Los fundamentos de la transicin epitelio-mesnquima.

El origen de las clulas mesenquimales participando en la reparacin de tejidos y procesos patolgicos, en partculas la fibrosis del tejido, tumores invasivos y metstasis son mal entendidos. Sin embargo, la evidencia emergente sugiere que la transicin epitelio-mesenquima (EMTs) representa un importante fuente de estas clulas. Como se discute aqu, procesos similares a la EMTs asociados con implantacin embrional, embriognesis, y rganos desarrollados son subvertidos por inflamacin crnica de tejido y neoplasia. La identificacin de vas de sealizacin que llevan a la activacin de programas EMTs durante este proceso de la enfermedad es aportar

nuevos conocimientos sobre la plasticidad de los fenotipos celulares y posibles intervenciones teraputicas. Qu es la transicin epitelio-mesenquima? Una transicin epitelio-mesenquima (EMTs) es un proceso biolgico que permite una polarizacin de clulas epiteliales, que normalmente interactan con la membrana basal a travs de su superficie basal, someterse a mltiples cambios bioqumicos que pueda asumir un fenotipo clulas, que incluye una mayor capacidad migratoria, invasividad, elevada resistencia a apoptosis, y una produccin mucho mayor de los componentes de ECM (1). La finalizacin de una EMT es sealada por la degradacin de la membrana basal subyacente y la formacin de una celula mesenquimatosa que puede migrar lejos de la capa epitelial en el que se origin. Un nmero de distintos procesos moleculares estn involucrados con el fin de iniciar una EMT y permitan llegar a una finalizacin. Esto incluye activacin de factores de transcripcin, expresin de especficas protenas de la superficie celular, reorganizacin y expresin de protenas del citoesqueleto, produccin de ECM enzimas de degradacin, y cambios en la expresin de microRNAs especficos. En muchos casos, los factores involucrados son tambin usados como biomarcas para demostrar el psaje de una celula a travs de una EMT (figura 1). Los trabajos pioneros de Elisabeth Hay primero describen una transformacin epitelio mesenquimal usando un modelo de la formacin de estras chica primitiva (2). En el tiempo transcurrido, el trmino transformacin ha sido sustituido por transicin, reflejando en parte la reversibilidad del proceso y el hecho de que es distinto de la transformacin neoplsica (1). La plasticidad del fenotipo ofrecida por un AMT es revelado por la ocurrencia del proceso reversouna transicin mesenquima-epitelial (MET), que implica la conversin de clulas mesenquimale a derivados del epitelio. Se sabe relativamente poco acerca de este proceso, el ejemplo mejor estudiado es MET asociada con la formacin de los riones, que es impulsada por los genes como la caja de pares 2 (PAX2), la protena morfogentica sea 7 (BMP7) y tumor de Wilms 1 (WT1) (3 5).

Por qu ocurre EMT? El concepto de divisin celular como una forma de generar ms clulas y expandir el tamao de los tejidos surgi hace 150 aos atrs (6). Central para este concepto fue la comprensin de que todas las clulas en un cuerpo se derivan de otras clulas y la deduccin resultante al final es que todos derivan de una sola clula, el vulo fecundado. Un nivel adicional de complejidad viene de la comprensin que la clula puede asumir varios estados fenotpicos durante el desarrollo, que es, ellos pueden someterse a procesos de diferenciacin. Como se supo ms recientemente ocurrida
durante los pasos especficos de embriognesis y el desarrollo de rganos, algunas clulas en el epitelio parecen ser de plstico y por lo tanto capaz de moverse hacia adelante y hacia atrs entre los estados epiteliales y mesenquimales a travs de los procesos de la EMT y el MET (7). Al completar el desarrollo del tejido epitelial, las clulas epiteliales por lo general ejercen funciones tejido especfica, mientras las clulas mesenquimales en dicho tejido juegan un rol de soporte. Implcita en esta nocin fue la idea, adems que un estado diferenciacin terminal es necesario para llevar a cabo tales especializadas funciones y que las clulas son mantenidas en un estado de permanente diferenciacin una vez el desarrollo es completo. Este concepto ha sido cuestionado por numerosas observaciones en que las clulas en un epitelio de diferenciacin terminal, pueden cambiar su fenotipo a travs de la accin de un programa de EMT, que permite la transdiferenciacion, lo que resulta en la conversin de clulas epiteliales a mesenquimaticas derivadas durante el desarrollo y la edad adulta. Este programa puede tambin ser activado en asociacin con reparacin de tejido y estrs patolgico, incluyendo aquellos la creacin de los diversos tipos de inflamacin y alto grado de carcinomas. En consecuencia, EMTs ahora contituye un reconocido mecanismo para dispersar clulas en embriones, formando clulas mesenquimales en injuria de tejidos y iniciando la invasivad y comportamiento metastico de epitelio cancergeno. Clasificacin de EMT en tres diferentes subtipos. EMTs son encontrados en 3 distintos ajustes biolgicos que traen diferentes consecuencias funcionales (figura 2). Mientras las seales especficas que delinea la EMTs en los 3 discretos ajustes aun no estn claras, ahora es bien aceptado que las distinciones funcionales son evidentes. Una propuesta para clasificar los en tres diferentes subtipos biolgicos basados en el contexto biolgico en que se producen se discuti en un 2007 reunin de la EMT en Polonia y la posterior reunin en marzo de 2008 en Cold Spring Harbor Laboratorios. Los EMTs que estn asociados con la implantacin, la formacin del embrin, y el desarrollo estn organizados para diversos tipos de clulas generadas que comparten comunes fenotipos mesenquimales. Esta clase de EMTs, que nosotros y otros proponen el temino de tipo1, no causa fibrosis y no induce a un fenotipo invasivo resultando en una difusin sistemtica va la circulacin. Entre otros resultados, este tipo1 EMTs puede generar clulas mesenquimticas ( mesenquima primario) las que tienen el potencial de someterse posteriormente a MET para generar un epitelio secundario.

