP, con formacin del nucletido monofosfatado correspondiente y la liberacin de pirofosfato. La sntes'i de novo, en el caso de los nucletidos pirimidnicos, se realiza a partir de 2 precursores: el carbam fosfato y el dcido asprtico. El orotidn monofosfato es el primer nudetido pirimidnico que se completa M' en la va biosinttica. A partir de este compuesto se sintetizan el U F ,y de este ltimo, el resto de los nucletidos pirimidinicos. La sntesis de novo de nucletidos purnicos es ms compleja, pues en eUa participa un nmero mayor de precursores. Los elementos que constituyen el miU purnico se incorporan en reacciones sucesivas, y son aportados por la glutamio na, la geina, el dudo asprtico, el CO, y fragmentos monocarbonados unidos al dcido tetrahidmflico. El DIP es el primer nudetido pnrnico completado en esta va y a partir de ste se forman los demts. Es notable la contribucin de diferentes aminodeidosa la sntesis de nudetidos. La sntesis de nucletidos purnicos y pirimidnicos se encuentra rigurosamente controlada y balanceada, de modo que los diferentes nudetidos se sintetizan slo en las cantidades y proporciones requeridas por el momento metablico de la clula. Existen enzimas capaces de modificar el grado de fosforilacin de 10s nudetidos, por lo cual los nudetidos monofosfatados,difosfatados y trifosfatados son interconvertibles. Los nucletidos de desoximbosa se forman por reduccin del carbono 2 de la ribosa de los correspondientes ribonuclesidos difosfatados. La reaccin es catalizada por la nudesido difosfato reductasa y requiere NADPH como fuente de

H
5 - iodo-uracilo

H
6- azo uracilo

Fig. 57.12. Anlogos de hasrs nitrogeiiadas ernpleador conio rnctliriimentor.

poder reductor. Los nucletidos de timina slo se sintetizan en forma de desoxirribouucle6sidos monofosfatados. El catabolismo de los nudetidos consiste en la separacin de sus pades constituyentes: base nitrogenada, monosacrido y grupos fosfatos, y la ulterior degradaci6n de la base nitrogenada. La degradacin de las bases pirimidinicas produce compuestos como la B danina, CO, y M,,que son incorporados al metabolismo. Por el contrario, la degradacin de las bases purinicas conduce a la formacin del dado rico, que no tiene otro destino metablico que su excrecin urinaria Se conocen d p a s enfermedades ocasionadas por deficiencias enzim6ticas en el metabolismo de los nudetidos, tales como la aciduria ortia, el sndrome de ~ e Nyhan y d p a s formas de gota, y cierto tipo de inmunodeficiencia. d l b b i e n exisien medicamentos que ejercen efedos teraputicos mediante su accin sobre el metabolismo de los nucletidos. Tal es el caso de algunos antibacterianos como las sulfonamidas (sulfas) y compuestos con accin anticancerosa como la azaserina, la ametopterina, la 6-mercnptopurina y otros.

Ejercicios
1. Enumere y caracterice los procesos que aportan nucletidos al poolde estos compuestos y los sustraen de l. 2. Cul es el papel metablico del compuesto 5fosforribosil -1-pirofosfato en la sntesis de nucletidos? 3.Establezca una comparacin entre la sntesis de nucletidos por recuperacin de bases y la sntesis de novo. 4. Cite los aminocidos que intervienen en la sntesis de novo de nucletidos. 5. ;Cul es el mecanismo mediante el cual los medicamentos que antagonizan con el cido flicoinhiben la multiplicacin celular? 6. Explique cmo se logra la regulacin y el balance en la sntesis de los diferentes nucletidos. 7. Cules son los productos finales del catabolismo de las bases nitrogenadas de los nucletidos? 8. Cite algunas enfermedades producto de alteraciones en el metabolismo de los nucletidos y seale el dficit enzimtico en cada caso. 9. Cite algunos medicanlentos que acten modificando el metabolismo de los nucletidos y seale cul es su mecanismo de accin.

Lasporfitinas son biomolculas que rralizanfunciones coenzimticasy pertenecen alos llamados compuestos tetrapirrlicos,los cuales se encuentran muy distribuidos enla naturaleza y cuyo origen evolutivo se considera antiqusimo. Ciertos tipos de compuestos tetrapirrlicos intervienen en los procesos fotosintticosy son caractersticos del reino vegetal, tal es el caso de las clorofilas y las ficohiiinas de plantas y algas. Un grupode compuestos tetrapidcos, entre los cuales seencuentrala coenzima B,,, parcipa en reacciones de isomerizacin y reduccin de nucletidos, se trata de l&anlos de comna y sirohemo de eucariontes y bacterias. Noobstante,los tetrapirrdes ms difundidosson los queintervienen en reacciones de oxidorreduccin,como los citacromos de la cadena respiratoria, y en interacciones con el oxgeno, como la hemoglobina. En el caso de las algas, estas funciones las Uevan a cabo las hilinas, mientras que en el resto de los procariontes y eucariontes estasfunuonescorresponden al gmpo hemo. Este captulo est dedicado al estudio del metabolismodel grupo hemo. Su inters reside en las importantes y vitales funciones que desempea este compuesto, cuyo eonoeimientoesfundamentalpara la adecuada interpretaciny tratamientomdico de diversas enfermedades en las cuales dicho metabolismo se encuentra alterado.

H-C-C-H H-C,

II

,C-H N

11

Esbiictura y h a 6 1 1de las porfirinas

Las porfinnas, al igual que el resto de los compuestos tetrapirrlicos, tal como indicaesta ltima denominacin,poseen un ncleo central constituido por la unin de 4 de pirrol mediante monocarbonados. ~ e s t n i c t n rbsica tetrapirrlica se denomina p r n a (Fig. 58.1). La presencia a de nitrgeno en estos compnestos explica su estudio en esta seccin. En las porfirinas, el ncleo de porfina presenta diversas sustituciones,lo que da lu=a una extensa famia de compuestos. La poffirina constituyente del grupo hemo es una protoporfirina. Este tipo de porfirina se caracteriza por poseer los siguientes sustituyentes: 4 grupos metilo, 2 @"Pos * o y 2 radicales propinico. Desde luego, la distribucin de estos grupos en h 8 posicionesde sustitucin podra originar una gran cantidad de ismeros. En el hemo, la protoporfirinapresente es la M, cuya disposicin de los snstituyentes SemWsb la figura 58.2. en

Fig. 58.1. Estructura del pirrol y la porfina. El pirrol es un cielo pentagonal que incluye un tomo de nitrgeno y presenta, adems, insaturaiiones. La porfina es el ncleo integrado por la unin de 4 pirroles mediante puentes monacarbonados. Las letras indican la designacin de lar anillos pirrliros y los nmeros sefialan los sitios donde se presentan divenas sustituciones para dar lugar a las portrinas.

LL -

CH,

CH.

CHI
COOH
Protoporfirina IX En el grupo hemo, un tomo de hierro al estado ferroso (Fe") se une, en forma covalente. a los 4 tomos de nitrgeno centrales de la protoporfirina IX. La molcula resulta elctricamente neutra por el desplazamiento de 2 protones de los nitrgenos e centrales. En estas condicions,el tomo dehiemcentral del y p o h e m o p ~ e Zralenciai adicionales de coordinacin que se proyectan por encima y por debajo del plano del anillo. y que posibilitan la interaccin del hemo con otras molculas (Fig. 58.3).

l
1

l i g . 58.3. IC\trurtura del grupo henio. La poi-firina cm5titii!eiitc del grupo hemu er la priitriporlirina I S . 111 &tiirno de hierro \e cniuentra unido a 105 . trmm centrales de ni. I tr6gcno. El Iiicrrri powe una quinla ? w t a %aleiicia\de rrirdinari<in que \e prr>!crtan p i r encima ! por dehaio del plano del anillo. :p'i%ihilitmla intemcci6n con otra5 miil<culai.

Las funcionesde los grupos hemo esin rinculadai con 2 propidade fundamentales. la podhilidad de interactuar con otras molcula^ mediante las ialencias de coordinaci611 del tomo de hierro, y la posihilidad deceder y ganar electrones en forma rerersihle por mediodel trnsito del tomo de hierro entre los estados ferroso (Fe'-)? ferrico iFei-l. En \irtud de estas 2 propiedad%, los grupos hemo participan en funciones hiol6gicac \inculadas con la interaccin con el oxgeno y con la5 reacciones de osidorreducci6ii. La funcin especificaen cada caso se halla absolutamentedeterminada por la protena a la cual se encuentra unido el @upohemo. En los organismos supenore. las heiiioproteinas i d U a n di~enas fiincion6,ralacoinoel ban~porteyalmaoenamiento rnge~io de -Iiaiioglohina ? mioglohina-.la eliminaci6n de perhidos -catalasay prosidasa-.el traiispwte electrnico citcmmns)ylaUdacii,ndii-ectadealgunomurtratos(tnptfarir~ i r r o l a ~ ~ . p
990

Him@nica Mdica

sitesis de porfllinas y grupos hemo

La sntesis de todos los compuestos tetrapirrlicos sigue una va general comn que slo diverge en sus etapas finales de acuerdo con el tetrapirrol ,intetizado (Fig. 511.4). centra remo.^ nnestra atencin en la sntesis del hemo.

Fig. 58.4. lixlucmii general

de la \intcii\ de trtrapirrolcs. La\ etapa, inirialc\ del proceso son comunes a todo\ lo\ letrapirrole\, la* rutas di,crycn e n \u etapa final en drpcndeneia dcltetrapirri,le\perifici, que \e \intetira.

Las sustancias precursoras del anillo porfirnico son el compuesto succinil COA, un intermediario del ciclo de Krehs, y la glicina. El succinil COAaporta sus carhonos al proceso hiosint(.ticoya la vez proporciona, mediantesu enlace tioster, la nica energa que requiere el proceso. Evidentemente, lasntesis de grupos hemo precisa de un ciclo de Krehs funcional y activo. Laglicina contrihuye a la sntesis de porfirinas con sus carhunos y su nitrgeno, esteltimopasaafomar los nitrgenmcentralesdel ncleo tetrapir~ilico. Aqutamhibn se confirma la participacih de aminocidos en la sntesis de otros compuestos nimgenados. Lasintesisdel hemo comienza por una reacciin de condensacin entre el succinil COAy la glicina, lo cual conduce a la hrmacin del cidij delta amino levulnico. El cido alfa amino heta ceto adpico ha sido identificado como intermediario en la reaccin.

CH,
C=O

H C - H

;\cid" alfa amino bcta celo adipicc

cido delta aminc levuliiicn

La reaccih tiene lugar en el interior de la mitocondria y la enzima implicada: amino le\ ulnico sintetasa, requiere del cofactor fosfato de piridoxal !de \Ig2-.

Esta enzima es un dmero formado por 2 subunidades idnticas y, como se ver, tiene un papel fundamental en la regulacin de la sntesis del hemo. La siguiente reaccin tiene lugar en el citosol. El cido delta amino levulnico abandona la mitocondria y experimenta la accin de la enzima delta amino levulnico deshidraiasa, que condensa 2 molculas del sustrato para formar el porfobilingeno.

COOH

C-

Delta amino levulnico deshidratasa

NH2

cido delta amino levulnico (2 molculas)

Porfobilingeno

Obsrvese que en el porfobilingeno ya se encuenira constituido el anillo pirrlico. Adems, estn presenteslas cadenas carbonadas quedarn origen alos sustituyentes de las porfirinas. El primer compuesto tetrapirrlico que se forma en la ruta biosinttica es el nroporfiringeno 111. La reaccin es compleja y en ella se unen 4 molculas de porfobilingeno, y se eliniinan 4 molculas de amonaco.

COOH COOH ;H,

I -

4 NH,

Porfobilingeno (intervienen 4 molculas)

1 Uroporfiringeno 1 1

A: radical de actico; P: radical de propinico Ntese que los sustituyentesdel anillo Dseencuentran invertidos en relacin con el resto. Esta reaccin de condensacin e inversin de uno de los anillos es catalizada por la accin mancomunada de 2 enzimas: la uroporfiringeno 1 sintasa 1 (porfobilingeno desaminasa) y la uroporfiringeno 1 1cosintasa. Se desconoce la manera exacta en queesias 2 enzimas cooperan en esta reaccin, pero se sabe que en ausencia de la cosintasa se forma el tetrapirrol, pero no se invierte el anillo D.

En la reaccin siguiente, tambin en el citosol,la uroporfiringeno descarboxasa ,,t&a la conversin de los 4 sustituyentes acticos en metilos, formndose el eoprOporringeno III.

P M Coproporfiringeno 111 M: radical metilo

Este itimo compuesto ingresa nuevamente en la mitocondria, donde la enzima coproporfiringeno oxidasa descarboxila los grupos propinicos de los anillos A y B, los cuales quedan convertidos en grupos vinilo, formndose el protoporfiringenoM.

Coproporfiringeno 111

Protoporfiringeno IX

bprotoporfirina~seforma la mitocondna a parr del protoporringeno M, en Por la accin de una oxidasa que introduce los dobles enlaces de los puentes monmbonados que unen a los 4 anillos pirrlicos.

Finalmente, el grupo hemo se integra, al incluirse el ion ferroso, en el anillo de la protoporfirina 1X por accin de la enzima ferroquelatasa. Esta enzima se localiza en la membrana interna de la mitocondria y para su accin requiere la presencia de un agente reductor. tal como el cido ascrbico o el glutatin.

En la figura 58.5 se resume la va hiosinttica del grupo hemo.

/
1

~ucciiiil COA -

Glicina

\l'
cido delta aiiiiiio Icviiliiico

tlenic
l',

La regulacin de la sntesis del grupo heino gravita sohre la enzinia delta ainino lerulnico sintetasa. La vida inedia de la enzinia es de aproxiniadaineiite 11 y. conlo sucede coi] otras 1 enzinias mitocondriales, sus genes codificadores se localizan en el niicleo celnlar. por lo cual la enzinia. una vez sintetizada en los ribosonias citoplasniticos, debe ser transportada al interior dela mitocondria. Aunqne se ha planteado un posible efecto inhibidor del hemo sobre la actividad de la sintetasa. la regulacin ni& poderosase ejerce sobre la sntesis? transportede delta aniino lerulnico sintetasa. En efecto. el heino, aun a bajas concentrsciunesinhibe la sntesis de la enzima por iin inecanisino gentico que posiblemente iriclii?~ una niolcnla represora: a concentraciones mayores, el henio inhibe el traspaso de sintetasa desdeel citoplasnia hasta la mitocondria. Aiiihos mecanismos posibilitan ajuste de la velocidad de sntesis a las necesidades celnlares (Fig. 58.6).

Fip. 58.6. Regiilaciiiii de la siiitrrb dcl Iiciiio. El Iiciiio. a l>ai;is cuiicetit~iriolier. repriiiir la siiitesis de dcltn sniiiii, Ir~ialiiiirusiiirrtnsa. a iiia!urPs roiirmiriwioiier Iiloqiira el traiisp o r t r d e la e i i r i i i i a Iiaria l a iiiitoruiidria.

El henio tiene un efecto adicional sobre la sntesis de protenas en los reticulocitos. En estas clulas. latraduccin prcticamente se detiene en ausencia de bemo. El mecanisnio incluye la fosforilaciiireversible del factor de iniciacin 2 (eIF2) (Fig. 58.7). Posiblemente este mecanismo asegure un balance entre la sntesis de apoprotenas (globina)y la disponibilidad de henio.

ATP

A ~ P

Diversas sustancias poseen efectos niarcados sobre la sntesis del henio. .Llguiias hormonas esteroides parecen tener un efecto permisivo sobre la desrepresiii de la sntesisde deltaamino le\uliiicosintetasa. Otras sustancias tienen un efectoestiniulante sobre la sntesis de esta enzima, porque son nietabolizadas cou la participacin del citocromo y,,,una hemoprotena, por lo cual el ingreso de stas al organisnio iliipoiie mayores demandas en la sntesis de hemo. Las sustancias que estimulan as la sntesis de delta amino levulnico sintetasa incluyen dirersos insecticidas. carcingenos Y medicamentos.

Alteradones metablicas de la sntesis de porfirinas

Lasaberaciones metablkas de la sntesis de grupos Iienio se conoren genricamente Conel nombre deporfirias! puede11ser de carcter adquirido -generalniente por efectos t6xicossobre el hgado- o hereditarias. Existen diversos tipos de porfirias heredadas 1 se han propuesto \arias chfficaciOne~para ellas. Aparenteniente esta di\ er~idad ohedece a la enzima afectada en cada caso. Las Porfinas se heredan eii forma autosniica dominante >, aunque afectan todos '~tejidos,susmanifestacio11essoii marcadas en el hgado y el tejido eritropo!tico. iiis 2 & P U k k sintetizadoresde hemo. Las ~iianifestaciones las porfirias pueden afectar de grado uno de estos 2 ltimos tejidos.

En lasdiferentes porfirias se acumulan y excretan distintosintermediarios de la va metablica biosinttica, en dependencia del paso enzimtico afectado. La determinacin de estos intermediarios en la orina y las heces, junto con las manifestaciones clnicas, permiten hacer el diagnsticode la afeccin de que se trate. Como la sntesis de hemo es una funcin imprescindiblepara la vida celular, la mayora de las porfirias, si no todas, responden al carcter heterocigtico del gen defectuoso, dado que la condicin homocigtica es incompatible con la vida. Esta situacin se evidencia porque las enzimas afectadas suelen presentar una actividad que ri aproximadamentela mitad de lo normal. Aunque las porfirias no son enfermedades frecuentes. es posible que se trate de entidadessubdiagnosticadas. Tiene importancia establecer el diagnsticodiferencial con olras enfermedad6 para evitar tratamientos inadecuadose inclusniatrogenia Como las manifestacionesms comunes de las porriasson los dolores abdominalcs,las alteraciones cutneas y las situacionesdemenciales,el mdico general,el cirnjano,el dermatlogoy el psiquiatra deben considerarlas al establecer las posibilidades diagnsticas. A continuacin se dan las caractersticas ms sobresalientesde los principales tipos de porf~rias.

Porria aguda intermitente

Se debe a un dficit parcial (50 %) de la uroporfiringeno I sintasa. Afecta fundamentalmente el hgado, y los pacientes excretan por la orina grandes cantidades de porfobilingeno y cido delta amino lenilnico. El gen se localiza en el cromosoma llq23. Estos compuestos, al oxidarse por contacto con el aire, dan a la orina una coloracin oscura. La enfermedad no suele manifestarse hasta la adultez y transcurre con episodios de dolor abdominal, estreimiento, vmitos y alteraciones psiquitricas. Las crisis pueden ser precipitadas por los medicamentos y sustancias que inducen a la delta amino levulnico sintetasa. No se ha aclarado adecuadamente el mecanismo de produccin de las manifestaciones clnicas.

La causa molenilar de esta enfermedad no est definitivamenteaclarada. Se conoce que se encuentra afectada la funcin que de forma coordinada realizan la uropodringeno 1 sintasa y la uroporfiringeno 111 cosintasa. El resultado de la alteracin es tal que si bien se integra un tetrapirrol cerrado, existe un marcado predominio (de 100 a 1) de los ismeros 1-no hay inversin del anillo D. La enfermedad afecta fundamentalmenteeltejidoeritropoyticoy se excretan por la orina considerables cantidades de los ismeros anormales uroporfiringeno 1 y copropodringeno 1, que poseen una coloracin rojiza y son tluorescentes, lo cual puedeser til en su deteccin. Como en la portina eritropoytica congnita hay una deficienciade gmpos hemo, la enzima delta amino levulnicosintetasa se mantiene inducida, y esto da lugar a una sohreproduccin y excrecin concomitante de cido delta amino levulnico Y porfobilingeno. En esta enfermedadse observan lasmismasmanifestaciones que en la p o m a aguda intermitente, pero a ellas se aade la hemlisisy una marcada fotosensibilidadcutnea Como las personas afectadasson plidas (anemia),huyendelaluz solar(dermatiti5) y muestran tendencia a beber sangre, esto puede haber sido el origen de algunas leyendassobre el vampirismo.

Porrh cutsnea tarda

Este tipo de porfiria se atribuye a un dficit parcial de uroporfiringeno descarbodasa Estcollsiderada como una delas pofirias ms frecuentes,pero debido

996

lirrliLiinkrw

"ariabilidad de su penetrancia, generalmente no se manifiesta de no existir algn

tipode lesin heptica.

El hgado es el rgano ms afectado y presenta, incluso, fluorescencia,debido a la acumulacinde intermediarios.Los compuestos acumuladosson el uroportiringeno y el coproporfiringeno, los cuales se excretan por la orina en forma de las correspondientes uroporfuinas y coproporfrinas,tanto de los ismeros IIIcomo 1. No ,,comn la excrecin de cido delta amino levulnico o porfobilingeno. La manifestacin fundamental de la enfermedad es la fotosensibilidadcutnea. NO existen los episodios agudos de la porfiria aguda intermitente.

Copmpo~B% hereditaria
En esta porfiria el defectoenzimtico radica en un dficit parcial de coproporfiringenooxidasa, lo cual bloquea parcialmente la conversin del coproporfiringeno en protoportiringenoi .Debido a ello, el coproporfringenoIII se acumula y es X exmetado por las heces y la orina; su oxidacin por el aire y la luz confiere a stos un color rojizo. Como est disminuida la sntesis de hemo, la delta amino levulnico sintetasa permanece desreprimida, lo que puede conducir a la produccin excesiva de cido delta amino levulnico y porfobilingeno. Laenfermedad afecta, sobre todo, el hgado y presenta sntomassimilaresa los de Is porfiria aguda intermitentejunto con fotosensibilidad cutnea discreta.

Pomiie variegata
Los pacientes afectados de porfiria variegata tienen disminuida la actividad de poituingeno oxidasa a la mitad delos valores normales. Todos los intermediarios de lava hasta el punto de bloqueo se encuentran aumentados, y se excretan por la orina y Las heces, las cuales suelen estar pigmentadas. Esta situacin metabca puede transcurrir en forma asintomtica y manifestarse d o en determinadas circunstancias como las situacionesde stress. Se produce una fotasensibilidad cutnea similar a la de la portina cutnea tarda.

E t enfermedad se produce por un dficit parcial de la ferroquelatasa,la ltima sa mima que participa en la va biosinttica del hemo. El principal compuesto acumulado es la protoporfirina M, que se excreta por las h q p e m no hay acumulacin ni excrecin importantes de otros metabolitosde la va. La deficiencia afecta todos los tejidos, y los pacientes presentan lesiones cutneas agudas de urticaria cuando se exponen a la luz solar. h e d e n presentarse estados de porfiria adquirida por el efecto txico de dete-sustancias, conio medicamentos (griseofulvina),metales pesados y otros. El tratamiento de las porfirias es sintomtico e incluye la proteccin de la luz Solar cuando hay fotosensibilidad cutnea y la administracin de hematina en los episodios agudos.

Lasdiferenteshemop~te-siguen un esquemacatahlicosimilar,que incluye la Separaei6ndelaparte pmteiica, seguida,generaunente,de su degradacina aminocidos Y la separacin del hierro que se integra al pool de este elemento en el organismo. De multa el desiino y procesamiento metablico de la porcin tetrapirrlica del hano (Fig. 58.8).

da e n aiiii~iticids.el Iiierro se iliicgrii al piiid de crtc clerii~iito. ? la porriiili trlrapirrdlira del Iieriia

El catabolisiiio de las Iieiiioproteiias se Ilexa a cabo en el reticiilo eiidoplsniico (le las clulas reticidoeiidotelials.si bien d e k tenerse en cuenta que la principal Iieiiioproteia catalmbida es la Iieiiioglobuia. de la cual un adulto iioniial c a t a l m b mios 6 g di&aiiieiite. En un iiiicioel Iieiiio -o la Iieiiiiiia prodiicto de su osidaciii- esperiiiieiita el ataqiie del sisteiiia eiiniiitico de la Iieiiio osigeiiasa. La acciii de este sisteiiia requiere S.IDPH !O2. En 18 reaccin se libera el Iiierro !CO. La acciii ejercida sobre el tetrapirrol es esencialnientelamptiira Y o\idaciii del pueiiteiiioiiwarlmiiado entre los aiilos pimlicm A B. locual da origen a un coiiipuesto tetrapirrlicoabierto: la biliverdiiia.

P
Hciiio

.\I

~aenzima biliverdina reductasa, utilizando de nuevo NADPH, rediicr la biliverdina ,b%mbina, compuesto de intenso color amarillo. En el adulto, la produccin diaria de bilirmbina alcaiiza unos 300 mg. m cambios de coloracin que se observan en un hematoma reflejan la conversin se produce en los grupos heiiio de la hemoglobina eutravasada, hasta convertirse eib%mibina E1 metabolismo posterior de la bilirrubina tiene lugar en el hgado, rgano que a travs de la circulacin sangunea. En la sangre, la bilirmbina via,ja unida a la albmina. La incorporacin de la bilirruhiiia al hepatocito se realiza por un sistema de -porte facilitadode gran capacidad. Laexcrecin final de la bilirrubina requiere su conversin en un compuesto mb ,,&ry,por tanto, ms soluble. Estose consigue mediante su conjugacin con el cido - glucurnico. Inicialmente, la enzima uridn difosfato glucuronil transferasa, localirada en el endoplsmico liso, convierte a la bilirrubina en el correspondierite monoglun~~do.

UDP UDP- glucurnico

Bilirrubina

Monogliicuriiido de bilirrubina

Eldiglucur~do bilirrubiiia se forma por accibn de una dismutasa que rataliza de latransferencia de cido glucurnico entre 2 iiiolculasdel monoglucurnido.

Labbimaconjngada essegregada hacia la bilis por un mecanismode transporte activo. Por esta va, este coinpuesto alcanza el intestino, donde experimenta la accin deenzimas bacterianas,formndose diferentes tipos de compuestos (urobilingeno, urobina y otros) que se excretan fundamentalmente por las heces fecales. El conocimiento preciso de las diferentes etapas del cataholismo de los grupos hem0 permite hacer una adecuada interpretacin de las manifestaciones clnicas de akunasenfennedades que transcurren con alteraciones de esta vid nietablica. Estos WPeetosSrn considerados con mayor detalle en el captulo 75.

Las poai5nss son biomol&ulas que realizan diversas funciones, entre las C k Usobresden, por su amplia distribuci611, los grupos hemo que paricipan en + -n8 0e de oxidorreduccin y en interacciones con el oxgeno. h o esta5 mnstituido por la protoporriaa M -unndeo tetrapirrlim porrioa, con una distribucin caracterstica de los sustituyentes- y om b o de hierro al estado fermso (Fe) centro de la molcula. El tomo de en el --ntrsl mnstituye la porcin ms activa de la molcula, ya que segn el tipo la cual participa puede sufrir cambios en su estado de oxidacin O &"eefeib

Monoglucurnido de bilirrubina

de~ilinubina

interaeeionar con otras molculas como el oxgeno. El tipo de hincin especca realizada por el gmpo hemo est determinada por la apoproteina a la que se encuentra d d o . En los organismos superiores, las hemopmtenas participan en el transporte de oxgeno, el transporte electrnico, la eliminacin de per6xidos y la oxidacin directa de algunos sustratos. Lcs preninores del gmpo hemo son la giicina y la s& u COA. En la reaeein inicial se f o m el cido delta amino levulnico, y 2 molculas de ste se unen para formar el p o r f o b ' i n o . A p d de 4 unidades de poiobilin6geno se integra un compuesto tetrapirrlico: el u~oporria6geno el cnai SI& modificacioness u d Iii, vas basta ser mnverdo en pmtopoflrina E Finalmente, la enzima ferroquelatasa . une un tomo de hierro a la pmtoporfirina, y queda integrado el grupo hemo. La sntesis del hemo resulta regulada por el compuesto final delana,el propio hemo, el cual inhibe la sntesis de la enzima delta amino leniliico sintetasa y tambin bloquea su transferencia desde el citoplasma a la mitocondria. Las alteraciones metabcas de la va de sntesis del hemo dan lugar a enfermedades denominadas p o r i k k . Existe un gmpo de porrias hereditarias provocadas por el dficit parcial de alguna de las enzimas del proceso de sntesis. Es posible distingui~ entre las diferentes porrias hereditarias, teniendo en cuenta los datos clnicos y la excrecin urinaria y fecai, que suele producirse de algunos intermediarios de la va o sus derivados. Como las porfinas pueden producir dolores abdominales, dermatitis y trastornos mentales, es necexrio el diagnbtico diferencial con diversas enfermedades atendidas por el mdico general, el cirujano, el psiquiatra o el dermatlogo. La degradacin de las bemoprotenas se inicia con la separacin de la parte pmteca, que se caiaboliza hasta sus amho8ados constituyentes, y la separacin del hierro, el cual se integra al pool de esta sustancia. El grupo tetrapirrlico correspondiente a laprotoporrina M sufre una apertura entre 2 de sus anillos y experimenta, adems, reacciones de reduccin que terminan por convertirlo en un tetrapirrol lineal de intenso color d o : la bimibina Desde los rganm donde se produce, principalmente los del sistema retculo endoteal, la b k V alcanza el bgado a travs de la circulacin sanpunes, donde viaja unida a la protena albmina En el bgado, la V i b i n a resulta conjugada al dcido glucur6uico y excretada por la bilis. Ya en el intestino, el glucurnido de bilimbina experimenta la accin de enzimas bacterianas, dando lugar a diferentes pigmentos que se excretan, sob* todo, por las heces fecaies. El metabolismo de la bilirrubina y la excrecin de sus derivados se encuentran alterados en algunas enfermedades, por lo cual su conocimiento resulta de inters mdico.