Las EMTs asociadas con cicatrizacin de heridas, regeneracin de tejido y fibrosis en rganos son de un segundo tipo. En este tipo2 EMTs el programa se inicia como parte de una reparacinasociada eventos que normalmente generan fibroblastos y otras clulas relacionadas con el fin de reconstruir tejidos despus de un trauma e inflamacin por injuria. Sin embargo en contraste al tipo 1 de EMTs, este tipo 2 de EMTs son asociadas con inflamacin y cesar una vez la inflamacin es atenuada, como se ven durante cicatrizacin de heridas y regeneracin de tejido. En la formacin

de rganos fibrosos, tipo 2 de EMTs puede continuar como respuesta a una inflamacin oncolgica, que conduce a una destruccin del rgano. Tejido fibroso es en esencia un sin cesar de cicatrizacin de heridas, debido a la persistente inflamacin. Tipo 3 de EMTs ocurre en clulas neoplsicas que ya han sido objeto de gentica y cambios epigeneticos, especficamente en genes que favorecen a la extensin clonal y el desarrollo de tumores localizados. Estos cambios, en particular afectan oncogenes y genes supresores de tumores, conpirando con la EMT circuito regulatorio para producir resultados muy diferentes a los observados en los otros dos tipos de EMT. Celulas de carcinomas se someten a un tipo3 puede invadir y metastsis y por lo tanto la generacin de la ultima, que amenazan la vida de la progresin de cncer. Importante, clulas cancergenas pueden pasar a travs de EMTs a diferentes grados, con algunas clulas epiteliales conservando muchos rasgos, mientras que la adquisicin de algunas clulas mesenquimales, una y otras clulas derramando vestigios de su origen epitelial y llegar a estar completamente mesenquimal. No est claro que seales especficas inducen al tipo 3 de EMTS en clulas de carcinoma. Por ejemplo, dichas seales pueden originarse en el tumor de estroma que es asociado con muchos carcinomas primarios. Si bien estas clases de EMTs representan distintos procesos biolgicos, un comn conjunto de elementos genticos y bioqumicos parece subyacer parece subyacer y as permitir que estos programas fenotpicas exteriormente diversas. a medida que ms experimentos se llevan a cabo en el futuro, vamos a aprender ms sobre las similitudes y diferencias entre las tres clases de EMTs.

Tipo 1 EMT: EMT durante la implantacin, embriognesis y rganos en desarrollo. Despus de las primeras etapas de la embriognesis, la implantacin del embrin y la iniciacin de la formacin de la placenta, se asocian con una EMT que implica el endodermo parietal (9). En particular, las clulas del trofoectodermo, que son precursores del citotrofoblasto, someterse a un EMT con el fin de facilitar la invasin del endometrio y el adecuado posterior anclaje de la placenta, permitiendo a su funcin en los nutrientes y el intercambio de gases (10,11). Como se describe a continuacin, este es solo el primer de muchos tipo1 EMTs que acompaan y sustentan la morfognesis embrionaria; mas detalles sobre algunos de los EMTs que ocurren durante el desarrollo son discutidas en otra parte (12).

Un ovulo fertilizado se somete a gastrulacin, generando tres capas germinales. Inicialmente una lnea primitiva se origina en la capa del epiblasto (13). Las clulas epiteliales en el tejido expresan E-caderina y muestran la polaridad apical-basal. Formacin de la lnea primitiva es considerado el primer signo de gastrulacin, lo que a su vez conduce a la formacin de las 3 capas germinales que generan todos los tipos de tejidos del cuerpo. La lnea primitiva es formada a partir de una invaginacin en el medio del epiblasto, que se forma inicalmente en el extremo inferior del embrin y ms tarde se extiende en direccin de la futura cabeza. Las clulas epiteliales del epiblasto. Las clulas epiteliales como del epiblasto sufren cambios programados dictados por la expresin especfica de las protenas asociadas con la migracin y diferenciacin celular (14). Una vez formada la lnea primitiva, actuando a travs de invaginacin o ingresin (dependiendo de las especies estudiadas), generando el mesodermo, que posteriormente se separa para formar el mesodermo y endodermo a travs de un EMT (tambin conocido como epiblasto-mesodermo transicin) (2) por reemplazo de clulas del hipoblasto, que probablemente la apoptosis contribuye
a la capa del mesodermo a travs de un EMT. El mesodermo embrionario que se forma entre el epiblasto y el hipoblasto finalmente da lugar a mesnquima primario asociado con la axial, paralelo al eje intermedio, y capas laterales mesodrmicas (15). Clulas del mesenquima primario muestran una mayor propiedad migratoria cuando se compara con los del epiblasto y el hipoblasto (15). A nivel bioqumico, la EMT asociada con gastrulacin es dependiente de la canonica y orquestada sealizacin de Wnty embriones deficientes en Wnt3 no puede someterse el EMT asociado con gastrulacin (16,17). La posterior formacin de la lnea primitiva es asociada con la espresion de Wnt8c y la expresin ectpica de Wnt8c en embriones conduce a multiples estrias primitivas (18,19). TGF- superfamilia de protenas, sobre todo ganglionar y Vg1, mediar la accin de Wnts, y

sus deficiencias pueden dar lugar a defectos mesodrmicos debido a la ausencia de tcnicos de emergencias mdicas funtional (20-24). Wnts tambin copera con los receptores FGF para ayudar a regular un EMT asociado con gastrulacin (25-28). El Snail, Eomes, y la transcripcin dirigir la EMT asociado con la gastrulacin (29-31). Por ejemplo Snail reprime E-caderina e induce EMT mediado por molculas de adhesin celular, tales como ocludinas y claudinas y por polaridad de genes, tales como Discs large (Dlg) y Crumbs homologos 3 (Crb3) (32-34). Durante el desarrollo embrionario, una EMT implica que las clulas epiteliales del neuroectodermo da lugar a clulas migratorias de la cresta neural (35). Inicialmente la premigracion de las clulas de las crestas neurales expresan genes tal como Sox, Snail, Slug, y forkhead box D3 (FoxD3), y estas clulas posteriormente se someten a una EMT (36,37). Como una consecuencia, a continuacin se disocian de los pliegues neurales, convertidos en mviles, y dispersos a diferentes partes del embrin, donde sufren una mayor diferenciacin en, entre otros tipos de clulas, los melanocitos que proporcionan pigmento a la piel.