Ejercicios
1. Describa la estructura general del grupo hemo. 2. Cules son las funciones de las hemoprotenas? 3. Cules son los compuestosprecursores en la sntesis del hemo? 4. Explique cmo se lleva a cabo la regulacin de la sntesis de grupos heni. 5. Haga una comparacin entre las caractersticasde la porfiria aguda iiiterniite~lte!' la porfina cutnea tarda. 6. A qu podra atribuirsequelas porfirias ocurran por dficit parcial de determinase das eozimas y no por su dicit total? &Cmo explica esto desde el punto de vista gentico? 7. Cul es el principal producto del catabolismo de los grupos hemo? 8. Cmo ocurre la eliminacin de la bilirruhina del organismo?

Resumen de la seccin

E1 metabolismo de los compuestos nitrogenados de bajo peso molecnlar reviste

gran importancia, dada, en primer lugar, por el destacado papel que en los seres vivos
desempean las biomolculas que poseen nitrgeno en su estructura. A pesar de que el nitrgeno es un elemento relativamente abundante en la naturaleza,los organismossuperiores son incapaces de utilizar las formas inorg~cas este de elemento para sintetizar sus compuestos nitrogenados. Las relacionesde dependencia queseestablecen entre diferentes organismos vivos en relacin con la utilizacin y el metabolismo del nitrgeno, constituyen el ciclo de este elemento, y su aspecto ms sobresaliente es la dependencia que tienen los animales en relacin con las plantas para la obtencin del nitrgeno metablicamente til. El nitrgeno aminoacdico representa la forma ms importante de obtencin de este elemento para los mamferos, mire ellosel hombre. De aqu que en stos, la mayor parte de los compuestosNtr~genados sean sintetizadosa partir de los aminocidos. Los aminocidos se obtienen de la digestin de las protenas de la dieta. Las protenas que ingerimos experimentan la accin de enzimas proteolticas digestivas Proteinssas y peptidasas- que las degradan a sus aminocidos constituyentes, los cnalesson absorbidos por la mucosa del intestino delgado, con la participacin de mecanismos de transporte activo. Una vez absorbidos, los aminocidos son distribuidos ~orlacircuiacin todo el organismo. Ya incorporados, pasan a formar parte del pool a de estos compuestos. Este pool se encuentra en un estado de equilibrio dinmico y reflejalas relaciones entre procesos que le aportan aminocidos -absorcin intestinal, a@holismo de protenas hsticas y sntesis de aminocidos- y otros que le sustraen a&06cidos -sntesis de protenas, sntesis de otros compuestos nitrogenados y fatabolismo de los aminocidos. Existe un grupo de reacciones generales de los aminocidos que tienen gran h ~ e n e l m e t a b o l i s mde estos compuestos. Entre las ms Sobresalientes estn la ~ desaminacin oxidativa y no oxidativa, la transaminacin y la descarboxilacin. La trmsamlliacin establece importantes relaciones metablicas entre distintos & &o. @ ds ~ s ttipo de reacciones, acopladas con la catalirada por la deshidrogee -del ghtsmico -principal enzima que cataliza desaminacionesoxidativas-, posibititalase~mcin nitrgeno de la mayor parte de los aminocidos, etapa prcticadel menteobligadaen su metabolismo. La biOSIteSis de los aminocidos es un proceso que presenta limitaciones en los -~~eriore~. Por carecer dedeterminadossistemasen-ticos, ellos slo pue*sinte* determinados aminocidos a los cuales se les denomina no esenciales, en

contraste con los llamados esenciales, que son aqullos que no pueden ser sintetizados por el oqanismodado, y cmstituyen, por tanto, requerimientos nutricionales. El cataholismo de los aminocidos cumple funciones eminentemente energcticas. Este proceso aporta alrededor del 20 lu de los requerimientos de energa de nuestro organismo. Si hien cada aminocido posee vas degradativas que le son propias, l a estrategia general de estos procesos consiste en l a separacin del nitrgeno y la convemin de l a cadena carbonada residual en alguno de los m e t a h l i t o s intermediario5 de las vias metahlicas de los glcidos y los lpidos, tales como el cido pirvico, el oxalactico y el acetilactico, entre otros. I'or esta razn, el rendimiento energ&o de 10s aminocidoses variable, pero su valor calbrico promedio es de 4 kca1.g'. E l nitrgeno que resulta separado de los aminocidos durante su metaholismo H, origina N , compuesto cuya acumulacin puede ocasionar serios daos a l organismo, en especial a l sistema nervioso central, y de ah la importancia de su eliininacih. Aunque el NH, puede ser excretado directamente p o r el rin, l a principal va para desembarazarse de esta sustancia, en el ser humano, es su conversibn en urea y su posterior excrecin urinaria. L a sntesis de urea tienelugar exclusivamente en el h p d o , mediante u n proceso cclicoenel que,deforma indirecba,Z molculas de NH, y una de CO, son amvertidas en una molcula de urea. Las alteraciones de este proceso, hien por dao heptico o por H, dficit enzimtico, ocasionan l a acumulacin de N , l o cual llega a prnducir alter;iciones del sistema nervioso central con diversas manifestaciones de ndole neuropsiqiiitricas. Adems de la urea, por la orina se eliminan algunos o t r m compuestos nitrogemdos de excrecin, tales como el cido rico, l a creatinina y lcs p i p e n t o s hiliares. L a dosificacibn deestassustancias nitrogenadasen l a orina es degran utilidad en medicina. E n t r e las sustancias nitrogenadas que se sintetizan a p a r t i r dc los aminoici<los ocupan u n lugar destacado los nucletidos. Existen 2 vas fundamentales p a r a l a sntesis de nucletidos: la sntesis de novo, que consiste en l a formacin de l a estructura del anillo heterocclico de la hase nitrogenada a partir de determinados precursores, y las llamadas vas de wcuperacibn de hases, que consisten en l a integracin de los nucletidos u t i l i m n d o hascs preformadas. Desde luego, las vas de recuperacin de hases constituyen prwesns iixk econbmicos que l a sntesis de novo. L a sntesis de novo de los nucletidos es un desbacado ejemplo de canalizacim metahlica. Esta canalizacin eleva l a eficiencia de estas vas y est dada p o r l a presencia de enzimas multifuncionales y l a asociacin de algunas de ellas entre s. El conocimiento del metaholismo de los nuclctidos es de g r a n interks mdico, dado que en ste se presentan diversas alteraciones p o r d6ficit enaimtice y porqiie numerosas sustancias txicas o medicamentosas ejercen sus efectos por nicdio de sil influencia en este metaholismo. lilcataholismo de los nucletidus consiste, esencialmente, en l a separaciiin de 1 : 0s d constituyentes de estos compuestos -hase nitrogenada, p e n t o ~ y grupos fi14iattw y V a ulterior d e g r a d a c i h del anillo de l a base. E n este sentido es de destacar que las hases purnicas en su cataholismo originan el compuesto cido rico. En determinadas afecciones conocidas genricamente como gota, la acumulacin de cido rico y su de116sito en forma de cristales ocasiona severas lesiones, sohre todo de locali.mcii>n a r t i w l a r y renal. Otros tipos de a>mpuestnsnitrogenados de gran importancia hiol6gica son los wpos hemo. Ellos estn constituidos p o r el anillo tetrapirrblico de l a protoporfirin;~ 1X unido a u n ion fern~so (Fe"). Los grupos hemo son grupos prostcticos de las denominddas henwpn~teiias, que realizan diversas funciones de transporte y eiizimticas. las L a prntoporfrina 1X sesintetiza a p a r t i r de la succinil COA y l a glicina,en una serie de reacciones que tienen lugar en l a mitocondria y el citnsnl. U n a vez integrada la pn~toporfirinaIX,sii unin con el ion ferrosoda lugar a l grupo hemo.Sedenonlinan porfirias a u n grupo de errores congnitos del metaholismo, ocasionados p o r dficit

enzimtic~ la ruta de sntesis de grupos hemo. Estas afecciones suelen ocasionar de lesiones drmicas, abdominales y alteraciones psiquitricas, o combinaciones de ellas. En la degradacin de las hemoproteinas se produce la separacin del grupo hemo vla wisin de ste en sus 2 componentes. La agrupacin tetrapirrlica de la protoporfirinaes convertida en hilirruhina, la cual, una vez conjugada al cido glucurnico en el hgado, se excreta por la bilis. Es conveniente recordar que los aminocidos constituyen el centro del metaholismo de los compuestos nitrogenados de hajo peso molecular. Si hien todos los aminocidos participan en las vas del metaholismo nitrogenado, algunos de ellos tienenun papel muy destacado. En particular se destacan, por su activa participacin en el metabolismo, los cidos glutmico y asprtico y sus correspondientes amida5, as como la glicina y la alanina. La riqueza del metaholismo de los compuestos nitrogenados se expresa tamhin en las numerosas relaciones interorgnicas que se estahlecen en el organismo en relacin con este tipo de compuestos. De particular inters resulta el relevante papel del hgado en esta rea metahlica y las relaciones que se estahlecen entre este rgano y otros, sobre todo con el msculo y el cerehro. Por Itimo,se dehen sealar las relaciones estrechas que se estahlecen entre el metabolismo de los compuestos nitrogenados de hajo peso molecular el de los glcidos y los Lpidos, dadas, sohre todo, por la existencia de metaholitos comunes y la contribucin de estas diferentes reas metahlicas a la formacin de compuestos orgnicosde relativa complejidad.

Introduccin a la seccin
- studiar la integracin del metabolismo intermediario y su regulacin en un
organismo pluricelular requiere como premisa conocer las distintas formas de comunicacin entre las clulas de ese organismo, de otra manera no es posible comprender cmo se establece la integracin ni la regulacin metahlicas, ya que ambas se hallan en funcin del organismo como un todo. Esta seccin se inicia con un captulo que sita al lector ante los diferentes medios de comunicacin que existen entre las clulas. De ellos, requieren mayor extensin los que permiten la comunicacin a distancia, sobre todo el estudio de las hormonas, porque en el captulo 64 se trata la bioqumica del sistema nervioso, que es la otra forma de comunicacin a distancia. debido La accin hormonal ES objeto de atencin en el captulo siguiente, es decir el 60, aqueel sistema endocrino noslo representa un preri~quisito estudiar laintegracin para y la +acin del metabolismo,sinoquepor smismosns trastornos originan un conjuntode enfermedadesque constituyen toda una rama de la medicina: la endocrinologia.La base hioqumica de los mecanismos fundamentales por medio de los cuale se ejerce la accin hormonal constiiuye el contenido central de este captulo. El captulo 61, tercero de la seccin, se ocupa del tratamiento de los distintos tipos de mecanismos que pueden intervenir en la regulacin del metabolismo. Se unifica aqu

J<

lo esencial de las formas de control metablico que han sido estudiadas en el libro y por primera vez se presentan otras -al menos con la ptica de la regulacin metablicay, sobre todo, este fenmeno bioqumico se aborda globalmente. Ello resulta imprescindible por la trascendencia e importancia que ste tiene para la comprensin de las bases moleculares del funcionamientodel organismo del ser humano, que es, en definitiva, uno de los objetivos fundamentales de la bioqumica mdica. Con estos antecedentes, la seccin puede, finalmente, esclarecer con precisin el concepto integracin metahlica, las formas en que se manifiesta y susignificado para la supervivencia, y exponer en detalle ejemplos concretos de situaciones comunes que le permitan al lector hacer el anlisis de cualesquiera de otras situaciones. As podr comprobar su grado de comprensin de la manera en que la integracin y la regulacin del metabolismo operan en realidad. De todo esto se ocupa el ltimo captulo de la seccin.

Una de las caractersticas que distinguen a los organismos pluricelulares de los unicelulares es la comunicacin entre las clulas que los componen. La comunicacin es imprescindible para que el organismo pluriceliilar responda como un todo nico anteestnulosinternos y externos: es primordial en el desarrollo del organismo,durante la embriognesis y la diferenciacibn celular, durante el control del crecimiento del organismo, en la multiplicacjn de sus clulas y en la coordinacin de una actividad cualquiera. Incluso existe comunicacintambin en la diminacin de tejidos daados y muertos, de los cuales se liberan seales que atraen a clnlas especializadaspara que las otras sean eliminadas. Delo anterior se desprende que son mltiples las seales que pueden estimular, de d i f e r e n t e s f o q a un organismopluricelular,y la5 clulas de este orgaanisnio reaccionan anteesas seales de acuerdo coi1 su especializacin. La informacin recibida por las primeras clulas se trasmite procesada al resto de las clulas del organismo y cuando esas otras clulas reciben esa inforniaciii, ellas a su vez responden. As se Iiabr cumplimentado la coniunicacin intercelular. Toda comunicacin compl~ta tiene en general un emisor, que trasmite una seal, un receptor que recibe, procesa y responde a la iiifornmcin captada mediante otra seal, y esta segunda seal respuesta es recibida por el emisor original (Fig. 59.1). Muchas comunicaciones celulares tienen todas estas etapas. Otra? veces, aunque no se encuentran presentes todos los componentes de la coinunicaciii de forma evidente, existeun intercambio entrelas clulas, que de una forma u otra, las relacionan.

[;;&A

-Seal,
1

Receptor Respuesta
Fig. 59.1. 1:tapa de 1s euniunicaci6ii rclu.
lar.

El organismo pluricelular de los mamferos es muy coniplejo. Se estima que por la importancia y complejidad de las comunicaciones intercelnlares,una gran parte de sus genes estn involucrados en estos procesos.

Como se trat en el captulo 4, las clulas de los organismos pluricelulares estn organizadas en tejidos, diversos tejidos forman los rganos, y los rganos se renen en aparatos y sistemas. Para que las clulas de un organismo respondan armnicamente como una unidad, existe una jerarqnizacin entre los sistemas; as, el sistema nervioso central es el que ocupa el nivel jerrquico superior. Se puede considerar que en los organisn~os pluricelulares existen 3tipos de seales que estimulan,al alcanzar su nivel correspondiente,las diferentesclulas del organismo y as logran fa comunicacin entre ellas; stas son las hormonas, los mediadores qumicos locales y los neurotransmisores. En este captulo se tratar, en general, de la comunicacin que existe a travs de estos 3 tipos de seales y al final se mencionarn algunos aspectos de los mediadores qumicos locales. Los neurotransmisores se presentarn con mayor detalle en el captulo 64. A las hormonas, en especial, dedicaremos el siguiente captulo.

Evolucin de la comunicacin intedular

El estudio de organismos inferiores nos ha permitido conocer cmo es la comunicacin intercelular primitiva, y este conocimiento nos ha posibilitado inferir las ventajas que favorecieron la evolucin de los organismos monocelulares a los ptuncelulares. El estudio de micobacterias, formadas por clulas procariotas, muestra como la convivencia en grandes grupos favorece la autoexistencia. En el captulo 4 se describieron las etapas por las que transcurren estos organismos cuando se les h u t a el alimento. Individualmente, cada una de estas clulas digiere las macromolculas del medio al verter sus enzimas al exterior, y se nutre de los productos de esta hidrlisis. La nutricin de cada una de estas clulas se favorece en extremo si muchos de estos microorganismos se encuentran reunidos, pues as la concentracin de las enzimas es elevada y se facilita la digestin de las macromolculas. Cuando las condicionesdel medio son desfavorables -escasez de nutrientes-, vemos cmo ellos se agregan,se forma una especie de botn y allse enquistan hasta que de nuevo aparezcan condiciones favorables de nutricin en el medio. El beneficio de esto resulta evidente, pues al desenquistarse, las niicobacterias se encuentran agnipadas y la digestin de los alimentos desde un comienzo es fcil, al alcanzarse rpidamente una concentracin enzimtica elevada en el medioextracelular. Se conoce que uno de los productos que las clulas segregan al medio se parece a los componentes del tejido intercelular de un organismo pluricelolar y que esta sustancia es una de las que causa su agregacin. En este ejemplo se observa la ventaja de la pluricelularidad para la conservacin de la especie. Tambin en el captulo 4 se describe el comportamiento de otro organismo monocelular eucariote que se agrega cuando las condiciones del medio son desfavorables: el Dictymtetium discoideuni.Su estndioha brindado mayores detalles en cuanto a las seales que se establecen entre ellos y que parecen ser importantes en el mecanismo dela agregacin. Una de ellas es el AMPcclico (3' -5 ' AMP). Con estos ejemplos sencillos observamos que en la evolucin hacia la pluricelularidad se requiri,al menos, de productos extracelulares de unin entre Las clulas, y de seales necesarias para la produccin de respuestas especficas que unieran en su accin a un conjunto de clulas.

Comunicacininterceluiar
Las clulas de los organismospluricelularesse comunican entre s mediante seales (Fig. 59.2). A veces una sena1emitida por una clula puedeser captada por lamayora de las clulas de ese organismo. Otras veces, la seal es captada slo por aquella clu!a que tenga un receptor especfico que reconozca la seal; sta es la clula diana.

Q Seales inespecficas

Seales especficas

Fig. 59.2. Comunicacin entre las clulas. Las clulas liberan seiiales. Algunas seiiales son captadas por muchas clulas de forma inespecfica; otras so? captadas por determinadas clulas (1, 3, 4) que tienen el receptor especfico para la seal. Estas sun las clulas diana.

Tipos de seaies
Podemos clasificar las seales que llegan a las clulas de diversas maneras. Una clasificacin se basa en el origen de la seal; as las seales se pueden dividir en externas e internas.

Clasicaci611 las &es de

en externas e internas

Las seales externas pueden ser fsicas o qumicas. Las fisicas son las ondas ~umin~sas, sonoras, la temperatura y las presiones. las Las qumicas, de variadsimas estmcturas, pueden presentarse en forma de gases, disueltas en lquidos -o ellas mismas ser lquidos- o slidas. Son seales externas las que estimulan los rganos de los sentidos como la vista, el olfato, el odo; y los corpsculos sensitivos al calor, el fro y el tacto, entre otros. Tambin a travs del tubo digestivo son captadas seales que nos llegan del medio externo por los diferentes nutrientes. A todas estas seales puede el organismo responder Como un todo; un ejemplo se muestra en la figura 59.3. Jenupnizaci611de los sistemas de seales. En la figura 59.3 se observa cmo despus de sentir una sensacin de calor intenso, el organismo reacciona coordinadamente tapndose la cara y evitando un posible peligro de quemarse. En este movimiento se coordma todo el organismo, y esto es posible por la jerarquizacin de 10ssistemas de seales.

Fig. 59.3. E~ttnuloexfci'no y respuesta. 41 sentir el intelm calor y ver el fuegn sc produce una respuesta coor. dinada. de pmtercin y alerta.

La sensacin de calor y la visin del fuego recibidas por los rganos de los sentidos enviaron seales elctricas al sistema nervioso central. ste,a su vez,alert a varios sistemas, entre ellos al muscular, a travs de los nervios, para realizar los movimientos de defensa necesarios. Por otro lado, alert al organismo de una posible situacin de peligro. Se enviaron seales al hipotlamo, el que liber neurohormonas. Escojamos una de ellas como ejemplo: se liber la corticotropina -factor de liberacin de la ACTH- que pas a la sangre y lleg a la hipfisis, produciendo all lasecrecin de la ACTH Oiomiona adrenocorticohwpa). Esta hormona, tambin por va sangunea, llega a sus clulas diana, a las clulas de la corteza soprarrenal. En estas clulas activan la sntesis de las hormonas glucocorticoides y activan su liberacin. El cortisol, una hormona glucncorticoide,por va sanpnea tambin, llega al hgado y al tejido adiposo, y produce en el primero la activacin de la glucogenlisis y la gluconeognesis, y en el segundo la activacin de la liplisis. De modo que si el organismo necesita energa, de inmediato est disponible.

Sealesinternas

Las seales internas son menos variadas, en su inmensa mayora son seales qumicas. Por su estructura pueden ser aminocidos. derivados de aininocidos, pptidos, protenas, derivados de cidos grasos, esteroides y otras.

Clasicacin de las seales en hormonas, mediadores qumicos locaies y neumtransmisores

Otra forma de cla~ificar seales internas es de acuerdo con el tipo de clula que las va a liberar laseal y al tipo decomunicacin intercelular que va a llevarse a cabo. De esta forma se clasifican en hormonai,mediadores qumicos locales y neurotransinisorm. Generalmente, las hormonas son segregadas por clulas endocrinas, pasan a la sangre y ejercen su accin a distancia; el neurotransmisor es liberado por una clula nerviosa hacia el espacio sinptico,y su accinlaejerce acortadi%tancia.Los mediadores qumicos locales son liberados por casi todas las clulas del organismo al medio extracelular y son captados por las ctlulas vecinas, por lo que la comunicacin se realiza tambin a corta distancia. Se ver primero esta otra clasificacin de las seales y luego se vern los tipos de comunicacin.

William Bayliss y Ernest Starling, en el ao de 1902, fueron los primeros en trmino hormona, que deriva de una raz griega que significa excitar, despertar, pues en sus investigaciones descubrieron que ciertas sustancias actuaban de esta forma. Ellos trabajaban con la hormona secretina del duodeno, que actuando sobre el @creas causaba la liberacin de las euzimas digestivas. De los experimentos que ellos realizaron deriv el concepto de hormona. Segn el concepto original, las hormonas son sustancias producidas en gl&ndulasespecficas, segregadas a la sangre y transportadas hacia varios rganos especficos -los rganos diana-, donde se las reconoce y se activan determinados procesos. Poco tiempo despus se conoci que algunas tambin podan ejercer efectos inhibitorios. Otros conocimientos aportados por la ciencia acerca de las hormonas fueron que: actan en muy pequeas cantidades, su vida media en la sangre es muy corta, hay mecanismos especficos que las inactivan, y su accin es la de regular procesos especficos ya existentes en las clulas y en esta regulacin intervienen procesos de amplificacin. Como ejemplos de hormonas podemos citar la insulina, el cortiso1,el glucagn y la ACTH entre muchas otras. El conceptode hormona debe contener los aspectos que anse mantienen comunes a todas ellas, y los cuales son:

1.Presentan triple especificidad, pues son sintetizadas por tejidos especficos,reconocidas por clulas especficasy, adems, provocan una determinada respuesta. 2. Actan en pequeas cantidades. 3. Actan sobre procesos ya existentes en los tejidos al regular la actividad o la cantidad de las enzimas. 4. Se produce, en su mecanismo de accin, una amplificacin de la seal. 5. Noes continua su sntesis y secrecin, y estn sujetas a regulacin. 6.Esmny corta su vida media y existenmecanismos que las inactivan.

Mediadores gunicm locales

Los mediadores qumicos locales son secretados por clulas de un tejido, y sin llegara la sangre difunden y ejercen su accin sobre clulas vecinas. Estas sustancias tienen una vida media muy corta. Existen muchos tipos y podemos citar, entre otros, los factores de crecimiento, los interferones, la histamina y las prostaglandinas. Todos estos son considerados por otros autores como hormonas locales, ya que presentan caractersticas comunes con las hormonas, aunque no son segregados por rganos endocrinos, sino por casi todos los tejidos; su accin la ejercen localmente sin ser transportados por lasangre y no se almacenan. Estas seales se tratarn brevemente al final del captulo.

Los neurotransmisores intervienen en la comunicacin, en la que la clula emisora

es una neurona y la otra clula puede ser o no otra neurona. En ambos casos, la

comunicacin se establece a travs de una sinapsis. Si la clula receptora es Otra neurona, por lo general se produce la transmisin de un impulso nervioso; pero Si la Otra clula no es una neurona, puede producirse movimientosi la clula es muscular, o una secrecin si la clula es endocrina. Ejemplos de neurotransmisores son la acetil Colina Y las catecolaminas (CA) -como la noradrenalina y dopamina- la serotouina y algunos aminocidos y derivados -como el cido glutmico, la glicina y el cido gamma amino butrico. Los neurotransmisores sern explicados ms ampliamente en elca~hilo que trata acercadel sistema nervioso. 64,

Las fronteras entre estas 3 seales a veces no son tan precisas. Los avances en el desarrollo tecnolgicoy en los conocimientos han demostrado que todas las hormonas no se cien a la definicin anterior y que se pierden un tanto las fronteras entre ellas, los mediadores qumicos y los neurotransmisores. Esto es as debido a que algunas hormonas no se sintetizan en un tejido glandular, sino queson propias de tejidos no glandulares; otras, no se transportan por la sangre, sino que difunden a tejidos vecinos a travs del espacio intercelular -caracterstica de los mediadores qumicos-; por otra parte, se ha visto que ciertos neurotransmisores tambin ejercen su efecto como las hormonas, y que el tejido nervioso produce sustancias que actan como las hormonas: las nenrohormonas. Por todo lo anterior debemos concluir que en esta clasificacin, como en muchos aspectos en los quese tratan de encasillar las molculas o los procesos biolgicos, esto no es posible y se cumple la excepcionalidad como principio.

Tipos de comunicacin intercelular

Cuando se describieron los organismos pluricelulares en el captulo 4, se clasificaronlas comunicaciones de acuerdo con la distancia entre la clula emisora y la clula receptora, en comu~caciones corta y a larga distancia. a

Comunicacin a corta distancia

La comunicacin a corta distancia se realiza directamente por la trasmisin de seales elctricas o qumicas entre 2 clulas contiguas a travs de canal es,^ tambin por intermedio de una sinapsis. En este tipo de comunicacin, a corta distancia, intervienen diferenciaciones de la superficie celular: una de ellas es la unin en hendidura (gapj u n c t h s ) que se describe a continuacin, y otra es la sinapsis. En la primera, la seal pasa a travs de un poro o canal y en lasegunda, la seal es liberada por la clula emisora y llega a un receptor situado en laclula receptoraatravesando un espacio muy corto, el espacio sinptico. La sinapsis se describe ms adelante.

Unin en hendidura
La comunicacin por canal es un tipo decomunicacin celular a corta distancia, se establece mediante la llamada unin en hendidura o nesus, y se realiza entre 2 clulas vecinas. Una parte dela membrana plasmtica de ambas clulas se encuentra unida por un canal formado por complejos de protenas que parecen estar presentes en las membranas de ambas clulasadyacentes. Secreeque estoes as ya quesi estas clulas aisladas son puestas en contacto, sin que medie sntesis de protenas y slo por la cercana entre ellas, se forma de inmediato el canal (Fig. 59.4). La distancia que queda entre las clulas es de 2 a 4 nm, y al micrycopio electrnico las protenas se muestran con una disposicin hexagonal que deja un canal en el centrode 1a 2,s nm. Usando molculas marcadas de diferentes tamaos se ha podido comprobar que por estos canales pasan sustancias con dimetros de 1,snm. Adems de existir una comunicacin qumica a travs de estas hendiduras, tambin ocurre una comunicacin de iones y una comunicacin elctrica. La comunicacin por los nesuses muy importante en clulas en diferenciacin durante la embriognesis, pues sustanciasde pequeo tamao indicadorasde crecimiento o de diferenciacin pueden pasar entre ellas y as mantenerse informadas. La comunicacin elctrica de este tipo es importante, por ejemplo, entre las clulas del tejido cardaco.

Las sealesespecficasutilizadas en la comunicacin a distancia son las hormonas, y las clulas que captan estas seales y que resultan estimuladas por ellas son las clulas diana, las cuales contienen los receptores que reconocen las seales especficas.

Receptores
Enla comunicacin celular especfica, ya sea la seal una hormona, un mediador qumico local o un neumtransmisor, ya sea la comunicacin a corta o a larga distancia, es imprescindible que la clula reconozca la seal. Este reconocimiento lo realizan protenas llamadas receptores. Un esquema sencillo de un receptor de membrana se puede ver en el captulo 20. Cuando se comenzaron a investigar, los receptores fueron dificiles de identificar, aislary caracterizar, pues la cantidad que existe de cada uno de ellos en una clula es poca. Si consideramos el total de receptores que tiene una clula, stos se corresponden con menos del 0.01 % de la masa celular. Sin embareo. con las tcnicas de la ingeniera gentica,grandes avancesseprodujeron en este campo, al poderse donar al gen o genes quecodifican el receptor, y asobtenerlos en cantidades suficientespara poder estudiar cada uno de ellos. Pueden sealarse algunas caractersticas comunes a todos los receptores. Todos son protenas, tienen un sitio especfico por el cual se une la seal o ligando, cuando ocurre la unin ligando-receptor se desencadena un cambio en una parte del receptor que produce una respuesta en la clula: la regulacin de un proceso ya existente. La respuesta que se pmduce en la clula es mucho m& amplia que la que se correspondena con una relacin de una seal-una respuesta, por lo que implica una amplificacin de esta ltima.

Procesosregulados por los receptores

Los receptores son diversos,sin embargo pueden resumirseen 3 los procesos que ellos regulan; muchos de los receptores regulan los 3 procesos:

1.El pasode sustancia a travs de un canal inico. 2. La actividad cataltica de una enzima. 3. La transcripcin de determinados genes.

Receptores hormonales
Los receptores hormonales se dividen, por su localizacin celular, en 2 gmpos, los de memhrana piasmtica y los iniracelulares.El glucagn y lainsulina tienen receptores demembrana, y el receptor del corsol es intracelular. Esta localizacinse corresponde con las caractersticasesbuchuales de las hormonas. Las hormonas que por su estnidura y soluhilidad pueden atravesar la membrana plasmtica se unen a receptores intracelulares, y las hormonas polares y grandes que no la pueden atravesar tienen receptores en la membrana plasmtica.

Receptores hormonales intrace1ulares

Las hormonas estemides y susderivados, las hormonas tiroideas y el cido retinoico son las seales que tienen receptores intracelulares. Estos ligandos son generalmente insolubles en solventes acuosos, pero sobre todo pueden atravesar la membrana plasmtica y unirse a sus receptores dentro de la clula.

La mayorade estos receptores son hormonales, y es por esto qnese tratarn ms mpliamente en el captulo siguiente,al verse los mecanismosde accin delas hormonas.

~e~ptores membrana plasmtica de

Los receptores de membrana son protenas o glicoprotenas transmembranales. podemos sealarles 3 dominios, uno externo a la membrana, en el que se encuentra el sitio especfico por el que es reconocido el ligando; otro se corresponde con la zona queatraviesa la membrana, el dominio transmembranal; y el tercero, el citoplasmtico que es por el que se lleva a cabo la accin del receptor. Los Ligandos que se unen a estos receptores pueden ser hormonales, mediadores qumicos locales o neurotransmisores y, adems, tambin estimulan a receptores de este tipo algunas seales fsicas, como la lw o los olores. A semejanza con las enzimas, la unin del ligando al receptor acta como un regulador aloestrico, y el cambio conformacional que se produce en el receptor repercute en el dominio intracelular, lo que provoca la regulacin de un proceso celular. La diferencia entre los receptores de membrana existentes radica en su estructura, y en el mecanismo asociado con la ebuctura por el cual regulan el proceso o los procesos celulares sobre los que actan. Si nos basamos en esta relacin estmctura-funcin, los podemos clasificar en 4 tipos: 1. Son canales inicos. 2. Se acoplan a protenas G trimricas. 3. Tienen una actividad cataltica en su dominio intracelular. 4. Se acoplan con enzimas que regulan protenas.

Receptores de membrana plasmtiea que son canales inim

Estos receptores se encuentran fundamentalmenteformando parte de la trasmisin SinpOca. Se hallan en lamembrana passinpca y son canales regulados por neurohmsmisores: la acetil colina, el cido gamma amino butrico, el cido glutmico y la glicha. Se tratarn en el captulo 64.
Reeeptore8 de membrana plasmiitica que se acoplan a protenas G Los receptores de membrana ligados a protenas G pertenecen a una gran familia
de receptorescon homologas eshucturales; ya se h n descubiertoms de 100miembm a

de esta familia. Son glicoprotenas monomricas cuya cadena protenica entra y sale atravesando la membrana 7 veces. Su extremo amino es el externo y se encuentra glicosilado, y su extremo carboxilo queda en el citosol. Los miembros de esta familia sedaerencian entre s por el nmero de aminocidos, de 500 a 600; por las longitudes ~ de los h . 0 que unen los segmentos en hlices transmembranales; y por el largo de los extremosamino y carboxilo terminales (Fig. 59.6).

Fig. 59.6. Esquemas de receptores de protenas G trimricas. Estos receptores estn constituidos por protenas monomricas, transmembranales que atraviesan la membrana 7 veces. El sitio especfico de unin al ligando lo forman el extremo amino terminal,^ las asas que unen losseetorestransmembranales que quedan por el exterior celular.

Como ya se mencion, existe una gran variedad de receptores que se acoplan a protenas G. Entre las seales que los activan se encuentran hormonas, mediadores qumicos locales y neurotransmisores. Estos ligandos tienen estnichiras qumicas muy variadas. A veces para una mismaseal hay ms de un receptor deestepo: laadrenalina se une a 7, la acetil colina a 50, la serotonina a 15 (Fig. 59.7).

Ho&~-cH2-NH2 1
OH Adrenalina

CH,

oi
NH2cooH 1

1 Tiroxina

Acetil colina
Fig. 59.7. Estructuras variadas de ligandos de receptores acoplados a protenas G y a receptores
intracelulares.

Las protenas G que se acoplan a estos receptores de membrana plasmtica son heterotrneros, formadospor las snbunidadesalfa, beta y gamma. La aifa es la que da gran diversidad a esta familia; se conocen 15tipos de alfa, 8 de beta y 5 de gamma; sin embargo, las beta y las gamma se diferencian menos entre s mismas que las propias alfa. La subunidad aifa tiene actividad GTPasa panosn trisfosfato hidrolasa Eneste sitio cataltico y en su estado inactivo se encuentra unido un GDP (guanosn difosfato); cuando la subunidad alfa se activa al formarse el complejo hormona receptor, intercambia ese nncletido por el GTP (guanosn trisfosfato). Receptor (R)+Ligando(L)

+R-L

Esta unin provoca, a su vez, un cambio conformacionalcon el que la alfa-GTP pierde su afinidad por el receptor y por las 2 snbunidades beta y gamma, y gana afinidad por una protena enzimtica. Esta unin provoca la activacin de la enzima.

a (GTP) + Enzima P -

a(GTP) - Enzima activa

Como la alfa es a su vez una GTPasa, hidroliza al GTP que se queda de nuevo como GDP unido a ella. La alfa pierde afinidad por la enzima, esta ltima vuelve asu estado inactivo y la alfa(GDP)recobra su afinidad por las subunidadesbeta y gamma.

H,O + a (GTP) - Enzima activa - - + a (GDP) + Enzima + Pi a (GDP) + B.y ---+ a (GDP) .B. y

La protena G lleva a cabo este proceso unida a la membrana plasmtica por la cara intracelular. En esta fijacin a la membrana ayuda el hechode que la Ga tenga unida covalentemente un grupo miristilo o palmitilo, y la gamma se encuentra unida por un grupo prenilo al cual tambin se une por un enlace eovalente (Fig. 59.8). Cada miembro de esta familia de receptores que se acopla a protenas G tiene especificidad para el ligando, pero adems tiene especificidadpor la protena G a la cual se acopla, y de cada tipo de protena G depender la protena que se regule. En dependencia de la subunidad alfa,se pueden citar diferentes tipos de protenas G (cuadro 59.1).
c d m 5 9 . i . Tipos de protenas G y enzimas que regulan
-

Prot-N-CH-C-O-CH,

o II

H CH,
I

Fig. 59.8. Radical prenilo. Se u n e a la subunidad gamrna de la protena G y es uno d e los factores que mantiene a esta subunidad unida a la membrana.

Tipos

Acciones desencadenadaspor las protenas G Activa la adenilciclasa Inhik la aden ciclasa Activa la fwfotipasaC-kta Activa lafodotipasaC-beta Activala fosfodi~~lera~a del GMPc Activa la aded cidasa

%
G,
Gk GP
Gt

Go"

Acciones desencadenadas por las protenas Gs

La protena Gs-S de siimulate, estimular- es la que activa a la enzima adenil ciciasa. La reaccin que esta enzima cataliza es la que se ve a continuacin. El AMPc es el producto de la enzima adenil ciclasa y se forma a partir del ATP.

ATP

--

, : adenil ciclasa

AMPc

+ Pi - Pi

Existen 8 tipos de adenil ciclasa, las 8 son estimuladas por las protenas Gs, pero la 1,hIIIy la VilI tambin son estimuladas por el ion calcio unidoa la calmoduna.Estas eMimasson transmembrandes,monomncasy estn formadaspor 1064 aminocidos, la ms pequea, y por 1248 aminocidos, la mayor. Estn formadas por 2 secuencias que se repiten; cada secuencia atraviesa la membrana 6 veces y tiene un dominio ataltico (Fig. 59.9).

Fig. 59.9. Esquema de la adenil ciclasa.

El AMPc fue descubierto por Earl W Sutherland y Theodor W Rall, en el ao 1958, cuando investigaban el mecanismo de activacin de la glucogenlisis por las hormonas adrenalina y glucagn. Ellos observaron que un factor de estructura an desconocida intervena en este mecanismo, y fue David Lipkin quien describi su estructura i~denominamn segundomensajemdela a d n hormonal, ya quelahormona era el primer mensajero. El mecanismo de activacin de la a d e d ciclasa est representado en la figura 59.10.

GDP

(4)

(21. La G -ATP activa a la adenil ciclasa(3): al hidrdizake el GTP.las auhunidades vuelven a unirse y sc inactiva I adenil delaia (4). s

El mecanismo es el siguiente: 1.El receptor de membrana se activa cuando reconoce y se une al ligando. La unin con el ligando provoca un cambio de conformacin del dominio interno del receptor, activndolo, lo que lo hace tener afinidad por la protena GT. 2. Al unirse al receptor,la subunidad alfa intercambia el GDPpor el GTP, lo que a su vez la transconforma, pierde su afinidad por el receptor y por el resto de las subunidades y se hace afn con la adenil ciclasa. 3. Al acoplarse ahora a esta protena enzimtica,le provoca un cambio de confonnacin que activa y aumenta la velocidad de sntesis de AMPc. 4. Cuando en la subunidad alfa se oroduce la bidrlisis del GTP. el GDPaueda unido ai centro aclivo.! la wbunidad pkrdrsu afinidad por laaden v i c h . 1.a suhuiiid~d alfa, unidad GDP, rwohraw aIinid;id purIw utns2suhunidad~sde prutrina (;: la Hasta aqu, en el mecanismo de esta trasmisin de la seal han ocurrido 2 amplificaciones:la primera tuvo lugar al acoplarse el receptor activadocon la protena

G , ~ no va a ser una protena Gsolamentela quese active. Mientras que el ligando ~ B ,,.tine unido al receptor, se establecern acoplamientoscon varias protenas G, pues
*da una de ellas, al acoplarse e intercambiar el nuclesido difosfatado por el Hosfatado,se separa del receptor. Por oholado, cada una de las protenas G activadas, a vez activar a una adenil ciclasa. El segundo paso amplificador se encuentra en la enzimtica, pues como resultado de su activacin cada una de las adenil delasas activadas producir mltiples AMPc.

Reapoesta celular al AMPe

En primer lugar, el AMPc es un activador de un tipo de quinasas de protenas dependientesde I,la protena quinasa A. Ella se activa con la p m n a a de este metabolito. El mecanismo deactivacin consisteen la separacin de las subunidades inhibidoras de laenzima cuando se efecta la unin con este nucletido cclico (Fig. 59.11).

Protena quioasa A a)

Subunidades catalticas b)

Subunidades reguladoras c)

Fig. 59.11. Representacin de la activacin de la protcina quinasa can el AMPc. a) Protena quinaaa inactiva. b) Protena quinasa activa. e) Subunidades rcguloduras unidas al AMPc.

Las protenas quinasas dependientes de AMPc, las protenas quinasas A activas, fosforilan sus sustratos especficos -enzimas o protenas celulares- en los aminocidos serha o treonina y de este modo dichos sustratos se inhiben o activan, por este mecanismo de regulacin covalente,procesos que estn regulados en sitios claves por estas protehasfosforiladas. El hechode que sefosforilen determinadas protenas depender dela informacin genticacontenida en la clula en cuestin (captulo 17). Adems de regular enzimas, la protena quinasa A fosforila canales inicos, activndolos. Otra forma de actuar de la protena quinasa A es la de fosforilar determinadas protenas que regulan la transcripcin de genes. En el gen de la somatostatina y en otros genes activados por la proteina quinasa A, existe una seccin del ADN,Uamada CRE -en ingls cyclicAMPresponiive element, elemento que W n d e a la protena efectora del AMPc. A este sector del ADN se le une una protena, la Protena CREB -en ingls cyclic AMPresponsive element bindingprotein- que se fosfoaa en una solaserina por la protena quinasa A, lo que activa la transcripcin de estos genes, sin alterarse la unin de la protena al ADN.

Seales que regulan a la adenil ciclasa mediante la proten8 Gs Un gran nmerode seales producen su accin mediante la activacin de protenas quinasas dependientes de AMPc: ACTH, calcitonina, catecolaminas actuando en los receptores beta 2, coriogonadotmpina, TRF, S H , VIP, FSH, glncagn, LH, LPH, MSH, lTH, GnRF, vasopresinai secretina.

Desadivacin de los mecanismos producidos por las protenas G, El AMPc es degradado por la AMPc fosfodiesterasa:

AMPc + H,O

AMP

Las protenas que fueron fasforadas por la protena quinasa A son desfmforadas por las fosfoprotenas fosfatasas especficas para desfosforilar en serina y treonina. Se J tienen 4 tipos de estas enzimas: 1,IIA, iB y IIC. Las fosfoprotenasfosfatasas1y IIA se relacionan con las acciones de la protena quinasa A; son las enzimas responsables de la desfosforilacin de la glucgeno sintasa, la glucgeno fosforilasa quinasa, la glucgeno fosforilasa y la protena CREB. El inhibidor de la fosfoprotena fosfatasa, que tambin fue fosforilado por la protena quinasa, es adems desfosforiladopor este tipo de enzimas. La IlB, tambin llamada calcinenrina, muy abundante en el cerebro, se activa con los iones de calcio. La IIC no se relaciona con las otras.

Acciones desencadenadas por i protena G, a

Ciertas seales -las catecolaminasaciuando sobre los receptores adrenrgicos tipo alfa,, la angiotensina 11, los opioides- tienen receptores que se unen a las protenas Gi que actuando por el mismo mecanismo van a unirse a la adenil ciclasa. En este caso, la adenil ciclasa, lejos de activarsese va a inhibir y, por ende, disminuyen los niveles de AMPc intracelulares. Para producir este efecto no slo interviene la subunidad alfaj; tambin el complejo be&-gamma desempea el papel de atrapar las alfa, para as hacer ms efectiva la inhibicin de estaenzima. Las protenas Gjtambin regulan un canal inico para el potasio.

Efecto de toxinas baderianas sobre las proteinas G y G,

Existen toxinas bacterianas que distinguen bien las protenas Gs de las G,. La toxina del clera tiene por receptor al ganglisido GM,, y entra a la clula unido a ste por endocitosis. Intracelularmente y por hidrlisis se libera un fragmento de la toxina, que es una enzima que ADP ribosila a la subunidad alfa de la protena G e n un residuo de arginina:

NAD'
\

Nicotinamida

1 1

La toxina del bacilo del clera inhibe la accin de la GTPasa de la subunidad alfa y a consecuencia de esto, como no se produce la hidrlisis del GTP, no se desacopla esta protena de la adenilato ciclasa y sesintetizan excesos de AMPc. Este es el causante

1020

demdiameas que aparecen en esta enfermedad, debido a que estimula la secrecin de u ovNa+hacia la luz intestinal dando lugar a prdidasde un litro de agua por hora -7-, comodiarreas, lo que puede provocar la muerte por deshidratacin. La todna pertussk, de la tos ferina, ribosila, mediante el ADP, a la protena Giaw, eimpide quese inbiba la adenil ciclasa.

Acciones desencadenadaspor las protenas G ,

La G,,se encuentra presente en nenronas olfatorias. Existen ms de 10 000 olores diferentes y para cada uno hay una neurona olfatoria. Esta protena G activa, por el mecanismo ya conocido, a la adenil ciclasa, y el AMPc que se forma activa a un canal inico de Na'. Al abrirse el canal se despolariza la clula y se produce el impulso n e T V i ~ se trasmite al sistema nervioso central. que

Acciones desencadenadas por las protenas G,

El receptor de membrana que activa a la G, (transducina), es la rodopsina, y la e n a a que se activa es la fosfodiesterasa del GMPc -guanosin monofosfato cclico. Esta enzima es tetramrica, y su subunidad gamma, inbibitoria, es desplazada por la alfa;GTP. Este mecanismo est presente en los fotorreceptores de los bastones, en la visin (captulo 65).

Acciones desencadenadas por las protenas G, y GP

Las protenas G , y Gpintervienen en el mecanismo que activa a la fosfolipasa C (F'LC), staes lafosfolipasa C tipo P, que a su vez va a producir los segundosmensajeros JP3(ioasn trisfosfato) y DAG (diacglicerol);el IP, libera al mensajero intracelular de mayor uso en las clulas, el Caz+. Una veintena de tipos de receptores utilizan esta va de transduccin deseales. La aceol colina, actuando mediante su receptor muscarnico con la protena G,, o las hormonascatecolaminrgicas,actuando a travs de sus receptores alfa 1adrenrgicos, con la protena GI>, activan, mediante la subunidad an-GTP,a una enzima que se encuentra en la cara citoplasmtica de la membrana plasmtica, la fosfolipasa C-beta (F'LC) (Fig. 59.12). Esta enzima tiene como sustrato al fosfatidil inositol y al fosfatidil inositol bisfosfato (PIP y PIP,). El segundo se encuentra en menor cantidad que el primer0 en las membranas, pero es de mayor importancia en la accin hormonal. Mediante su accin, en menos de 1 s se forman los segundos mensajeros fosfatidil inositoltrisfusfato y el diacilglicerol (IP, y DAG).

PIP,

+ H,O ---+IP, + DAG

Se ver ms adelante que la FLC es tambin activada por un mecanismo bien daerente,y que noestligado a protenas G. Ese otro mecanismo estligadoa receptores que tienen,ellos mismos, una actividad enzimatica de tirosina quinasa. Este tipo de receptor es al que se une la insulina. Por este mecanismo se liberan las hormonas tiroideas S, y T,, se estimula la secrecin de varias enzimas digestivas del pncreas, tambin se estimula la secrecin de la insulina y la sntesis de bistamina en las clulas cebadas; en el hgado, la vasopresina activa a la giucogeniisis; en el pncreas, la acetil colina estimulala secrecin de amilasa y, en el msculo liso se produce la contraccin; en las clulas cebadas los antgenos estimulan la sntesis y secrecin de histamina.

'

GTP

GTP

Ca

GDP

: i : :

(+)

-_

Retculo endoplasmtico

-Fosforilacin de protenas especficas

Fosforilacin de protenas especficas MG: monoacilglicerol; Eic: eicosanoides; G,: protena G involucrada en el mecanismo

Fig. 59.12. Esquema del mecanismo mediado por el inosifol trisfosfato, el CaU y el diacilglieerol. Sc muestra la activacin del receptor y de la protena G (1); la activacin de la FLC (fosfolipaia C) (2) y la liberacin del Caz*(3). Se activa la PQ (protena quinasa) (4); el DAG, la Fd lfosfatidil-serinal y el Ca" activan a la PQ-C (protena quinara C) (S) y se forman el AA (cido araquidnieo) y, a partir de stas, los Eic (eieosanoides-pmstaglandinas)(6).

A grandes rasgos, el P3, al nivel del retculo endoplasmtico,se une a un canal de Caz+ regulado por ligando (el IF'J y lo abre. El calcio intracelular aumenta y se une a diversas protenas; algunas de estas protenas son la cadena ligera de la miosina, la troponina y la calmodulina (CM). Las 2 primeras intervienen en la contraccin muscular, y la tercera regula importantes pmcesos metablicos. % La CM se halla en todas las clulas, es el 1 9 de toda la protena celular, y hay aproximadamente lo7 molculas de ella por clula. Tiene 150 aminocidos y se encuentra muy conservada en la escala evolutiva; es monomrica y en cada extremo tiene los sitios que se unen al calcio, 2 en cada extremo. La CM cambia su conformacin cuando se une al calcio inico (CahCM), y parece abrazar a la protena que ella regula (Fig. 59.13). La Cat+CMregulaimportantes p r o c m metabliw y activa a protenas quinasas a tipo C. Las protenas quinasas C fosforilan en serina o treonina . diversas enzimas a las ---. cuales regulan. Una de las subunidades de la fosforilasa quinasa del glucgeno es un tipo de calmodulina. La Ca2*CM tambin activa a la xido ntrico sintetasa. La accin del xido ntrico se describe m& adelante. El DAG que ha quedado en la membrana activa a otra protena quinasa C (PQ-C), P no asociada a membrana (Fig 59.12). Pero el i,induce la traslocacin de esta protena quinasa C del citoplasma a la membrana, y all es activada por el DAG,el Caz' y la fosfatidil serina (Fds). Esta quinasa, a su vez, fosforila en serina o treonina a otras

1022

&pi$rcfmcr Majira

,-as, y las regula.La degradacin del DAG produce monoacilglicerol (MG) y cido araquidnico (AA). Este ltimo va a la sntesis de las prostaglandinas (Pg), que salen de la clula y regulan procesos en clulas vecinas (Fig. 59.12).

Fig. 59.13. Rcpresentaein de la accin de la Caz* ralniodulina. En cada extremo de esta protena de 150 aminoridos se encuentran 2 si. tio de unin para cl Caz+.En la molcula ocurre un cambio conformarional can la unin de este ion. al Representari<inesquemtica de la calmodulina (CM) sin calcio. bl La calmodulina se une al calcio y va a suceder un cambio cunfarmacional. cl La unin del complejo Cal*CM parece abrazar a la protena que ella regula.

&aacvad6n de La va de le foslolipasa C

Los niveles normales de Cah intracelularesson de 10-'M; en el lquidoextracelular son altos, lo5 M, y en el retculo endoplasmtico y en las mitocondrias, sus concentraciones son altas tambin. Se presentan 4 transportadores que extraen el Ca2'del citoplasma:
1.Un transportador de Ca2'ATPdependiente y que, adem&,se activa con la Ca2+Cb4; este transportador es muy activo, y su anidad por el Caz+ alta; se encuentra en la es membrana plamitica. 2.Un antiportede Caz+ Na*, que slo funciona si las concentracionesintracelulares y Uegan a 10" M, y tiene poca afinidad por el ion de calcio; tambin se encuentra en la membrana plasmtica. 3. Un transportador en los receptores del retculo endoplasmticoque es ATPdependiente. 4. Uno en la mitocondria, que est acoplado a los gradientes de H', y que slo funcionasi los niveles de Cah Uegan a M; tiene muy poca afinidad por el ion, pero su capacidad para extraer el ion de calcio es alta. Una grfica que presenta cmo fluctan las concentraciones intracelulares de d c i o inico muestra un comportamiento en formas de espigas. Los mecanismos de extraccin del calcio son podermos, pues la entrada del ion a travs del canal regulado ' ] por el E es del todo u nada. El IP, abre el canal un poco, pero el propio Ca"', por un mecanismo de retroalimentacin positiva, ahre el canal al mximo, dejando pasar avalanchas del ion, que rpidamente desaparecen al actuar los transportadores extractom de Cah. Cada nueva apertura de los canales de Caz+ provoca aumentos en espiga de su concentracin intracelular, y la rpida desaparicin del ion por los transportadores que lo extraen produce el descenso de la espiga (Figs. 59.14 y 59.15).

Fig. 59.14. Esquema del canal de calcio del retculo endaplasmtieo regulada por el IP,. El IP, abre el canal limitadamente, pero la unin del Cal* al canal, por un mecanismo de retrnalimentacin positiva, produce su apertura total.

lksnias b

1023

Fig. 59.15. Las oscilaciones del calcio en una clula heptica inducidas por vasopresina. Las frecuencias de las espigas aumenta al incrementarse las concentraciones de vasopresi. na; no se afecta la amplitud de dichas espigas.

Por otro lado, el DAG y el IP, vuelven aformar el iP2. la figura59.16se observa En un esquema del metabolismo deestos 2 compuestos.

Receptor Hormona-,

Gp . - Se activa la fosfoiipasa .t

Fosfatidil inositol 4,5- bisfosfato

Inositol-l,4,5-tnsfosfato (IP,)

2 ATP

/I
1

L
Diacilglicerol (DAG)

CMP - fosfatidilinositol(pI) <Pf

Inositol

CDP Diacilglicerol

y,
Acido fosfatdico Glicerol 2 cidos grasas (en a el cido estenco y en p el cido araquidnico generalmente)

Fig. 59.16. Reacciones implicadas en el metabolismo del fosfatidil inositol.

1024

I)cqlaftiiror m h r a

Transcripcin de genes activados por la protena quinasa C

Dos vas diferentesson utilizadas para la activacinde la transcripcin de genes. Por ,,mde las vas se activa la cascada de las MAP-quinasas -mitogen activatedprofeins,es ,j&,protew'~\actiradac por mi t gen^^. PorlaotrJ \.ia,la pn~teinaquinaiii foiforila <: Uihihidora(Fig.SY.171. ,,protenade tranwripcinn liherhdoladesusul~unidad

ATP &Q &P

SRE

SRE

ARNm

ARNm

+
I

i
Protena

h . 59.17. Esquema de la scvaein de la transcripcin de genes por la proteina quinasa C. La pmtena quinasa C fosforila la Map quinasa quinasa quinasa y esto activa la eascada que termina en la transcripcin de genes. Por otra va, la protena quinasa fosforila a la protena inhibitoria que se encuentra unida a NF-KB, protena regulatoria del gen. Al ser fosforilada Y separarse esta proteina inhibitoria, se activa la transcripcin.

Interaecin entre los diferentes mecanismos

Podemos citar algunos ejemplos de estas interacciones:

1. La Ca2'CM, que pertenece a la va de seales de la FLC-P, puede regular adenil

ciclasas y fosfodiesterasas,que pertenecen a la va de seales de la adenil ciclasa. 2. La protena quinasa A fosforila al canal-receptordel E en el mtcnio endoplasmtico. ' , 3. Algunas Ca"CM son fosforiladas por la proteina quinasa A. 4. A veces, ambas quinasas, la A y la C, fosforilan en sitios diferentes a la misma Protena

Oxido ntrico y monxido de carbono como mensajeros interceluiares

En estudios realizados acercade la relajacin de los msculos lisos,que conduce a la vasodilatacin de stos, se observ que la acetil colina no efectuaba esta accin directamente; haba un mensajero celular intermedio. Result ser el xido ntrico (ON). Su vida media es muy corta, 5 s. La enzima que lo sintetiza es la xido ntrico N sintasa, una de las enzimasms reguladas que existen. Esta enzima sintetiza O a partir de la arginina y su otro productoes la citrulina.

NADPH

N ADPH

Arginina

OH- arginina

Citrulina

En esta reaccin se traspasan S electrones. Ambos pasos dependen de la Ca2+CM; la reaccin se acelera con la tetrahidrobiopterina. La regulan la protena quinasa A, la C y la protena quiuasa GMPc dependiente. Intervienen en dicha reaccin la tetrabiopterina, el FAD, el FMN, el cit P,,, con su hierro hemnico. Varias seales que liberan Caz+, como son la acetil colina y la adrenalina, activan esta enzima. El ON difunde libremente por las membranas celulares, se libera de la clula que lo sintetiz y, en clulas vecinas, se une al Fe del centro activo de la guanil ciclasa y aumenta la actividad de esta enzima unas 50 veces. El GMPc que se forma puede regular canales inicos, y modularla actividad del AMPc a travs de una fosfodiesterasa. Se ha visto que el mecanismo de accin de la nitroglicerina para producir la vasodilatacin, es mediante la formacin de ON. Una ON sintasa, calmodulina s independiente,e t presente en los macrfagos; en ellos el ON es utilizado paraeliminar microorganismos. La liberacin de ON en el pene, causada por los nenios autonmicos, es responsable de la vasodilatacin que conduce a la ereccin. Pero tambin este gas est implicado en el shock endotxico y en el dao hstico en la inflamacin. En el cerebro se encuentra en grandescantidades regulando la actividad neuronal.

Receptores de membrana que son enzima5 en su dominio intraeelular

Como muchos de los receptores conocidos, estos receptores tienen 3 dominios, uno extracelular, por donde se une la hormona; otmesel paso dela protena a travs de la membrana, y en el tercero, intracelular, se encuentra la actividad enzimatica. Hay 3 tipos: 1.Receptores queson guanil ciclasas. 2. Receptores que son tirosina quinasas. 3. Receptores que son serina o treonina quinasas.

R e ~ ~ t o rque t m n adividad de guanil aclasa e s ie

Las clulas del atrio del corazn secretan una serie de hormonas peptdicas cuando la tensin arterial aumenta. Las clulas diana de estas hormonas peptdicasse hallan en el fin y en el msculo liso de los vasos sanguneos, donde se encuentran sus receptores que son enzimas (guanil ciclasas) en su dominio intracelular. La formacin de este metabolito es semejante a la formacin del AMPc. El GMPc activa a protenas qoinasas dependientes de GMPc; son monomricas. ~n la misma cadena polipeptdica se halla la snbunidad regulatoria y la cataltica. Estas protenas quinasas fosforilan a protenas en serina y treonina. En el rin se &hnula la salida de Na' y agua, y en las clulas musculares se produce relajacin.

~ m p t o r eque tienen actividad de tiFosin quinasas s

Otro mecanismo hormonal importante es el del grupo de receptores tirosn q n h s q
estos receptores se autofosforilan y fosforilan a otras protenas, pero en vez de realizar

lasfosforilaciones en serinas o treoninas, lo hacen en residuos de tirosina. A este grupo pertenecen un grupo de hormonas peptdicas que regulan el crecimientoy la proliferacin celular, y a l tambin pertenece la insulina. Los receptores de los factores de crecimiento, por su similitud, forman una gran f d a con 6 subfamilias, clasificadas segn su homologa estmctural (Fig. 59.18).

1 EGF IGF -1 NGF PDGF FGF VEGF

Fig. 59.18. Representacin de los receptores de los factores de crecimiento. Se presentan las 6 subfamilias. La que ~ ~ r n p a rlae IGP-1 y la insulina estn formadas por 2 suhunidadea; el t m t o de las subfamilias es rnonornrico.

Fig. 59.19. Esquema de la activaeiii de los receptores de tirosin quinaras. El rcecptor del PDGF se dimeriza y de esta manera se activa la tirosin quiiiasa intracelular al fosforilarse cntrr si el dmero que se forma.