Este EMT ocurre en la crestas neuronales es disparado por la sealizacin similares a los que dirige la EMT asociado con gastrulacin. Por lo tanto, las vas de sealizacin mediada por Wnt, FGF, BMP, c-Myb y msh homebox 1 (Msx-1) conspira a inducir EMT (38-40). Entre ellos, BMP lo ms prominente induce la propiedad migratoria de clulas de las crestas nuerales. Noggin, un inhibidor de la BMP, es esencial en la regulacin negativa de esta actividad, y su expresin pone un alto en EMT (41,42). Adicionalmente, E-caderina y N-caderina, dos molculas de adhesin celular, necesita ser reprimido en orden para crestas neurales EMT que se produzca (43). Segn algunas estimaciones, los programas de la EMT se han desplegado en varias fases sucesivas de la embriognesis, lo que indica la participacin continua de estos programas mas adelante en el desarrollo, tales, como la transicin del endotelio-mesenquimal (endMT) ese lugar durante la formacin de las vlvulas del corazn. Tipo 2 EMT: EMT asociado con regeneracin de tejidos y rganos fibrosos. rganos fibrosos, que ocurren en un numero de tejido epitelial, es mediado por clulas inflamatorias y fibroblastos que realizan una variedad de seales inflamatorias as como componentes de un complejo EMT que incluye colgeno, lamininas, elastina y tenacina (figura 3). Ms especficamente, tales EMTs se encontr que asociado con la fibrosis que ocurre en el rion, hgado, pulmn y el intestino (44-47). Algunas de las primeras pruebas de esto viene de estudios de ratones transgnicos portadores de la lnea germinal de los genes reportero cuya expresin fue impulsado por clulas epiteliales especficas de los promotores. El comportamientos de estos reporteros, proporciona una evidencia directa de las clulas epiteliales que sirven, via EMTs, como importante precursor del fibroblasto que surgen durante la fibrosis de rganos (48-50). Fibroblastos especfico de proteina 1 (FSP1, tambin conocida como S100A4 y MTS-1), una clase de protena S100 citoesqueleto, alfa-SMA, y colgeno 1 han proporcionado marcadores fiables para caracterizar los productos mesenquima generados por el EMTs que ocurre durante el desarrollo de fibrosis in variados rganos (48,49,50). Estos marcadores, junto con dominio discoidina receptores de tirosin quinasa 2 (DDR2), vimentina, y dimeina, se han utilizado para identificar clulas epiteliales del rion, hgado, pulmn e intestino que se encuentran en medio de someterse a una EMT asociada con inflamacin crnica. Tales clulas continan mostrando morfologa epitelio-especfico y molculas marcadoras, tal como citoqueratina y E-caderina, pero mostr expresin concominante del FSP1 mascador mesenquimal y alfa-SMA. Tales clulas es probable que representan las etapas intermedias de EMT, cuando los marcadores epiteliales siguen expresando pero nuevos mascadores mesenquimales ya han sido adquiridas. El comportamiento de estas clulas proporcionan uno de los primeros indicios de que las clulas epiteliales bajo estrs inflamatorio puede avanzar en diversos grados a travs de un EMT creando la nocion de parcial EMTs (figura1).

Eventualmente con el tiempo estas clulas dejan la capa epitelial negocian su camino a travs de la membrana basal subyacente, y se acumulan en el intersticio de los tejidos (52) donde finalmente arrojar todos sus marcadores epiteliales y un fenotipo fibroblstico plenamente. Experimentos recientes en ratones han demostrado que clulas endoteliales asociadas con microvasculatura tambin pueden contribuir a la formacin de clulas mesenquimales durante el curso de la fibrosis, hacerlo a travs de un proceso anlogo conocido como EndMT (44). Este proceso patolgico hace eco de un proceso similar ocurrido durante el desarrollo. As durante la embriognesis un EndMT ocurre durante la organizacin del cojn endocardico y las vlvulas del corazn. En la fibrosis cardiaca asociadas con injuria post-isquemia del corazn, EndMT, que implica tanto el (la capa interior endotelial del corazn) y el endotelio microvascular del corazn, se ha demostrado que juega un papel clave para contribuir a la aparicin de fibroblastos recin (45) (figura 4). En los modelos de cultivo de tejido de EndMT, TGF-1 induce EndMT de clulas deoteliares capilares y la prdida marcadores epiteliales, CD31 e integrina alfaV3, as como la adquisicin de fibroblasto- y myofibroblast- marcadores especficos tal como FSP1, alfa-SMA, DDR2, colgeno 1 y vimentina. Aunque aun no documentado, es posible que muchas de los reguladores moleculares de EMTs tambin juegan un papel crtico en la direccin de EndMTs. En un anlisis (1), de experimentos de marcado de linaje y estudios de trasplante de medula sea demostraron que durante el curso de fibrosis renal en ratones, acerca del 12% de fibroblastos son derivadas de la medula sea y cerca del 30% son derivados a travs de EMT de clulas del epitelio tubular del rin. Adems, se ha demostrado ms recientemente que en fibrosis renal cerca del 35% de fibroblastos son derivados a travs de EnsMT de clulas endoteliales que residen habitualmente en el rion. Las porciones restantes se especula que surgen a travs de la activacin de fibroblastos residentes u otro tipo de clulas mesenquimales, tal como clulas musculares lisas perivasculares/ pericitos y fibroblastos (53) en la circulacin (figura 4). Es probable que estas proporciones puedan variar considerablemente dependiendo de la etapa de la fibrosis, el rgano, y en particular el modelo experimental que est siendo estudiado. Este complejo proceso patolgico puede reflejar el origen evolutivo del rion. Por lo tanto, todo el epitelio del rion, incluyendo las clulas epiteliales tubulares se deriva del mesodermo intermedio durante el desarrollo del sistema urogenital. Ms especficamente, un mesenquima se condensa sobre el brote uretral (derivado del endodermo) para dar lugar al glomrulo y estructuras del epitelio tubular del rion (54) al hacerlo a travs de una MET. Esto apunta a los aspectos peculiares de la biologa renal: durante alguna retencin de la huella del origen mesenquimal, clulas epiteliales del rion pueden ser particularmente propensos a volver a este estado, a travs de EMTs que se producen en respuesta a estrs inflamatorio y conducir a la fibrosis patolgica (55,56).