Fig. 59.20. 1.a protena RAS, una proteina G monamriea. Su actividad GTPasa es 100 veces menor que la de las proteinas G trimricas. Dos protenas, la GAP y la GNPK, la hacen ms eficiente. 1.a CAP aumenta su aelividad GTPsiea; la GNPR favorece cl intercambio de los nucletidos.

El primero que se caracteriz, en 1982, fue el EGF -epidermalgrowth factor, es decir factor de crecimientoepidrmico. Est formado por 53 aminocidm,y su receptor contiene 1 000 aminocidos. Menos una de las subfamilias, en la que se encuentran la insulina y el factor de crecimiento semejante a la insulina, los otros receptores estn formados por una sola protena, a la que le podemos sealar un sector extracelular,uno transmemhranal y otro intracelular. El sector extracelular,al igual queen otros receptores,eselsitio por el que se reconoces la hormona. Elsector transmembranal.se cree que lo formeuna h1ice.y su particularidad entre los receptores, es que el sector intracelular es enzimtico; tiene actividad de tirosin quinasa. Dos de las subfamiliastienen dominios ricos en cistena en su dominio extracelular; son las familias del factor de crecimiento epidbrniico (EGF) y el de la insulina y el IGF-1 -insolin likegrowth factor-l. Las otras 1subfamilias tienen dominios parecidos a las inmunoglobulinasen su porcin extracelular; la del factor de crecimiento nervioso -NGF, nervegrowthfactor-, la del factor de crecimientoderivado de plaqoetai -PDGF, platelet derivedgrowth factor-, la del factor de crecimiento de fibroblastos -FGK -\'EGF. fibrnbl;~stgrolvth factor- y la del factor de crecimiento del endotelio ~ascular vascular endotelialgrowth factor. La activacin de la enzima se logra en estos receptores nionocntenarios por la dimerizacin de los receptores al unirse la hormona a ellos, lo que provoca que se fosforilen de forma cruzada y asse active la tirosn quinasa. Por ejemplo. el PDGF se dimeriza y asse liga a 2 receptores que como son tirosn quinasas intracelulares se activan al fosforilarse de forma cmzada uno al otro (Fig. 59.19). La$fosforilaciones se producen en determinados residnosde tirosina y estossitios sirven de alta afinidad para determinadas protenas intracelulares. Algunas de estas protenas se unen directamente al receptor y se activan, y, estando activadas. otras protenas se unen a ellas y a su vez se activan; otras proteinas se unen al receptor y son fosforiladas en tirosinas y de esta forma tambin se activan. El reconocimiento entre estas protenas se lleva a cabo por sitios especficos que han sido estudiados y caracterizados. Uno destoses el dominio SH2, que reconoce sitios quese encuentran fosforilados en tirosinas; otro esel SH3, que reconoce a otras protenas no fosforiladasen tirosinas. Se ha estudiado una protena pequea, la Sem-5. que parece que su nica funcin es la de adaptane entre 2 protenas; tiene un dominio SH2 y otro SH3, por lo que, por un lado, reconoce a protenas con tirosinas fosforiladas y, por otro, a otras protenas. Varias vas resultan activadas por estos receptores, algunas son comunes a las activadas por los receptores de protenas G,, por ejemplo la va de activacin de las fosfolipasas del fosfatidil inositol, pero en este caso la enzima que se activa es la fosfolipasa C-y. En esta va se liberan, al igual que en la otra, los mensajeros IP,, DAG. Ca" y cido araquidnico, y se activa la protena quinasa C. La otra enzima que se activaes lafosfatidil inositol3 quinasa. Un sustrato que se fosforila y se unea este tipo de receptor es el IRS-1 -insulin receptorsuhstrate-1, es decir, el sustrato del receptor de la insulina -1. Una de las protenas que se activa en estos receptores es la RAS, que pertenece a una gran familia de protenas monomricas con actividad GTPasa. Adems de la diferencia en su estructura,suactividad enzimtica es 100 veces mslenta quela de las protenas G trimricas. Una protena quese une a estos receptores directamente y que activa a la RAS, es la GAP-GTPase activatingprotein, es decir, proteina activadora de la GTPasa. La otra proteina que se une indirectamente a estos receptores y que activa la liberacin del GDP en las protenas RAS, es la GNRP -guanine nucleotide releasing proteins, protenas delaliberacin delos nucletidos de guanina. La RAS activada se traslada del citoplasma al ncleo. y all. a travs de la cascada de las RIAP quinasas. activa la transcripcin de diversos genes (Figs. 59.20 y 59.211. La va de las \I.AP quinasa se puede observar en la figura 19.17.

PQC..

RAS; GTP

-----

P{Mi\PQVQt

L."'

L'

ATP

Fig. 59.21. Activacin de la transcripcin de genes por la proteina RAS. Para que la ra MAPseactivc totalmente, tienen que fosforilarse en tirosinas y en serhas.

Receptores que se unen a msn quiaasas

La hormona del crecimiento, citoquinas, interferones, parecen actuar por este mecanismo. A estos receptores se asocian una familia grande de tirosinas quinasas, la familiaSrc,ms recientemente otra, la .Janus. Seconocen 3 interferones: el alfa, queessintetizado por los leucocitos; el heta,de los fibroblastos; y el gamma, cuya accin an no se conoce bien. El receptor del interfern tipo 1que pertenece a los alfa, tiene 2 cadenas: la alfa y la beta (Fig. 59.22). Alasubunidad alfa sele unen 2 molculas deinterfern, a la beta, una sola. L a u Y la&, por smismas, tienen alguna actividad biolgica; iap, no la tiene. Para su plena aavidad, deben unirse ambas cadenas, una u con una de las 8. Las subunidades son ms peqnefias y estn glicosiladas. Estos receptores son fosforilados por enzimas tiro~ ~ ~ u n a d e r c r i tBaK~- 3 -1 y m s i n e k Medimtediferentespmtenas ~ l a ~ que interactan con el receptor, se produce la activacibn de determinados genes a havsdefactores de transcripcin.

Estas fosfatasasson diferentes a las fosfoprotenas fosfatasas en serina y treonina. SohIbles v unidas a rnemhranas. Tienen actividades muv es~ecficas, Pues . . mantienen bajos los niveles de fosforilacin en tirosina. Pero, adems, activan a los finfocitos T y B.

Dominio con unin al interfern

Fig. 59.22. Representacin de las subunidades del receptor del interfern tipo 1.

Dominio transrnernbranal
-a

$$$ Dominio de unin

cido

Tirosina fosforilada

oDominio

Receptores que se unen a proteinas quinasas que fosforao en serina o treonina

Sobre estos receptores acta una familia de 5 miembros de protenas quinasas que son mediadores locales y que regulan la proliferacin y mltiples funciones. Son los TGF-beta, a beta5.Con este tipode receptores termin el estudiodelosmecanismos de accin de las seales por las que se intercomunican las clulas. A continuacin se tratarn brevemente los factores de crecimiento, los interferones y los eicosanoides.

Factores de crecimiento
Los factores decrecimiento son un grupo de protenas cuyomecanismo de accin es muy semejante al de las hormonas. Se sintetizan a partir de un precursor mayor, y sus receptores son tirhsin quinayas. Tienen 2 particularidades ms: se sintetizan en diferentes tejidos, no glandulares, y su accin la realiaan al nivel gentico, ya que activan el crecimiento y la reproduccin de los tejidos. E,iemplos de ellos son el factor epidrmico de crecimiento, el factor neural de crecimiento y el factor de crecimiento derivado de las plaquetas. Este ultimo,por ejemplo, sesintetiza en las plaquetas, y ejerce su accin sobre el crecimiento y la reproduccin de las clulas epiteliales. Un grupo de estos Factores aparecen en la tabla.

mh Factures de crecimientu

Factores de Peso molecular Origen Efectos

SomatomedinaA,, A,Y C
Plavna humano
1.11s coiitrolalaGH.

iCstimulaii la sntffis de cartbgoy simulan acciones de la insuliixi Tienenactividad mitognica

Faetorde creeirnientoderivadodeplaquetas (PDGF) Famr de crewnientode fibmblastos Cerebro hipfisis I~:stiniulaiila proliferacin de liiieas endodrniica~ y oieswlmucas E~tiiiiula prolila feracinde tejido epidmico yepitelial

Fadorde crecimiento epidrmico(EGF)

orina

Iiumana

Los interferones son unas protenas especiales cuya fiiiicin es la defensa contra los virus, y en su mecanismo interviene la coniuniiacin intercelular. El interfern liberado por una clula que ha sido infectada por dicho orgaiiisino prepara a otras clulas vecinas contra esta infeccin. Su mecanismo es el siguiente: la infeccin viral generalmente implica la muerte de la clula invadida, pero durante este proceso ella sintetizauna protena,el interfern, que parece ser inducida por una porcin de AKN doble del virus ya sea ste un virus de ARN. de ADN, monocatenario o hicateiiario. El interfern sesegrega y difiinde a las clulas cercanai y en ellas, a travs desu receptor Y Por un mecanismo an no bien conocido, induce a su vez en estas cliilas la sntesis de unas protenas que la van a defender de la infeccin viral. Una de estas protenas es una ewziiiia, la oligoadenilato sintasa, que sintetiza unos Polinueletidos cortos de adenosina unidos por el enlace fosbdister 2', 5' que activan a m a endonucleasa,la cual hidroliza al ARN. La otra protena, la protena quinasadel F-2,fosforila a la subunidad menor, la alfa, del factor de iniciacin 2 de la sntesis de Pmtenai, y, por lo tanto, inhibe este proceso. Ambas protenas no se activan hasta que no ocurra la infeccin viral y entonces impiden la replicacin del virus.

En 1930, Ulf VonEulerdescubri las prostaglandinas en el semen humano, pero stas no despertaron la atencin de los investigadores hasta el ao 1971, en el cual John Vane descubri que la aspirina bloquea la sntesis de dichos compuestos. En el captulo 13 se observa un ejemplo de la estmctura caracterstica de cada uno de estos compuestos. Regulan una gran cantidad de procesos biolgicos, pues intervienen en la contraccin, en el dolor, en la coagulacin y en el parto. Los eicosanoidesson sustancias locales de tipo hormonal. Entre ellas se encuentran las prostaglandinas (PG), los tromboxanos (TX) y los leucotrienos (LT). Su caracterstica estruciural comn es la de tener una cadena de 20 tomos de carbonos. Cada uno de estos gmpos tienen 3 tipos de PG, TX y LT. Los del grupo 1derivan del cido S, 11, 14-eicosatrienoico;los del grupo 2, del cido araquidnico, el 5, 8. 11, 14-eicosatetraenoico;y el del grupo 3, del 5,8,11,14,17-eicosapentanoico. Utilizaremos como modelo la sntesis de los del segundo grupo.

Sntes'i de prostagiaodinas,pmstacielinss, tromboxanos y leucotrienos

De los 10 g de cido linoleico que se deben ingerir diariamente en la dieta, mny poco se convierte en cido araquidnico, sin embargo, si en la dieta se disminuyen el cido linoleico, la produccin de prostaglandinas desciende. En la formacin de estos conipuestos se pierden 2 de los dobles enlaces que estn presentes en el cido graso, y as, la prostaglandina con un doble enlace se forma a partir del cido eicosa trienoico -de 20 carbonos y 3 dobles enlaces-; la de 2 dobles enlaces, del cido eicosa tetraenoico -cido araquidnico- y la de 3, del cido eicosa pentanoico. Como el ms frecuente en los tejidos es el cido araquidnico. las prostaglandinasPGE, y la PGF,, son las ms abundantes (captulo 131,dondeaparecen los diferentes tipos d prostaglandinas y su nomenclatura. Los cidos grasos poliinsaturados no estn libres en los tejidos, sino coino componentes de los fosftidosde glicerina, y por lo general se encuentran esterificados a su posicin 2. Precisamente su liberacin del fosfatidil inositol, por la fosfolipasa A,, es el p a ~ o limitante en la sntesis de las prostaglandinas, y este paso parece estar estimulado por la noradrenalina, la trombina, la angiotensina 11, y la disniinuciii de la tensin de 0, hstico y de otros factores poco conocidos. En cambio los corticoiiles suprarrenales hhiben esta enzima. Parte de la accin antiinflamatoria de estas hormonas esteroides se explica por dicha accin. Aunque se encuentran diferencias en los diversos tejidos, la va ms aceptada para su liberacin es la siguiente: Fosfatidil inositol

----+
fosfolipasa A? Paso limilante

Diacil glicerol + Difosfoinostido

Diacilglicerol

- - - - - - ,
diacilglicerol lipasa

Monoacilglicerol + cido araquidnico

Del cido araquidnico derivan 2 vas anablicas divergentes: la va de la ciclooxigenasa, que da lugar a los prostanoides (PG y TX), y la va dela lipooxigenasa, de la que se forman los leucotrienos. Un complejo multienzimticn presente en la fraccin microsomal es el responsable de la sntesis. Para la formacin de los prostanoides, el comple,joest integrado por la enzima prostaglandina sintetasa y las prostaglandinas eudoperxido isoinerasas. I d primera contiene grupos hemo e hierro no heninico. Dos tipos de drogas afectan la sntesis de los eicosanoides: los antiiiiflaiiiatorios no-esteroides-cido acetil saliclico, ibuproten? indonietaciiia y fenil hutaioiin-, We

inhiben irreversiblemente la enzima ciclo oxigenasa. La fenil butazona tiene efectos sentndarios indeseables, pues puede producir anemia aplstica. El segundo gmpo es el delm antiintiamatorios esteroides -hidrocortisoua, prednisona, beta metasona- que i a b e n a la fosfolipasa A,. Una particularidad curiosa de la prostaglandina sintetasa es lade su propia destruccin luego de procesar aproximadamente 400 sustratos. Como ejemplo vemos en la figura siguiente que del cido araquidnico se forman las prostaglandinas, las prostaciclinas y los tromboxanos, en dependencia de cul sea el segundo componente enzimtico del complejo. cido araquidnico

PgH,

Prostaglandina sintetasa

Pg endoperxido isomerasas

Prostaciclina sintetasa

Tromboxano sintetasa

4
Prostaglandinas

Prostaciclinas

Tromboxanos

Abordar los efectos metablicos de estos compuestos escapa al contexto de este bro,pero slo para ilustrar los mltiples efectos de estos compuestos, en el cuadro 59.2 se ilustran algunos de los que provocan las prostaglandinas de la serie E y F, y algunos de otros compuestos relacionados.

Chidm 593. Efectos de las prostaglandinas E y F, prostaciclinas y tromboxanos

Compuesto
MusnUahua lisa v d a r Musnilahua lisa bronquial

PGEs Dilata Dilata

PGFs Coubae Conhae

Prostaciclinas Dilata Ligeradilatacin

Tromboxanos Conhae Contne

Tejidoadipaso Tejidoendocrino Mimetiza la ACTH, TSH y LH

Produce inilamacin

Facilitaliberacin de ACTH, LH

Pruducc menos inflamacin

Sistema nerviosocenh;iI

Produce fiebre Menor liberacin de N A Sensibiliza los nervios aferentes aldolor

Sistemanenioso perifrico

Cada tipo celular produce una sola clase de prostanoides, relacionada con las enzi~asPresentes: el TXA, en las plaquetas; el PGI, en las paredes arteriales.

Los leucotrienos no son hormonas; duran aproximadamente 4 horas en el organismo. Fornian parte de la llamada sustancia de reaccin lenta de la anafilaxis, produciendo una lenta y evolutivacontraccinde los msculos lisos de las vas areas y gastrointestinales, regulan la funcin de neutrfilos y eosinfilos, intervienen en la quemotaxis, estimulan a la adenil ciclasa e inducen a los PMN (polimorfonucleares) a desgranarse y liberar enzimas lisosomales. Parece que su efecto lo producen al incorporarse a los fosfolpidos de las membranas de las clulas diana y rompen el empaquetamientoy, por lo tanto, la estructura y funcin de las membranas. Luego de la unin antgeno anticuerpo, los mastocitos los liberan. Nosesabe cmose degradan o eliminan los leucotrienos. De los 3 tipos de lipooxigenasas (dioxigenasas)presentes en las clulas, slo la 5-lipooxigenasaforma leucotrienos. A partir del cido araqnidnico,el primer compuesto que se forma es el cido hidroperoxieicosatetraenoico(S-HPETE).A partir de ste se forma el resto.

Resumen
Una de las caractersticas que distinguen a los organismospluricelularesde los unicelulares es la comunicacin intercelular. Las clulas de los organismos pluricelularesse comunican mediante seales qumicas que son de estructuras muy variadas, desde las ms simples, molculas gsseosas, hasta las de grao complejidad, como las protenas. Emis seales, al adquirir una determinada concentracin, esimulan clulas especializadas, que tienen un receptor espeew que las reconoce, son las clulas diana. El receptor transduce esta informacin y provoca la regulacin de un proceso celular. Las seales se clasifican en hormonas, mediadores qumicos locales y neurotril~l~misores. hormonas, en la mayora de los casos, se segregan por Las clulas glandulares, van a la sangrey hacen contado con sus clulas diana a disancia. Los neurotrBllSmiFOres son liberados por las neuronas al espacio sinptico, viajan por el espacio sin4ptic0, y de inmediato hacen contacto con la clula possin4ptica que puede ser o no otra neurona El mediador qumiw local puede ser liberado por casi cualquier clnia del organismo, y hace wntacto con la clula mxptora tambin a corta distancia. A veces, las fronteras entre estas 3 seaies no son muy precisas. Las 3 seales anteriores tienen mecanismos comunes de actnacin en las clulas. Pueden establecer contacto con su receptor en la propia membrana o dentro de la elula Los receptores intracelulares, por lo general, son hormonales. Fundamentalmenteson 3las formas que tiene un receptor para aehiar: o regula el paso de sustancia por un canal, o regula la actividad de una enzima, o regula la transcripcin de determinados genes. Los receptores dela membranaplasmtica pueden ser, a d d , canales inicos, pueden acoplarse a protenas G trimricas, pueden tener alguna actividad enzimatica en su propia estructura o pueden asociarse con una enzima cuando estsn activos. Cada uno de estos tipos de receptores wnforman una familia, por tener dentm de su grupo caractersticas estructurales y funcionales comunes. Las protenas G trimricas esn formadas por 3 subunidades: la alfa, la beta y la gamma. La subunidad alfa es una GTPasa. Hay varios tipos de cada una de esas subunidades en las clulas, pero la ms variada es la alfa y, segn el tipo que sea, depender su modo de producir el efecto en la clula Una subunidad alfa muy conocida es la alfa*,y al formar parte de la pmteha G le da apellido, la G8. pmtena G8activa a la enzima adenil ciclasa, sta forma La

m , activa la protena quinasa y esta ltima, al fosforilar a determinadas ese pmt&m enzimas celulares, regula su actividad. Tambin la protena quinasa o && por el AMPc puede reguiar canales y activar la transcripcin de genes. por el contrario, otra protena G, la Gj,inhibe a la adenil ciclasa Algunas de estas protehas G activan a otra enrima, la fosfolipssa C, y sta desencadena toda una
Be&

de m h o s de regulacin de procesos celulares.

Al AMPc se le Llam segundomensajero en la accin hormonal. La fosfolipasa

C tambin iibera mew-eros, el inositol trisfosfato, el diaeil glicerol e iones de & o - ., Como consecuencia de la accin de esta ltima enzima, se regulan canales i6nie08, se regulanenzima6 y se transcriben genes. otros receptores tienen en su propia esiructura una actividad enzimtica. Una familia importante de stos es la que tiene los receptores para los factores de cre6 e n t o y la insuna.Estos receptores son protenas quinasa, pem fosforilan las en rosina -diferencia con la pmtsna quinasa activada por el AMPc que Las fdorilan en serha o treonina Como consecuencia de la actuacin de estos re~eptores son Orosn quinasas se regulan enzimas y se regula la transcripcin que de genes. 'hnto las hormonas, como los neurotraaimisores y los mediadores qumicos locales, tienen una vida media muy corta, pues solamente as es efectiva su regulad 6 a En Las clulases* presentes los mecanismos que inactivan las actuaciones de los receptores. Como mediadores qumicos locales se mencionan los faetores de crecimiento, tan importanies para el crecimiento, diferenciacin y multiplicacin de las clulas. Thbin Las prostapiandinas, que tienen como precursor a los cidos grasos de 20 carbonos p o h t u r a d o s . Entre sus funciones regulan la tensin, el dolor, la infiamaan y el parto.

1. Cite diferentes tipos de seales externas que requieren la jerarquizacin de los procesos de seales. 2. Haga una tabla comparando los diferentes tipos de seales. 3. Haga una tabla que muestre los segundos mensajeros conocidos, la enzima que los origin, los efectos que producen y las hormonas que actan con ellos. 4. Dibuje el esquema de un receptor y seale sus diferentes dominios funcionales. 5. Haga un esquema que muestre el mecanismo de accin de los receptores que se unen a la Gi 6. Haga un esquema que muestre el mecanismo de accibn de los receptores que se unen a la G,. 7 Haga un esquema que muestre el mecanismo de accin de los receptores que son . tirosn quinasas. 8. Haga un cuadro comparandolos diferentes mediadores qumicos locales.

En el captulo anterior se consideraron los tipos de comunicacin entre las clulas. Se vieron los tipos de seales -hormonas, neurotransmisores y mediadores qumicos locales-, los tipos de comunicacin -a corta distancia y a larga distancia-, y se desdbieron los tipos de receptores y sus mecanismos implicados. Este captulo se dedica en especial a las hormonas. Se retoma el concepto de hormona y seclasifican sta? segn su estructura. A partir del ciclo hormonal se toma cada grupo de hormonas y se presenta un bosquejo de su sntesis y su liberacin, mencionando aspectos importantes de estos pmeesos. Tambin se expone su transporte por la sangre y los mecanismos particulares de accin dealgunas hormonas, puesto que ya la mayora de sus mecanismos de accin se refirieron en el captulo anterior por cuanto muchos son comunes a los neurotransmisores y a los mediadores qumicos locales. Se tratan tambin los aspectos de la inactivacin y eliminacin de las hormonas, Y fuialmente se toman como modelos de accin hormonal el glocagn, el cortisol y la insulina. Las3son diferentes en cuanto a su accin hormonal.

Concepto de hormona
Las hormonas son sustancias que actan en pequeas cantidades, su sntesis y ~ ~ no son continuas, y su vida media rimuy corta. Son sintetizadas y segregadas n W r d u l a s especficas,actan sobre clulas especficasy regulan procesos especficos. En su mecanismo de accin se produce una amplificacin de la seal. Este concepto contempla muchos mediadores qumicos locales que trabajan a corta distancia,sin embargo, como fueron tratados en el capitulo anterior, este captulo "mfefi especficamentea las hormonas que trabajan a distancia.

-cadn

de las hormonas

En las hormonas se ~ u e d constatar una vez ms la manifestacin del principio de e la relacin estrnctura-funcin, pues en ellas existe una estrecha asociacin eutre su - ~ ~ n W C a n i s m o de accin, transporte y sntesis. Como todas estas caractersticas

dependen de una forma u otra de la estructura hormonal, se expondr laclasificacin que se basa en su estructura. Se pueden dividir en 3grupos: 1. Las hormonas aminoacdicai o derivadas de aminocidos. 2. Las peptdicas y protenicas. 3. Las esteroideas. Al primer grupo pertenecen, entre otras, las hormonas de la glndula tiroides -la timxha y triyodo tironina-y lasdela mdula suprarrenal -lascatecolaminas: adrenalina y noradrenalina Enhplassegundas se pueden mencionar, como ejemploslas hormonas del pncrcaq -lainnilma y el glucagn-, hormonas dela hipfisis oxitocina, vasopmina y tirotropina o TSH. Entre las del tercer grupo estn algunascomolas hormonas de la corteza suprarrenal -el cortisol y la aldosterona- y de las gnadas -los andrgenos y los estrgenos. En la figura60.1se puedeobservar laestructura dealgunas hormonas dediferenta estructuras. En la tabla se relacionan las hormonas msconocidasdelorganismo humano y algunas de sus caractersticas estmcturales y funcionales.

C)

OH

d) Cis-Tir-Fen-Gln-Asn-Cis-Pro-ArgL-SLS
Gli

Fig. 60.1.

F:slructura dc algunas hormonaq.

a ) Adrenalina. b) 'T4, la letraiodo tironinao 1iruxina.e)Te~li,stcrona, Iiormonl esltroidc androgi.nic;i.d )

Vasopresina, hormona pcptidica

hipofisiaria.

lui-1:

o
Tabla Alguna.$caracterkticas de las hormonas

Homna Egado

EstniLtura

Funcin

Hom~onadel cnrimiento
TuohDpina

Pepodica (1911 Pepodica (96 y 112) Pepl3ka (39)

Efeioanahlicogeneial.Produce la libencindela IGF-1. Sintnkde

somatomedirm

(TSH) Homwna adre nomrmw pa (ACTH)

&laduracin funcin de la $;idub y tiroides; tiheracin de T,) T, Estimula la shtcsis y liberacin de plucomrtimides

(Continuacin) Funcin Crecimiento de los fr>lirulos Graaf, de ovulacin en los ovarios, sntesis de ertrgennsy espermatoghesk en los tcstcnlos En el ovario desarrolla el folculo y estimula la sntesii de estrrrnos y pmgesterona; en el tcsticulo desarrolla la? clulas intenticiak y estimula la snteskde andrgenns Mimula el crecimiento de la glndula manianay la produccin de leche Factor dela molilimcibn de lpidns

Contraccindel tero; eyeccin de la leche Contrae varas sanguneos; eleva la pmiinsan~u'nea;r e a k r b e agua por el rin

Estimula Io lilieracin de LH y F!jH

Esmula la liberacinde ACTH

Esmula Iaiiheracin de la GH

Inhihidor de la liberacin de lasomdto-

Ciclocstnial, maduracin de Vas cara*rsticai sexuales femeninas

Tabla (Continuacin)

Fnncin
Eskmidea Fasesecretoriadel tero -con los esh-genosy glndulasmamarias-; favorece la implantacin del vulo y que semantenga la preez Tonomuscular

Peptidiea (22 Y 32)

Pptdica (21 Y 30) Peplidiea (29)

Hipoglucemiante;anabticagenerald~ wbohidratos,grasas y protens Glucogenlisisheptica;tibeiadora de tipidos. Hiperpiucemiantes

Peptidia (14)

Inhibelaliberacindelasomatotropina y del glucagn

Peptidia
(84)

Elevalacalcemia y aumenta la excrecin de Sodatos por el rin Disminuye la calcemia

Peptidiea (32)

Derivado iodado de aa Peptidica (32)

Esmulacin general del metabolismo

Metabolismo del Caz* el Pi y

Pineal
Melatonina
Derivada de aminocidos Regula los rihnm biolgicos; interviene en funcione del sistema nervioso superior; mnbxrreslalaaccin delaMSH Actividad pmlactina

PLaeenta
Lactgeno P Gmadotmpina mrinica Rewm Estrgenos Peptidica (191) Pepodica (96 y 147) Peplidica (22 Y 32) &mide h i d e Mantieneia preez Mantienela preez

P m g b
M6n diOH-125 vitamina D ,

Derivado de estemide

Formacin dehueso y recaptura de calcio

(Continuacin)

Homm

Funcin

Estemide

Remila el metabotismodeloscarbohid&tos, pmtehas y es anoinnamatorio. Intervieneen la resistenciaal es*

Esteroide Estemide Maduracin de los rganos sexuales secundarios masculinos y su funcin Glucogenlisisheptica. Contraccin o relajacindelamusculahuaLisa. Liplisis Contraccin de las arteriolas Liplisis

Derivadode la timina Derivado de laamsina

EFteroide

Maduracin delascaracteddras sexuales del macho (rganos semales secundanos)

Peptidica (17) Peptidica (27) Pepodica (33) Peptidica (22) Peptidica

(28)

Estimula la secrecincidaen las clulas purirhlis del isuimago y la s e c m i h dr pepsinogrno

R e d a la secrecin delas enzimas digestivas pancretiwr>hicarhunaUi el aciamienui de la % isicula hiliar Control delasmsculosgastmintestinales Relajacin gastmhtestinal.inhibela secrecin cida y la dela pepsina inhibela secrecincida gshica. inhibeelvaciamientogstrico.E h u l a laliberacindeinsul& por elpncreas

Peptidica (43)

En el caso de las hormonas peptdicas, las cifras entre parntesis se refieren al nmero de ~ o h i d o que contiene cada cadena peptdiea. s

Ciclo hormonal
Se denomina ciclo hormonal a las diferentes etapas que transcurren para que se prQduzca la comunicacin mediada por hormonas, y ste es un proceso cclico. E n el ciclo hormonal, por lo general, interviene u n a seiial inicial. Cuando la alcanza un nivel suficiente y contacta con la clula endocrina o glandular

que tiene la caracterstica de reconocer la seal, sta constituye un estmulo para la sntesis y liberacin de la hormona. sta es transportada por la sangre y reconocida por un receptor que se une a ella y que se ciicuentra en las clulas diana. En estas clulas se produce la respuesta, que a su vez depende de la especializacin de las clulas diana. La respuesta llega de una fornia u otra a contrarrestar el estmulo inicial. La hormona tiene una vida media corta, ya que el organismo posee mecanisnios para inactivarla y eliminarla. Observemos un esquema de este ciclo en la figura 60.2. Seal
1

"p"&"L

Respuesta que

/T

Glucosa
,
~,

'

Sntesis y secrecin de glucagn

.

Glucogenlisis

.
RGANO ENDOCRINO

PNCREAS

TEJIDO DIANA
b'$. 60.2. lisquema del ciclo d e l gliicagii pancrelico.

Inactivacin

Glucagn

Hormona sangunea

)'

I
I

1;
1

En el ciclo representado, una disniinucin de los niveles de gliceniia provoca en el pncreasla liberacin de la hormona glucagn, la cual es transportada por la sangre, y al pasar por el hgado,es reconocida por los receptores hepticos especficos de esta hormona. Las liepatocitosson,en estee,jemplo,lasclulaidiana, y la respuesta especfica de este tejido especializado es la de estimular el proceso degradntivo del glucgeiio, entre otros procesos. Al llevarse a cabo la glucogenlisis se libera glucosa a lasangre 1' se cierra el ciclo, pues se produce un aumento de la glucosa sangunea. El glucagn es eliniinado mediante mecanismos especficosque se vern mis adelante. El ciclo puede w r ins complejo al tener encadeiiados 2 6 3 ciclos hormonales en secuencia. Esto sucede cuando laliberacinde nna hormona es a su vez regulada por otra. Ello podenios observarlo en el ejemplo de la figura 60.3. La disnunucin de la glucosa sangunea tambin p u d e ser reronocida en el sistenia nervioso rentral, que estimula por va nerviosa las clulas del hipotlaiuo, donde se estimula,asu vez la sntesisy liberacin de la neurohormona,factor de liheraciii de la ACTH. Esta Uegaatravsde lasangrea la hipsic,enla que es reconocida por receptores de las clulas de este tejido (clulas diana),en lascuales se produce la sntesisy liberacin de la horniona adrenocorticotropina (ACTH) (respuesta especializada). La ACTH transportada pnr lasangrees asu vez monncida por receptores delas dlulasde l a c w t m adrenal (clulas diana), y aquise produce la estimulacin dela sntesisy liberacin del cortisol. Esta hormona se transporta por la sangre y es reconocida por receptores en hgado. hipisis e Iiipntlamo (clulasdiana), donde provoca la regulacin de prncesos especficos. En el hgado estimula la gluconeognesis, la que, liberada a la sangre, contrarresta la disminucin que exista de este metabolito, causa que prowc el desencadenamiento de todo este ciclo. El cortisol adems, inliibe la secrecin del factor de liberacin de la ACTH por el hipotlamo y la de la ACTH por la hipfisis.

Fip. 60.3. Kcpresentacin dc los ciclos encadenados del A U H y el enrlisul.

Losmecanismos que inactivan al cortisol disminuyen sus niveles en sangre, y a su vez tambin deja de sintetizarse y liberarse al ser tambin eliminados los niveles sanguneos de ACTH.

Espeeifieidad hormonal
En losejemplos deciclos hormonales descritos se ha puesto en evidencia la triple espeeiocidad presente en la accin de las hormonas. La primera la hemos visto representada en la especificidad del origeii de las hormonas, pues s61o clulas especializadas pueden sintetizar estos compuestos. En la tabla 60.1 podemos observar que, por lo regufar,cada hormona es sintetizada en un tejido glandular. Hemos podido notar que ellas ejercen su accin sobre las clulas diana, que son las que contienen los receptores especficospara cada una de esas hormonas. ksta es la segunda especificidad, presente en las clulas diana. Algunas hornlonas actan solamentesobre un tejido y como ejemplo tenemos la hormona tirotropina, segregada Por la hipfisis y que actasohre la glndula tiroides. Pero otras pueden actuar sobre varios tejidos; el glucagn tiene receptores en el hgado y en el tejido adiposo. Una terceraespecificidad de las hormonas es la de respuesta. La hormona regula determinados procesos en cada tejido, y la posibilidad de regularlos depende de la esPeci*izacin celular de cada tejido. En el hgado, el glucagn provoca una activacin delaglucogenlisis e inhibicin de la glucognesis. Sin embargo, en el tejido adiposo, la h0Imma provoca la activacin de la eiizima que hidroliza los triacilgiiceroles. Esta enzima se encuentra en este tejido y no en el hgado.

Sistema neuroendocrino
En los organismos pluricelulares desarrollados, mamferos y, en particular, en el hombre, el sistema neuroendocrino desempea un papel muy iniportante en la de las acciones de las clulas, tejidos y aparatos que lo componen. Este sistema consta de receptores que captan cambios externos e internos; de sistemas de de seales y de procesos que elaboran esa informacin emitiendo a su vez que "ordenan"acciones en otras clulas del organismo; tambin de receptores =Paces de recibir las respuestas de esas clulas, y as poder modificar la accin del

sistemaemisor de la "orden". Por ejemplo, un fro intenso puede producir un estimulo en el sistema nervioso,el qoees captado,seelabora lainformacin de esta seal, y su respuesta puede provocar la liberacin de determinadas hormonas que activan los mecanismos de produccin de calor, uno de los cuales es el temblor. Una vez pasada la sensacin de fro, se detienen los mecanismos desencadenados. En la figura 60.3 se mostr el ejemplo de cmo una seal interna convertida en estmulo puede tambin desencadenar la respuesta neuroendocrina. En estos procesos, como en otros que mantienen al individuo en comunicacin con su medio, intervienen mecanismos nerviosos y hormonales, que ponen en accin casi todas las clulas del organismo. En toda esta interaccin e k t e una jemqua de accin y reaccin. El niveljerrquico superior es el sistema nervioso central, ste rige a la hipfisis, y ella al resto de los rganos endocrinos que responden a sus hormonas. El nivel jerrqnico inferior lo ocupan las clulas diana. Pero la respuesta de stas puede modificar o alterar la accin del nivel jerrquico superior (Fig. 60.3).

Sntesis de hormonas
Una de las especializacionesde las clulas endocrinas es la de poseer las enzimas de la sntesis de la hormona que ella segrega. De acuerdo con su estructura particular, las hormonas se sintetizan de distintas formas. Las derivadas de aminocidos se sintetizan por vas especiales, en dependencia de que sean catecolaminas u hormonas tiroideas. Las peptdicas y protenicas siguen un patrn comn, y las esteroides, otro.

Sntesis de catecolaminas
La adrenalina y la noradrenalina se sintetizan en la mdula suprarrenal y su precursor comn es la fenilalanina, un aminocido esencial. La va esquematizada NH,

QCH~CH-COOH

,
(1)

I'ig. 60.4. Reirciones de la sintesis de las catecolaminas.

Metabolitos que forman parte de esta va: a: fenilalanina; b: tirosina; c: dihidroxifenilalanina (DOPA); d: dopamina (DA); e: noradrenalina (NA); f: adreoalina. Enzimas que catalizan esas reacciones: I: fenilalanina hidroxilasa;2:tirosim hidroxilasa; 3: descarboxilasa de aminocidos aromticos; 4: DA-heta-hidroxilasli; 5: dihidroxifeniletanolamina-N-metil uansferasa.

en la figura 60.4. El paso limitante de la sntesis est catalizado por la enzima tirosina hidroxilasa, la cual se activa por un mecanismo covalente, una protena quinasa dependiente de AMPc. Ambas hormonas se almacenan en los grhnulos cromafines, los que contienen catecolaminas y ATP (CAIATP) en una relacin de 4 : 1 y, adems, se asocian con protenas. En respuesta al estado de ,,tris, llega por la va preganglionar, la estimulaciu neural colinrgica (acetil colina) que produce la despolarizacin de la membrana con la entrada de Caz', lo que provoca la exocitosis del contenido total de estos grnulos a la sangre. Pero el &&de estrs tambin produce la liberacin de los glucocorticoides de la mdula adrenal; en su paso por los vasos ~anguneos, travs de la corteza adrenal, hacia a la circulacin general, el cortisoi es captado a este nivel e induce, en la zona medular, la sntesis de la enzima dibidroxifeniletanolamina N-metil transferasa (pNMT), enzima clave en la transformacin de noradrenalina en adrenalina.

H H N-C-CpN-C-C-N
H

HZ

* '
H

C,CH, \
l

CH2

l c =o
NH,

Fig. 60.5. Est,.,,ctura de la esti,,,,,. lante de la tiroides (TSH). Trlpptido formado por Beido piroglutrnico, histidina y prolina NH?.

Sfntesisde hormonas Oroideas

La t i d n a y la triiodotironina se sintetizan en la glndula tiroides. Su sntesis se puede dividir en 3 etapas. La sntesis de tiroglobulina, la iodacin, y la formacin de las hormonas y su liberacin a la sangre.

Lasntesis detiroglobulinaes estimulada por la hormona hipofisiaria,la tirotropina (TSH). A su vez, la liberacin de la TSH se produce por la estimulacin del tripptido hipotalmico(glu-his-proNH,), que es el factor de liberacin de la rotropina (Fig. 60.5). La sntesis de tiroglobulina se realiza, al igual que la de cualquier protena, por elmecanismo de la traduccin. Esta protena tiene un peso molecular de 600 000 D. En su paso por el retculo endoplsmico liso se glicosila y es empaquetada en vesculas en el Golgi; posteriormente se produce la exocitosis de dichas veiculas al lumen del folculo tiroideo (Fig. 60.6). La glicosilacin parece ser el paso limitante en esta etapa. A su vez, la TSH hipofisisria estimula la exocitosis hacia el lumen.

a: clulas glandulares, b: lumen

Iwladh
En la glndula tiroidea se concentra el iodo mediante un transporte activo en el Cual Participa una ATPasa dependiente del Na' y el K*, y que tambin es estimulada Por la TSH. La globulina tiene en su estructura residuos de tirosina que sufren una iodacin por la peroxidasa presente en la glndula tiroides. Esta enzima es una hemoprotena queseencuentra unida a la membrana externa de las clulas del folculo que dan hacia el lumm (Fig. 60.7).

Fig. 60.6. Esquema de un folculo tiroideo. Lar clulas glandulares rodean al lurnen, donde se encuentra la tiraglohulina.

Una veziodadm, losresiduosde tirosina se condensan (Fig. 60.7); parte del lumenes fagOdtad~ las clulas del folculo, estas vesculas se funden con los lisosomas y se por Pmduce SU degradacin debido al contenido en hidrolasas cidas de este organelo. Al Pr~~cirselaexocitosis la sangre, las hormonas quedan libres. Como resultado se hacia f o m 2 hormonastimideas, latehaicdohnina (T>y la trodohnina (TJ; esta ltima pareceser lams activa La tiberacin delaTSH es inhibida por lasomatostatina.

Fig. 60.7. Esquema de la sntesis de las hormonas de la glndula tiroides. a) Dos segmentos de la tiroglabulina q u e contienen 2 residuos d e tirosina y que sc encuentran adynccntes debido a la conformacin de la protena. b) Los residuos de tirosina son iodados por la tiroides , i pcrnxidasa. i Se produce la eondcnaaiin d c un residuo d e la tirosina i d a d a con el otro. La misma enzima parece estar involucrad a en esta segunda reaccibn. El residuo de alanina deshidrogenada, encuadrado en azul, se descompone, en un paso posterior, en cida pirviea y amonaco. Una dc las hormonas tiroideas, an unidas a la liroglobulina, la triiodotironina se encuentra encuadrada en amarillo.

Sintesis de hormonas popeptidicas

La sntesis de las hormonas polipeptdicas ocurre por medio del mecanismo de la traduccin (captulo 351, con la particularidad de que stas constituyen protenas de secrecin y, por lo tanto, son sintetizadas e introducidas al retculo endoplsmico rugoso (RER). En el captulo 21 se describe cmo las protenas de secrecin, unidas al ribosoma,son sintetiidas a partir del extremoaniino terminai,como todas las protena?, pero comenzando con una secuencia llamada pptido seiial, cuya funcin es la de unirse a una protena receptora del RER y asorientar su sntesis al interior de este organeto membranoso. Una vez en su interior, ocurre la hidrlisis de dicho pptido mediante una peptidasa. Otra particularidad de la sntesis de estas hormonas, es la de poseer un MlNm, despus de pasar ste por su proceso de maduriicin, con una longitud mucho m a p r que la que le correspondera a la protena hormonal adems de tener en cuenta el pptido seal. Lo que ocurre es que la hormona se sintetiza en forma inactiva como la pmprohormona, al eliminmele el ptptido seal queda la prohormona, la cual finalniente es procesada y convertida en la hormona activa.

Pptido seal
A
l 1

Pptido (S)
A

Preprohormona (inactiva)
1046

Prohormona (inactiva)

Hormona (activa)

R n -

Tomemos el e,jempll) de la insulina, que es sintetizada en las celulas heta del pncreas Luego de eliminado el pptido seal a la preproinsulina por la peptidasa del RER,2 enzimas transforman a la proinsulina en insnliiia. Estas enzinias le eliminan el pptido C.

Pptido seal preproinsulina [inactiva)

Pptido C Proinsulina (inactiva)

f.

Insulina (activa)

Esto puede serohservado con mayores detalles en la figura 60.8.

I Pptido seal 6 i Cadena A m 1

Par de aminocidos bsicos por donde ocurre la hidrlisis del pptido m Pptido C o Cadena B Aminocidos numerados que pcncncccn al pptido

Fie. 60.8. Etap;ts dr la sntesis dr ILi insulina. Llnii rnziiiiii senic,jante ;i la tripsiiiii hidrolira por los amiiiucidos bsici,s. y otra, del tipo d e la cai-hosipeptidasaU, eliiiiima rl resto d r los aniinuridus h&icos qiir qiiediirrin iinidos al ertrenio carhoxiliro.

Se ha estudiado que lo mismo ocurre con el glucagn, la oxitocina y la vasopresina, la P~atohormona,la gastrina,la ACTH y laSH. Un caso interesante se observ al estudiarse el precursor de la corticotropina, Cuyo Peso molecularera muclisimo mayor que el de esta hormona. Este precursor, llamado ahora pieproopiomelanocortina, contena el pptido seal, la alfa y gamma MSH, la *CTH,la beta y la gamma lipotropina, la endorfina y la encefalina (Fig. 60.9). Este precursor se sintetiza en diferentes clulas de la hipfisis, y en cada una de ellas el producto es diferente debido a la forma peculiar de hidrlisis en cada clula. La glicosilacin de las protenas hormonales se realiza al igual que todas las Protenas dentro del retculo endoplsmico, y a su paso por el Golgi se completa la glicosi~acin otros procesos de maduracin de la hormona. y

p- iipotropina
Fig. 60.9. Esquema de los fragmentos hormonales contenidos en la preproopiorne~anocortina.

I Pares de aminocidos bsicos por donde se produce la hidrlisis

Las hormonas peptdicas pequeas tambin tienen precursores mayores, y la porcin no hormonal est asociada con la hormona hasta el momento de su liberacin. Las hormonas polipeptidicas son almacenadas en vesculas cercanas a la cara citoplasmtica de las membranas hasta que se produce el estmulo que provoca su secrecin por el mecanismo de la exocitosis. Cuando se estudi la secuencia aminoacdica de estas hormonas protenicas, se vio queselas poda separaren familias por la semejanza en lasecuenciade aminocidos. Este hecho sugiere que tienen un tronco comn del cualevolucionaron: la GH, LTH, y el lactgenoplacentario; la TSH, FSH, LH, y la coriogonadotropina; la insulina, los factores de crecimiento semejantes a la insulina- 1 y -2, el factor de crecimiento de los nervios, y la relaxina; el glucagn, lasecretina,el pptido vasoactivointestinal, el pptido gstricoinhibitorio; y la gastrina y la pancreozimina.

Sntesisde hormonas esteroides

El precursor comn es la molcula de colesterol (captulo 531,y ste a su vez puede provenir delos steres del colesterol.

steres del colesterol

+
Colesterol &ter hidrolasa

Colesterol + &ido graso

ste es uno de los pasos limitantesenla sntesis de las hormonas esteroides. En la cortezasupramnal, la ACTHes su activador, y la FSHlo es en las gnadas. La primera transformacin del colesterol es su conversin en pregnenolona -un esteroide de 21 carbonos- por el complejo multienzimtico de la colesterol desmolasa. Este complejo mitocondrial, que contiene al citocromo P,,,, rompe la cadena lateral del colesterol y lo hidroxila en su posicin 2. Esta enzima tambin se regula, pero el mecanismo de su regulacin es menos conocido; en las gnadas se activa por la gonadotropiua y en las supramnales w r la ACTH. A partir de la pregnenolona se forma la pmgesterona, la cual puede seguir 2 rutas de transformaciones. Una va sigue hacia la sntesis de las hormonas sexuales,y la otra, hacia la de los glucocorticoides y la aldosteroua. En la figura 60.10 pueden observarse ms detalles de estas n'as. Estas hormonas no se almacenan en vesculas como las anteriores; en respuesta a una seal se sintetizan y liberan al medio, y como se seal anteriormente, se observan determinadas caractersticas de la regulacin de las hormonas esteroides en algunos de los tejidos donde se sintetizan, como son las suprarrenales, el ovario, el testculo y la placenta. Esto ocurre por caractersticas metablicas propias, se jerarquiza la sntesis de algunos de estos tipos de esteroides. Otros

Colesterol

la O 10 progesterona - -----c 17 OH Progesterona 1 @l l.@. Desoxicorttcosterona Androsteoodiona 11 Desoxicortisol 1 10 Corticosterona Testosterona 1s

Pregneoolona Aldosterona

lo

1: colesterol desmolasa; 2: 3- p -01 deshidrogenasa; 3:17- hidroxilasa; 4: 21 hidroxilasa; 5: 11- p-hidroxilasa; 6: 18- hidroxilasa; 7: 18- hidroxiesteroide deshidrogenasa; 8: complejo de la aromatasa.

Fig, 60.10, Va simplificada de la sntesis de las hormonas esteroides.

tejidos -adiposo, mamario, piel, hgado y cerebro- sintetizan andrgenos y estrgenos activos a partir de los esteroides circulantes. Sehan encontradopacientes con deficienciagentica de algunas de estas enzimas. El trastorno hormonal va a depender de la afectacin de la sntesis. Por ejemplo, el dficitde la 17-hidroxilasacausa niveles de cortisol disminuidos y una maduracin sexual deficiente. Si el dficit est en la 21-hidroxilasa, la sntesis se desva hacia la formacinde las hormonas sexuales y se produce masculinizacin muy marcada por a perderse l retroalimentacinnegativa del cortisol sobre la Liberacin de ACTH. Latgtostemna e, su vez,una hormona que experimenta hansformaciones niando sa Llega asus tejidos diana. Una vez unida a su receptor andrognico alfa, intracelular, la La enzima 5-alfa-reductasala transforma en la 5-alfa-dihidrotestosterona. deficiencia de esta enzima produce una forma de psendohermafroditismo. En el rin tambin enconhmoseste tipo de receptor, pero en este tejido provoca la sntesisy secrecin de entropoyetina. En loseritroeitos,la hormonase uneal receptorandrognicobeta que es diferente del anterior,y es transformada en la 5-heta-dihidmtestosterona. En las clulas del cerebro, una enzima semejante a la aromatasa del ovario transforma este andrgeno en 17-heta-estradiol, hormona que se une al receptor estmgnico intracelular. En las aves se ha estudiado su accin y se ha observado que influye sobre el desarrollo y la actividad neural que se relaciona con la conducta territorial del macho, con el canto y con la conducta masculina especfica de aparramiento. La 1,2525-dihidroxivitamina D, (1p-(OH), DJ.Esta otra hormona esteroide Proviene de la vitamina D, (captulo53). Su precursor es el 7-deshidrocolesterol, que Se transforma en la vitamina D, al nivel de la piel por los rayos ultravioletas del sol (Fig. 60.11).

~etebobmo inoerniadiano y su reguieci60

1049

iig. 60.11. Sintesis dc la humana activa a partir de la vitantina 11,. Fstruetura del: a ) Celecalciferol h l 25-hidrori-eol~ralriferol. c)

OH

HO

HO

1.25-dihidrori-colccalcifer<il.

1: coiecalciferol-25- hidroxilasa; 2: 25- hidroxicolecalciferd- 1 alfa-hidroxilasa

Se ha observado que la vitamina D, es inactiva, y su actividad depende de que se hidrowle 2 veces. Una ocurre en el hgado, en la posicin 25, y si los niveles de Ca3'esn disminuidos, se libera la paratohormona, qne estiniula la segunda hidrodacin del compuesto anterior en el rin. Estecompuestoactivo realizasu funcin en la mucosa intestinal y en los ostwclastos, sus rganos diana. Aqu se estimula la sntesis de una protena transportadora para el calcio y que promueve la absorcin de ste. Cuando se elevan las concenhacionesdelcaiao inim, la 1,2525-diludroxi viiaminaD3(ISj-(OH),-D,), es convertida en la 1,242425-trihidroxi vitamina D, (1,25,24-(OH),-DJ, que es inactiva. La oxidacin dela cadenalateral parece ser la va ms importante para su inactivacin,y la mayor parte desus metabulitosse excretan por la bilis.

'kansporie de hormonas por la sangre

El transporte delas hormonas por la sangre depende, fundamentalmente, de su solubilidad en solventes acuosos. Si son solubles, se transportan libres, si no lo son deben unirse a otro compuesto queles brinde la posibilidad de que el complejo formado sea soluble en ese medio acuoso. En general, las hormonas derivada3 de aminocidos -si exceptuamos las tiroideas- y las polipeptdicas son solubles en el suero, y las de los esteroides no lo son. Lasprimensse vierten ala sangrey.se transportan por eUa hasta establecer relacin con sus receptores de membranas. Son solubles las catecolaminas y las hormonas polipeptdicas. Las hormonas tiroideas y las esteroidesson insolubles en medio acuoso. Existe una protena en el plasma, la globulina transportadora de la tiroxina, TBG, tiroxin binding globulin, que se une a esta hormona. El 60 O/o de esta ltima se encuentraunida a dicha protena,e130 % seune a otra, la TBPA, tiroxin bindingpre slbumin y el 10 %,a la albmina. Estas 3 protenas se sintetizan en el hgado. As, la T, tiene una vida mediaensangre de 6 a 7 das. Las molculas que quedan Iibresson las activas y estn en equilibrio con las unidas a los transportadores. Las hormonas esteroideai tampoco son solubles en solventes acuosos. Ellas son ransportadas unidas a protenas .&ricas,y stas pueden ser, al igual que las quese unen con las tiroideas, transportadores especficos e inespecficos. Una fraccin de la albminatambineonsOhiyeuna forma de transporte inespffan,paia&a9 hormonas.

Mecanismos que degradan e inaetivan les hormonas

Ademsde la regulacin de la sntesis delas hormonas y desu liberacin, exiten mecanismos que eliminan los restosde hormonas circulantes. Las hormonas esteroides que permanecen en sangre, y que no penetraron en sus clulas diana, al pasar por el hgado son captadas por los hepatocitos e inactivadai

d&mos~e~>rdarqueestas hormonas sesolubilizan en lai membranas. Este rgano es el que contiene las enzimas capacei de efectuar esta accin de inactivacin y as ellai son reducidas, sulfatadas o conjugadas con el cido glucurnico. Estos compuestos s o n q d s a d o s de nuevo a la sangre y eliminadoscon la orina por el rin, o eliminados por la bilis, ya que estas transformaciones los convierten en compuestos solubles en solventes acuosos y les impiden penetrar las membranas biolgicas. Alynas de estas r n d o n e s estn esquematizadas en la figura 60.12.

1: las hormonas esteroides se reducen; 2: se conjugan con el cido glucurnico; 3: se oxidan en el carbono 21.

Fig. 60.12. Rcaeeiones de la inactivacibn de las hormonas esteroides. a) C o r h l . b) Tctrahidmderivadn. r ) Glueiironil cortisol. d) Uno dc los cidos cortnicos.

Las hormonas polipeptidicas son hidrolizadas por proteasas sricas o unidas a memhrana~. Algunas de estas hormonas, mediante endocitosisson incorporadas por dsknas asociados a membranas y que tienen afinidad por ellas. Una vez dentro de la clula, se funden las vacuolas endocticas que las contienen con los lisosomai que disponendelas proteasasrequeridas para suhidrli?is. Las cateeo&asson ;activad& por2 sistemasenzimticos fundamentalmente, Por la monoamino oxidasa (MAO) y por la catecol-O-metil transferasa (COMT).Pero los productos resultantes pueden &bin ser sulfatados o conjugados con el cido ~~ununico. Observen algunas de estas transformaciones en la figura 60.13. h tirosinas iodadas son recapturadas por la glndula tiroidea, y el iodo es ~ u l i k a d debido a la presencia de la iodotirosina desiodinasa, enzima microsomal o W rrquiere NADPH. Enlosdiferentes tejidos son varias las transformaciones que pueden experimentar las tinIninas. En el hgado, msculo, rin, cerebro, hipfisis anterior y en la propia pindula b i d e a se encuentran tironinas desiodinasas. Una de ellas desioda el anillo externo, y la otra el interno. Adems, estas hormonas pueden ser desaminadas y desearbodladas en varios tejidos -hgado, rin, msculo y cerebro-, y en el hgado ser mnjugadas con el cido glucurnico.

obos tipos de regulaciones

de la respuesta hormonal

Emsten ohos mecanismos especiales que iambin regulan la respuesta hormonal.

stos actan sobre el nivel dc receptores existentes en las membranas, o sobre su

"tesis

o al nivel de su degradacin.

Noradrenalina

Nonnetanefrina

cido 3.4- dihidroximandlico

cido vanilniandlicu

Fig, 60,13.

de la inactivaein de las catecalaminas.

1: accin de la monoamino oxidasa, lo que produce los derivados desaminadoj: 2: accin de la catecol orto metil transferasa con la produccin de los metil derivador.

Se ha comprobadoque exi$tenmecanismos de regulacin que controlan la sntesis de los receptores. Como ejemplospodemos citar el estmulo que provoca la FSH sohre la sntesis de los receptores dela LH. Otro ejemplo lo tenemos en la prolactina, que es capaz de estimular la sntesis de sus propios receptores.

La desensibilizacin ha sido observada al estudiar la respuesta a la adrenalina. Un primer estmulo de esta hormona sobre sus tejidos diana provoca una respuesta muy superior a la que causa el segundo, si ste se produce en las prximas horas cercanas al inicial. Se ha visto que la causa parece deberse a un nmero menor de receptores activos, provocado por un desacople de algunas de las protenas relacionadas con la trasmisin de la seal a la clula. En este caso la adenil ciclasa, que normalmente interacta con el receptor beta de la adrenalina. se desacopla de l.

Regulad611 degradad611del reeeptoq down reguiaiion por

La funcin de algunas hormonas implica la formacin de un complejo hormona-receptor que debe internarse en la clula y degradarse para que se produzca la respuesta hormonal. Generalmente el nmero de receptores existentes es mucho mayor que la posibilidad de la formacin de complejos, sin embargo, en algunos casos en los que se produce una activacin crnica que va acompaada de la degradacin de stos, se requiere cierto tiempo para que el nmero de receptores que debe ser sintetizado se recupere. Se ha observado que este proceso se produce en el caso de los receptores de la insulina, del factor de crecimiento epidrmico (EGF), de la GH, del TRF y del glucagn. El internamiento Y degradacin del complejo hormona-receptor ocurre siguiendo el esquema que se presenta en la figura 60.14.

Fip. 60.14. Drgradaiin de los receptores de membrana. a) Se representan los receptores d e m e m b r a n a como iirculos y una porcin d e la m e m b r a n a recubierta de clatrina en rojo. b) Los receptores se concentran en la zona recubierta can clatrina y se produce la internalizaein en e ) . d) Una vez en el interior de la clula son cubiertos por los lisosomas en e). f) Se produce la hidrlisis de SUS componentes.

Regolean de la respuesta hormonal

Las concentraciones de las hormonas en la sangre dependen de diversos factores entre los que se encuentra la necesidad o no de transportador. Si no requieren traosportadoreshay que considerar: 1.Laregulacin de su liberacin. 2. La &dad por sus receptores. 3. Su eliminacin, inactivacin o degradacin. Si requieren transportadores, adems de los anteriores aspectos hay que tener pmnte:

queslo la hormona libre es la activa.

Agonistas y antagonistas de la accin hormonal

Existen sustancias estructuralmente semejantes a las hormonas que son reconocidas por los receptores y se ligan a ellas. Generalmente son molculas sintetizadas en el laboratorio con el fin de actuar contra las enfermedades ya sea Produciendo la accin hormonal o impidindola. Las primeras son los llamados agonistas, que producen el mismo efecto de la hormona en mayor o menor grado We sta, y las segundas son los llamados antagonistas. que tienen afinidad por el rWePt0r hormonal, pero no producen el efecto hormonal e impiden que la hormona acte; actan de forma semejante a los inhibidores competitivos de las enzimas. En la figura 60.15 se muestran ejemplos de la estructura de cada una de estas sustancias y el uso que se les ha dado en la medicina.

l
I

FI 60.15. Ejemplo de a g u a y antagmkh I

ertrngnico. a) Estriol, hormona

emognica n a d b) Diehlesolk tml, "c<tNEta sint6tico que fue uti-

lizado para evitar abortos hasta que se demostr que produca malformacioncr en l a recin nacidos. r) Hidroritamoxifen, antagonista otilirado para detener el crecimiento de los tumores dependientes de estrgeno%

Modelos hormonales
A continuacin se expondrn 3modelos hormonales, escogidos por tener diferentes estmcturas y mecanismos de accin: el glucagn, el cortisol, y la insulina

Modelo del glncagn

El glucagn es una hormona pepidica de 29 aminocidos que se sintetiza en las clulas alfa de los islotes de Langerhans del pncreas y en clulas especializadas del tracto intestinal superior. El producto de ambos tejidos es idntico y pertenece a una que familia de pptidos hormonales, los cuales muestran secuencias C O ~ ~ S ~ N X ~ ~ S , ~ indica su evolucin a partir de la duplicacin de genes de un precursor comn. Entm ellos tenemos, adems del glucagn, la secretina, el pptido intestinal vasoactivo (VIP)y el pptido inhibitorio gstrico (GIP) (Fig. 60.16). Secretina 'H,N-hi5-ser -asp-gli -tre-fen -me -ser-glu -leu -ser-arg-leu -arg-asp ser-ala-ar,o-leu-gln -arg-leu -leu-gln -gli-leu -val -COO20 27
I

10

Pptido intestinal vasoactiva

gln - rnet -ala -val -lis - lis -tir - leu - asn -ser- ile - leu - asn -COO

20

28

'~,N-his-ser- glu - gli -tre - fen -tre - ser - asp -ti1 - ser - lis -tir - leu - asp Fig. 60.16. Composicin nminoardica de una familia dc pptidos.