Injuria inflamatoria al rion de ratn puede resultar en el reclutamiento de gran variedad de clulas que pueden desencadenar una EMT a travs de su liberacin de factores de crecimiento, tales como TGF-, PDGF, EGF, y FGF-2 (57). Ms prominentes entre estas clulas son macrfagos y fibroblastos residentes activados que se acumulan en el sitio de la lesin y liberan estos factores de crecimiento. Adems estas clulas liberan quimiocinas y MMPs, notablemente MMP-2, MMP-3 y MMP-9. Las clulas epiteliales estn bajo la influencia de estas seales moleculares, actuando conjuntamente con clulas inflamatorias, inducir dao a la membrana basal degradacin focal de colgeno tipo IV y laminina (57). Deslaminadas clulas epiteliales pueden entonces migrar hacia el rea intersticial ( el espacio entre la capa epitelial) bajo la influencia de gradientes de factores de crecimiento y otros quimioatrayentes (57). Este inicial reclutamiento de clulas epiteliales en una EMT pueden ser inhibidas por el bloqueo de la expresin de MMP-9 a travs de ruptura de tejido plasmingeno activador (tPA) (58). Otros estudios tambin han demostrado que HGF puede bajar el nivel de TGF-, restaurar TGF- mediada por perdida de E-caderina y disminucin de las cantidades potenciales de activos MMP-9 (59). 1 integrinas e integrin-liked quinasa (ILK) son tambin identificadas como importantes mediadores de TGF--inducida EMT asociadas con clulas del epitelio tubular (60). TGF- inducen EMT a travs de ambos un Smad2/3 via dependiente y una MAPK- via dependiente. Experimentos recientes tambin han demostrado una funcin clave para la E-caderina/-cateina sealizacin eje para EMT en la participacin de clulas epiteliales. (61,62). El significado de TGF--induce EMT por progresin de rganos fibrosos ha sido demostrado en estudios usando BMP-7, un antagonista deseales TGF- en modelos de rin, hgado, tracto biliar, pulmn y fibrosis intestinal del ratn (51,63). BMP-7 funciona como un inhibidor endgeno de TGF-B- inducida EMT (51,63) (figura 4). Entre otros efectos, se invierte el TGF--induce perdida de la protena epitelial clave, E-caderina (63). Restauracin de los niveles de E-caderina por BMP-7 es mediado a travs de sus receptores afines, activin-like quinasa-2/3/6 (ALK-2/3/6) y la Smad 4/5 factor de transcripcin rio abajo (63). La administracin sistematica de recombinantes BMP-7 a ratones con fibrosis severa como resultado de la reversin EMT y reparacin de estructuras epiteliales daadas, con repoblacin de las clulas epiteliales sanas, todo presumiblemente mediado a travs de MET (63). Esta inversin tambin se asoci con restauracin de la funcin de rganos, una sustancial disminucin en FSP1 y alfa-SMA fibroblastos intersticiales y la activacin de novo de seales BMP-7 (63). Estudios usando tejido fibroso de humanos tambin han demostrado EMT (50). En un estudio de 133 pacientes con fibrosis renal, fue demostrado un EMT en un nmero sustancial de muestras, tal como se evalu utilizando doble etiquetado de las clulas epiteliales tubulares con citoqueratina, vimentina, alfa-SMA, o la zona ocluyente 1 (Z0-1). Similar en pacientes con la enfermedad de Crohn, una EMT se demuestran en areas de fibrosis en el colon (64). Dichos estudios deben proporcionar la confianza necesaria para desarrollar nuevos intervenciones teraputicas con el fin de suprimir EMTs y una potencial reversin de rganos fibrosos.

Tipo 3 EMT: EMT asociada con progresin de cncer y metstasis. Excesiva proliferacin de clulas epiteliales y angiognesis son caractersticas de la iniciacin y crecimiento temprano de cncer epitelial primario (65). La posterior adquisicin de la invasin, en un principio manifiesta por la invasin a travs de la membrana basal se cree que anunciar el inicio de las ltimas etapas del proceso de mltiples pasos que conduce finalmente a la diseminacin metstica, con consecuencias peligrosas para la vida. El control gentico y mecanismos bioqumicos subyacentes a la adquisicin del fenotipo invasivo y la propagacin sistmica subsiguiente de las clulas cancergenas, han sido motivo de extensa investigacin. En muchos de estos estudios, la activacin de un programa EMT se han propuesto como el mecanismo crtico para la adquisicin de fenotipos malignos por las clulas cancerosas epiteliales (66). Muchos estudios en ratones y experimentos en cultivo celulares haban demostrado que clulas del carcinoma pueden adquirir un fenotipo mesenquimal y expresar marcadores mesenquimales tal como alfa-SMA, FSP1, vimentina y demina (67). Estas clulas son tpicamente visto en la parte delantera invasiva de tumores primarios y se considera que las clulas eventualmente entran en las etapas subsiguientes de la cascada de invasin metstica, i.e., intravasacin, transporte a travs de la circulacin, extravasacin, formacin de micrometastasis, y finalmente la colonizacin ( el crecimiento de pequeas colonias en metstasis macroscpica) (66,68,69). Una aparente paradoja viene de la observacin que el EMT-deriva clulas cacerigenas migratorias tpicamente establecen colonias secundarias a distancia que se asemejan, en el nivel histopatolgico, el tumor primario de la que surgieron; en consecuencia ya no presentan los fenotipos mesenquimales atribuidos a metstasis de clulas de carcinoma. Reconciliar este comportamiento con la funcin propuesta de la EMT como un facilitador de diseminacin de la metstasis requiere una nocion adicional que la metstasis de cncer de las clulas debe despojase de su fenotipo mesenquimal a travs de una MET durante el curso de la formacin de un tumor secundario (70). La tendencia de la diseminacin de clulas cancergenas a someterse a MET probablemente refleja los mocroambientes locales que se enfrentan despus de la extravasacin en el parnquima de un rgano distante, muy posiblemente la ausencia de las seales heterotpicas que experimentaron en el tumor primario que eran responsables de la induccin de la EMT en el primer lugar (66,71,72). Estas consideraciones indican que la induccin de una EMT es probable que sea un mecanismo de importancia central para la progresin de carcinomas a una etapa metastica e implica MET durante el subsiguiente proceso de colonizacin (figura 5). Sin embargo, muchos de este modelo de mecanismo todava requiere una directa validacin experimental. Por otra parte no queda claro en la actualidad si estos fenmenos y mecanismos moleculares se relacionan y explican la diseminacin metastica de no-epiteliales clulas cancerosas.

Todo el aspecto de los agentes de sealizacin que contribuyen a EMTs de clulas del carcinoma sigue sin estar claro. Una sugerencia es que la gentica y alteraciones epigeneticas sufridas por clulas cancerosas durante el curso de la formacin de un tumor primario los hacen especialmente sensibles a EMT- induce seales heterotipicos originarios del estroma asociado a tumor. Oncogenes inducen la secuencia y recientes estudios sugieren que clulas cancerosas EMTs pueden jugar tambin un rol de la prevencin de la senesencia inducida por oncogenes, facilitando as la posterior diseminacin progresiva (73-75). En el caso de muchos carcinomas, EMT-induce seales emanadas del tumor asociado a estroma, notablemente HGF, EGF, PDGF, y TGF-, parecen ser responsables de la induccin o activacin funcional en celulas cancergenas de una serie de EMT- inducen factores de transcripcin , notablemente Snail, Slug, Zinc finger E-box binding homeobox 1 (ZEB1), Twist, Goosecoid, y FOXC2 (66, 71,76-79). Una vez expresada y activada, cada uno de estos factores de transcripcin pueden actuar estos actos pleiotropicos para guiar el programa del complejo EMT, ms a menudo que no, con la ayuda de otros miembros de esta cohorte de factores de transcripcin. La implementacin actual por estas clulas de su programa EMT depende de una serie de redes de seales intracelulares que implican, entre otras seales de transduccin de protenas, ERK, MAPK, PI3K, Akt, Smads, RhoB, -catein, factor potenciador de unin (LEF), Ras, and c-Fos asi como protenas de superficie celular tal como 4 integrinas, alfa 51 integrina, y alfaV6 integrina (80). Activacin de programas de EMT es tambin facilitada por la ruptura de celula-celula uniones adherente de la celula y celula ECM adhesin mediada por integrinas (67, 75, 81-86). TGF- es un importante supresor de la proliferacin celular y as tumorogenesis primaria. Sin embargo, ahora est claro que en ciertos contextos esto puede tambin servir como un regulador positivo de progresin de tumor y metstasis (87-89). As, en estudios in vitro han demostrado que TGF- puede inducir una EMT en ciertos tipos de clulas cancergenas (90). Dos posibles vas de sealizacin han sido identificadas como mediadores de TGF- induciendo EMT. El primero de estos implica protenas Smad, que median la accin TGF- a inducir EMTs a travs del receptor ALK-5 (51,91-95). Smad- sealizacin mediada inducida por TGF- facilita la motilidad. Inhibidores Smad modulan diferentes efectos de factores de transcripcin relevante y quinasas citoplasmticas e inducen la produccin autocrina de TGF-, que puede reforzar an ms y amplificar el programa (91,92,96,97). La via de sealizacin que media la accin de cateina y LEF tambin coopera con Smads. (61,98) para inducir una EMT (61,99,100). Respecto a esto, la participacin de LEF y -cateina en PDGF- induce EMT recientemente se ha descrito (98). Este estudio colectivo demostr que la TGF-/Smad/LEF/PDGF es un importante inductor de una EMT fenotpica en el cncer.