10

ser- arg - arg - ala - gln -asp -fen -val -gln -m - leu -met - asn -tre -COO

20

29

La sntesi~ Ueva a cabo al igual que en todas las hormonas polipeptdicas y Se se sintetiza como preproglucagn con un peso molecularde 18000D.Luegode hidmlizado el pptido seal, la prohormona se almacena en veaea& d d aparato de C;oig y p e m w en so forma de proglucagn, hasta que se estimula su secrecin a la sangre. En este momento es procesado por 2 enzima-,: del tipo de la tnpsina y de la carboxipeptidasa fk

que &den

su cadena al nivel de pares de aminocidos bsicos y queda en su forma defuiitiva activa con un peso molecular de 3 500 D (Fig. 60.17).

~1 & m u l o de la secrecin del glucagn es diverso. En realidad no se conoce an el m&mo mediante el cual las clulas alfa del pncreas detectan los niveles bajos de glucosa en sangre, que se sabe estimulan la liberacin de glucagn: tamhin la Libe-n es estimulada por las bajas concenh-aciones sanguneasde otros metabolit~ energticoscomo son los cidos grasos, los cuerpos cetnicos y los aminocidos. Otras ~ r m o ~ g a s t r o i n t e s n a ltambin promueven su beracmn,asicomola estimulacin es del simptico por medio de receptores beta adreniyicos y el parasimptico a mV&delreceptor muscannico de la acetil colina. Por e s t a ltimas vas es que se sabe queel glucagn responde a situaciones de estrs y ejercicio intenso. Al estimularse su beraein ocurre un aumento intracelular de Caz*y se produce la exocitosis de las vesculas que lo contienen. El glucagn tiene receptores slo al nivel de 2 rganos: el hgado y el tejido adiposo. El nmero de receptores puede ser regulado y se conoce que las hormonas timideas inducen su sntesis en el tejido adiposo. Elgiucagnachaen receptores acopladosa la G , receptores tipo beta adrenrgicos. Una vez que el glucagn activa a su receptor en estos tejidos. se activa la adenil ciclasa, que forma el AMPc y ste activa la protena quinasa A. La Itima fosfora a diversas e m h a s y ejerce efectos diferentes en dependencia del tejido en cuestin. Al nivel del hgado, su efecto va a ser hiperglicemiante, es decir, contrarresta los niveles bajos de giucos( en sangre. En este tejido, la protena quinasa A interviene en el mecanismo de frsforilaun de las 2 protenas reguladorasdel metabdsmodel glucgeno: la glncgeno fosTorilasa y laglucgeno sintetasa. La primera se activa). la segunda se inhibe, y esto produce el efecto de estimular la degradacin del glucgeno e inhibir su sntesis (captulo 43). Esteefectoes muy eficiente,yjunto con los glucocorcoidesy la adrenalma impide la produccin de hipoglicemia en el ayuno y en los ejercicios muy prolongados, siemprrque el <jeto est sano. La adrenalina y ohus agonistasbeta adrnq$ms esmulan la Liberacin de inwlina por las clulas beta del pncreas. Tambin al nivel del hgado se produce una jerarquizacin de procesos que impulsan la gluconeognesis e inhiben la gluclisis. Se produce la inhibicin de la phvato quinasa al fosforilarse la enzima por la protena quinasa A, y lo mismo ocurre k aceW-COAcarboxilaia: sin embargo, la fosforilacin de la enzima buncional que fosforila o desfosforila a la fructosa 2,6 bisfosfato impide la sntesis de este metabolito producindose, por ende, una activacin de la fructosa-l,6-disfosfato faba% y la inhibicin de la fosfofructoquinasa 1. La glucosa-6-fosfatasa tambin se a d v a p o r accin del glucagn. Como tambin en el hgado esta hormona activa la protelisis intracelular, los sushatos de la gluconeognesis aumentan. Los lisosomas, parecen intervenir en esto, Puestoquese ha observado que uno de los efectos del glucagn es causar el aumento de 1% vacuolas autofgicas. De modo que la degradacin de protenas provoca un aUmentO en los niveles de aminocidns, los cuales se desaminan. Por un lado aumenta umgnesi~,y otro, las cadenas carbonadas de los aminocidosson utilizadas en por lagiuconwgnesis. La urea seeleva, y por un mecanismo no bien conocido, inhibe la i" * heptica de protenai. Con respecto a esto, se ha observado que existe una en la tenninacin delas cadenas polipeptdicasen los ribosomas, y se cree que " P ~ W T I Iunefedode esta hormona mediante la inhibicin del proceso deelongacin O de terminacin (o ambos) en la traduccin.

H~GADO
Glucgeno

Glucosa- 6- P Urea
(+)

(+)

Urea TEJIDO ADIPOSO

Aminocidos cido oxaloactico

(+)

Tnacilglicndos

Protenas

cidos grasos

cidos grasos
Fig. O.21. Esquema de lo. efectos del cortisol

Elreeeptor de la insulina consta de 4 subnnidades: 2 alfa, de 719 aminocidos; y 2 betrqde6U)aminocidos. Es transmemhranal, como todos los receptorade membrana, y en sus 2 subunidades alfa (externas)se encuentra el sitio para la hormona, en cada subunidadalfa;mientras clue las 2 unidades heta, que son las queatraviesan lamembrana, SOII~nzimas tipo tirosn quinasas de protenas. Las subunidades se unen por puentes del disulfuro (Fig. 60.22): l ?2 alfa entre s, por un puente disulfuro, y cadasubunidad beta, a Wunpuente disulfuro con una alfa. Las alfa estn glicosiladas.

h.
G

\P
b)

P '

Fig. 60.22. Representacin del receptor de la insulina. Las subunidadcs alfa se encuentran glicosiladas. Las subunidades Iieta son transmembranales y tienen la actividad tirosina quinasa. a ) Receptor no aiti\ado. b) Receptor activada al iinirsele la iiisulina.

En su dominio intracelular, estos receptores tienen varias tirosinas que resultan fosforiladasprobablementepor unmecanismodetransfosforilacinentrelas actividades quinasas de las 2 subunidades beta. Las tirosinas 960,1146,1150,1151,1316 y 1322 son las que sefosforilan. A su vez estos sitios catalticos fosforilan a ms de una protena intraeelular. De lo anterior sededucequeson mltipleslosefectos que pueden pmduciw. Ms de una protena va a ser activada al unirse a diferentesporciones del receptor. En la figura 60.23 se representa un esquema de las accions del receptor de insulina

MAPQ Vescula

Fig. hO.23. C3qurina de las proreinas que son activadas por el receptor de insiilina. La SHC se activa por inirrmrdio de una profciiia adaptadora. la PTB. por esta ra se aetisa la cascada de las \1i1' quiniisa.. i.~piil.indosela eqwrsitiii de penes. Se a c t i ~ a \.id de la fosfolipasa gamrna. 18 al parecer por iiiteriiirdi<i de lu p85. Uno de los factores qilc parece necesario pira increiiiriirar lo, rrccptorm de glucosa. los GLUT-4, en l a membrana, es l a artivaein dc la fmfdridil inosiiol 3 qiiiiissa a Ira\& del rustrato-1.2 del receptor de insulina y la p8j.

Sus receptores se han aislado de clulas del tejido heptico y adiposo, aunque existen en otros tejidos. Hay diferencias en cuanto a la disposicin de los receptores hepticos g adiposos. En el adipocito, los receptores se hallan siempre agrupados en 2 o en 3; en el hgado se encuentran aislados. Los recentores de esta hormona nenetrm en laclula, una vez formadoel complejo con la hormona; ellos se agrupan en zonas recubiertas por una protena llamada clatrina y son endocitados (Fig. 60.14).

C6mo se me0 Im pmdenai celulares al receptor de iBsulms

Se ha visto que las protenas quese unen a la subunidad hetalo hacen reconociendo los sitios donde se encuentran las tirosinas fosforiladas. Algunas de estas protenas se activan al unirse a estos sitios sin ser fosforiladas, y otras se fosforilan a su vez en tirosinas. Se han descrito dominios en las protenas involucradas en estas seales que son capaces de reconocer tirosinasfosfatadasy los amincidos que las rodean. En el C M del receptor delainsulina hay undominio Uamado PTS -protein prmine bnding,quese encuentraen 2 de las protenas que se unen a este receptor: el sustrato del receptor de insulina 1,2 y la protena SHC. Ambas resultan fosforiladas por el receptor. LaSHC es una prokna adaptadora. AeUa se van a unir protenas para ser,a sil vez, activadas. Este es el caso de la GRB2, que se une a la SOS y por esa va se activa la cascada de la RAS y MAP quinasas,quese ha visto que acti~a factores de transcripcin.

por intermedio del sustrato del receptor de insulina se activa la va de la fasfolipasa-gamma,tambin por esta va se activa la GRB2 unindose por otro sitio. ~dems,por va se activa la traslocacin de los receptores de glucosa, los GLUT-4, esta alamembrana plasmtica. En la activacin de los GLUT-4 interviene la fosfatidil inositol3 quinasa, pero parece que no es ste el nico factor que toma parte en dicho proceso.

-ucci6n

de seales por la h & a

Aun cuando no se conocen todos los pasos en la sealizacin del receptor de insulina, ya se vislumbra el camino. Se empieza a entender la relacin entre el transportador de glucosa 4 y el receptor de insulina (Fig. 60.23). Los efectosde la insulina los podemos dividir en aqullos que ocurren en un plazo corto, despus de haberse puesto en contacto la hormona con su receptor, y los que ocurren mucho tiempo despus. Losefectos a corto plazo se deben a los aumentos de los transportadores al nivel de las membranas que afectarn el paso a travs de la membrana de glucosa, aminocidos e iones; y se ha demostrado que estos efectos ocurren antes del proceso de interiorizacin del complejo hormona-receptor. Los efectos tardos pudieran deberse ala accin de la insulina en eventos intracelulares. En general, la insulina es una hormona hipoglucemiante y anablica. Sobre el metabolismo de los carbohidratos, la insulina provoca la entrada de la glucosa a las clulas, una activacin de la gluclisis y una disminucin del proceso gluwneogentico. Aumenta la sntesisde protenas e incrementa las reservas energticas apartir de los Ipidos y los glcidos (glucognesis).Tambin se elevan los niveles de NADPH y de ATPpor la va de la gluclisis, ciclo de Krehs y cadena respiratoria. Ya se conoce algo sobre el mecanismo ntimo de accin de la insulina. Deben ser reguladas enzimas claves que produzcan estos efectos. Los niveles de la actividad de lafmtosa-1,6-difosfatasay la piruvato quinasa disminuyen. Las enzimas activadas son las glucgeno sintetasa y la piruvato deshidrogenasa. Sin embargo, estos experimentos se han llevado a cabo a concentraciones ms altas que las fisiolgicas. En la figura 60.24 se puede observar un esquema de sus efectos. La misma interiorizacin de esta hormona es la va de su destruccin, pues las proteasas lisosomales la bidrolizan. Una inactivacin casi total se logra con la dhinande la asparragina carboxilo-terminalde la cadena A. Tambin se encuentra Prrsente en el hgado y en otros tejidos una enzima transhidrogenasa que inactiva a la insulina al hidroeenar los puentes disulfuro. Los hidrgenos en esta reaccin son aportados por eiglutatin-reducido. Una proteasa a ~ a - ~ u ele ha denominado se iosunasapuede entonces hidrolizar las cadenas separadas.

Adipocito como rgano endocrino

Se ha visto que el adipocito no es un rgano pasivo. l secreta el factor de "Wtosis tumoral (TNF), leptina, adipsina y angiotensina. La leptina parece que regulala ingestin de comida, la termognesis y el gasto de energa. Los aumentos de la masa adiposa producen aumentos del TNF y ste acta como adipostato, regulando la e~fin~omielinasa. enzima libera ceramida que estimula la Esta aPoptosis y la diferenciacin de los monocitos. Una accin importante del TNF es que inhibe la actividad del receptor de la insulina, la tirosina quinasa sobre el propio receptor y sobre el sustrato IRS-1, y e t h l a la degradacin del receptor del GLUT-4.

Se denominan endocrinopatas a aquellas enfermedades ocasionadas por una de la funcin hormonal. Pueden deberse a una insuficiente produccin de la

El tercer ejemplo e el de la iasuna,de efectos conocidos. Su mecanismo de s a d 6 n se aclara eada vez ma Interviene en muchos procesos eeluiarea mediante mecanismos covalentes y -do factorea de transcripcin de genea Su receptor tiene aetindad de tirwhi quinasa Esta hormona ea hipopiieemiantey anablica.

Eecco jriis
1. Intente realizar el esquema del ciclo hormonal especfico de la hormona ACTH. Consulte otros captulos de este texto. Adems intente realizar el ciclo de la adrenana 2. Explique por qu usted cree que el glucagn puede ser reconocido en el adipocito y en el hepatocito, y por qu en cada uno de estos tejidos su accin es diferente. 3. Haga una tabla donde se presente el tejido de origen, el precursor o los precursores de su sntesis, la enzima marcapaso de la sntesis de las hormonas catecolaminas, las tiroideas, las esteroideas y las polipeptdicas. 4. Haga un esquema dondese represente lo ms detallado posible el ciclo hormonal de la 1JS-(OH),-D,. S. Realice una tabla donde se resuman los mecanismos de inactivacin y degradacin de las hormonas. 6. Efecte un esquema del mecanismo de accin hormonal del cortisol. 7. Constmya un esquema del mecanismo deaccin hormonal del glucagn. 8. Sobre la base de los conocimientos adquiridos, realice un esquema hipottico del supuesto mecanismo de accin de la insulina relacionado con sus efectos a corto plazo. 9. Sobre la basede los conocimientos adquiridos, disee un esquema hipottico del supuesto mecanismo de accin de la insulina relacionado con sus efectos a largo plazo.

A lo largo del estudio del metabolismo intermediario y aun en los procesos enmarc;idosfn la gcntiu niul~viilur,el Icctor ha enwntradu, en cada pnr.esoc%tudiado. la existencia de dispusiliro\ de control que mudiilun lu inteii\idad con que stv se Ueva a cabo en un momento determinado. Los mecanismosa que hacemos referencia son de la mayor importancia biolgica. EUos aseguran la regulacin de la complicada red de transformaciones fisicoquimicas que constituyen la esencia misma de los seres vivos. Aunque los tipos fundamentales de regulacin del metabolismo han sido tratados alestudiar el proceso correspondiente, se ha considerado conveniente reunir los ms s o b d n t e s e n tomoa este tema, con la intencin de presentarlos en formasistemtica y wherente,para propiciar una visin ms totalizadora y que refleje las caractersticas generales, as como los rasgos distintivos de los diferentes modos de regulacin metablica.

concepto
La regulacin metablica es la accin ejercida por los mecanismos de control a que estsujeto el aparato metablico de las clulas y de los organismos superiores, de formatal queexista un eqdibrio entre aporte y demanda desustancia (metabolitos)y energa, en constante adaptacin a las condiciones cambiantes del medio y del organismo. Por logeneral, cualquiera que sea el mecanismo de control, en ltima instancia e~6involucrado cambio en la actividad o la concentracinde algunas de las enzimas el queintervienenen el proceso regulado. El cambio de la actividad puede ser propiciado Por factores nue modifican la cintica- enzimtica. tales como la concentracin o ~ ~ ~ ~ ~ ~ disponibilidad de sustrato o bien mediante influencias que afecten sensiblemente la a&idad catalticahtrwea dela protena enzimtica, como es el caso de la regulacin Cmlente. Inclusive, en el enfoque de la especializacin celular como mecanismo de +acin metablica, encontraremos en el rgano o tejido, que la especificidadque Al hacer el recuento de los diversos mecanismos de regulacin metablica que oPenuienlaclula y eIorganismo,se hade procurar observar los rasgos comunes o qne estan pmentes en varios mecanismos y aqullos que le dan individualidad. Tambin es conveniente compararlos atendiendo a diferentes criterios, ya sea el tiempo que demoran en hacer efectivo su control, o la fugacidad o mayor permanencia de sus "ciones,ascomo el nivel o sistema en el cual operan. ~eestamanera que lograremos es Una Concepcin global de la regulacin metablica y se comprender mejor la Wmplementaridadrecproca de los distintos dispositivos de control del metabolismo.

~.~
~ ~ ~

~~ ~ - ~

Diferentg tipos de m c n s o de regulacin metabika eaims

Aunque pasan de la decena los mecanismosindividuales que han sido distinguidos por diferentesautom,centraremos nuestra atencin en un conjunto de 6 mecanismos, los cuales abarcan las acciones reguladoras ms significativas del metabolismo. No obstante, nos referiremos tambin, pero ms brevemente, a otros mecanismos que han sido individualizados. Las mecanismos de regulacin metablica fundamentales que se deben considerar son:
1. Disponibilidad de sustrato. 2. Compartimentacin celular. 3. Modificacin cnvalente. 4. Modificacin alostrica. 5. Induccin y represin enzimticas. 6. Especializacin celular.

Entre los factores que modifican la velocidad de una reaccin enzimtica, la concentracin de sustrato es uno de los que ejerce una iniueucia drstica y directa en ella. Al estudiar la cintica enzimtica se analizcmo se modifica la velocidad de una reaccin, en la medida en que vara la mncenhacin de los susbatos No debe sorprrnder entonces que en el metabolismo existan pasos en los cuales las fluctuaciones de la concentracin de los sustratos provean el mecanismo automtico de ajuste de la velocidad del procesa en cuestin, a las circunstancias imperantes en cada momento. s Tal e el caso de la reaccin inicial de transformacin de la glucosa en el organismo. es decir, la fosforilacindel monosacrido (captulo 42). La hexoquinasa que cataliza la reaccin de transferencia de fosfato desde el ATP a la glucosa, en la mayora de los tejidos posee una Km pequea, de manera que a concentraciones normales de glucosa en sangre la enzima de esos tejidos se encuentra i n trabajandoal mximo desu capacidad cataoca. S emhargo,laglucoquinasa heptica, la cual, por el contrario, tiene una Km mucho ms elevada, responde en el acto a los aumentos que se producen en la glicemia y que se traducen, como es lgico. en incrementos de la concentracin de glucosa en el interior del hepatocito. Al hacerse efectiva esta especie de reserva cataltica, constituida por la glucoquinasa, se dispone rpidamente de los excedentes circulantes de glucosa. La fosforilacin acelerada posibilita que el glcido pueda seguir cualquiera de los mltiples destinos metablicos alternativos que se le ofrecen, una vez en forma de ster fosfrico. En la figura 61.1 se representa grficamenteel comportamiento de ambas enzimas.

Fig. 61.1. R~presentatingrfica del eamportarnicnto rintiro de la hexoquinasa :la glueoquinasa ron la variacin de la cnncentracin dcl sustrata. Desde valores muy bajos dr concentracin dc glucosa -del orden de 10~'-, la hexoquinasa alcanni su mxima velocidad. En camhin, la ~lucoquinasa va aumentando la relsidad de la reaccin en la medida qur >e inrrrmontn la conrrnlracin dr glucosa en un amplio rango que va de lo-' a IUz.M.

4 Km = O, I mM

4 Km = 1OinM

Concentracin de glucosa

Glocoquinasa

Hexoquinasa

Estemecanismoopera tambin en los casos en que participan vanos sustratos,por ejemplo, la sntesis del cido ctrico, que forma parte de las reacciones del ciclo de Krebs y para la cual se requiere tanto del cido oxaiactico como del acetil-COA.No -, ,e t suele existir siempre uno solo de los sustratos como determinantedel ritmo &n>oversin. En este caso, el oxalactico, al unirse a la ctrico sintasa aumenta su W d por el otro susirato, la acetil-COA(captulo38). En condicionesespeciales, la intensidad de funcionamientodel ciclo puede verse restringidapor un dfiUt en la disponibilidad relativa del cido oxalactico,tal como -en sihiacionesen las cuales el c a t a h o h o glucdicu se encuenha comprometido, yasea por un ayuno prolongado o en la diabetes mellitus descompensada. Loscambiosqw o m n en virtud del mecanismo de ladisponibilidad desustrato seestablecencon granceleridad, ya que las fluctuaciones en la concentracin de los mmpuestos reamionantes influyen directamente en las pasibilidades catalticasde las &as involucradas, sin que medie ningn otro mecanismo adicional. Un proceso esencial para el metabolismo energtico, la respiracin celular, y ecpeQaimente las etapas de la cadena respiratoriay la fosforilacin oxidativa, responden en su direccin e intensidad a 2 variables fundamentales: la [NAD']/[NADH] mtrarnitocondrial y la [ATPV[ADP]+ [Pi] extramitocondrial. Como quiera que el ADP y el fosfato son sustratos de la fosforilacin oxidativa, y el NADH se puede considerar de igual modo con respecto al transporte de equivalentes de reduccin enia cadena -de hecho es efectivamenteel sustrato de la NIUfH deshidrogenasa-, se amprwdequeal menos en parte,en el wntrol de este sector medular del metabosmo est presente el meranismo de regulacin por disponibilidadde sustrato. EsUamativa la precisin que puede resultar de estos ajustesdependientes de una eioticaen funcin de las concentracionesde los participantesen las reacciones, toda vez que el consumo del producto fundamental, el ATP, puede variar desde 600 g de ATPmix' que gasta un sujeto de 60 kg de peso, Uevando un equipajede 25 kg cuesta aniba,hasta apenas 27 gde ATP.min-' durante un penodo de reposo.

Estemecanismo se d i h g u e por el hecho de que la circunstancia que va adetennirwr en laintensidad de la va o reaccin metablica viene dada por la accesibilidad de los participantes de sta al compartimientocelular en que se encuentran confinadas las enzimasdelavia. Es preciso tomar en consideracin ladinmica del trasiego de metaholitos a travs de las membranasde los diferentesorganelos intracelulares,pues si no se hace as, a estosnstemasse les puede confundir con los regulables por disponibilidad de sustrato. Como en &tima instancia,es la concentracin del sustrato en el compartimiento adecuado,ia que provoca los cambios en la intensidad de la va, se comprende esta confusin. Lo que sucede ES que el fenmeno pnniario que establece verdaderamente el efecto regulador est determinado por los controles que operan en el transporte de metabolitos por medio de las membranas de los organelos, y la concentracin del m b e s , e n este caso, un factor secundarioy subordinado al aspecto esencial, el cual se * d a indisolublemente con la compartimentacin celular. Una de las principales ras catahlicas del metabolismo intermediario, la beta o*cin de los cidos g m , es un exponente inequvoco de este tipo de regulacin metabbca. La capacidad cataltica del conjunto de enzima que participan en este pnaeioes sugente pamdar cuenta de los cidos grasas que penetran en la mitocoodria en todos los estados estudiados. De manera que el funcionamiento de la ra en s, no se halla restringido por tipo de control metablico que sea significativo. En coasffuencia, la intensidad del proceso degradativo de los cidos grasas wene dada por el flujo de estm compuestos hacia el interior de las mitocondnas. El acceso se

produce en forma de acil-carnitina,como fue tratado oportunamente (captulo 50). La transferencia de los grupos acilo desde lacoenzima A a la carnitina, es catalizada por la . caniitina palmitil transferasa 1 Naturalmente que a mayor activacin de este sistema, mayor serel trasiego de cidos grasos hacia la mitocondria y,porende,se incmmentar proporcionalmente el proceso degradativo. Resulta de inters el hecho de que el malonil-COA,quees un intermediarioclave en lasntesis delos cidos grasos,constituyc un inhibidor eficaz de la transferasa. Ello evita que en condiciones metahlicas,en las cuales se halla estimulada la produccin de cidos grasos, stos sean atrapados por la maquinaria degradativa mitocondrial dando lugar a lo que sera un ciclo ftil de sntesis y degradacin. En la figura 61.2se esquematizalo ms significativo de la regulacin metabliia por compartimentacin en la beta oxidacin de los cidos grasos. Citosol

.. , .
.
~

B oxidacin

Fig. 61.2. Esquema de la regulacin por eompartirnentaein de la beta oxidacin de los tidoi grasos. Se destaca 1 intervencin del malonil-COA como inhibidor de la enzima tarnitina palrnitil . a transferasa l.

Queda evidenciado que aunque existe un control inhibitorio por parte del malonil-COA,steno se ejerce sobre ninguna delas enzimas dela beta oxidacibn, de suerte que la regulacin esmediada por la existencia de la compartimentacin. El flujo de cido ubico mitorondnal al citoplasma,donde es canvertidoen oxalacti~o Y acetil-COA, un punto cmcial para la va de sntesis de cidos grasos, no slo porque es dependede ello para la provisin de su precursor, sino tambin como fuente de una parte no despreciable del potencial reductor que requiere esa va (captulo 49). De modo que si la regulacin alostrica de la enzima aceol-.COA carboxilasaconstituyeelpunto decontrol ms significativo de este proceso, en l se evidencia adems, el fenmeno de la compartimentacininfluyendo en su realizacin.

Este mecanismoha sido estudiadoen detalle al tratar el metablismo del glucgeno (captulo 43). Son mltiples las vas metablicas que estn sometidas a este tipo de control. La eniima clave es susceptible de aceptar la unin covele~te un grupo de atmico, y ello provoca una influencia decisiva en la actividad cataltica de sta. La sirnacin puedc revertirse, es decir, la enzima puede perderel grupo que se le ha unido y con ello retomar al nivel de activacin anterior. Ea modificacin covalente mis estudiada es la que resulta de la fosforilacin de residuos de serina en la protena ennmtica. Tal es el caso de la fosforilasa de glucgeno, la siutasa de glucgeno, !a reducta$a,entre otras. lipasasensible a Iiormonas y la hidroximetilglutarii-COA En el caso de la fosforilasa, la modificacin covalente provoca el cambio haciaei ogmemactivo (forma a). Sin embargo, para la sintasa la forma fosforil8drr;l-cltasi:r lamenosactiva. Como regla, se observa que las enzima regulables por Y F i;:r-::x>mv, si participan en vas catablicas suelen ser activas en sns formas !iick:>rii,?des. .,. ! intervienenen vas de sntmises la no Fosfatadalaformaactiva. E a ;cs:!lxi<iadnr. : s ! casual. La modificacin covalente y, especficamente, id consistente en la atilribii ti.: gniposfosfatos,se encuentra en el centro de uno de ios mecanismos de accin hornmnd fundamentales. Es el mediado por el AMP cclico. As, hormonas como el glticagun. que promueven tanto el cataho!ismo glucdico como la iiplisis, ejercen su accin concertada en ambos sectores metahlicos, al igual que lo hace la insulina, hormona promotora del anabolimo. La rquhcin por mndific;lcin covalente da como multado cambios relativamente rpidos, puesto que las transformacionesson catalizadas por enzima$,es decir, la unin ola separacin del grupo en ceestin; en el caso ms comn del faFiato son las quinasas y fosfatasas de protena% Ello naturalmente le imprime un ritmo acelerado al cambio, que adems suele ser brusco e intenso por el fenmeno de la amplificacin, asociado de ordinario con este tipo de regulacin y analizado en el captulo 17. El hecho de que este mecanismo sea tributario de control hormonal lo siha en una regulacin metablica al nivel integral del organismo, dado que las interaccioiies hormonales responden a necesidades de coordinacin de los estados inetablicos de diferentes rganos y de la disponibilidad general de metabolitos, reflejada en los niveles sanguneos de stos.

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ikta modificacin fue estudiada en el captulo 17 y encontrada en mltiples muxiones,queson pasos &ves del contml de vas fundamentalesen diferentes sectores delmetabolismo. Se basa en el cambio de conformacin de protenas enzimticas que poseen estructura cuatemaria. Al cambio se aiocia una modificacin en la capacidad a ~ t a o a i d l enzima Latransconformacin es inducidapor metabolitos relacionados, e directa o indirectamente, con esa rea metablica, para los cuales existen sitios de unin en la enzima regulable, y los que, si bien no pertenecen al centro activo, determinan la transicin hacia un estado conformacional que repercute en las Poabidadescatalticas de aqul. El sitio de unin al metabolito modificador recibe el nomblp de sitio alostrico, y el compuesto que puede unirse a l es el modificador O modulador alostrico. ste se considera positivo si favorece la transicin hacia la wnfomcin ms activa de la enzima, y negativo, si induce el cambio hacia la forma de menos actividad. Unode los muchos casos relevante de control por modificacinalostrica es el de laenzimaisoehico deshidrogenasa, la cual constituye el punto clave de la regulacin d d a o d e &&,a pesar de que existen otras etapas de ste sujetas a regulacin, pero queson de significacin fisiolgica ms controvertida.

La isoctrico deshidrogenasa responde al ADP como modificador positivo, y al NADH y ATP como modificadores negativos. En consecuencia, la relacin en las concentraciones de ADP y ATPson determinantes en el predominio de una de las 2 conformaciones posibles, y por tanto, del carcter deprimido o activado de su accin enzimtica. De modo queel control se halla directamenteligado al papel central de esteciclo metablico,parte importante en el proceso de mayor significacin cuantitativa a en L produccin de ATPpor la clula: la respiracin celular. Otro ejemplo digno de mencin entre las enzimas regnlables alostricamente, cs el de lasquinasasde protena9 dependientesde AMPc. Hay que observar que, en virtud de la accin que catalizan dichas enzimas, encontraremos aqu un vnculo indisoluble entre 2 mecanismos de regulacin metablica: los de modificacin alostrica y covalente. La quinasa de protena adopta su conformacin activa en respuesta al modificador positivo (AMPc) y con ello desencadena su accin, que es protagnica en la frecuente modificacin covalente por incorporacin de fosfato a una enzima. El mecanismo de modificacin alostrica es de carcter ms rpido, tngase en cuenta que como los cambios conformacionales no implican formacin o ruptura de enlaces covalentes, transcurren en breve. Sin embargo, el cambio no es abnipto dado que las relaciones de concentracin entre los modificadores de efecto contrario, van variando de modo gradual.

induccin y presin enzh4ticas

Ante todo cabe destacar que ste es el mecanismo que opera al provocarse un cambio en la cantidad de enzima presente sin afectar el grado de actividad de sta. Justamente en el captulo anterior se ha abordado esta forma de regulaciii, a propsito de las hormonasesteroideas. La indnccin de enzimas transaminasas por el cortisol y la represin de la sntesis de la enzima HMG-COAreductasa que provoca el colesterol, son ejemplos tpicos. al igual que la induccin de la glucoquinasa por la insnlina. Se comprende que el tiempo que tomaste mecanismo para establecerse es superior a los anteriormente estudiados, ya que est mediado por la regulacin del proceso de sntesis de protenas. Por otra parte, y de acuerdo con la vida media de las enzimas involucradas, sus efectos pueden ser ms duraderos. Puede tardar horas y aun das en establecerse, y de igual modo perdurar inclusive semanas. Desencadenado con frecuencia por la accin hormonal, interviene en acciones de regulacin entre diferentes rganos de la economa. Este mecanismo suele operar tambin en la adaptacin que desarrolla el organismo ante algunos medicamentos. Existen frmacos, que administrados a los sujetos durante cierto tiempo inducen en ellos un incremento en la cantidad de las enzimas que transforman dichos frmacos en sustancias fcilmente eliminables y generalnienle inactivas, tal es el caso del fenobarbital y otras drogas.

Especializacin celular
Aun cuando todas las clulas del organismo estn dotadas de la informacih completa correspondiente al genoma, la diferenciacin que conduce a la formacin de los distintos tejidos y rganos es el resultadode que no toda la informacin gentica se exprese por igual en lasclulas, una vezespecializadas. Es por eso que el metabolismo del eritrocito difiere, por ejemplo,del que puede desarrollar la neurona, o del de una clula del epitelio intestinal. En ocasiones, la posibilidad que tiene un rgano de efectuar determinada va metablica, puede repercutir a su vez en otros rganos. Esa va metablica puede complementar algunas transformaciones que hayan tenido lugar en el otro rgano, es

factible que a travs del torrente sanguneo, y mediante los metabolitos apropiados, se establezca el nexo que materialice esa complementariedad metablica. Estas interacciones pueden entonces abrir nuevas posibilidades de funcionamiento a una va temporalmente agotada, y es asque se estejercieiido una iifflucnciaque contribuye al equilibrio entre aporte y demanda de sustancia y energa del organismo como un todo, lo cual cabe de lleno dentro del concepto regulacin metablica. El ejemplo ms clam de la especializacin celolar, como mecanismo de regulacin metablica, lo podemos apreciar en torno a los niveles de glucosa en sangre (Fig. 61.3).
-,
/

Alimentos,

Glucgeno

digestivo

Sangre

Fig. 61.3. Ejemplo de espceialiizicibii celular. al El hgado responde a iiiveIcs bajos de glucosa en sangre liIxrando la Iiexosa por la aiei6n de la glucosa-6-fosfatasa. b) En el pcriadii ahsortiro, en el que la glircmia se eleva. el hgado es el que puede incrementar nolahlrnieiilc la sustracrin del monesadi-ido de la cireulaiibn dehido a su peculiar d~tnci6iienrinitica (glucoquinasa).

El hgado puede desempear el papel de rgano compensador de los cambios en la concentracin sangunea de glucosa, en virtud de la presencia en sus clulas de enzimas que le permiten llevar a cabo reacciones metablicas especiales. Cuando en el perodo absortivo la glucosa se eleva en la sangre y la hormona insulina es segregada en respuesta a ello, el hgado es el que posee la enzima glucoquiiiasa -inducible por insnlina- y que resulta efectiva por su alta Km, especialmente en estascoiidiciones de pltora. Gracias a ello, el hgado puede asimilar grandes cantidades de glucosa. La glucoquinasa no se inhibe por la glucosa-6-fosfato, conlo slo hace la hexoqninasa. Por el contrario, en condiciones en las cuales los distintos tejidos han venido consumiendo el monosacrido circulante, y las cifras de glicemia comienzan a descender, es la hormona glucagn la que predoniinar, y sus efectos en la activacin de la glucogenlisis heptica permiten suministrar cantidades adicionales de glucosa a la sangre, provenientes de esa fuente. El hepatocito puede dar respuesta a este Wuerimiento regulatono noslo por estar dotado del receptor especficode la hormona hipeiglicemiante por excelencia, y disponer, adems, de la organi7acin supramolecular de 10s grnulos de glncgeno, tan eficientes para la pronta liberacin de unidades fosfatadas de glucosa, sino porque cuenta tambin con la enzima glucosa-6-fosfatasa, UPaz de liberar a la hexosa de la atadura intracelnlar que representa su ster fosfrico. En el captulosiguiente,al tratar las relaciones metablicas entre diversos rganos, el lector podr apreciar otras instancias en las cuales una va metablica en un tejido es

influida por transformaciones que ocurren en otro rgano. A la luz de este enfoque. deber contemplarse la gluclisis anaerohia en el msculo y la gluconeognesis heptica a partir de cido lctico.

Mecanismos mltiples Con frecuencia, en muchas instancias del metabolismo, la regulacin se estahiere simultneamente por medio de varios de los mecanismos estudiados. Ya lienlos vistik k ' que la modificacibn covalente, que llevan a cabos quinasasde proteinasdependiencs de AMPc, est indisolublemente ligada a la modificacin alostrica que estabiccz e: propio AMPc. Un punto del metabolismo eii el que se uianifiesta de manera sobresalieiir;, :,i% inltiple regulacibn, es el caso de la eiiziina rcductasa de hidroxinietil-glutarii-Ct:,~iiii en la sntesisdel colesterol.Laformaciii de esta enzimase deprime por la ingesii5i eie colesterol, en lo que sera un efecto de represin enxiinitica. Al mismo tiempo, e s h rednctasa est sujeta a repdacin por modificacin covalente, y su forma fusfritaii:i EL; inactiva, de modo que las hormonas como el glucagbn, qne estimulan I u rj-liwxs. ~ favorecen el predominio de la forma inactiva. Natnralmente, la accin de ia t;iski?::i:," quese estimula por la insulina, propende aconvertir a la reductasa ensu fornia acliwi. Por otra parte, el colecterol e,jercenn efecto inhibitorio directo en la actividad de ia HMC-COAreductasa, que parece ser de tipo alostrico. La superposicin de diversos mecanismos de regulacin en un paso nietahlico no constituye una rednndancia estril. Cada mecaiilsmo tiene sus particularidades, entre ellas, el ritmo con que se desencadena y con el que se establece, y la duracin de su efecto. Cuando operan vanos de ellos a la vez, la replacin de la va es ms sensiblea cambios metabblicos de diversa ndole. Por otra parte,cuando alguno de los dispasitivosdecontroi no funciona correctamente, por anormalidades del individuo o del ambiente. las consecuenciasse atenan por la concomitaucia de otros mecanismos de control. Por todo ello, en la diversidad se encuentra gran parte de la eficiencia y eficacia de los niecanisinos de regulacin metablica, por consiguiente no cabe plantearse cul de ellos es ms importante o desempea un papel m i relevaiite en el control del metabolismo.

Los nmgenos, enzimas que no son activas hasta que les ocurre una modificacibii eovalente, pero que en este caso no suele ser reversible, se pueden considerar como una especie de regulacin. Por lo comn este mecanismo impide que la accin de estas enzimas, de ordinario enzimas proteolticas, se manifieste en localizaciones iriconvenientes para la clula o el organismo (enzimas digestivas), o proporciona el desencadenamiento de un proceso en el momento apropiado (coagulacin). En ocasiones, rrgularidades de la cintica qumica general pueden ser determinante5 en imprinur la direccin adecuada al flujo de tran.Fformaciones. La ley de accin de masas delas iraccionesrevembles opera en la interconveisinde tnosas fosfatadasen la gluclisi5, por ejemplo. All, en la reaccin dc la isomerasa de fosfotriosa, aunque en el equilibrio predomina la fosfodihidrouiacetona, se favorece la sucesiva conversibn de sta en cl fosfogliceraldehdo,al ser retirado &tedel medio por accin de la enzima deshidrogenm del fosfogliceraldehdo,en condicionesen que la gluclisis se halla estimulada.

Otros mensajeros de seides regmiadoias

En el aniilisis general realizado sobre la regulacin metablica en este captub) Y tambin en el anterior, al tratar la accin hormonal, se observa que existeii efc.c't0.j

reguladores resultado de seales provenientes de sitios en el organismo distantes del lugar en qiie se producc la respuesta inetal~lica. Las bormonas son los clsicos mexis~jeros portadores de estas seales,pero exi cl mecanismo de accin de n~uchas ellas participan otras moli.~ulasque a su vez de portan la seal, generalmente en el interior de las clulas efectoras. El AMPcclico es el ejemplo tpico de estos segundos mensajeros. Est comprobada id participacin dc otroscompuestos en ciertos tipos de efectos reguladores g de control. En este caso se encuentra el sistema de los polit0sfoinositoles. Ya sean hormona, neurotransmisores o factores de crecimiento, provocan el desdoblamiento de estos compuestos en 2 productos que actan comomensajeros de seiales. Eiios son el trisfosfato de inositoi y el diacilglicerol.

El trisfosfato de inositol provoca un aumento en los iones de calcio, los cuaies modulan numerosas reacciones celiilarcs. E1 diacilglicerol estimnla una puiuasa de protena que adiciona los grupos fosfatoa residuos dc tirosins. Este tipo de quinasas de protena parece estar implicado cn el control de la divisin celular y, prol>ablemenle, enel mecanismo de produccin del cncer.

Resumen
La reguiaa6n metablica es E accin ejerucia por los mecanismos de control a

a que est sujeto el apawto metabliw de Iss clulas y de los organismos superiores, de forma tal que exista un equilibrio entre aporte y demanda de sustancia (Wbolitos) y energa, en constante adaptacin a las condiciones cambiantes del medio y del organisno.
Como Las transturmaciones qumicas que tienen lugar en los organismos vivos en m inmensa mayora, satauizadas por enzimas, por lo general cualquiera q W el mecanismo de control, en atima instancia en ste ef involocmdo el fi w i o en La actividad o en la concentracin de nma o ms enzima del proceso
80%

-. 0

Se distinguen diferentei tipos de m&us en el esiabableeimiento de la reguM 6 n del metabolismo. La disponibilidad de sustrato es uno, en el cual las caraderklim ein&i@asdc la mzhmdeterminan el cambio en la velocidad de B mcci6n, en dependenda de a '06 niveles de mncentraci6u de sustratn. Lammpartimentaci6n celular rs un rneeankmo donde !osefecios rcgulatorins resultado del trasiego de &tabolitos que intervienen en la va, a i-avm de las

membranas que delimitan los compartimientos intracelulares de los diversos organelos. En la modif~cacin covalente, la enzima posee un grado de actividad notablemente diferente segn se encuentre unido o no un grupo aimico a ella. Es muy comn el grupo fosfato unido por enlace &ter al grupo OH de la s e h . Cuando la unin de un compuesto qumicn a determinado sio deuna protena enzimtica, que no es el centro activo, provoca un cambio conformacional que infiuye decisivamente en su actividad, se trata del mecanismo por modicacin alostrica. En la induccin emh6tica aumenta la sintesis de la protefna enzimtica, y en la represin disminuye sta como respuesta a la presencia de un compuesto inductor en el primer caso y un correpresor en el segundo. La direccin del flujo de sustancia y energa en un sector metablico es, en ocasiones, el resultado de interacciones entre diferentes rganos que se complementan. Ello es posible como consecuencia de sus dotaciones enzimticas especcas que reflejan la especializacin celular. Esta ilima opera entonces como un mecanismo de regulacin metabliea Otros mecanismos incluyen la activacin de zimgenos, la ley de accin de masas en reacciones reversible8 y la participacin de sustancias trasmisoras de seales reguladoras. Como cada mecanismo tiene sus caractersticas en cuantn al tiempo que toma en establecersey la mayor o menor prolongacin de sus efectos, en muchas vas la regulacin es el resultado del control concertado por varios mecanismos, lo que tambin constituye un recurso adicional contra posibles fallas en algunos de los dispositivos reguladores moleculares.

Ejercicios
1. Encuentre 2 semejanzas y 2 diferencias entre los mecanisnios de regulacin alostrica y de induccin enzimtica. 2. Explique la diferencia principal que distingue el mecanismo de disponibilidad de sustrato del de compartimentacin celular. 3. ;Cmo la especializacin celular puede determinar un dispositivo de regulacin metahlica? 4. Explique el mecanismo de regulacin por activaciu de zimgenos. 5. Qu mecanismodetermiua b direccin del flujo glucolitico en la reaccin de la a fosfotriosa isomerasa? 6. En general ;cules mecanismos operan con ms rapidez, los que culminaii en la modificacin de la actividad emimtica o aqullos que afectan los niveles que la enzima presenta? 7. Considere el efecto que ejerce el cido ctrico en la fosfbfructoquinasa,enzinia de la gluclisis. Qu tipo de modificacinejerce el citrato en la eiizima y que otro mecanismo de los estudiadosest operando para que esta influenciatenga lugar?

El estudio del metabolismo intermediario generalmente se acomete de modo separado, por reas, como una forma de aproximacin ms conveniente desde el pnnto de vista didctico. Es IGgico que se analicenlas transformaciones que le ocurren a los compuestos glucdicos, por una parte, y se aborden, por otra,los cambios metahlicos de los Ipidos, como conjuntos o sistemas propios fcilmente distinguibles. No obstante, el flu,jo de sustancia y energa ocurre en la clula como un todo que no reconoce fronteras, y el metabolismode los distintosgrupos de biomolculas se da,en realidad, de una forma integrada, donde lo comn son los nexos y vnculos mltiples entre los diferentes sectores inetablicos. Si en los captulos precedentes en los que se han presentado de fornia separada las distintas reas del metabolismo, se han presentado muchas de las interrelacioiies que existen, en ste el nfasis se pone precisamente en esa visin integradora, con la ventaja de que ya el lector dispone de aquellos aspectos que conforman la fase analtica del estudio del metabolismo, con lo cual se halla en mejores condiciones para abordar la fase de sntesis o totalizadora. Adems, ese enfoque integrador se aplica aqua diversas situaciones particularcs del organismo y a las condiciones metablicas que stas traen consigo.

Manifestaciones de la integracin metablica

En realidad si furamos a escoger cualquier sector del metabolismo, lo dificil sera encontrar alguno en el que no se manifieste relacin con otra rea difereiite. Tonieuios para ilustrar esto, por ejemplo, a los esfingolpidos, los cuales no estn involucrados directamente en el flujo energtico. De antemano sabemos que los compuestos que intervienen en el flujo y en el aprovechamiento de la energa, de algn modo se relacionan, pues el ciclo de Krebs y la cadena respiratorka constituyen p r o c m centrales que de una forma u otra vinculan a las biomolculas que hacen las veces decombustibles biolgicos. De manera que los esfingolpidos pareceran buenos candidatos para excluir esta posibilidad de integracin. Sin embargo, tan pronto incursionramos en su metabolismo Iiallaramos mltiples nexos con ms de otro sector: uno de los precursores de la esfingosina es un aminocido, la serina. Para conformar las esfingomielinasse requiere el concurso de nucletidos de citosina, y el resto de los esfingolpidos se constituyen mediante la incorporacin de monosacridos, conveiiientenienteactivados por la unin a nucletidos de uracilo (captulo 52). La degradacin de esta clase de lipidos da lugar a relaciones similares.

Con este ejemplo se pone en evidencia que el concepto iutegracin metablica responde a una realidad muy amplia, queconstituye la regla, la excepcin es cuando los no se materializa eso relacin. Tal es el caso de la imposibilidad de transfom~ar cidos grasos en glcidos en muchas especies. Ahora bien, el carcter generalizado de las interrelaciones entre las diferenies reas del metabolismo no impideque sea posible distinguir, en esa compleja madeja, diversos grados de vinculacin. No cabe duda que existen puntos en los cuales k i integracin nietablica adquiere mayor relieve por lo mltiple y significativo de las interacciones que se establecen. Resulta til reconocer esa mayor jerarqua que adquiere la integracin ci, determinados nudos metabticos y a ello lo designamos como contluencia metablir;!.

Cuando el entrecruzamiento notable de diversos sectores tienesu centro en u:i compuesto particular, se dice que existe, a ese nivel, confluencia por metabolito. LE! cido pirnco constituye un caso tpico de m e t a u n c i a o de encrucijada. En la figura 62.1 se presentan las mltiples relaciones metal>licasde este compuesto.

cido pirvico

Fig. 62.1. Relacionw mmcbliciis del cido pirvico. En cl esquemi se reflejan relacions n i e l i l ~ l i c a s centralizadas por el tidu pirvico. 1.8 reprwntati6n illr~tra carcter d e el metaholilu de cuntluencia qiie posee este ciinipue.\io.

La degradacin de la glucosa hasta CO,.y H,O pasa por su conversin en cido pinvico,queconstiluyela mayor hentedeeste mehbolito. Laalanina rindepirtvico directamente por transaminiicin, pero otros aminocidos tambin lo forman, con!) producto de sus vas catablicas respectivas -serina y cistena. La desearboxilaridn oxidativa del cido pinvico provee una buena parte del acetil-COA.Este meiairolito es precursor de diferentes lpidos y de cuerpos cetnicos. Por medio del pirivim sc puede fornarglucosa a partir de compuestos no glucdicos, como los aminocida5y cido Lctico. Por iltimo, el cido pirvico no slo puede suministrar acetil-62ii.A ciclo de Krebs, sino que adems su carboxilacin constituye la principal va de anaplerosis o relleno de este crucial ciclo mehblico. En resumen,el cido pinvico se puede originar tanto a partir dc protenas con10 degKicids, y e>astentransfom,aciones de ste queconducen a la Formacin de gIl"cido5, . lpidos y aniino6cidos. En consecuencia e. un compuesto sobresaliente desde el ~ ; u n t i J de vista de la integracin del metabolismo.

Existen otros compuestos que establecen nexos entre diferentes reas del metabolismo y constituyen tambin metaboliios de confluencia. E1 caso del acetil-Coi\ e notorio conlo elemento integrador de glcidos, aminoridos y cidos grasos en sil s acceso con:n al catabolismo. Entre los aniinocidos, son ejemplos la glicina y el glutmico (cai)itulo 55). Naturalmente qne el grado de interconexin es variable y no siempre resulta taii &arcador como lo es en el caso del pirvico.

El otro p e l d a ~ el que se concreta de manera evidente Ia integracin del en metabolismo, es la va o secuencia iuetaSlica. La via integradora por excelencia es el ciclo de Krebs. En el ciclo de los cidos tricarboxlicos confluyen los procesos catablicos $c. pidos, glcidos y aminocidos, pero al mismo tiempo existen intermediarios ( i ~ e pueden derivar Iiacia reas variada? del nieabolisuio. La sntesis de novo de los cidos grasos sera virtnalmente imposible sin el concurso de la reaccin de la ctrico sintasa, puesel wdoctrico viabiliza lasalida del grupoacetilo del interior de la mitocondria. Elsuccin COAes precursor del anillo porfirnico, y de intermediarios del ciclo pueden formarselos aniinocidosglutmico y asphtico. La glucosa puede ser Eoniiada a partir delcido oxaiactico del ciclo, que se transforma en cido miico, ste puede atravesar lamembrana mikondnal y continuar en el citosol las reacciones de la gluconeognesis. De modo que en el ciclo se estableccn nexos entre aminocidos, Ipidos, glcidos y ann entre otras reas ms especializadasdel metabolisino, tal como las p ~ ~ r i n a s . La condicin de va de conflnencia existe en otros casos, sin abarcar la florida gama de interconexiones que encontramos en el ciclo de Krebs, por ejemplo, la va de oxidacin directa de Ia glucosa se relaciona con los ~iucletidos, pues origina la nh-S-fosfato,siUai.estruchiral deaqnllos. Adems, esa \.a es una fuenteimpoi~nte o en elsuministro deNADPH necesario en la sntesis de ia niayora de L s lpidos.

Vhinitad6n entre ambolimo y cataboliismo

Larelacin ms evidente entre las 2 ucrficnta opuestas del nretabolisinose sustciiia en consideracionesenergticas. El anabolismo se realiza por medio de reacciones qiie coiisunien energa, y las fuentesdega ener@alibre precisamente lo son niiiclim de Iiireacciones del caabolisnio enhscuales, ya sea de modo directo indirecto, parte de tsta qneda atrapada en ia molcula de ATP, cuya Iiidrlisis ulterior, acopiad;i convenientemente, viabiliza la fonsecucin de las reacciones anablicas. Notodos los procesos catablicos son aprovechados desde el punto de vista de la obtencin de energa qumica utilizable. As, por ejemplo, si bien la siitesis de las P o m a s e s un proceso en el cual se invierte gran cantidad de energia (captulo SS), "embargo su degradacin no representa una fuente de energia, ya que la ruptura de lC'S&c~ noocurre acoplada a reacciones que conserven la energa liberada en forma utizable. Por otra parte, los compuestos ms coinplqjos resultantes de las rcacciunes de sintesis emplean como sustancia de partida conipuestos stuiples. Estas molculas senclas que suministran la fuente de carbono de los procesos anablicos, se originan medida como productos de las vas catablius. o h rasgoconh'adiciorio del par anabolisnio-cataboIismo,y que al naisno tiernpo lesirve de nexo,es que los procesos degradativos implican, gqwralruente, reacciones d e o ~ e i n d lossustratos,con lo cual % genera e cantidad de cofactoresreducidos. Aunque una parte de ellos se relacionan con el suniinislro de energa aprovechable por

medio de su oxidacin en la cadena respiratoria mitocondrial, otra parte abastece directamente los requerimientos de cofactores reducidos de los cuales dependen etapas claves dela mayora delos procesos anablicos.

Integracin y regulacin metablicas en condiciones especificas

La integracin y regulacin del metabolismo responden a la necesidad ostensible que tiene todoorganismo de adaptarse a los continuos cambios queson consustanciales a la esencia misma de la vida. En el decursar de stasuceden moditicaaones importantes, a veces reversibles y otras no, en funcin del desarrollo progresivo del organisnio o de procesos particulares. La dotacin enzimtica del recin nacido no coincide con la del adulto, as por ejemplo, la actividad de la enzima lactasa intestinal va declinando con el transcurso delos meses. La pubertad,el embarazoson etapa5 de acentuados cambios nietablicos sujetos a regulacin, especialmente endocrina. Adems, constantemente se verifican adaptaciones de carcter ms agudo en relacin con lai fluctuacionesdel suministro de nutrientes y de la actividad que despliega elsujetoen cada momento. Deahqueel anlisis de estos procesos noestara completo si no se abordaran algunas situaciones concretas que permitieran comprender de qu modo operan los diferentes mecanismos estudiados ante un cambio cualitativo en las condiciones del organismo. A continuacin se examinan 3situaciones crticas que hemos seleccionado como modelos apropiados para el estudio de la integracin y regnlacin metablica aplicado a cambios especficos bien definidos, los cuales ocurren con cierta frecuencia en el scr humano.

Ejercicio fsico
Uno de los modelos me,ior conocidos de adaptacin metablica a situaciones especficases el del ejercicio fsico. Adems, esta actividad ha cobrado una importancia extraordinaria en la medicina contempornea. La conveniencia de la prctica constante de actividad fsica para preservar la salud ha pasado a ser, en los das actuales, une de las medidas prioritarias en 10s programas de atencin priniaria de salud en el mundo entero. Ello no ha sido el resultado de una seleccin caprichosa por los mdicos,sino la lgica consecuencia de innumerables investigaciones cientficas de diversa ndole, las cuales proporcionan evidenciasabrumadoras que sitan a la prctica sisteniticade ejercicios fsicos como la accin teraputica ms efecti~za, entre todo el arsenal de mdico disponible actualmente, para prevenir y combatir las enfermedades quc mayor incidcncia tienen hoy en da en las causas de mortalidad en cualquier pas con un sistema de atencin de salud desarrollado. De todo lo anterior se comprende fcilmente la necesidad que tiene todo nidico de conocer el sustrato bioqoimico que condiciona estos efectos originados por el ejercicio fsico. Como punto de partida revisemos las principales caractersticas nietahlicas del msculo en reposo.

CaracteAtim meiab6Um del msculo en reposo

La energa quese consume en los msculos en este estado,provienc de laoxidacin . . de los cidos grasas hasta CO, y H,O y, en menor medida, de la propia glucosa. h a pequea cantidad de esta ltima puedeser convertida en cido lctico. En verdad,sien estas condiciones hay un suministro significativode glucosa que proviene de la sangre,

su destino ms importantecuantitativamente esla conversin en glucgeno. La cetlisis es insignificante porque, en estas condiciones, en el hgado no se estn formando cuerpos cetnicos en demasa (Fig. 62.2).

Fig. 62.2. hletaholicmo dcl iiisculo en reposo. Se presentan slgiitios rasgos del iiietabalisnio muscular en rrposo tratados en el texto. XEli rcpresenta los cnfaetores redueirlm ~irove~iicntes la oxidacii,il de de los iciilos grasos y del prodiieto final rlc sta, acrtil-Cor\. cii cl i i d o de Krebs.

En el msculo una buena parte del ATPformado en el metabolismoaembio cede su fosfatoa la creatina. Asse generan las existenciasdefosfocreatinamuscular (captulo66). El 30 % del oxgeno que se consume por el organismo en reposo corresponde al msculo. La cifra parece grande si se considera que se trata de las necesidades basales, es decir, para mantener el potencial de reposo, viabilizar otros procesos que requieren y transporte activo, y sostener el tono n~uscular las reacciones biosintticas, pero lo que sucede es que la masa muscular constituye una porcin grande de nuestro cuerpo, cerca de la mitad del peso corporal en un sujeto de peso normal. De manera que el gasto el no es tan grande si tomamos en cuenta que, por ejen~plo, cerehro, que tiene una masa mucho menor, consume el 20 % del total, tambin en reposo. Para analizar el ejercicio como situacin metablica hay que considerar, en primer trmino, la contraccin muscular. De hecho esto constituye el fenmeno fundamental del ejercicio. El lector puede remitirse al captulo 66 para el estudio detallado de la bioqumica del msculo.