Evidencia de la participacin de un segundo TGF-- inducida via en EMT es tambin irresistible. Ms especficamente, algunos datos indican que p38 MAPK an RhoA median una autocrina TGF-induciendo EMT en NMuMG clulas epiteliales de mama de ratn (96,101). Estos procesos tambin requieren integrina 1-mediado seales y activacin latente de TGF- por alfaV6 integrina (96,101). Fibulina-5 una molecula ECM, aumenta induciendo TGF- induciendo EMT en un mecanismo dependiente de MAPK (102). TGF- puede inducir una EMT en Ras- hepatocitos transformados, las clulas epiteliales mamarias ( via MAPK), y clulas MDCK; al mismo tiempo, Ras-activada PI3K inhibe TGF-- induciendo apoptosis para facilitar esta transicin (103-106). Evidencia de estas conecciones viene de obsevaciones que ERK/MAPK y PI3K/Akt via mediada Ras mutant- InduceEMT, y que tal EMT se invierte, ya sea de tipo salvaje Ras o MAPK quinasa 1 (MEK1) inhibidor (106). Respecto a esto, Raf tambin median TGF--inducen EMT y promueve la invasin de clulas cancergenas. En modelos de raton en carcinoma de piel y cncer de colon en humanos, la ausencia de la expresin del receptor TGF- en realidad le confiere un mejor pronostico (107, 108). La coneccin entre inflamacin y EMT fue demostrada cuando COX-2 se demostr que inactiva seales Smad y mejora la estimulacin de EMT por TGF- a travs de un mecanismo dependiente de (109). Cambios en la expresin de ciertas protenas polares en clulas puede tambin jugar un importante rol en TGF- induce EMT, ya que las pruebas de un rol para particin defectuosa de protena 6 (Part6) en este proceso es emergente (66,110). La conexin entre perdida de expresin de E-caderina por clulas cancergenas y el paso a travs de un EMT ha sido establecido por muchos estudios (111, 112). Por ejemplo, induccin del oncogn c-Fos en clulas de las lneas epiteliales de la mama de un raton, inducen una EMT y es asociado con una disminucin en la expresin de E-caderina (99). Por otra parte los complejos de reorganizacin celular de clulas epiteliales y la proliferacin celular es suprimida cuando el cuerpo entero o la porcin citoplasmtica de E-caderina (contiene el sitio de unin -cateina) es expresado ectpicamente en clulas que tienen paso a travs de un EMT, causado que tales clulas pierdan su fenotipo mesenquimal (99,113). El secuestro de B- cateina en el citoplasma es importante para la preservacin de caractersticas epiteliales de clulas cancergenas y la adquisision del fenotipo mesenquimal se correlaciona con el movimiento de -cateina en el ncleo, donde se convierte en parte de complejo Tcf/LEF (100,114). Tal acumulacin - Cateinas en el ncleo que es a menudo asociada con prdida de la expresin de E-caderinas se correlaciona con la susceptibilidad de entrar en una EMT y adquisicin de un fenotipo invasivo (61,66). As clulas que pierden E-caderina en la superficie celular son mas sensibles a la induccin de una EMT por factores de crecimiento (61).