Adaptaciones meiablicas en el msculo durante el ejercicio

El gasto de ATPes considerable en todo el proceso de acortamiento del msculo, en virtud de la interaccin de las fibras de actina y miosina. Se hidroliza ATP adems en la reintegracin del Ca" al retculo sarcoplsmico. En consecuencia, los niveles de ADPaumentan notablemente y ello repercute de diversas maneras en el metabolismo muWlar. La reaccin de la creatina quinasa ocurre ahoraen sentido inverso y constituye unafuentesignificativapara suministrar ATPen los primeros segundos de la contraccin muscular: PwCREATINA + ADP

ATP + CREATINA
CREATININA + H,O

CREATINA

Lacreatinina es excretada en la orina (captulo 66). En realidad, se ha estimado quelas Concentracionesde fosfocreatinaen el msculo de los mamferos son suficientes Paran0 mas de 100 contracciones, de modo que los altos niveles de ADP ejercen sus aeeiones reguladoras en vas metablicas cruciales. Pordisponibidad de sustrato se estiniula la cadena respiratoria, y por modificacin *ostnca, la isocitrico deshidrogenasa del ciclo de Krehs. As mismo se activa la fwfofru~toquinasa, enzima reguladora de la gluclisis, que a la vez se re libre del

efectoinhihidor del ATP. La gluclisisacelerada trae consigo un consumo increnientado de glucosa por el msculo, que hace bajarlos niveles del nionosacrido en sangre, y las hormonas Iiiperglicemiantes glucagn -en el hgado- y adrenalina -en el hgado y msculos- estimulan la glucogenlisis, y la liplisis en el tejido adiposo, lo que snministra cidos grasos para la beta oxidacin. Como consecuencia del predominio de todas estas vas,la afluencia de cofactores reducidos hacia la cadena respiratoria aunienb grandemente y en la misma medida sucede con la demanda de oxgeno. En los primeros momentos del e,jercicio,una vez agotadas las disponibilidades de fosfocreatina, los msculos se contraen gracias a la energa liberada por la transformacin del glucgeno en el ster fosfrico de la glucosa y la degradacin de sta predominantemente en la va anaerobia. Con posterioridad se efectan ajustes respiratorios y cardioeirculatorios que tienden a reforzar el suministro de oxgeno y adecuar10 a las demandas grandemente incrementadas. El aumento en la tensin de CO, y la disminucin del pH sanguneo, a lo cual t a m h i b contribuye la hiperlacticemia resultante de una gluclisis anaerobia incrementada, estimulan al centro respiratorio bulbar, y se establece un aumento en ia (ieciir::~cia y amplitud de los movimientos respiratorios. De una frecuencia de 12 a 20 se puede pasar a ms de 50 respiraciones por minuto, y de un volumen corriente de 500 mL a otro de 3 L o ms. En el sistema cardiocirculatorio se produce una vasodilatacin arteriolar local. Este efecto regulatorio responde, en parte, a la accin del cido lctico y a otras sustancias que se elevan durante la contraccin muscular, como la histamina y el cido adeniico. Concomitantemente se establece un aumento en el volumen minuto del corazn como consecuencia de complejos cambios hemodinmicos, entre ellos un incremento de la frecuencia cardaca debido al estmulo de la adrenalina. A pesar de estos carnhios adaptativos, el suministro de oxgeno puede no satisfacer las alta9 demandas. Ello depende del grado de intensidad del ejercicio. La actividad fsica moderada y efectuada peridicamente desarrolla una diferencia mayor de eslas adaptaciones en el individuo, por lo cual el grueso de las necesidades energticas pueden satisfacersecon ATPgenerado en el proceso de respiracin celular, en este caso se dice que el ejercicio es aerobio, en contraposicin con los esfuerzos intensos y espordicos en individuos no entrenados, en quienes el dficit de oxgeno determina la necesidad de generar el ATPporla va de la fermentacin Ictica; en este ltimo caso se habla de ejercicio anaerobio. En estas ltimas condiciones, el producto de la degradacin parcial de la glucosa, e\ cido lctico formado, no se metaboliza en el msculo. En consecuencia se elevan sus niveles en la sangre circulante, g es el hgado el rgano capaz de convertirlo nuevamente en glncosa, por medio de la gluconeognesis (captulo 44). De manera que parte de esa glucosa producida en el hgado, a partir de! cido lctico generado en el msculo, puede retornar aeste ltimo, se conforma mi el. denominado ciclo de Cori Fig. 44.14). En reaiidad el ejercicio muscular es un excelenteejemplo de cmo operan diversos aiccanismos reguladores e integradores. Lamisma operacin delamaquinaria contMctil acelerala velocidad de los procesos swninitiradomdeeneiga. El ADPiiberadoen lacontraccinniwularse hacedkp+i?ibEc9 tanto para cI sistema mitocondrialde la fosforilacinoxidativa, como pare los 2 [iiws de la g l u c ~q u e , ~ t e h A T P . i Poroh;ipwte,laadenilato q h p i o m u e v e la p&uccih de.4MP.el mal acta como nioduladorpositivode la fosfofrudoquinas;i,lo que tstiniiri~i la glucsis. E! fosfato inorgnico abunda para la mitocondria, para la glicerofusfi3i:! y deshidrogena~a para la fosforilasa del glucgeno. Dado que en el msculo en reposa el suministrode iiUPy ortofosfatoec un factor hitantedeimportancia, he aquiun ejempiu bien ustralivo de autorregulacin en un sistemahiolgico. De todo cuanto queda dicho se comprende que las proporciones relativas de! aporte energtico proveniente de; iiieiabolismo aerobio de diferentes combustibles, tales como cidos grasos, aminocidos, cuerpos cetnicos y glucosa, o del provenientc de la degradacin anaerobia de c s t ltima, van a estar determinadas por la suficiencia o no del aportc de oxgeno a los mhsculos.
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I%kq&nkaiMtdicrii

Eii lodo qjercicio van a estar operando amba? Fnenta, pero con preponderancia dc una ri otral en dependencia del balanceque tenga lugar entrela demanda incrernentada de oxgeno y la capacidad del organismo para establecer los procesos adaptativos que hemos revisado. El ejercicio repetido eleva la capacidad de trabajo del urganisrno niediante una serie de efectos beneficiosos que enumeranios a continuacin:
1. Desarrolla el sistema muscular con aumento de la masa y de la capacidad de

contraccin que trae a p a ~ j a d un aumento de la fuerza. o 2. Aumenta la capacidad respiratoria, con un mayor intercambio gaseoto con el niedio por unidad de tiempo, accomocontribuyr a conservar la elasticidad del tejido pulmonar. 3. Mejora la capacidad cardaca y la fuerza contr&3il del corazn. con lo cual se produce una mejor circulacin y con ella la i ? ~ i i i S de iodos los tejidos. n 4.Iinpide o disminuye los depsitosexcesiwi de :,;~sas, por lo que es eficaz contra la obesidad. 5. En circunstancias especiales consiitiijc :si. >.?cdio rehabilitaciiin de capacidades de funcionales perdida% 6. Constituye un medio eficaz para ali:irr las tensiones originadas en el traiv&jo intelectual intenso y m;inienido. 7. Beneficia la capacidad para el trabajo intelectual. 8. Provoca una sensacin suhjetiva de bienestar que favorece la disposicin para la realizacin de actividades de carcterpoliticosocial.

Ayuno pmlongado Esta situacin puede sobrevenir en diferentes circunstancias. Sobrevivientes de naufragios pueden verse sometidos a semanas de ayuno antes de ser rescatados. Igual puede suceder con mineros atrapados en accidenteso desplomes de galena? subterrneas. No es raro que luchadores progresistas que persiguen causas populares, adopten la denominada huelga de hambre como una forma de movilizar la opinin pblica en defensa de sus derechos. En algunos paises muy pobres del continente africann,sobre todo, la escasez de alimentos agudizada por pocas de sequas prolongadas llega a ocasionar hambrunas en las cuales miles de personas sobreviven das sin ingerir amentos. En consecuencia, puede llegarle al mdico cualquiera de estos sujetos en estados ms o menos avanzados de un ayuno prolongado. Es obvio que el galeno ha de poseer un conocimiento aceptable de los cambios metabGlicos que sobrevienen con este estado, para poder intervenir adecuada y oportunamente en su correccin. Ser necesario de nuevo establecer un punto de partida, que en este caso puede centrarse en la magnitud de las reservas energticas promedio de que dispone el individuo. En la tabla apareceun estimado de estas cifras.
'hbh Reservas energiticas estimadas en un adulto niasculino de 70kgde peso corporal

rgano

Energa disponiblesegn la fuente (kcal) Glucosa o TI.i?cil;liceroles Protenas glucgeno

60 400 8 1 200 80 45 150 O
450

San,
Hgado

cerrbro

Msculo Tejidoadipw

135 000

0 400 0 21 O00 10

Las reservas lipdicas sobrepasan al resto de las fuentes a la$que puede recurrir el organismo en un perodo de ingesta supriniida. El gasto calrico diario mnimo asciende a unas 1600 caloras, pero se puede elevar de manera variable de acuerdo, sobre todo, con la actividad fsica del sujeto. El clculo del tiempo de supervivencia con arreglo a ese total de reserva no responde exactamente a la realidad. De hecho, en personas obesas, las reservas pueden ser mucho mayores y alcanzar, en teora, para ms de 10 meses de ayuno, pero esto no se cumple estrictamente, por los desequilibrios metablicos que se desencadenan. Aunque en la tabla se asigna un nmero de caloras a las protenas, no existen macromolculas de esta naturaleza destinadas a esta funcin, como ocurre con el glucgeno entre los glcidos, y los triacilgliceroles entre los lpidos. De manera que las protenas corporales cuyo catabolismo se incrementa para servir como fuente energtica, lo harn aexpensas de las funciones especificas que stas llevan a cabo, ya sea estructurales, enzimticas, contrctiles o de otro tipo. Los hechos se suceden a partir de que cesa la ingestin de alimentos de la forma siguiente: corno es natural, los niveles de glucosa sangunea empiezan a descender, ya que se mantiene el consumo por el cerebro, perose detiene el aporte exgeno. Ello trae consigo un incremento en los niveles de secrecin de glucagn por el pncreas, cuyo efecto provoca una pronta aceleracion de la glucogenlisis heptica, con lo cual se detiene el descenso progresivo de la glicemia. Con el decursar del tiempo se van agotando las reservas de glucgeno heptico, lo que acontece en 12 horas aproximadamente. Como no existe aporte diettico, no hay disponibilidad de quilomicrones ni VLDL que suministren cidos gayos. La lipognesis tambin cesa, y los sustratos de que se pueda disponer -cidos Ictico, pirvico y aminocidos-, van hacia la formacin de glucosa. El ciclo de Cori se vuelve importante, pero los eritrocitos tambin son una fuente significativa de cido lctico para la gluconeognesisheptica. En la sangre venosa proveniente de los msculos se observa un predominio del aminocido alanina. Es que parte del pirvico proveniente de la gluclisis se transamina con otros aminocidos y llega al hgado como alanina. Aqusirve como sustrato de la glnconeognesis, previa reconversin en pirvico, y participa en el mantenimiento de niveles aceptables de glicemia. A este proceso se le conoce como ciclo de Cahill (Fig. 44.15). A pesar del importante papel delos ciclos de Cori y Caliill durante el ayuno, nose debe perder de vista que en verdad no constituyen un aporte neto de carbono para la sntesisde glucosa, sino la restiiucin de la que fue consumida en tejidos perifricos. Sin embargo, en el cerebro y, en parte,en otros tejidos la glucosa se oxida porcompleto haita CO, y H,O, por tanto, en el ayuno, una vez agotadas las reservas de glucgeno,hace falta alguna sntesisneta de glucosa. La protena del msculo provee la mayora de este flujo neto de carhono. La movilizacin de protenas endgenas se incrementa en la medida en que las reservas glucdicas se van agotando. Cuantitativamente,las protenas musculares son lasquemayor aporte brindan,aunquelasprimeras protenas quese degradan con tina energticos son las ennmas digestivas y las de origen heptico relacionadas con la transformacin de losalimentos. En la tigura 623se mumen las relacionesinterorgnicas ms relevante9durante el perodo inicial del ayuno prolongado. Naturalmente, los aminocidos que resultan de la protelisis celular se incorporan a la produccin de glucosa eii el hgado. Los 3 aminocidos que salen del msculo son la alanina, la glutamina y la glicina. La alanina es el ms importante, ya que otros aminocidos que salen lo hacen coino pirvico y cc -cetoglutrico,quecon posterioridad darn alanina y glutamina. Mucha de la glutamina liberada del msculo es convertida en alanina por el epitelio intestinal. La glutamina se oxida parciahnente en estas clulas; se forma oxalactico por la va del ciclo de Krebs. La glicina, por otra parte, es convertida en serina en el rin, la cual, ahmismo y en el hgado, puede dar glucosa. E1 msculo, adems, libera cetocidos de cadena ramificada hacia el hgado que sintetiza gliicosa del cetocido de la valina, cuerpos cetnicos del de la leucina, y ambos, glucosa y cuerpos cetnicos del cetocido de la isoleucina.

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lSinquinucn W i c e

Vig. 62.3. Relaciones inlerorgnicas de la fase inicial del ayuno teniprnnu. Se presenta el flujo de eonibiistibles celulares quc se cstahlere durantl. l a face inicial del ayuno pi-olungatlo mediante algunos de los circuitos ms significatiios.

Como se sabe, en estas vas gluconeognicas no interviene el nitrgeno aminoacdico, de modo que la excrecin de urca se incrementar&.La mayora de los aminocidos pueden ceder el nitrgeno por transaminacin con alfa-cetoglutrico, que rinde cido glutmico y un nuevo cetocido que puede utiliaarse para sntesis de glucosa. En el intestino y los riones, la glutamina se Iiidroliza a glutmico y NH,. As se canaliza el nitrgeno hacia los alimentadores del ciclo de la urea. Todaesta primera etapa provoca una aguda prdida de peso.Tanto los glcidos como las protenas proveen menos de la mitad de las calora$ que los Ipidos para una masa igual, adems, por ser los primeros ms hidratados tambin conducen a una mayor prdida de agua. Como las protenas que se consumen tienen sus propias funciones, esta situacin no puede prolongarse indefinidamente, al inenos con mucha intensidad. El glucagn es una hormona que acta no slo en la glncogenlisis heptica, tambin lo hace en la clula adiposa al estimular la liplisis. Esto provoca la movilizacin de cidos grasos y glicerol. Este ltimo constituye una fuente adicional para la gluconeognesis, al llegar al hgado. Los cidos grasos que se transportan unidos a la albuniina son utilizados por el msculo, y se atena grandemente el catabolismo de las protenas y disminuye el ciclo de Cahill. En el hgado, tambin los cidos grasos que llegan son degradados en la beta oxidacin mitocondrial; as se generan grandes cantidades de acetil-COAcuyo mayor destino debera ser el ciclo de Krebs,pero ello no acontece as como consecuencia del estado de ayuno. El primer requisito para que las molculas de acetil-COApuedan ser procesadas en el ciclodeKrebs es la existencia desuficiente cido oxalactico, el otro sustrato de la reaccin inicial. Durante el ayuno no hay provisin de glucosa, la que constituye una fuenteimportante de cido pinvico. Comose sabe, la principal va anaplertica es la carboxilacin del pirvico que produce osalactico. Por otra parte, los aminocidos, cuyas cadenas carbonadas podran incorporarse al ciclo, tales como el asprtico y el glutmico, estn siendo derivados hacia la gluconeognesis,al igual que la alanina y su cetocido correspondiente: el propio cido pirvico. De todo ello se comprende que existe un dficit real de cido oxalacticopara que las elevadas concentracionesde acet-COA, provenientes del catabolismo de los cidos &?rasos, puedan ser asimiladas en el ciclo de los cidos tricarboxflicos. Todo este exfedentees convertido, en su mayor parte, en cuerpos cetnicos en el hgado. Estos Cuerpos cetnicos son utilizados como combustible por varios tejidos, especialmente el msculo cardaco y el rin.

Se ha pumtode manifieto queentre el tercer y sextodas de ayinose va produciendo una adaptacibn nietablica en las clnlas cerebrales, queles permiteutilizar !scuerpii: cetnicos adeniis de la glucosa. La niauera en que esto ocurre es motivo de controversia. una puealpnw~ autnm consideran cluesimp!emente.%manifi~ta capacidad metabntica latente, como consecuencia del aumento de nivel de los cuerpos cetnicos. la cual no se ponede manifimtoen la diabetes debido al gran suministrodeglucosa al cerebro. Otm: autora lian demostsado queen el ayunose produce induccin del sistema transportado;. de cidos nioiiocarboxfiicos, que permite a los 2 cuerpos cetnicos sidos Ranquear 1;i harrera hematwnceflica, trasiegonomalmentemuy limitado. Adems se ha reportado IUI incrementode la actividad de las enzima5 cetoltica5enel ayuno, p r o alguiios afirniax que esto Gltiiiioocurre slo en d cerebro embrionario y fetal. De cualquier manera,este posibilidad del cerebro es una de las adaptaciones mas y siEu. icalivas que ocurren en la situacin de ayuno prolongado, ya que disminuye ia demaixla de glucosa sangunea y permite la estabilizacin de las pbrdidas de protenas musculares en cifraimrderadas de alrededor de 10 g diarios. Naturalmente, la prdida de peso se atena tambin en la medida en que los cidos grasos contribuyen n ~ j como ccmbustible, debido a su alto rendimierit.c s calrico de 9 kca1.g~'.Esta segunda etapa del ayuno, cuyo advenimientose producde forma grxiuol, puedeestabiiizane durante cierto tiempo, pero tarde o tempraiic Ir:; cuerpos cet6nicos se eievan en sangre y son eliminados por la orina! por el aliento (la acetona). El pH de os lquidos corporales desciende algo, pero por lo comn no sc llega a establecer la acidosis metablica. La prdida de protenas n~usculares, aunque moderada, es sostenida y conduce a adhamia y postracin. Como la sntesis heptica de protenas est disminuida, la albmina srica desciende, y se afecta sensiblemente la presin onctica, en consecuencia aparece edema, es decir, aumento del lquido inlersticial, lo cual se percibe en la infiltracin del tejido celular subcutneo. Las inmunoglobulinas tambin decaen. y el sujeto se hacems susceptible ti ias enfermedades infecciosas. Generalmente, alguna de las complicaciones apuntadas impiden que esta fase se prolongue durante todo el tiempo que duren las reserva de triacilgliceroles. En los casos en que no sobreviene una infeccin o una seria acidosis metablica, la extenuacin de las reservas lipdicas provoca una nueva alza cu la utilizacin de las protenas iiiusculares. La muerte sobreviene cuando el desgaste niuscular hace inoperante el complejo funcional cardiorrespiratono. En la Figura 62.4 se presenta un esquema temporal de las diferentes etapas.

Fig. 62.4. Aproximacin csqiieinAtira a la evolucin tcniporal del estado de nyiino. La Iharrn inferior dc diferentes colores ofrece una idea de la sucesin teeilior;il de I;is diferentes etapas. 0lisi.rrese que los colores se superponco, ya que los liiiiites tienen un niargcn de variacin individiial. Las curras representan en cada caso ci curso cuantifafilo en el tiempo dc 1:s dircrsas fuentcs dc combustible mctali6lieo utilizadas.

0 1

2 Das de ayuno Primera etapa

4!

6'

'30

6d

Segunda etapa
-

Etapa final Cuerpos cetnicos

-Glucgeno

cidos crasos

Protena muscular

Cetosis d a i a ibtc La diabetes mellitus es un trastorno producido por mltiples causas, que siempre presenta una actividad insulinica insuficiente en los pacientes que la padecen. En el captulo 75 se trata ms ampliamente. Aqu se toma una de sus complicaciones agudas para completar la trada de situaciones metablicas particulares, que sirven de modelos para el estudio aplicadodela integracin y regulacin del metabolismo. Se tratade la cetoacidosis diabtica. Partimos de una accin de insulina deficitaria, luego la entrada de la glucosa a los tejidos adiposo y muscular va a estar comprometida. Si se tiene en cuenta que ambos tejidos representan ms de la mitad de la masa corporal, es fcil comprender que los niveles sanguneos de glucosa van a estar considerablemente aumentados (hiperglicemia). Esos tejidos se ven privados de glucosa, ya sea con fines energticos o para su conversin en glucgeno muscular o en triacilgliceroles en los adipocitos. Aunque en el hgado la glucosa no p m k a de la insulina para entrar, la mayor parte de las vas o destinos metablicos de la hexosa son, en diversa medida, dependientes de la insulina. La glucoquinasa, enzima con una Km relativamente elevada y muy necesaria en situaciones de hiperglicemia, depende de la indnccin por la insulina para su sntesis significativa. De modo que el hgado diabtico no contribuye efectivamente a disminuir los niveles de glicemia. Pese a todo, los tejidos en los cuales la entrada de glucosa hacia ellos requiere de la accin insulnica, necesitan la energa, y sus mecanismos reguladores al nivel hioqumico tratarn de suministrar el combustible de que se disponga. Los cidos grasos del te,jidoadiposo constituyen la fuente energtica ms expedita en esas circunstancias. La insulina es una hormona que estimula la deposicin de los Ipidos de reserva, su relativa insuficiente actividad permite que predominen las hormonas lipolticas, como el glucagn, la adrenalina y otras sustancias adipoqninticas. En consecuencia, se eleva la proporcin de energa proveniente de la oxidacin de los cidos grasos. De hecho la produccin de acetil-COAa partir de cidos grasos excede las posibilidadesdeser degradado en el ciclo de Krebs. El excedente de acetil-COAse transforma en cuerpos cetnicos en cantidades supranormales, que sobrepasan la capacidad cetoltica del msculo, corazn y rin. Por ello, la acetona y loscidos acetilactico y beta hidroxibutrico se elevan en sangre. Esta hipercetonemia conduce a la aparicin de los cuerpos cetnicos en la orina (cetonuria) y a que con la respiracin se expulse el nico voltil de ellos 3: la acetona (aliento cetnico). La excrecin urinaria de los cidos acetilactico y heta hidroxibutrico -cidos orgnicos con pK inferiores a 4- se acompaa de mayor eliminaciri de sodio, potasio y amonaco, los cuales,junto con la glucosuria, conducen a la ulterior deshidratacin. La acidosis deprime la contraccin de la musculatura cardaca, y la hipovolemia, as como la poca respuesta a las catecolaminas por las arteriolas, explican la hipotensin, el pulso filiforme y la insuficiente perfusin de los rganos de la economa. De todo cuanto oueda dicho se aorecia oue los mecanismos reeuladores resultan . ineficacesen la situacin analizada. De hecho, la situacin se establece precisamente por la carencia o insuficicnciade un eslabn clave,la accin ejercida por la hormona insulina, en la regulacin metabblica.

Resumen
La integracin de diferentes sedores del metabolismo es lo comn, de manera que se hace difcil hallar vas que no establezcan algn nexo con otras transformadones metablicas. No obstante, existen puntos en los que la integraan adquiere mayor d e v e , por lo mlople y significa&o de las interacciones que se estabiecen. Cuando el entreenizamiento notable de diversos sectores tiene su centro en u n compuesto particular, se dice que existe a este nivel confluencia por

metabolito. El cido pirvico constituye el ejemplo ms conspicuo. El otro peldao en el que se concreta de manera evidente la integraein del metabolismo es la va o secuencia metablica. El ciclo de Krebs es la manifestacin, por excelencia, de esta categora de integracin: la confluencia en secuencia metablica. Existe tambin una vinculacin general entre las vertientes anablicas y caiablicasdel metabolismo. El vnculo se da en las interdependencias energticas. El par dialctico semanifiesta, adems, en que la fuente de los cofactores reducidas necesarios al anabolismose generan en reacciones oxidativas del catabolismo, y en ste tambin se originan sustancias simples, que eventualmente sern el punto de partida de reacciones de sntesis. La integracin y la regulacin del metaboikmo se concretan de forma parcular en situacionesespecficas. Se anazan los cambios de esta ndole que ocurren en el ejercicio fsico, durante el ayuno prolongado y en la cetoaado6s diabtica. En el ejercicio fsico se analizan las vas que predominan en el msculo en reposo -oxidacin de cidos grasos- y en contraccin, cuando las mayores demandas exigen una rpida provisin de ATP a expensas del glucgeno muscular, en primer trmino, y cuya intensidad puede hacer necesario que una parte de la glucosa sea degradada slo hasta cido lctico. Todos estos cambios tienen repercusiones en el resto del organismo, que se traducen en beneficios para el sistema cardiorrespiratorio y muscular, para combatir la obesidad, para rehabitar capacidades funcionalesperdidas y, en general, proporcionar una mayor disposicin de nimo para las actividades fsicas, intelectuales y de la vida de relacin. Durante las adaptaciones al ayuno prolongado se distinguen 3 fases. En la primera, una vez agotadas las reservas de glucgeno, el caiaboikmo de protenas aporta una buena parte de la energa. El perodo se caracteriza por una prdida de peso muy acentuada. En la segunda fase, los ipidos de reserva ocupan el primer lugar como combustible, y en esta fase el cerebro experimenta cambios adaptativos que le permiten utizarlos cuerpos cetnicos como fuente energtica La fase tercera es la etapa de descompensacin o perodo terminal del ayuno, en el cual, fmalmente, se hace insostenible la funcin del complejo ~ardio~piK&rio. En la cetoacidosis diabtica la integracin metablica se manifiesta de modo negativo, a partir de una deficiencia en un disposiivo clave para la regulacin del metabolismo, como es la accin de la hormona insulina. La incapacidad de metabolizar eficientemente los glcidos repercute en otras reas metablicas, en un intento por supr los requerimientos energcos del organismo. La interdependencia de diferentes sectores metablicos se manifiesta entonces en un serio desorden: la cetoacidosis diabtica. Si el trastorno no se compensa con la intervencin mdica, la estrecha integracin del metaboikmo se har patente en estas condiciones patolgicas con un desenlace fatal para el organismo.

Ejercicios
1.Exponga y analice al acetil-CoA coiuo nietabolito de encrucijada. 2. Exponga y analice una va, distinta al ciclo de Krebs, donde se d la coiiflucnria metablica. 3. Exponga los vnculos que usted observa entre el anaholismo y el catabolisiiio. 4. Explique cmo se iiianifiests la integracin inetablica entre diferentes rganos diirante el ejercicio niiiscular. 5. Haga un anlisis comparativo del ejercicio aerobio y el anaerobio. h. Coniyare el grado de Iiipercetonemiaen el ayuno y en la diabetes descompensada, Y ofrezca iiiia explicacin de la diferencia que pudiera existir entre amhas sitiiacioiies. 7. En cada una de las 3 situacionesestudiadas, seleccione un ejemplo de algiino de los tipos de regulacin metablica analizados en el captulo anterior.

Resumen de la seccin

Slo puede establecerse una integracin y regulacin del metabolismo, al nivel del organismo como un todo, si existen formas de comunicacin intercelular. Efectivamente, hay muchas maneras en las que se establece ese nexo entre clulas no niuy separadas entre s, inclusive entre clulas contiguas, y tambin entre aqullas que se hallan bien distantes unas de otras. Las ventajas que para ciertos orgmismos unicelulares represent el fenmeno de l agregacin, significel primer paio en la larga evolucin hacia los actuales organisa mos pluricelulares superiores, con su amplia gama de recursos de comunicacin intercelular. Salvando la enorme distancia entre el movimiento 1)iolgico y el social, ello puede compararse con la necesidadd de los simios, que nos son ms cercanos genealgicamente,de agruparse en manadas, y del hombre primitivo de constituirse en hordas, hasta la aparicin del Humusapienscomo ser social, cuyo ulterior desarrollo ha trado las innumerables formas de comunicacin de que dispone la civilizacin contempornea. La forma esencial de la comunicacin intercelular, d a d e la ptica de la integracin y la regulacin del metaholisrno, es por medio de las hormonas. La evolucin de este concepto tiende a concebirlo cada vez msampliamente. En laseccin se presenta una visinde este desarrollo, que en resumen viene inclinndose en algimos autores, aunque no en todos, a considerar hormona oalgosemejantc a casi cualqiiier sustancia qumica con unainformacin que desencadenecambios hioqumicos o fisiolgicosen un sitio del organismo. Si bien en esta seccin presentamos un concepto que contempla los aspectos que debenser comunes a todas las hormonas, el lector puede sacar sus propias conclusiones, no necesariamente coincidentes con stas, acerca del bien establecido concepto hormonaen los tiempos de Baylissy Starlii~g, tan controvertido. hoy Decualquier inanera,se hade considerar a las hormonas en su estrecha relacin con el otro sistema principal de comunicacin en el organismo, y comprender los hechos que acreditan de forma incontrovertible la concepcin del sistema neuroendocrino. La participacin del hipotlamo y la nenrohipfisis en el ciclo de accin de numerosas hormonas es el ms evidente de estos hechos, pero no el nico. El estudio de los mecanismos de las acciones hormonales est bien precisado en la mayora de los casos en 2 formas bsicas, la induccin y represin enzimtica, y la mdificacin de actividadesde enzima?mediante la intervencinde receptores: especifi-Para lahormona, en estaltima forma lncalizadosen la membrana de la clula diana.

En otros casos, la situacin no se reduce simplemente a estas 2 alternativas y existen otras formas, e incluso complejas comliinaciones, no del todo esclarecidas, de las 2 mencionadas en este resumen. Lar componentesdeun sistemacualquieranopueden funcionardemanera inegrad'a sisuselementos y subsistemas nose hallan sujetos a mecanismos de control que permitan la regulacin, en los diferentes niveles del sistema, de sus funciones respectivas. La regulacin del metabolisnio se ejerce as, ya dentro de los lmites de la clula, o mediante relaciones entre diferentes rganos,cn virtud de laespecialimin de stos. Tratndose del metabolismo, la adaptacin a las condiciones cambiantes del medio y las demandas celulares de rganos o del organismo en su totalidad, se realizan por medio de modificaciones en la velocidad de reacciones cnzimticas. Sin embargo, estas modificaciones se llevan a cabo de muy diversas maneras, ya sea por la amplia variedad de tipos especializados de controlde la actividad enzimtica que existen, o mediante la adecuacin de la produccin y degradacin de las propias enzimas. La intcgracin del metabolismo, en un organismo vivo, es la nica forma en que aqul existe. El andlisis indispensable que se hace para poder estudiar ese complejo conjunto de reacciones qumicas, abordndolo por sectores, obliga entonces a destacar ese carcter integrado queenla realidad tiene. Aun en un organisn~o aislado,el decnrsar de unas reacciones, sus productos nuevosclue aparecen en elmedio o que incrementan sus concentraciones, los cambios en las concentraciones desus sustratos y de las forn~as quese encuentran cofactores y en nucletidos fundamentales, como el ADPy el ATP, e,jercen influencias en otras reacciones qumicas. Ya al nivel celular se agregan los factores asociados con la compartimentacin, y por ltimo, al nivel del organisnio, existe la comunicacin intercelular a distancia y los n~ecanismos reguladores estudiados. Todo ello permite que el metabolismo se d t en el ser vivo como un sistema esencialmente integrado, en ello va la supervivencia del organismo.