Algunos estudios han demostrado que el control epigenetico de E-caderina y -cateina/LEF activada es importante en el establecimiento del potencial de metstasis de clulas cacerigenas (115-118). Lneas celulares que carecen de E-caderina muestran mayor tumorogenesis y metstasis cuando se transfiere inmunodeficiencia a los ratones (118). La expresin de los niveles de E-caderina varia drsticamente en diferentes tumores humanos y una relacion inversa entre los niveles de E-caderina y la supervivencia de los pacientes ha sido documentada (117). Respecto a esto, mutaciones en genes E-caderina se ha identificado en clulas cancerosas, hacindolos luego ms suceptibles a EMT y metstasis (115-116). Un anlisis ms a travs de mutaciones y su correlacin con la progresin metastsico sigue siendo necesario. El papel central desempeado por E-caderinas perdidas en el programa EMT se ilustra adems por las acciones de varios EMT- induciendo factores de transcripcin que facilitan la adquisicin de un fenotipo mesenquimal, tal como Snail and Slug, as como los que codifican dos claves zinc flingercontiene la bsico factor de transcripcin hlice-lazo-hlice, supervivencia de protenas de motoneuronas interactuando con protena 1 (SIP1) y E12 (tambin conocidas como E47-E2A). Estos factores de transcripcin son inducidos por exposicin TGF- y una vez expresadas reprimen la expresin de E-caderinas (78). Snail tambin facilitan fenotipo en ratones (31). La perdida de seales Wnt promotoras de E-caderina y asociacin con altos niveles de Snail en los nucleos (119). SIP1 reprime la expresin de E-caderinas y se une a lo largo de Snail, al promotor de E-caderina en un overlapping fashion (120,121). La expresin de Snail y E-caderinas se correlaciona inversamente con el pronstico de los pacientes que sufren de cncer de mama o el carcinoma oral de clulas escamosas (119,122). El uso de anlisis de expresin de genes para comparar la expresin de genes en metstasis y no metstasis de lneas celulares de ratn de cncer de mama ha conducido a la identificacin de Twis and Goosecoid como importantes genes que facilitan EMT e inducen metstasis (85,123). Algunos han informado que degradacin enzimtica de la matriz tal como MMP-3 facilitando EMT por la induccin de la inestabilidad genmica a travs de Rac1b y ROS (124). Micro RNAs no codificante son tambin componentes del circuito de sealizacin celular que regula el programa EMT. Por ejemplo microRNA 200 (miR200) y miR205 inhiben la represin de la expresin de E-caderinas, ZEB1 y ZEB2 y con ello ayudar en el mantenimiento del fenotipo de clulas epiteliales (125-129). En el carcinoma de mama, una perdida de miR200 se correlaciona con un aumento de la expresin de vimentina y un decrecimiento en los niveles de E-caderinas en clulas cancergenas (125-127,129). Actuando en la direccin opuesta, miR21 es aumentada en muchos tipos de cncer y facilita la TGF- induce EMT (130). Curiosamente clulas se purifican a partir de las caractersticas normales y malignos de mama con cncer presentan un tejido de la EMT, y en clulas humanas inducidas a travs de EMT exhiben las propiedades de clulas madres e incrementan el potencial de metstasis (84). Por lo tanto EMT puede jugar un papel importante en la generacin de altos grados de clulas invasoras con caractersticas de clulas madres y el fenotipo de este ltimo, que incluye la autor renovacin potencial, puede

facilitar la formacin de tumores secundarios por diseminacin de clulas cancergenas, una nocin que todava requiere demostracin directa. Perspectiva. Ahora est claro que EMTs ocurre en tres distintos sistemas biolgicos. Mientras el resultado es la generacin de celulas movibles de fenotipo mesenquimal, el mecanismo de induccin y progresin vara drsticamente de una configuracin o otra. La EMT asociada con implantacin, embriognesis y desarrollo de rganos (tipo 1 EMTs) son impulsados por la necesidad de evolucionar para remodelar y diversificar el tejido con el fin de permitir la morfognesis y generar un organismo funcional. Tal como EMTS se produce de forma transitoria y no estn asociados con la inflamacin, fibrosis, y diseminacin sistmica. El tipo 2 EMTs es asociado con regeneracin de tejidos y fibrosis, y dependen de injurias inducidas por inflamacin para su iniciacin y persistencia. En consecuencia, estos EMTs continuara hasta que se produzcan las injurias o las infecciones son removidas y en el caso de injurias el tejido es reparado. El tipo 2 de EMTs genera activacin de las clulas mesenquimales, especialmente miofibroblastos que producen cantidades excesivo ECM rico en colgeno. El tipo de EMT ocurre en el contexto de crecimiento de tumores y progresin de cncer, cuando las clulas cancergenas en el frente de la conversin de tumores a fenotipos mesenquimales. La induccin de tipo 3 de EMTs es facilitada por la adquisicin de alteraciones genmicas por clulas cancergenas y estos EMTs generan clulas con propsitos invasivos que les permiten moverse en el torrente sanguneo y propagacin sistemtica a otros rganos. Futuras investigaciones seguramente se centraran en el descubrimiento de la estructura molecular similar y diferencias entre los programas EMT que ocurren entre tres distintos programas. EMT busca en los prximos aos ser apasionante, con nuevos modelos de ratones y sondas moleculares, son identificados para abordar importantes preguntas todava sin responder. Por ejemplo. Cules son las identidades de las seales microambietales inducidas por EMT? Cul es la naturaleza de los cambios in celulas que los hacen sensibles a dichas seales? Y Qu maquinaria de sealizacin dentro de las clulas epiteliales dirigen los diversos programas EMT?